a-甘露糖苷酶法测定家兔血清中苦马豆素含量
家兔血浆中甘露醇浓度测定
［ ｓｒｃ］ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｓ ｂｉ ｅｈｄｏ ｅｅ ｎｔ ｎｏ ｐａｍ ｎ ｎｔ ｏｔ ｔｎｒｂ ｉ． ｔｏ ｓ Ａｂｔ ｔ ａ ｊｃｉ ｏｅｔ ｌｈａｍ ｔｏ ｆ ｔ ｍｉ ｉ ｆ ｌｓ ａｍａｎ ｉｌ ｎ ｎ ａｂｔ Ｍｅ ｄ ｖ ａ ｓ ｄ ｒ ａｏ ｏｃ ｅ ｉ ｓ ｈ
西南 国防医药 ２ １ ０ ０年 ２月第 ２ ０卷第 ２期
・
．２ １９．
论著 ・
家兔 血 浆 中甘 露醇 浓 度 测定
邓晶晶， 冯 云 ， 李亭 亭 ， 思路 尤
［ 摘要 ］ 目的 建立家兔血浆 中甘 露醇含量 的测定方法 。方法 家兔血浆样品沉淀蛋 白后 ， 入高碘酸钠使 加 用本法测定 的血浆 中的甘露 醇
［ 关键 词 ］ 血 浆 ； 露醇 ； 定 ； 色 法 甘 测 比 中 图分 类 号 Ｒ ９ ７７ ７ ． 文 献标 识 码 Ａ
ｄ ｉ１ ．９ ９ ｊｉ ｎ １０ ０ ８ ．０ ０ ０ ．０ ｏ ：０ ３６ ／．ｓ ．０ ４— １ ８２ １．２ ０ ５ ｓ
文 章 编 号 １０ — １ ８ ２ ｌ ）２— １９— ３ ０４ ０ ８ （０ Ｏ ０ ０ ２ ０
之氧化成 为甲醛 ， 再加入 Ｎ ｓ ａｈ试剂显色 ， ４ ２ｎ 在 １ ｍ处采用 比色法进行测定 。结 果 结论
在 ０ ５ ６０ ｇｍｌ ．０～ ．０ ｍ ／ 范围 内线性关系 良好 ， 相关 系数 ｒ ０ ９ ８ ； 为 ．９ ７ 其平均加 样 回收率为 ９ ． ９ ，Ｓ ７ ５ ％ Ｒ Ｄ为 ２ ５ ％。 ．ｌ 采用本法测定血浆 中甘露 醇含量的精密度和重复性 良好 ， 并且操 作简单 易行。
小花棘豆生物碱对α—甘露糖苷酶活性的影响
收稿日期:2013-04-09基金项目:内蒙古自治区高等学校科学研究项目(N J 10063);内蒙古自然科学基金(2012M S 0404)㊂*通讯作者张建军,男,1985年生,硕士㊂小花棘豆生物碱对α-甘露糖苷酶活性的影响张建军1 韩 敏1* 王 宇1 白 颖2 刘国娟1 邬宇航1 孙晓磊1 刘建新11.内蒙古农业大学兽医学院农业部动物临床诊疗技术重点实验室,呼和浩特010018;2.内蒙古自治区鄂尔多斯市东胜区动物疫病预防控制中心,内蒙古鄂尔多斯017000摘要 为探讨小花棘豆的中毒机理,采用苦马豆素㊁黄花碱以及这2种生物碱的混合物分别对小白鼠进行传统灌胃,并于试验开始后第7㊁14㊁21㊁28和35天分别从各组中随机取4只小白鼠,眼球采血,肝素钠抗凝,利用紫外可见分光光度计检测血清中α-甘露糖苷酶的活性㊂结果表明:低浓度的S W 具有提高血清中α-甘露糖苷酶活性的作用,中等浓度和高浓度的S W 在短时间内也可以提高血清中α-甘露糖苷酶的活性,但时间过长会严重降低血清中α-甘露糖苷酶的活性;T s 在整个试验过程中不影响血清中α-甘露糖苷酶的活性;混合生物碱组表现出与S W 组类似的结果㊂关键词 小花棘豆;中毒机理;α-甘露糖苷酶活性;紫外可见分光光度计;苦马豆素;黄花碱 小花棘豆(O x y t r o pi s g l a b r a )俗称醉马草,属豆科棘豆属(O x y t r o p i s )多年生草本植物,是疯草(L o c o w e e d )的一种,全草有毒[1]㊂疯草是豆科棘豆属和黄芪属(A s t r a g a l a s )2属中能引起动物以慢性神经机能障碍㊁机体消瘦为特征的中毒的有毒植物的总称㊂M o l y n e u x 等[2]认为苦马豆素(S w a i n s o n i -n e ,S W )是疯草的主要毒性成分㊂杨桂云等[3]及于荣敏等[4]曾对小花棘豆的毒性成分进行过研究,确定其毒性成分主要为生物碱,并从中提取出多达8种的生物碱,其中黄花碱是主要生物碱之一㊂苦马豆素属于多羟基吲哚里西啶类生物碱,是一种极强的α-甘露糖苷酶(α-m a n n o s d a s e ,AMA )竞争抑制剂,可使机体甘露糖的代谢发生异常,大量蓄积在细胞内致细胞空泡变性,造成器官组织损害和功能障碍,并最终导致细胞死亡[5-6]㊂黄花碱(T h e r -m o p s i n e ,T s )属于多羟基喹诺里西啶类生物碱,对动物的神经节有中度抑制作用,对延髓及大脑皮层亦有抑制作用[7]㊂本试验选用苦马豆素㊁黄花碱及这2种生物碱的混合物,通过紫外可见分光光度计对小白鼠血清中α-甘露糖苷酶的活性进行研究,以探讨小花棘豆的中毒机理㊂1 材料与方法1.1 试验材料1)试验仪器㊂T U-1901紫外可见分光光度计,由北京普析仪器有限责任公司生产;S a r t o r i u s 精密电子分析天平,由德国赛多利斯公司生产;数显恒温水浴锅(HH-4),由金坛市杰瑞尔电器有限公司生产㊂2)试验药品㊂苦马豆素和黄花碱,由内蒙古农业大学兽医学院 小花棘豆中毒机理的研究 课题组提供;4-硝基苯基-α-D-甘露糖吡喃糖苷,购于美国Si g m a 公司;对硝基酚,购于成都艾科达化学试剂有限公司;甘氨酸,购于B I O S H A R P 公司;醋酸钠,购于天津市永大化学试剂有限公司;醋酸和氢氧化钠,购于天津市化学试剂三厂㊂3)试验动物㊂260只昆明系小白鼠,雌雄各半,㊃61㊃试验研究养殖与饲料2013年第6期. All Rights Reserved.体重(20ʃ2)g,购于内蒙古大学实验动物中心㊂小白鼠标准日粮,购于内蒙古大学实验动物中心㊂1.2试验方法1)小花棘豆生物碱中毒动物模型的建立㊂试验小白鼠适应性饲养1周后,随机分为4个大组:A组为S W组㊁B组为T s组㊁C组为2种生物碱的混合组㊁D组为对照组,A㊁B㊁C组每组80只小白鼠,D 组20只小白鼠㊂前3组又分为4个小组,分别为A1㊁A2㊁A3㊁A4组和B1㊁B2㊁B3㊁B4组以及C1㊁C2㊁C3㊁C4组,每小组20只小白鼠㊂将生物碱用去离子水稀释成不同的浓度,A1~A4组胃内灌服S W,浓度分别为0.020㊁0.100㊁0.300和0.600m g/m L; B1~B4组胃内灌服T s,浓度分别为0.040㊁0.060㊁0.080和0.100m g/m L;C1~C4组胃内灌服S W和T s的混合物,浓度分别为0.005㊁0.010㊁0.020和0.030m g/m L;D组胃内灌服去离子水㊂2)试剂的配制㊂反应缓冲液:为0.1m o l/L p H 4.60的醋酸盐缓冲液(1.8g醋酸钠,980μL冰醋酸,加水至100m L);反应中止缓冲液:为0.1 m o l/L p H10.14的甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(80 m L0.1m o l/L的氢氧化钠与120m L0.1m o l/L 的甘氨酸混合);底物溶液:为4.0mm o l/L的4-硝基苯基-α-D-甘露糖吡喃糖苷溶液(准确称取4-硝基苯基-α-D-甘露糖吡喃糖苷24.1m g,溶解在20m L的去离子水中)㊂3)试验过程㊂将小白鼠适应性饲养1周后,空腹称重并记录㊂每天早晨9:00添加鼠粮,任小白鼠自由采食和饮水㊂对每只小鼠按0.01m L/g体重胃内灌服生物碱,每隔3d称1次体重,以调整灌服生物碱的量㊂于试验的第7㊁14㊁21㊁28和35天,从每组分别随机取4只小白鼠,眼球采血,肝素钠抗凝㊂4)标准曲线的绘制㊂用0.1m o l/L的甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(p H10.14),将对硝基酚(分析纯)配成1mm o l/L的母液,然后稀释成10㊁20㊁40㊁80㊁120和160μm o l/L的标准对硝基酚溶液,并用紫外可见分光光度计在λ=405n m处测定其O D值㊂然后以O D值为横坐标㊁对硝基酚的浓度为纵坐标,绘制标准曲线㊂5)α-甘露糖苷酶活性的测定方法㊂在5m L 的一次性塑料试管中分别依次加入血清㊁反应缓冲液和底物溶液(分别为50㊁200和50μL),缓缓震荡摇匀,37ħ水浴1h[8];加入反应终止缓冲液,充分震荡摇匀;室温静置5m