有机酸分子量测定共28页
有机酸分子量测定
实验目的 实验原理 实验试剂 实验步骤 结果计算 实验讨论
实验目的
1. 进一步熟悉分析天平减量称量法的 操作。 2．进一步熟悉滴定酸碱物质以计算摩 尔质量的基本方法。 3. 进一步掌握酸碱指示剂的使用。
实验原理
大多数有机酸是固体弱酸，易溶于水，且有 Ka≥10-7，即可在水溶液中用NaOH标准溶液进行 滴定。反应产物为强碱弱酸盐。由于滴定突跃发 生在弱碱性范围内，故常选用酚酞为指示剂，滴 定至溶液呈微红色即为终点。根据NaOH标准溶 液的浓度和滴定时用的体积，计算该有机酸的摩 尔质量。
④参加反应时，按反应式定量地进行，不发 生副反应。 ⑤最好有较大的式量，在配制标准溶液时可 以称取较多的量，以减少称量误差。
故氢氧化钠不能作为滴定的基准物质 不符合以上所说的③和⑤
实验原理
有机酸与氢氧化钠反应方程式：
nNaOH H n A Nan A nH 2O
摩尔质量计算公式：
mA mA nmA MA 1 nA cNaOH VNaOH nNaOH n
实验原理
邻苯二甲酸在水中的解离常数为
pKa1 2.95, pKa2 4.37
pH pKw pOH
的试剂瓶中，稀至500mL，摇匀。
2、 0.10mol/L NaOH溶液的标定
减量称量法称 取0.4～0.6g无 水邻苯二甲酸 氢钾
倒入250mL锥 形瓶中，加 40～50mL蒸 馏水，溶解
加入2～3滴 酚酞指示剂
各次标定结果 的相对平均偏 差应控制在 ﹤0.2%。
溶液呈为红色 并保持半分钟 不褪色
首先将一组数据由小到大按顺序排列为： x1，x2 ，…，xn-1， xn ，若xn可疑值，则 统计量Q为 X X
常用有机酸结构、化学式、分子量、别名
名称含量分子式分子量化学名结构1 甲酸≥98.0% HCOOH 46.03 蚁酸2 乙酸≥99.5% CH3COOH 60.05 醋酸3 丙酸≥99.0% CH3CH2COOH 74.084 丁酸≥99.0% CH3CH2CH2COOH 88.11 酪酸5 苯甲酸≥99.5% C6H5COOH 122.1214 安息香酸6 乳酸85-90% CH3CH(OH)COOH 90 α羟基丙酸7 富马酸≥99.0% HOOCCH=CHCOOH 116.07 反丁烯二酸8 对羟基苯甲酸≥99.0% C7H6O3 138.13 尼泊金酸9 马来酸≥99.5% HOOCCH=CHCOOH 116.07 顺丁烯二酸10 肉桂酸≥99.5% C6H5-CH=CH-COOH 148.17 β-苯丙烯酸、3-苯基-2-丙烯酸11 没食子酸≥99% C7H6O5 170.12 3，4，5-三羟基苯甲酸12 烟酸≥99.5%-100.5% C6H5NO2 123.11 维生素B3、维生素PP、尼克酸13 山梨酸钾≥98% CH3CH=CHCH=CHCOOK 150.22 2,4-己二烯酸钾14 丁香酸98% C9H10O5 198.18 3，5-二甲氧基-4-羟基苯甲酸15 丙二酸≥98% HOOCCH2COOH 104.06 缩苹果酸16 一水合柠檬酸≥99.5% C6H8O7 192.14 2-羟基-1,2,3-三羧基丙烷17 香草酸98% C8H8O4 168.15 4-羟基-3-甲氧基苯甲酸18 2,4-二羟基苯甲酸≥99% C7H6O4 154.1219 水杨酸≥99.5% C7H6O3138 邻羟基苯甲酸20 丁二酸≥99.5% HOOCCH2CH2COOH 118.09 琥珀酸21 DL-苹果酸≥99% C4H6O5 134.09 2－羟基丁二酸22 齐墩果酸97% C30H48O3 456.71 3β-羟基齐墩果-12-烯-28-酸23 β-甘草次酸97% C30H46O4470.643β-羟基-11-氧化-18β,20β-齐墩果烷-12-烯酸24 咖啡酸98% C9H8O4 180.15 3,4-二羟基苯基烯丙酸25 蛇床子素99% C15H16O3 244.29 7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素26 熊果酸93% C30H48O3 456.68。
