流式细胞术分析和分拣植物染色体
采用流式细胞仪鉴定3种秋海棠愈伤组织的遗传变异
采用流式细胞仪鉴定3种秋海棠愈伤组织的遗传变异[摘要]采用流式细胞仪，对3种离体培养多年的秋海棠属植物的dna含量进行了测定。
结果表明：掌叶秋海棠的dna含量发生了非整倍性变化，离体培养材料是温室保存材料的1.5倍，其它两种秋海棠的dna含量无明显变化。
[关键词]秋海棠；愈伤组织；变异；dna含量离体保存是种质资源保存的一条重要途径，具有节省人力、物力、财力以及避免自然灾害和病虫害等优点。
但是在离体保存过程中常有遗传变异的发生，因此需要对离体保存材料进行鉴定。
目前的鉴定方法包括形态学标记、细胞学标记、分子标记等。
秋海棠属植物的染色体很小，计数十分困难。
而且某些种类的细胞质中含有许多小颗粒，与因缢缩而变得极小的染色体难以区分，观察难度较大。
本研究用流式细胞仪对3种培养多年的秋海棠进行了dna含量分析，以期为进一步研究该属植物离体培养的遗传变异规律提供基础。
1.材料与方法1.1植物材料供试材料为温室中保存和以愈伤组织形式保存10年的的花叶秋海棠（β.cathayana）、掌叶秋海棠（β.hemsleyana）和假厚叶秋海棠（β.pseudodryadis）。
培养基为1／2ms培养基，不加激素，每2个月继代一次。
实验前随机选取3种秋海棠属植物的愈伤组织进行培养，直至幼嫩叶片长出。
1.2方法选取叶片约1cm2，加入0.5ml的otto i buffer和2μl／ml 的β巯基乙醇，用手术刀将其切碎，室温孵育30min后用200目尼龙网过滤得到悬浮液。
采用同样的方法获得水稻悬浮液。
往悬浮液中加入1ml的otto iibuffer（50μg·l-1的碘化丙啶和50μg·l-1的rnase），200目尼龙网过滤后置于常温黑暗条件下染色1h。
1.3分析方法流式细胞仪系统为facsaria（美国bd公司）。
以水稻为内标，每个种测定5个样品，每个样品至少收集20，000个细胞，变异系数控制在8％以内。
211004201_利用流式细胞术鉴定68份三角梅基因组大小与染色体倍性
接收日期：2022-11-18接受日期：2022-12-14基金项目：厦门市科技计划项目(3502Z20214ZD4001、3502Z20199008) *通信作者。
E-mail:****************利用流式细胞术鉴定68份三角梅基因组大小与染色体倍性陈宜木，周 群，钟颖颖，张万旗*，李可威，林悦其(厦门市园林植物园，福建 厦门 361000)摘 要：以国内外收集的54份三角梅(Bougainvillea )资源和14份实生种质为材料，选用番茄(Solanum lycopersicum )为内参，采用流式细胞术估测三角梅基因组大小，并以二倍体品种为对照，计算三角梅染色体倍性。
结果表明：(1) 所选用的内参与待检测样品的最高值能完全分开，没有重叠峰，峰型比较清晰集中，可以对三角梅基因组大小进行有效估测。
(2) 供试材料中有34份二倍体，基因组大小为2.48～2.86 Gb ；有28份三倍体，基因组大小为3.65～4.22 Gb ；有5份四倍体，基因组大小为4.98～5.12 Gb ；另外，‘大金边杨梅’为2X 、4X 、6X 混倍体。
利用流式细胞法鉴定三角梅染色体倍性可缩短鉴定时间，提高鉴定效率。
关键词：三角梅；流式细胞术；基因组大小；染色体倍性；育种Doi: 10.3969/j.issn.1009-7791.2022.06.001中图分类号：S685 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2022)06-0417-07Genome Size Estimation and Ploidy Identification of 68 ServingsBougainvillea by Flow CytometryCHEN Yi-mu, ZHOU Qun, ZHONG Ying-ying, ZHANG Wan-qi *, LI Ke-wei, LIN Yue-qi(Xiamen Botanical Garden, Xiamen 361000, Fujian China)Abstract: Using diploid variety tomato as the internal reference, the genome sizes of 54 collected germplasm at home and abroad and 14 seedlings of Bougainvillea resources were estimated by flow cytometry, and the chromosome ploidy was calculated with diploid as the control. The results showed that: (1) the peaks of the selected samples assayed were completely separated from that of the control without overlapping, and the peak shape was clear and concentrated, suggesting that the estimation of Bougainvillea genome size and ploidy was effective; (2) among the tested materials, 34 germplasm were diploids with genome sizes of 2.48–2.86 Gb, 28 germplasm were triploids with genome sizes of 3.65–4.22 Gb, 5 germplasm were tetraploid with genome sizes of 4.98–5.12 Gb. In addition, a Bougainvillea germplasm resource ‘Big Phnom Penh bayberry’ was identified as a mixoploid of 2X, 4X and 6X. The usage of flow cytometry assay could shorten the time while improve the efficiency towards the identification of Bougainvillea chromosome ploidy. Key words: Bougainvillea ; flow cytometry; genome size; ploidy; breeding三角梅是紫茉莉科(Nyctaginaceae)叶子花属(Bougainvillea )中具有园艺价值的一类藤状灌木[1]，也叫叶子花、三角花、南美紫茉莉、九重葛、宝巾花、簕杜鹃、贺春红等，至今已有250多年的栽培历史[2]。
