人凝血因子8分离纯化工艺分析

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相关背景
性质
结构
内容
六个结构域， 结构复杂
分子量
等电点 血浆含量 半衰期
330KD
4.3左右 0.1-0.2μg/ml 12h
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相关背景
原材料：人新鲜冰冻血浆 主要杂质：人纤维蛋白原、人纤维结合蛋白、白蛋白、其他凝血因子等
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02 分离纯化工艺
关键步骤：
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02 分离纯化工艺
冷沉淀中所含杂质： 杂质 人纤维蛋白原 人纤维结合蛋白 白蛋白 FⅨ FⅡ FⅦ FⅩ 分子量 340KD 450KD 67KD 56KD 72KD 50KD 59KD 等电点 5.2-5.6 5.5左右 4.7-4.9 4.0-4.6 4.1 4.0-4.6 4.1-4.6
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02 分离纯化工艺
2. 乙酸缓冲液调节pH —— 等电点沉淀法
调节温度为15℃，pH6.3左右 去除等电点较高的人纤维白蛋白和人纤维结合蛋白
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02 分离纯化工艺
3.Al(OH)3 吸附 —— 吸附分离法 （负吸附） 使用Al(OH)3 作为吸附剂，通过预实验确定铝胶含量为12%。由于该吸附剂为两性离子，在pH7.1 （预实验确定）左右时带正电，易于吸附小分子酸性蛋白，去除F Ⅸ、F Ⅱ、F Ⅶ、F Ⅹ 等
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02 分离纯化工艺
4. DEAE 650M 弱阴离子交换凝胶 —— 离子交换层析 固定层析过程为pH7.0,通过调节缓冲液盐浓度来改变蛋白结合能力，进行洗脱。 梯度洗脱方案：
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02 分离纯化工艺
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02 分离纯化工艺
5. 病毒灭活 （1）S/D处理法 灭活脂包膜病毒 （2）100℃ 30min 干热灭活法灭活非脂包膜病毒
The Preparation Procedure of Human Coagulation Factor ⅷ
人凝血因子 ⅷ 的分离纯化工艺
制作人：龙益如 班级：144092
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相关背景
FⅧ
FⅨ
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相关背景
人凝血因子Ⅷ是人血浆中一种非常重要的凝
血因子，其缺失或缺乏会引起不同程度的甲型血
友病——一种连锁隐性遗传的出血性疾病，严重 时甚至会危及患者的生命。甲型血友病是一种终 生性疾病，目前仍没有根治的方法，只能通过输 注产品进行替代性治Procedure of Human Coagulation Factor ⅷ
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制作人：龙益如 班级：144092
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