阿魏酸钠对大鼠创伤性脑损伤的实验
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实验动物及分组 健康成年 SD 雄性大鼠 80 只, 体重 ( 250 ± 30 ) g, 由辽宁医学院试验动物中心提供 。 将 80 只大
鼠随机分为 4 组, 每组 20 只: Ⅰ 假手术组: 仅做头皮切口, 开 颅骨窗不致脑损伤; Ⅱ模型组: 腹腔注射同计量的生理盐水; Ⅲ小 剂 量 阿 魏 酸 钠 组 ( 5mL / ㎏ ) ; Ⅳ 大 剂 量 阿 魏 酸 钠 组 ( 10mL / ㎏) 。 1. 2 药品与主要试剂 阿魏酸钠粉针剂由成都制药一厂生 4℃ 保存备 产, 用双蒸馏水配成 5 ㎎ / mL 和 10 ㎎ / mL 溶液, 用; 丙二醛( MDA ) 试剂盒购于南京建成生物试剂有限公司
第 20 卷第 2 期 2012 年 2 月
中国医学工程 China Medical Engineering
Vol. 20 No. 2 Feb, 2012
·临床研究·
阿魏酸钠对大鼠创伤性脑损伤的实验研究
蔡长寿, 刘兴波
( 辽宁医学院附属第一医院, 辽宁
摘要: 目的 制。方法
锦州 121001 )
研究阿魏酸钠( SF) 对大鼠脑创伤后氧自由基和内皮素的影响, 探讨 SF 对脑损伤的保护机
组别 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 0. 05 。 脑组织含水量 ( %) 72. 96 ± 0. 45 85. 53 ± 0. 39 a 82. 75 ± 0. 32 ab 79. 66 ± 0. 24 abc MDA ( mmol / mL) 1. 05 ± 0. 17 10. 54 ± 0. 36 a 8. 37 ± 0. 24 ab 5. 29 ± 0. 27 abc ET ( pg / mL) 55. 65 ± 4. 83 137. 41 ± 7. 59 a 97. 92 ± 3. 69 ab 76. 84 ± 2. 60 abc
关键词: 创伤性脑损伤; 阿魏酸钠; 内皮素; 丙二醛; 自由基 R651. 15 文献标识码:
B
TBI ) 是神经外科 创伤性脑损伤 ( traumatic brain injury, 最常见的疾病之一, 由于易伤及中枢神经系统, 其致死率和 致残率均较高。目前颅脑损伤的原因主要为交通事故 、 建筑 工伤等。颅脑损伤的发生率不断增长, 所以国内外学者脑损 伤的保护 性 治 疗 与 其 作 用 机 制 做 了 大 量 研 究 。 阿 魏 酸 钠 ( Sodium Ferulate) 为非肽类内皮素受体拮抗剂, 具有良好的 抗氧化、 清除自由基等多种药理作用 。 本实验通过脑损伤早 MDA 含量 观察大鼠大脑皮层含水量 、 期给予阿魏酸钠治疗, 及血浆中 ET 的含量的变化, 从而探讨 SF 对创伤性脑损伤的 。 保护机制 1 1. 1 材料与方法
试剂盒说明执行。 1. 5 统计学处理 试验数据以均数 ± 标准差( x ± s ) 表示, 由 SPSS 13. 0 统计软件完成。两组样本间比较采用方差分析 及 t 检验。以 P < 0. 05 为差异具有显著性意义 。 2 结果 MDA 含量和 表 1 结果所示, 相对于 Ⅰ 组, 各组含水量、 血浆内 ET 含量明显升高 ( P < 0. 05 ) 。 阿魏酸钠治疗组组 ( ⅢⅣ) 相比于Ⅱ组脑组织含水量、 MDA 含量和血浆内 ET 含 P < 0. 05 , 量明显降低( P < 0. 05 ) 。 Ⅲ 与 Ⅳ 相比较, 说明不同 剂量阿魏酸钠对创伤性脑损伤的治疗也有显著差异 。 SF 对创伤性脑损伤大鼠脑组织含水量 、 丙二醛含量和 见附表。 血浆内 ET 浓度的变化, 、 附表 脑组织的含水量 丙二醛和内皮素含量的比较( x ± s)
收稿日期: 2011 - 12 - 26
注: 与Ⅰ组对比 ap < 0. 05 ; 与Ⅱ组对比 bp < 0. 05 ; 与 Ⅲ 对比 cp <
备脑组织匀浆作 MDA 检测。 1. 4. 1 脑组织含水量的测定( 干湿重法) 取 0. 1g 左右脑组 织, 电子分析天平称其湿重后, 放入温度达 105℃ 的电热恒温 干燥箱 24 h, 然后称干重, 计算公式: 脑组织含水量: ( 湿重一 干重) / 湿重 × 100% 。 1. 4. 2 MDA 及 ET 含量测定 采用硫代巴比妥酸法检测 MDA 含量、 放射免疫法检测血浆 ET 浓度; 具体操作方法按
ET 放免试剂盒, 购自北京科美东雅生物技术有限公司 。 1. 3 模型建立 SD 大鼠 80 只适应性喂养 3d 采用改良的 Feeney 氏法 自 由 落 体 撞 击 来 制 作 运 动 功 能 损 伤 模 型 。 用 10% 水合氯醛( 3. 5mL / kg) 行 SD 大鼠腹腔注射麻醉, 麻醉完 全后将大鼠俯卧位固定于动物实验台常规消毒铺巾 。 矢状 分离骨膜, 暴露前囟、 冠状缝、 矢状缝及顶 正中线切开头皮, 骨。于矢状缝旁开 2. 5mm 冠状缝后 1. 5 mm 钻一骨孔, 咬除 颅骨扩大骨窗为 5. 0mm, 显露硬脑膜。在硬脑膜上放置一与 骨孔大小吻合的垫片以 25g 重的砝码, 自 30cm 高处自由落 造成左侧大脑半球脑挫裂伤 。 假脑外伤组除不 体撞击垫片, 予以撞击外, 其余操作相同, 其他各组均进行上述手术操作 。 在模型制作过程中均使用头灯加热保持动物肛温于( 37. 0 ± 0. 5℃ ) 。 1. 4 样本处理 脑损伤 4 h 后将动物断头取血, 测血浆内 ET 含量。取挫裂伤灶邻近 0. 1 cm 范围内前后大脑皮质 250 mg 以干湿法作含水量检测 。 另取一块约 250 mg 脑组织制
采用自由落体撞击伤方法制作创伤性脑损伤模型 。致伤后 5min 腹腔注射 SF, 测定脑损伤后 4h 大 MDA 含量及血浆 ET 含量。结果 创伤性脑损伤大脑皮质含水量增高 、 MDA 含量及血浆 ET 含 脑皮质含水量、 SF 治疗组上述情况明显改善 。结疗有效, 对于大鼠创伤性脑损伤, 可能与其减少 ET 释放、