染色体实验室配置
染色体实验准备
染色体制片实验准备一所用试剂及配制：1、0.8％生理盐水：8gNaCl溶于1000ml蒸馏水，4℃存放。
2、PHA：例如，粉剂10mg溶于100ml灭菌生理盐水得到100ug/ml的注射液。
必须根据鱼的大小来确定配制的注射液的浓度。
4℃存放。
3、秋水仙素：1mg溶于100ml灭菌生理盐水得到10ug/ml的注射液。
必须根据鱼的大小来确定配制的注射液的浓度。
4℃存放。
4、0.075M KCl：5.59gKCl溶于1000ml蒸馏水，4℃存放。
5、卡氏固定液：甲醇：冰醋酸(体积比)＝3：1，现配现用，充分混匀。
6、Giemsa染液：用1ml Giemsa母液加6～7ml磷酸缓冲液（即PBS,PH6.8）稀释后用。
7、PBS（pH6.8）：先配制：甲液：KH2PO49.078g加蒸馏水至1000ml.乙液：Na2HPO4.2H2O 11.876g(或Na2HPO4.12H2O 23.8g)加蒸馏水至1000ml.再配制pH6.8 PBS：若为100ml，则取甲液50.8ml+乙液49.2ml混合而成。
二器材准备1、载玻片处理：将载玻片一片一片放入肥皂液中后煮沸30min，趁热刷洗干净，自来水冲洗后放入蒸馏水中浸泡一天（更换数次蒸馏水），再浸入95％酒精保存待用。
滴片前放入玻片盒，干燥后放入－20℃冷冻。
2、注射器及针头处理：肥皂液中煮沸、刷洗，自来水冲洗，蒸馏水浸泡，80℃烤干，盒内保存。
3、注射器: 5ml或1ml；针头4.5号，青霉素小瓶（同样方法洗净），其他不同大小试剂瓶。
4、解剖盘，镊子，大剪刀，小剪刀，小培养皿。
5、10ml刻度离心管，乳头吸管，100ml量筒；试管架，4000转电动离心机6、－20℃冰箱，显微镜，数码相机。
三实验步骤1 实验前准备：实验前1天按质量比10 µg/g鱼体重在实验鱼胸鳍基部往腹腔注射PHA，隔12小时后，按8 µg/g鱼体重再次给实验鱼腹腔注射PHA，4.5小时后，按2 µg/g鱼体重给实验鱼腹腔注射秋水仙素。
人类染色体标本制备经验手册
人类染色体标本制备经验手册3.0版本广州市达晖生物技术有限公司印制GUANGZHOUDAHUIBIOTECHCO.,LTD 目录第一部分各类器械清洗与常用试剂配置4页第三部分探讨染色体标本制备技术中的若干问题22页第五部分附录25页第一部分一、实验室要求1、准备室（约30平方米）：供清洗玻璃仪器、配制试剂仪器包装消毒及制片场所，还必需配置耐酸碱水池、实验操作台、药橱等设施。
并能合理放置冰箱、电热干燥箱、离心机、纯水器、消毒锅、天平等仪器，以方便使用。
2、无菌室（约25平方米）：用作细胞的接种培养、配备培养基。
分为更衣室（约4平方米）、缓冲室（约6平方米）、接种室（约15平方米）。
配备空调机、传递窗、离心机、倒置显微镜、超净工作台、臭氧发生器或紫外灯、培养箱等设备仪器。
二、设备仪器（一）仪器1、超净工作台一台2、光学显微镜二台（可以安装染色体软件分析系统）倒置显微镜与带照相装置的正立显微镜各一台。
倒置显微镜用作细胞培养；正立显微镜用作核型分析，有条件的单位可配备染色体分析软件、电脑、打印机等。
3、隔水式恒温培养箱一台开展产前检查的单位，最好购买二氧化碳培养箱。
4、电热干燥箱一台5、冰箱二台：普通冰箱和低温冰箱各一台6、酸度计一台（可略）7、纯水器（电阻率18兆欧姆）一台；（可略）-1-8、高压灭菌锅一台（可略）9、电热磁力搅拌器一台（可略）10、真空泵（无油）一台（可略）11、电子天平二台（万分之一天平与普通天平各一台）12、水平式离心机二台转速0-4000转/分，10毫升/管，大容量与小容量各一台。
大容量的供制片用，小容量的放置无菌室供细胞培养用。
13、可调移液器若干支：规格从5-5000微升若干支14、超声波清洗器一台（可略）15、水浴箱（0-100℃可调）（二）玻璃器皿与耗材1、培养瓶：15毫升链霉素瓶，25毫升小方瓶（建议采用一次性培养瓶）。
2、刻度离心管（10毫升）50支3、量筒（10-1000毫升）：各种规格各一个。
人体外周血淋巴细胞染色体制备与观察实验方案
人体外周血淋巴细胞染色体制备与观察实验方案清晨的阳光透过实验室的窗户，洒在桌子上，我拿起笔，准备写下这个实验方案。
人体外周血淋巴细胞染色体制备与观察，这是一个既熟悉又充满挑战的课题。
就让我以意识流的方式，带你走进这个神秘的实验世界。
一、实验目的1.了解人体外周血淋巴细胞染色体的基本结构。
2.学习并掌握染色体制备与观察的方法。
3.分析染色体形态，探讨其在遗传研究中的应用。
二、实验原理1.人体外周血淋巴细胞具有分裂能力，可进行有丝分裂。
2.通过特定染色方法，使染色体着色，便于观察。
3.利用显微镜技术，观察染色体形态和结构。
三、实验材料1.人体外周血：新鲜、无污染。
2.染色剂：吉姆萨染液、醋酸洋红染液。
3.试剂：肝素钠、氯化钠、磷酸缓冲液。
4.实验器材：显微镜、载玻片、盖玻片、离心机、移液器、吸管、计时器等。
四、实验步骤1.采集外周血：抽取2ml静脉血，加入含有肝素钠的抗凝管中，轻轻摇匀。
