考点一基因工程的概念及操作工具

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高中生物基因工程考点精选全文完整版

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可编辑修改精选全文完整版高中生物基因工程考点基因工程专题在高中生物中处于重要的地位,我们在生物考试时会遇到哪些相关考点?下面店铺给大家带来高中生物基因工程考点,希望对你有帮助。

高中生物基因工程考点1. 作为运载体必须具备的特点是:能够在宿主细胞中复制并稳定地保存;具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接;具有某些标记基因,便于进行筛选.质粒是基因工程最常用的运载体,它存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,是能够自主复制的很小的环状DNA分子.2.基因工程的一般步骤包括:①提取目的基因②目的基因与运载体结合③将目的基因导入受体细胞④目的基因的检测和表达.3.重组DNA分子进入受体细胞后,受体细胞必须表现出特定的性状,才能说明目的基因完成了表达过程.4.区别和理解常用的运载体和常用的受体细胞,目前常用的运载体有:质粒、噬菌体、动植物病毒等,目前常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等.5.基因诊断是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子做探针,利用DNA分子杂交原理,鉴定被检测标本的遗传信息,达到检测疾病的目的.6.基因治疗是把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,达到治疗疾病的目的.高中生物基因工程知识点(1)基因工程的概念标准概念:在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组细胞在受体细胞内表达,产生出人类所需要的基因产物.通俗概念:按照人们的意愿,把一种生物的个别基因复制出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状.(2)基因操作的工具A.基因的剪刀——限制性内切酶(简称限制酶).①分布:主要在微生物中.②作用特点:特异性,即识别特定核苷酸序列,切割特定切点.③结果:产生黏性未端(碱基互补配对).B.基因的针线——DNA连接酶.①连接的部位:磷酸二酯键,不是氢键.②结果:两个相同的黏性未端的连接.C.基困的运输工具——运载体①作用:将外源基因送入受体细胞.②具备的条件:a、能在宿主细胞内复制并稳定地保存.b、具有多个限制酶切点.c、有某些标记基因.③种类:质粒、噬菌体和动植物病毒.④质粒的特点:质粒是基因工程中最常用的运载体.(3)基因操作的基本步骤A.提取目的基因目的基因概念:人们所需要的特定基因,如人的胰岛素基因、抗虫基因、抗病基因、干扰素基因等.提取途径:B.目的基因与运载体结合用同一种限制酶分别切割目的基因和质粒DNA(运载体),使其产生相同的黏性末端,将切割下的目的基因与切割后的质粒混合,并加入适量的DNA连接酶,使之形成重组DNA分子(重组质粒)C.将目的基因导入受体细胞常用的受体细胞:大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌、动植物细胞D.目的基因检测与表达检测方法如:质粒中有抗菌素抗性基因的大肠杆菌细胞放入到相应的抗菌素中,如果正常生长,说明细胞中含有重组质粒.表达:受体细胞表现出特定性状,说明目的基因完成了表达过程.如:抗虫棉基因导入棉细胞后,棉铃虫食用棉的叶片时被杀死;胰岛素基因导入大肠杆菌后能合成出胰岛素等.(4)基因工程的成果和发展前景A.基因工程与医药卫生B.基因工程与农牧业、食品工业C.基因工程与环境保护高中生物基因工程核心知识点1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。

2025高考生物总复习基因工程的基本工具和基本操作程序

2025高考生物总复习基因工程的基本工具和基本操作程序

第54讲基因工程的基本工具和基本操作程序课标内容(1)阐明DNA重组技术的实现需要利用限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体三种基本工具。

(2)阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定等步骤。

(3)DNA的粗提取与鉴定实验。

(4)利用聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段并完成电泳鉴定,或运用软件进行虚拟PCR实验。

考点一重组DNA技术的基本工具1.基因工程概述基因工程的理论基础2.重组DNA技术的基本工具(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)①将一个基因从DNA分子上切割下来需要切两处,同时产生四个黏性末端或平末端。

②限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。

(2)DNA连接酶①DNA连接酶连接的是两个DNA片段,而DNA聚合酶是把单个的脱氧核苷酸连接到已有的DNA片段上。

②DNA聚合酶起作用时需要以一条DNA链为模板,而DNA连接酶不需要模板。

(3)载体构建基因表达载体时,需要选择合适的限制酶切割含有目的基因的DNA片段和载体。

已知限制性内切核酸酶Ⅰ的识别序列和切点是,限制性内切核酸酶Ⅱ的识别序列和切点是,根据图示分析回答下列问题:(1)请用图示法写出限制性内切核酸酶Ⅰ和限制性内切核酸酶Ⅱ切割后形成黏性末端的过程。

提示限制性内切核酸酶Ⅰ:限制性内切核酸酶Ⅱ:(2)切割图示中的目的基因和质粒应选用哪类限制酶?请说明理由。

提示用限制酶Ⅱ切割目的基因,用限制酶Ⅰ切割质粒。

限制酶Ⅰ的识别序列包含限制酶Ⅱ的识别序列,因此限制酶Ⅱ也可切割限制酶Ⅰ的位点,故使用限制酶Ⅱ时,可在目的基因两端同时作切割,从而切出“目的基因”,但若使用限制酶Ⅱ切割质粒,会同时破坏质粒中的两个“标记基因”,故只能使用限制酶Ⅰ切割质粒。

