临床微生物学与检验
临床微生物学检验技术(85页)
应用：常用于肠杆菌科内某些种属的鉴别，如大肠埃希菌和产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。肠杆菌属和哈夫尼亚菌属为阴性，而沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属和变形杆菌属等为阳性。
4．β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验） 原理：乳糖发酵过程中需要乳糖通透酶和β－半乳糖苷酶才能快速分解。有些细菌只有半乳糖苷酶，因而只能迟缓发酵乳糖，所有乳糖快速发酵和迟缓发酵的细菌均可快速水解邻硝基酚-β-D-半乳糖苷（O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG）而生成黄色的邻硝基酚。用于枸橼酸菌属、亚利桑那菌属与沙门菌属的鉴别。 方法：将待试菌接种于ONPG肉汤中，35℃水浴或孵箱孵育18~24h，观察结果。
3．甲基红（MR）试验 原理：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步被分解为甲酸、乙酸和琥珀酸等，使培养基pH下降至4.5以下时，加入甲基红指示剂呈红色。如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其他物质（如醇、醛、酮、气体和水），培养基pH在 5.4以上，加入甲基红指示剂呈桔黄色。 方法：将待试菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中，35℃孵育48~96h后，于5ml培养基中滴加5~6滴甲基红指示剂，立即观察结果。
二、染色标本
细菌标本经染色后，除能清楚看到细菌的形态、大小、排列方式外，还可根据染色反应将细菌进行分类，因此染色标本的检查在细菌的初步鉴定中应用最广，起着非常重要的作用。 （一）常用染料：酸性染料、碱性染料、复合染料。 （二）常用的染色方法：革兰染色、抗酸染色、 荧光染色。
革兰染色
二、培养接种
（一）划线接种 1.方法 斜线法 、曲线法 、方格法 、放射法 、四格法。
斜线法
临床微生物学检验
临床微生物学检验引言临床微生物学检验是一种通过检测和分析患者体内微生物的存在和活动水平来帮助诊断和治疗感染性疾病的方法。
微生物学检验可以确定感染的原因和类型，并确定适当的抗生素治疗方案。
本文将介绍临床微生物学检验的概念、常见的检验方法和其在临床实践中的应用。
临床微生物学检验的概念临床微生物学检验是通过收集患者样本（如血液、尿液、血液培养物等）并对其中的微生物进行培养、分离和鉴定来确定感染病原体的方法。
它涉及一系列实验室操作和技术，包括细菌培养、抗生素敏感性测试、鉴定和分子生物学方法等。
这些方法可以帮助确认感染病原体的存在、确定其感染类型（细菌、真菌、病毒等）以及选择适宜的治疗药物。
临床微生物学检验的常见方法细菌培养细菌培养是一种常见的微生物学检验方法，它涉及将患者样本置于培养基中以促进微生物的生长。
不同类型的培养基可以支持不同类型的微生物生长，如常见的血液琼脂培养基可用于细菌培养。
细菌培养的时间可以从几小时到几天不等，具体取决于患者样本中微生物的增殖速度和种类。
抗生素敏感性测试抗生素敏感性测试是一种用于确定感染病原体对不同抗生素的敏感性和抵抗性的方法。
常见的抗生素敏感性测试方法包括纸片扩散法和微量稀释法。
这些测试可以帮助医生选择最适合的抗生素治疗方案，以避免抗生素的滥用和抵抗性的产生。
分子生物学方法分子生物学方法在临床微生物学检验中也扮演着重要的角色。
这些方法可以通过检测微生物的核酸（如DNA或RNA）来快速鉴定微生物的存在和类型。
其中常用的方法包括PCR （聚合酶链反应）和实时荧光定量PCR。
分子生物学方法具有高度的特异性和敏感性，可以快速准确地检测微生物。
临床微生物学检验的应用临床微生物学检验在临床实践中具有广泛的应用。
它可以帮助确定感染的病原体，指导治疗方案的制定和调整，并监测治疗的疗效。
以下是临床微生物学检验在不同感染疾病中的应用示例：细菌感染在细菌感染的诊断和治疗中，临床微生物学检验可以帮助确定感染的菌种、菌株的数量和敏感性，从而选择适当的抗生素治疗方案。
临床微生物学及检验
一 碳水化合物的代谢试验 二 二 蛋白质和氨基酸的代谢试验
ห้องสมุดไป่ตู้三 碳源和氮源利用试验 四 酶类试验
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一、碳水化合物的代谢试验