常用有机酸结构、化学式、分子量、别名
咖啡酸
98%
C9H8O4
180.15
3,4-二羟基苯基烯丙酸
25
蛇床子素
99%
C15H16O3
244.29
7-甲氧基-8-异戊烯基香豆素
26
熊果酸
93%
C30H48O3
456.68
龟裂链霉菌菌种交接说明
今由陈晓红将张江波、秦宝福老师2016年月日从上海华东理工大学寄往西北农林科技大学生命科学学院生物工程实验实训中心的土霉素发酵菌种龟裂链霉菌冻干粉（牛奶管）支，斜面支，转交给刘建党、张江波老师，并将牛奶管支保藏在陈鹏老师实验室-80℃冰箱，斜面支保藏在陈鹏老师实验室4℃冰箱。特此说明。
经办人：
日期：2016年3月11日
CH3CH(OH)COOH
90
α羟基丙酸
7
富马酸
≥99.0%
HOOCCH=CHCOOH
116.07
反丁烯二酸
8
对羟基苯甲酸
≥99.0%
C7H6O3
138.13
尼泊金酸
9
马来酸
≥99.5%
HOOCCH=CHCOOH
116.07
顺丁烯二酸
10
肉桂酸
≥99.5%
C6H5-CH=CH-COOH
148.17
β-苯丙烯酸、3-苯基-2-丙烯酸
11
没食子酸
≥99%
C7H6O5
170.12
3，4，5-三羟基苯甲酸
12
烟酸
≥99.5%-100.5%
C6H5NO2
123.11
维生素B3、维生素PP、尼克酸
13
山梨酸钾
≥98%
CH3CH=CHCH=CHCOOK
大气PM2.5中水溶性有机酸的测定
甲酸
乙酸
草酸
0.974
0.981
0.891
0.954
0.976
0.817
0.962
1.010
0.776
0.950
0.985
0.752
0.939
0.990
0.712
0.972
0.899
0.712
0.959
0.974
0.777
0.013 5
0.038 3
0.068 8
1.4
3.9
8.9
95.9
97.4
77.7
超纯水机制备；石英滤膜，上海安谱公司。
2.1 离子色谱图
1.2 标准溶液
标准溶液中水溶性有机酸和阴离子的色谱图如
甲酸标准溶液 1 000 mg/L，上海安谱公司；乙酸 图 1 所示，在 42 min 内可有效分离出 3 种水溶性离
纯品，上海安谱公司；草酸标准溶液 1 000 mg/L，上海 子，乙 酸、甲 酸、草 酸 的 出 峰 时 间 分 别 为 7.10 min、
各有机酸测定结果 /（mg/L）
甲酸
乙酸
草酸
0.116
0.180
0.251
0.117
0.176
0.246
0.115
0.174
0.243
0.126
0.174
0.250
0.124
Байду номын сангаас
0.179
0.243
0.121
0.176
0.243
0.117
0.177
0.242
0.119
0.177
0.245
0.03
0.06
有机酸的测定
实验3 有机酸的测定
1. 实验目的
测定n 元有机酸以A H n 表示的摩尔质量与转移的质子数的比值；或测定n 元有机酸以A H 1n M n
表示的特定组合的摩尔质量。
2. 实验试剂
有机酸HnA 固体试样；0.1mol/LNaOH 标准溶液；酚酞指示剂（0.2%乙醇溶液）。
3. 实验原理
用NaOH 标准溶液滴定有机酸只有一个滴定突跃时，相应的滴定反应为
O H A OH A H 2--n n n n +=+
计算式为
3NaOH NaOH A H A
H 101-⨯⨯=V c n
M m n n ； 3NaOH NaOH A H A H 10n -⨯⨯=V c m M n n 4. 实验步骤
用分析天平减量法称取0.15~~0.2g 固体有机酸试样至250mL 锥形瓶，加约40mL 水，溶解，加2滴酚酞指示剂，用NaOH 标准溶液平行实验滴定2次。
5. 实验数据记录（见附表）
6. 实验结果分析
①实验结果数据与酒石酸相近；