2.制备淋巴细胞悬液：将抗凝血置于离心管中，加入适量氯化钠溶液，1500r/min离心10分钟，弃上清，重复洗涤2次。
加入适量磷酸缓冲液，重悬细胞。
3.染色：取适量淋巴细胞悬液，滴加吉姆萨染液或醋酸洋红染液，染色5-10分钟。
4.制片：将染色后的细胞悬液滴在载玻片上，用盖玻片覆盖，轻轻压实。
5.观察染色体：将制片置于显微镜下，调节光线和倍数，观察染色体形态和结构。
6.记录结果：记录观察到的染色体形态、数量、排列等信息。
五、实验结果分析1.染色体形态：观察到的染色体呈棒状或X形，颜色鲜艳。
2.染色体数量：正常人体外周血淋巴细胞染色体数为46条。
3.染色体排列：有规律地排列成2个染色体组。
4.遗传研究应用：通过染色体分析，可研究遗传病、肿瘤等疾病的发生机制。
六、实验注意事项1.采集外周血时，要确保无污染。
2.制备淋巴细胞悬液时，要充分洗涤，去除红细胞和血浆。
3.染色过程中，要控制好染色时间，避免过染或欠染。
4.观察染色体时，要调节好显微镜光线和倍数，确保清晰。
染色体实验室可行性操作方案
新建染色体实验室可行性操作方案一、派遣计划：实验室建立初期市场尚未深入，标本量较少，为避免人力及物力资源的浪费，染色体实验室建设可分为两个阶段：第一阶段，标本量不足40例时：1．在当地联系合作医院，标本暂时外包；染色体属于形态学范畴，部分结果的判断并没有一个统一的标准，这样既可以加强与当地实验室及当地遗传专家的联系，又可在实验室出现仪器故障等突发事件时可暂时外包标本；2．就近送给已开展染色体项目的高新达安临检实验室，但必须将时间控制在标本抽取后24小时内送达实验室，以免影响试验效果。
第二阶段，标本量达到40例以上时：1．标本量达到40例时，派遣制片技术人员1名完成前期的试验处理，制好的玻片就近送往广州或上海两地的实验室进行阅片，也可根据实际情况在当地外聘阅片专家，完成阅片工作；2．标本量超过80例时，派遣熟练阅片技术人员1名，完成整个实验流程。
3．以后每增加40例标本可增加技术人员1名。
成立技术监督小组（1-3人），全面负责各实验室的技术及质量问题：①对各分点实验室提供技术协助；②观注行业的发展方向，寻找新项目，为本专业的发展提供更多理论支持；③培训：组织各实验室每月进行一次网络培训；④部分对试验效果影响较大的自配试剂统一由中心统一配置。
2．质量方面：①常用试剂的对比试验：某种试剂需更换厂家时，则由技术监督小组负责进行对比试验及质量评估；②盲点检查：每100份标本中抽取5份标本进行盲点检查，包括标本编号、病人基本信息、实验记录、核型分析记录及结果的核对等；②疑难片的会诊流程：a.拓展实验室提出申请，并附上详细的病历资料、标本玻片4张，提交给中心实验室；b.中心实验室组织专家进行会诊；c.中心实验室将会诊结果转交拓展实验室，报告单由拓展实验室发出。
二．实验室配置：1．实验室要求：①制片室：供清洗玻璃仪器、配制试剂及标本的接种、收细胞、制片、染片的场所，还必需配置耐酸碱水池、实验操作台等设施。
并能合理放置冰箱、电热干燥箱、离心机等仪器，以方便使用；②培养室：用作细胞的接种培养及部分试剂的配备，根据需要可仪器；③阅片室：为观察分析核型、整理资料场所。
细胞遗传室工作手册SOP
第一章设备与器械1目的规范实验室用房，确保实验室工作和业务用房的正常需要，以促进科室的发展，确保各项工作顺利进行。
2实验室用房规范与要求细胞遗传学实验室一般分为洗涤室、培养室、细胞学处理室、阅片室、暗室、档案室。
其要求一般与其他普通实验室的要求基本相同:1.便于所有器具的清洗。
2.\3.便于准备消毒及各种试剂的保藏。
4.便于使用各种方法检测待检标本，进行细胞遗传学方面的临床诊断。
但同时需要具有暗室并具有符合医疗档案存放的档案室。
洗涤室玻璃器皿的清洗、包装，培养物质的准备与消毒，供应物品的保藏等工作都需在洗涤室里进行，洗涤室的大小一般为4m×6m，洗涤室应设有下列设备：1.一个清洗玻璃器皿的水槽，便于清洗、晾干；2.电热干燥消毒箱，用于玻璃器皿的干热灭菌；3.高压蒸汽灭菌锅，用于不能耐受干热灭菌物品的处理；、4.烤箱两个便于烤干玻璃器皿或高压蒸汽灭菌物品；5.石英玻璃双重蒸馏器或超纯水装置，用于蒸馏水或超纯水的制备；6.真空泵一个，以备配制培养基过滤时用；7.物品准备台，以备包裹玻璃器皿等；8.储柜或储架，便于清洗干燥的器皿或其它物品存放；9.酸缸，一般最好是耐酸材料，用于盛装清洗液，清洗液多为含重铬酸钾的硫酸溶液。
培养室培养室包括操作间和缓冲室，操作室功能是进行无菌操作和细胞培养，如各种组织取材与接种材料的准备、培养物的生长状态观察等，因此应配有超净工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、小型低速离心机、冰箱、玻璃柜等。
缓冲室则是供工作人员进入培养室前换消毒衣服、鞋、帽等之用。
培养室一般3m×3m已够用，要求清洁、干燥、不通风、光线适宜。
操作间必须墙壁光滑并装有空调器，操作间与外间实验室之间最好有传递窗，以便传递临时需用的实验用品。
培养室空气消毒可采取紫外线消毒或空气净化。