类别 生化试验
原理
培养基/试剂 阳性结果
应用
碳 糖(醇)发酵试 各种细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类 含糖、醇、 溴甲酚紫变黄 肠杆菌科细菌的鉴
水
验
的酶，分解糖类的能力不同，产酸、产
实验1 细菌形态学检查
【实验目的】
1.掌握普通光学显微镜的原理和使用方法。 2.掌握悬滴法、压滴法及结果判读 。 3.熟悉细菌染色基本原理；掌握革兰染色法、
抗酸染色法。
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【实验器材】 1.菌种 金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、
变形杆菌、耻垢分枝杆菌。 2.培养基 普通琼脂平板、肉汤培养基、罗
氏培养基。 3.试剂 无菌生理盐水、凡士林、结晶紫、
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4. 半固体穿刺接种法：由培养基中央刺到距管底约半厘米处，然后
沿穿刺线退出接种针。
用途：检验细菌的运动性或观察细菌的生化反应。
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四、细菌的培养方法
1. 需氧培养法：将已接种的表皮葡萄 球菌的琼脂平板、斜面或液体培养 基置35℃培养箱培养18-24h，观察细 菌生长情况。
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2. 二氧化碳培养法（烛缸法）：取有磨口 标本缸或玻璃干燥器，在盖及磨口处涂 以凡士林，将接种细菌的培养基放入缸 中，点燃缸内蜡烛，加盖密封，当蜡烛 燃烧时会消耗缸内氧气并产生CO2，浓度 约为5%左右，将烛缸置35℃培养箱。
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三、细菌的接种与分离技术
细菌接种的基本程序： ➢ 灭菌接种环（杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本） ➢ 沾取标本 ➢ 接种 ➢ 灭菌接种环（杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境）
临床微生物学检验题库与参考答案
临床微生物学检验题库与参考答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.深部感染的分泌物有很强的恶臭,应首先考虑引起感染的病原体是(2014/2016 年初级士)A、真菌B、支原体C、病毒D、厌氧菌E、需氧菌正确答案：B2.患者女，36 岁。
术后感染，取感染部位渗出液做细菌培养，培养示：血平板菌落小、不溶血、有黄色素，革兰阴性细杆菌，有动力，无芽孢、无荚膜，氧化酶阴性，葡萄糖氧化，可水解七叶苷，液化明胶，DNA 酶阳性。
该患者感染的病原菌是（2016 年初级师）A、铜绿假单胞菌B、嗜麦芽窄食单胞菌C、大肠埃希菌D、芳香黄杆菌E、产碱假单胞菌正确答案：B3.革兰染色所用染料顺序是(2017/2020 年初级士)A、结晶紫-乙醇-碘液-稀释复红B、稀释复红-乙醇-结晶紫-碘液C、结晶紫-碘液-乙醇-稀释复红D、稀释复红-结晶紫-碘液-乙醇E、稀释复红-碘液-乙醇-结晶紫正确答案：C4.患者男,37 岁。
下呼吸道标本做细菌培养,在普通培养基及血平板上3℃培养24 小时,生长出光滑、不透明、灰白色、易从培养基上推动的菌落。
该菌为革兰阴性双球菌,无芽孢、无鞭毛,氧化酶阳性,触酶阳性,产 DNA 酶,还原硝酸盐和亚硝盐酸该菌为(2013 年初级师)A、脑膜炎奈瑟菌B、卡他布兰汉菌C、淋病奈瑟菌D、肺炎链球菌E、葡萄球菌正确答案：B5.下列细菌中硫化氢阳性的一组为(2015 年中级师)A、黏质沙雷菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌B、弗劳地枸橼酸菌、肺炎克雷伯菌、痢疾志贺菌C、伤寒沙门菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌D、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、痢疾志贺菌E、弗劳地枸橼酸菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌正确答案：E6.