②误差分析：滴定终点不明显；NaOH 溶液标定浓度不准确（偏低）导致最终结果误差。
高分子材料的性能与研究方法(ppt 28页)
料
医用高分子
概念：可应用于医药的人工合成（包括改性）的
高分子材料，不包括天然高分子材料、生物高分子 材料、无机（高分子）材料等在内。
分 类
基本：（1）、组织相容性：材料自身稳定性及于机 要求 体组织亲和性（容忍性），材料对集体的影
响； （2）、酶生物老化性：材料对人体复杂环境 的适应性（抗“体内老化”性） （3）、血液适应性：不凝血、不溶血、不改 变血液中的蛋白、不破坏血小板、不在引发 血栓形成等。
功能高分子材料
分类：（1）化学功能：感光高分子、氧化还原树脂、离子交
高
换树脂、高分子催化剂、光降解塑料、固体电介质等；
分
（2）物理功能：导电高分子、压电高分子、高分子极 驻体、旋光性高分子、磁记录高分子、荧光体等； （3）化学、物理复合功能：高分子吸附剂、絮凝剂、
子 发 光 板
表面活性剂、染料、稳定剂、高吸水材料等；
2、连锁聚合反应（链式聚合、链式反应）： 单体被某种能量激活，是指链接到具有能量 的基团上，从而再激发另一个单体使之在连 接到这个增长的基团上，如此往复连成高分 子。包括自由基聚合与离子聚合。
4、高分子共混：多种高分子共混，形成有 特点的新的高分子材料。包括机械粉末共混、 溶液共混、乳液共混、熔融共混、化学反应 性共混等。
复合材料：以一种材料为基体（基体材料），另一
种材料为增强体（增强材料）组合而成的材料。 聚合物基复合材料通常以塑料或橡胶为基体，以纤维 为增强材料。
优势性能：强度高、力学性能好，抗疲劳性能好，
减震性能好，热变形温度高。
应用领域：
（1）航天航空（机翼、卫星天线、太阳能电池翼、大型运载火箭壳体等）； （2）汽车工业（车身、受力构件、传动轴、发动机架及内部构件等）； （3）化工、纺织、机械制造（化工设备、纺织机、复印机、高速机床等）； （4）医学领域（医用X光机、矫形支架等）。
滴定分析的基本操作和未知有机酸分子量的测定
分析化学部分的实验内容，而分析化学是确定物质组成、结构及各组分在其中的含量的一门学科。
按其任务可分为定性分析、定量分析和结构分析。
特点——量化，特别强调“量”的概念。
为得到一个好的结果，要做到如下几点：※必须正确和熟练地掌握实验的基本操作；※正确地记录实验数据，注意“有效数字”的概念；※正确地按照数据处理方法对实验结果进行运算、处理。
分析误差产生的原因。
（a）（b）（c）√√√√√√√√√√√直接称量法减量法（三）容量器皿及其基本操作1.滴定管及其使用滴定管是在滴定过程中，用于准确测量溶液体积的一类玻璃量器。
一般分成酸式和碱式两种。
酸式滴定管适于装盛酸性或氧化性的溶液；碱式滴定管用于装盛碱性溶液，不能用来放置能与橡皮起作用的溶液。
另有一种以聚四氟乙烯塑料作活塞的新型滴定管，因其耐酸耐碱又耐腐蚀，可以放置几乎所有的分析试剂。
酸式碱式酸式滴定管的处理：注意点:6）滴定操作酸管的滴定姿势烧杯内滴定锥形瓶内滴定碘量瓶内滴定碱管：滴定时手的用力点在玻璃珠中心偏上。
可调式微量移液器固定式3.容量瓶及其使用容量瓶是一种主要用来配制标准溶液或稀释溶液到一定体积的量器。
操作步骤：检漏⇒洗涤（自来水、蒸馏水）⇒定量转移⇒定容⇒摇匀拿容量瓶的方法定量转移操作三、实验步骤1. 0.1 mol·L-1 NaOH 溶液的配制100mL 称取NaOH2.0gH2O300mL500mL试剂瓶稀释至500 mL摇匀2. 0.1 mol·L-1 NaOH 溶液的标定250mL直接法KHC8H4O40.4~0.6gH2O溶解20~30mLNaOH 溶液滴定30s不褪色2%酚酞1~2d平行3次，由滴定剂体积计算氢氧化钠浓度。
实验步骤3. 样品的测定100mL 差减法称量硫酸铵 1.5gH2O30mL250mL容量瓶定容摇匀试样溶液25.00mL20%甲醛10mL放置5min2%酚酞1~2d NaOH滴定30s不褪色250mL平行3次，由滴定剂体积计算样品的含氮量。
有机酸电离度及电离平衡常数和相对分子质量的测定.