'细胞学处理室细胞学处理室需要配备普通离心机、恒温水浴箱及恒温电烤箱（烤片用）等，主要用于染色体的收获与显带。
医院细胞遗传室常用实验溶液试剂的配置作业指导书
医院细胞遗传室常用实验溶液试剂的配置作业指导书1目的规范试剂的配制，为临床实验的可靠性提供质量保障。
2原则专人负责，一剂一皿，一配一录，双人核签。
定期校对，可溯源。
3性能特征规范试剂的配制，为临床提供准确稳定有效的试剂，减少人为因素对临床试验结果的影响。
4 方法化学实验试剂的配制方法5 试剂与耗材量筒、烧杯、玻棒、电子称、量杯、容量瓶、定容瓶、油纸、药勺、100ul 加样枪、100ul 枪头6 操作步骤6.1 生理盐水准确称取氯化钠（NaCl ）（生产商xxxx, 批号xxxx 有效期xxx）8.5 g,加二蒸水溶解定容至1L,待充分溶解混匀装瓶，贴标签（配置日期、药品名称、浓度、用途、有效期、配制双人），记录双人签名6.2 0.075M 氯化钾溶液氯化钾（KCI）5.587g ,加二蒸水至1000ml,室温保存，用于细胞低渗处理。
6.312X SSC 溶液氯化钠（NaCl）105.3g柠檬酸钠（Na3C6H3O7• 5H2O）52.94g加二蒸水至1000ml，室温保存，临用时用二蒸水稀释至所需浓度。
6.40.25%胰蛋白酶溶液（Trypsin ）胰蛋白酶粉末（1:250）250mg无Ca2+, Mg2+的PBS 加至100ml先用少许消毒的PBS 将胰蛋白酶粉末溶解，再补足PBS 至100ml，搅拌混匀，置4C冰箱4小时，用0.22um微孔滤膜除菌，分装成小瓶于-20 C保存，用于消化细胞。
6.5Giemsa 染色液Giemsa 储备液：配制：Giemsa粉末1g加少许甘油混合研碎宀共计加入甘油66ml，充分混匀-倒入烧杯中在55-60 C水浴中加热2 小时T冷却T加入甲醇66ml，充分混合—在室温中静置2-3 周，过滤贮存于棕色瓶中，可长期使用。
6%Giemsa 工作液：47ml 蒸馏水中加入Giemsa 储备液3ml，用于染色体标本的染色，一般染色时间为10-20分钟。
6.6 无钙镁离子溶液氯化钠（NaCl）8 g氯化钾（KCl ）0.2g柠檬酸三钠（Na3C6H5O7?2H2O）1g 磷酸二氢钠（NaH2PO4?H2O）0.05g 碳酸氢钠（NaHCO 3）1g 葡萄糖1g依次溶于二蒸水，最后加二蒸水至保存于4C冰箱备用。
遗传学实验室
遗传学实验室遗传学实验室是进行遗传学研究与实验的专门场所，旨在探索基因传递、变异与表达等相关机制。
本文将介绍遗传学实验室的设备与工具、实验流程与方法、实验室管理与安全等方面的内容。
一、实验室设备与工具1. 显微镜：遗传学实验中常用的工具之一，用于观察显微细胞结构和染色体。
2. PCR仪：聚合酶链式反应（PCR）是遗传学领域常用的实验方法，PCR仪是进行PCR实验的必备设备。
3. 离心机：用于离心沉淀、分离细胞和提取DNA等实验步骤。
4. 培养箱和培养皿：遗传学实验室中常用的细胞培养设备，用于培养细胞并进行实验操作。
5. 电泳仪：用于分离、检测DNA、RNA等分子的大小和电荷的设备。
6. 核酸提取试剂盒：用于从样本中提取DNA或RNA的试剂盒，是遗传学实验中不可或缺的工具。
二、实验流程与方法1. 样本采集：遗传学实验通常需要样本，包括人类和动植物组织、细胞、体液等。
样本的采集需要遵循严格的伦理规范和安全操作。
2. 样本处理：将采集到的样本进行处理，如细胞培养、分离细胞、提取DNA或RNA等。
3. 分子生物学实验：包括PCR扩增、酶切、DNA测序、基因克隆等实验。
这些实验可以揭示基因的结构、功能及其遗传变异等信息。
4. 细胞遗传学实验：通过显微镜观察染色体、细胞分裂等现象，探究染色体组成与结构、染色体数目异常与疾病的关系等。
5. 生物信息学分析：将实验中得到的数据进行处理与分析，借助生物信息学工具挖掘基因座、比对序列等。
三、实验室管理与安全1. 实验室安全：遗传学实验室工作存在一定的危险性，应根据实验室的具体情况建立相关安全操作规范（SOP），包括个人防护、样本处理和实验废物处置等。
2. 知识产权保护：遗传学研究涉及到的基因、DNA序列等信息具有重要价值，相关研究成果应符合知识产权的保护法律法规。
3. 实验室质控：定期检查实验室设备的状态和性能，确保实验的准确性和可重复性。
同时，建立实验室质量管理体系，进行相关认证和评估。
植物常规染色体制片-取材
实验一植物常规染色体制片Ｉ
-取材和预处理
（综合性实验）
遵义师范学院生命科学学院韦若勋
一、实验目的
1、掌握植物根尖染色体制片过程中预处理的方法；
2、掌握植物根尖染色体制片过程中取材的方法；
3、熟悉预处理药剂的配制。
二、实验原理
②促1、预处理原理植物根茎尖分生组织进染色中分裂细胞能达到3个效果。
体缩①③短妨降
三实验器具及试剂
三实验器具及试剂
2、实验试剂及配制
2实验试剂及配制
（1）0.002mol/L 8-羟基喹啉（分子量0002l/L8
145.17）
8-羟基喹啉0.29g，少许乙醇溶解，鲜蒸馏水定溶1000ml。
