实验一 茶多酚总量的测定
茶多酚的测定实验报告
茶中茶多酚的测定
检测时间：2014年3月19日
检测方法：GB/T 8313—2002《茶茶多酚测定》
检测样品：立顿红茶
检测仪器：752W 紫外分光光度计
检测结果：
实验总结：
1.学习提取茶多酚的方法和技术
2、学习溶剂提取法的操作方法和步骤。
3、掌握用分光光度计法测定茶多酚的总量的方法。
茶中的多酚物质能和亚铁离子形成蓝色的络合物，则可以用分光光度法测定其含量。
由于茶多酚易溶于热水，因此本实验要用热水在一定温度下将茶多酚从茶叶提取出来。
食品质量与安全专业生物和化学实验中心。
茶叶茶多酚类物质的测定
实验12 茶叶茶多酚类物质的测定茶多酚是茶叶中的重要品质组成，含量多少与品种、栽培条件、加工方法有关，必须掌握其测定方法。
酒石酸铁比色法，方法简便、快速，重现性好，容易掌握，已列为国家标准方法。
在一定的pH 条件下，酒石酸铁与茶多酚类物质形成蓝紫色或红紫色的络合物，在波长540nm 处比色，在适当的浓度范围内，茶多酚的量与呈色的深浅成正比，可用分光光度法定量。
本实验学习用酒石酸比色法测定茶多酚类物质的方法。
一、试材及用具1．试材 茶叶磨碎试样2．仪器 分光光度计、实验室常规玻璃仪器（三角瓶、漏斗、容量瓶、移液管、量筒等）3．试剂（1）酒石酸铁溶液：称取硫酸亚铁(FeSO 4·7H 2O)1g 与酒石酸钾钠（KNaC 4H 4O 6·4H 2O ）5g ，加水溶解稀释至1L 。
该溶液可稳定10 d 。
（2）pH7.5的磷酸缓冲液 先配制以下两种溶液：a ．1/15mol/L 的磷酸氢二钠溶液 称取11.876g 的Na 2HPO 4·2H 2O ，加水溶解，稀释至1L (若用无结晶水的需称取9.47g ，若用含12个结晶水的需称取23.872g ，其余操作相同)。
b ．1/15mol/L 磷酸二氢钾溶液 称取经110℃烘箱烘2h 后的KH 2PO 4 9.078g ，加水定容至1L 。
取a 液85mL 和b 液15mL 混合后，即为pH7.5的缓冲液。
二、方法步骤1．配制标准溶液称取茶多酚纯品0.2500g ，加水溶解定容至250mL ，混匀，即为每毫升含1mg 茶多酚的标准溶液。
2．绘制标准曲线分别称取标准溶液0.0mL 、0.5mL 、1.0mL 、1.5mL 、2.0mL 于一组25mL 棕色容量瓶中，各加水至5mL ，再加酒石酸铁溶液5mL ，加缓冲液至刻度，混匀后用10mm 比色皿，以试剂空白作参比，于波长540nm 处测定吸光度，绘制出标准曲线。
3．茶汤制备准确称取磨碎试样3g ，加450mL 沸水，在沸水浴中浸提45min ，每隔10min 摇瓶一次，过滤。
实验一 茶多酚总量的测定
实验一茶多酚总量的测定一实验目的茶多酚是茶叶中多元酚物质的总量，具有苦涩味，对茶汤的滋味和茶叶的保健功能有非常重要的影响。
药理学研究表明，茶多酚对心血管系统疾病、癌症等具有一定的防治效果。
因此，检测茶多酚总量对评价茶叶品质具有非常重要的作用，同时对于茶叶深加工产品如茶饮料、茶叶提取物、速溶茶等的品质评判也有重要作用。
福林酚法由于采用没食子酸为标准品，因而其适用范围较宽，不仅可以用于茶叶，而且还可适用于茶叶提取物、茶叶深加工制品等。
而酒石酸亚铁法由于采用经验系数1.957，因而仅适用于茶叶中多酚总量测定，而不适于茶叶提取物制品等其他产品中多酚总量测定。
二实验原理本实验引用国家标准方法《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》（GB/T 8313-2008）中的“方法二茶叶中茶多酚的检测”的方法。
茶叶磨碎样中茶多酚用70%的甲醇在70℃水浴上提取，福林酚试剂（主要成分为磷钨酸和磷钼酸）在碱性条件下氧化茶多酚中-OH基团并显蓝色，最大吸收波长为765 nm，用没食子酸作校正标准，根据标准曲线定量茶多酚。
三实验材料、仪器与试剂1 实验材料：均匀磨碎茶样。
2 仪器：电子天平（感量分别为0.000 1g和0.01g）、分光光度计、恒温水浴锅、低速离心机、移液管、容量瓶（10、100、250、500mL）、10mL离心管、10mL具塞刻度试管。
3 10%福林酚（Folin-Ciocalteu）试剂：将25mL福林酚试剂转移到250mL容量瓶中，用水定容并摇匀，避光储存，现配现用。
4 Na2CO3溶液：按质量浓度7.5%配置，即称取37.50g Na2CO3，加适量水溶解，转移到500mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀。
该试剂在室温下可保存30天。
5 没食子酸标准储备溶液：按1mg/mL（1 000 μg/mL）的浓度现配，即称取0.110g没食子酸（GA，相对分子质量188.14）于100mL容量瓶中溶解，并定容至刻度，摇匀，避光保存。
茶叶中茶多酚含量测定工作方案(精选.)