2.32 × 102
3.60 × 102 5.04 × 102
2.32× 10-2
3.60×10-2 5.04 ×10-2
1.12×10-3
6.90×10-4 4.83×10-4
2.87
1.77 1.24
1.77 ×10-5
1.67 ×10-5 1.63 ×10-5
平均：Ka0=1.72 × 10-5
已知浓度HAc溶液 约40mL
移入
4 50mL
1，2，3，4号溶液
有机酸电离度及电离平衡常数和相 对分子质量的测定
测定HAc溶液的pH 电导率。
8
未知弱酸标准解离常数的测定
5 50mL 未知一元弱 10.00mL 1～2滴酚酞
微红色 0.1mol•L-1NaOH 滴定 测定HAc溶液的 pH值。
有机酸电离度及电离平衡常数和相 对分子质量的测定
2.18 × 10-5
1AC 0.01044 к(μs·cm-1) 1.66×1 02 к(s·m-1) 1.66×10-2 Λm (s· m2 · mol-1) 1.59×10-3 α% 4.07 KaO 1.80×10-5
2
3 4
0.02088
0.05220 0.0100
有机酸电离度及电离平衡常数和相 对分子质量的测定
5
HAc
H+ + Ac-
Ⅱ、电导率法
• 醋酸是一元弱酸，它的标准解离常数与解离度α存 在如下关系：
HAc
• 起始浓度 平衡时浓度 • c c－ c
0 a
H+ + Ac-
c K 1
2
0 0 c c
有机酸电离度及电离平衡常数和相 对分子质量的测定
有机酸电离度及电离平衡常数和相对分子质量的测定(精)
有机酸电离度及电离平衡常数和相
4
对分子质量的测定
对于NaAc-HAc组成的缓冲溶液，pH值可采用
以下公式计算：
pH
pK
a
lg
c( Ac ) c(HAc)
当：c( Ac ) c(HAc)
则：pK
a
pH
得：K
a
c(H )
有机酸电离度及电离平衡常数和相
5
对分子质量的测定
HAc
3. 将电极取出，用蒸馏水冲洗，用吸水纸吸干后插入另一 pH=4.00的缓冲溶液中，用“斜率”旋钮调节至pH为4.00。
有机酸电离度及电离平衡常数和相
13
对分子质量的测定
pH计的使用
4. 反复进行2、3两步，直至不用调节旋钮而直接读出准确 的值。以后所有的测量中均不再调节“定位”和“斜率” 旋钮。
差减法
100mL H2O
Байду номын сангаас
酚酞
0.45~0.55 邻苯二甲酸氢钾
50mL
1~2滴
0.1mol•L-1NaOH 滴定
溶液呈 微红 （30秒不褪色）
有机酸电离度及电离平衡常数和相 对分子质量的测定
摇匀
18
有机酸的测定
100mL
差减法
有机酸 0.6~0.7g
H2O 30mL
100mL 容量瓶
有机酸电离度及电离平衡常数和相
率是一定，可查表得到。
• 摩尔电导率由电导率κ求出，与醋酸溶液浓度c 及电导率κ之间关系为：
m c 1000
有机酸电离度及电离平衡常数和相
7
对分子质量的测定
实验步骤
(环境监测)第八节-有机污染物的测定课件
TOD值能反映几乎全部有机物质经燃烧后变成 CO2、H2O、NO、SO2等所需要的氧量。它比BOD5、 COD和高锰酸盐指数更接近于理论需氧量值。但它 们之间也没有固定的相关关系。有的研究者指出， BOD5/TOD＝0.1～0.6；COD/TOD＝0.5～0.9，具体 比值取决于废水的理化性质。
3
1.重铬酸钾法
（1）测定原理
在水样中加入一定量的 K2Cr2O7； 在一定条件（强酸性、 加热回流2小时、Ag2SO4 作催化剂）与水中的有 机物相互作用； 剩余的K2Cr2O7用硫酸 亚铁铵Fe(NH4)2(SO4)2 滴定。
氧化回流装置示意图
4
（2）滴定过程
指示剂：试亚铁灵
实验的结果：溶液颜色由黄经绿、灰兰到最后的棕红色
该方法最低检出浓度为0.5mg／L。
O2 水样 高温炉 CO2
低温炉 CO2
水样
冷却 冷却
TC
TOC
流路切换
IC
总有机碳分析流程
红外线 分析仪
28
29
五、总需氧量( Total Oxygen Demand，TOD)