四、实验材料
1、蚕豆、绿豆、洋葱和大蒜的根尖
蚕豆：2n = 12
绿豆：2n = 22
洋葱、大蒜：2n = 16
洋葱大蒜216
25℃，浸种4-5h；发芽16-24h；
25℃浸种45h；发芽1624h；
五、实验方法与步骤
2
8mm
3
2mm
1
色较深
六、实验作业
实验报告。
染色体实验室配置
注：后附染色体配套设备表前言染色体是遗传物质的载体，近40-50年来，对染色体的研究发展迅速。
目前由染色体畸变引起的疾病发现的越来越多，应用染色体诊断疾病，探讨病因和发病机制，合理制定出治疗方案和合理用药，采取必要的预防措施及推算预后等都提供了科学的依据．因此对染色体的研究已成为临床医学中一个组成部分．染色体制备、分析日益广泛应用，如何正确识别人类染色体显得十分重要。
基于这种想法，编写这本材料，以供学习参考。
由于水平所限错误之处再所难免，敬请批评指正。
实验室的基本设备开展人类染色体研究的实验工作，应具有一定的条件、设备和器材才能顺利地开展工作。
一、实验室实验室的间数、大小应根据从事的研究的内容、工作人员和设备的多少，并根据各单位具体情况安排。
一般包括：1、准备室：为实验主要工作场所，除放置冰箱、烘烤箱、恒温箱、离心机、天平等仪器外，还备有箱厨和其它橱柜放置玻璃器皿、各种日常应用物品。
室中央设有操作台，以供实验操作用。
2、无菌室：为无菌操作室。
应设在实验室靠近最里面的位置，以利于防止空气流通引起污染。
在无菌室外要有缓冲室，室内应装空调、紫外线光源、清洁工作台等设备。
3、研究室：供电脑染色体分析用，并要有显微镜、整理研究资料等用。
二、大型器械1、电热恒温培养箱：最好用隔水式的，用于细胞培养。
2、电热恒温干燥箱：以中型较合适，因为干燥灭菌时的温度要达到160℃，故应购置能升温到300℃的较为安全适用。
3、高压蒸汽灭菌器：以电热恒温式较好。
4、普通冰箱：主要用于短期保存血清、培养液、生理盐水、消化液等各种溶液。
5、低温冰箱：作为培养基、血清等的长期保存，温度达到-40℃即可。
6、离心沉淀机：一般应购置0-4000转/分，最好12管，每管容量为10ml为水平式的。
若自制血清则购置0-4000转/分，4管，每管容量为250-300ml的水平式为好。
7、酸度计：又称为氢离子测定计或PH计，是测定各种溶液酸碱度的必须工具。
细胞生物的学实验7染色体制备技术
实验7 染色体制备技术〔实验目的〕1、学习染色体标本的制备技术2、掌握滴片法制备染色体标本的一般步骤〔实验原理〕每一物种的细胞一般都具有一定数目、形状和大小的染色体，在秋水仙素的作用下可使分裂细胞阻断在中期，此时染色体形态最典型，然后通过低渗、固定、染色等步骤，便可在显微镜下呈现出其形态。
〔试剂材料〕1、试剂（1）0.1%秋水仙素溶液〔生理盐水配置〕（2）1mol/L盐酸（3）1%柠檬酸钠溶液（4）0.067mol/L磷酸盐缓冲液〔pH6.8〕Na2HPO4﹒12H2(Na2HPO4﹒2H2O 5.92g)KH2PO4蒸馏水至1L（5）Giemsa原液〔pH6.8〕〔pH6.8〕Giemsa染粉1g，甘油 33ml, 甲醇 45ml 染粉在乳钵中滴加少许甘油研磨至无颗粒，再将全部甘油参加，放入60-65℃保温2小时后参加甲醇混匀。
棕色瓶中保存。
用时和磷酸缓冲液1：10混合〔6〕低渗液：0.4%KCl2、材料（1）洋葱根尖（2）女性口腔上皮（3）蟾蜍〔内容方法〕X染色体标本制片与观察1、取材：女性漱口后取口腔上皮细胞，涂在干净的载玻片上2、固定：95%乙醇固定10分钟，空气枯燥3、水解：1mol/L盐酸室温水解10分钟，然后用新鲜蒸馏水冲洗4次，晾干4、染色：Giemsa染色10分钟，蒸馏水冲后90%乙醇分色1分钟，酒精灯过火脱水。
也可用0.2%甲苯安蓝染色5-15分钟，冲洗后枯燥，观察须知事项：1、女性口腔、牙签和载波片要干净，防止杂质干扰。
2、口腔内第一次获取的上皮细胞要弃去，然后在一样部位再获取新鲜的上皮细胞。
3、上皮细胞涂片时尽量使细胞分散开，重叠的细胞影响观察。
4、人的X小体紧贴细胞核膜内侧，但是一般上皮细胞中只有30%-50%的细胞可以观察到X小体。
小鼠骨髓染色体制备1、小鼠按照4μg/g体重经腹腔注射秋水仙素，3-4小时后杀死动物，取后肢股骨和胫骨，纱布剥离所有肌肉，生理盐水洗净后剪去骨两端。
染色体实验室质量控制
• 3、凡是待测定的血液标本有血渗出的情况， 应通知相关人员予以重新采集标本，并在 《标本接收和报告单发放记录本》及《不 合格标本登记本》上记录存档； • 4、染色体标本需严格无菌操作，采用经高 温高压消毒的容器盛装，如标本送检不规 范，应通知相关人予以重新采集标本，并 在《标本接收和报告单发放记录本》及 《不合格标本登记本》上记录存档；
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操作程序： 1）取新购买的培养基，接种新鲜的外周血标本， 每个标本接种两瓶培养基，每瓶培养基中接种 ０.３－０.４ｍｌ。 2）将接种好的培养基放入３７℃，５％ＣＯ２ 培养箱中，培养７２ｈ。 3）培养结束前３小时，加秋水仙素处理。 4）收获细胞。 5）将收获的细胞沉淀配成细胞悬液进行滴片， 滴好的片放入烘箱中，８０℃烘烤３ｈ。