茶叶中茶多酚含量测定工作方案一、 紫外分光光度法1. 实验原理在一定PH 条件下，酒石酸铁能与多酚类物质反应形成蓝紫色络合物，该络合物在540nm 波长下具有最大吸光度。
用分光光度法测定其含量2. 仪器试剂A. 酒石酸亚铁溶液:称取1.0g 硫酸亚铁(O H FeSO 247•)和5.0 g 酒石酸钾钠(OH KNa O H C 2614144•)，用水溶解并定容至1L （低温保存有效期10天)。
B. PH=7.5 磷酸盐缓冲液1/15mol/L 磷酸氢二钠:称取23.9 g 十二水磷酸氢二钠(O H HPO Na 24212•)，加水溶解后定容至IL 。
1/15 mol/L 磷酸二氢钾:称取经110℃烘干2h 的磷酸二氢钾(42PO KH )9.08 g,加水溶解后定容至1L 。
取上述 1/15mol/L 的磷酸氢二钠溶液85mL 和1/15mol/L 的磷酸二氢钾溶液15mL 混合均匀。
3. 工作步骤1) 试样的制备与测定：称取磨碎茶叶试样0.1g(准确至0.0001g) ，置于小烧杯中，加温水30mL ，溶解冷却，注入100mL 容量瓶中，定容、摇匀、过滤，弃去初滤液约20mL ，剩余的滤液为试液【1】。
取试液【1】 2mL于50mL比色管中，加酒石酸铁10mL摇匀，用PH=7.5的磷酸盐缓冲液定容。
取2mL蒸馏水于50mL比色管中，加酒石酸铁10mL摇匀，用PH=7.5的磷酸盐缓冲液定容作为空白对照，于540nm处用1cm比色皿测定吸光度值。
2)标准系列溶液的配制与测定：称取茶多酚纯品0.2500g，加水溶解定容至250mL，混匀，即为每毫升含1mg 茶多酚的标准溶液。
分别称取标准溶液0.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL于一组50mL比色管中，各加水至10mL，再加酒石酸铁溶液10mL，用PH=7.5的缓冲液定容至刻度，混匀后用1cm比色皿，以试剂空白作参比，于波长540nm处测定吸光度，绘制出标准曲线。
茶叶茶多酚含量的测定
茶叶茶多酚含量的测定上图中的横坐标为每25ml 没食子酸标准液中没食子酸的含量，纵坐标为吸光度值。
样品待测液含量对应关系：25ml 待测液中茶多酚含量=10ml 1/10=0.2g 茶叶中茶多酚总含量的1/100。
由对应关系进行公式推导：茶叶样品中茶多酚含量（%）=浸提液中茶多酚的含量/（样品质量*干物质含量）浸提液中茶多酚的含量=1ml 中茶多酚含量*10ml=10ml 稀释液中茶多酚的含量*10*10ml=25ml 待测液中茶多酚的含量*10*10ml茶多酚含量（%）=A*V*d/(L*m*m1*(10^6)),稀释因子d应该为10。
同时由于：A=K*X+b,所以此公式应该调整为：茶多酚含量（%）=[(A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100A----待测液平均吸光度b----标准曲线公式中的常量，本实验为-0.0134V----浸提液体积本实验为10mld----稀释因子，在以没食子酸含量为横坐标的计算方法中，d=10L----标准曲线斜率m----样品质量，本实验为0.2m1----样品干物质含量，本实验为80%详细过程如下：A1=0.885 A2=0.822 A3=0.784平均光度值A=（A1+A2+A3）/3=0.830将A值带入公式:茶多酚含量（%）= [( A-b)*V*d/(L*m*m1*(10^6))]*100,可以求得茶叶样品中茶多酚的含量=13.5%二、以没食子酸浓度作标准曲线上图中的横坐标为没食子酸标准溶液的浓度，纵坐标吸光度A此时的计算公式推导过程为：茶叶样品中茶多酚含量（%）=0.2g茶叶中茶多酚含量/（0.2*干物质含量）0.2g茶叶中茶多酚的含量为=浸提液浓度*10浸提液浓度=10ml稀释液浓度*10010ml稀释液浓度=25ml待测液浓度*25ml/10ml25ml待测液浓度可以由标准曲线公式：A=L*X+b测得。
综上，可推的计算公式为：茶多酚含量（%）=[(A-b)*V1*d*V/L*m*10^6*m1]*100 A----待测液平均吸光度b----标准曲线公式中的常量，本实验为-0.0134V1----待测液体积，本实验为25mld----稀释因子，本实验为100V----浸提液体积，本实验为10mlL----以浓度为横坐标获得的标准曲线的斜率m----样品干物质含量，本实验为80%m1----样品质量，单位为g。
茶 茶多酚的检测方法
如果符合重复性（5.2）的要求，则取两次测定的算术平均值作为结果。 5.2 重复性 同一样品的两次测定值之差，每 100g 试样不得超过 0.5g。 备注：本方法参考 GB 8313《茶 茶多酚测定》
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A 文件标准用纸
表号:R-0110-002-1A
表号:R-0110-002-1A
名称
4.2.2 测定
茶 茶多酚测定
文件编号:
准确称取上述（4.2.1）试液 1g 左右（精确至 0.001g），注入 25ml 的容量瓶中，加 水 4ml 和酒石酸亚铁溶液（3.1）5ml，充分混合，再加 pH7.5 磷酸缓冲液（3.2）定容至 刻度，用 10mm 比色杯，在波长 540nm 处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度（A）。 5 结果计算 5.1 计算方法和公式 茶叶中茶多酚的含量，以干态质量百分率表示，按下式计算：
茶 茶多酚测定
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1 原理
茶茶多酚测定