流式细胞术的原理和应用
流式细胞术的原理和应用流式细胞术（Flow cytometry）是一种广泛应用于生物医学研究和临床诊断的生物技术，它通过将单个细胞悬浮在溶液中，利用激光器照射并检测细胞表面或内部的荧光标记物，实现对细胞的定量和质量分析。
流式细胞术具有高通量、高准确性和高灵敏度的特点，被广泛应用于细胞表型分析、细胞分选、DNA含量测定、蛋白质定量、染色体分析、细胞凋亡测定等领域。
本文将对流式细胞术的原理和应用进行详细介绍。
一、流式细胞术的原理1. 细胞悬浮流式细胞术的第一步是将待检测的细胞悬浮在生理盐水或缓冲液中，以确保细胞处在单个状态，方便后续的激光检测。
2. 细胞标记细胞通常会被标记上与特定蛋白或分子结合的荧光标记物，通过特异性和高亲和力结合到细胞表面或内部的特定结构上。
这些标记物可以是荧光染料、荧光免疫球蛋白（Fluorescent-labeled antibodies）等。
3. 激光照射悬浮细胞通过流式细胞仪中的微流道单个流经，在通过激光照射后，激光与标记物产生光散射或荧光发射。
4. 光散射和荧光检测流式细胞仪通过多个检测器检测光散射和荧光发射强度，这些数据被传输到计算机中进行分析和图形呈现。
5. 数据分析通过计算机软件对检测到的数据进行图形处理和数据分析，包括各种细胞表型的区分、细胞计数、蛋白质表达水平、细胞周期分析等。
二、流式细胞术的应用1. 细胞表型分析流式细胞术可以用来分析细胞的表面标记物和内部标记物，比如CD标记、HLA标记、细胞凋亡标记等，帮助研究者深入了解细胞的功能和特性。
2. 细胞分选基于细胞表面标记物的差异，流式细胞术结合细胞分选仪可以实现对不同亚群细胞的快速纯化和分离，广泛应用于免疫学、干细胞研究等领域。
3. DNA含量测定通过DNA特异性荧光染料，流式细胞术可以对细胞的DNA含量进行测定，帮助研究细胞周期的变化、细胞增殖速率的测定等。
4. 蛋白质定量利用荧光标记的免疫球蛋白，流式细胞术可以对细胞中蛋白质的表达水平进行定量分析，比如研究细胞信号通路的活性等。
流式细胞术测定植物基因组大小 一、流式细胞术的基本知识 二、植物C值分析原理
Sheath fluid
Fluorescence signals Focused laser beam
液流中心由单列 匀速运动颗粒组 成的液柱
分选系统
488 nm laser FALS Sensor
Fluorescence detector
Charged Plates
+
Single cells sorted into test tubes
流式细胞仪(Flow Cytometer)
集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、电子计算机技术、细 胞荧光化学技术、流体力学为一体的一种新型高科技仪器。
流式细胞术特点
单细胞悬液 或生物颗粒 分析速度高 多参数 精度高 高灵敏度 无害分析 和分选
当代最先进的细 胞定量分析技术
国际两大流式细胞仪生产商：
流式细胞仪计算测量DNA 含量实际上是细胞周期的测 量，由于细胞核G1期的DNA含量反应一个细胞的倍性，因 此常用DNA含量来估计细胞倍性，包括DNA的绝对含量或相 对含量。
测量DNA的绝对含量时，须设一个已知DNA含量的标准样 品作对照，来换算出DNA的绝对含量。
样品2C DNA含量=[(样品G0/G1峰均值)/ (标准G0/G1峰均值)] ×标准2C DNA含量(pg DNA)
台式机和大型机
EPICS XL 流式 细胞分简便
使用寿命长
配备1-2根激光 细胞分选速度慢， 主要用于细胞分析
临床型(BD,FACSCalibur台式机)
特点： 分辨率高 选配多种波长和 类型激光器 可把感兴趣细胞 分选到特定培养孔 或板上（4路和24 孔板） 大型机(BD,FACSAria科研型) 适用于高速分选 和多色分析
基于流式细胞术对27种石斛的倍性鉴定和基因组大小分析
基于流式细胞术对27种石斛的倍性鉴定和基因组大小分析作者：熊文艳普冉刘云礼陈军文张敬丽来源：《热带作物学报》2022年第11期摘要：石斛屬（Dendrobium）是兰科（Orchidaceae）一个大属，我国植物志记载有76种，主要分布于我国海南省、西南和两广地区，石斛属植物种类繁多，花朵鲜艳，颜色丰富，花期长，具有极高观赏价值。
目前，石斛属植物野外资源濒临灭绝，面临自交异交不亲和、观赏种数量少、缺乏优良育种亲本的困境，为保护现有良种、培育新物种及为建立基因分子库奠定基础，以石斛属植物幼嫩叶片为材料，采用MGb解离液制备细胞核悬浮液，利用玉米（Zea mays，‘B73’）和番茄（Lycopersicon esculentum）作为内标，建立了基于流式细胞术测定石斛倍性和基因组大小的方法，用流式细胞仪对兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）27种石斛属植物的倍性和基因组大小进行测定。
研究表明：以玉米为内标区分度较好，且没有重叠峰，峰型清晰集中，对27种石斛属植物的倍性和基因组大小能准确估测；27种石斛中二倍体19种，三倍体5种，四倍体3种；27种石斛分属于8组，分别是禾叶组1种，顶叶组2种，石斛组16种，瘦轴组1种，叉唇组1种，距囊组1种，草叶组4种，基肿组1种，各个组间基因组大小不同，各组内基因组大小也存在差异；27种石斛预估基因组大小在0.98～2.41 pg 之间，预估的平均基因组大小为1.44 pg，27种石斛的基因组大小均大于0.7 pg，主要集中在0.7～1.4 pg之间，其中草石斛的预估基因组最大，梳唇石斛最小，二者的预估基因组大小相差近2.5倍；27种石斛的基因组可归为极小基因组或小基因组。
