徒手切片法和临时装片的制作方法以及植物细胞和组织观察
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临时装片的制作方法和徒手切片法以及植物细胞、组织观察
一、实验目的
1、掌握临时装片的制片方法、掌握徒手切片的方法
2、了解植物细胞结构。
二、实验材料
显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、培养皿、毛笔、滴管、纱布、0.9%的NaCl溶液;洋葱、马铃薯、芹菜、番茄
三、实验内容和实验方法
(一)临时装片的制作
1、擦净载玻片和盖玻片
(1)擦载玻片用左手的拇指和食指捏信载玻片的边缘,右手
用纱布将载玻片上下两面包住,然后反复擦拭,擦好后放
在干净处备用。
(2)擦盖玻片先用左手拇指和食指轻轻捏住盖玻片的一角,
再将右手拇指和食指用纱布把盖玻片包住,然后从上下两
面隔着纱布慢慢地进行擦试。
2、取样
用滴管滴一点水或其他溶液(根据需要)于载玻片的中央,把观
察物放于载玻片上的液滴中,展开或摇匀。
3、盖盖玻片
右手持镊子,轻轻夹住盖玻片的一角,使盖玻片的边缘与液滴的
边缘接触,然后慢慢倾斜下落,最后平放于载玻片上,避免气泡
的产生。如盖玻片下的液体过多,可用吸水纸将多余的液体吸掉。
(二)徒手切片法
徒手切片法不需要任何的机械设备,只需要一把锋利的刀片就可以完
成切片的制作,方法简单,也容易保持物的生活状态,有很大的实用
价值。
1、选材
选择软适度的材料,先截成适当的段块。一般直径大小以3~5mm、
长度以20~30mm为宜。若材料太软,如幼叶等,不能直接拿在手
中进行切片,可用适当大小的马铃薯块茎或萝卜块根等作支持物,
将材料夹入其中,一起切片。
2、切片
用左手拇指、食品指和中指夹住材料,使其稍突出在手指之上,
拇指略低于食指,以免刀口损伤手指。材料和刀刃上蘸水,使其
湿润。右手拇指和食指横向平握刀片,刀片要与材料断面平行,
刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置,以均匀的力量和平
稳的动作从左前方向向右后方拉切。切片时要用臂力而不用腕力,
手腕不要动,靠肘、肩关节的屈伸来切片,拉切要快,中途不要
停顿,更不能用拉锯方式进行切片。
每切2~3片就要把刀片上的薄片用湿毛笔移入盛有清水的培养皿
中暂存备用。如发现材料切面出现倾斜,应修平切面后再继续切
片。
3、镜检观察
连续切下很多切片后,挑选最薄的切片放于加了1滴清水的载玻
片,盖上盖玻片,制成临时装片,进行镜检、观察。
(三)植物细胞的结构观察
1、洋葱表皮细胞的观察
取一洁净载玻片,于载玻片中央加上一滴水。取洋葱一个,剥下
一片新鲜的带紫色的南鳞叶,和刀片从外表面(或内表面)切一
个面积为4mm2左右的方形小格,然后用镊子将表皮撕下,迅速
入入载玻片上的小水滴中(表面向上)。并使其平展,盖上盖玻片,
即制成临时装片。将装片放在显微镜下,用低倍镜观察细胞结构。
(1)细胞的形状
洋葱表皮由一层细胞构成,所有的细胞都有相似的—扁砖
状。细胞之间排列紧密,没有间隙。
(2)细胞壁
为植物细胞所特有的结构,较透明,因此只能看到其侧壁。
初看时,好像两个相邻细胞只有一层壁,但是,通过增加
反差和仔细调焦就能发现这实际上是三层,即两侧相邻两
细胞的细胞壁及中间的胞间层。
(3)细胞质
为无色透明的胶状物,充满整个细胞。由于中央有大的液
泡,被挤成一薄层,分布于细胞周围,仅细胞两端较明显。
(4)细胞核
为球形小体。由于中央有大液泡,也被挤向近细胞壁处。
(5)细胞膜
非常薄,而且与细胞壁紧贴在一起,因此不易观察到。
(6)液泡
一个或几个,位于细胞中央,里面充满细胞液,所以比细
胞质透明。
2、果肉离散细胞观察
用解剖针挑取少许已经红熟的的番茄果肉(以临近果皮的为好),
把它们放在载玻片上的水滴中,用解剖针将果肉细胞拨匀,分散
得越开越好,盖上盖玻片,在显微镜下观察。可以看到圆形或卵
圆形的离散细胞,同样也可以观察到细胞壁、细胞核和很大的液
泡。此外,还可以看到带色的圆形小颗粒,即有色体。
3、厚角组织
用徒手切片法做芹菜叶柄的横切片,选取薄而透明的切片制成临
时装片,置于低倍镜下观察。在芹菜叶柄棱角处的表皮内方有厚
角存在,这些细胞的细胞壁在角隅处有增厚。
实验三植物根、茎、叶、花结构的观察
一、实验目的
1、掌握双子叶植物和单子叶植物根的初生结构以及根的次生
结构
观察并掌握叶片的内部结构;
2、掌握茎的初生结构和次生结构;
3、观察并掌握叶的内部结构;
二、实验材料
双子叶植物幼根(棉花)横切片,小麦或玉米根横切片、棉花老根横切片;双子叶植物幼茎横切片、玉米茎横切片、椴树茎横切片;棉花(或蚕豆、迎春叶)叶片横切片,玉米(或小麦、水稻等单子叶植物)叶片横切片
三、实验内容
(一)根的结构
1、双子叶根的初生结构
取双子叶植物幼根横切片显微镜观察。双子叶植物
根的初生结构从外向内由表皮、皮层和维管柱一部
分组成。
(1)表皮是根的最外一层细胞,排列紧密整齐,
无细胞间隙。有的表皮细胞可观察到向外突
起形成的根毛(或根毛残体)。
(2)皮层在表皮之内维管柱之外的部分,占幼
根的大部分,由多层薄壁细胞组成,可进一
步分为外皮层、皮层薄壁细胞和内皮层三部
分。
A、外皮层:靠近表皮之下的几层细胞(一
般为1~3层),细胞较小,细胞壁常木栓
化,代替表皮起暂时的保护作用。
B、皮层薄壁细胞:细胞体积较大,排列疏
松,有较大的细胞间隙,细胞具有储藏作
用。
C、内皮层:是皮层最内层的细胞,围绕着
内部的维管柱,细胞小,排列紧密,细胞
横壁和径向壁上具有木栓化的加厚带状
物——凯氏带,在根的横切面上可见两相
邻的内皮层细胞间明显的加深的点状结
构——凯氏点。
(3)维管柱内皮层以内的中央部分,细胞较小,
排列紧密,可分为中柱鞘、初生韧皮部、初
生木质部、薄壁细胞。
A、中柱鞘:内皮层里面的1~2层薄壁细胞,
排列紧密整齐。这些细胞具有潜在的分生