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茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。用分光光度法测定其含量。 2 仪器和用具 实验室常规仪器及下列各项： 2.1 分析天平：感量 0.0001g。 2.2 分光光度仪。 3 试剂和溶液 所用试剂应为分析纯（AR），水为蒸馏水。 3.1 酒石酸亚铁溶液： 称取 1g（准确至 0.0001g）硫酸亚铁（GB 664-77）和 5g（准确至 0.0001g）酒石酸 钾钠（GB 1288-81），用水溶解并定容至 1L（溶液应避光，低温保存，有效期一个月）。 3.2 pH7.5 磷酸盐缓冲液： 3.2.1 1/15M 磷酸氢二钠： 称取 23.377g 磷酸氢二钠（GB 1263-77），加水溶解后定容至 1L。 3.2.2 1/15M 磷酸二氢钾： 称取 9.078g 磷酸二氢钾（GB 1274-77），加水溶解后定容至 1L。 取上述 1/15M 的磷酸氢二钾溶液 85ml 和 1/15M 的磷酸二氢钾溶液 15ml 混合均匀。 4 操作方法 4.1 取样 按“茶叶原料验收规范”（文件编号„„„„ ）要求进行取样。 4.2 测定步骤 4.2.1 试液的制备 称取待测茶样（4.1）约 5 克，精确到 0.001 克，置于 500ml 烧杯中，加入 500ml 70 ±2℃蒸馏水，于 70±2℃水浴中加热 60 分钟，期间每 5 分钟搅拌约 15 秒，以脱脂棉过 滤，茶渣及脱脂棉以少量水进行淋洗，稀释至 500g，精确到 0.1g。 生效日期 页 次 1/2 页 序 A 文件标准用纸
绿茶中茶多酚的提取与含量的测定
绿茶中茶多酚的提取与含量的测定一、摘要茶叶是中华民族传统的保健饮品，茶多酚上茶叶只能感最重要的保健活性成分，其含量与茶业质量有密切关系。
茶多酚是茶叶中三十多种多酚类物质的总称，包括儿茶素、黄酮类、花青素和酚酸等四大类物质。
茶多酚的含量占干物质总量的20%～35%。
而在茶多酚总量中，儿茶素约占70%，它是决定茶叶色、香、味的重要成分。
现代茶叶药理学研究表明，茶多酚对防衰延寿、减少抗癌药物的毒副作用有良好的效果。
此外茶多酚还可去脂减肥，降胆固醇，防止动脉粥样硬化，抗血凝等抵抗心血管系统疾病的作用。
本实验旨在对今后人们科学认识茶与科学饮茶起一定指导作用。
关键词：茶多酚、儿茶素、保健饮品、防衰延寿、去脂减肥。
二、正文1、前言：众所周知茶叶是良好的保健饮品，但是那种成分在起作用却不为众人所知或者知之甚少。
本实验通过对对茶叶的提取与含量测定，可使我在校大学生了解茶多酚和儿茶素的保健活性，加深对绿茶的保健作用的认识，更好的了解绿茶的保健作用。
2、实验目的a、学习用酒石酸亚铁显色法测定茶多酚含量的原理和方法b、掌握分光光度计的使用方法和过滤等实验操作的方法c、通过实验测定了解茶叶中多酚类物质的含量3、实验原理a、多酚类物质包括花青苷、黄酮苷、单宁等，具体又可分为若干种。
多酚类物质含有酚羟基，有的还含有羧基，属于极性有机化合物，常用极性溶剂提取，如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、水以及由这些溶剂按比例组成的复合溶剂。
b、本实验茶多酚总量的测定方法为较为简单实用的酒石酸亚铁分光光度比色法。
酒石酸亚铁分光光度比色法原理：过量的酒石酸亚铁与提取液中多酚反应生成稳定的紫褐色络合物，溶液颜色的深浅与溶液中多酚含量成正比。
本实验以儿茶素做标准物质测定绿茶中茶多酚含量。
4、实验设备：水浴锅，分光光度计，锥形瓶，容量瓶（3只1000ml、7个50ml），吸管，漏斗，烧杯四个（2个100ml、2个500ml），电子天平，容量瓶,铁架台，滤纸，玻璃棒，5ml 管两只5、实验材料及试剂a、实验材料：茶叶，儿茶素b、试剂的配制：（1）酒石酸亚铁溶液：称取1.00g硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）和5.00g酒石酸钾钠(C4H4O6NaK·4H2O）,混合后加蒸馏水溶解,定容到1000mL；（2）pH 7.5磷酸盐缓冲液：称取60.20g Na2HPO4·12H2O和5.00g NaH2PO4·12H2O，混合后加蒸馏水溶解,定容到1000mL。
酒石酸亚铁法测定茶多酚
方法一：酒石酸亚铁法测定茶多酚1.适用范围：茶叶、茶粉及其制品，茶饮料等。
2.原理：在茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚性化合物，均称茶多酚。
茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物，可用分光光度法测定其含量。
3.试剂：所用试剂应为分析纯，水为蒸馏水或去离子水。
3.1酒石酸亚铁溶液：称取1g（准确至0.0001）硫酸亚铁，5g酒石酸钾钠（准确至0.0001），用水溶解并定容至1L（低温保存，有效期10天）。
3.2 PH7.5磷酸缓冲溶液：3.2.1 1/15M磷酸氢二钠：称取23.9g十二水磷酸氢二钠，加水溶解后定容至1L。
3.2.2 1/15M磷酸氢钾：称取经110℃烘干2小时的磷酸二氢钾9.08g，加水溶解后定容至1L。
取上述1/15M的磷酸氢二钠溶液85ml和1/15M的磷酸二氢钾15ml混合均匀。
4.仪器及用具：4.1分光光度计4.2磨碎机：由不吸收水分的材料制成；死角尽可能小，易于清扫；使磨碎样品能完全通过孔径600~1000um的筛子。
5.操作步骤：5.1茶叶：5.1.1试样的制备：（紧压茶以外的各类茶）先用磨碎机将少量试样磨碎，弃去，再磨碎其余部分。
如果水分含量太高，不能磨到2.2所规定的细度，必须将样品预先干燥（烘箱不超过100℃为宜）。
待试样冷却后（置干燥器内），再进行磨碎。
5.1.2试液的制备：（1）称取3g（准确至0.001g）磨碎试样于500ml锥形瓶中。
（2）加沸蒸馏水450ml，立即移入沸水浴中，浸提45min。
若水浴无振动装置则每隔10min 摇动一次。
（3）浸提完毕后，冷却后（自然冷却或于自来水流下冷却）将样液转移到500ml容量瓶内，并定容至刻度。
（4）定容后立即常压过滤，弃去初滤液（5ml以上），收集滤液备用。
（所用滤纸为杭州新华纸业有限公司，双圈牌，定量，慢速滤纸）。
5.2茶粉：茶粉试液的制备：称取一定量的样品，用沸蒸馏水450ml冲泡，冷却后用蒸馏水稀释定容至500ml。
茶叶中茶多酚的提取实验报告
茶叶中茶多酚的提取实验报告一、实验目的茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等，具有抗氧化、清除自由基、抗菌消炎、降血脂、抗癌等多种生理活性。