该研究为石斛属植物的人工杂交授粉配置、杂交育种、多倍体诱导提供便利，同时，为石斛属植物基因分子库的建立以及石斛属植物基因组学、遗传变异、进化生物学与全基因组测序等研究奠定基础。
流式细胞术在植物研究中的应用
流式细胞术在植物研究中的应用作者：徐可来源：《农家科技中旬刊》2018年第02期摘要：随着我国社会经济的不断发展，流式细胞仪也在不断改革创新，其自身能对液流中的细胞，或是其他微粒多参数的进行分析与分选，具有速度快、灵敏度高、参数多、全面分析、对细胞无害等特点。
本文通过分析流式细胞术在植物研究中的应用，以期为今后相关研究提供经验及帮助。
关键词：流式细胞术；植物研究；应用1.前言流式细胞仪（FCM）是集物理技术、细胞免疫化学技术、计算机技术、流体力学、单克隆抗体技术等相融合的一种高科技技术设备。
该仪器主要包含光学技术、液流技术、细胞分选技术以及信号采集数据处理技术等，其能根据细胞理化性质，如细胞大小、DNA含量以及表面抗原等参数，准确分析细胞群体或亚群体[1]。
2.流式细胞仪的结构与原理流式细胞仪主要由四大部分组成：液流系统；光学系统；电子系统；分选系统。
其主要的技术指标包括：分选速度与纯度、荧光分辨率、分选收获率等方面。
细胞仪工作原理：将需要检测的标本制作成一个单细胞液，通过特异性的荧光染料对标本进行染色，并将标本放入实验管，通过流体力学系统的压缩，让其进入布满鞘液的流动室，当标本的压力和鞘液的压力形成一定的压力差，细胞就会在鞘液的制约下形成单列成排的现象，通过鞘液流动室的喷嘴向外喷出，经过激光聚集区最后形成细胞柱，与激光束形成交叉垂直，通过激光的扫射，形成产生荧光信号和散射光。
散射光信号主要包括前向角散射与侧向角散射，荧光信号可以反映出经过测试后的细胞的大小，而散射光则反映了经过检测的细胞胞膜以及胞质和核膜的折射、细胞内的小颗粒的形状。
经过设备的光学系统比如其中的滤片、透镜以及检测器，聚集光的散射或者光的吸收还有细胞的电阻抗等信号，然后通过计算机技术进行收集和分析，显示出被检测的信号，并将每一项指标都进行分析，通过二维点阵图或一维直方图、数据表或三维图形得以显示。
除此之外，FCM还能分别选择或者选取比较有针对性的细胞，经过分离，有效的降低单细胞的含有数量。
流式细胞术检测药用植物基因组大小的研究策略
流式细胞术检测药用植物基因组大小的研究策略
刘佩;杜芬;邓静怡;曾蒋玲;卢小舒;蓝培基
【期刊名称】《医学综述》
【年(卷),期】2024(30)11
【摘要】流式细胞术是一种可以对悬浮于液体中微小颗粒进行分选和计数的方法。
该方法的步骤包括制备完整的细胞核悬浮液、对核酸荧光染色、根据相关荧光含量分类。
分析荧光标记悬液中的单细胞或其他微小颗粒信号,可以实现蛋白质含量、
细胞DNA含量、酶活性、细胞膜受体和表面抗原、细胞体积等参数的快速测定。
该技术可以用于植物倍性分析和基因组大小估测等研究。
目前利用流式细胞术对药用植物进行基因组大小评估的研究较少,未来有待深入研究,以期为利用流式细胞术检测基因组大小提供相关资料。
【总页数】4页(P1292-1295)
【作者】刘佩;杜芬;邓静怡;曾蒋玲;卢小舒;蓝培基
【作者单位】韶关学院
【正文语种】中文
【中图分类】Q943.2
【相关文献】
1.应用流式细胞术测定药用植物黄芩基因组大小
2.基于流式细胞术和基因组Survey的花榈木基因组大小及特征分析
3.DNA流式细胞术及其在植物基因组大
小与倍性检测中的研究与应用4.基于流式细胞术与基因组Survey分析白及基因组大小及特征
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流式细胞术在植物学研究中的应用——检测植物核DNA含量和倍性水平
流式细胞术在植物学研究中的应用——检测植物核DNA含
量和倍性水平
弓娜;田新民;周香艳;刘建全
【期刊名称】《中国农学通报》
【年(卷),期】2011(27)9
【摘要】流式细胞仪作为高效的检测工具,在植物学研究的多个领域都发挥了重要作用。
兰州大学干旱与草地生态教育部重点实验室分子生态所通过大量的植物流式细胞术实验,针对检测植物核DNA含量和倍性水平,总结出一套详细通用的实验方法。
同时着重阐述了各个实验环节的关键点,分析因碎片过多而导致实验失败的原因,并提供了切实可行的解决方法。
对今后检测各种植物具有重大指导意义,同时也促进了流式细胞术在植物学研究中的应用。
【总页数】7页(P21-27)
【关键词】流式细胞术;植物核DNA含量;倍性水平;C值
【作者】弓娜;田新民;周香艳;刘建全
【作者单位】兰州大学干旱与草地生态教育部重点实验室分子生态所,兰州730000;甘肃农业大学生命科学技术学院,兰州730000
【正文语种】中文
【中图分类】Q943
【相关文献】
1.水稻细胞核 DNA 含量和倍性的流式细胞术测定 [J], 覃永华;徐鑫;王春台
2.应用流式细胞计检测肾癌和膀胱腺癌的DNA含量研究倍体状态能否超越肿瘤分期提高对预后的判断 [J],
3.流式细胞术在水生生物DNA含量和倍性分析中的应用 [J], 耿波;孙效文
4.利用流式细胞术鉴定甜樱桃砧木细胞核DNA含量和染色体倍性 [J], 吴雅琴;周锡明;陈龙;程和禾;李玉生;吴永杰;赵艳华
5.中国吊钟花属植物核DNA含量(2C-值)与倍性水平研究 [J], 梁华;蒋露;朱大海;周建伟;范邓妹;张志勇
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利用流式细胞术鉴定茉莉花基因组大小和染色体倍性
热带作物学报2021, 42(5): 1231-1236 Chinese Journal of Tropical Crops收稿日期 2020-06-10；修回日期 2020-07-04基金项目 广西自然科学基金项目（No. 2020GXNSFAA297190）；广西科技基地和人才专项（桂科AD17195065）；广西重点研发计划项目（桂科AB18221064）。
