高效液相色谱荧光检测法测定环境水体中的苯酚的实验研究
高效液相色谱法测定水中苯酚类化合物
三、实验仪器与试剂
高效液相色谱仪 邻苯二酚、对苯二酚、间苯 二酚，甲醇（色谱纯）
定性标准溶液：邻苯二酚，对苯二酚，间苯 二酚，含量均为100μgml-1单标水溶液 定量标准溶液：含邻苯二酚，对苯二酚，间 苯二酚各适量，至于50ml容量瓶中，用二次 蒸馏水定容，得到质量浓度分别为100μgml1和200μgml-1的混合标准溶液。
附Ⅱ：（预习）实 验 报 告 格 式
1．工作准备 实验室级别：温度： 相对湿度： 高效液相所用液体的确认 样品确认 2．高效液相柱状态确认 柱型： 。高效液相柱连接是否完好 平衡柱 流动相： 流速： （ml/min）时间： （min） 2、上样 上样量： μl 流速： (ml/min) 样品采集时间 （min） 检测波长 (nm) 3 、清洗 流动相： 流速： （ml/min）时间： （min） 4、封柱 流动相： 流速： （ml/min）时间： （min）
高效液相色谱法测定水中 苯酚类化合物
指导教师：刘晓宇
一、实验目的
1、初步掌握高压液相色谱仪的基本原理和使 用方法。 2、了解反相液相色谱仪的分离非极性与弱极 性化合物的基本原理。 3、站我反相液相色谱法分离苯酚类化合物试 验条件。 4、对水中苯酚类化合物进行定性和定量分析。
二、实验原理
1、反相液相色谱法 是指流动相极性大于固定相极 性的分离体系。 分离机理：基于被分离组分与固定相疏水作用力 的差别。 2、定性分析：
四、实验步骤
1、实验条件 1)色谱柱： 2)流动相：甲醇水溶液（甲醇：水=20:80）流 量为1.2mlmin-1 3)紫外光度检测器：检测波长为270nm 4)进样量：20μg
2、具体步骤 1)用20%甲醇清洗进样针 2)进样针吸取对本二酚标准溶液，测得保留时 间吸光度（t1，A1） 3)进样针吸取邻本二酚标准溶液，测得保留时 间吸光度（t2，A2） 4)进样针吸取样品溶液，测得3个峰值的保留 时间，吸光度（t1’、t2’tx’ A1 ’ Ax’ A2 ’ ） 5)计算邻本二酚、对苯二酚的浓度
水样中苯酚测定
反相色谱法测定环境水样中苯酚的含量
一．实验目的
1. 熟悉液相色谱仪的基本构造和操作方法
2. 学会利用内标法对物质进行色谱定量分析
二．仪器与试药
仪器：
高效液相色谱仪（日本岛津10AVP型）、溶剂过滤器、样品溶液过滤器、微量进样器
试药：甲苯（分析纯）、苯酚（分析纯）、甲醇
三、色谱条件
色谱柱：C18（250×4.6，5um）
流动相：甲醇-水=70：30 （v/v）
检测器及检测波长：紫外检测器254nm
流速：1.0ml/min
四、实验操作
1. 内标物溶液的配制：准确称取一定量的甲苯，加甲醇溶解后制成0.5 mg/mL的内标溶液。
2．对照品溶液的配制：准确称取苯酚对照品适量，加甲醇溶解后制成0.4 mg/mL的对照品溶液。
3. 调用或创建咖啡因测定方法并运行方法
4. 测定
⑴校正因子的测定：取400uL内标溶液和200uL对照品溶液混合。
待基线平稳后，吸取5μL 进样。
⑵样品测定：取400uL内标溶液和200uL样品溶液混合。
待基线平稳后，吸取5μL进样。
五、数据处理及计算
六、思考题
1.如何判断第一个色谱峰就是苯酚的峰？
2.简述三种定量方法的优缺点。
苯酚含量的测定方法
苯酚含量的测定方法主要有以下两种：一、高效液相色谱法：1.样品制备：量取适量待测溶液，使用孔径为0.45μm的滤膜过滤，得到待测样品。
2.仪器检查：按洗脱的初始体积比将流动相A（如1.0‰TFA-乙腈溶液）和流动相B（如1.0‰TFA-水溶液）接入高效液相色谱仪的C色谱柱中平衡，检查仪器各系统，确保仪器正常。
3.检测前准备：设置高效液相色谱仪的色谱条件，包括压力警戒、检测波长、流速、进样量、柱温等参数。
随后继续按初始体积比将流动相A和流动相B 接入C色谱柱中，直至C色谱柱内的各物质含量达到动态平衡。
4.苯酚洗脱：将步骤1中得到的样品加入至已平衡的C色谱柱中，按流动相A和流动相B之间的体积比的不同分成多个洗脱阶段，依次对样品中的苯酚进行梯度洗脱，记录色谱图。
5.绘制线性回归方程：精密量取不同浓度的苯酚标准溶液作为标准对照液，按照上述洗脱阶段进行梯度洗脱，记录色谱图，测得标准对照液的吸收峰面积。
以标准对照液浓度为横坐标、以吸收峰面积为纵坐标制作的线性回归方程。
6.苯酚含量测定：将待测样品的苯酚的吸收峰面积代入线性回归方程中，计算得到样品中苯酚的含量。
二、氧化还原滴定法：1.原理：供试品加水溶解后，取适量置碘瓶中，加入溴滴定液和盐酸，摇匀后静置，再加入碘化钾试液和硫代硫酸钠滴定液进行滴定，根据滴定液的使用量计算苯酚的含量。
2.试样制备：制备溴滴定液、碘化钾试液、淀粉指示液和硫代硫酸钠滴定液等所需试剂。
3.操作步骤：按照上述原理中的步骤进行操作，记录滴定结果，并用空白试验校正。
根据滴定液的使用量计算苯酚的含量。
以上两种方法各有特点，可以根据实际需求和实验条件选择适合的方法进行苯酚含量的测定。
高效液相色谱法测定水样中的苯酚
实验三高效液相色谱法测定水样中的苯酚一、实验目的1.1熟悉HPLC仪器的各个部件及熟悉操作方法；1.2掌握应用高效液相色谱法对苯酚的定性、定量分析；1.3掌握水样中苯酚的测定。
