人CD45分子检测试剂盒(流式细胞仪法-FITC)
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采集不少于 500ul 的新鲜人骨髓样本到无菌的 EDTA，枸橼酸钠或肝素 钠抗凝的样本管中，样本采集后室温（18-25℃）放置 6 小时内或 2-8℃冰 箱保存 24 小时内检测，样本如有微生物污染、乳糜、凝集、溶血或细胞活 力不达标准等，应避免使用，如样本有不可替代性，则应说明处理该种样 本的方法，并应在结果报告时明示。每管检测需样本 100μl（约含细胞 1× 106 左右），如样本中细胞浓度特别高或低，用户需根据样本实际情况调整， 其它标本需用户自行摸索最佳用量。用户如果使用了可能对细胞活性造成 一定影响而导致活性细胞的比例降低的样本处理方法，需用胎盘蓝染色计 数死活细胞数，处理后的样本中活性细胞比例至少在 80%以上才可进行后 续的检测。样本在完成抗体标记后，放置 2-8℃冰箱内避光保存，需在 24 小时内上机分析。 【检验方法】
本试剂用于体外流式细胞仪半定量检测经 EDTA、枸橼酸钠或肝素钠 抗凝的骨髓细胞表面 CD45 分子的表达。
CD45 的荧光强度结合测向角可以用于流式细胞仪检测时设门，准确找 到白血病细胞群，然后进行细胞免疫分型表达分析。
用 CD45 与侧向角（side scatter,SSC），对数取样后可将骨髓细胞清晰地 分出淋巴细胞，单核细胞，成熟粒细胞，幼稚细胞和红细胞群，其理论依 据是 CD45 是所有白细胞的抗原。其表达量在淋巴细胞最高，单核细胞， 成熟粒细胞，早期造血细胞（blasts）依次减弱。红细胞（中，晚幼红细胞， 成熟红细胞）不表达 CD45[1-3]。SSC 反映细胞的颗粒性，成熟粒细胞 SSC 最高，依次为单核细胞，淋巴细胞，早期造血细胞，红细胞。以 CD45/SSC 双参数，对数取样时即可把各细胞群区分出来。若同时加上一个，二个甚 或三个荧光标记的单抗，则很容易识别非正常细胞群所表达的抗原。这样 可以排除正常细胞的干扰。在幼稚细胞百分率低的情况下或检测残存白血 病时尤为必要 。
1%BSA 和 0.05%NaN3。
抗体特异性
CD45
克隆号
HI30
杂交瘤细胞
SP2/0 x BALB/c
免疫原
正常人周血单个核细胞和人扁桃体细胞
亚类
IgG1
物种
小鼠
来源
腹水
纯化方式
蛋白 G 亲和层析
偶联的荧光素
FITC（异硫氰酸）
荧光激发波长及发射波长 激发波长 488nm，发射波长 525nm
实验必需但本试剂盒不提供的物品：
产品中可能存在轻微的沉淀，为试剂本身的生物学特性所致，不影响 产品使用。如出现明显沉淀或其它外观改变，请谨慎使用。 【适用仪器】 BD Calibur 和 BD CantoII 型（BD FACSDiva 软件）流式细胞仪。 BD CellQuest™ Pro 软件版本 5.2.1 B来自百度文库 FACSDivaTM 软件版本 v6.1.3 【样本要求】
5.首先做两个图，第一个图是 FSC-SSC 散点图，第二个图是 CD45-FITC 和 SSC 的散点图。 6. 先看第一张图，调整 FSC、SSC 电压和 FSC 阈值，使活细胞群位于图中 合适的位置，并圈定为 P1 群，排除细胞碎片。再看第二张图，让第二张图 显示 P1 门内的细胞群，调整相应荧光电压，使得淋巴、单核、粒细胞、幼 稚细胞和有核红细胞群分群清晰。对以上细胞群分别画门，逐个进行数据 分析。 7. 所有条件保持不变，依次记录所有实验组样本管数据，分析统计结果。
异硫氰酸（FITC）标记小鼠抗人 CD45 单克隆抗体试剂是一种流式细胞 仪用试剂，主要用于白血病分型诊断时，应用流式细胞术 CD45/SSC 设门进 行急性白血病免疫分型[4]。