总需氧量：是指水中能被氧化的物质，主要是 有机物质在燃烧中变成稳定的氧化物时所需要的氧 量，结果以O2的mg/L表示。
最后用高锰酸钾反滴定多余的
自身指示剂）；
耗氧量。以mg/L计；
根据用去的高锰酸钾量计算出
- 、Fe2+、SO 2- 、S2-等，
2
3
水中如存在还原性无机物，如N的O方法：在不加热煮沸的情 也要消耗高锰酸钾。消除干扰色，测定时扣除此部分。
况下，用高锰酸钾滴定至粉红
13
（1）水样不经稀释 （2）水样经稀释
有机酸检测方法
甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、苯乙酸、阿魏酸甲酸、乙酸、丙酸、柠檬酸、苹果酸、琥珀酸、酒石酸、草酸、仪器与设备waters2695 Alliance SeparationsModule高效液相色谱仪;waters2996 PhatadiodeArray二极管阵列检测器;Heraeus离心机;HORIBApH计。
色谱分析(1)混标配置。
分别准确称取适量上述10种有机酸并用超纯水溶解或稀释,以孔径0. 45μm 的微孔滤膜过滤,转移至50mL容量瓶中,定容,配制浓度为100mg/L的储备液,保存于4℃冰箱中。
(2)标准曲线绘制。
有机酸标准液的配置:根据紫外吸收灵敏度,将草酸、酒石酸、苹果酸、甲酸、丙二酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸、丙酸按照0. 2∶2. 5∶5∶5∶5∶2. 5∶5∶5∶5∶5的比例配制混标,逐级稀释,配制成A、B、C、D、E五个浓度级别的标准溶液,以绘制标准曲线。
其中A级别标准溶液浓度为0. 2; 2. 5, 5, 5, 5, 2. 5, 5, 5, 5, 5(μg/mL);B、C、D分别为上一个级别浓度的5倍稀释,E级为D级的2倍稀释。
并将这10中有机酸编号为:OA01-OA10。
(3)色谱条件。
反相C18柱CAPCellPAK C18MG 4. 6mm×250mm, 5um, pH范围: 2~10,流动相: 0. 1%H3PO4的去离子水和乙腈(V/V)98∶2;检测器波长: 210nm;流速: 1mL/min;进样量: 20u;l柱温: 35℃;(4)流动相配置。
取1mLH3PO4用超纯水稀释至1000mL,经孔径为0. 45μm的微孔滤膜过滤,超声脱气后备用。
乙腈(色谱纯)超声脱气备用。
阿魏酸阿魏酸的测定:称取风干样品1.0000g置50ml量瓶中，加入乙酸乙酯约45ml，超声处理30min 并静置过夜，加乙酸乙酯到刻度，摇匀，过滤，吸取滤液25ml水浴蒸干，残渣加甲酸溶解并移入10ml容量瓶，定容之后用荧光分析仪测定。
有机酸的测定液相色谱法
有机酸的测定液相色谱法是一种常用的化学分析方法，其基本原理是利用高效液相色谱仪将有机酸分离，然后通过检测器检测各有机酸的含量。
以下是测定有机酸液相色谱法的基本步骤：
1. 样品处理：将待测样品进行处理，如粉碎、溶解、过滤等，以便于后续的提取和分离。
2. 提取有机酸：将处理后的样品用适量的溶剂进行提取，常用的溶剂有酸性和碱性溶液。
提取时可以根据有机酸的性质选择合适的溶剂，如甲酸、乙酸、乳酸等。
3. 分离有机酸：将提取液通过高效液相色谱仪进行分离，色谱柱是关键的分离介质。
可以根据有机酸的极性、酸碱性质等选择合适的色谱柱，如C18、硅胶等。
流动相的选择也很重要，常用的流动相有甲醇、乙腈等。
4. 检测有机酸：分离后的有机酸可以通过紫外可见光检测器、荧光检测器等进行检测。
检测器的选择应根据有机酸的性质和实验要求进行选择。
5. 定量分析：根据色谱峰的面积或峰高进行定量分析，通过标准曲线法或内标法计算各有机酸的含量。
6. 数据处理和报告：将实验数据进行处理和分析，并撰写实验报告，包括实验目的、原理、操作过程、结果分析和结论等。
需要注意的是，在测定有机酸液相色谱法的过程中，应注意实验的安全性，避免使用有毒有害的试剂和溶剂。
同时，为了获得准确的结果，需要进行严格的实验操作和控制，如样品处理、提取和
