豆粕中大豆异黄酮提取工艺研究(设计)
微波及溶剂法提取豆粕中大豆异黄酮的工艺研究
（Ｊ ． Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｍｕ ｎ ｉ ｃ ｉ ｐ ａ ｌ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｆ ｏ ｒ Ｆ ｏ ｏ ｄ ａ ｎ ｄ Ｄ ｒ ｕ ｇ Ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ， Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ ， Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ １ ３ ２ ０ ０ １ ； ２ ． Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｃ ｏ ｎ ｎ ｅ ｌ ｌ Ｐ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｅ ｕ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ． ， Ｌ ｔ ｄ ． ， Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ ， Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ｌ Ｓ ２ Ｏ Ｏ １ ）
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豆粕中大豆异黄酮的超临界萃取工艺及性质研究
288 2008, Vol.29, No.09 食品科学 ※工艺技术大豆异黄酮是一类从大豆中分离提取出的天然活性成分，可以作为天然抗氧化剂和自由基清除剂，具有明显的防癌、抗衰老、降低血脂、改善骨质疏松、以及妇女更年期综合症等药理效果[1]。
目前已有报道从大豆中分离鉴定出12种异黄酮，包括染料木素、大豆苷元、大豆黄素三种异黄酮苷元、及其与葡萄糖、乙酰葡萄糖、丙二酰葡萄糖以β−糖苷键连接形成的9种异黄酮糖苷。
研究表明，染料木素等三种苷元为活性苷元，是大豆异黄酮发挥药理功能的活性形式，其中染料木素活性最强[2]。
大豆异黄酮的提取方法有有机溶剂萃取法、超声波法、超临界萃取法等[3]。
豆粕中大豆异黄酮的提取，由于原料成分复杂，影响因素众多，因此对其提取工艺条件的合理性选择就显得十分必要。
超临界CO 2萃技术具有萃取能力强、生产周期短、有效成分破坏少、工艺简单、产品质量稳定等优点。
因此，超临界CO 2 萃取技术已被广泛用于天然有效成分提取[4]。
本实验对大豆异黄酮的超临界CO 2萃取工艺进行优化，并对萃取物的抗氧化性及抑菌性进行测定。
研究结果为豆粕深加工增值提供途径，同时也为深入开发大豆资源、拓宽应用领域提供一定的参考。
1材料与方法1.1材料与试剂脱脂豆粕 山东禹王实业有限公司；染料木素标品(色谱纯) 上海同田生化技术有限公司。
1.2仪器与设备收稿日期：2007-08-15基金项目：安徽省自然科学基金项目(050410301)；合肥工业大学科学发展基金项目(053001F)作者简介；潘利华(1973-)，女，讲师，博士研究生，研究方向为农产品加工生物技术。
E-mail ：panlihua612@ *通讯作者：罗建平(1966-)，男，教授，研究方向为细胞培养。
E-mail ：jianpingluo1966@豆粕中大豆异黄酮的超临界萃取工艺及性质研究潘利华，罗建平*(合肥工业大学生物与食品工程学院，安徽 合肥 230009)摘 要：以脱脂豆粕为原料，通过正交试验，对超临界流体萃取法提取大豆异黄酮的工艺进行了优化研究，并测定了提取物的抗氧化性和抑菌性。
正交设计法对大豆中提取异黄酮的工艺研究
Ｐ ，Ｙ ｎ ｔ ｎ ｉ ｎ ｘ ３ ０ ０， ｉｇ ａ ，Ｊａ ｇ ｉ３ ５ ０
［ ｂｔａｔ Ｏ ｊｃｉｅ Ｔ ｘｌｒ ｔｅｔ ｈ ｉ ｆ ｘｒ ｔ ｎｏ ｉ ｆ ｖｎ ｒ ｏｂ ａ．Ｍｅｈ ｄ Ａ ｓ ｃ］ ｂｅｔ ｏｅｐｏｅ ｈ ｃｎｃ ｏ ｅｔ ｃｉ ｆ ｓｌ ｏｅｆ ｍ ｓｙ ｅｎ ｒ ｖ ｅ ｓ ａ ｏ ｏａ ｏ ｔｏ ｓ
光技术 有 限公 司） 。
１ ３ 方 法 ．
值 和治疗 作 用 的非 固醇类成 分 ， 为植 物雌抑制 肿瘤 生长 、 具 治疗 心血管
疾 病 、 防和治疗 骨 质 疏松 以及 缓 解妇 女 更 年 期综 预 合 症 等多种 生理保 健 作 用 ， 独 特 的药 用 价 值 为 大 其
谢 彦兵 ， 肖红兵
［ 要 ］ 目的 摘 探 讨 用 乙醇 提 取 大 豆 中异 黄 酮 的工 艺 。方 法 大豆粉过 ４ ０目筛 ， 以石 油 醚 脱 脂 后 从 大 豆 中 所 得 粗 异 黄 酮 含 量
通过单 因素实验和正交实验改变不同的提取工艺选取 最佳 提取条件 。在 ７ ０℃ 的条件下 ， ７ ％ 乙醇水 用 ０
［ ｅ ｏｄ ］ ｓｙ ｅｎ ｉ ｆ ｖｎ ； ｔａｏ ｅｔ ｔ ｎ ｅｔ ｃｏ ａ Ｋ ｙｗ ｒｓ ｏｂ ａ ； ｓｌ ｏｅ ｅ ｎｌ ｘａ ｉ ； ｘ ａｔｎｒｔ ｏａ ｈ ｃｏ ｒ ｉ ｅ
大豆异 黄酮 是存 在于大 豆 中的一类 具有 营养 价
有 限公 司 ） Ｊ一 精 密增 力 电 动搅 拌 器 （ 海 浦 东物 ； １ Ｊ 上 理光学 仪器 厂 ） 电热恒 温 水浴 锅 （ 京科 技 永 兴仪 ； 北 器有 限公 司 ） Ｚ Ｑ ８ Ａ旋转 蒸 发 器 （ 海 医械 专机 ； Ｆ ５ 上 厂 ）７０ Ｒ ；６ Ｃ Ｔ双 光束 紫外／ 可见 分 光光 度 计 （ 海棱 上
豆粕中大豆异黄酮的超声辅助提取工艺研究
（ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｓ ｔ ｒ ｙ＆ Ｅ ｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍ ｅ ｎ ｔ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ 。 Ｓ ｈ ａ ｏ ｎ ｘ ｉ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｆ ｏ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｈ ａ ｎ ｚ ｈ ｏ ｎ ｇ ７ ２ ３ ０ ０ ０ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
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从豆粕中提取大豆异黄酮的研究的开题报告