通过使用本品检测 CD45+细胞，只作为辅助判断白血病的免疫分型， 其百分率高低与白血病的具体类型、发病、疾病进程和预后并无直接关系， 需要临床医师根据病人的临床表现及其他检查结果综合做出判断。 【检验原理】
骨髓标本： 1. 取 2 支流式细胞仪用检测管，加入 100μl 抗凝骨髓标本，再分别加入 20μl 同型对照和本试剂，室温（18-25℃）避光孵育 15-30 分钟。 2. 分别加入溶血素 2ml，振荡混匀，室温（18-25℃）避光孵育 10 分钟。 3. 300g 离心 5 分钟，弃上清，加入 2ml 磷酸盐缓冲液重悬细胞沉淀，充分 振荡混匀。 4. 300g 离心 5 分钟，弃上清，加入 300μl 磷酸盐缓冲液重悬细胞沉淀，4℃ 避光 2 小时内上机检测。如果需要延时检测（2 小时以上），则需要使用含 1%多聚甲醛的磷酸盐缓冲液 300μl 重悬细胞沉淀，置 2-8℃冰箱避光保存， 但固定保存时间不可超过 24 小时。
CD45 阳性细胞的百分率，从而可以实现白血病分型辅助诊断。
本产品与待测标本孵育，经溶血、洗涤等必要步骤后，流式细胞仪检
测，根据同型对照设定的背景基值，测得 CD45 阳性细胞在所测细胞群体中
的百分比。
【主要组成成份】
产品主要组成成份为 FITC 标记的鼠抗人 CD45 单克隆抗体、pH7.0 的 PBS、
小鼠抗人 CD45 单克隆抗体试剂可以特异性结合细胞表面的 CD45 分子，
其上连接的 FITC 荧光素在 488nm 激光的激发下可以发射 525nm 的发射光。
当某一细胞通过流式细胞仪被检测到具有此 525nm 特异光信号，就可以确
定该细胞表面表达 CD45 分子。对某一细胞群体进行该项检测，可以确定
人 CD45 分子检测试剂盒（流式细胞仪法-FITC） 说明书
【产品名称】 通用名称：人 CD45 分子检测试剂盒（流式细胞仪法-FITC） 英 文 名 称 ： FITC labeled human CD45 detecting reagent (for flow cytometry) 【包装规格】 50 人次/盒 【预期用途】
·样本采集管、
·自动加样器及不同规格的加样枪头（20μl，200μl 和 1ml）
·流式细胞仪检测管
·溶血素
·同型对照品
·缓冲液（pH7.0 的 PBS）
·离心机
·涡旋振荡器
·流式细胞仪
【储存条件及有效期】
1/3
2-8℃，避光保存，效期稳定性 12 个月，开封稳定性 4 个月，运输稳 定性能够适应在-18℃至 37℃的外部环境中 5 天的运输过程。
本试剂用于体外流式细胞仪半定量检测经 EDTA、枸橼酸钠或肝素钠 抗凝的骨髓细胞表面 CD45 分子的表达。
CD45 的荧光强度结合测向角可以用于流式细胞仪检测时设门，准确找 到白血病细胞群，然后进行细胞免疫分型表达分析。
用 CD45 与侧向角（side scatter,SSC），对数取样后可将骨髓细胞清晰地 分出淋巴细胞，单核细胞，成熟粒细胞，幼稚细胞和红细胞群，其理论依 据是 CD45 是所有白细胞的抗原。其表达量在淋巴细胞最高，单核细胞， 成熟粒细胞，早期造血细胞（blasts）依次减弱。红细胞（中，晚幼红细胞， 成熟红细胞）不表达 CD45[1-3]。SSC 反映细胞的颗粒性，成熟粒细胞 SSC 最高，依次为单核细胞，淋巴细胞，早期造血细胞，红细胞。以 CD45/SSC 双参数，对数取样时即可把各细胞群区分出来。若同时加上一个，二个甚 或三个荧光标记的单抗，则很容易识别非正常细胞群所表达的抗原。这样 可以排除正常细胞的干扰。在幼稚细胞百分率低的情况下或检测残存白血 病时尤为必要 。
1%BSA 和 0.05%NaN3。
抗体特异性
CD45
克隆号
HI30
杂交瘤细胞
SP2/0 x BALB/c
免疫原
正常人周血单个核细胞和人扁桃体细胞
亚类
IgG1
物种
小鼠
来源
腹水
纯化方式
蛋白 G 亲和层析
偶联的荧光素
FITC（异硫氰酸）