•
秋水仙素处理时要注意加入秋水仙素的 量和作用时间。
• 3、固定液质控程序
• 目的：新购买的甲醇和乙酸需要做预实验 以检测试剂的质量，避免因试剂的质量而 影响实验结果。 • 操作程序：在收获细胞的实验过程中使用 新的固定液，制片后分析固定液的效果。 • 1）按甲醇：乙酸=3:1比例配置固定液。 • 2）预固定：加入1.5ml固定液，固定5min。
染色体实验室质量控制
一、室内质控：主要是培养基，常用试剂的 室内质控。 二、室间质控：定期与开展染色体检查的实 验室合作，对同一血液标本进行实验对比， 对 实验中的不足之处进行改进。
一、室内质控
• 1、外周血培养基质控程序
• 目的：新购买的培养基需要做预实验以检 测培养基的质量，避免因试剂的质量而影 响实验结果。
• 5、经查对标本的病人姓名、年龄、性别、 住院号、床号、及检验号等不相符者，应 通知相关人员予以重新采集标本，并在 《标本接收和报告单发放记录本》及《不 合格标本登记本》上记录存档。
染色体核型分析
染⾊体核型分析姓名程开源系年级2010级临床医学⼋年制同组者孙琳、孙晶鑫、窦云德科⽬分⼦细胞⽣物学题⽬染⾊体核型分析学号201000232012【实验⽬的】1.了解⼩⽩⿏睾丸细胞染⾊体的形态及数⽬。
2.初步掌握⼩⽩⿏睾丸细胞染⾊体的玻⽚标本制作⽅法。
3.观察动物细胞染⾊体的数⽬和形态。
【实验原理】染⾊体的制备在原则上可以从所有发⽣有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。
最常⽤的途径是从⾻髓细胞、⾎淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染⾊体。
⼩型动物的染⾊体制⽚最好最有效的材料就是⾻髓组织。
⾻髓细胞中，有丝分裂指数相当⾼，因此可以直接得到中期细胞⽽不必象淋巴细胞或其它组织那样要经过体外培养；对⼤型动物通常采⽤对⾻骼、脊或胸⾻穿刺术吸取红⾻髓，⼩型动物多采⽤剥离术取股⾻以获得⾻髓细胞。
制作染⾊体标本的先决条件1. 细胞具有旺盛的分裂能⼒选择活跃的组织：胸腺，⾻髓，睾丸，⼩肠施加药物使细胞分裂：PHA2. 设法得到⼤量的中期细胞：秋⽔仙素(1) PHA：粗细胞分裂，使淋巴细胞返幼，变为淋巴母细胞(2) 秋⽔仙素：破坏微管装配，使纺锤体不能形成，使⼤量细胞停⽌在分裂中期。
(3) 低渗作⽤：⽔进⼊细胞内，细胞内容空间变⼤，染⾊体间的距离拉⼤，易于染⾊体展开(4) 空⽓⼲燥：使细胞和染⾊体展开(5) 固定：⽤甲醇：冰醋酸=3:1作⽤使蛋⽩质变性，对染⾊体内的组蛋⽩讲，变性后硬度增加，保持了染⾊体的“及时形态”，对细胞膜蛋⽩讲，变性使细胞膜硬度增强，形成屏障作⽤，防⽌了细胞内物质外溢和丢失。
对于⼩⿏精巢染⾊体标本的制作，⼀般包括以下⼏个要点: 1. ⽤⼀定剂量的秋⽔仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期, 使中期染⾊体停留在⾚道⾯处; 2. ⽤低渗法使将细胞膨胀, 以⾄于在滴⽚时细胞被胀破, 使细胞的染⾊体铺展到载玻⽚上; 3.空⽓⼲燥法可使使细胞的染⾊体在载⽚上展平, 经Giemsa染⾊后便可观察到染⾊体的显微图象。
胎儿染色体异常的细胞遗传学产前诊断技术标准解读
取材手术的质量控制
羊膜腔穿刺术 一次穿刺成功率99％以上 术后一周内的胎儿丢失率小于0.5％ 绒毛取材术 一次穿刺成功率98％以上 术后一周内的胎儿丢失率小于1.5％ 经皮脐血管穿刺术 一次穿刺成功率90％以上 术后一周内的胎儿丢失率小于2％
知情同意书的签署
不能达到上述标准的实验室应将病人 转送到其他产前诊断实验室。 对异常诊断结果应尽可能进行细胞遗 传学随访，以对产前诊断结果进行确 认
羊水细胞染色体分析(1)
培养瓶法： 计数：至少计数在 2个以上独立培养的培养 瓶中平均分布的 20 个细胞，记录任何观察 到的染色体数目或结构异常 分析：至少分析在2个以上独立培养的培养 瓶中的5个细胞，所分析的细胞的染色体分 辨率应达到320条带水平 核型分析：2个细胞，每个独立的培养瓶各 分析一个细胞
羊水细胞染色体分析(2)
ห้องสมุดไป่ตู้
原位法： 计数： 至少计数在 2 个以上独立培养的器皿中平均分布 的15个 细胞集落中的15个细胞，一个集落计数一个细胞 如果没有15个集落，则至少计数10个集落中的15 个细胞 记录任何观察到的染色体数目或结构异常 分析：至少分析在 2 个以上独立培养的培养器皿 中 的 5个 细胞，所分析的细胞的染色体分辨率应达到 320 条带水平 核型分析： 2 个细胞，如果发现有一个以上的细 胞克隆， 则每个克隆核型分析一个细胞
初中生物实验室标准仪器配置及初中生物实验器材清单