关于性菌毛的特点,下列叙述错误的是(2014 年初级师)(2014 年中级师)A、数量少 0~4 根B、比普通菌毛长C、仅见于少量阳性菌D、带有性菌毛的细菌称为雄性菌E、具有致育性正确答案：C7.下列细菌中属条件致病菌的是(2014/2018 年中级师)A、结核分枝杆菌B、铜绿假单胞菌C、霍乱弧菌D、金黄色葡萄球菌E、伤寒沙门菌正确答案：B8.不属于志贺菌血清群的是(2013 年初级士)A、宋内B、福氏C、鲍氏D、彦岛E、痢疾正确答案：D9.细菌的 ONPG 试验阳性呈现的颜色是(2015 年初级师)A、红色B、蓝色C、黄色D、紫色E、绿色正确答案：C10.白喉棒状杆菌致病主要靠(2019 年中级师)A、黏附素B、内毒素C、侵袭性物质D、外毒素E、英膜正确答案：D11.在半固体培养基中,沿接种线生长,接种线清晰,培养基澄清的细菌是(2013年中级师)A、大肠埃希菌B、铜绿假单胞菌C、阴沟肠杆菌D、肺炎克雷伯菌E、伤寒沙门菌正确答案：D12.患者女,22 岁。
临床微生物学检验题库(附参考答案)
临床微生物学检验题库（附参考答案）一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.患者男,18 岁。
进食炒饭 3 小时后出现恶心、呕吐等食物中毒症状。
其呕吐物中培养出蜡样芽孢杆菌。
有关芽孢的叙述,正确的是(2014 年初级士)A、是某些疾病的潜在传染源B、属于细菌的基本结构C、主要见于革兰阴性杆菌D、对化学消毒剂抵抗力弱E、不同种类细菌的芽孢位置、大小相同正确答案：A2.防止和抑制细菌生长繁殖的方法被称为(2014 年初级师)(2012 年中级师)A、无菌操作B、无菌C、消毒D、防腐E、灭菌正确答案：D3.用于 A 群链球菌与非 A 群链球菌的鉴别试验是(2013 年初级士)A、奥普托欣(Optochin)试验B、卵磷脂酶试验C、DNA 酶试验D、CAMP 试验E、杆菌肽试验正确答案：E4.一小学生在春节之后突然高热、头痛、呕吐并出现颈项强直,皮肤出现瘀点, 瘀点渗出液印片,革兰染色镜检发现大量白细,细胞内发现革兰阴性双球菌。
可能的病原菌是(2016/2020 年初级士)A、肺炎链球菌B、大肠埃希菌C、表皮葡萄球菌D、草绿色链球菌E、脑膜炎奈瑟菌正确答案：E5.细胞壁中具有磷壁酸的是(2013/2016 年初级师)A、金黄色葡萄球菌B、淋病奈瑟菌C、肺炎克雷伯菌D、铜绿假单胞菌E、大肠埃希菌正确答案：A6.不属于院内感染常分离到的耐药菌的是(2016 年中级师)A、MRSAB、MRSC、PRSPD、VREE、MDRAB正确答案：E7.检查痰液申结核分枝杆菌最常用的染色方法是(2015 年初级士)(2017 年初级师)A、Gram 染色B、H-E 染色C、WrighT 染色D、抗酸染色E、巴氏染色正确答案：D8.关于致病菌错误的描述是(2013 年初级士)A、多数为厌氧菌B、少数能形成芽孢C、最适生长温度为37℃D、适合中性偏碱环境E、致病菌的致病具有种属特异性正确答案：A9.伤寒发病 1~3 周均可取的化验标本是(2014 年中级师)A、脑脊液B、痰C、血液D、骨髓E、粪便正确答案：D10.患者男,56 岁,惠肝脓肿入院治疗。
临床微生物学和检验试题及答案
一、单选题（题数：40，共80.0 分）1副溶血弧菌的致病因子为（2.0分）0.0 分A、TSST-lB、CTC、LTD、STE、TDH我的答案：C2一开放性骨折患者并有大面积组织撕裂伤，伤口局部剧烈肿胀，触摸有捻发感，并有恶臭，病变发展迅速，伤口深部细菌涂片可见革兰阳性粗大杆菌和革兰阴性杆菌，可能感染（2.0分）2.0 分A、破伤风梭菌B、炭疽杆菌C、肉毒梭菌D、产气荚膜梭菌E、艰难梭菌我的答案：D3芽管形成试验阳性的是（2.0分）2.0 分A、光滑假丝酵母菌B、白假丝酵母菌C、光滑球拟酵母菌D、近平滑假丝酵母菌E、热带假丝酵母菌我的答案：B4导致婴儿先天畸形的病毒有（2.0分）2.0 分A、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒B、巨细胞病毒、腺病毒、乙型脑炎病毒C、风疹病毒、乙脑病毒、麻疹病毒D、巨细胞病毒、流感病毒、乙型脑炎病毒E、风疹病毒、流感病毒、腮腺炎病毒我的答案：A538、引起PCP的病原菌是（）（2.0分）2.0 分A、卡氏肺胞菌B、普氏立克次体C、曲霉菌D、组织胞浆菌E、汉坦病毒我的答案：A6一患者皮肤出现中央发黑呈痈样化脓灶，取分泌物涂片革兰染色镜检发现革兰阳性竹节状排列大杆菌，且有荚膜，初步判断是下列哪种细菌引起的（2.0分）2.0 