二、实验原理HPLC原理高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9´107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
特点1．高压：液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。
一般可达150～350×105Pa。
2. 高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。
高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h 。
3. 高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。
4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。
如荧光检测器灵敏度可达10-11g。
另外，用样量小，一般几个微升。
5.适应范围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。
而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。
对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400 以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的75% ～80% ）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。
据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。
高效液相色谱仪一般分为四个部分：高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。
高效液相色谱法测定废水中酚类化合物含量
第19卷·第1期2019年3月0引言随着生活水平的提高，人们对生态环境的关注度越来越高，其中，水体污染已经成为环境污染中最重要的方面［1］。
酚类化合物被广泛应用于染料、医药杀菌剂、防腐剂以及除草剂等各个方面，是我国工业发展不可或缺的一种重要有机化合物［2］。
但是，含酚工业废水对环境危害巨大，具有致癌、致突变以及致畸等严重危害，我国已经把酚类化合物列为5种毒物之一［3，4］。
因此，对酚类化合物的检测十分必要。
目前已有多种检测酚类化合物的方法，例如福林-西莫卡特比色法［5］、分光光度法［6］、气相色谱法［7］以及高效液相色谱法［8］等。
其中，高效液相色谱法具有准确度高、重现性好以及操作简单等优点，因此，本实验采用高效液相色谱法测定废水中间苯二酚和对苯二酚的含量。
1实验部分1.1仪器与试剂LC-20A 高效液相色谱仪（日本岛津公司）；FA-1104电子天平（上海越平科学仪器有限公司）；KQ5200超声波清洗器（合肥金尼克机械制造有限公司）。
高效液相色谱法测定废水中酚类化合物含量张德谨1,2，王君荷1，谢永1,2，朱军1，李沙沙1，张萍花1（1.宿州学院，安徽宿州234000；2.宿州学院精细化工产品开发研究所，安徽宿州234000）【摘要】采用高效液相色谱法同时测定废水中间苯二酚和对苯二酚的含量，以酚类化合物浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，通过精密度试验、稳定性试验以及加标回收率实验对该方法进行评价。
结果表明：测定间苯二酚的线性回归方程为Y=0.00009X+0.31783，测定对苯二酚的线性回归方程为Y=0.0002X-1.36472。
在设定的色谱条件下，模拟废水中间苯二酚浓度为6.27mg/L ，对苯二酚浓度为2.30mg/L ，加标回收率试验、精密度试验和稳定性试验结果表明，该检测方法准确可靠。
【关键词】高效液相色谱法；含量；酚类化合物Determination of Phenolic Compounds in Wastewater by HPLCZHANG De-jin 1,2,WANG Jun-he 1,XIE Yong 1,2,ZHU Jun 1,LI Sha-sha 1,ZHANG Ping-hua 1(1.Suzhou University,Suzhou 234000,China;2.Fine Chemical Product Development Research Institute,Suzhou University,Suzhou 234000,China)【Abstract 】HPLC was employed to determine the contents of resorcinol and hydroquinone simultaneous,the standard curves were used to determine the content of hydroquinone and resorcinol in