1.限制酶的选择原则(1)不破坏目的基因原则:如图甲中可选择PstⅠ,而不选择SmaⅠ。

基因工程基本工具和基本操作程序

基因工程基本工具和基本操作程序

用电场分离DNA片段,根据大小和电荷进行分析。
4
转染
将外源DNA导入目标细胞,通常使用电穿孔或化学方法。
5
筛选
筛选目标细胞中成功转染的细胞,并鉴定其特定特性。
应用案例:植物基因编辑、基因治疗、基 因工程生物制品的生产
植物基因编辑
基因治疗
使用基因工程技术调整植物基因, 提高产量、耐病性和适应性。
通过引入修复基因或抑制异常基 因来治疗遗传性疾病。
基因工程基本工具和基本 操作程序
基因工程的定义与意义。重要工具:限制酶、DNA连接酶、载体。 基本操作 程序:DNA提取、限制酶切、凝胶电泳、转染、筛选、鉴定。 应用案例:植 物基因编辑、基因治疗、基因工程生物制品的生产。未来发展趋势和道德考 虑。
基因工程定义与意义
1 解答生物界之谜
基因工程提供了改变生物 特性的方法,解开了生NA。
载体 (Vector)
用于携带外源DNA进入目标细 胞,如质粒、病毒等。
基本操作程序:DNA提取、限制酶切、凝胶 电泳、转染、筛选、鉴定
1
DNA提取
从生物体中提取DNA,通常使用化学试剂和机械方法。
2
限制酶切
使用限制酶切割DNA,将其分成特定的片段。
3
凝胶电泳
2 促进科学发展
基因工程的研究为其他学 科提供了重要的基础和探 索空间。
3 应用于医学和农业
基因工程技术在医学和农 业领域有广泛的应用,为 人类带来福祉。
重要工具:限制酶、DNA连接酶、载体
限制酶 (Restriction Enzymes)
识别DNA的特定序列并切割, 常用于创造重组DNA。
DNA连接酶 (DNA Ligases)
基因工程生物制品的生产

基因工程的基本工具和操作程序

基因工程的基本工具和操作程序

药物研发
利用基因工程技术研发新 的药物,如基因工程疫苗 和基因编辑药物。
基因工程的伦理和法律问题
基因工程涉及对生命和遗传信息的干预,引发了伦理和法律上的许多争议,如个人隐私、基因歧视、知 情同意等。
总结和展望
基因工程是一项能够改变生命的重大技术,可以为农业和医学带来重要的创 新。然而,我们也要警惕其潜在风险,并加强伦理和法律的管理。
组织培养
利用基因工程技术对植物进行 组织培养,实现无性繁殖、快 速繁殖和种质保存。
生物防治
利用基因工程技术培育具有抗 虫能力的昆虫,实现对农作物 害虫的生物防治。
基因工程在医学领域的应用
基因治疗
利用基因工程技术治疗遗 传性疾病,通过修复或替 代异常基因来恢复正常功 能。
基因诊断
利用基因工程技术检测个 体的基因组信可以将两个DNA 片段连接起来,形成一 个完整的DNA分子。
基因工程的操作程序
1
剪切
使用限制酶剪切DNA链,得到需要的DNA片段。
2
连接
使用连接酶将DNA片段连接成新的DNA分子。
3
转化
将新的DNA分子转化到目标细胞中,使其表达所带有的外源基因。
基因工程在农业领域的应用
转基因作物
通过基因工程技术改变作物的 遗传特性,使其具有抗虫、抗 草药、耐旱等特点。
基因工程的基本工具和操 作程序
基因工程的定义和目的
基因工程是一种通过改变生物体的遗传信息来实现对特定性状的控制的技术。 其目的是改善农业产量、提高医学疗效和推动科学进步。
基因工程的基本工具
1 质粒
2 限制酶
3 连接酶
质粒是一种循环的DNA 分子,可用于携带外源 基因进入目标细胞。

2025人教版高考生物一轮复习课件 第十单元 第61课时 基因工程的基本工具和基本操作程序

2025人教版高考生物一轮复习课件  第十单元 第61课时 基因工程的基本工具和基本操作程序

2025人教版高考生物一轮复习课件第61课时1.概述基因工程是在微生物学、生物化学和分子生物学等学科基础上发展起来的。

2.阐明重组DNA技术的三种基本工具。

3.阐明基因工程的基本操作程序。

课标要求考情分析1.基因工程的基本工具2023·新课标·T6 2021·全国乙·T38 2021·湖北·T72.基因工程的基本操作程序2023·全国乙·T38 2023·全国甲·T38 2023·湖北·T4 2023·广东·T20 2021·广东·T22内容索引考点一 基因工程的基本工具考点二 基因工程的基本操作程序课时精练1.基因工程的概念DNA分子转基因遗传特性生物类型基因重组2.基因工程的诞生和发展(1)肺炎链球菌转化实验不仅证明了DNA 是遗传物质,还证明了DNA 可在同种生物不同个体之间。