分A、类白喉棒状杆菌B、产单核细胞李斯特菌C、炭疽芽胞杆菌D、破伤风梭菌E、蜡样芽胞杆菌我的答案：C7关于厌氧芽胞梭菌，下列选项错误的是（2.0分）2.0 分A、均能形成芽胞B、都是厌氧菌C、多见于自然环境中D、均通过伤口感染E、均为革兰阳性杆菌我的答案：D8解脲脲原体的特点是（2.0分）2.0 分A、分解精氨酸B、吸附CD4+ T细胞C、吸附红细胞D、分解葡萄糖E、分解尿素我的答案：E9属于氧化还原指示剂的是（2.0分）2.0 分A、溴甲酚紫B、甲基红C、酚酞D、亚甲蓝E、酚红我的答案：D10血平板上形成双层溶血环的细菌是（2.0分）2.0 分A、白喉棒状杆菌B、肺炎链球菌C、产气荚膜梭菌D、金黄色葡萄球菌E、破伤风梭菌我的答案：C11关于皮肤癣菌的描述，错误的是（2.0分）2.0 分A、在沙保弱培养基上形成丝状菌落B、通过直接和间接接触感染C、一种皮肤癣菌仅能引起一种癣病D、主要侵犯皮肤、毛发和指（趾）甲E、可以根据菌丝、孢子及菌落形态作出初步诊断我的答案：C12倾注MH平板时，培养基厚度为（2.0分）2.0 分A、6mmB、2mmC、5mmD、4mmE、3mm我的答案：D13通常定量接种的尿液量是（2.0分）2.0 分A、2μlB、7μlC、5μlD、3μ1E、1μl我的答案：E14手工法的血培养瓶，需每天观察有无细菌生长，下例情况中与细菌生长无关的是（2.0分）2.0 分A、溶血B、产生絮状沉淀C、肉汤培养基表面出现薄膜D、红细胞沉淀于瓶底E、肉汤培养基变浑浊我的答案：D1514、在液体培养基中形成菌膜生长的细菌是（）（2.0分）2.0 分A、产气荚膜杆菌变形杆菌C、布鲁菌D、结核分枝杆菌E、肉毒芽孢梭菌我的答案：D16不可在血平板上生长的细菌是（2.0分）0.0 分A、淋病奈瑟菌B、无乳链球菌C、肺炎链球菌D、卡他莫拉菌E、念珠菌我的答案：C17埃希菌属在KIA培养基上的常见反应模式是（2.0分）2.0 分A、A/A，产气，硫化氢-B、K/A，产气，硫化氢+C、A/A，不产气，硫化氧-D、K/A，不产气，硫化氢-E、K/A，不产气，硫化氢+我的答案：A1815、结核分枝杆菌常用的培养基是（）（2.0分）2.0 分A、沙保培养基庖肉培养基C、巧克力培养基D、罗氏培养基E、亚碲酸钾培养基我的答案：D19下列哪组试验是志贺菌属与类志贺邻单胞菌的鉴别试验（2.0分）2.0 分A、动力试验和氧化酶试验B、KIA和MIUC、MIU和IMViCD、糖发酵试验和脲酶试验E、动力试验和硝酸盐还原试验我的答案：A20缺陷病毒本质是指（2.0分）0.0 分A、复制周期不完全B、包膜刺突缺损C、衣壳缺损D、基因组缺损E、病毒酶缺损我的答案：C21下列病原体中，能引起软下疳的是（2.0分）2.0 分A、埃及嗜血杆菌B、杜克嗜血杆菌C、嗜沫嗜血杆菌D、流感嗜血杆菌E、溶血嗜血杆菌我的答案：B22关于嗜肺军团菌的描述，不正确的是（2.0分）2.0 分A、革兰阳性B、有鞭毛和菌毛，无荚膜和芽胞C、主要致病物质包括菌毛、侵袭性酶类和内毒素D、生长缓慢E、生存能力强我的答案：A23临床实验室检查细菌形态最常用的显微镜是（2.0分）2.0 分A、普通光学显微镜B、电子显徽镜C、相差显微镜D、荧光显微镜E、暗视野显微镜我的答案：A24由SARS冠状病毒引起的疾病是（2.0分）2.0 分A、大叶性肺炎B、普通感冒C、流感D、严重急性呼吸道综合征E、溃疡性结肠炎我的答案：D25真菌都能产生的孢子是（2.0分）2.0 分A、厚膜孢子B、大分生孢子C、小分生孢子D、芽生孢子E、关节孢子我的答案：C2631、下列细菌产生的毒素中，毒性最强的是（）（2.0分）2.0 分A、肉毒毒素B、破伤风毒素C、炭疽毒素D、霍乱毒素E、鼠毒素我的答案：A2727、放线菌在机体组织中形成的菌落是（）（2.0分）2.0 分A、硫磺样颗粒B、荷包蛋样菌落C、细菌L型D、绒毛样菌落E、黑色菌落我的答案：A28培养皮肤癣菌时为防止细菌生长可在沙保弱培养基中加入（2.0分）2.0 分A、普拉米星B、氯霉素C、放线菌酮D、两性霉素BE、益康唑我的答案：B29沙门菌属在KIA培养基上的常见反应模式是（2.0分）2.0 分A、K/A，不产气，硫化氢-B、A/A，不产气，硫化氧-C、A/A，产气，硫化氢+D、K/A，不产气，硫化氢+E、K/A，产气，硫化氢-我的答案：D30双糖铁培养基属于（2.0分）2.0 分A、营养培养基B、鉴别培养基C、特殊培养基D、基础培养基E、选择培养基我的答案：B3129、血平板上形成双层溶血环的细菌是（）（2.0分）2.0 分A、肺炎球菌B、葡萄球菌C、产气荚膜杆菌D、破伤风杆菌E、白喉杆菌我的答案：C3227、放线菌在机体组织中形成的菌落是（）（2.0分）2.0 