初中生物实验室标准仪器配置分类：实验室仪器 | 标签： |字号大中小订阅初中生物实验器材清单一．七年级上册：1.演示实验：（1）比较玉米幼苗在蒸馏水和土壤浸出液中的生长状况材料用具：两株生长状况基本相同的玉米幼苗、玻璃器皿、等量蒸馏水和土壤浸出液、标签纸、胶水（2）光合作用还产生氧气材料用具：大烧杯、清水、试管、漏斗、金鱼藻、卫生香、火柴（3）种子在萌发过程中发生的能量变化材料用具：保温瓶、温度计、煮熟的种子和萌发的种子（4）种子在萌发过程中放出了什么气体？材料用具：广口瓶、软木塞、漏斗、棉花、带开关的导管、试管、澄清的石灰水、小烧杯、萌发的植物种子（5）有机物在分解过程中消耗了什么气体？材料用具：广口瓶、软木塞、煮熟的种子和萌发的种子、蜡烛、火柴、燃烧匙2.学生实验：（1）调查校园、公园或农田的生物种类材料用具：调查表、笔、望远镜、放大镜、照相机（2）非生物因素对某种动物的影响材料用具：鼠妇、湿土、铁盘（或塑料盒、纸盒）纸板、玻璃板（3）练习使用显微镜材料用具：显微镜、载玻片、玻片标本、笔、纱布（4）制作并观察植物细胞临时装片材料用具：洋葱鳞片叶、新鲜的黄瓜（苦草或黑藻）、清水、碘液、镊子、刀片、滴管、纱布、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜（5）观察人的口腔上皮细胞材料用具：生理盐水、稀碘液、消毒牙签、滴管、纱布、镊子、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜（6）观察人体的基本组织材料用具：人体四种基本组织的永久切片、显微镜（7）观察草履虫材料用具：草履虫培养液、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、放大镜、少许棉花纤维（8）观察种子的结构材料用具：浸软的菜豆（或大豆、蚕豆）种子、浸软的玉米（或小麦）种子、刀片、放大镜、滴管、稀碘酒（9）种子萌发的环境条件材料用具：菜豆（或大豆、蚕豆）种子40粒、四个能够盖紧的罐头瓶、一个小勺、八张餐巾纸（或卫生纸）、四张标签纸和胶水（10）测定种子的发芽率材料用具：直径10cm的培养皿、滤纸、纱布、清水、菜豆（或大豆、蚕豆）种子100粒（11）观察根毛和根尖的结构材料用具：已经长出根毛的幼苗、根尖的永久切片、放大镜、显微镜、镊子（12）观察叶片的结构材料用具：新鲜叶片（菠菜或蚕豆）、显微镜、双面刀片、镊子、载玻片、盖玻片、叶片的永久切片、清水、培养皿、滴管、吸水纸、碘液、纱布、毛笔、小木板（13）绿叶在光下制造有机物材料用具：盆栽天竺葵、黑纸片、曲别针、碘液、小烧杯、大烧杯、培养皿、酒精灯、三脚架、石棉网、镊子、火柴、清水、湿手巾、酒精（14）二氧化碳是光合作用必需的原料吗？材料用具：二个能够盖紧的透明玻璃瓶、培养皿、小烧杯、二株长势大致相同的植物、清水、25%氢氧化钠溶液二、七年级下册1、演示实验（1）胸廓变化与呼吸的关系材料用具：玻璃罩、玻璃管、木塞、气球、橡皮筋、橡皮膜2、学生实验（1）测定某种食物中的能量材料用具：花生、火柴、解剖针、锥形瓶、温度计、试管夹、自制装置、量筒、水（2）馒头在口腔中的变化材料用具：试管、温度计、玻璃棒、清水、小刀、消毒棉絮、碘液、新鲜的馒头（3）为家长设计一份午餐食谱材料用具：纸、笔、蔬菜、肉类、调味品、厨房用品（4）测量胸围差材料用具：钢卷尺、布卷尺、墨笔（5）用显微镜观察人血的永久涂片材料用具：显微镜、人血的永久涂片（6）观察小鱼尾鳍内血液的流动材料用具：显微镜、培养皿、滴管、棉絮、载玻片、清水、尾鳍色素少的活的小鱼（7）膝跳反射材料用具：椅子、小木锤子（8）测定反应速度材料用具：直尺、笔、纸（9）酸雨对生物的影响材料用具：纸杯2个、绿豆40粒、另外用水、醋分别配制PH值为4、12的模拟酸雨材料（10）拟定保护当地生态环境的计划材料用具：笔记本、笔三、八年级上册1、演示实验（1）发酵现象材料用具：白糖、酵母、矿泉水瓶1个、温开水、玻璃杯、小气球2、学生实验（1）观察蚯蚓材料用具：活蚯蚓、玻璃板、粗纸、棉球、放大镜（2）鸟适于飞行的形态结构特点材料用具：活的鸟（或鸟标本）、放大镜、鸟的骨骼标本（3）小鼠走迷宫获取食物的学习行为材料用具：自制迷宫、活的小白鼠、透明玻璃板、炒熟的花生（4）蚂蚁的通讯材料用具：塑料容器、清水、小石头、小木条、饥饿的蚂蚁、糖（5）检测不同环境中的细菌和真菌材料用具：装有牛肉汁培养基的培养皿、无茵棉棒、透明胶带、标签纸、放大镜、硬币（6）观察酵母菌和霉菌材料用具：酵母菌培养液、培养皿中培养好的青霉、吸管、镊子、显微镜、解剖针、载玻片、盖玻片、放大镜、稀释的碘液、吸水纸（7）制作孢子印材料用具：新鲜蘑菇、解剖刀、白纸、培养皿、放大镜（8）制作米酒材料用具：酒曲一块、糯米1500克、凉开水一杯、清洁的容器、蒸锅、清洁的筷子、清洁的蒸布一块四、八年级下册1、演示实验2、学生实验（1）观察鸟卵的结构材料用具：新鲜鸡蛋、培养皿、镊子、牙签（2）花生果实大小的变异材料用具：大小花生各30粒、一把直尺、两个直角三角板（3）精子与卵细胞随机结合材料用具：两个信封、四粒围棋子（其中三粒白色，一粒黑色）（4）模拟保护色形成的过程材料用具：大彩纸一张、四种不同小彩纸（其中一种与大彩纸颜色相同或相近）（5）酒精或烟草浸出液对水蚤心率的影响材料用具：显微镜、不同浓度酒精溶液、载玻片、吸管、量筒、计时器、水蚤。