从豆粕中提取大豆异黄酮的研究的开题报告一、研究背景与意义大豆异黄酮属于植物中的一种天然黄酮类化合物，具有类雌激素的作用。
通过多种机制，大豆异黄酮不仅能够缓解更年期综合征症状，而且具有降低心脑血管疾病、骨质疏松症等慢性疾病的风险。
因此，大豆异黄酮引起了广泛的关注和研究。
大豆异黄酮主要存在于豆类中，其中大豆异黄酮含量最高。
豆粕是大豆加工过程中产生的一种副产物，含有大豆异黄酮，但大豆异黄酮的提取较为困难，研究较少。
因此，深入研究豆粕中大豆异黄酮的提取方法以及优化提取工艺对于大豆异黄酮的开发和利用具有重要的理论和实践意义。
二、研究目的1.确定豆粕中大豆异黄酮的提取工艺参数。
2.对提取条件进行优化，以提高大豆异黄酮的提取效率。
3.分离纯化大豆异黄酮并进行结构鉴定。
4.探究大豆异黄酮的生物学活性及其在保健食品开发中的应用。
三、研究内容和方法1.豆粕中大豆异黄酮的提取方法探究。
2.建立大豆异黄酮的分离、纯化及鉴定方法。
分别采用针对大豆异黄酮的分离纯化方法，如硅胶柱层析、逆相高效液相色谱层析等。
3.采用生物大分子智能药物筛选系统，对大豆异黄酮进行生物活性筛选实验。
并选取常见的细胞系，如CCK-8细胞试剂盒、MTT法等进行细胞毒性测定，从而探讨大豆异黄酮的抗氧化、保护心脏等生物活性。
四、预期结果1.实现对豆粕中大豆异黄酮的高效提取。
2.优化大豆异黄酮提取工艺，提高提取效率。
3.获得大豆异黄酮的纯化产物，开展鉴定工作。
4.掌握大豆异黄酮在保健食品开发中的应用前景。
五、研究价值1.为大豆异黄酮的开发利用提供了新思路和新方法。
2.优化了提取条件，提高了大豆异黄酮的提取效率。
3.获得了大豆异黄酮的纯化产物，为后续的功能研究提供了基础数据。
4.探讨了大豆异黄酮在保健食品领域的应用，具有重要的经济和社会价值。
大豆异黄酮各种提取工艺
大豆异黄酮各种提取工艺：1、从豆粕中纯天然提取的大豆异黄酮此类大豆异黄酮是以大豆榨油厂生产的副产品脱脂豆粕为原料生产的，六种大豆异黄酮成分中染料木甙（Genistin）、染料木素(Genistein)、大豆甙(Daidzin)、大豆甙元(Daidzein)的含量较高，占总含量的90%以上，而且主要是以糖甙型的形式存在。
虽然由于豆粕大豆异黄酮的含量很低，提取技术要求高，生产成本高，因而这种大豆异黄酮销售价格也比较高。
但由于其主要活性成分的含量很高，效果很好，性价比高，因而仍然是市场上销售的主要品种，深受广大客户的欢迎。
2、从胚芽中纯天然提取的大豆异黄酮此类大豆异黄酮是以大豆蛋白厂生产的副产品大豆胚芽为原料生产的，六种大豆异黄酮成分中黄豆黄甙(Glycitin)、黄豆黄素(Glyciteiin)的含量很高，一般占到总异黄酮含量的40%以上，因而与同规格的从豆粕中提取的大豆异黄酮相比，虽然总的异黄酮含量相同，但真正有生理活性的大豆异黄酮成分的含量却相差很大。
由于大豆胚芽中大豆异黄酮的含量相对较高，是豆粕中异黄酮含量的10倍，因而现在有很多生产厂家在生产这类大豆异黄酮产品，以较低的价格冲击市场。
3、天然提取与化学合成的掺合物理此类大豆异黄酮是由低含量的纯天然提取的大豆异黄酮与纯度很高的人工合成的大豆异黄酮按照一定比例掺合而成。
由于大豆异黄酮的六种成分中只有大豆甙元和染料木素可以人工合成，因此这类产品中大豆甙元和染料木素的含量比较高，报价也很低，甚至低于由大豆胚芽中提取的大豆异黄酮产品的价格。
4、从其它植物中提取的大豆异黄酮目前，大豆异黄酮中的多个组分都可以从其他植物中提取，市场上的大豆异黄酮产品，特别是高纯度的大豆异黄酮，有些掺加有从其他植物中提取的大豆异黄酮组分。
这类大豆异黄酮各个组分的组成比例与从豆粕中提取的大豆异黄酮基本一致，很难从各个组分的组成比例上分辨出来，因而识别难度最大。
但由于从其他植物中提取的异黄酮的生理活性与从豆粕中提取的大豆异黄酮有较大的差距，因而可以从产品长期的应用效果上分辨出来。
(整理)豆粕中大豆异黄酮提取工艺研究设计
豆粕中大豆异黄酮提取工艺研究大豆异黄酮（Soy isoflavone)是以大豆油渣为原料,经过提取分离,加工成含量达30%-95%的粉状大豆异黄酮。
近年来研究表明大豆异黄酮具有广泛的生理活性, 除其自身作为异黄酮具有的抗氧化作用外,大豆异黄酮作为雌性激素治疗的替代品,可以改善妇女更年期综合症；其对与激素有关的肿瘤如乳腺癌和前列腺癌的抑制作用更为显著受到极大关注；此外,大豆异黄酮在治疗和预防心脑血管疾病方面也有明显作用。
大豆异黄酮已经广泛应用于食品、医药等行业。
大豆异黄酮是多酚类混合物,分为游离型的甙元(Aglycon)和结合型的糖甙(Glucosides)两类。
甙元包括染料木素(Genistein)、大豆黄素(Daidzein)和黄豆黄素(Glycitein)。
天然情况下它们主要以β-葡萄糖甙形式存在,即染料木甙(Genistin)、大豆黄甙(Daidzin)和黄素黄甙(Glystin),部分异黄酮甙发生乙酰化、丙二酰化,但所有这些大豆异黄酮衍生物经酸水解或酶催化分解后都能转化为大豆异黄酮甙元。
大豆异黄酮所具有的良好的药理作用显示了它具有很大的开发价值,通过提取分离大豆异黄酮能充分合理利用大豆中的各种有效成分,提高其附加值,实现良好的经济效益和社会效益。
目前有关豆粕的提取工艺主要以乙醇为提取溶剂，由于乙醇系有机溶剂，消耗大、成本高、且生产过程存在易燃等安全隐患，为此我们根据豆粕异黄酮有一定的水溶性，试改用水做提取溶剂，以大豆异黄酮为目标，对其大豆异黄酮进行了正交提取工艺研究，并对最佳提取工艺得到的提取液进行了大孔吸附树脂吸附分离性能研究，以期为豆粕大豆异黄酮的开发利用提供依据。
1 材料与仪器1.1 材料豆粕(采自陕西石羊公司)，自然干燥，粉碎。
1.2 试剂染料木素和大豆黄素对照品:百灵威化学；大豆苷元标准品(中国药品生物制检定所1502-2001O1)。
大孔树脂ADS-21、ADS-7、D101，AB-8购自西安蓝小科技开发有限公司。
大豆豆粕中异黄酮提取工艺的研究
３ 高 荣 编 著 ． 义 优 化 设 计 ． 炭 工 业 出 版 社 ，９ ７ 广 煤 １８
２３ ．
指 标 检 测
４
乳 品 工 业 手 册 ． 工 业 出 版 社 ．９ ７ 轻 １ ８
天平 梅 特 勒 一 托 利 多 仪 器 ｆ 海 ） 限 公 司 ； 上 有 回
表 ｌ 正 交 试 验 与 极 差 分 析 表
２． ． ３ １ 理 化 指 标 固 形 物 含 量 ２ ％ ； 总 糖 含 量 ８５
２４． ５％ ； 肪 含 量 ６． ％ 。 脂 ９
２ ３２ 微 生 物 －．
１ 材 料 与 方 法
１１ 材 料 与 仪 器 ．
豆 粕 为 加 工 豆 油 中 产 生 的 高 温 脱 脂 豆 粕 ；５ ９ ％ 乙 醇 天 津 化 学 试 剂 厂 ； 己烷 （ 析 纯 ） 上 海 陆 都 正 分