分A、硫磺样颗粒B、细菌L型C、绒毛样菌落D、荷包蛋样菌落E、黑色菌落我的答案：A33以人虱为传播媒介的微生物为（2.0分）2.0 分A、布鲁菌B、鹦鹉热立克次体C、鼠疫杆菌D、钩端螺旋体E、普氏立克次体我的答案：E34不属于蛋白质和氨基酸代谢试验的是（2.0分）2.0 分A、明胶液化试验B、硫化氢试验C、CAMP 试验D、尿素分解试验E、吲哚试验我的答案：C35区分须癣毛癣菌与红色癣菌选用（2.0分）2.0 分A、厚膜孢子形成试验B、毛发穿孔试验C、明胶液化试验D、脲酶试验E、触酶试验我的答案：B36白喉棒状杆菌的异染颗粒，通过哪种染色可观察到（2.0分）2.0 分A、镀银染色B、革兰染色C、Giemsa染色D、Albert染色E、抗酸染色我的答案：D37鹅口疮的病原体是（2.0分）2.0 分A、新型隐球菌B、表皮癣菌C、白假丝酵母菌D、黄曲霉菌E、小孢子癣菌我的答案：C38下列疾病中，主要经粪—口途径传播的是（2.0分）2.0 分A、脊髓灰质炎B、流行性乙型脑炎C、黄热病D、森林脑炎E、登革热我的答案：A39长期应用氨基糖苷类、头孢菌素类或四环素类无效的患者，均可因机体的微生态平衡被破坏而诱发下列哪类感染（2.0分）2.0 分A、梅毒螺旋体感染B、病毒感染C、缺陷病毒感染D、厌氧菌感染E、需氧菌感染我的答案：D40可用于治疗支原体肺炎的是（2.0分）2.0 分A、舒巴坦B、氨苄西林C、红霉素D、青霉素GE、头孢哌酮我的答案：C二、多选题（题数：10，共20.0 分）146、下列何种细菌不能引起社区性肺炎（）（2.0分）0.0 分A、支原体B、军团菌C、大肠杆菌D、铜绿假单胞菌E、流感嗜血杆菌我的答案：BE244、细菌染色性与细菌何种物理性状无关（）（2.0分）0.0 分A、半渗透性B、表面积C、光化学D、带电性E、渗透性我的答案：ABCDE342、有关荚膜描述正确的是（）（2.0分）0.0 分化学成分可是多糖B、具有抗吞噬作用C、具有免疫原性D、一般在机体内形成E、增强细菌的热的抵抗我的答案：ACDE443、不是真核型微生物特点的是（）（2.0分）1.0 分A、有核膜、无核仁B、有核仁、无核膜C、无染色体D、有核仁、核膜E、无核仁、核膜我的答案：AE5CAMP试验出现“矢状”溶血是什么细菌共培养的结果( ):（2.0分）2.0 分A、A群链球菌B、肺炎链球菌C、无乳链球菌D、流感嗜血杆菌E、金黄色葡萄球菌我的答案：CE645、不是溶菌酶作用部位为（）（2.0分）1.0 分A、细胞壁肽聚糖B、核糖体C、细菌外膜层D、细胞壁外膜细胞壁磷壁酸我的答案：CE7鸟氨酸脱羧酶试验阳性的细菌有( ):（2.0分）2.0 分A、痢疾志贺菌B、宋内志贺菌C、伤寒沙门菌D、甲型副伤寒沙门菌E、福氏志贺菌我的答案：BD8氧化酶试验阳性的细菌有( ):（2.0分）0.0 分A、铜绿假单胞菌B、宋内志贺菌C、大肠埃希菌D、鲍曼不动杆菌E、淋病奈瑟菌我的答案：AC9硝酸盐还原试验试剂的成分有( ):（2.0分）2.0 分A、α-萘胺B、对氨基苯磺酸C、α-萘酚D、醋酸E、对氨基苯甲醛我的答案：ABD10鲍曼不动杆菌鉴定试验阴性有( ):（2.0分）1.0 分A、硝酸盐还原试验B、动力试验革兰染色阴性D、氧化酶试验E、触酶试验我的答案：BCD。
临床微生物学与检验教学大纲
《临床微生物学与检验》教学大纲程编号：05280020课程名称：临床微生物学与检验(Clinical microbiology & laboratory)学分：6.5总学时：120学时理论学时：56学时实验学时：64学时先修课程要求：人体解剖学、生物化学、医学免疫学适应专业：医学检验专业参考教材：1、临床微生物学与检验，倪语星、尚红主编，第四版，人民卫生出版社2、临床微生物学检验，洪秀华主编，第一版，中国医药科技出版社3、Murray PR. Manual of Clinical Microbiology.8th ed.Washington:American Society for Microbiology一、课程在培养方案中的地位、目的和任务临床微生物学与检验是医学微生物学、临床微生物学以及微生物学技术密切结合的一门新兴学科，是医学检验专业的一门专业主干课程，它综合了临床医学、免疫学、临床抗生素学和医院流行病学等几方面的知识和技能，研究感染性疾病的病原体特征，提供快速、准确的病原学诊断，密切结合临床提出及时有效的治疗方案，对医院内感染进行动态监控。
二、课程基本要求临床微生物学与检验是一门实践性、应用性很强的课程，该课程包括医学微生物学和临床微生物学两部分，前者主要研究与医学有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性、以及防治措施的学科。
