植物组织培养技术实验指导
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3.能正确说出本次实验应注意的地方。
二、实验内容1．配制洗涤液。
2.分类洗涤：新购置的玻璃器皿的洗涤，使用过的玻璃器皿的洗 涤，污染瓶的洗涤，移液管、容量瓶、量筒等量具器皿的洗涤。
三、实验器材与试剂
（一）器材 具体包括：待洗的移液管、吸管、量筒、量杯、容量瓶等量具； 新购和用过的培养皿、 璃器皿；污染瓶（管） 筐等。
植物组织培养技术实验指导
马铃薯生产与加工教研室编写
生化系
2013.09
实验实训一 组培实验室的识别与设计 实验实训二 组培常用设备仪器的使用 实验实训三
玻璃器皿及用具的洗涤
3..
4..
6..
实验实训四 实验实训五 实验实训六 实验实训七 实验实训八 实验实训九 实验实训十 实验实训十
MS培养基母液的配制
1. 学习操作蒸馏水器；
2.学习使用、
3.学习使用、
4.学习使用、
5.学习使用、
6.学习使用、操作手提式解剖镜；
7.学习使用、操作离心机；
8.学习使用、操作量筒、容量瓶、吸管、移液管；
9.学习使用、操作精密pH4~7试纸。
五、作业 将实验整理成实验报告
一、技能要求
1.能清楚理解玻璃器皿洗涤的标准；
2.能按照程序争取进行玻璃器皿的洗涤，不但要求操作快，而且 要求达到洗涤标准；
作用：常用以浸洗除去普通油污，通常需要用热的溶液。黑色焦 油、硫可用加热的浓碱液（如浓NaOH）溶液洗去。
2.重铬酸钾-硫酸洗液
称取重铬酸钾40gT慢慢加入约50C的80~100ml蒸馏水中，边
搅拌边让它溶解（为了加速溶解，还可加热到约95C）7待稍冷却
后7加入工业用浓硫酸900~1000ml（用玻璃棒引流），刚开始加入时， 速度要缓慢（因为浓硫酸会迅速释放出溶解热，导致溶液激烈沸腾， 甚至会溅到脸上， 烫伤皮肤）7待倒入的浓硫酸不再激烈沸腾和冒浓 雾时，就可加速倒入浓硫酸7搅拌均匀7装瓶7贴上标签。
2.盛装器皿，具体包括试剂瓶、 烧杯、计量器皿、量筒、容量瓶、 吸管、移液管
3.其他器皿，具体包括滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等 实验室常用器皿。
4.金属器械
镊子类：20~25cm长形镊子（接种或转移愈伤组织） 、尖端弯曲 的枪形镊子（夹取较小的植物组织） 、尖头钟表镊子和鸭嘴镊子（剥 离表皮用）、尖端为小铲状镊子（挖取带琼脂培养基的培养物） 。
放在移液管架或工作台上，垂直晾干，容量瓶置于工作台上，自然晾 干。
2. 新购玻璃器皿的洗涤方法 具体流程如图所示。
3. 使用过的玻璃器皿的洗涤方法 具体流程如下图所示
6.1mol L-1盐酸溶液
用1mol L-1盐酸溶液即可除去附在容器底部或壁上的铁锈、二氧 化锰、碳酸钙等物质。
（二）分类洗涤 根据洗涤对象不同，需分类洗涤。
1.移液管、吸量管、小量筒和容量瓶的洗涤 将小量筒和容量瓶灌满重铬酸钾-硫酸洗液，或将吸量管、移液 管浸泡在重铬酸钾-硫酸洗液中7第二天用竹夹子取出，或将容量瓶 和小量筒中的重铬酸钾-硫酸溶液倒回到洗液瓶中7流水冲洗这些玻 璃器皿至洁净7用蒸馏水冲洗1~3次，然后将吸量管、 量筒等分别倒
5.碱性高锰酸钾洗液
取4g高锰酸钾溶于少量水后，加入100ml10%的NaOH溶于混 匀后装瓶备用。
该洗液呈紫红色， 有强碱性和氧化性，能浸洗去除各种油污。洗 后若仪器壁上面有褐色二氧化锰， 可用盐酸、 稀硫酸或亚硫酸钠溶液 洗去。
该洗涤液与重铬酸钾-硫酸洗液一样，可反复使用若干次，直至 碱性及紫红色消失为止。
MS固体培养基的配制与灭菌
试管苗的茎段转接（继代培养）
试管苗叶片接种
茎尖、茎段外植体接种培养 .. 外植体叶片接种培养
生根培养
驯化
1..0
1. 4
1. 6
1..8
.2.0
2..2
.2.ຫໍສະໝຸດ Baidu4
2..5.