本实验旨在探索从茶叶中提取茶多酚的有效方法，并对提取产物进行定性和定量分析。
二、实验原理茶多酚易溶于水、乙醇、乙酸乙酯等有机溶剂。
本实验采用乙醇作为提取溶剂，利用茶多酚在乙醇中的溶解性，将其从茶叶中提取出来。
然后通过过滤、浓缩、萃取等操作，将茶多酚从提取液中分离纯化。
三、实验材料与仪器1、实验材料茶叶：选用市售的绿茶（如龙井、碧螺春等）。
乙醇：分析纯，浓度为 70%。
氯仿：分析纯。
乙酸乙酯：分析纯。
碳酸钠：分析纯。
2、实验仪器电子天平：精度为 0001g。
恒温水浴锅。
旋转蒸发仪。
离心机。
分光光度计。
布氏漏斗、抽滤瓶、滤纸。
四、实验步骤1、茶叶预处理称取 10g 茶叶，粉碎后过 40 目筛，备用。
2、提取茶多酚将预处理后的茶叶粉末放入 250ml 锥形瓶中，加入 100ml 70%乙醇溶液，在 60℃恒温水浴锅中搅拌提取 1h。
3、过滤将提取液用布氏漏斗抽滤，收集滤液。
4、浓缩将滤液在旋转蒸发仪上减压浓缩至约 20ml。
5、萃取将浓缩液转移至分液漏斗中，加入 20ml 氯仿，振荡萃取 3 次，每次 5min，除去色素等杂质。
然后再加入 20ml 乙酸乙酯，振荡萃取 3 次，每次 5min，收集乙酸乙酯层。
6、干燥将乙酸乙酯萃取液在旋转蒸发仪上减压浓缩至干，得到茶多酚粗品。
7、定性分析显色反应：取少量茶多酚粗品，加入 1%三氯化铁溶液，观察溶液颜色变化。
若溶液变为蓝紫色，说明有茶多酚存在。
紫外吸收光谱：将茶多酚粗品配制成一定浓度的溶液，在分光光度计上测定其在 200-800nm 波长范围内的紫外吸收光谱。
茶多酚在270nm 左右有特征吸收峰。
8、定量分析标准曲线的绘制：准确称取 01000g 没食子酸标准品，用蒸馏水溶解并定容至 100ml，得到 10mg/ml 的没食子酸标准溶液。
茶多酚设计性实验
茶多酚的提取与测定实验目的1、学习提取茶多酚方法和技术。
2、学习溶剂提取法的操作方法和步骤。
3、掌握用分光光度计法测定茶多酚的总量的方法。
实验原理茶叶中有诸多保健作用，这与茶叶中富含茶多酚，咖啡因，茶多糖和茶氨酸等有效成分有密切关系。
茶多酚不仅是是构成茶叶色，香，味的主体化学物质，而且是一种理想的天然的食品抗氧化剂，已被列为食品添加剂。
此外，它还具有清除自由基，抗衰老，防辐射，减肥，降血脂，防癌等多方面的功能。
茶多酚在食品加工，医疗保健，日用化工等领域具有广阔的应用前景。
近十年来，国内外特别是我国和日本对探索新的茶多酚提取分离工艺日益关注。
茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
由于茶多酚易溶于热水，因此本实验首先用热水在一定温度下将茶多酚从茶叶中提取出来；然后对茶叶浸提液盐析处理除去部分杂质；再利用某些金属离子与茶多酚形成的络合物在一定pH值下溶解度最低的特性，将茶多酚从浸提液中沉淀出来并高效地与咖啡碱等杂质分离；经过稀酸转溶将茶多酚游离出来后，用对茶多酚具有很好选择性的有机溶剂再次对其进行萃取分离；最后将茶多酚萃取液通过真空浓缩、真空干燥得到茶多酚精品。
实验材料与试剂器材：分析天平：感量0.0001g，540分光光度计，布氏漏斗，真空泵,研磨缸一个，500ml烧杯两个，烘箱，玻璃棒，7支试管，滴管一个，10ml移液管一支，水浴锅。
试剂：蒸馏水，酒石酸亚铁溶液：称取1g (准确至0.0001g) 硫酸亚铁和5g (准确至0.0001g)酒石酸钾钠，用水溶解并定容至1L(溶液应避光，低温保存，有效期一个月)。
pH7.5磷酸盐缓冲液：磷酸氢二钾: 称取23.377g磷酸氢二钾，加水溶解后定容至1L。
磷酸二氢钾：称取9.078g 磷酸二氢钾，加水溶解后定容至1L。
取上述磷酸氢二钾溶液85ml和磷酸二氢钾溶液15ml混合均匀。
250ml乙酸乙酯，无水硫酸钠，茶多酚标准溶液的配制：称取纯品0.2500g,加水溶解定容至250mL,混匀,即为每毫升含1mg纯品的标准溶液(mg/mL) 。
茶多酚含量的测定
2、试样测定 用移液管分别移取没食子酸工作液、清水（空白对照）及 测试样各1.0 mL于刻度试管内，在每个试管内分别加入5.0 mL 的福林酚试剂，摇匀。反应3-8 min，加入4.0 mL 7.5%碳酸钠 溶液，加水定容至刻度、摇匀。室温下放置60 min。于765 nm 波长下测定吸光值。
表1 没食子酸标准曲线浓度
中国茶叶生产状况
2018年我国茶园面积4395.6万亩，全国干毛茶产量为261.6万吨，世界 第一；茶叶出口量为36.4万吨，世界第二，国内市场茶叶消费量191.1万吨
产量排名前五位的省份：福建、云南、湖北、四川、湖南；绿茶、黑茶、 红茶、乌龙茶、白茶、黄茶产量分别为172.24万吨、31.89万吨、26.19万吨、 27.12万吨、3.37万吨、0.80万吨。
字得自其汤色红。其性质较温和，且能和各种饮品搭配饮用。 著名的红茶：祁红、滇红、金骏眉、正山小种。
黑茶
黑茶：原来主要销往边区，原料粗老，加工时堆积发酵时
间较长，使叶色呈暗褐色，是藏、蒙、维吾尔等兄弟民族不可 缺少的日常必需品。
云南普洱和湖南安化黑茶就是中国传统的经典黑茶。
乌龙茶
乌龙茶：是一类介于红绿茶之间的半发酵茶。制作时适当
实验材料：绿茶、红茶、黑茶 实验仪器：水浴锅（70℃）、
分析天平（精度0.001 g）、 离心机（3500 r/min）、 分光光度计 化学试剂：甲醇、 碳酸钠（Na2CO3）、 福林酚（1 mol/L）、 没食子酸。
70%甲醇水溶液（v/v）。 10%福林酚（现配）：将20 mL福林酚试剂转移到200 mL容量瓶中， 用水定容并摇匀。 7.5%碳酸钠溶液：称取37.50 g碳酸钠，加适量水溶解，转移至500 mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀（室温下可保存1个月）。 没食子酸标准储备液（1000 μg/mL）：称取0.110 g没食子酸（GA， 相对分子量188.14），于100 mL容量瓶中溶解并定容至刻度，摇匀（现配） 没食子酸工作液：用移液管分别称取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL没食 子酸标准储备液于100 mL容量瓶中，分别用水定容至刻度，摇匀，浓度分 别为10、20、30、40、50 μg/mL。