wastewater,and the method was evaluated by re-covery rate test,precision test and stability test.The results indicated that the linear equation of resorcinol was Y=0.00009X+0.31783and the linear equation of hydroquinone was Y=0.0002X-1.3647.The linear correlation was good.The concentra-tion of resorcinol in wastewater was 6.27mg/L,and the concentration of hydroquinone was 2.30mg/L,the results of recovery rate test,precision test and stability test showed that this method was accurate and reliable.【Key words 】HPLC;content;phenolic compounds 〔中图分类号〕O658〔文献标识码〕A〔文章编号〕1674-3229（2019）01-0059-04[收稿日期]2018-12-11[基金项目]安徽省高校自然科学重点项目（KJ2017A435）；安徽省大学生创新创业训练项目（201710379130）；宿州学院重点科研项目（2017yzd12）[作者简介]张德谨（1989-），男，在读博士研究生，宿州学院化学化工学院助教，研究方向：绿色化工与可再生资源开发。
实验四 高效液相色谱法测定水体中的苯酚及α-萘酚
高效液相色谱法测定水体中的苯酚和α-萘酚一、实验目的1、了解色谱法的分离原理，初步学会使用高效液相色谱仪；2、利用高效液相色谱仪分离测定水体中的苯酚及α-萘酚。
二、实验原理1、色谱法的分离原理溶于流动相中的各待测组分经过色谱柱固定相时，由于各组分与固定相发生作用（吸附、分配、离子吸收、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，达到分离的目的，又称色层法、层析法。
2、高效液相色谱仪使用原理高效液相色谱仪由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成四个系统即高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。
储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
正是根据物质的定性与定量关系，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。
3、苯酚及α-萘酚的分离原理及标准溶液准备对于一些组分比较简单的已知范围的混合物，或无已知物的情况下，可以利用保留值定性。
保留值的大小取决于分配系数之比，即与组分的性质、固定液的性质及柱温有关，与固定液的用量、柱长、流速及填充情况无关。
在一定操作条件下，用对照品配成不同浓度的对照液，定量进样，用峰面积或峰高对对照品的量（或浓度）做校正曲线，求回归方程，然后在相同条件下分析试样，计算含量，这种方法称为校正曲线法。
通常截距近似为零，若截距较大，说明存在一定的系统误差。
本实验，苯酚的波长为270nm，α-萘酚的波长为295nm。
使得两种物质的吸收峰达最大值，最终选定在254nm条件下。
分别配置单样和混合液浓度为100mg/L、80mg/L、60mg/L、40 mg/L、20mg/L标准溶液，分别进样，记录保留时间和出峰面积，用于定性分析。
高效液相色谱法测定酚类物质的探讨
[1] 周 晓 珍,肖 熳.高 效 液 相 色 谱 法 测 定 水 中 六 种酚 类 化 合 物 [J].南 昌 高 专 学 报,2005,1 (56):103-105.
[2] 刘桂明,邓义敏.水 中 苯 酚、五 氯 酚、2,4,6三氯酚 的 高 效 液 相 色 谱 法 [J].云 南 环 境 科 学 ,2005,4(19):59-61.
方法二:流动相为70% 乙 腈—1% (v/v)乙 酸 水 溶液;流速为1ml/min;柱温 箱 温 度 为 35℃;进 样 量 为 10μL,测 定 波 长 在 254nm。 2.2.2 定性标准溶液的配制
本项目旨 在 确 定 碎 煤 加 压 气 化 酚 氨 回 收 水 中 酚类的检验 方 法,因 此,本 实 验 选 择 了 样 品 中 可 能 存在的 20 中 酚 类 物 质,利 用 标 准 物 质 进 行 定 性 分析。