(2)DNA 双螺旋结构的提出和的证明。

(3)中心法则的确立。

(4)的破译。

(5)基因转移载体的发现。

的发现为DNA 的切割、连接以及功能基因的获得创造了条件。

转移半保留复制遗传密码限制酶、DNA 连接酶和逆转录酶(6) 体外重组的实现。

(7)重组DNA 表达实验的成功。

(8)DNA 测序和合成技术的发明。

(9) 技术的发明。

(10) 技术可以实现对特定基因的定点插入、敲除或替换。

DNA PCR 基因组编辑3.重组DNA技术的基本工具(1)限制性内切核酸酶(简称“限制酶”)原核生物数千特定核苷酸序列磷酸二酯键磷酸二酯键提醒 ①限制酶的识别序列一般由6个核苷酸组成,少数由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。

②限制酶作用的化学键只能是磷酸二酯键。

③在切割含目的基因的DNA分子时,需用限制酶切割两次此DNA分子,产生4个末端。

只有这样才能使目的基因的两端都有可连接的黏性末端或平末端。

第十单元第36讲基因工程

第十单元第36讲基因工程

据两酶的作用特点, 可 知酶切图谱为 D。
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基础回扣
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1.已知一双链 DNA 分子,用限制酶Ⅰ切 解析 答案 割得到长度为 120 kb(kb:千碱基对) 片段;用限制酶Ⅱ切割得到 40 kb 和 根据题意, 该 DNA 用限 80 kb 两个片段; 同时用限制酶Ⅰ和限 制酶Ⅱ切割时,得到 10 kb、80 kb 和 制 酶 Ⅰ切 割 后长度 不 30 kb 3 个片段。 据此分析该双链 DNA 分子结构及酶切位点情况为 ( D ) 变,故为环状 DNA,根
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解析
答案
2.如图所示为部分双链 DNA 片段, 下列有关基因工程中工具酶功能 的叙述,错误的是 (双选) ( )
限制酶能识别特定的核苷酸序 列,并且能在特定的切点上切 割 DNA 分子,通常形成黏性末 端,即能切割 DNA 链外侧的磷 酸二酯键(图中的 a 处),内侧 碱基对之间的氢键(b 处)可通
考点一 基因工程的概念和基本工具 考点二 基因工程的操作与应用
第36 讲
考点三 蛋白质工程
基因 工程
高考模拟
提能训练
练出高分
考点一
基因工程的概念和基本工具
一、基因工程的概念 1.供体:提供 目的基因 。 2.操作环境: 体外。 3.操作水平: 分子 水平。 4.原理: 基因重组 。 5.受体:表达目的基因。 6.本质:性状在 受体 体内的表达。 7.优点:克服远缘杂交不亲和的障碍,定向改造生物的 遗传性状 。

基因工程-课件ppt

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(7)用于载体的质粒 DNA 分子上至少含一个限制酶识别位点(√ )
(8)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中,使之稳定存在
并表达
(√)
在日常生 活中, 随处都 可以看 到浪费 粮食的 现象。 也许你 并未意 识到自 己在浪 费,也 许你认 为浪费 这一点 点算不 了什么
2.载体需具备的条件及其作用(连线)
对点落实
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1.(2016·全国卷Ⅲ)图(a)中的三个 DNA 片段上依次表示出了
EcoR Ⅰ、BamH Ⅰ和 Sau3AⅠ三种限制性内切酶的识别序列
与 切 割 位 点 , 图 (b) 为 某 种 表 达 载 体 的 示 意 图 ( 载 体 上 的
EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。



——GAATTC—— ——GGATCC—— ——GATC——
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(2)写出产生的末端的种类:①产生的是黏性末端;②产生的 是 平末端 。 (3)EcoRⅠ限制酶和 SmaⅠ限制酶识别的碱基序列 不同,切割 位点不同 (填“相同”或“不同”),说明限制酶具有专一性 。
在日常生 活中, 随处都 可以看 到浪费 粮食的 现象。 也许你 并未意 识到自 己在浪 费,也 许你认 为浪费 这一点 点算不 了什么
图(b)
图(c)
(3)DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶,常见的
有__E_·_c_o_l_i__D_NA_连__接__酶_和____T_4D_N_A_连___接__酶___,其中既能连接黏 性末端又能连接平末端的是__T_4D_N_A__连__接__酶___。
解析
在日常生 活中, 随处都 可以看 到浪费 粮食的 现象。 也许你 并未意 识到自 己在浪 费,也 许你认 为浪费 这一点 点算不 了什么

高三生物一轮复习:第36讲 基因工程

高三生物一轮复习:第36讲  基因工程
内 稳定维持 和 表达 的过程。
3.将目的基因导入受体细胞 (2)转化方法
生物种类
植物
农杆菌转化法 (常
方法 用)、基因枪法、花粉 管通道法
受体细胞 体细胞、受精卵
动物
显微注射技术
受精卵
微生物 Ca2+处理法 原核细胞
(续表)
生物种类