异 黄 酮 是 黄 酮 类 化 合 物 中 的 一 种 ， 主 要 存 在 于
关 键 词 豆 粕 大 豆 异 黄 酮
Ａｂ ｔ ａ ｔ ｓ ｒ ｃ Ｔｈ ｅ ｓ ｕｄｙ Ｓ ｔ ｉ ａｉ ｅｄ ａ ｔ ｃｈｎ ｏ ｃａｌ ｐｒ ｅｓ ｏｆ ｍ ｔ ｅ ｏｌ ｇｉ ｏｃ ｓ
ｅｘ ｒ ｔｎ ｔａｃ ｉｇ ｓｏ ｃｒ ｙ ｕｄｅ ｉｏｆ ｖ ｓ ｌ ｏｎｅｓ ｕｓｎｇ ａ ｉ ｓ ｏｙ
ｒ ｓｉ ｅ ｅ ｄｕ ａｓ ａｗ ｍ ａ ｅｒａＩ ａ ａ ｃｏ ｒ ｔ ｉ ｎｄ ｌ ｈｏＩ ａｓ ｓ ｖ ｔ ｏｌｅｎ
（ ｌ ｃ ｎ） 结 合 型 的 糖 甙 （ ｕ ｏ ｉ ｅ ） 类 ， 元 约 Ａｇ ｙ ｏ 和 Ｇｌ ｃ ｓｄ ｓ 两 甙 占 总 量 的 ２ － ％ ， 甙 约 占 总 量 的 ９ ％ ｌ。具 有 生 物 ％ ３ 糖 ５ ３ １ 活 性 的 两 种 成 分— — 金 雀 异 黄 素 （又 称 染 料 木 素
大豆异黄酮提取工艺
大豆异黄酮提取工艺和药理功效一、提取工艺每100克大豆样品中含有异黄酮128毫克，可分离约102毫克。
大豆异黄酮的提取可以采用甲醇、乙醇、乙酸乙酯等溶剂进行浸提。
不同的溶剂其提取工艺也不同。
现以乙醇为例，介绍其浸提工艺。
(1)原料制备将脱脂豆粕进行粉碎。
如果采用大豆为原料，需要先进行脱脂，使豆粕残油率<1%，干燥后粉碎备用。
(2)提取采用乙醇为浸提液，先在豆粕粉中加入含0.1～1.0摩尔/升(mol/l)的盐酸，再在95%的乙醇溶液中进行回流提取，过滤收集滤液。
(3)回收提取溶剂将滤液进行减压蒸发，回收乙醇，得到大豆异黄酮的粗水溶液。
(4)纯化将粗水溶液中加入0.1摩尔/升的氢氧化钠溶液，调节pH值至中性。
这时，中性溶液中将出现沉淀，然后过滤，得到的沉淀物即为含大豆异黄酮的产物。
(5)精制将上述产物溶解于饱和的正丁醇溶液中，加于氯化铝吸附柱上进行吸附，然后用饱和的正丁醇溶液淋洗，洗出大豆异黄酮的不同组分各种大豆制品中异黄酮含量和种类分布不同，不仅与大豆品种和栽培环境有关，还与大豆制品的加工工艺密切相关。
水处理、热处理、凝固、发酵等加工环节和方法显著地影响了大豆制品中异黄酮的含量和种类分布，特别是大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白的不同提取方法其中异黄酮含量影响极大。
1）水处理：浸泡使10%的异黄酮流失于浸泡水中，且水处理后的大豆中游离型异黄酮增加，这是因为豆类自身存在的β-glucosidases酶水解葡萄糖苷的结果。
2）加热：水煮加热增加了异黄酮向外渗透速率，使大量异黄酮因渗入加热水中而丢失，同时热处理还显著改变了豆制品中异黄酮种类的分布，因为热处理时β-glucosidases酶活性增强，使异黄酮葡萄糖苷水解为游离型异黄酮，因而制品中游离型异黄酮较原料大豆或大豆粉中的有所增加。
3）凝固：在豆腐生产中，凝固使一部分异黄酮丢失于乳清中，丢失率为44%。
4）发酵：发酵不影响异黄酮的含量，但改变了异黄酮种类的分布，发酵后的产品以游离型异黄酮为主要存在形式，这是因为在发酵过程中，真菌产生的大量β-glucosidases水解酶使异黄酮葡萄糖苷大量水解，从而导致游离型的异黄酮显著增加。
大豆异黄酮提取条件和大豆蛋白质分离工艺研究
1. 1 材料
大豆豆 粕 , 徐 州 市 丰 裕 科 技 饲 料 有 限 公 司 ; Daidzin 、Glycitin 、Genistin 、Daidzein 、Glycitein 和 Genistein 对照品 ,中国药品生物制品鉴定所 ; 化学 试剂均为分析纯 。 1. 2 仪器
由表 4 、5 可知 ,乙醇浓度和提取温度对异黄酮
的提取量有显著性影响 ;乙醇浓度对蛋白质的提取
因素
Facto r
K1 K2 K3 极差 离差 均方差 F值 显著性
A
5. 57 4. 85 1. 49 4. 08 3. 16 1. 58 11. 29
3
B
4. 81 3. 99 3. 11 1. 7 0. 48 0. 24 1. 72
2. 1 豆粕主要成分含量分析结果见表 1 。 用溶剂提取异黄酮时 ,一方面异黄酮的提取率
要高 ;另一方面蛋白质 、糖类等可溶物的提取率要 低 。因为“杂质”特别是蛋白质的存在不利于提取液 的浓缩和异黄酮的分离纯化 。浓缩时大量的蛋白质 起泡溢出 ,混入流出液中 ,致使浓缩无法进行 。用吸 附柱分离异黄酮时 ,蛋白质的絮凝引起上柱速度慢 , 柱的吸附性能降低和柱堵塞等现象 。用溶剂萃取分
摘要 以豆粕为原料 ,以总大豆异黄酮为目标产物 ,用正交试验设计研究了用乙醇提取大豆异黄酮 的较优条件 ,70 %(V/ V) 乙醇 ,固液比 (豆粕 ∶溶剂) 1 ∶10 ( W/ V) ,70 ℃下提取 3 次 ,每次回流时间 1. 5h 。在室温下 ,采用盐析和等电点沉淀工艺分离除去提取液中的大豆蛋白质 。试验表明 ,p H 值 在 4. 1 ±0. 1 下 ,加入 3. 0 %( m/ v) 的 ZnCl2 ,大豆蛋白质的分离除去率最高 。 关键词 豆粕 ;大豆异黄酮 ; 蛋白质 ; H PL C 中图分类号 R 1511 3 文献标识码 A 文章编号 1000 - 9841 (2005) 01 - 0026 - 04
大豆异黄酮的提取分离技术研究
大豆异黄酮的提取分离技术研究大豆异黄酮是一种天然植物化合物，被广泛用于食品、保健品和药物制剂等领域。
其具有多种生理活性，包括抗氧化、抗炎、抗癌、降低胆固醇和预防心血管疾病等作用。
因此，开发高效的大豆异黄酮提取分离技术具有重要的科学研究价值和应用前景。
大豆异黄酮的提取分离技术主要包括传统的溶剂提取法、超低温冷冻法、超临界流体萃取法、微波辅助萃取法、超声波辅助萃取法以及液液萃取法等多种方法。
每种方法都有其优点和局限性，因此在实际应用中需要根据不同的目的和条件选择合适的提取方法。
传统的溶剂提取法是目前最常用的大豆异黄酮提取分离方法之一。
其基本原理是利用溶剂与目标化合物的物理性质差异来实现分离。
常用的溶剂包括乙醇、醚类和酯类溶剂等。
但该方法存在很多问题，如提取效率低、环境污染严重等。
超低温冷冻法是一种相对新颖的提取分离技术。
该方法利用低温冷冻的原理，使大豆异黄酮在低温下形成固态结构，从而顺利地分离出来。
超低温冷冻法的优点是提取效率高，不需要使用溶剂，对环境友好。
但该方法也存在一些技术难题，如低温操作难度大、设备成本高等。
超临界流体萃取法是近年来发展的一种新型提取分离技术。
超临界流体是介于气体和液体之间的物质状态，具有高扩散性、低粘度和可调变性等特点。
超临界流体萃取法的优点是提取效率高，操作简便，对目标化合物有较好的选择性。
但该方法的设备成本较高。
微波辅助萃取法是利用微波对物质分子进行加热，使其溶解和扩散快速进行的一种提取分离技术。