在反相色谱分 析 体 系 中,待 测 的 酚 类 物 质 在 反 向固定 相 和 流 动 相 之 间 进 行 一 定 比 例 的 分 配,此 时,可以通 过 改 变 流 动 相 的 种 类 以 及 组 成 比 例,或 者是流速,来改变或 者 控 制 待 测 物 质 在 色 谱 柱 上 的 保留时间,以达 到 待 测 物 质 有 效 分 离 的 目 的。 通 过 查询文献 发 [2] 现 多 数 采 用 甲 醇 或 者 乙 腈 作 为 流 动 相,而且在流 动 相 中 加 入 1% 的 冰 乙 酸 能 够 有 效 的 改善目 标 物 峰 形 并 且 降 低 峰 宽,获 得 更 好 的 分 离 度。本文 中 选 用 两 种 流 动 相,一 种 是 70% 甲 醇— 1%(v/v)乙酸水溶液,另 一 种 是 70% 乙 腈—1%(v/ v)乙 酸 水 溶 液 。 2.3.2.3 酚类化合物色谱分析结果
高效液相色谱法分离检测废水中酚类物质
高效液相色谱法分离检测废水中酚类物质高效液相色谱法分离检测废水中酚类物质一、实验目的1.掌握高效液相色谱法分离检测有机化合物的原理及操作步骤；2.熟悉水中分离化合物的分离检测方法。
二、实验原理酚类化合物是指芳香烃中苯环上的氢原子被羟基取代所生成的化合物，根据其分子所含的羟基数目可分为一元酚和多元酚。
酚类化合物具有强烈的杀菌作用。
酚是一种中等强度的化学毒物。
低浓度时使细胞变性，高浓度时使蛋白质凝固。
酚类化合物可经皮肤粘膜、呼吸道及消化道进入体内。
低浓度可引起蓄积性慢性中毒，高浓度可引起急性中毒以致昏迷死亡。
采用高效液相色谱法测定酚类化合物可以保持原化合物的组成不变，直接测定，对各种不同取代基的酚类化合物可以同时进行分离和分析，此法具有重现性好，选择性好，灵敏度高，操作简便的优点。
高效液相色谱是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
三、仪器条件1、仪器：高效液相色谱仪、高压泵、紫外光度检测器、六通进样阀、色谱工作站2、试剂：苯酚、甲酚、间苯二酚为分析纯；甲醇为色谱纯；纯水为重蒸水.标准溶液的配制：分别配制苯酚、甲酚、间苯二酚浓度为250 mg/L，甲醇溶液10.0 mg/L。
3、实验条件：色谱柱：C18 柱(4.6 mm ×250 mm，5 μm) ，柱温：28 ℃流动相：甲醇：水= 45:55，流量：1.0 ml·min-1紫外分光检测器：测定波长233、274 nm进样量：20μl四、实验步骤1. 将配制好的流动相于超声波清洗器上脱气15 min 。
2. 根据实验条件，将仪器按照仪器的操作步骤调节至进样状态，待仪器液路和电路系统达到平衡，基线平直时，即可进样。
3. 吸取20μl 标准溶液进样，记录色谱图，重复进样。
4. 检测废水的酚类物质的含量。
高效液相色谱法测定水样中的苯酚.doc
实验三高效液相色谱法测定水样中的苯酚一、实验目的1.1熟悉HPLC仪器的各个部件及熟悉操作方法；1.2掌握应用高效液相色谱法对苯酚的定性、定量分析；1.3掌握水样中苯酚的测定。
二、实验原理HPLC原理高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9´107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
特点1．高压：液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。
一般可达150～350×105Pa。
2. 高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。
高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h 。
3. 高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。
4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。
如荧光检测器灵敏度可达10-11g。
另外，用样量小，一般几个微升。
5.适应范围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。
而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。
对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400 以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的75% ～80% ）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。
据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。
高效液相色谱仪一般分为四个部分：高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。
高效液相色谱法测定水中酚类物质
2017年04月高效液相色谱法测定水中酚类物质景阳贺调（陕西煤业化工集团神木天元化工有限公司，陕西榆林719319）摘要：在淡水资源日益短缺的背景中，水资源污染形势仍然十分严峻。
酚类物质作为一种较为常见且难以处理的污染物，其在淡水资源中的存在极易危害人们的身体健康。
为了改善这种现象，相关环保部门应该加强对河流、湖泊等淡水资源酚类物质含量、种类的测定，以便更加精确地开展水污染治理工作。
