一种简单的肝素钠效价检测方法
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肝素钠效价测定方法
肝素钠效价测定步骤:
准确称取0.035-0.05g样品,放入小烧杯中,加入35-50ml0.9%Nacl,配成0.1%的样品溶液;
吸取0.5ml上述样品溶液至小瓶中;
根据估计效价,加入适量0.9%Nacl,其量为估计效价除以标准品效价(即8),减去1,除以2,即:
[(估计效价/8)-1]/2 摇匀;
取5个试管,分别吸取上述3的溶液140ul、150ul、160ul、170ul、180ul;
分别加入1ml血浆,再加入0.8ml0.25%Cacl2,盖上塞子,摇匀;
放入37℃±1水浴箱中1小时,1小时后观察结果
结果判定,实际效价=估计效价*标准品凝固点/样品凝固点;
废液残留测定
试验目的
为了加强生产监控力度,在过程中进行检测吸附废液残留,从而根据废液残留量,在后道工序进行调整,最大程度的提高肝素钠效价和出率。
试验原理
肝素钠是具有抗凝血活性的一类物质,在溶液中肝素钠含量越高,抗凝血作用越强,吸附废液中肝素残留量的高低,直接跟血浆的凝固程度有关,含量越高,凝固程度越大。
三、试验器材及试剂
1、试验器材:-18度冰箱1个,吸耳球2个,10ml吸量管3个,1ml吸量管1个,试管架1个,恒温水浴箱1个,锥形漏斗1个,脱脂棉;
2、试验所需试剂:血浆,标准品,0.9%的Nacl,0.25%的Cacl2;
四、试验方法
1、吸附结束后,关闭搅拌电机,静置2分钟,用瓶子取半瓶吸附废液,盖上瓶盖,放冷水中冷却备用;
2、取1个试管架,装试管4排,第一排装5支,后面3排各装3支;
3、在第1排试管中分别按顺序加入吸附废液1400ul、1600ul、1800ul、2000ul、2200ul,后3排分别按顺序加入标准品150ul、160ul、170ul;
4、分别在上述4排试管里加入1ml血浆,然后再加入0.8ml0.25%的Cacl2,盖上试管塞,摇匀;
5、放入37℃±1 的恒温水浴箱中1小时,1小时后观察每1管的凝固程度;
五、试验结果
1、观察每一排试管中血浆的凝固程度,以第1排血浆的凝固程度作为吸附废液的血浆凝固点,后3排中凝固程度相同的两排的凝固程度作为标准品的凝固点;凝固程度判断:
1)、完全凝固:溶液完全凝固,倒转管子,凝块不从管壁脱落;
2)、3/4凝固:溶液完全凝固,倒转管子,凝块有气泡产生,能从管壁脱落;3)、1/2凝固:倒转管子,大约有一班体积的溶液凝固;
4)、1/4凝固:倒转管子,只有很少溶液凝固;
5)、0凝固:倒转管子,溶液无凝固现象,并完全流动;
2、废液残留量的计算方式:
废液残留量=8*标准品凝固点/样品凝固点