作者简介 李春牛（1983—），男，硕士，副研究员，研究方向：茉莉花栽培与育种。
*通信作者（Corresponding author ）：卜朝阳（BU Zhaoyang ），E-mail ：**************。
利用流式细胞术鉴定茉莉花基因组大小和染色体倍性李春牛1，李先民1，黄展文1，卢家仕1，李 琴2，黄昌艳1，卜朝阳1*1. 广西农业科学院花卉研究所，广西南宁 530007；2. 广西农业科学院农业资源与环境研究所，广西南宁 530007摘 要：以收集的16份茉莉花资源及50份实生种质为材料，以玉米B73为内参，采用流式细胞术估测茉莉花基因组大小，并以二倍体品种为对照，计算茉莉花染色体倍性。
结果表明：内参与待测样品峰值能完全分开，无重叠峰，峰型清晰集中，可对茉莉花基因组大小进行有效估测；供试材料中有56份二倍体，基因组大小为0.54~0.63 Gb ，有7份三倍体，基因组大小为0.79~0.96 Gb ，有3份四倍体，基因组大小为1.04~1.12 Gb ；从收集的资源中鉴定出二倍体和三倍体，未见四倍体，而从实生种质中鉴定出3个四倍体、2个三倍体，表明实生选种是茉莉花种质创新的一条有效途径；在已明确花冠类型的材料中，三倍体及四倍体均为单瓣型茉莉。
该研究结果为茉莉花倍性育种及实生选种提供科学依据。
关键词：茉莉花；流式细胞术；基因组大小；染色体倍性；实生选种 中图分类号：S961.6 文献标识码：AGenome Size Estimation and Ploidy Identification of Jasminum sambac by Flow CytometryLI Chunniu 1, LI Xianmin 1, HUANG Zhanwen 1, LU Jiashi 1, LI Qin 2, HUANG Changyan 1, BU Zhaoyang 1*1. Flowers Research Institute, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning, Guangxi 530007, China;2. Agricultural Resources and Environmental Research Institute, Guangxi Academy of Agricultural Sciences, Nanning, Guangxi 530007, ChinaAbstract: Using Zea may s ‘B73’ as the internal reference, the genome size of 66 Jasminum sambac germplasm (16 col-lected germplasms and 50 seedings) were estimated by the flow cytometry, and the ploidy was calculated using diploid as the control. Using Zea may s ‘B73’ as the internal parameter could effectively estimate the genome size of J. sambac , the peaks of the samples under test could be separated completely, and no overlapping peaks and peaks could be clearly concentrated. 56 germplasms were diploid with genome size between 0.54 Gb and 0.63 Gb, Seven germplasms were triploid with genome size between 0.79 Gb and 0.96 Gb, Three germplasms were tetraploid with genome size range from 1.04 Gb to 1.12 Gb. Three tetraploid and two triploid were found in the seedings, which showing that seed selec-tion is an effective way of germplasm innovation for J. sambac. All the tetraploid and triploid blossomed were simple flower. The results of the study wouldl provide important reference basis for the ploidy breeding and seed selection of J. sambac .Keywords: Jasminum sambac ; flow cytometry; genome size; ploidy; seedling selection DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2021.05.005茉莉花Jasminum sambac (L.) Ait.系木犀科（Oleaceae ）素馨属（Jasminum ）植物，原产于印度，现在我国南方和世界各地均有广泛栽培，可用于花茶加工、香精提取、观赏及药用等[1]。
流式细胞术分析和分拣植物染色体
流式细胞术分析和分拣植物染色体
李立家;宋运淳
【期刊名称】《遗传》
【年(卷),期】2005(27)3
【摘要】流式细胞术是当染色体、细胞核和细胞等颗粒随着流动的液体(水或缓冲液)通过一个测量点时,被探测器探测到,这样根据颗粒的物理和化学特征而将不同的颗粒分开并计数分拣的技术.流式细胞分析在人类基因组计划中发挥了重要作用,流式细胞技术的应用也适用于植物,目前这个技术应用范围包括流式核型分析,分拣纯化染色体,定位基因,构建文库等.文章综述了流式细胞术在植物基因组分析方面的研究进展.