茶多酚含量测定
植物生理学模块实验指导李玲主编科学出版社茶多酚含量的测定方法（分光光度计法）【实验目的】学习用酒石酸铁比色法测定茶多酚含量的方法，了解茶多酚在植物抗氧化活性中的作用。
【实验原理】茶多酚是一类儿茶素为主体的类黄酮化合物，具有C6—C3—C6碳骨架结构，是一种重要的天然抗氧化性物质。
它是超氧阴离子自由基和羟自由基的强捕获剂，能清除自由基。
本实验介绍用酒石酸铁比色法测定植物组织中的茶多酚含量。
【器材与试剂】1.实验仪器与用具分光光度计、离心机、研钵、水浴锅、移液管、烘箱、具塞三角瓶2.实验试剂0.1mol/L磷酸缓冲液（pH6.8）100μg/ml儿茶素标准液：称取10mg儿茶素，用蒸馏水定容至100ml。
1.5%酒石酸钾铁3.实验材料同抗坏血酸。
【实验操作】1. 称取1g样品，研磨成粉末。
用50ml沸蒸馏水将粉末洗入三角瓶，于沸水浴中浸提20min，过滤，滤渣用50ml蒸馏水同样提取一次，合并上清液，5000g离心15min，取上清液待用。
2.将儿茶素标准溶液稀释成0、20、40、60、80、100μg/ml，分别吸取1ml，加0.1mol/L 磷酸缓冲液3ml，混匀，加1.5%酒石酸钾铁1ml，用分光光度计测定540nm处的OD值，并绘制浓度-OD标准曲线。
3.取样品提取液1ml，按上述同意方法测定540nm处的OD值。
【实验作业】根据公式，计算植物幼叶和成熟叶中茶多酚的含量，分析原因。
茶多酚含量（μg/g鲜重）=C×（提取液总体积×体积稀释倍数）式中，C为从标准曲线中查得提取液中茶多酚含量（μg/ml）。
【注意事项】提取时间过长，所提的茶多酚会发生氧化反应，转化成其他物质，致使一部分茶多酚丢失。
提取时间在1~2h对茶多酚含量的影响不大。
【实验扩展】1.可以从提取容积的选择以及萃取环节等方面，优化从植物组织高效率提取茶多酚含量的方法。
2.根据茶多酚易溶于水、乙醇、乙酸乙酯等性质，本实验用溶剂萃取法从茶叶制备多酚标准品，其方法是：取茶叶粉末，加6倍量沸水提取30min，不断搅拌，过滤。
酒石酸法茶多酚含量测定
二、 仪器与试剂
▪ 仪器：分光光度计、天平、1ml移液枪、100ml容量瓶*6 100ml量筒、100ml烧杯*3、10ml EP管
▪ 试剂： ▪ (1)FeSO4•7H2O 1.000g，含4个结晶水的酒石酸钾钠5.000g ▪ (2) Na2HPO4•12H2O 6.020g ，NaH2PO4•2H2O 0.500g ▪ (3)茶多酚标准品 10mg
0.2
0.4
0.6
0.8
1
坐标轴标题
微克/毫升
线性 (微克/毫升)
1.2
1.4
四、 计算
▪ 茶多酚含量 W=C/1000×100%
W
茶多酚含量%
C
所测吸光度带入标准曲线得到样品中茶l）
▪ （3）儿茶素标准液。称取10mg儿茶素，用蒸馏水定容至10ml， 浓度为1000μg/ml。分别稀释到200、400、600、800μg/ml， 得5个浓度标准品溶液。
▪ 2、 标准曲线：分别吸取1ml标准液，磷酸缓冲液3ml，酒石酸钾 铁1ml混匀，3000转离心10min。吸取上清液3ml加入玻璃比色 皿，用分光光度计测定540nm处的OD值三次求平均值，并绘制 浓度-OD标准曲线。以蒸馏水代替标准品溶液加入同样的试剂作 空白对照。
▪ 3、取提取物10mg，用蒸馏水定容至10ml。取1ml，按上述同 样方法测定540nm处的OD值3次求平均值。以蒸馏水代替样品溶 液加入同样的试剂作空白对照。
标准曲线
坐标轴标题
1200 1000 800 600 400 200
0 0
微克/毫升
y = 840.35x + 24.753 R²= 0.9972
三、 操作步骤
▪ 1、溶液配制
茶多酚总量的测定
结果计算
测试效果
pH对测定结果有影响，在pH6.24时连位羟基和铁起 反应，而邻位几乎不起反应；在pH6.8和8.1时，连 位羟基变化不大，颜色的加深是由邻位羟基引起的。 低于pH7.0，酒石酸铁和索伦逊缓冲液会形成乳状 混浊液干扰比色结果。
酒石酸铁主要与茶多酚中的邻位羟基和连位羟基功 能团呈色，而对间位羟基和单羟基不呈色，而且与 连位羟基呈色能力比与邻位羟基呈色强3倍。由于 不同种类茶叶的多酚组成不完全相同，对酒石酸铁 的显色强度也有差异。
pH7.5的索伦逊缓冲液：
pH7.5的索伦逊缓冲液
先配制以下两种溶液
（1） 1/15M的Na2HPO4溶液：称取Na2HPO4.2H2O 11.876 克，加水溶解并稀释至1 L。 （2） 1/15M的KH2PO4溶液：称取经110℃ 烘干2 h 的KH2PO4 9.078克，加水溶解并稀释至1 L。
取溶液（1）85 ml和溶液（2）15 ml混匀，
主要仪器
分光光度计，恒温水浴，分析天平。
测定方法
茶汤制备：准确称取磨碎试样3 克，加450 毫升沸 水，在沸水浴中浸提 45分钟，每隔10 分钟摇瓶一 次，过滤。洗涤残渣，滤液合并于500毫升容量瓶 中，冷却后加水定容至刻度，摇匀。 测定：准确吸取茶汤1 毫升，注入25 毫升容量瓶 中，加水4 毫升、酒石酸铁溶液5 毫升，用缓冲溶 液定容至刻度，混匀。用10 mm比色皿，以试剂 空白作参比，于波长 540 nm处测吸光度，根据经 验系数求得茶汤中茶多酚含量。
茶多酚总量的测定
─酒石酸铁比色法
制作人：汪小钢
实验目的
茶多酚是茶叶中多元酚类物质的总称，具有苦 涩味，对茶叶的品质有非常重要的影响。此外， 药理学试验表明，茶多酚对心血管疾病、癌症 等具有一定的防治效果。因此，检测茶叶中多 酚类物质总量对评价茶叶的品质具有非常重要 的作用。
茶多酚的含量
酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量1．原理根据酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色配合物。
配合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比，因此可以用比色方法测定。
该法可避免高锰酸钾滴定法所产生的人为视觉误差。
在一定的操作条件下，光密度为1.00时，供试液中茶多酚浓度为7.826mg/mL 。