植物
动物
微生物
转化过程
农杆菌转化法:目的基
Ca2+处理细胞
因插入Ti质粒
回答下列问题: (4)图甲中的Tetr和ampR在运载体上可作为 标记基因 , 用于重组DNA的鉴定 和选择。
[解析] (4)图甲中的Tetr和ampR都是抗性基因,在运载体上可以作为标记基因, 用于重组DNA的鉴定和选择。
◉ 方法归纳
“选择限制酶的技巧
(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类 ①应选择切点位于目的基因两端的限制酶,如图甲可选择PstⅠ。 ②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶,如图甲不能选择SmaⅠ。 ③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使用不同的限制酶切割目的 基因和质粒,如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这 两种酶的切点)。
[解析] (1)限制性核酸内切酶(简称限制酶)切割DNA分子后,产生的片段末端 类型有黏性末端和平末端。
1.[2020·四川攀枝花市二模] 根据与基因工程有关的知识,回答下列问题:
(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段为AATTC……G
G……GTTAA
,为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可
(4)若质粒运载体用EcoRⅠ切割,为使运载体与目的基因相连,图甲中含有目 的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割, 该酶切割后得到的末端必须具有什么特点?

高考生物中的基因工程考点有哪些

高考生物中的基因工程考点有哪些

高考生物中的基因工程考点有哪些在高考生物中,基因工程是一个重要且具有一定难度的考点。

基因工程作为现代生物技术的核心领域之一,对于我们理解生命的奥秘、解决现实中的生物问题以及推动生物技术的发展都具有极其重要的意义。

首先,我们来了解一下基因工程的基本概念。

基因工程,又称为重组 DNA 技术,是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA 重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程的操作工具是这部分的重要考点之一。

其中包括“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(简称限制酶),它能够识别特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割 DNA 分子。

“分子缝合针”——DNA连接酶,用于将切割后的 DNA 片段连接起来,形成重组 DNA 分子。

还有“分子运输车”——载体,常见的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

载体需要具备能够在受体细胞中复制并稳定保存、具有多个限制酶切点以便与外源基因连接、具有标记基因以便于筛选等条件。

基因工程的基本操作程序也是高考的重点。

第一步是获取目的基因。

获取目的基因的方法有多种,比如从基因文库中获取、利用 PCR 技术扩增目的基因以及通过化学方法人工合成。

第二步是基因表达载体的构建,这是基因工程的核心步骤。

目的基因与载体结合时,需要用同一种限制酶切割,产生相同的黏性末端,再用 DNA 连接酶连接,形成重组 DNA 分子。

第三步是将目的基因导入受体细胞。

导入植物细胞常用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;导入动物细胞常用显微注射法;导入微生物细胞常用感受态细胞法。

第四步是目的基因的检测与鉴定。

可以通过检测标记基因是否表达、检测目的基因是否转录出 mRNA、检测目的基因是否翻译成蛋白质等方法来鉴定目的基因是否成功导入并表达。

在基因工程的应用方面,也有很多考点值得关注。

比如在农牧业方面,利用基因工程可以培育抗虫、抗病、抗逆的农作物新品种,还可以提高家畜的生长速度、改善畜产品品质等。

艺考生高三生物知识点

艺考生高三生物知识点

考点基因工程的操作工具和步骤(一)、深化拓展1.基因工程操作工具(1)基因的“剪刀”——限制性核酸内切酶(简称限制酶)①分布:主要在原核生物体内。

②特性:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子。

③实例:EcoRⅠ限制酶能专一识别GAATTC序列,并在G和A之间将这段序列切开。

④切割结果:产生两个带有黏性末端的DNA片段。

⑤作用:基因工程中重要的切割工具,能将外来的DNA切断,对自己的DNA(要不五次序列,要不就是被特异性的甲基化酶甲基化)无损害。

(2)基因的“针线”——DNA连接酶①催化对象:两个具有相同黏性末端的DNA片段。

②催化位置:脱氧核糖与磷酸之间的缺口。

③催化结果:形成重组DNA。

(3)常用的运载体——质粒①本质:小型环状DNA分子。

②作用:a.作为运载工具,将目的基因送到宿主细胞中去;b.用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。

③条件:a.能在宿主细胞内稳定保存并大量复制;b.有多个限制酶切点;c.有标记基因。

2.基因工程操作步骤图解提醒(1)微生物常做受体细胞的原因是因其繁殖速度快、代谢旺盛、目的产物多。

(2)目的基因表达的标志:通过转录翻译合成出相应的蛋白质。

(二)、对位训练2.基因工程是在现代生物学、化学和工程学基础上建立和发展起来的,并有赖于微生物学理论和技术的发展,现在基因工程在动植物育种上有广泛而重要的应用。

基因工程基本操作流程如下图,请据图分析回答:(1)图中A是,最常用的是;在基因工程中,需要在酶的作用下才能完成剪接过程。

(2)在上述基因工程的操作过程中,可以遵循碱基互补配对原则的步骤有(用图解中序号表示)。

(3)不同种生物之间的基因移植成功,从分子水平分析,进行基因工程的主要理论依据是,也说明了生物共用一套。

(4)研究中发现,番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有抑整理用,导致害虫无法消化食物而被杀死,人们成功地将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内,玉米获得了与番茄相似的抗虫性状,玉米这种变异的来源是。