本文以某地区河水样本作为研究对象，利用高效液相色谱法对该河水样本中含有的酚类物质进行精确测定和分析。
关键词：高效液相色谱法；测定；酚类物质随着工业的不断发展，水资源污染问题变得越来越明显。
工业生产活动中产生了大量的酚类物质，这些物质通过工业污水、地下水等途径汇入河流、湖泊，对水资源产生污染。
对于作为一种工业化学污染物，酚类物质的存在会对水资源的质量、安全性产生极大影响。
相关环保部门需要通过测定水中酚类物质含量的方式，提出有针对性的处理措施，改善水资源的质量，更好地保障人们的用水安全。
与其他酚类物质测定方法相比，高效液相色谱法在测定水中酚类物质种类、含量方面的应用优势较为明显。
1实验仪器与试剂这里选用Mill 色谱管理软件、2690型分离系统、996型紫外线检测器、Inte 质谱检测器作为测定水中酚类物质的实验仪器。
在实验试剂方面，基于高效液相色谱法的水中酚类物质检测所需的试剂主要包含以下几种：磷酸二氢钾、二甲基苯酚、乙腈、蒸馏水、三氯苯酚、二氯苯酚、四硝基苯酚等。
为了保证酚类物质的检测质量，本研究选用的酚类物质含量全部高于95%[1]。
2样品选择这里以某地区的河水作为样品来源，利用孔径参数为0.45μm 的滤膜对样品进行初步过滤。
将过滤后的河水体积控制在250mL[2]。
当初步处理完成后，利用氢氧化钠溶液提高河水样品的pH 值。
经测定，原河水样品的pH 值为10.45，采用碱溶液将其pH 参数提高为13左右时，停止上述处理；利用流速参数为每分钟10毫升的速度，将pH 值为13的河水样品通过活化好的小柱[3]。
水中酚类化合物(液相色谱法)测定实验报告
水中酚类化合物(液相色谱法)测定实验报告1.进行醇和酚主要化学性质的实验操作。
2.熟练进行水浴加热和点滴板使用的操作。
3.能够较慢地设计出来①伯醇、仲醇与叔醇；②一元醇与多元醇；③醇与酚类物质的辨别方案，并展开实验操作方式。
4.具有严肃和实事求是的科学态度，养成爱护公物，节省试剂的良好品德。
【实验用品】金属钠、无水乙醇、酚酞试剂、仲丁醇、叔丁醇、蒸馏水、卢卡斯试剂、1.5mol/l硫酸、0.17mol/l重铬酸钾溶液、g/l naoh溶液、乙醇、醋酸、48g/l cuso4溶液、甘油、蓝色石蕊试纸、0.1mol/l苯酚溶液、饱和碳酸钠溶液、饱和碳酸氢钠溶液、溴水、0.06mol/l三氯化铁溶液、0.03mol/l高锰酸钾溶液、浓硫酸。
试管、烧杯、酒精灯、玻璃棒、点滴板、广为ph试纸、表面皿。
【实验原理】羟基就是醇的官能团、o－h键和c－o键难脱落出现化学反应；同时，α-h和β-h存有一定的开朗性，使醇能够出现水解反应、消解反应等；而邻多元醇除了具备通常醇的化学性质，由于它们分子中相连羟基的相互影响，具备一些特定的性质，例如甘油能够与cu(oh)2促进作用。
酚类化合物分子中所含羟基，o－h键已出现脱落，在水溶液中能电离出来少量氢离子，并使酚溶液表明弱酸性；－oh受到苯环上大π键的影响，使c－oh键表明一定的活性，极易出现水解反应；而苯环也受到－oh的影响，使苯环上的h的活性进一步增强，极易出现替代反应。
【实验指导】（实验内容、步骤、操作事项）一、醇的化学性质1. 醇钠的生成及水解在潮湿试管中，重新加入无水乙醇1ml，并提一小粒艾盖佩的、用滤纸擦拭的金属钠，观测反应释出的气体和试管与否咳嗽。
随着反应的展开，试管内溶液变小仁和。
当钠全然熔化后，加热，试管内溶液逐渐凝固成液态。
然后几滴搅拌直至液态消失，再提一滴酚酞试液，观测并表述出现的变化。
2. 醇的氧化挑4两支试管，分别重新加入5几滴仲丁醇、叔丁醇和蒸馏水，然后各重新加入10几滴1.5mol/l硫酸和0.17mol/l重铬酸钾溶液，振摇，观测并及时记录发生变化快慢的时间。
超高效液相色谱法快速灵敏检测水中苯酚
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HPLC定量测定水中苯酚类化合物
需要注意的问题
1．操作一定要严格认真 实验原理务必搞清楚。 2.标准曲线一定要画得规范，美观，尽量用满坐标纸。 3.结论的描述要有以下内容： A、用什么方法得到的数据 B、如何做的标准曲线 C、查得未知样品中对苯二酚的含量是多少。
4、分析结束后如果次日或一段时间内不再进行分析，必须用纯 的甲醇将色谱柱封好（一般用甲醇冲洗20分钟）
再 见
四、实验步骤
(一)、实验条件 1、色谱柱：反向 C18---4.6X15cm 2、流动相：甲醇水溶液（甲醇：水=20:80） 流量为1.2ml/min-1 3、紫外检测器：检测波长为270nm 4、进样量：25μl
（二）、具体步骤 1、设定参数表（结束时间10分钟、等浓度洗脱、流速 1.2ml/min、检测波长 270nm） 2、用20%甲醇清洗进样针, 3、进样针吸取不同浓度的对苯二酚标准溶液25ul，进 样后，测得各浓度溶液的峰高和峰面积。 4、 进样针吸取未知样品溶液，以同样的方法测得峰高 和峰面积。 5、以标准物质的峰高或峰面积对浓度作标准曲线 6、以未知样品峰高或峰面积在标准曲线上查出其中对 苯二酚的浓度。
• 我们采用标准曲线法对对苯二酚进行定量 分析。作标准曲线（峰面积为纵 坐标、浓度为横坐标）， • 在标准曲线上查出未知样品中对苯二酚的 浓度。