【总页数】5页(P461-465)
【作者】李立家;宋运淳
【作者单位】武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室,武
汉,430072;武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室,武汉,430072【正文语种】中文
【中图分类】Q942
【相关文献】
1.植物染色体标本的制备和染色体核型分析研究进展 [J], 丁鸿;邱东萍;陈少雄
2.植物染色体标本的制备和染色体核型分析研究进展 [J], 丁鸿;邱东萍;陈少雄;
3.流式细胞术在微型浮游植物研究中的应用Ⅰ、流式细胞术对微型浮游生物丰度测
量方法的探讨 [J], 张利华
4.植物减数分裂染色体配对与染色体组分析的研究进展 [J], 郭军洋;陈劲枫;钱春桃;曹清河
5.流式细胞术及染色体畸变分析在X射线职业照射者血细胞研究中的初步… [J], 周振英;余世俊
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染色体流式分选(法)
染色体流式分选(法)
染色体流式分选（法）是一种用于分离和分析染色体的技术。
它结合了染色体学和流式细胞术的原理，可以用于研究染色体的数量、形态和结构。
这项技术主要包括以下几个步骤：
1. 细胞处理，首先，需要获得要研究的细胞样本，通常是从组
织或血液中分离的细胞。
然后，对细胞进行适当的处理，如暴露于
适当的酶或盐溶液中，以使细胞膜破裂，释放出染色体。
2. 染色体标记，接下来，染色体需要被染色或标记，以便在流
式细胞仪中进行识别和分析。
常用的染色方法包括使用荧光染料或
特定的抗体标记。
3. 流式细胞分析，标记好的染色体样本被注入到流式细胞仪中，通过激光的照射和细胞的流动，染色体被逐个扫描并记录下其荧光
强度和特征。
4. 数据分析，最后，通过流式细胞仪收集到的数据进行分析和
解读，可以得到染色体数量、大小、形态和结构等信息。
染色体流式分选法在遗传学、肿瘤学和生殖医学等领域有着广泛的应用。
通过对染色体的分析，可以帮助科研人员了解染色体异常与疾病之间的关系，也可以用于筛选染色体异常的胚胎，辅助生殖医学诊断和治疗。
同时，该技术也为基因组学研究提供了重要的工具和方法。
总的来说，染色体流式分选法在染色体研究和临床诊断中具有重要的意义。
流式细胞术在农业领域的应用
流式细胞术在农业领域的应用
流式细胞术在农业领域的应用是指利用流式细胞术来检测、分离、排序和定量分析作物种子、细菌、真菌、动植物病原体和植物细胞以及其它微量生命体中的细胞或其组分。
流式细胞术对于开发新品种、育种和农业生物技术的应用及其农业保护以及病原鉴定和检测、种质资源保存和研究以及基因组学实验均有重要的意义。
例如，在食品安全方面，利用流式细胞术进行食品中污染指示物的检测，可以快速、灵敏地检测出可能存在污染的作物，从而减少后续检测中的不必要消耗。
流式细胞术还可以识别出抗病菌。
例如，可以从大豆样品中检测出褐飞虱、绿肥虱、细小锈菌等。
此外，流式细胞术有助于检测和鉴定茬特性，可以通过基因工程在抗病能力中处理病原体。
流式细胞术还可以检测生物体中的细胞形态特征，可以识别出细菌、真菌和植物细胞的形态特征，并可以定性和定量分析病原体的大小、活性、核外染色体和表面等特征。
流式细胞术还可以使用激光衍射法测定植物细胞中细胞墙中的钙离子浓度，从而有效评价植物支持所需的营养元素，从而判断植物是否健康。
此外，流式细胞术还可以检测植物病毒感染情况，并能够快速和精确地鉴定出令植物病毒感染的病毒株。
总之，流式细胞术在农业领域的应用十分广泛，可以有效检测、鉴定和分析农作物种子、细菌、真菌、动植物病原体和植物细胞以及其它微量生命体的细胞组分，对植物的育种、农业生物
技术的应用和病原鉴定及检测都有重要意义，可为农业生产质量的改进提供重要技术支持。
流式细胞术是什么？流式细胞术原理及步骤
流式细胞术是什么？流式细胞术原理及步骤蛋⽩质或核酸等⽣物⼤分⼦在某个细胞中或细胞群体中的含量分析对了解该物质的⽣物学功能是⼗分重要的。
从前⼈们常⽤显微分光光度测定技术，⽬前流式细胞术得到了越来越⼴泛的应⽤。
流式细胞术（flow cytometry）可定量地测定某⼀细胞中的DNA、RNA或某⼀特异的标记蛋⽩的含量，以及细胞群体中上述成分含量不同的细胞的数量，它还可将某⼀特异染⾊的细胞从数以万计的细胞群体中分离出来，以及将DNA含量不同的中期染⾊体分离出来，甚⾄可⽤于细胞的分选。
流式细胞术技术原理细胞群体分散后对待测的某种成分进⾏特异的荧光染⾊，然后使悬液中的细胞⼀个个快速通过流式细胞仪（每秒可达⼏万个细胞）。
当含有单个细胞的液滴通过激光束时，带有不同荧光的细胞所在的液滴被充上正电荷、负电荷，或不被充电，同时检测器可测出并记录每个细胞中的待测成分的含量。
因带有不同表⾯标志的细胞所带的电荷的种类不同，当液滴通过⾼压偏转板时，带不同电荷的液滴发⽣偏转，从⽽达到将细胞分选的⽬的。
如果染⾊过程不影响细胞活性，那么分离出来的细胞还可以继续培养。
流式细胞仪分选原理⽰意图流式细胞术可⽤于测定哺乳动物细胞的许多参数, 尤其是细胞周期中的变化, 如细胞⼤⼩、细胞内某些成分的含量等。
⽤⼀种可以可逆性通透细胞膜的单克隆抗体, 可直接测定相应的可溶性细胞内蛋⽩。
GFP等荧光蛋⽩可作为基因表达的报道分⼦, 流式细胞术可利⽤它来检测菌株细胞内产物的表达情况。