2025届高中生物高考复习学案:基因工程及生物技术的安全性与伦理问题

2025届高中生物高考复习学案:基因工程及生物技术的安全性与伦理问题

基因工程及生物技术的安全性与伦理问题(答案在最后)考点一基因工程的概念及操作工具任务1完善基因工程的理论基础任务2与DNA有关的酶的比较任务3明确限制酶的选择原则(1)不破坏目的基因原则:如图甲中可选择,而不选择。

(2)保留标记基因、启动子、终止子、复制原点原则:所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构,如图乙中不选择。

(3)确保出现相同黏性末端原则:通常选择与切割目的基因相同的限制酶切割质粒,如图中;为避免目的基因和质粒自身环化和随意连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如图也可选择PstⅠ和Eco RⅠ两种限制酶。

任务4明确载体上标记基因的标记原理标记基因可用于检测是否导入受体细胞:1.基因载体与膜载体的区别基因工程中的载体是DNA 分子,能将目的基因导入受体细胞内,它能在宿主细胞内稳定存在,并可对目的基因进行大量复制;膜载体是蛋白质,与细胞膜的通透性有关。

2.正确认识限制酶(1)限制酶是一类酶,而不是一种酶。

(2)将一个基因从DNA 分子上切割下来,需要切两处,同时产生四个黏性末端或平末端。

(3)不同DNA 分子用同一种限制酶切割,产生的末端都相同,同一个DNA 分子用不同的限制酶切割,产生的末端一般不相同。

(4)限制酶切割位点应位于标记基因之外,不能破坏标记基因,以便进行检测。

(5)限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。

3.释疑:原核生物的限制酶为什么不剪切自身的DNA?细菌中的限制酶之所以不切割自身DNA,是因为微生物在长期进化过程中,使含有某种限制酶的细胞,其DNA分子中要么不具备这种限制酶的识别切割序列,要么通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能识别,从而不能将其切开。

所以,尽管细菌中含有某种限制酶也不会将自身的DNA切断,并且可以防止外源DNA的入侵。

基因工程中单酶切好?还是双酶切好?在进行单酶切时,所得到的目的基因与质粒两头的黏性末端是相同的。

高考生物-基因工程的含义及操作工具

高考生物-基因工程的含义及操作工具

高考生物-基因工程的含义及操作工具1.基因工程的诞生(1)概念:基因工程是狭义的遗传工程。

广义的遗传工程泛指把一种生物的遗传物质(细胞核、染色体脱氧核糖核酸等)移到另一种生物的细胞中去,并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。

(2)核心:构建重组DNA分子,早期也将基因工程称为重组DNA技术。

(3)诞生时间:20世纪70年代。

(4)理论基础:DNA 是生物遗传物质的发现,DNA双螺旋结构的确立以及遗传信息传递方式的认定。

(5)技术保障:限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒载体的发现和运用。

2.基因工程的基本工具归纳总结与DNA有关的酶的比较(1)限制性核酸内切酶只能用于切割目的基因( F )(2)DNA 连接酶能将两碱基间通过形成的氢键连接起来( F )(3)质粒是小型环状DNA 分子,是基因工程常用的载体( T )(4)载体的作用是携带目的基因导入受体细胞中,使之稳定存在并表达( T )(5)DNA 连接酶能够将任意2个DNA 片段连接在一起( F )1.下列关于基因工程的叙述,不正确的是( D )A .基因工程的原理是基因重组B .运用基因工程技术,可使生物发生定向变异C .一种生物的基因转接到另一种生物的DNA 分子上,属于基因工程的内容D .是非同源染色体上非等位基因的自由组合2.以下有关基因工程的叙述,正确的是( D )A .基因工程是细胞水平上的生物工程B .基因工程的目的是获得目的基因表达的蛋白质产物C .基因工程产生的变异属于人工诱变。

人工诱变—基因突变D .基因工程育种的优点之一是可以定向地使生物产生可遗传的变异3、不属于质粒被选为基因运载体的理由是 ( D )A .能复制B .有多个限制酶切点C .具有标记基因D .它是环状DNA4.质粒之所以能做基因工程的载体,是由于它( D )A .含蛋白质,从而能完成生命活动B .能够自我复制,从而保持连续性C .是RNA ,能够指导蛋白质的合成D .具有环状结构,能够携带目的基因5.限制酶是一种核酸内切酶,可识别并切割DNA 分子上特定的核苷酸序列。

高考生物专题复习《基因工程》含答案

高考生物专题复习《基因工程》含答案

高考生物专题复习《基因工程》【考点梳理.逐个击破】一、基因工程的操作工具1.限制性核酸内切酶(简称限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)作用:识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

