实验一、小鼠腹腔注射筒箭毒碱ED - 长尾 S

【实验目的】 了解 ED50 的测定方法、原理、计算过程与意义。 【实验对象】 小鼠（昆明种 KM），雌雄各半 【仪器和药品】 铁丝网，铁架台，来自百度文库平，注射器，筒箭毒碱（根据实际需求常规注射体积，一般为 0.2ml/10g 体重，进行配制）。
【实验方法】 1．预实验，目的是为了找出符合上述点斜法要求 5）的 Dmax 和 Dmin。阳性反应判定标准： 20min 内小鼠落下 3 次（注意排除因互相拥挤而落下所造成的假阳性）。 2．确定组数（n）后，根据 Dmax 和 Dmin，计算各组应给予的剂量，注意公比 r 应在上述 要求的范围内。Dmax= rn·D min
即 r = (n−1) Dmax Dmin = 1.1 ~ 1.6
分别计算出各组应注射的剂量，见下表：
Group
1
2
3
4
5
6
…
No.
Dose
Dmin R·Dmin r2·Dmin r3·Dmin r4·Dmin Dmax = r5·Dmin …
3．正式实验：
（1）筛选小鼠：将小鼠放在铁丝网上，观察 10 分钟，能坚持不掉落的即为合格，可以
效应
效应
量反应
长尾 S 型 剂量
对称的 S 型 Lg 剂量
累加频率
质反应
累加频率
长尾 S 型
对称的 S 型
4．ED50 测定方法：应用点斜法剂。量应用该方法测定 ED50 时，实L验g 剂设量计必须符合以下 5 点 要求：
（1）动物以 5～8 组为宜； （2）每组动物数须一致； （3）各组给药剂量应为等比数列； （4）各组给药剂量的公比 r = 1.1～1.6； （5）最大剂量（Dmax）组的阳性反应率须≥80%，最小剂量（Dmin）组的阳性反应率须≤ 20%。
（杨毓章 林志彬 李利华）
参与实验。此步筛选的目的在于排除假阳性；
（2）称重、标记；
（3）给药观察：腹腔注射筒箭毒碱。每组分别给予相应的剂量。
（4）计算阳性率：阳性反应标准：给药后 20 分钟内自铁丝网上掉落 3 次者为阳性。
记录表格示例 1（每组用）
No.
Weight of Volume of
Time:
Time: end Times of +/-*
body (g) injection injection
of
falling
(ml)
observatio down
n
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
* +: positive; -: negative
记录表格示例 2（合计）：
Groups
N*
Dose
(mg/kg)
1
10
2
10
3
10
Volume of injection (ml/10g body weight)
No. of reaction
P%**
4
10
5
10
6
10
* Number of animals in each group;
** Positive rate
4．计算： （1）lg ED50=Xm–i（∑P–0.5）
其中， Xm = lg Dmax i =lg r ∑P：阳性率之和
因此， ED50 =lg–1 [Xm–i（∑P–0.5）] （2） ED50 的 95%可信区间
实验一、小鼠腹腔注射筒箭毒碱 ED50 的测定 Experiment 1. Determination of Cl-Tubocurarine’s
median effective dose （ED50）
【相关理论】 1．什么叫量反应？质反应？ED50 属于什么反应资料？ 量反应是指在个体身上反应的强度，可以用连续性的数值来表示，例如血压、尿量等。 质反应是指群体中所观察到的某一效应的出现，如生或死，有效或无效等，以阳性反应率或 百分数来表示（全或无，阳性率）。ED50 是质反应的参数。 2．什么是 ED50，LD50，治疗指数？ 能使群体中有半数个体出现某一效应的剂量，称为半数效应量，若此效应为有效，则 为半数有效量 ED50，若此效应为死亡时，则为半数致死量 LD50。 治疗指数= LD50/ ED50=TI，该值越大越好，说明药物越安全。 可用机率单位正规法或点斜法求出 LD1 ，ED99 ；LD5 ，ED95。 3．量效曲线。
= lg–1 [lg ED50±1.96Sx50] 其中，Sx50 为 ED50 的标准误：
S x50 = i • (∑ P − ∑ P 2 ) (n − 1) ，n 为各组动物数。
以阳性率为纵坐标，对数剂量为横坐标，作图。 【思考题】 1. 点斜法测定 ED50 时，实验设计必须符合哪些条件？ 2. 测定 ED50、LD50 的意义是什么？ 3．小鼠腹腔注射筒箭毒碱的 ED50 是多少？其 95%可信区间是多少？