后者侧重于研究感染性疾病，快速、准确的诊断病原体的策略与方法，为临床诊断提供依据。
通过本课程的学习，学生应该掌握微生物的基本特性，病原微生物对人体的致病性以及人体的抗感染免疫，微生物学检验的基本技术。
各类临床标本的采集方法、检验程序及常规检验方法。
三、学时安排四、考核考核方式：理论考试笔试，实验课采用考核及评估方式评定成绩。
成绩构成：理论考试70%，实验和平时成绩30%。
五、课程基础内容（理论教学）绪论[目的要求]1、掌握有关微生物及微生物学的概念；2、了解微生物学的发展简史。
临床微生物学检验试题含参考答案
临床微生物学检验试题含参考答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.患者女,43 岁。
因”慢性咳嗽、咳痰、反复咳血”20 余年,发热 5 天入院,痰培养无致病菌。
胸部 CT 示右肺术后缺如,右下肺支气管扩张并感染,脓肿形成。
支气管镜下,右下叶背段黏膜活检病理提示大量浆细胞、淋巴细胞和中性粒细胞浸润,并见到大量细菌菌落,形态为革兰阳性杆菌、多形态、抗酸及弱酸染色为阴性,无菌丝,有分枝,成链状排列。
该患者可能为何种菌引起的肺病(2016/2019 年中级师)A、奴卡菌B、放线菌C、结合杆菌D、军团菌E、肺炎克雷伯菌正确答案：B2.与外斐反应有关的细菌是(2013 年中级师)A、痢疾志贺菌B、肺炎链球菌C、变形杆菌属中某些特殊菌株D、伤寒沙门菌E、粪肠球菌正确答案：C3.在培养基中加入特定的作用底物和指示剂,通过指示剂的反应来观察细菌生长过程中分解底物所释放产物的差异,此培养基称为(2011 年中级师)A、基础培养基B、特殊培养基C、选择培养基D、鉴别培养基E、营养培养基正确答案：D4.引起医院感染的病原体大多数属于(2017 年初级师)A、衣原体B、支原体C、细菌D、病毒E、真菌正确答案：C5.对芽孢作用不明显的灭菌方法是(2015 年初级师)A、160~170℃干烤 2hB、间歇灭菌法C、焚烧法D、流通蒸汽灭菌法E、加压蒸汽灭菌法(103.4kPa,121.3℃)正确答案：D6.疑为白喉患者的最佳取材部位是A、假膜边缘B、假膜表面C、淋巴液D、血液E、假膜深处正确答案：A7.患者女,23 岁。
发热 5 天,体温39~40℃,物理化学降温无效。
患者自述曾进食腌制的贝壳类食物。
予以抗生素抗感染治疗。
3 天体温恢复正常。
抗生素使用前做血培养,血培养结果阳性,革兰阴性杆菌生长,细菌在SS 平板上生长出中心黑色菌落。
最可能感染的细菌是(2017/2019 年中级师)A、鲍曼不动杆菌B、洋葱伯克霍尔德菌C、大肠埃希菌D、伤寒沙门菌E、痢疾志贺菌正确答案：D8.患儿男,6 岁。
医学检验科-临床微生物学专业内容
医学检验科-临床微生物学专业内容一、专业介绍1.1 临床微生物学的定义临床微生物学是研究临床医学中与微生物相关的疾病的学科，主要包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等微生物在人类疾病中的作用、诊断和治疗。
1.2 专业背景随着医疗技术的不断发展，微生物学在医学领域中的地位日益重要。
临床微生物学的专业内容涉及病原微生物的检测、分离和鉴定，以及对微生物相关疾病的诊断和治疗。
1.3 就业前景临床微生物学专业毕业生可以在医疗机构、检验检测中心、疾控中心、药品生产企业、科研院所等单位从事临床微生物学领域的工作，有很好的就业前景。
二、专业内容2.1 微生物的检测与分离临床微生物学的专业人员需要掌握微生物的检测与分离技术，包括采集临床样本、培养和鉴定微生物等操作，以确诊微生物相关疾病。
2.2 微生物的鉴定与鉴定鉴定微生物的特征对于制定治疗方案至关重要。
临床微生物学专业人员需要掌握各种微生物的鉴定方法，包括形态学、生理生化特性、分子生物学方法等。
2.3 微生物相关疾病的诊断临床微生物学专业人员需要学习各种常见微生物相关疾病的临床表现、诊断方法和治疗原则，以提高对这些疾病的诊断和治疗水平。
2.4 抗微生物药物的敏感性检测临床微生物学专业人员需要学习和掌握抗微生物药物的敏感性检测方法，以指导临床用药和抗微生物药物的合理使用。
2.5 微生物学实验室管理临床微生物学学科需要规范的微生物学实验室管理，包括实验室环境和设施管理、实验室安全管理、微生物样本管理等内容。
三、专业要求3.1 知识基础学习临床微生物学需要有扎实的生物学、微生物学和临床医学知识，了解细菌、病毒、真菌、寄生虫等微生物的基本特征和生物学特性。