初中生物实验室标准仪器配置
25
骨剪
130mm，不锈钢
把
1
接种环
把
25
徒手切片器
个
8
根纵剖模型
件
1
导管、筛管结构模型
件
1
单子叶植物茎模型
件
1
双子叶草本植物茎模型
件
1
叶构造模型
件
1
桃花模型
件
1
蛙胚胎发育模型
件
1
头、颈、躯干模型
850mm
件
1
人体骨骼模型
850mm
件
1
眼球解剖模型
6倍自然大
件
13
心脏解剖模型
3倍自然大
件
1
心脏解剖模型
片
60
疏松结缔组织装片
片
60
人血涂片
片
60
骨骼肌纵横切
片
60
平滑肌分离装片
片
60
心肌切片
片
60
运动神经元装片
片
60
动静脉血管横切
片
60
小肠切片
片
60
字母“e”装片
片
60
正常人染色体装片
片
60
生物体的结构层次
教学挂图
套
1
生物与环境
教学挂图
套
1
生物圈中的绿色植物
教学挂图
套
1
生物圈中的人
教学挂图
套
1
动物的运动和行为
个
8
离心沉淀器
手摇式
台
1
酒精喷灯
坐式
个
3
电炉
密封式
个
4
染色体标本制备
• 4、制片： （1）离心：从温箱中取出培养瓶，用毛细吸管将培 养液转入5ml的刻度离心管内。1200rpm，离心 8min。 （2）低渗：弃去上清液。加入37℃预热（中午开 水浴箱）的0.075mol/L KCl低渗液，加至5ml，用 毛细吸管轻轻吹打均匀，放在37℃恒温水浴中 20min。 （3）预固定：在离心管中加入现配的（实验前配制） 甲醇-冰醋酸(3:1)固定液约0.5ml，用毛细吸管吹 打轻轻混匀, 室温固定20min。 （4）再次离心：1200rpm离心8min。
1实验前配制?giemsa液实验仪器及用具?恒温培养箱离心机恒温水浴箱冰箱?注射器以及消毒酒精?培养瓶120个吸管120支离心管5ml120支?冰载玻片
外周血染色体制备技术
材料与方法
• • • • • • • 血样：每班6个同学采集外周血 试剂： 1640培养液含植物血凝素(PHA)， 20µg/ml秋水仙素液， 0.075 mol/L KCl溶液 固定液：甲醇-冰醋酸(3:1) （实验前配制） Giemsa液
（9）扣染：用10%吉姆萨染液扣染30min， 染色结束后用清水将浮色冲去，干燥后即 可进行镜检。 （10）照相：在显微镜下寻找分散较好的分 裂相(核型)，再置于显微照相仪下拍摄照片， 并保存。 （11）核型分析：应用核型分析软件，进行 染色体核型分析。
注意事项
1、 秋水仙素处理的时间与浓度要控制得当：秋水仙素处理 时间过长，分裂细胞多，染色体短小；反之，则少而细长。 都不宜观察形态及计数。 2、低渗处理的时间与浓度要适当：低渗使红细胞膜破裂， 淋巴细胞膨胀，其处理浓度及时间要 适当。且低渗后混 匀细胞一定要轻，否则引起膜破裂、染色体散失。 3、在滴片时一定要迅速、准确，高度足够高，玻片保持足 够冷。 4、离心前配平，离心速度过高，细胞团不易打散；反之， 细胞易丢失。 5、固定液应在使用前临时配制。 6、载玻片一定要洁净，否则染色体分散不好。
初中生物实验室标准仪器配置
初中学校标准化建设——生物
打孔器
四件
套
4
仪器车
辆
2
生物显微镜
1000倍
台
5
生物显微镜
500倍
台
50
双目立体显微镜
40倍
台
13
放大镜
手持式，有效通光孔径不小于30mm，5倍
个
50
望远镜
双筒，7×35
个
8
离心沉淀器
手摇式
台
1
酒精喷灯
编号
名称
规格 型号 功能
单位
数量
2001
钢制黑板
900mm×600mm，双面
块
1
2014
抽气筒
个
1
2015
打气筒
自行车用
个
1
2016
抽气盘
直径不小于180mm，附罩
套
1
2020
仪器车
耐酸碱,不锈钢
辆
2
2023
充磁器
台
1
2051
放大镜
有效通光孔径不小于40mm，2×或3×
个
25
2103
注射器
100ml
块
25
温度计
红液，0℃～100℃
支
60
温度计
水银，0℃～200℃
支
5
干湿球温度计
-36℃～+46℃
付
25
血压计
汞柱式
个
2
肺活量计
台
1
解剖器
不锈钢材料，7件(大、小剪刀，大、小镊子，解剖刀，解剖针，弯头镊)
染色体的化学组成
染色体的化学组成
《染色体的化学组成啊》
嘿，大家知道吗，染色体可是个神奇的东西呢！咱先不说那些复杂的科学术语哈，就说我有一次去参观生物实验室的事儿。
那天，我走进实验室，就像刘姥姥进了大观园似的，东瞅瞅西看看。
然后就看到了那些被放在玻片上的染色体标本。
哇塞，我就凑近了仔细瞧，那模样就像是一串串小小的面条。
我就在想啊，这染色体到底是啥做的呀。
后来听讲解员说，染色体主要是由 DNA 和蛋白质组成的。
哎呀呀，这可真有意思。
DNA 就像是染色体的核心骨架，就好像是盖房子的钢梁一样重要呢。
而蛋白质呢，就像是给这个骨架穿上了一件件漂亮的衣服，起到保护和支撑的作用。
我当时就琢磨，这可真是奇妙的组合呀。