2．仪器和试剂仪器：水浴、分光光度计、三角烧瓶、容量瓶、吸管、滴瓶等。
试剂：酒石酸铁溶液、pH7.5的磷酸缓冲溶液。
3．操作步骤（1）样品溶液的制备方法准确称取茶叶麻碎样品1g ，于200 mL 三角烧瓶中，加入沸水80 mL ，在沸水浴中浸提30min ，然后过滤、洗涤，滤液倒入100 mL 容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至刻度，摇匀，备用。
（2）测定吸取样品溶液1 mL 于25 mL 容量瓶中，加蒸馏水4 mL ，加酒石酸铁溶液5 mL ，摇匀，再加入pH7.5磷酸缓冲液稀释至刻度。
以蒸馏水代替样品溶液加入同样的试剂作为空白。
选择540nm 波长和0.5cm 的比色杯测定光密度。
4．结果计算1001000826.7⨯⨯⨯⨯=mV T A x 式中：x ——茶多酚含量，%；A ——样品溶液的光密度值；T ——样品溶液总量，mL ；V ——吸取的试剂量，mL ；m ——样品质量，g 。
5．注意事项磷酸缓冲液在常温下容易生长霉菌，以冷藏为宜。
酒石酸铁与茶多酚反应时，因连苯酚比邻苯酚显色强，所以没食子酸酯类儿茶素显色深，凡是此类儿茶素含量比例大的，显色就较深。
因此酒石酸铁比色法与高锰酸钾滴定法两者测定的结果会有所出入。
食品中锡的测定1．原理样品经消化后，在弱酸性溶液中，四价锡离子与苯芴酮形成微溶性橙红色配合物，在保护性胶体存在下，与标准系列比较定量。
2．仪器和试剂（1）仪器分光光度计（2）试剂酒石酸溶液（100g/L）；抗坏血酸溶液（10g/L）；动物胶溶液（5g/L）；酚酞指示液（10g/L）；氨水（1+1）；硫酸（1+9）；苯芴酮溶液（0.1g/L）；锡标准储备液（1.0mg/ mL）；锡标准使用液（10.0μg/ mL）。
茶多酚的含量测定
茶多酚的含量测定高锰酸钾直接滴定法目的：掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作原理茶叶中茶多酚易溶于热水，在用靛红作指示剂的情况下，样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。
根据消耗1mL 0.318g/mL的高锰酸钾相当于5.82mg茶多酚的换算系数，可计算茶多酚的含量。
仪器与试剂仪器：分析天平、电动磁力搅拌器、电热水浴锅、500mL白瓷皿。
试剂：1、0.1%靛红溶液：称取靛红1g加入少量水搅匀后，再慢慢加入相对密度为1.84的浓硫酸50mL，冷却后用蒸馏水定容至1000mL，如果靛红不纯，可下法磺化处理是：称取靛红1g，加浓硫酸50mL，在80℃烘箱或水浴中加热磺化4~6h，用蒸馏水定容至1000mL，过滤后贮于棕色瓶中。
2、0.630%草酸溶液：准确称取草酸6.3034g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
3、高锰酸钾标准溶液：称取AR的高锰酸钾1.27g，用蒸馏水溶解后定容至1000mL。
准确吸取0.630%草酸溶液10mL，放入250ml锥形瓶中（平行3份），加入蒸馏水50mL，再加入相对密度为1.84的浓硫酸10mL，摇匀，在70~80℃水浴中保温5分钟，取出后用高锰酸钾进行滴定。
开始慢滴，待红色消失后再滴第二滴，以后可逐渐加快，边滴边摇，待溶液出现淡红色保持1分钟不变即为终点。
计算高锰酸钾溶液的百分比浓度。
测定步骤1、供测试液的准备：准确称取茶叶磨碎样品1g，放在250mL锥形瓶中，加入沸蒸馏水80mL，在沸水浴中浸提30分钟，然后抽滤、洗涤，滤液倒入100mL容量瓶中，冷至室温，最后用蒸馏水定容至100mL，摇匀。
2、测定：取200ml蒸馏水放入白瓷皿中，加入0.1%靛红溶液5mL，再加入供测试液5mL，开动磁力搅拌器，用已标定的高锰酸钾溶液边搅拌边滴定，滴定速度以1滴/s为宜，接近终点时应慢滴。
直到溶液由深蓝色转变为亮黄色为止，记下消耗的高锰酸钾毫升数。
茶多酚实验报告
茶多酚实验报告摘要：茶多酚是一种天然的生物活性物质，具有抗氧化、抗菌、抗炎、降血压等多种功效，对预防心血管疾病、癌症等疾病有一定的作用。
本实验采用鞣酸法测定茶多酚含量，并比较了不同茶叶的茶多酚含量差异。
实验结果表明，绿茶中的茶多酚含量高于红茶和乌龙茶。
关键词：茶多酚、鞣酸法、绿茶、红茶、乌龙茶一、实验目的：1. 了解茶多酚的特性和生物活性。
2. 学习鞣酸法测定茶多酚含量的原理和方法。
3. 比较不同茶叶茶多酚含量的差异。
二、实验原理：鞣酸法是一种测定茶多酚含量的经典方法。
该方法是利用茶多酚与鞣酸在酸性环境下形成复合物的性质来测定其含量。
在酸性条件下，茶多酚分子中的羟基与鞣酸分子中的羟基发生氢键作用，形成不溶于水的复合物，被沉淀于底物。
通过测定沉淀物的重量，即可计算出茶多酚含量。
三、实验步骤：1. 取一定量的绿茶、红茶、乌龙茶，分别置于一研钵中。
2. 加入少量的研磨剂，研磨至茶叶粉末状。
3. 取相等质量的茶叶粉末，加入 20 ml 的 0.1 N 盐酸溶液，放置 30 min。
4. 过滤，去掉滤液中的杂质，留下茶多酚沉淀物。
5. 用蒸馏水洗涤沉淀物，干燥至恒重。
6. 将沉淀物称重，记录其重量，计算出茶多酚含量。
茶多酚含量（%）=（沉淀物重量/样品重量）×100四、实验结果：实验结果如下表所示：茶叶茶多酚含量（%）绿茶18.42红茶12.36乌龙茶14.56根据实验结果可知，不同茶叶的茶多酚含量存在明显差异，其中绿茶的茶多酚含量最高，为 18.42%，红茶和乌龙茶的茶多酚含量分别为 12.36% 和 14.56%。
1. 茶多酚是茶叶中的一类天然多酚化合物，具有抗氧化、抗菌、抗炎、降血压等多种生物活性。
2. 鞣酸法可以测定茶多酚含量，通过与鞣酸在酸性条件下形成复合物的性质来测定其含量。
饮料中茶多酚含量的测定共19页
二、实验原理
• 茶叶中的多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色 络合物，用分光光度计法测定其含量。
三、药品与仪器
仪器：分析天平、分光光度计、 锥形瓶、烧杯 试剂：酒石酸亚铁溶液、PH为7.5的磷酸缓冲 液（磷酸氢二钠溶液和磷酸氢二钾溶液）。
国家标准绿茶饮料中茶多酚的含量≥600mg/kg.