3.2 技术能力临床微生物学专业人员需要具备熟练的微生物检测和分离技术、微生物鉴定和鉴定技术、微生物敏感性检测技术等实践技能。
3.3 全面素质临床微生物学专业人员需要具备严谨的科学态度、扎实的专业知识、良好的交流能力和团队合作能力，以满足临床微生物学领域工作的要求。
临床微生物学检验完整版
临床微生物学检验题型单选（4选1）多选（5选多）判断改错（错误的并改正）简答（适当解释说明）论述（案例分析，具体阐述）革兰氏染色属复染法，初染，媒染，脱色，复染4个过程革兰阳性（呈紫色）革兰阴性（呈红色）第二章1.细菌大小以微米（μm）为测量单位。
2.细菌结构：①附属结构：鞭毛、菌毛（光镜下看不见，不能作为鉴定依据，没鉴定价值）或纤毛；②表层结构：糖萼（荚膜或粘液层）；③内部结构：细胞质、质粒、芽孢。
3.细菌功能：①动力（鞭毛是细菌的运动器官），观察细菌动力可用悬滴法或压滴法在显微镜下直接观察其运动，也可将细菌穿刺接种半固体培养基观察动力。
鞭毛具有鉴定价值，采用鞭毛特殊染色（如镀银染色）可观察有无鞭毛及鞭毛数量、分布；一般染色不能看见鞭毛（如革兰氏染色）。
4.芽孢的功能：①对热力、干燥、辐射、化学消毒剂等具有强大抵抗力；②以是否杀死芽孢作为物品消毒灭菌判断效果的指标。
③芽孢在菌体的位置和直径大小随菌种不同，这种形态特点有助于细菌鉴别。
5.细菌生长曲线（要求整个过程，结合生长曲线记忆4个时期比较容易，可能是简答题）细菌二分裂方式进行繁殖。
以倾注平板法计数孵育后的菌落数换算菌落形成单位（）。
生长曲线：连续检测细菌不同培养时间的，以为纵坐标，培养时间为横坐标作出一条反映细菌生长数变化的规律曲线。
典型的生长曲线分为迟缓期、对数生长期、稳定期、衰亡期。
①迟缓期。
也称为准备时期，是细菌适应环境的过程。
特点：细菌的核酸、蛋白质、辅酶等物质合成增加，细胞体积增大，细菌数量恒定或极少量增加。
②对数生长期。
特点：细菌以最大的速率生长和分裂，细菌数量成对数增加。
细菌代谢活跃、稳定，其大小、形态、染色性和生化反应典型，对外界因素反应敏感，是检测细菌生物学性状和进行药物敏感性试验的适宜阶段。
不添加培养基下一般细菌对数期维持4~8h。
③稳定期。
特点：由于培养基中营养物质消耗、有害代谢产物积累和等环境变化，细菌生长速率降低，细菌死亡数增加使生长繁殖菌数和死亡菌数处于动态平衡，细菌数量达到最大，即处于稳定期。
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褚云卓
本章内容
第一节 标本的采集和处理原则 第二节 细菌的形态学检查 第三节 细菌的分离培养和鉴定 第四节 细菌的非培养检测方法
第一节 标本的采集和处理原则
一、标本采集的一般原则 1．早期采集 2．无菌采集 3．根据目的菌的特性用不同的方法采集 4．采集适量标本 5．安全采集
用于白喉棒状杆菌染色。
第二节 细菌的形态学检查
6.芽胞染色： 绿色部分 为芽胞
第二节 细菌的形态学检查
7.墨汁染色: 一般用于新型隐球菌
检查
第三节 细菌的分离培养和鉴定
一、培养基的种类和选择 培养基的组成成分、培养基种类、培养基的选择
二、分离及培养 细菌的分离、细菌培养方法
三、生化反应和鉴定 碳水化合物的代谢试验 蛋白质和氨基酸的代谢试验 碳源和氮源利用试验
1．基础培养基 含有基础生长所需的基本
营养成分，最常用的是肉浸 液，俗称肉汤（broth），主 要成分含牛肉浸液和蛋白胨。
第三节 细菌的分离培养和鉴定
2．营养培养基（nutrient medium） 最常用的是血琼脂平板、巧克力血
平板等Βιβλιοθήκη 第三节 细菌的分离培养和鉴定
3．鉴别培养基（diferential medium） 糖发酵管、克氏双糖铁 琼脂（KIA）、伊红-镁 蓝琼脂和动力-吲哚-尿素 （MIU）培养基等。
６.标本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必须包装 好，防止送检过程中倒翻或碰破流出
７.对于烈性传染病标本运送时更要特别严格，必须 按规定包装，由专人运送
８.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送， 有时可直接用抽取标本的注射器运送
第二节 细菌的形态学检查
1.包括不染色标本检查法和染色标本检查法 2.镜检可以了解有无细菌及大致的菌量 3.根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原菌的
第一节 标本的采集和处理原则