三、实验仪器与试剂
高效液相色谱仪
（岛津LC-20A ） （岛津LC-20A D） 试 剂： 对苯二酚 20%甲醇 定量标准溶液： 对苯二酚溶液: 含量为40μgml-1、 80μgml-1 120μgml-1 160μgml-1 未知样品液: 对苯二酚（浓度未知）
HPLC定量分析
高效液相色谱法 定量测定水中苯酚类化合物
指导教师：赵建军
一、实验目的
水中苯酚、苯二酚和苯三酚的高效液相色谱分析方法的研究
环境与健康杂志2002年1月第19卷第1期J Environ Healt h ,J anuar y 2002,Vol.19,No.1·64·【技术与方法】文章编号:1001-5914(2002)01-0064-02作者单位:福建省卫生防疫站(福州350001)作者简介:阮国洪(1965-),男,福建省人,主管技师,硕士,从事饮用水及涉水相关产品卫生学检验及安全性评价。
摘要目的建立水环境中苯酚、苯二酚和苯三酚的高效液相色谱分析方法。
方法应用固相萃取(SP E )技术处理样品,反相高效液相色谱法(RP-HPL C )测定酚类化合物。
结果苯酚分析选择波长270nm 、流量0.5ml/min ,测定苯酚线性范围为011～10.0μg /L 、其精密度为01012～0.057、准确度9813%～106%(回收率)、检测限为011μg /L ,从而建立起快速测试水中苯酚的分析方法。
同时对间苯二酚、邻苯二酚、对苯二酚、苯三酚的测定的检测限分别为0111、0113、0111、0114μg /L 。
结论高效液相色谱法测定酚类化合物具有准确度高、灵敏度高、选择性好、操作简便快速的优点。
关键词水;高效液相色谱法;苯酚;苯二酚;苯三酚;测定中图分类号:O652163文献标识码:ADetermination of Phenol ,Benzenediol and Benzenetriol in Water b y Hi g h Perf ormance Li q uid Chromato g ra p h y R U A N Guo-hon g .Fu j i a n Provi nci al Sa nit ation a nd A nti-e p i demic St ation ,Fuz hou 350001Abstract Ob j ective To establish a q uick ,sim p le and hi g h-efficienc y -low-consumin g RP-HPL C met hod to test p henol ,benzenediol and benzenet riol in environmental waters.Methods A pp l y in g SP E technolo gy to t reat ,to se p a 2rate sam p les ,p henolic com p ounds in water were determined b y RP-HPL C.Results The anal y tical conditions for p he 2nol were selected as wave len g t h 270nm and flow rate 0.5ml/min.Linear sco p e ran g ed f rom 0.1to 10μg /L ,p recision ran g ed f rom 0.012to 0.057(RSD ),accurac y ran g ed f rom 98.3%to 106%(recover y rate )wit h detection limit at 0.1μg /L.At t he same time research was done on m-benzenediol (resorcinol )、o-benzenediol (py rocatechol )、p -benzenediol (h y dro q uihone )、benzenet riol wit h detection limit s at 0.11、0.13、0.11、0.14μg /L res p ectivel y .Conclusion This met hod was sim p le and q uick to o p erate.The anal y tical met hods of p henol ,benzendiol and benzenet riol had advanta g es wit h hi g h accurac y 、sensitivit y and selectivit y .K e y words Water ;Hi g h-p erformance li q uid chromato g ra p h y ;Phenol ;Benzenediol ;Benzenet riol ;Determination苯酚是最简单的酚,为无色固体,有特殊气味,显酸性。
水中苯酚、苯二酚和苯三酚的高效液相色谱分析方法的研究
苯 酚是 最 简 单 的 酚 ， 无 色 固体 ， 特 殊 气 味 ， 酸性 酚 含 为 有 显 量 超 过 １ ｇ ０ ｔ ／Ｌ时 可 用演 化 窖量 法 测 定 （ 最 早 期 测 定 酚 类 ｎ 是