细胞株可以设计成能使GFP 同步表达, 并与⽬标蛋⽩的表达量相⼀致。
其荧光含量的测定结果可⽤于指导产量的控制、细胞株选择、质量控制。
植物染色体标本的制备和染色体核型分析研究进展
植物染色体标本的制备和染色体核型分析研究进展
丁鸿;邱东萍;陈少雄
【期刊名称】《南方农业学报》
【年(卷),期】2012(043)012
【摘要】染色体是遗传物质的载体,植物染色体制片和核型分析技术是细胞遗传学中最基本、最常用的方法,在物种亲缘关系鉴定、染色体变异、杂种分析等方面得到广泛应用.文章从取材、材料预处理、材料固定、材料解离、染色体制片、染色与观察等方面综述了近年来植物染色体制片的改进方法,从传统手工分析、Photoshop软件分析、自动核型分析、流式细胞术等介绍了核型分析技术.并从提高制片技术,以获得更清晰可辨的中期染色体图像;在染色体制片中规范统一标准的仪器设备并建立一套统一的标准,便于比较不同研究者的结果,有利于植物分类和遗传的研究;提高数据统计和分析的方法,以降低实验成本等方面展望了今后植物核型分析的发展方向.
【总页数】5页(P1958-1962)
【作者】丁鸿;邱东萍;陈少雄
【作者单位】揭阳职业技术学院师范教育系,广东揭阳522000;揭阳职业技术学院师范教育系,广东揭阳522000;揭阳职业技术学院师范教育系,广东揭阳522000【正文语种】中文
【中图分类】Q943
【相关文献】
1.植物染色体标本的制备和染色体核型分析研究进展 [J], 丁鸿;邱东萍;陈少雄;
2.小鼠成纤维细胞早中期染色体标本制备及G带核型分析 [J], 王一平;程在玉
3.革胡子鲇染色体标本制备及核型分析 [J], 余凤玲
4.山医群体中国地鼠骨髓细胞染色体标本的制备及其核型分析 [J], 李焰;隋兰馥
5.植物根尖中期染色体标本制备实验教学的改进 [J], 刘志祥;徐刚标;曾超珍
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流式细胞术分析和分拣植物染色体
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一种利用流式细胞仪快速检测植物倍性的分析方法
2020.06植保土肥在研究植物的过程中，往往要对其生长发育和基因等因素进行检测研究，其中，对植物的基因组大小以及其DNA 倍性的研究对该植物的品系、性状及营养和药用价值等都有着极其密切的关联。
特别是在植物遗传育种中，植物染色体倍性鉴定是不可缺少的步骤，有效的倍性鉴定是了解其遗传背景和进一步应用的基础。
在植物研究中，检测植物的基因组大小和DNA倍性是有非常重要意义的。
除细菌和蓝藻的细胞以外，所有的动物细胞以及植物细胞都属于真核细胞。
研究表明包括植物细胞在内的真核生物的细胞增殖主要都是通过有丝分裂的方式。
我们首先要知道，细胞有丝分裂的一个循环被称为细胞周期，它指细胞从上一次分裂结束到下一次分裂结束所完成的活动过程。
整个周期被人为的分为：有丝分裂期（M ）、有丝分裂后间期（G1）、DNA合成期（S ）和合成后间期（G2）[1]。
另外，除了有丝分裂这个增殖的周期之外，在许多双子叶植物的发育过程中，组织细胞也会受到一些其他的发育信号以及环境因素的影响，在S 期完成后会直接重新回到Gl 期开始新一轮的DNA复制，这个过程是跳过了G2和M期的，经过如此特殊的一个循环，就可以促使植物形成多倍体细胞，而在植物育种过程研究中，多倍体育种是特别重要的途径之一，它不仅可以对植物的性状进行改良，还可以提高植物体内各种有效成分的含量。
这种特殊的导致多倍体形成的细胞周期在双子叶植物的叶、下胚轴、花器官和果实等器官的发育过程中是普遍存在的，而且这还与该植物细胞的扩展、分化密切相关。
正是因为对植物倍性的有效鉴定是了解其遗传背景和进一步研究的基础，所以我们才要找到并利用有效且快速的倍性鉴定方法，才能够准确地辨认多倍体并将其挑选出来。
流式细胞仪（Flow cy tometry ，简称FCM，是一种可以对动植物细胞或者一些微粒进行自动分析和分选的仪器。
该仪器运用了激光技术和光电测量技术，并将计算机技术和流体力学结合起来，以细胞免疫荧光化学技术为基础，逐渐发展成为现代分子生物学实验室不可或缺的高科技细胞分析技术。
1.流式细胞仪在植物科学中的应用
流式细胞仪在植物科学中的应用The Application of Flow Cytometry in Plant Sciences摘要：流式细胞仪(Flow Cytometry, FCM)的产生标志着对细胞进行定性、定量分析及分选时代的到来。
自20世纪70年代发明以来，流式细胞仪已被广泛应用在生物学和医学的各个研究领域，创造了无数个里程碑式的发现，极大地推动着生物学和医学的发展和应用。
流式细胞仪应用于植物科学(Plant sciences)领域38年来，在诸如植物细胞计数(Cell count)、细胞核分析(Nucleus analysis)、原生质体分析(Protoplast analysis)、染色体分析(Chromosome analysis)、植物细胞和染色体分选(Sorting plant cell and chromosome)、染色体文库构建(Chromosome library construction)、细胞结构和功能分析(Cell structure and function)、逆境植物学研究(Plant anti-stress biology)、植物病理学(Plant pathology)、植物分类学(Plant taxonomy)、植物育种(Plant breeding)等植物科学的各个领域都有着广泛的应用。