其优点是提取时间短，提取效率高。
但该方法也存在一些问题，如对设备要求高，操作需要控制加热温度，易产生高温带来安全隐患等。
超声波辅助萃取法是利用超声波的作用来加速萃取过程的一种技术。
其优点是提取效率高，操作简便，能够减少溶剂的使用。
但该方法也存在一些问题，如容易引起泡沫和分散相，导致难以分离。
液液萃取法是通过建立两种不相溶的溶液体系，利用溶剂的挥发性差异分离目标化合物的一种方法。
大豆豆渣中大豆异黄酮的提取工艺研究_何恩铭
西北农业学报 2006,15(4):160~162A cta A gr icultur ae Bor eali occidental is Sinica大豆豆渣中大豆异黄酮的提取工艺研究y何恩铭,齐香君*,魏丽娜(陕西科技大学生命科学与工程学院,陕西咸阳 712081)摘 要:以乙醇为溶剂,以大豆豆渣为原料,研究了大豆异黄酮的提取工艺。
结果表明,乙醇浓度、温度、时间、料液比对大豆豆渣中大豆异黄酮的提取均产生不同程度的影响,其中乙醇浓度对大豆异黄酮提取量的影响最大,提取时间对大豆异黄酮提取量的影响最小。
通过正交试验得出从大豆豆渣中提取大豆异黄酮的最佳工艺条件为乙醇浓度80%,温度70 ,时间3h、料液比1 12,在此条件下异黄酮的提取量为8.95mg/10g。
关键词:大豆异黄酮;豆渣;提取中图分类号:T S201.1 文献标识码:A 文章编号:1004 1389(2006)04 0160 03Research on Extraction of Soybean Isoflavones from Soybean ResidueHE En ming,QI Xiang jun*and WEI Li na(College of Life Science and Engineerin g,S haanx i U nivers ity of Science&T ech nology,Xianyang S haanxi 712081,Ch ina)Abstract:T he optimum ex traction conditio ns of iso flavo nes from soybean residue w ere researched by using ortho gonal desig n.T he optimum is the alco ho l concentration80%,the temperatur e70 ,the ex tractio n time3hours and the ratio of material to so lvent1 12,and the yield is8.95m g/10g under the optimum co nditions.T he primary facto r of this ex tr actio n is the alcohol concentr ation,w hile the least one is the extraction tim e.Key words:Soy bean isoflavones;Soy bean residue;Extraction大豆异黄酮是存在于大豆中的生物活性物质,研究发现大豆异黄酮对人体具有多种生理功能,除其自身具有抗氧化作用外,还可作为雌性激素治疗的替代品用以改善妇女更年期综合症,并还具有抗癌,防止心血管疾病,抗菌等多种功能[1],是目前治疗心血管疾病的最佳原料药物。
发酵豆粕中大豆异黄酮的超声波提取工艺
实验技术与方法发酵豆粕中大豆异黄酮的超声波提取工艺孙体健 王浩江 曹晓峰 刁海鹏(山西医科大学,山西 太原 030001)摘 要:为提高大豆异黄酮的提取率,以发酵豆粕为原料,采用超声波提取技术,通过单因素实验及正交实验对大豆异黄酮提取工艺中提取溶剂、料液比、时间、次数等因素进行探讨。
结果表明:采用80%乙醇为提取剂,料液比1g ∶15ml ,提取时间20min ,提取2次,大豆异黄酮提取率最高,可达到01548%。
超声波提取发酵豆粕中大豆异黄酮是一种较为理想的方法。
关键词:发酵;黄豆;异黄酮类;超声学;分光光度法Study on Conditions of U ltrasonic Extraction of Soybean Isoflavones from Fermented Soybean C akeS UN T i 2jian ,W ANG Hao 2jiang ,C AO X iao 2feng ,DI AO Hai 2peng (Shanxi Medical University ,Shanxi T aiyuan 030001,China )Abstract :In order to extract m ore is oflav ones from s oybean cake ,the ultras onic technology were used.The s oybean is oflav ones were extracted from fermented s oybean cake by ultras onic technology ,and the in fluences of extraction s olvent and extraction time ,ratio of sample to extractant and the number of repeated extraction were studied by single factor and systematial lineartest.The results showed that the optimum extraction technology was as follows :s olvent :80%ethanol ;extraction time :20min ;the ratio of sample to s olvent :1:15(g :ml );repetition of extraction :2times.The extraction rate of this method can reach 01548%.K ey w ord :Fermentation ;S oybeans ;Is oflav ones ;Ultras onic ;S pectrophotometry基金项目:山西省教委科技开发项目(2003009)作者简介:孙体健 女 教授通讯作者:曹晓峰 女 教授 开展先发酵大豆(或副产品)后提取异黄酮的研究,对提高异黄酮产品的生物活性,开发富含大豆异黄酮苷元的保健产品具有重要的意义。
大豆异黄酮提取工艺
大豆异黄酮提取工艺和药理功效一、提取工艺每100克大豆样品中含有异黄酮128毫克，可分离约102毫克。