实验实训十二 微茎尖脱毒培养 实验实训十三 花器官的培养 .. 实训十四 胚和种子培养
.2..7
.2..8
.3..0
一、实训目标
能够正确识别组培实验室及育苗工厂的基本组成并能叙述其主 要功能。
二、实训内容 通过参观或观看组培实验室和育苗工厂的录像， 掌握实验室的基 本结构和各区的主要功能。
三、实验器材和试剂 准备设计平面图所需的铅笔、红蓝记号笔、尺、纸、橡皮等文具 用品或直接用CAD软件进行组培实验室和育苗工厂的设计和绘图。
3.苯、二甲苯、丙酮溶液
用于浸洗除去小件异形仪器， 如活栓孔、吸管及滴定管的尖端等。
4.1％~2％稀盐酸
以配制100ml该溶液为例，先量取97ml蒸馏水于烧杯中，再吸 取35%浓盐酸3ml，立即释放到装有97ml蒸馏水的烧杯中，搅拌均 匀即可。
该溶液主要用于清洗刚购买的玻璃器皿， 它能中和新玻璃器皿上 的游离碱和金属氧化物。
还包括：晾干架、 分析天平、水池（槽）
料桶、烧杯（300ml、500ml、1000ml）、容量瓶（200ml、500ml、1000 ml）、量筒（5ml、10ml、
（二）试剂 具体包括：重铬酸钾、 高锰酸钾、无水乙醇（或
四、实验（实训）步骤
（一）洗涤剂的配制
1.强碱洗液
配制5%~10%的NaOH溶液（或NaCO3、N^POq溶液）
解剖刀和刀类： 眼科用刀、种牛痘疫苗的菱形刀（切割柔软组织 中的小细胞团）、解剖刀（手术刀）、双面刀片焊接在玻棒上（切取茎
尖用）、锋利小刀、大刀和小铁锹。 剪刀类：解剖剪、眉剪、眼科剪、10~25cm弯头剪、修枝剪。 接种针
四、实验内容与步骤 教师讲解并示范后， 指导学生正确地按规程进行下列设备仪器的 操作使用：
3.天平，包括药物天平、粗天平（1/10）、分析天平（精密度1/10000）
4.超净工作台
5.电热干燥箱（烘箱）
6.恒温光照培养箱
7.电冰箱
8.显微镜和解剖镜，包括手提式解剖镜、立体解剖镜和普通显微 镜
9.离心机（学习、使用、操作）
（二）必要的器皿、器械
1.玻璃器皿，具体包括试管、三角烧瓶（锥形瓶） 、培养瓶（罐 头瓶）、培养皿、凹面载玻片
四、实验内容和步骤 在教师带领下对组培实验室的各个分区进行参观， 并讲解其功能 或观看录像，然后自己动手设计实验室。
一、实训目标
认识植物组织培养必需的仪器、 器皿，掌握几种主要设备的使用 方法。
二、实训内容 植物组织培养必需仪器的使用
三、实验器材与试剂
（一）常用仪器
1.蒸馏水器
2.手提式高压消毒锅、立式高压消毒锅
二、实验内容1．配制洗涤液。
2.分类洗涤：新购置的玻璃器皿的洗涤，使用过的玻璃器皿的洗 涤，污染瓶的洗涤，移液管、容量瓶、量筒等量具器皿的洗涤。
三、实验器材与试剂
（一）器材 具体包括：待洗的移液管、吸管、量筒、量杯、容量瓶等量具； 新购和用过的培养皿、 璃器皿；污染瓶（管） 筐等。
植物组织培养技术实验指导
马铃薯生产与加工教研室编写
生化系
2013.09
实验实训一 组培实验室的识别与设计 实验实训二 组培常用设备仪器的使用 实验实训三
玻璃器皿及用具的洗涤
3..