(3)结果:产生黏性末端或平末端。

2.DNA 连接酶3.载体(1)作用:携带外源DNA 片段进入受体细胞。

(2)种类:质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

(3)条件⎩⎪⎨⎪⎧能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因二、基因工程的基本操作程序 1.目的基因的获取(1)目的基因:主要是指编码蛋白质的基因,也可以是具有调控作用的因子。

(2)获取方法⎩⎪⎨⎪⎧从基因文库中获取利用PCR 技术扩增通过化学方法人工合成2.基因表达载体的构建 (1)构建基因表达载体的目的①使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代。

②使目的基因能够表达和发挥作用。

(2)基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子及标记基因等。

3.目的基因导入受体细胞微生物细胞感受态细胞法(Ca2+处理法)4.目的基因的检测与鉴定检测目的检测方法判断标准目的基因是否插入转基因生物的DNA DNA分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否翻译出蛋白质抗原—抗体杂交技术是否出现杂交带个体水平的检测如抗虫、抗病的接种实验是否表现出相应的特性三、基因工程的应用及蛋白质工程1.基因工程的应用(1)动物基因工程:提高动物生长速度从而提高产品产量;改善畜产品品质;用转基因动物生产药物;用转基因动物作器官移植的供体等。

(2)植物基因工程:培育抗虫转基因植物(如抗虫棉)、抗病转基因植物(如转基因烟草)和抗逆转基因植物(如抗寒番茄);利用转基因改良植物的品质(如新花色矮牵牛)。

2.基因诊断与基因治疗(1)基因诊断:又称为DNA诊断,是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。

第28讲 基因工程

第28讲 基因工程

• ⑤培育转基因植物,受体细胞可选受精卵或 体细胞。若受体细胞是体细胞,再将导入了 目的基因的受体细胞进行组织培养,即可获 得转基因植株。 • ⑥生产基因工程药品(如胰岛素)时,受体细 胞一般采用细菌,利用细菌繁殖快的特点, 可短期内获得大量基因工程产品。 • ⑦抗虫棉只能抗虫,不能抗病毒。
• 基因诊断与基因治疗 • 1.基因诊断 • (1)原理:DNA分子杂交 • (2)过程:①制备DNA探针(用放射性同位素, 荧光分子标记的单链DNA分子); • ②待测DNA:患者DNA制成的单链DNA;
一、知识概述
操作工具 基因工程 操作步骤 基因工程和成 果与发展前景
存在:主要在微生物中 限制性 作用与特性:一种限制酶只识别一种特 核酸内 定的核苷酸序列,并在特定的切点上切 切酶 割DNA分子。常形成 黏性末端 操 作 工 具
DNA连接酶
• 条件:①能在宿主细胞中复制,并 限制酶 切点; 稳定保存;②具有多个 ③具有某些标记基因 • 种类:质粒、噬菌体、动植物病毒 等

(2008· 上海)以重组DNA技术为核心的基 因工程正在改变着人类的生活。请回答下列 问题。 • (1)获得目的基因的方法通常包括 •化学合成(人工合成) 和 。 酶切获取(从染色 • 体DNA分离/从生物细胞分离/鸟枪法) 。 • (2)切割和连接DNA分子所使用的酶分别是 限制性核酸内切酶(限制酶) DNA连接酶 和 。 • (3)运送目的基因进入受体细胞的载体一般选 用病毒或 质粒 ,后者的形状呈 小型环状(双链环状、环状 。 •
第六单元
生 物 工 程


28
因 工


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【考纲搜索】 (1)基因操作的工具; (2)基因操作的基本步骤; (3)基因工程的成果与发展前景。

高中生物高考1 第十单元 第33讲 基因工程

高中生物高考1 第十单元 第33讲 基因工程

第33讲基因工程考点一基因工程的操作工具1.基因工程的概念2.限制性核酸内切酶(限制酶)3.DNA连接酶4.载体1.(选修3 P6“寻根问底”改编)DNA连接酶和DNA聚合酶的作用相同吗?试简要说明。

答案:不相同。

DNA连接酶连接的是两个DNA片段,而DNA聚合酶连接的是单个的脱氧核苷酸。

2.(选修3 P6“旁栏思考题”)想一想,具备什么条件才能充当“分子运输车”?答案:能自我复制、有一个或多个限制酶切割位点、有标记基因及对受体细胞无害等。

1.限制酶的选择技巧(1)根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类①应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶,如图甲可选择PstⅠ。

②不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶,如图甲不能选择SmaⅠ。

③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如图甲也可选择用PstⅠ和Eco RⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切割位点,如图乙)。

(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶一致,以确保产生相同的黏性末端。

②质粒作为载体必须具备标记基因等,所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构,如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因;如果所选酶的切割位点不是一个,则切割重组后可能丢失某些片段,若丢失的片段含复制起点区,则切割重组后的片段进入受体细胞后不能进行自主复制。