大豆异黄酮的提取可以采用甲醇、乙醇、乙酸乙酯等溶剂进行浸提。
不同的溶剂其提取工艺也不同。
现以乙醇为例，介绍其浸提工艺。
(1) 原料制备将脱脂豆粕进行粉碎。
如果采用大豆为原料，需要先进行脱脂，使豆粕残油率<1%，干燥后粉碎备用。
(2) 提取采用乙醇为浸提液，先在豆粕粉中加入含0.1～1.0摩尔/升(mol/l)的盐酸，再在95%的乙醇溶液中进行回流提取，过滤收集滤液。
(3) 回收提取溶剂将滤液进行减压蒸发，回收乙醇，得到大豆异黄酮的粗水溶液。
(4) 纯化将粗水溶液中加入0.1摩尔/升的氢氧化钠溶液，调节pH值至中性。
这时，中性溶液中将出现沉淀，然后过滤，得到的沉淀物即为含大豆异黄酮的产物。
(5) 精制将上述产物溶解于饱和的正丁醇溶液中，加于氯化铝吸附柱上进行吸附，然后用饱和的正丁醇溶液淋洗，洗出大豆异黄酮的不同组分各种大豆制品中异黄酮含量和种类分布不同，不仅与大豆品种和栽培环境有关，还与大豆制品的加工工艺密切相关。
水处理、热处理、凝固、发酵等加工环节和方法显著地影响了大豆制品中异黄酮的含量和种类分布，特别是大豆浓缩蛋白和大豆分离蛋白的不同提取方法其中异黄酮含量影响极大。
1）水处理：浸泡使10%的异黄酮流失于浸泡水中，且水处理后的大豆中游离型异黄酮增加，这是因为豆类自身存在的β-glucosidase s酶水解葡萄糖苷的结果。
2）加热：水煮加热增加了异黄酮向外渗透速率，使大量异黄酮因渗入加热水中而丢失，同时热处理还显著改变了豆制品中异黄酮种类的分布，因为热处理时β-glucos idase s酶活性增强，使异黄酮葡萄糖苷水解为游离型异黄酮，因而制品中游离型异黄酮较原料大豆或大豆粉中的有所增加。
豆粕中大豆异黄酮提取纯化工艺研究
豆粕中大豆异黄酮提取纯化工艺研究
蔡立;郁建平;占建波
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2008(029)004
【摘要】本研究探讨了豆粕中大豆异黄酮提取纯化工艺,经过单因素和正交试验,应用大孔树脂技术对提取液进一步纯化.得到大豆异黄酮最佳提取工艺:提取温度为80℃,时间为2h,乙醇浓度为60%,料液比为1:20.在此条件下大异黄酮的提取率为0.59%.由大孔树脂静态吸附解吸试验,得出D4006和H103型大孔树脂吸附解吸最好.经D4006大孔树脂纯化后,大豆异黄酮的纯度可达到30.58%.
【总页数】4页(P185-188)
【作者】蔡立;郁建平;占建波
【作者单位】贵州大学生化营养研究所,贵州贵阳,550025;贵州大学生化营养研究所,贵州贵阳,550025;贵州大学生化营养研究所,贵州贵阳,550025
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.1
【相关文献】
1.大孔吸附树脂富集豆粕中大豆异黄酮的工艺研究 [J], 阮洪生;秦学功;陈志宝;朱丹;郑小亮
2.豆粕中大豆异黄酮提取工艺研究 [J], 李年龙;刘洁珠;陈锦峰;董华强
3.豆粕中大豆异黄酮的超声辅助提取工艺研究 [J], 李万林
4.萃取-酸水解法提取纯化豆粕中大豆异黄酮甙元 [J], 文瑞芝;杨明生;刘建庄
5.微波及溶剂法提取豆粕中大豆异黄酮的工艺研究 [J], 王舒;李文;梁艳
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大豆豆渣中大豆异黄酮的提取工艺研究
大豆中所含的异黄酮是一种天然的植物雌激素，具有抗氧化、抗衰老、抗癌等多种生理活性。
而大豆豆渣中异黄酮的丰富含量，使其成为一种重要的天然资源。
为了实现大豆豆渣中异黄酮的有效提取和利用，需要对其提取工艺进行深入研究。
一、提取剂的选择目前常见的提取剂有乙酸乙酯、苯、乙醇等多种，其中以乙酸乙酯为最佳选择。
乙酸乙酯不仅具有良好的溶解能力，而且对异黄酮的稳定性影响较小，能保证提取物的生物活性。
二、提取时间的控制大豆豆渣中的异黄酮含量较低，需要较长时间的提取才能达到最佳效果。
通常情况下，提取时间控制在4-6小时之间，可以得到较高的异黄酮提取率。
三、提取温度的调控提取温度也是影响异黄酮提取率的重要因素之一。
过高的提取温度会导致异黄酮分解和失活，过低的提取温度则会影响提取效果。
一般来说，提取温度控制在60-80℃之间，能够保证异黄酮的生物活性和提取率。
四、提取物的分离和富集大豆豆渣中异黄酮的含量较低，需要进行分离和富集才能达到较高的含量。
常用的分离和富集方法有吸附柱、逆流萃取、超临界萃取等方法，其中吸附柱法是最为常见的方法之一。
通过选择合适的吸附材料、调节溶剂极性等，能够将异黄酮有效地富集和分离出来。
五、异黄酮提取物的应用大豆豆渣中提取出来的异黄酮，具有丰富的生物活性，可用于食品、保健品、医药等领域。
例如，在调味品和保健品中加入一定量的大豆异黄酮，能够增加人体内雌激素水平，起到保护心血管、预防骨质疏松等作用。
综上所述，大豆豆渣中异黄酮的提取工艺需要从提取剂的选择、提取时间的控制、提取温度的调控、提取物的分离和富集等多个方面进行综合考虑，才能实现最佳的提取效果和生物活性。
随着人们健康意识的提高和自然保健意识的提升，大豆异黄酮的应用前景将越来越广阔，也必将成为未来生物技术领域中的一个重要研究方向。
从豆粕中提取大豆异黄酮的研究
学位授பைடு நூலகம்单位:天津大学
被引用次数:1次
1.闵嘉霖大豆异黄酮萃取的实验研究[学位论文]2006
2.李雪玲大豆异黄酮的提取分离技术研究[学位论文]2006
3.姚占静大豆异黄酮提取及其组分分离工艺研究[学位论文]2009
4.宋冰.王丕武.张秀艳.付永平.邓川.李鹏月.SONG Bing.WANG Pi-wu.ZHANG Xiu-yan.FU Yong-ping.DENG Chuan.LI Peng-yue大豆异黄酮提取工艺的优化[期刊论文]-大豆科学2008,27(2)
9.郭睿.姚占静.李宁.GUO Rui.YAO Zhan-jing.Li Ning一种大豆异黄酮提取工艺研究[期刊论文]-食品科技2008,33(11)
10.杨阳.蒋和体豆粕中大豆异黄酮的提取工艺研究[期刊论文]-中国食物与营养2006(9)
1.何隽婷.梁勇.梁斯.杨明泉.陈穗.张庆宇酱油渣中大豆异黄酮的动态逆流提取及分离纯化研究[期刊论文]-华南师范大学学报(自然科学版) 2010(4)
从豆粕中提取大豆异黄酮的研究
本文链接:/Thesis_Y1532122.aspx
5.龚凌霄大豆异黄酮的提取与精制[学位论文]2006
6.权静由豆粕制备高纯度大豆异黄酮的研究[学位论文]2004
7.邓志成大豆异黄酮标准物质的制备和定值方法研究[学位论文]2006
8.蔡立.郁建平.占建波.CAI Li.YU Jian-ping.ZHAN Jian-bo豆粕中大豆异黄酮提取纯化工艺研究[期刊论文]-食品科学2008,29(4)