4..
6..
实验实训四 实验实训五 实验实训六 实验实训七 实验实训八 实验实训九 实验实训十 实验实训十
MS培养基母液的配制
1. 学习操作蒸馏水器；
2.学习使用、
3.学习使用、
4.学习使用、
5.学习使用、
6.学习使用、操作手提式解剖镜；
7.学习使用、操作离心机；
8.学习使用、操作量筒、容量瓶、吸管、移液管；
9.学习使用、操作精密pH4~7试纸。
五、作业 将实验整理成实验报告
一、技能要求
1.能清楚理解玻璃器皿洗涤的标准；
2.能按照程序争取进行玻璃器皿的洗涤，不但要求操作快，而且 要求达到洗涤标准；
作用：常用以浸洗除去普通油污，通常需要用热的溶液。黑色焦 油、硫可用加热的浓碱液（如浓NaOH）溶液洗去。
2.重铬酸钾-硫酸洗液
称取重铬酸钾40gT慢慢加入约50C的80~100ml蒸馏水中，边
搅拌边让它溶解（为了加速溶解，还可加热到约95C）7待稍冷却
后7加入工业用浓硫酸900~1000ml（用玻璃棒引流），刚开始加入时， 速度要缓慢（因为浓硫酸会迅速释放出溶解热，导致溶液激烈沸腾， 甚至会溅到脸上， 烫伤皮肤）7待倒入的浓硫酸不再激烈沸腾和冒浓 雾时，就可加速倒入浓硫酸7搅拌均匀7装瓶7贴上标签。
2.盛装器皿，具体包括试剂瓶、 烧杯、计量器皿、量筒、容量瓶、 吸管、移液管
3.其他器皿，具体包括滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等 实验室常用器皿。
4.金属器械
镊子类：20~25cm长形镊子（接种或转移愈伤组织） 、尖端弯曲 的枪形镊子（夹取较小的植物组织） 、尖头钟表镊子和鸭嘴镊子（剥 离表皮用）、尖端为小铲状镊子（挖取带琼脂培养基的培养物） 。
放在移液管架或工作台上，垂直晾干，容量瓶置于工作台上，自然晾 干。
2. 新购玻璃器皿的洗涤方法 具体流程如图所示。
3. 使用过的玻璃器皿的洗涤方法 具体流程如下图所示
6.1mol L-1盐酸溶液
用1mol L-1盐酸溶液即可除去附在容器底部或壁上的铁锈、二氧 化锰、碳酸钙等物质。
（二）分类洗涤 根据洗涤对象不同，需分类洗涤。
1.移液管、吸量管、小量筒和容量瓶的洗涤 将小量筒和容量瓶灌满重铬酸钾-硫酸洗液，或将吸量管、移液 管浸泡在重铬酸钾-硫酸洗液中7第二天用竹夹子取出，或将容量瓶 和小量筒中的重铬酸钾-硫酸溶液倒回到洗液瓶中7流水冲洗这些玻 璃器皿至洁净7用蒸馏水冲洗1~3次，然后将吸量管、 量筒等分别倒
5.碱性高锰酸钾洗液
取4g高锰酸钾溶于少量水后，加入100ml10%的NaOH溶于混 匀后装瓶备用。
该洗液呈紫红色， 有强碱性和氧化性，能浸洗去除各种油污。洗 后若仪器壁上面有褐色二氧化锰， 可用盐酸、 稀硫酸或亚硫酸钠溶液 洗去。
该洗涤液与重铬酸钾-硫酸洗液一样，可反复使用若干次，直至 碱性及紫红色消失为止。
MS固体培养基的配制与灭菌
试管苗的茎段转接（继代培养）
试管苗叶片接种
茎尖、茎段外植体接种培养 .. 外植体叶片接种培养
生根培养
驯化
1..0
1. 4
1. 6
1..8
.2.0
2..2
.2.ຫໍສະໝຸດ Baidu4
2..5.