纯 水 蒸 馏 器 （ 苏 信 选 仪 器 厂 ） 隔 膜 真 空 泵 ，津 腾” 滤 器 （ 江 ； “ 抽 天 津市 南 开 区 腾达 过 滤 器件 厂 ） ２ ｌ ； ｎ 微孔 滤膜 （ 海浦 东 新 区半 上 岛实业 有 限公 司 净化 器材 厂 ）富 集柱 Ｚ ＲＢ Ｘ（ 迪 马公 司 ） ； Ｏ Ａ Ｇ 。
收 集 后 用 纯 氯 吹气 浓缩 至 １０ｍｌ ． 供测 定用 ， 缩 ｌ ０ 浓 ０倍 。 ０
１ 材料 与 方 法
１３ ４ 色谱 条件 ．
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１ １ 试 剂 甲醇 、 腈 和 四氢 呋 哺均 为色 谱 纯 （七 陆都 实 业 ． 乙 海
作 者单 位 ： 建 省 － 接 站 ｆ 州 ３０ ０ ） 桶 Ｊ ． 幅 ５０ Ｉ 作 者简 彳 ： ｌ （ ９ ５， 见 ， 啦 省 ＾ 主管 技 师 ， ｉ． ｒ 阮 司湛 【６ ． 删 。从 住 ｌ 及 求 涉水 相 关产 Ｉ 学检 验 段 惟 ∽ ￡ 。
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实验四 高效液相色谱法测定水体中的苯酚及α-萘酚
高效液相色谱法测定水体中的苯酚和α-萘酚一、实验目的1、了解色谱法的分离原理，初步学会使用高效液相色谱仪；2、利用高效液相色谱仪分离测定水体中的苯酚及α-萘酚。
二、实验原理1、色谱法的分离原理溶于流动相中的各待测组分经过色谱柱固定相时，由于各组分与固定相发生作用（吸附、分配、离子吸收、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，达到分离的目的，又称色层法、层析法。
2、高效液相色谱仪使用原理高效液相色谱仪由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成四个系统即高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。
储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
正是根据物质的定性与定量关系，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。
3、苯酚及α-萘酚的分离原理及标准溶液准备对于一些组分比较简单的已知范围的混合物，或无已知物的情况下，可以利用保留值定性。
保留值的大小取决于分配系数之比，即与组分的性质、固定液的性质及柱温有关，与固定液的用量、柱长、流速及填充情况无关。
在一定操作条件下，用对照品配成不同浓度的对照液，定量进样，用峰面积或峰高对对照品的量（或浓度）做校正曲线，求回归方程，然后在相同条件下分析试样，计算含量，这种方法称为校正曲线法。
通常截距近似为零，若截距较大，说明存在一定的系统误差。
本实验，苯酚的波长为270nm，α-萘酚的波长为295nm。
使得两种物质的吸收峰达最大值，最终选定在254nm条件下。
分别配置单样和混合液浓度为100mg/L、80mg/L、60mg/L、40 mg/L、20mg/L标准溶液，分别进样，记录保留时间和出峰面积，用于定性分析。
高效液相色谱法-紫外线法测定水中的苯酚含量实验模板
实验题目：高效液相色谱法-紫外法测定水中的苯酚含量一、实验原理苯酚是最简单的酚，为无色固体，有特殊气味，显酸性。
苯酚是有机化工工业基本原料，可通过各种途径对环境水体造成污染，对人类、鱼类以及农作物带来严重危害。
根据国家环保部门有关规定，工作场所苯酚的最高允许质量浓度为5×10-6μg/L，饮用水中为2μg/L，地面水中为0.1mg/L。
苯酚的测量方法有多种，如溴化容量法、比色法、高效液相色谱法等。
但前两种方法分析速度较慢、精度较低，高效液相色谱法是近年来发展起来的一种新技术，具有分析速度快、检测灵敏度高、操作简便、样品用量少等特点。
二、仪器与试剂1、仪器名称及型号Agilent 12002、试剂规格及用量苯酚（分析纯），甲醇（色谱纯），二次蒸馏水三、实验步骤1、开机操作（1）打开电脑进入window XP 画面（2）打开Agilent 1200 各模块电源（3）待各模块自检完成后，双击“联机”图标“进入化学工作站”（4）把流动相放入溶剂瓶中（5）数据采集及分析方法编辑2、标准曲线的制备称取纯苯酚600mg 于100.0ml 容量瓶中，用适量甲醇溶解，用甲醇稀释至刻度。
分别吸取该溶液（单位：ml）0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0于50ml的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。
得到标准系列溶液。
分别采用高效液相色谱-紫外法测定标准溶液，记录色谱峰面积，以浓度为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线。
3、样品分析将水样经过过滤（0.45um滤膜）处理后，测定其峰面积值，根据标准曲线进行定量。