接下来我们将对流式细胞仪在植物科学领域的研究方法、样品制备及应用前景等做一详细的介绍。
一、前言：流式细胞术是一种对处在液流中的细胞或其它生物微粒逐个进行多参数的快速定量分析和分选的技术。
它集计算机技术、激光技术、流体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体，按照细胞的物理或化学性质，同时具有分析和分选细胞的功能[1-3]。
因而自1974年BD (Becton, Dickinson and Company)公司研制出第一台商用流式细胞仪(Fluorescence Activated Cell Sorting, FACSTM)以来，就在技术方法上不断推陈出新，使流式细胞仪在生物学和医学领域受到了广泛的应用。
植物染色体倍性鉴定方法概述_杨清淮
植物染色体倍性鉴定方法概述_杨清淮一、植物染色体倍性鉴定，这听起来是不是超级高大上，但其实也很有趣呢。
咱们先得知道啥是植物染色体倍性呀。
简单来说，就像有的植物细胞里的染色体是一套，有的是两套，甚至更多套，这个套数就是倍性啦。
那为啥要鉴定它呢？这可太重要了，不同倍性的植物在好多方面都不一样呢。
比如说，三倍体的无籽西瓜，就是利用了染色体倍性的特点培育出来的。
如果不鉴定清楚，可能就种不出这么好吃又方便的西瓜啦。
二、那鉴定方法都有哪些呢？一种是直接观察法。
就是直接在显微镜下看植物细胞里的染色体数目。
这就像是给染色体来个大点名，数数有多少个。
不过这可不容易呢，得先把植物细胞处理一下，让染色体乖乖地排好队，才能数得清楚。
这个过程就像给一群调皮的小朋友排座位，要很有耐心。
而且不同植物的染色体大小、形状还不一样，就更增加了难度。
比如说小麦的染色体就比较小，数起来就像在一堆芝麻里数个数一样麻烦。
三、还有一种方法是流式细胞术。
这个名字听起来就很酷炫吧。
它就像是给植物细胞做一个快速的普查。
把植物细胞放在仪器里，仪器就能很快地检测出细胞里DNA 的含量。
因为不同倍性的植物细胞DNA含量是不一样的，所以根据这个就能知道染色体的倍性啦。
这就好比是用一个超级智能的秤，一下子就能称出东西有多重，然后根据重量来判断是几倍性。
不过这个仪器也不便宜呢，不是所有实验室都能有得起的。
四、另外，还有形态学鉴定法。
这个就比较直观啦。
不同倍性的植物在形态上往往有一些区别。
比如说，多倍体植物的叶片可能会更厚实、更大，花朵也可能更大、颜色更鲜艳。
就像我们看到的巨型南瓜，很多都是多倍体的，它们长得又大又壮，和普通南瓜一对比就很明显。
但是这个方法也不是很精确啦，因为环境因素也会影响植物的形态，有时候可能会看错呢。
五、还有一种生理生化鉴定法。
不同倍性的植物在生理生化方面也有差异。
比如说，它们对某些化学物质的反应可能不一样，或者在酶的活性上有差别。
这就像是不同的人对同一种食物的消化能力不同一样。
流式细胞术鉴定黄花苜蓿染色体倍性水平
流式细胞术鉴定黄花苜蓿染色体倍性水平富新年;高洪文;王赞【期刊名称】《中国草地学报》【年(卷),期】2013(035)001【摘要】采用流式细胞术检测47份黄花苜蓿种质材料的染色体倍性水平,同时结合传统的根尖染色体制片法进行验证.结果表明,47份黄花苜蓿种质材料中45份为四倍体(2n=4x=32),核DNA含量为1.85±0.09 pg/2c；2份为二倍体(2n=2x=16),核DNA含量为1.016±0.021 pg/2c.研究结果为黄花苜蓿遗传育种、种质资源的合理利用及苜蓿属的系统进化研究提供了理论依据.%Flow cytometry was used to determine the ploidy levels of 47 Medicago falcata accessions. Forty-five accessions were found to be tetraploid, the mean nuclear DNA content was 1. 85 ± 0. 09pg/2c, two accession s were diploid with an average of 1. 016 ± 0. 021pg/2c of nuclear DNA content. The results provide theoretic basis for genetics and breeding, reasonable utilization of germplasm resources, and phy-logeny and evolution of Medicago species.【总页数】5页(P18-22)【作者】富新年;高洪文;王赞【作者单位】中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193;甘肃省天祝县草原工作站,甘肃733200;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193【正文语种】中文【中图分类】S551.7【相关文献】1.利用流式细胞术对29份火龙果种质染色体的倍性鉴定 [J], 黄黎芳;武志江;梁桂东;陆贵锋;黄凤珠;刘朝安;邓海燕2.