氨中毒在家兔肝性脑病发病机制中的作用观察[1]

氨中毒在家兔肝性脑病发病机制中的作用观察

【摘要】目的：①复制家兔急性肝功能不全模型，用十二指肠灌注复方氯化铵法，观察氨中毒对家兔脑功能影响；②用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病，探讨其治疗机制。方法：全班分为五大组，其中第一组为模型组，第二组为治疗组，第三组为假手术组，第四组为症状明显抢救组，第五组为预防组。结果：复方氯化铵可使家兔大脑功能受影响,而肝可解氨中毒，复方谷氨酸钠也可缓解其作用。结论：肝具有解毒作用，肝功能不全在肝性脑病的发生中占极大地作用。

【关键词】氨中毒肝性脑病复方谷氨酸钠

1实验材料

1.1对象：家兔(

2.8kg)；

1.2实验试剂：氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，复方谷氨酸钠溶液；

1.3实验仪器：10ml注射器、50ml注射器及针头，手术剪，镊子、止血钳、兔手术台、棉线若干、婴儿秤、缝针、导管；

2实验方法

2.1实验分组本组实验为假手术组

2.2麻醉家兔称重，按5ml/kg剂量由耳缘静脉注射1

3.5ml氨基甲酸乙酯。待家兔麻醉后背位固定于兔手术台上。

2.3急性肝功能不全动物模型复制从胸骨剑突下沿腹正中线行长8cm的切口，打开腹腔；暴露肝脏，向下压肝脏，剪断肝与横膈之间的镰状韧带，使肝叶游离，辨明肝脏各叶，用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶根部一周，不结扎肝脏。

找出十二指肠，找其上壁血管较少的一处做一环形缝合，在环形中间剪一个小口，沿小肠方向插入导管并向下推进4~5cm，切口荷包缝合固定导管，用止血钳关闭腹腔切口。

2.4试剂注射前两次分别向十二指肠内注入10ml的复方氯化铵溶液，之后的注射量都为5ml每次注射间隔5min，仔细观察并记录。

2.5实验观察

2.5.1记录家兔的呼吸频率：实验前、实验中、治疗中、死亡前。

2.5.2记录家兔抽搐及痉挛发生所需时间。

2.5.3记录所用复方氯化铵溶液的总量。

3实验结果

3.1实验结果数据记录

实验类型组数

手术前呼

吸频率第一次给药

呼吸频率

第二次给药

呼吸频率

第三次给药

呼吸频率

抽搐痉挛发

生时间

用药

总量

药物体

重比

死亡时

间

复发谷氨

酸钠用量

模型组

第一组未测未测未测未测3min 40ml 11.9 32分钟/

第二组40 42 72 66

40min后仍未

发生

40ml 17.31 未死亡/

治疗组

第三组46 44 49 50 33min36s 40ml 11.4 / 95ml

第四组37 37 42 48 15min 30ml 10.34 / 2ml

假手术组第五组46 50 52 54

40min后仍未

发生

50ml 18.52 / /

抢救组第六组32 43 56 60 25min 35ml 15.21 / 50ml

预防组

第七组未测116 110 130 20min 30ml 未测/ 75ml

第八组48 44 46 52 9min 20ml 7.67 / 32ml 3.2分组说明:（模型组）不给复方谷氨酸钠溶液，给生理盐水，观察出现明显肝性脑病症状。（治疗组）仔

细观察，出现抽动，立即给复方谷氨酸钠溶液，实施抢救。（假手术组）手术全过程都做，只是不结扎肝脏，注入复方氯化铵溶液，观察是否出现肝性脑病症状。（症状明显抢救组）多灌几次，等症状明显时给药抢救。（预防组）耳缘静脉灌注复方谷氨酸钠溶液（30mg/kg），造模给复方谷氨酸钠溶液同时进行，直至症状缓解，并继续观察。

4小组讨论

4.1假手术的目的：假手术组与模型组的不同点是其肝叶健全，即肝功能健全。主要用于对比证明肝对氨有解毒作用，由实验结果的第一组可见（其中第二组的数据不准确可能由于肝的结扎没有到位），肝功能不全的家兔对氨的解毒作用明显低于肝功能健全的家兔，说明肝有解氨中毒的作用。

4.2复方氯化铵溶液对肝性脑病的作用机理，肝大部分结扎在实验中的作用：

4.2.1据氨中毒学说，正常情况下，血氨的来源于清除保持动态平衡，而氨在肝中合成尿素是维持此平衡的关键。在结扎大部分肝的基础上灌注氯化铵导致血氨增高，增高的血氨可通过血脑屏障进入脑组织，通过干扰脑组织的能量代谢，使脑内神经递质发生改变，引起脑的功能障碍，出现震颤、抽搐、昏迷等类似肝性脑病症状。

4.2.2肝大部分结扎术在实验性肝性脑病中的作用：采用家兔大部分肝结扎，是为了复制急性肝功能不全的动物模型，造成肝解毒功能急剧降低，在此基础上经十二指肠灌入复方氯化铵溶液，导致肠道中氨生成增多并吸收入血。

4.3家兔呼吸频率和肌紧张有何改变，为什么？

4.3.1家兔呼吸频率的改变：由实验数据可以看出，给药后家兔的呼吸频率是加快的，（由于个体差异的存在，第七组的呼吸频率一直保持在高水平）其中第三组的呼吸频率的变化相对第四组小并综合预防组的数据，可以猜测家兔呼吸频率的增加是由于氨中毒引起的。

4.3.2随着实验的进行家兔的肌紧张加剧，以至于出现抽搐甚至角弓反张等表现。

4.3.3说明：血氨浓度升高，干扰脑组织的能量代谢，主要是干扰葡萄糖的生物氮化过程，而脑组织随时都要依赖血液中的葡萄糖提供能量。氨与脑内的α-酮戊二酸结合，生成谷氨酸，影响糖代谢，使ATP产生不足，产生谷氨酰胺为抑制神经的递质，并使脑内兴奋性神经递质减少，并且氨对神经细胞膜也有抑制作用是神经细胞兴奋性异常，并干扰神经传导活动。其中乙酰胆碱有扩张血管减慢心率的作用，从而可见家兔呼吸频率加快的原因。而其中肌紧张加剧可能由于脑组织中氨大量增加使大量谷氨酸转化成谷氨酰胺使氨中毒早期生成γ-氨基丁酸的底物-谷氨酸减少，引起脑内抑制性递质γ-氨基丁酸减少有关。

4.4复方谷氨酸钠溶液的影响和作用机理：

4.4.1注射复方谷氨酸钠溶液后可以缓解家兔氨中毒的症状，且治疗组的效果最好，作为预防则其效果不大。

4.4.2作用机理：谷氨酸可与血中过多的氨结合成为无毒的谷酰胺，由尿排出，进而降低血氨。谷氨酸还可参与脑细胞的代谢，改善中枢神经系统的功能。

5班组结论

5.1肝功能健全可使氨中毒的作用时间延长，即肝有对氨的解毒作用。

5.2复方谷氨酸钠溶液有缓解氨中毒的作用。

6注意事项

6.1肝脏手术时，动作宜轻柔，以免肝脏破裂出血。

6.2剪断镰状韧带时，注意不要损伤肝脏与膈肌。

6.3十二指肠插管方向要向空肠方向，并防止复方氯化铵溶液溶液溢出漏入腹腔。

7参考文献

7.1陆源，林国华，杨午鸣主编机能学实验教程第二版科学出版社2010.6 P177~179

7.2 生理学张志雄主编上海科技出版社2006.8 P23~28