分离等步骤都需要严格按照实验要求进行。
有机酸测定24
由于酸的种类不同，氢离子的离解度的大小也
有很大差别，如酒石酸较柠檬酸和苹果酸的酸味大。 一般果实中含酸在0.1~0.5%时，感觉比较适口，含 酸在0.5~1%时，便觉酸味较浓。 各种有机酸在果实组织中以游离或盐式状态存在。
例如，甜橙所含柠檬酸大约有50%呈游离态，
40%为柠檬酸钾盐，10%为柠檬酸钙盐。
示；苹果、核仁、核果、浆果和蔬菜类按苹果酸表
示；牛乳、水产品以乳酸表示。
4.农产品中的有机酸均为弱酸，用强碱(NaOH)滴定
时，其滴定终点偏碱，一般在pH8.2左右，所以， 可选用酚酞作为指示剂，微红色，30s内不褪色为 终点。 。
5.氢氧化钠标准溶液用基准物质来标定。常用的有
草酸和邻苯二甲酸氢钾等。采用邻苯二甲酸氢钾， 它与氢氧化钠的反应为：
果实酸味的强弱，并非决定于酸的总含量，而是
决定它的酸碱值的高低，即氢离子的离解度大小，氢 离子愈多则愈酸。不过果实中含有各种缓冲物质，如 蛋白质、氨基酸等成分，能起一定的缓冲作用。但当 果实或果汁加热或煮熟时，由于蛋白质凝固，失去了
缓冲作用，同时因温度升高，也促进酸的离解，则氢
离子增加使得果实酸味增大。
中的酸、果胶、某些盐类和蛋白质缓冲能力的影响。
提取：
一般的果蔬样品，与水1︰1研磨，过滤； 干果、籽粒，水2-3倍，沸水煮30min，过滤测定。
测定
pH值测定的方法应用最广泛的有：pH试纸法、标
准色管比色法和pH计测定法。其中以pH计法最准 确，操作也简便、迅速，可排除或减小这些样品中 所含的色泽和杂质对测定结果所造成的影响,测得较 准确的数据。
综上所述,酸度对农产品、食品和饮料,酒类以及发酵
产品有着重要的作用,并且,影响酸度的有机酸又是农 产品、食物和酒中重要的呈味成分,是一类重要的分 析项目。
总有机酸测量
气相色谱法：乳酸、乙酸、丙酸和丁酸含量，用气相色谱法测定，测定条件为：检测器F1D，柱2m×4 mm，固定相Pora—pak Q(80目)，柱温220O C，汽化室和检测器温度260O C，N2=65 mL／min，Air=550 mL／min，H2=55 mL／min，灵敏度l6×l0x，纸速5mm／min酸碱滴定法测定总有机酸含量1 、氢氧化钠溶液(0．1 mol·L-1)的配制取适量氢氧化钠加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，静置，澄清后备用。
取澄清的氢氧化钠饱和溶液5．6mL，加新沸放冷的蒸馏水使成1 000 mL，摇匀。
2 、供试品溶液的制备精密称取板蓝根提取物0．4 g，置50mL锥形瓶中，无水乙醇溶解，即得。
3、样品含量测定供试品溶液中，加入酚酞指示液2滴，用标定好的氢氧化钠滴定液(0．074 9 mol·L-1)滴定，滴定至溶液显粉红色。
每1 mL氢氧化钠滴定液相当于9．916 mg 的水杨酸(C7H603)，总有机酸以水杨酸计。
反相高效液色谱法测定板蓝根总有机酸中水杨酸的含量1 、色谱条件Kromasil C18柱(4．6 mm x 250mm，5 µm)；流动相乙腈-1％醋酸水溶液(25：75)，检测波长225 nm，流速10 mL/min-1，柱温为室温，理论塔板数按水杨酸计算不低于3 000。
2、对照品溶液的配制精密称定干燥的水杨酸对照品10．6 mg，100 mL量瓶甲醇定容，摇匀，0．45µm微孔滤膜过滤，即得对照品溶液。
3 、供试品溶液的制备精密称取板蓝根提取物0.25 g，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取上述溶液1 mL，置100 mL量瓶，甲醇稀释至刻度，摇匀，用0．45µm微孔滤膜滤过，取续滤液即为供试品溶液。
4 、线性关系的考察精密量取上述配制的对照品溶液0.25，1．0，2．0，3．0，5．0，6．0 mL置10 ml量瓶中，无水乙醇稀释至刻度，摇匀，0．45µm微孔滤膜过滤，取上述溶液在选定的色谱条件下，分别进样10µL,以峰面积为纵坐标，含量为横坐标，绘制标准曲线。