你说这大自然多神奇，就这么几种物质组合起来，就能决定我们的各种特征，像眼睛啥颜色啦，头发啥样啦。
真的是太不可思议了。
所以啊，这染色体的化学组成虽然听起来很专业很复杂，但其实仔细想想，也挺好玩的呢。
就像我们生活中的很多东西一样，看似深奥，其实只要我们去认真观察和了解，就能发现其中的趣味和奥秘呀！
这就是我对染色体化学组成的一点小感受啦，嘿嘿。
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注：后附染色体配套设备表
前言
染色体是遗传物质的载体，近40-50年来，对染色体的研究发展迅速。
目前由染色体畸变引起的疾病发现的越来越多，应用染色体诊断疾病，探讨病因和发病机制，合理制定出治疗方案和合理用药，采取必要的预防措施及推算预后等都提供了科学的依据．因此对染色体的研究已成为临床医学中一个组成部分．染色体制备、分析日益广泛应用，如何正确识别人类染色体显得十分重要。
基于这种想法，编写这本材料，以供学习参考。
由于水平所限错误之处再所难免，敬请批评指正。
实验室的基本设备
开展人类染色体研究的实验工作，应具有一定的条件、设备和器材才能顺利地开展工作。
一、实验室
实验室的间数、大小应根据从事的研究的内容、工作人员和设备的多少，并根据各单位具体情况安排。
一般包括：
1、准备室：为实验主要工作场所，除放置冰箱、烘烤箱、恒温箱、离心机、天平等仪器外，还备有箱厨和其它橱柜放置玻璃器皿、各种日常应用物品。
室中央设有操作台，以供实验操作用。
2、无菌室：为无菌操作室。
应设在实验室靠近最里面的位置，以利于防止空气流通引起污染。
在无菌室外要有缓冲室，室内应装空调、紫外线光源、清洁工作台等设备。
3、研究室：供电脑染色体分析用，并要有显微镜、整理研究资料等用。
二、大型器械
1、电热恒温培养箱：最好用隔水式的，用于细胞培养。
2、电热恒温干燥箱：以中型较合适，因为干燥灭菌时的温度要达到160℃，故应购置能升温到300℃的较为安全适用。
3、高压蒸汽灭菌器：以电热恒温式较好。
4、普通冰箱：主要用于短期保存血清、培养液、生理盐水、消化液等各种溶液。
5、低温冰箱：作为培养基、血清等的长期保存，温度达到-40℃即可。
6、离心沉淀机：一般应购置0-4000转/分，最好12管，每管容量为10ml为水平式的。
若自制血清则购置0-4000转/分，4管，每管容量为250-300ml的水平式为好。
7、酸度计：又称为氢离子测定计或PH计，是测定各种溶液酸碱度的必须工具。
8、天平：架盘天平两台，分析天平（万分之一）一台，应有固定的台座，以免震动，影响精确度。
9、显微镜：是从事染色体研究工作必须具备的工具，每一名研究人员需配一台。
目镜应配5×、10X、15×，物镜应配4×、10×、40×、100×。
镜台上要配刻度移动尺。
10、荧光显微镜：这是开展Q、R显带及Y小体检查时用的。
11、染色体核型分析仪一套：应配有显微镜、CCD、打印机及相关软件。
12、蒸馏器：组织细胞的培养对水的质量要求极高，一般要用三蒸水，其中以石英蒸馏器为最好。
13、真空泵：用于液体除菌过滤的负压装置，一般购置一台30升旋片式真空泵即可。
14、玻璃除菌装置：大部分细胞培养液不能高压灭菌，必须用玻璃除菌器。
一般5、6号（G5、G6）便能保证除菌。
可买3-4套备用。
15、水浴箱：电热恒温双孔水浴箱，用于水浴加温等。
16、或超级恒温水浴箱，用于调控溶液浓度作染色体标本和各式显带处理用。
三、小型器械
常用的如下：
1、刀：普通解剖刀几把。
2、剪：应配有各种直、弯的、有齿、无齿的若干把。
3、镊子：钟表镊子、敷料镊子几把
4、试管架若干：用于安插试管、离心管等。
5、橡皮塞：应选用质量比较好的硅橡皮、纯树胶橡皮制的普通皮塞和反口橡皮塞。
6、清洗桶：制备和储藏洗涤液（可用陶瓷），新洁尔灭、来苏等可用塑料桶。
7、酒精灯：用于瓶口灭菌、制片等。
8、钢精锅：用于煮沸玻璃器皿等。
9、钢丝网筐：用于灭菌时盛装各种用具。
10、钢丝钳、试电笔等修理用具。
四、玻璃器皿
玻璃器皿是直接或间接与培养细胞相接触的工具，故采用中性硬度的硼酸盐的玻璃制品比较好。
1、培养瓶：根据培养物的不同可选用不同的容量的培养瓶，一般培养外周血、骨髓、胸腹水等用的培养瓶用链霉素的空瓶代替即可。
培养羊水、绒毛、皮肤等用25ml 的八角方瓶。
2、试管：用于细胞培养等。
3、离心管：10ml，用于沉淀细胞用等。
4、存水瓶：5000-10000ml玻璃瓶，用于储存蒸馏水及各种溶液。
5、试剂瓶：30-500ml无色或棕色瓶，用于储存各种试剂。
6、染色缸：5片装立式，用于玻片标本的染色及玻片标本的各种特殊处理。
7、量筒：10-1000ml用于量取各种溶液。
8、盐水瓶：容量250-500ml用于盛装有关溶液和培养基进行高压灭菌等。
9、乳钵：容量20-500ml用于研磨各种染料。
10、吸管：1-20ml用于吸取各种溶液。
11、烧杯：5-5000ml用于盛装加温各种溶液等。
12、载玻片：用于制作染色体标本。
13、盖玻片：用于观察染色体标本等。