制备培养基的步骤.

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知识点:制备培养基的步骤
情境一:培养基制作技术 任务一:培养基制备步骤
课程:微生物检验技术
制备培养基的步骤
一、制备培养基的步骤
1.称量
按照培养基配方,准确称量各成分放于烧杯中。对于wk.baidu.com是粉状的成分(如 肉膏),用烧杯直接称量。
2. 调配
向烧杯中加入适量的水,搅拌,溶解。 如配制固体培养基,在琼脂熔化时,需不断搅拌,并控制火力不要使培养基 溢出或烧焦。待完全熔化后,补足所失水分。 如果配方中含有淀粉,先将淀粉用少量冷水调成糊状并在火上加热搅拌,然 后加足水分及其他药品,待完全熔化后补足所失水分。
6.灭菌
塞棉塞,包扎,灭菌。 高压蒸汽灭菌,普通培养基为121℃、20min,以保证灭菌效果和不损伤 培养基的有效成份。 培养基经灭菌后,如需要作斜面固体培养基,则灭菌后立即摆放成斜面, 斜面长度一般以不超过试管长度的1/2为宜;半固体培养基灭菌后,垂直冷凝 成半固体深层琼脂。
3.调节pH值
培养基溶解均匀并冷却至室温时,用pH试纸测pH,然后按要求加酸或碱 (一般用1mol/L盐酸或氢氧化钠)要缓慢少量且多加搅拌,培养基配方为自然 pH时,不用调节。
4.过滤
用滤纸或多层纱布过滤。
5.分装
将制好的培养基分装入试管内或三角瓶内,管(瓶)口塞上棉塞。固体培养 基要趁热装。
分装时要避免培养基粘染管(瓶)口,引起污染。分装量如下: ①斜面:装量为管长的1/4-1/5。 ②液体培养基、高层培养基(固体培养基的一种)、半固体培养基:装载量不超 过管长的1/3。 ③三角瓶:装量不超过容积1/2。
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