2.载体上标记基因的标记原理载体上的标记基因一般是一些抗生素的抗性基因。

目的基因要转入的受体细胞没有抵抗相关抗生素的能力。

当含有抗生素抗性基因的载体进入受体细胞后,抗性基因在受体细胞内表达,使受体细胞能够抵抗相应抗生素,所以在受体细胞的培养体系中加入该种抗生素就可以筛选出转入载体的受体细胞,原理如下图所示:1.(2016·高考全国卷Ⅲ)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了Eco R Ⅰ、Bam H Ⅰ和Sau3A Ⅰ三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图(b)为某种表达载体的示意图(载体上的Eco R Ⅰ、Sau3A Ⅰ的切点是唯一的)。

2023届高三生物一轮复习课件: 基因工程的工具和操作步骤

2023届高三生物一轮复习课件: 基因工程的工具和操作步骤
—— 如新冠病毒可以入侵哺乳动物的肺部细胞
高考题:若用家蚕作为某基因表达载体的受体细胞,在噬菌体和昆虫
病毒两种载体中,不选用 噬菌体 作为载体,其原因是

噬菌体的宿主细胞是细菌,而不是家蚕
[双标记基因题型:2016年新课标I卷] 某一 质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr 或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表 示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗 性基因)。有人将此质粒载体用SamI酶切 后,与用SamHI酶切获得的目的基因混合 ,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果 大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含 有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆 菌。回答下列问题: 1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有(答出两点即可) _能__自__我___复__制___、__有__标___记__基___因__、__有___一__个___至__多__个___限__制___酶__切__割___位__点__________________ (答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具 有启动子和终止子。
[2018全国1卷] 艾弗里肺炎双球菌转化实验对基因工程启示: DNA可从一种生物个体转移到另外一种生物
考点1 基因工程的诞生和发展 P68
1. 基因工程的理论基础 [2017全国1卷] DNA为什么能实现不同生物的转移,从结构和功能两个方面 进行分析? DNA双螺旋结构 (结构上的可能性) 生物界共用一套遗传密码 (功能上可能性)
目的基因 未转化
图片来源:《高中生物核心知识图文笔记》
大肠杆菌类型
氨苄青霉素 抗性
未被转化
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考点一 基因工程的概念及操作工具(5年13考)(2015天津、福建、重庆、浙江、江苏;2014新课标、天津、北京、山东、江苏、海南;2013全国大纲卷、广东……)一、基因工程的概念基因工程的别名基因拼接技术或DNA 重组技术操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA 分子水平 原理 基因重组基本过程 剪切→拼接→导入→表达 结果 人类需要的基因产物或生物类型 供体 提供目的基因 受体 表达目的基因 本质 目的基因在受体体内的表达 优点可定向改造生物的遗传性状二、DNA 1.限制性核酸内切酶(简称:限制酶)⎩⎪⎨⎪⎧来源:主要从原核生物中分离作用:割断两个核苷酸之间的磷酸二酯键作用特点:专一性,即限制酶可识别特定的核苷酸序列结果⎩⎨⎧ 错位切:产生两个相同的黏性末端平切:形成平末端2.DNA 连接酶常用类型 E·coliDNA 连接酶 T 4DNA 连接酶 来源 大肠杆菌 T 4噬菌体 功能 连接黏性末端连接黏性末端或平末端结果都缝合磷酸二酯键,如图3.载体(1)种类:质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。

(2)质粒的特点⎩⎪⎨⎪⎧能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因1.下图为限制酶和DNA 连接酶的关系,据图回答:(1)限制酶和DNA 连接酶的作用部位相同吗相同。

(2)DNA 连接酶起作用时是否需要模板不需要。

2.探究载体所具条件的意义条 件 意 义稳定并能自我复制 目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因 具有特殊的标记基因便于重组DNA 的鉴定和选择基因工程操作工具的综合考查导学号(经典高考题)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)限制性核酸内切酶切割DNA 分子后产生的片段,其末端类型有________和________。

(2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下:AATT C……GG……CTTAA为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA 除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制性核酸内切酶切割,该酶必须具有的特点是______________________________。

(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA 连接酶有两类,即________DNA 连接酶和________DNA 连接酶。

(4)反转录作用的模板是________,产物是_____________________________________。

若要在体外获得大量反转录产物,常采用________技术。

(5)基因工程中除质粒外,________和________也可作为运载体。

(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是____________________________________________________________________。

1.限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶等相关酶的分析比较名称作用部位作用底物作用结果限制酶磷酸二酯键DNA将DNA切成两个片段DNA连接酶磷酸二酯键DNA片段将两个DNA片段连接为一个DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯键脱氧核苷酸DNA DNA酶磷酸二酯键DNA将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸解旋酶碱基对之间的氢键DNA将双链DNA分子局部分解为两条长链RNA聚合酶磷酸二酯键核糖核苷酸将单个核糖核苷酸依次连接到单链末端(1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类①应选择切点位于目的基因两端的限制酶,如图甲可选择PstⅠ。

②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶,如图甲不能选择SmaⅠ。

③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒,如图甲也可选择用PstⅠ和Eco R Ⅰ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。

(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致,以确保具有相同的黏性末端。

②质粒作为载体必须具备标记基因等,所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构,如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因;如果所选酶的切点不是一个,则切割重组后可能丢失某些片段,若丢失的片段含复制起点区,则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。