4、关机操作（1）关机前先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统（2）退出化学工作站关闭计算机（3）关闭Agilent 1200各模块电源开关四、实验数据记录及其处理（可另附页）1、标准曲线的绘制及数据处理序号进样量峰面积序号进样量峰面积五、实验结果六、问题与讨论。
高效液相色谱_荧光检测法测定环境水中的苯胺和苯酚
高效液相色谱2荧光检测法测定环境水中的苯胺和苯酚薛科社Ξ1,董发昕2(1.西北大学环境科学系,西安710069;2.西北大学化学系,西安710069摘要:建立了用高效液相色谱荧光检测法同时测定环境水中苯胺和苯酚的分析方法。
色谱柱为Eclipse X DB 2C 8(4.6mm i.d.×150mm ,5μm ,流动相为甲醇2磷酸盐缓冲液(0.1m ol/L 磷酸二氢钾+011m ol/L 磷酸氢二钠,pH 6.87V (甲醇∶V (磷酸盐缓冲液=50∶50,流速110m L/min ,柱温25℃,检测波长0min λex /λem=230/340nm (测定苯胺,3.5min λex /λem =215/300nm (测定苯酚。
测定苯胺的线性范围0.2~120ng ,r =0.9999,检出限0.01ng ;测定苯酚的线性范围0.4~500ng ,r =0.9998,检出限0.02ng ,回收率98.1%~101.2%。
该方法已用于对环境水中苯胺和苯酚的测定。
关键词:高效液相色谱;荧光检测;苯胺;苯酚;环境水中图分类号:O657.6文献标识码:A 文章编号:100020720(20040920036203苯胺是制造染料、药物的主要原料,进入人体后可造成急性或慢性中毒,产生高铁血红蛋白症或神经衰弱、轻度贫血、中毒性皮炎等。
苯酚是有机化工工业的基本原料,可通过多种途径对环境水体造成污染,是对人体和水生生物有害的污染物质。
测定这2种物质的方法有分光光度法[1,2]、荧光光度法[3]、可变角荧光法[4]和高效液相色谱2紫外检测法[5]等。
由于环境样品的物质种类和质量浓度常有很大的变化,特别是废水样品的分析,以上方法有的干扰严重,需要用多种方法和试剂进行分离、操作繁琐、耗时长,有的对这2种物质不能同时测定。
本文以高效液相色谱分离,以高选择性的荧光检测器进行检测,通过选用合适的分离条件,并采用检测波长的时间切换,样品不需要前处理,可对苯胺和苯酚同时测定,所用方法未见报道。
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高 效 液 相 色 谱 荧 光 检 测 法 测 定
环 境 水 体 中 的 苯 酚 的 实 验 研 究
黄尧 ， 王 小文 ， 薛科社 ， 范晓娟
（ 西北大学 城市与环境学 院 ， 陕西 西安 ７ １ ０ １ ２ ７ ）
摘
要： 苯酚毒性 大、 难 降解 ， 是 严重的环境 污染物 ， 同时也是环境监 测的重要 指标 。文章介 绍 了用高效液相
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第３ ８卷第 ７期
２ ０ １ ３年 ７月
环境 科 学 与 管 理
ＥＮＶＩ ＲＯＮＭ ＥＮＴＡＬ Ｓ ＣＩ ＥＮＣＥ ＡＮＤ Ｍ ＡＮＡＧＥＭ ＥＮＴ
Ｖ０ ｌ ＿ ３ ８ Ｎｏ ． ７
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文 章编 号 ： １ ６ ７ ４－６ １ ３ ９ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ７— ０ １ ２ ２— ０ ４
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酚 的线性范 围 ０ ． ２ ０—１ ０ ０ ｍ ＃Ｌ ， ｒ ＝０ ． ９ ９ ９ ３ ， 检 出限 ０ ． １ ｍ ｇ ／ Ｌ 。表 明 该 方 法 适 用 于 对 环 境 水 体 中 苯 酚 的
测 定。
关键词 ： 高效 液相 色谱 ； 荧光检测 ； 苯酚 ； 环 境 水Ａ
ｓ ｕ ｉ ｔ ａ ｂ ｌ ｅ ｏｒ ｆ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｍ ｉ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｐ ｈ ｅ ｎ ｏ ｌ ｉ ｎ ｅ ｎ ｖ ｉ ｒ ｏ ｎ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｌ ｗａ ｔ ｅ ｒ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｓ ．
色谱 荧光检 测法测定环境 水体 中苯酚 的分析方 法。实验条件 ， 色谱柱 Ｖ Ｐ—Ｏ Ｄ Ｓ （ １ ５ ０× ４ ． ６ ｍ ｍ， ５ ｕ ｍ） ： 柱 温
２ ５ ％； 流动相 ： Ｖ （ 甲醇）： Ｖ（ 水 ）＝ ４ ６： ５ ４ ， 检 测 波长为 ｋ ｅ ｘ ／ ｋ ｅ ｍ＝ ２ １ ５ ／ ３ ０ ０ ｎ ｍ， 进样 量 ２ Ｏ ｕ Ｌ 。测 定结 果 ， 苯