大豆异黄酮的提取与分离工艺研究
大豆异黄酮的提取与分离工艺研究随着人们对健康意识的提高，越来越多的人开始关注大豆及其制品。
大豆中含有丰富的营养成分，其中的异黄酮具有多种保健功效，如抗氧化、抗肿瘤、抗菌等。
因此，研究大豆异黄酮的提取与分离工艺对于深入了解其作用机制、发挥其保健功效具有重要意义。
在大豆中，异黄酮以苷形式存在，主要有乙酰基大豆苷和大豆苷。
目前，提取和分离大豆异黄酮的工艺主要包括溶剂萃取、超声波辅助提取、微波辅助提取、酶法提取等方法。
溶剂萃取是一种常用的提取工艺。
通过选择适当的溶剂，如乙醇、甲醇、醋酸等，将大豆中的异黄酮溶解出来，然后通过浓缩、结晶等步骤进行分离。
其中，乙醇提取得到的产物含量最高，但其安全性需要引起关注。
近年来，超声波辅助提取被广泛应用于大豆异黄酮的提取。
超声波具有分散悬浮、破碎细胞和增加物质传输速率等作用。
在超声波辅助提取过程中，通过超声波的作用，可提高提取效率和产物得率。
然而，超声波处理过程中对样品的温度和pH值也有一定影响，研究人员需要根据实际情况选择合适的操作条件。
微波辅助提取是利用微波加热作用提高异黄酮的溶解度和提取效果。
微波可以穿透样品，使得样品内部迅速升温，从而加速溶剂中异黄酮的溶解。
与传统提取方法相比，微波辅助提取具有快速、高效、节能的特点。
但是，微波处理过程中需要注意溶剂的选择和反应压力的控制，以免对样品产生不良影响。
酶法提取是利用酶的特异性催化作用，将大豆中的异黄酮水解为游离态。
通过酶解，不仅可以提高提取效果，还能改变异黄酮的结构和性质。
然而，酶法提取工艺相对复杂，需要对酶的选择、酶的浓度、反应温度和反应时间等进行合理设定。
除了提取工艺的研究外，还需要对大豆异黄酮的分离工艺进行研究。
目前，常见的分离方法有硅胶柱层析、高效液相色谱、超滤等。
这些方法可以根据异黄酮在不同介质中的亲疏水性、相对分子质量等特性进行选择。
大豆异黄酮的提取与分离工艺研究不仅有助于开发大豆功能性制品，也能为人们提供更多的保健选择。
(毕业论文)豆渣中大豆异黄酮的提取及其在面膜中的应用正文终稿
摘要豆渣是豆制品加工的副产物，除了作饲料、肥料使用外，还有其他增值加工的方法。
其中豆渣中富含的大豆异黄酮是非常有价值的成分。
大豆异黄酮具有抗氧化的功能对皮肤组织有特殊的作用。
从理论上讲，皮肤局部使用大豆异黄酮对延缓皮肤衰老比口服具有更好的作用，所以将大豆异黄酮制作成化妆品对延缓及抵抗皮肤衰老有较好的效果。
本文对大豆异黄酮的提取工艺做了研究，并将大豆异黄酮用于美容面膜的制备，首先单因素试验确定浸提时间，浸提温度以及料液比对大豆异黄酮的提取率进行研究，并以大豆异黄酮的提取率和抗氧化性为评价指标，通过正交试验确定了大豆异黄酮提取的最佳工艺条件：即料液比为1:20，在50℃下浸提1h。
在最佳实验条件下提取率为0.13%。
通过测定大豆异黄酮对邻苯三酚的自氧化的抑制作用，抑制率为20%，得出大豆异黄酮具有较强的抗氧化功能。
实验证明，将大豆异黄酮应用到面膜中，对皮肤有着明显的改善，可以使女性皮肤光润、细腻、柔滑、充满弹性、焕发靓丽光彩。
关键词：豆渣；大豆异黄酮；抗氧化性；面膜AbstractBean dregs is the by- product of bean products. It can be used as forage and fertilizer. The paper mainly introduces sever always in using the by-product. And the soybean isoflavone of soybean dregs is a very important content. . Processing conditions have large effects on isoflaviones glucosidic forms. Through some animal test, Clinical studies and epidmiological investigation showed that soybean isflavones may help prevent and even can cure cancer, atherosclerosis, osteoporosis and menopause symptoms. Besides that, soybean isoflavone has a special effect on the skin tissue be cause it’s anti-oxidation function. In fact, Using soybean isoflavone on the partial skin is more helpful than eating it. So make soybean isoflavone into cosmetics is a good choice.In this experiment, the key point is focusing on the extraction process of making soybean isoflavone into facial mask. And in this paper, soybean dregs the extraction process of soybean isoflavone done a preliminary study, in the extraction time, temperature, liquid test than on the basis of the test identified by soybean dregs soybean isoflavone extract the best technology conditions. That is expected to water ratio of 1:20, extraction at 50 ℃ under one hour. Under the optimum conditions for the extraction rate is 0.13%. At last, determination of soybean isoflavone of soybean dregs through pyrogallol self-oxidation inhibition, inhibition rate is 20%, obtained with soybean isoflavone anti-oxidation function.Key words: bean dreg; Soybean isoflavones; anti-oxidation; facial mask目录摘要 (1)Abstract (2)目录 (3)前言 (6)第一章文献综述 (7)1.1大豆异黄酮的功能 (7)1.1.1对骨质疏松的作用 (7)1.1.2大豆异黄酮对癌症的预防及认知的影响 (7)1.1.3大豆对不同人群的激素效应 (7)1.1.4大豆对心血管病疾病的预防 (8)1.1.5大豆蛋白对患有糖尿病肾病变病人肾功能影响 (8)1.2大豆异黄酮的应用 (8)1.3大豆异黄酮的研究现状 (9)1.3.1国内研究现状 (9)1.3.2国外研究现状 (10)1.4 大豆异黄酮的提取和分离精制 (11)1.5豆渣对疾病的预防及应用 (11)1.5.1对预防糖尿病的功效 (11)1.5.2对预防心血管疾病的功效 (11)1.5.4对预防肥胖症的功效 (12)1.5.5有氨基酸互补的功效 (12)1.6应用 (12)1.6.1豆渣的粗利用 (12)1.6.2豆渣酱油 (12)1.6.3可食用纸 (12)1.6.4豆渣中可溶性膳食纤维的研究 (12)1.7本文主要研究内容 (13)第二章实验部分 (14)2.1实验材料 (14)2.2主要仪器与试剂 (14)2.2.1主要仪器 (14)2.2.2主要试剂 (14)2.3 豆渣化学成分分析 (14)2.3.1 含水量的测定 (14)2.3.2蛋白质含量测定 (14)2.3.3脂肪含量的测定 (16)2.3.4 膳食纤维的测定 (17)2.3.5灰分的测定 (18)2.4大豆异黄酮的提取 (18)2.5大豆异黄酮提取单因素实验 (19)2.5.1料液比选择实验 (19)2.5.2乙醇浓度选择实验 (20)2.5.3浸提时间选择实验 (20)2.5.4浸提温度的选择实验 (20)2.6大豆异黄酮的正交试验 (20)2.7邻苯三酚-抗氧化功能的测定 (20)2.8大豆异黄酮在面膜中的应用 (21)2.8.1面膜的调制 (21)2.8.2试用调查 (21)第三章结果与讨论 (22)3.1豆渣成分分析结果 (22)3.2 大豆异黄酮提取工艺单因素实验 (22)3.2.1 料液比对大豆异黄酮提取率的影响 (22)3.2.2乙醇浓度对大豆异黄酮提取率的影响 (23)3.2. 3浸提温度对大豆异黄酮提取的影响 (23)3.2.4 浸提时间对大豆异黄酮提取的影响： (24)3.3大豆异黄酮提取工艺正交实验 (25)3.3.1大豆异黄酮样品正交实验的结果及分析 (26)3.3.2 正交试验的极差和方差分析 (27)3.3.3以最优的工艺参数提取大豆异黄酮 (28)3.4面膜使用后的感官评定 (28)第四章结论和展望 (30)4.1 结论 (30)4.2 展望 (30)致谢 (31)参考文献 (32)前言我国是大豆的故乡，有着悠久的种植历史。
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豆粕中大豆异黄酮提取工艺研究大豆异黄酮（Soy isoflavone)是以大豆油渣为原料,经过提取分离,加工成含量达30%-95%的粉状大豆异黄酮。
近年来研究表明大豆异黄酮具有广泛的生理活性, 除其自身作为异黄酮具有的抗氧化作用外,大豆异黄酮作为雌性激素治疗的替代品,可以改善妇女更年期综合症；其对与激素有关的肿瘤如乳腺癌和前列腺癌的抑制作用更为显著受到极大关注；此外,大豆异黄酮在治疗和预防心脑血管疾病方面也有明显作用。
大豆异黄酮已经广泛应用于食品、医药等行业。
大豆异黄酮是多酚类混合物,分为游离型的甙元(Aglycon)和结合型的糖甙(Glucosides)两类。
甙元包括染料木素(Genistein)、大豆黄素(Daidzein)和黄豆黄素(Glycitein)。
天然情况下它们主要以β-葡萄糖甙形式存在,即染料木甙(Genistin)、大豆黄甙(Daidzin)和黄素黄甙(Glystin),部分异黄酮甙发生乙酰化、丙二酰化,但所有这些大豆异黄酮衍生物经酸水解或酶催化分解后都能转化为大豆异黄酮甙元。
大豆异黄酮所具有的良好的药理作用显示了它具有很大的开发价值,通过提取分离大豆异黄酮能充分合理利用大豆中的各种有效成分,提高其附加值,实现良好的经济效益和社会效益。
目前有关豆粕的提取工艺主要以乙醇为提取溶剂，由于乙醇系有机溶剂，消耗大、成本高、且生产过程存在易燃等安全隐患，为此我们根据豆粕异黄酮有一定的水溶性，试改用水做提取溶剂，以大豆异黄酮为目标，对其大豆异黄酮进行了正交提取工艺研究，并对最佳提取工艺得到的提取液进行了大孔吸附树脂吸附分离性能研究，以期为豆粕大豆异黄酮的开发利用提供依据。
1 材料与仪器1.1 材料豆粕(采自陕西石羊公司)，自然干燥，粉碎。
1.2 试剂染料木素和大豆黄素对照品:百灵威化学；大豆苷元标准品(中国药品生物制检定所1502-2001O1)。
大孔树脂ADS-21、ADS-7、D101，AB-8购自西安蓝小科技开发有限公司。
甲醇:色谱纯试剂，其余试剂均为分析纯。
1.3 仪器天津市泰斯特仪器有限公司FZ102植物粉碎机；德Sartorius赛多利斯ME235S-电子分析天平；上海亚荣生化仪器厂RE-52AA旋转蒸发仪；上海医疗器械五厂H〃H〃S21-6C电热恒温水浴锅；江苏昆山超声仪器公司KQ-50DB 超声清洗器；郑州长城科工贸有限公司SHB-C循环水式多用真空泵；日本岛津LC-20A型高效液相色谱系统(包括SPD-20A检测器、LC-20A型高压恒流泵和LC Solution工作站)；色谱柱:Inertsil C18（4.6mm×250mm，5μm）；日本岛津UV-1700紫外可见分光光度计；日本岛津CS—930型薄层色谱扫描仪；日本岛津ZF—1型三用紫外分光仪；上海市实验仪器总厂101A—2型鼓风干燥箱；浙江黄岩求精真空泵厂2XZ-2旋片式真空泵；北京医用离心机厂LD5-10高速离心机；上海悦丰DE-10蒸馏水器；美国Bedford公司Milli-Q超纯水制备仪；TGL-16C 型高速离心机；上海沪西分析仪器厂有限公司HL-2恒流泵；上海大龙医疗器械有限公司PotPette 100-1000μl 手动单道可调式移液器；索式提取器；层析柱(16 mm×30 cm)。
2 方法2.1大豆异黄酮的薄层检测大豆异黄酮苷元的薄层检测硅胶薄板制作称取4g硅胶GF254置于研钵中，加入0.5%的羧甲基纤维素钠溶液12ml，研磨15min后铺于20×10cm的干净玻璃平板上，要求平整无气泡，然后晾干即可。
展开剂配制取展开剂氯仿-无水甲醇10：0.5的比例配制52.5ml（50：2.5）作为展开剂。
薄板活化：将制好的硅胶薄板在105℃下活化30min。
点样：点样点距板子底端1.5cm左右，所有点样点位于同一直线上，尽可能向中间靠拢，每个点样点点样约20μl，点样点尽可能小。
饱和：将板子不没入层析缸内的展层剂中，在展层剂的蒸气中饱和约0.5h。
层析：将板子下端插入展层剂中进行展开，当展层剂前沿距板子上端约1.5cm 时取出板子，自然晾干。