荧光激发波长及发射波长 激发波长 488nm，发射波长 525nm
实验必需但本试剂盒不提供的物品：
产品中可能存在轻微的沉淀，为试剂本身的生物学特性所致，不影响 产品使用。如出现明显沉淀或其它外观改变，请谨慎使用。 【适用仪器】 BD Calibur 和 BD CantoII 型（BD FACSDiva 软件）流式细胞仪。 BD CellQuest™ Pro 软件版本 5.2.1 B来自百度文库 FACSDivaTM 软件版本 v6.1.3 【样本要求】
5.首先做两个图，第一个图是 FSC-SSC 散点图，第二个图是 CD45-FITC 和 SSC 的散点图。 6. 先看第一张图，调整 FSC、SSC 电压和 FSC 阈值，使活细胞群位于图中 合适的位置，并圈定为 P1 群，排除细胞碎片。再看第二张图，让第二张图 显示 P1 门内的细胞群，调整相应荧光电压，使得淋巴、单核、粒细胞、幼 稚细胞和有核红细胞群分群清晰。对以上细胞群分别画门，逐个进行数据 分析。 7. 所有条件保持不变，依次记录所有实验组样本管数据，分析统计结果。
异硫氰酸（FITC）标记小鼠抗人 CD45 单克隆抗体试剂是一种流式细胞 仪用试剂，主要用于白血病分型诊断时，应用流式细胞术 CD45/SSC 设门进 行急性白血病免疫分型[4]。
通过使用本品检测 CD45+细胞，只作为辅助判断白血病的免疫分型， 其百分率高低与白血病的具体类型、发病、疾病进程和预后并无直接关系， 需要临床医师根据病人的临床表现及其他检查结果综合做出判断。 【检验原理】
骨髓标本： 1. 取 2 支流式细胞仪用检测管，加入 100μl 抗凝骨髓标本，再分别加入 20μl 同型对照和本试剂，室温（18-25℃）避光孵育 15-30 分钟。 2. 分别加入溶血素 2ml，振荡混匀，室温（18-25℃）避光孵育 10 分钟。 3. 300g 离心 5 分钟，弃上清，加入 2ml 磷酸盐缓冲液重悬细胞沉淀，充分 振荡混匀。 4. 300g 离心 5 分钟，弃上清，加入 300μl 磷酸盐缓冲液重悬细胞沉淀，4℃ 避光 2 小时内上机检测。如果需要延时检测（2 小时以上），则需要使用含 1%多聚甲醛的磷酸盐缓冲液 300μl 重悬细胞沉淀，置 2-8℃冰箱避光保存， 但固定保存时间不可超过 24 小时。
CD45 阳性细胞的百分率，从而可以实现白血病分型辅助诊断。
本产品与待测标本孵育，经溶血、洗涤等必要步骤后，流式细胞仪检
测，根据同型对照设定的背景基值，测得 CD45 阳性细胞在所测细胞群体中
的百分比。
【主要组成成份】
产品主要组成成份为 FITC 标记的鼠抗人 CD45 单克隆抗体、pH7.0 的 PBS、
小鼠抗人 CD45 单克隆抗体试剂可以特异性结合细胞表面的 CD45 分子，
其上连接的 FITC 荧光素在 488nm 激光的激发下可以发射 525nm 的发射光。
当某一细胞通过流式细胞仪被检测到具有此 525nm 特异光信号，就可以确
定该细胞表面表达 CD45 分子。对某一细胞群体进行该项检测，可以确定
人 CD45 分子检测试剂盒（流式细胞仪法-FITC） 说明书
【产品名称】 通用名称：人 CD45 分子检测试剂盒（流式细胞仪法-FITC） 英 文 名 称 ： FITC labeled human CD45 detecting reagent (for flow cytometry) 【包装规格】 50 人次/盒 【预期用途】
·样本采集管、
·自动加样器及不同规格的加样枪头（20μl，200μl 和 1ml）
·流式细胞仪检测管
·溶血素
·同型对照品
·缓冲液（pH7.0 的 PBS）
·离心机
·涡旋振荡器
·流式细胞仪
【储存条件及有效期】
1/3
2-8℃，避光保存，效期稳定性 12 个月，开封稳定性 4 个月，运输稳 定性能够适应在-18℃至 37℃的外部环境中 5 天的运输过程。