二、标本的处理 1. 对环境敏感的细菌如脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌
和流感嗜血杆菌等应保温并立即送检 2. 其他所有的标本采集后最好在2h之内送到实验室 3. 若不能及时送检，标本应置于一定环境中保存 4. 一般情况下，用于细菌培养的标本保存时间不应
超过24h
５.病人标本中可能含有大量致病菌，必须注意安全 防护
初步识别和分类 4.通过形态学检查可得到初步诊断，对临床早期诊
断和治疗疾病有一定的参考意义
第二节 细菌的形态学检查
一、不染色标本 1.细菌不经染色直接镜检，主要用于检查生活状态
下细菌的动力及运动状况 2.常用的方法有压滴法和悬滴法
有动力：可看到细菌自一处移至另一处，有明显 的方向性位移
无动力：细菌呈现布朗运动，只在原地颤动而无 位置的改变
第三节 细菌的分离培养和鉴定
4．选择培 （selective medium） SS琼脂使致病的沙门菌、 志贺菌容易分离到
第三节 细菌的分离培养和鉴定
5．特殊培养基 （special medium） 疱肉培养基、 巯基乙醇酸纳培养基
第三节 细菌的分离培养和鉴定
（三）培养基的选择 根据标本来源和可能存在的
第三节 细菌的分离培养和鉴定
（二）细菌培养方法 1．需氧培养法 2．二氧化碳培养法 3．厌氧培养法
第三节 细菌的分离培养和鉴定
三、生化反应和鉴定 （一）碳水化合物的代谢试验
1. 糖（醇、苷）类发酵试验 是鉴定细菌最主要和最基
本的试验，特别对肠杆菌科 细菌的鉴定尤为重要
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第三节 细菌的分离培养和鉴定
第二节 细菌的形态学检查
3.有些病原菌通过不染色标本的动力检查可作 出初步鉴定 如疑似霍乱患者，镜下观察到来回穿梭似 流星状运动的细菌，制动试验阳性，可初步 推断为“疑似O1群霍乱弧菌”。
第二节 细菌的形态学检查
二、染色标本 （一）常用染料 1．碱性染料：碱性复红、结晶紫、美蓝等 2．酸性染料：有伊红、刚果红等 3．复合染料（中性染料）及荧光染料：复合染料有
第二节 细菌的形态学检查
3．荧光染色 （1）荧光染色法敏感性强，效率高而且容易观察
结果，在临床细菌鉴定中有很大的实用价值。 （2）主要用于结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、白
喉棒状杆菌及痢疾志贺菌等的检测。
第二节 细菌的形态学检查
4.鞭毛染色 可观察到菌体上有无鞭毛、鞭毛的位置及数
量，在细菌鉴定中，特别是非发酵菌的鉴定中 很重要。 5.异染颗粒染色
病原菌，确定选用各种分离培养 基。伊红美蓝/麦康凯用于筛选 革兰阴性杆菌。
第三节 细菌的分离培养和鉴定
（三）培养基的选择 从血液、骨髓中
分离病原菌用血液增 菌培养基
第三节 细菌的分离培养和鉴定
二、分离及培养 （一）细菌的分离
1．平板划线分离法 2．斜面接种法 3．液体接种法
4．穿刺接种法 5．倾注平板法 6．涂布接种法
瑞氏染料（伊红美蓝）、姬姆萨染料（伊红天青） 等；荧光染料有荧光标记的抗体
第二节 细菌的形态学检查
（二）常用的染色方法 1．革兰染色（gram stain）
革兰阳性球菌
革兰阴性杆菌
第二节 细菌的形态学检查
2．抗酸染色 （acid-fast stain） 可将细菌分为两大类： 即-抗酸性细菌 -非抗酸性细菌
2．氧化―发酵试验（O/F试验） 主要用于肠杆菌科细菌与非发酵菌的鉴
别，前者均为发酵型，而后者通常为氧化型 或产碱型。也可用于葡萄球菌与微球菌间的 鉴别。
第三节 细菌的分离培养和鉴定
3．β―半乳糖苷酶试验（ONPG试验） 迅速及迟缓分解乳糖的细菌ONPG试验为
第三节 细菌的分离培养和鉴定
（二）培养基种类 1．基础培养基（based medium） 2．营养培养基（nutrient medium） 3．鉴别培养基（diferential medium） 4．选择培养基（selective medium） 5．特殊培养基（special medium）
第三节 细菌的分离培养和鉴定
第三节 细菌的分离培养和鉴定
一、培养基的种类和选择 培养基（culture medium）
是由人工方法配制而成的， 专供微生物生长繁殖使用 的混合营养物制品。
第三节 细菌的分离培养和鉴定
(一)培养基的组成成分 1．营养物质
蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖类、醇类、血液、 无机盐类、鸡蛋和动物血清生长因子 2．凝固物质 琼脂、明胶、卵白 3．抑制剂和指示剂