七、注意事项
• 1、使用分光光度计前，需要开机预热30分钟。 • 2、测定样品时，样品室盖开盖时要调零，盒盖时调100
%。
1、最灵繁的人也看不见自己的背脊。——非洲 2、最困难的事情就是认识自己。——希腊 3、有勇气承担命运这才是英雄好汉。——黑塞 4、与肝胆人共事，无字句处读书。——周恩来 5、阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。——培根
本次使用的较透明的样液，直接摇匀后备用即可。
四、实验步骤
+5mL
试样5mL
测定试样的吸光度
+4mL蒸馏水
酒 石 酸 亚 铁溶 液
用PH=7.5的缓冲溶液定容至25mL
四、实验步骤
四、实验步骤
四、实验步骤
四、实验步骤
四、实验步骤
四、实验步骤
五、实验结果计算
茶多酚的含量 X (A 1 A 2 ) 1 .9 5 2 K 7 10 m 0 /L g 0 L
式中： X——样品中茶多酚的含量(mg/L) A1——试液显色后的吸光度 A2——试液底色的吸光度 K——稀释倍数 L——测定时吸取样液的体积(mL) 1.957——用10mm比色皿，当吸光度等于0.50时，1ml中茶多
酚的含量相当于1.957mg
六、实验结论
一测多评法测定茶饮料中咖啡因、茶多酚总量及其5种主要组分的含量
一测多评法测定茶饮料中咖啡因、茶多酚总量及其5种主要组分的含量李玉红，陈 佳*，韦志超，于喆源（张掖市质量检验检测研究院，甘肃张掖 734000）摘 要：目的：建立茶饮料中咖啡因、茶多酚总量、儿茶素、没食子酸、表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯和表没食子儿茶素的一测多评法。
方法：采用HPLC法，以咖啡因为内参物，计算茶多酚总量，其余5种多酚物质的相对校正因子，并考察相对校正因子的稳定性，比较外标法和一测多评法对茶饮料中7个指标的测定结果。
结果：6种被测物质的相对校正因子分别为儿茶素0.34、没食子酸1.41、表儿茶素0.86、表没食子儿茶素没食子酸酯0.80、表没食子儿茶素1.53、茶多酚总量133.91。
相对校正因子在不同含量样品下的RSD为2.95%～8.78%，均小于10%，稳定性良好。
一测多评法和外标法所得茶饮料中7个指标的含量在统计学上无明显差异。
结论：建立的一测多评法准确、可靠，可为茶饮料的质量控制提供参考。
关键词：茶饮料；色谱法；一测多评；茶多酚；咖啡因Determination of Caffeine, Total Amount of Tea Polyphenols and Their Five Main Components in Tea Beverages by Using a One Test Multiple Evaluation MethodLI Yuhong, CHEN Jia*, WEI Zhichao, YU Zheyuan(Zhangye Quality Inspection and Testing Institute, Zhangye 734000, China) Abstract: Objective: To establish a method for the determination of caffeine, total amount of tea polyphenols, catechin, gallic acid, epicatechin, epicatechin gallate and epicatechin in tea beverages. Method: HPLC was used to calculate the total amount of tea polyphenols and the relative correction factors of other 5 polyphenols, and to investigate the stability of the relative correction factors. The results of 7 indexes in tea beverage were compared between external standard method and one test and multiple evaluation method. Result: The relative correction factors of the 6 tested substances were catechin 0.34, gallic acid 1.41, epicatechin 0.86, epicatechin gallate 0.80, epicatechin 1.53, and total tea polyphenols 133.91, respectively. RSD of relative correction factors in different samples ranged from 2.95% to 8.78%, all of which were less than 10%, indicating good stability. There was no significant difference in the contents of 7 indexes in tea beverages obtained by one test and multiple evaluation method and external standard method. Conclusion: The established method is accurate and reliable, and can provide reference for the quality control of tea beverage.Keywords: tea beverage; chromatography; one test with multiple evaluations; tea polyphenols; caffeine茶文化在我国拥有悠久的历史和丰富的内涵，作为世界上最大的茶叶生产国，我国茶资源十分丰富。
茶多酚提取综合试验(1)
茶叶提取茶多酚综合实验一、实验目的1）熟悉酒石酸亚铁法测定茶多酚含量；2）掌握天然植物中提取活性物质的实验方案设计及操作方法；3）熟练掌握各种实验操作的正确方法；4）熟悉数据处理及科技论文的写作方法。
二、实验原理茶多酚是一类以儿茶素类为主体的多酚类化合物，由于其酚性羟基易氧化而提供质子H ＋，而具有抗氧化和消除自由基作用，是一种理想的天然抗氧化剂。