观察：展开取出晾干后，在254n m荧光灯下观察，斑点呈浅黄色。
Rf 。
2.2紫外分光光度法测定大豆异总黄酮[2][2]张玉梅，孙学斌，高旭年，等.紫外分光光度法测定大豆异总黄酮的含量[J].中国食品卫生杂志.2000，12(4)7-92.2.1标准品溶液的配制及标准曲线的制备精确称取大豆苷元标准品(中国药品生物制检定所1502-2001O1)2.0mg,置于25 mL容量瓶中，以甲醇溶解并定容至刻线，摇匀，分别精密吸取标准品溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.6，0.8 mL 置于10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻线，摇匀，以甲醇为空自，在254nm的波长处测定A值，以浓度为横坐标，A值为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程Y=0.138X-0.0056，R2=0.9994，线性范围(0.8-6.4 ml/L)。
2.2.2含量测定精确量取供试品溶液0.01m L用无水甲醇稀释1000倍到10m L 定容，用T U-9100紫外分光光度计在波长254n m处测定A值3次，取平均值测定结果，根据标准曲线计算样品含量。
2.3紫外分光光度法测定大豆异总黄酮关于测定大豆异黄酮的含量有采用比色法、薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法等，比色法干扰多，专一性差，测定结果偏差较大;薄层色谱法存在分离效果差，定量不准确等不足;气相色谱法需要将样品进行衍生，操作繁琐，易受杂质干扰;高效液相色谱法能检测不同类型的异黄酮，但检测时间较长，设备运行费用较高，不适于在提取工艺探讨中大量多次地监测异黄酮.大豆异黄酮为黄酮醇类化合物，在紫外光区有较强吸收，因此可采用适当对照品，用紫外分光光度法检测大豆异黄酮含量[9]。
[9]杨晓文.大豆异黄酮测定力法的研究概况[J].中国油脂.2006,31(1):60-622.3.1标准曲线的制作准确称取120℃干燥至恒重的染料木素5mg置于5OmL 容量瓶中，用95%乙醇溶解，并定容个刻度，摇匀、分别用移液管准确吸取O.5mL,1.OmL,1.5mL, 2.OmL,2.5mL标准溶液分别置于5OmL容量瓶中，并各加入95%乙醇1.Oml,再加蒸馏水稀释个刻度，摇匀、以1 mL95%乙醇加水到5OmL作空白对照、在260nm处测吸光度，染料木素的浓度C以μg/mL为横坐标，吸光度A 为纵坐标绘制标准曲线。
回归方程A=0.1676X-0.0118，r=0.9982。
2.3.2样品的制备豆粕多功能食品粉碎机粉碎后，过30目筛，称取粉碎样品5.OOOOg,、将无水乙醇配成70%浓度后取40mL，索氏提取豆粕粉末，在70℃恒温水浴中提取2h,减压抽滤去残渣，回收溶剂至干，加95%乙醇溶解，定容至5OmL 容量瓶中，作为储备液、准确吸取储备液2mL置5OmL容量瓶中，加95%乙醇1.OmL 定容个刻度，摇匀、作平行样3份。
2.4高效液相色谱法测定大豆异黄酮的含量仪器条件:Waters液相色谱仪;C18色谱柱，150mmX4.6mm, 5μm;流动相:甲醇: 水:磷酸=55:45:0.3;流速:0.6mL/min;柱温:25℃;检测波长:260nm。
标准溶液:用十万分之一电子天平准确称量5.Omg染料木素和5.Omg大豆黄素对照品，加入50mL容量瓶中，以甲醇溶解并定容至刻度，作为标准溶液。
样品预处理:因大豆异黄酮甙元容易得到纯品，所以测定大豆异黄酮含量时都以甙元做对照品。
这样在进行HPLC分析之前，需对大豆异黄酮样品进行预处理。
准确称量5Omg待分析样品于50mL锥形瓶中，加入3OmL甲醇和5mL质量分数为25%的盐酸水溶液，在恒温水浴锅上80℃加热回流水解1h至大豆异黄酮甙完全水解为大豆异黄酮甙元后，把水解液用甲醇定容至5OmL容量瓶中，进液相色谱进行分析。
样品分析:以标准溶液的出峰保留时间和峰面积与溶液浓度的对应工作曲线为依据，根据文献报道的相应组分的换算系数计算样品中总大豆异黄酮甙的含量。
2.5 RP-HPLC测定大豆异黄酮的含量阮洪生，秦学功，陈志宝，等.大孔吸附树脂富集豆粕中大豆异黄酮的工艺研究[J].黑龙江八一农垦大学学报2007，19（5）：72-76采用RP-HPLC测定豆粕中以大豆苷和染料木苷为主的异黄酮含量。
色谱条件为色谱柱:KromasilC18柱(4.6 mm X 250 mm, 5μm);柱温:30℃;流动相:甲醇-水(3:7);流速:1.00 mL.min-1;检测波长:260nm;进样量:10μL。
建立测定大豆苷与染料木苷的标准工作曲线。
用ADS-21大孔吸附树脂进行大豆异黄酮分离实验A 树脂处理1.准确称取20gNaoH,慢慢加入到盛有300ml蒸馏水的烧杯中溶解，稀释至500ml，配成4%的NaoH溶液。
将新购ADS-21大孔吸附树脂300g置于其中，其间不断进行搅拌，冷浸3h,之后用蒸馏水洗至中性。
2.精确量取15ml盐酸，慢慢加入到盛有300ml蒸馏水的烧杯中溶解，稀释至500ml，配成3%HCL溶液。
加入上步处理后的树脂，冷浸3h,搅拌，之后用蒸馏水洗至中性。
备用。
3.树脂的再生：做过实验的树脂用4%的NaoH溶液冷浸3h,之后用蒸馏水洗至中性备用。
B 豆粕样液制备2.3.2豆粕样液制备称取粉碎后豆粕100g，加600ml 75%酒精于60℃热回流提取120min，用4层纱布粗滤得粗滤液，残渣再加入500ml75%酒精于60℃热回流提取90min，用4层纱布粗滤得粗滤液，残渣再加入500ml75%酒精于60℃热回流提取90min，用4层纱布粗滤得粗滤液，合并三次粗滤液，在用滤纸或离心过滤得豆粕提取液。
提取液经旋转蒸发仪浓缩至原体积的1/5，再加入和浓缩液同体积的蒸馏水水，继续蒸馏至馏出液中乙醇含量为10%时停止。
调pH为4,使蛋白析出，离心l5min，倒出上清液，再将pH调到中性，得到豆粕大豆异黄酮溶液（ mg/ml）。
C ADS-21大孔吸附树脂分离大豆异黄酮1.将处理后树脂，装入Φ4.5×38.0cm 柱中，上样，平均流速3-5ml/min，流出液收集，取其10ml留样，冰箱保藏。
2.用蒸馏水以平均流速5-8ml/min进行洗涤，洗至无色。
3.经层析柱后，被树脂吸附物质即为大豆异黄酮，用8 ml/ min的流速，用500 ml 15.0%的乙醇洗脱，收集流出液，取其10ml留样，冰箱保藏。
洗脱液减压浓缩回收酒精至无醇味。
4.用500ml 30%乙醇洗脱，洗脱液收集，取其10ml留样，冰箱保藏。
洗脱液减压浓缩回收酒精至无醇味。
5.用2000ml 65%酒精洗脱，洗脱液收集，取其10ml留样，冰箱保藏。