如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙),限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。

下列分析合理的是( )A.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体已知一双链DNA分子,用限制酶Ⅰ切割得到长度为120 kb(kb:千碱基对)片段;用限制酶Ⅱ切割得到40 kb和80 kb两个片段;同时用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割时,得到10 kb、80 kb和30 kb 3个片段。

据此分析该双链DNA分子结构及酶切位点情况为( )下列关于载体的叙述中,错误的是( )A.载体与目的基因结合后,实质上就是一个重组DNA分子B.对某种限制酶而言,载体最好只有一个切点,但还要有其他多种酶的切点C.目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒D.载体具有某些标记基因,便于对其进行切割考点二基因工程的基本操作程序及应用(5年24考) (2015新课标Ⅰ、福建、天津、四川、海南、江苏;2014新课标、天津、广东、重庆、北京、山东、江苏、海南;2013新课标Ⅰ、福建……)1.操作步骤:获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。

2.应用技术名称应用植物基因工程 培育抗虫转基因植物、抗病转基因植物和抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质动物基因工程 提高动物生长速度,改善畜产品的品质,用转基因动物生产药物,用转基因动物作器官移植的供体基因治疗把正常基因导入病人体内,使其表达产物发挥作用,从而治疗疾病,分为体内基因治疗和体外基因治疗1.观察基因工程的操作过程,分析每一步骤的操作程序1获取目的基因—⎩⎪⎨⎪⎧①从基因文库中获取②利用PCR 技术扩增③通过化学方法人工合成↓2基因表达载体的构建—组成⎩⎪⎨⎪⎧①目的基因②启动子③终止子④标记基因↓3将目的基因导入受体细胞—方法⎩⎪⎨⎪⎧①植物:农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法②动物:显微注射技术③微生物:感受态细胞法↓4目的基因的检测与鉴定⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧①利用DNA分子杂交技术检测目的基因的有无②利用分子杂交技术检测目的基因的转录③利用抗原—抗体杂交技术检测目的基因的翻译④利用个体生物学水平的鉴定检测重组性状的表达2.目的基因的检测和鉴定3.探究基因治疗与基因诊断的不同点原理操作过程进展基因治疗基因表达利用正常基因导入有基因缺陷的细胞中,以表达出正常性状来治疗临床实验基因诊断碱基互补配对制作特定DNA探针与病人样品DNA混合,分析杂交带情况临床应用基因工程的操作程序的考查导学号(2015·四川卷)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中,可获得抗棉铃虫的转基因棉,其过程如下图所示(注:农杆菌中Ti质粒上只有T­DNA片段能转移到植物细胞中)。

(1)过程①需用同种____________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。

为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来,应使用________培养基。

(2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让________进入棉花细胞;除尽农杆菌后,还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养,目的是________________________________________________________________________。

(3)若过程④仅获得大量的根,则应在培养基中增加________以获得芽;部分接种在无激素培养基上的芽也能长根,原因是_________________________________________。

(4)检验转基因棉的抗虫性状,常用方法是____________。

种植转基因抗虫棉能减少________的使用,以减轻环境污染。

下图表示用化学方法合成目的基因Ⅰ的过程。

据图分析,下列叙述正确的是( )A.过程①需要DNA连接酶B.过程②需要限制性核酸内切酶C.目的基因Ⅰ的碱基序列是已知的D.若某质粒能与目的基因Ⅰ重组,则该质粒和目的基因Ⅰ的碱基序列相同下列用于判断目的基因是否转移成功的方法中,不属于分子检测的是( )A.通过害虫吃棉叶看其是否死亡B.转基因生物基因组DNA与DNA探针能否形成杂交带C.转基因生物中提取的mRNA与DNA探针能否形成杂交带D.转基因生物中提取的蛋白质能否与抗体形成杂交带(2014·天津卷)为达到相应目的,必须通过分子检测的是( )A.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B.产生抗人白细胞介素­8抗体的杂交瘤细胞的筛选C.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定D.21三体综合征的诊断(2015·福建卷)GDNF是一种神经营养因子,对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。

研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。

请回答:(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是__________________。

(2)构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的________限制酶进行酶切。

(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有3种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。

为鉴定这3种连接方式,选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对筛选得到的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示。

图中第________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。

(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测GDNF基因是否成功表达,可用相应的________与提取的蛋白质杂交。

当培养的神经干细胞达到一定密度时,需进行________培养以得到更多数量的细胞,用于神经干细胞移植治疗实验。

考点三蛋白质工程、转基因技术的安全性及生物武器(5年6考) (2015新课标Ⅱ、海南;2014重庆;2013广东、江苏……)1.概念理解蛋白质工程具体内容别称第二代基因工程目标生产符合人类生产和生活需要的一种新的蛋白质原理由于基因决定蛋白质,因此要对蛋白质结构进行改造,必须从基因入手基础蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系手段基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质关键技术基因工程基础蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系结果改造了现有蛋白质或制造出新的蛋白质从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)→基因表达→产生需要的蛋白质。

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