含醇羟基的有机溶剂对植物多酚具有良好的溶解性，而含水的有机溶剂对多酚的溶解能力比纯有机溶剂大，这是因为含水有机溶剂可破坏多酚分子间的氢键从而减弱了多酚间的缔合，有利于多酚的溶出。
二、试验仪器及药品BS210S 电子分析天平 722分光光度仪 KQ-5200超声波振荡器RE-52D 旋转蒸发器 粉碎机试验原料：苏州碧螺春绿茶（2008年春制取，冰箱保存）.... ....三、试剂与溶液配制1.标准溶液的配制：精确称取没食子酸乙酯（100℃烘干燥1h ）25mg ，水溶解，定容至25mL 容量瓶中，作为标准溶液。
2．酒石酸铁溶液称取硫酸亚铁（GB 664）1.0g ，酒石酸钾钠（GB 1288）5.0g ，加水溶解并定容至1L ，可稳定10天。
3．pH7.5的磷酸缓冲液a 液： 1/15mol/L 的磷酸氢二钠溶液：称取磷酸氢二钠（GB 1263）23.877g ，加水溶解并稀释至1L 。
b 液： 1/15mol/L 的磷酸二氢钾溶液：称取经110℃烘干2h 的磷酸二氢钾（GB 1274）2.2695g ，加水溶解至250mL 。
c 液：.取a 液85mL 和b 液15mL 混匀，即得pH7.5的缓冲液。
四、试验方法（一）分析方法多酚类物质能与亚铁离子生成紫蓝色络合物。
用分光光度法测定其含量。
虽然各种儿茶素的呈色度不同，但茶多酚中的儿茶素组成范围大致相同，在此范围内，对吸光度的影响不大，故用一条标准曲线即可。
此标准曲线与没食子儿茶素没食子酸酯的标准曲线一致，但因没食子儿茶素没食子酸酯不易得到，故用没食子酸乙酯。
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实验一茶多酚总量的测定
一实验目的
茶多酚是茶叶中多元酚物质的总量，具有苦涩味，对茶汤的滋味和茶叶的保健功能有非常重要的影响。
药理学研究表明，茶多酚对心血管系统疾病、癌症等具有一定的防治效果。
因此，检测茶多酚总量对评价茶叶品质具有非常重要的作用，同时对于茶叶深加工产品如茶饮料、茶叶提取物、速溶茶等的品质评判也有重要作用。
福林酚法由于采用没食子酸为标准品，因而其适用范围较宽，不仅可以用于茶叶，而且还可适用于茶叶提取物、茶叶深加工制品等。
而酒石酸亚铁法由于采用经验系数1.957，因而仅适用于茶叶中多酚总量测定，而不适于茶叶提取物制品等其他产品中多酚总量测定。
二实验原理
本实验引用国家标准方法《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》（GB/T 8313-2008）中的“方法二茶叶中茶多酚的检测”的方法。
茶叶磨碎样中茶多酚用70%的甲醇在70℃水浴上提取，福林酚试剂（主要成分为磷钨酸和磷钼酸）在碱性条件下氧化茶多酚中-OH基团并显蓝色，最大吸收波长为765 nm，用没食子酸作校正标准，根据标准曲线定量茶多酚。
三实验材料、仪器与试剂
1 实验材料：均匀磨碎茶样。
2 仪器：电子天平（感量分别为0.000 1g和0.01g）、分光光度计、恒温水浴锅、低速离心机、移液管、容量瓶（10、100、250、500mL）、10mL离心管、10mL具塞刻度试管。
3 10%福林酚（Folin-Ciocalteu）试剂：将25mL福林酚试剂转移到250mL容量瓶中，用水定容并摇匀，避光储存，现配现用。
4 Na2CO3溶液：按质量浓度7.5%配置，即称取37.50g Na2CO3，加适量水溶解，转移到500mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀。
该试剂在室温下可保存30天。
5 没食子酸标准储备溶液：按1mg/mL（1 000 μg/mL）的浓度现配，即称取0.110g没食子酸（GA，相对分子质量188.14）于100mL容量瓶中溶解，并定容至刻度，摇匀，避光保存。
6 没食子酸工作液：用移液管分别移取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL的没食子酸标准储备溶液于100mL容量瓶中，分别用水定容至刻度，摇匀，浓度分别为10、20、30、40、50μg/mL。
四实验步骤
1 茶样含水率测定按GB/T 8303-2002进行。
2 供试液的制备
（1）母液制备称取0.2g（精确至0.000 1g）茶样于10 mL离心管中，加入在70℃水浴锅
中预热过的70%的甲醇溶液5mL，用玻璃棒充分搅拌均匀湿润，立即移入70℃水浴锅中，
浸提10 min，期间搅拌两次，浸提后冷却至室温，转入离心机在3 500r/min转速下离心10 min，将上清转移至10 mL 容量瓶。
残渣再用5mL的70%甲醇溶液提取一次，重复以上操作。
合并提取液定容至10mL，摇匀备用。
此提取液在4℃下至多可保存24 h。
（2）测试液制备移取母液1.0 mL于100 mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，待测。
3 测定
（1）测定用移液管分别移取系列没食子酸工作液、水（作空白对照用）及测试液各1.0 mL 于10 mL具塞刻度试管内，在每个试管内分别加入5.0 mL10%福林酚试剂，摇匀。
反应
3~8 min内，加入4.0mL 7.5% Na2CO3溶液，摇匀。
室温下放置60 min。
用10 mm比色皿，在765 nm波长条件下用分光广度计测定吸光度（A）。
（2）标准曲线制作根据没食子酸工作液的吸光度（A）与各工作溶液的没食子酸浓度，制作标准曲线。
以没食子酸浓度（μg/mL）为横坐标，对应的吸光度（A）为纵坐标，求得线性回归方程和相关系数。
五数据处理
1 计算方法比较试样和标准工作液的吸光度，按下式计算。
茶多酚含量（%）=[（A×V×d）×100]÷( SLOPE Std×m×106×w)
式中 A----样品测试液吸光度；
V----样品提取液体积（10 mL）；
d----稀释因子（通常为1 mL稀释成100 mL，则其稀释因子为100）；
SLOPE Std----没食子酸标准曲线的斜率；
w----样品干物质含量（%）；
m----样品质量（g）。
2 重复性同一样品的两次测定值之差，每100g试样不得超过0.5g，若测定值相对误差
在此范围内，则取两次测定值的算术平均值为结果，保留小数点后一位。
3 注意事项样品吸光度应在没食子酸标准工作曲线的校准范围内，若样品吸光度高于50μg/mL浓度的没食子酸标准工作溶液的吸光度，则应重新配置高浓度没食子酸标准工作
液进行校准。
六实验准备物品清单
每个标准班按30人计算，两人一组，共15组。
本次实验需实验室准备物品及数量如表
1-3所示。
表2 需准备仪器
表3 需准备玻璃器皿。