实验实训十二 微茎尖脱毒培养 实验实训十三 花器官的培养 .. 实训十四 胚和种子培养
.2..7
.2..8
.3..0
一、实训目标
能够正确识别组培实验室及育苗工厂的基本组成并能叙述其主 要功能。
二、实训内容 通过参观或观看组培实验室和育苗工厂的录像， 掌握实验室的基 本结构和各区的主要功能。
三、实验器材和试剂 准备设计平面图所需的铅笔、红蓝记号笔、尺、纸、橡皮等文具 用品或直接用CAD软件进行组培实验室和育苗工厂的设计和绘图。
3.苯、二甲苯、丙酮溶液
用于浸洗除去小件异形仪器， 如活栓孔、吸管及滴定管的尖端等。
4.1％~2％稀盐酸
以配制100ml该溶液为例，先量取97ml蒸馏水于烧杯中，再吸 取35%浓盐酸3ml，立即释放到装有97ml蒸馏水的烧杯中，搅拌均 匀即可。
该溶液主要用于清洗刚购买的玻璃器皿， 它能中和新玻璃器皿上 的游离碱和金属氧化物。
还包括：晾干架、 分析天平、水池（槽）
料桶、烧杯（300ml、500ml、1000ml）、容量瓶（200ml、500ml、1000 ml）、量筒（5ml、10ml、
（二）试剂 具体包括：重铬酸钾、 高锰酸钾、无水乙醇（或
四、实验（实训）步骤
（一）洗涤剂的配制
1.强碱洗液
配制5%~10%的NaOH溶液（或NaCO3、N^POq溶液）
解剖刀和刀类： 眼科用刀、种牛痘疫苗的菱形刀（切割柔软组织 中的小细胞团）、解剖刀（手术刀）、双面刀片焊接在玻棒上（切取茎
尖用）、锋利小刀、大刀和小铁锹。 剪刀类：解剖剪、眉剪、眼科剪、10~25cm弯头剪、修枝剪。 接种针
四、实验内容与步骤 教师讲解并示范后， 指导学生正确地按规程进行下列设备仪器的 操作使用：
3.天平，包括药物天平、粗天平（1/10）、分析天平（精密度1/10000）
4.超净工作台
5.电热干燥箱（烘箱）
6.恒温光照培养箱
7.电冰箱
8.显微镜和解剖镜，包括手提式解剖镜、立体解剖镜和普通显微 镜
9.离心机（学习、使用、操作）
（二）必要的器皿、器械
1.玻璃器皿，具体包括试管、三角烧瓶（锥形瓶） 、培养瓶（罐 头瓶）、培养皿、凹面载玻片
四、实验内容和步骤 在教师带领下对组培实验室的各个分区进行参观， 并讲解其功能 或观看录像，然后自己动手设计实验室。
一、实训目标
认识植物组织培养必需的仪器、 器皿，掌握几种主要设备的使用 方法。
二、实训内容 植物组织培养必需仪器的使用
三、实验器材与试剂
（一）常用仪器
1.蒸馏水器
2.手提式高压消毒锅、立式高压消毒锅