利用流式细胞术鉴定茉莉花基因组大小和染色体倍性 [J], 李春牛;李先民;黄展文;卢家仕;李琴;黄昌艳;卜朝阳3.应用流式细胞术对柳属染色体倍性与基因组大小测定 [J], 任伟超;徐姣;樊锐锋;刘美琦;于欣欣;王思嘉;马伟4.利用流式细胞术鉴定甜樱桃砧木细胞核DNA含量和染色体倍性 [J], 吴雅琴;周锡明;陈龙;程和禾;李玉生;吴永杰;赵艳华5.利用流式细胞术快速鉴定169份香蕉种质资源的染色体倍性 [J], 吕顺;任毅;王芳;胡桂兵;黄秉智;刘文清;何建齐;刘建平;曾莉莎;周建坤;麦景郁;张珂恒因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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收稿日期 ! 修回日期 ! ! ( ( $ ( ) ! (" ! ( ( $ & ( ( * "和湖北省杰出青年基金 & 基金项目 ! 国家自然科学基金 ! 编号 # # ( ! " ( % " )% # ( ! " ( " $ ( + , . / 0 1 23 0 5 16 7 0 8 . 9 7 : 6 7 0 , / 7 : + ; 8 1 9 ; 1< . , 9 2 7 0 8 . 9. => 5 8 ? 4 ! " ’ 9 7 6 . @ # ( ! " ( % " )% # ( ! " ( " $ ( 7 9 2 0 5 16 7 0 , / 7 :+ ; 8 1 9 ; 1< . , 9 2 7 0 8 . 9. =A , 3 1 8B / . C 8 9 ; 1 作者简介 ! 李立家 ! $ 男$ 博士 $ 专业 # 植物分子细胞遗传学 (E # # & * % "D " 1 : ( ! " ? % ) " % ) $ ’ ( ’$ F ? G 7 8 : : : 8 7 ) )"4 7 5 . . @ ; . G@ ; 9 H
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流式细胞技术用于植物基因组分析分拣有一些 优势 $ 正如在人和哺乳动物染色体的研究 $ 流式核型 分析和染规 模W 6 J 测序和基 因 定 位 技 术 的 进 展 大 大 促 进 了 其 他大基因组植物的 分 析 $ 许多植物基因组遗传和物 分子标记技 术 以 及 基 因 克 隆 等 的 研 究 目 前 理作图 $ 正迅速进行 $ 然而许多植物基因组很大 $ 而且包含着 大量的重复 W 这些重复 W 6 J$ 6 J 阻碍它们基因组的 分析和功能基因的图位克隆 ( 发展染色体分拣技术 将加强这些植物染色体和基因组分析以及基因定位
首先用专 性 结 合 染 色 体 ! 的荧 W 6 J 或 蛋 白 质" 光染料染色 $ 或用耦连有荧光染料的 抗 体或 W 6 J探 针结合染色体 $ 然后 流 式 细 胞 仪 通 过 测 量 荧 光 染 料 的荧光强 度 而 对 染 色 体 进 行 快 速 定 性 和 定 量 的 分 析 ( 在一个带有分拣 设 备 的 流 式 细 胞 仪 ! 也叫荧光 激 活 流 式 细 胞 分 拣 仪$ < : , . / 1 R ; 1 9 ; 1 ? 7 ; 0 8 C 7 0 1 2; 1 : : 中$ 染色体 悬 浮 液 被 吸 入 注 射 进 一 个 $ R . / 0 1 / < J > +" 流式室 ! 喷管 " $ 这个流式室中充满了正在高速地流 动的套式 流 体 ! 通常是去离子水或 B ( X + 盐 溶 液" 样品在直径为 ’ G 的孔中加速流动导致染色 (!) (# 体在液流的中间一 个 一 个 的 流 动 $ 这个过程被称为 流水动力学聚 焦 ( 在 流 体 中 的 染 色 体 以 ! * (G R的 速度流动 $ 穿过一束强光 $ 波长调节为能激发结合染 色体的染料 ( 可调的汞离子光源或高压汞弧光灯是 最常用的激发光 源 ( 激 发 光 引 起 染 料 发 荧 光 $ 同时 染色体结构引起荧 光 散 射 $ 向前散射的激发光被一 向右角 散 射 的 光 和 染 色 体 自 发 荧 光 被 个透镜接收 $ 另一个透镜收集 ( 这些收集的光分别被不同的探测 器! 光电二极管或光 电 倍 增 管 " 转 换 成 电 流 信 号$ 最
! 遗!传 ! " # # " # " $ % & ’ (! ) * + + ! " $ % &!$ % ’$ ! ( ( ’ , ."
技术与方法
流式细胞术分析和分拣植物染色体
李立家 ! 宋运淳
! " 武汉大学生命科学学院植物发育生物学教育部重点实验室 $ 武汉 $ # ( ( " !
摘!要! 流式细胞术是当染色体 ) 细胞核和细胞等颗粒随着流动的液体 ! 水或缓冲 液 " 通过一个测量点时$ 被探测器 探测到 $ 这样根据颗粒的物理和化学特征而将不同的颗粒分开并计数分拣的技 术 ( 流 式 细 胞 分 析 在 人 类 基 因 组 计 划中发挥了重要作用 $ 流式细胞技术的应用也适用于植物 $ 目前这个技术应用范 围 包 括 流 式 核 型 分 析 $ 分析方面的研究进展 ( 关键词 ! 流式细胞仪 % 植物染色体!!!! 文献标识码 ! ! " 文章编号 ! ( ! ’ #D* " " ! ! ( ( ’ ( #D( $ % &D( ’