i n,在λ=405n m处测定O D值,结果查标准曲线㊂α-甘露糖苷酶活性以每升血清(浆)每秒钟水解产生的对硝基酚的纳摩尔数表示㊂1.3数据处理结果以 平均值ʃ标准差 表示,采用S P S S18.0软件对数据进行单因素方差分析,进行差异显著性检验㊂2结果与分析2.1标准曲线的绘制用紫外可见分光光度计测得的与对硝基酚的浓度相应的O D值,见表1㊂表1对硝基酚的浓度与相应O D值对硝基酚的浓度/(μm o l/L)O D值100.114200.203400.366800.7431201.1231601.468根据表1中的数据,以O D值为横坐标㊁对硝基酚的浓度为纵坐标,绘制标准曲线,见图1㊂图1对硝基酚的浓度与相应O D值的标准曲线从图1中可知标准方程为y=109.77x-1.8264,R2=0.9997,表示线性关系良好㊂可依据此标准方程,计算对硝基酚的浓度,从而得出血清中α-甘露糖苷酶的活性㊂2.2苦马豆素组与对照组血清中α-甘露糖苷酶活性的测定不同剂量的S W连续灌服后,小白鼠血清中α-甘露糖苷酶活性的测定结果见表2㊂由表2可知,A1组只有在第35天时α-甘露糖苷酶活性显著高于D组(P<0.05);A2组的α-甘露糖苷酶活性在整个试验过程中一直在增加,在第21和28天时显著高于D组(P<0.05),在第35天时极显著高于D组(P<0.01);A3组的α-甘露㊃71㊃养殖与饲料2013年第6期试验研究. All Rights Reserved.糖苷酶活性在整个试验期间一直在降低,在试验第7天时显著高于D 组(P <0.05),而在第28和35天时极显著低于D 组(P <0.01);A 4组的α-甘露糖苷酶活性在整个试验期间也一直在降低,在第14天时显著低于D 组(P <0.05),在第21㊁28和35天时极显著低于D 组(P <0.01)㊂2.3 黄花碱组与对照组血清中α-甘露糖苷酶活性的测定不同剂量的T s 连续灌服后,小白鼠血清中α-甘露糖苷酶活性测定结果见表3㊂由表3可以看出,在整个试验期间,灌服黄花碱的小鼠血清中α-甘露糖苷酶活性与对照组比较差异均不显著(P >0.05)㊂2.4 混合物组与对照组血清中α-甘露糖苷酶活性的测定 不同剂量的2种生物碱的混合物连续灌服后,小白鼠血清中α-甘露糖苷酶活性测定结果见表4㊂表2 S W 组与对照组血清中α-甘露糖苷酶活性的测定结果n m o l /(s㊃L )组别α-甘露糖苷酶活性第7天第14天第21天第28天第35天A 1422.40ʃ0.39428.80ʃ1.17425.60ʃ0.98437.50ʃ0.39445.30ʃ0.74aA 2435.50ʃ1.34447.60ʃ0.84458.70ʃ0.48a 465.30ʃ0.99a474.50ʃ1.11A A 3439.50ʃ0.64a 418.60ʃ0.05417.50ʃ0.57408.40ʃ1.53A 397.90ʃ1.34A A 4414.30ʃ0.83405.30ʃ0.26a 387.40ʃ1.43A386.40ʃ0.78A 377.60ʃ0.56A D423.00ʃ0.37428.90ʃ0.28419.10ʃ0.85423.90ʃ0.29424.60ʃ0.84注:同一列标有小写字母表示与D 组比较差异显著(P <0.05),标有大写字母表示与D 组比较差异极显著(P <0.01),未标注字母表示与D 组比较差异不显著(P >0.05)㊂下同㊂表3 T s 组与对照组血清中α-甘露糖苷酶活性测定结果n m o l /(s㊃L )组别α-甘露糖苷酶活性第7天第14天第21天第28天第35天B 1419.20ʃ0.28428.80ʃ0.45423.20ʃ1.43430.30ʃ1.11424.40ʃ0.78B 2422.60ʃ0.99425.80ʃ0.73424.40ʃ0.33421.50ʃ0.41426.40ʃ0.38B 3426.40ʃ1.57 424.10ʃ0.14424.40ʃ0.51417.50ʃ0.22419.80ʃ0.24B 4430.90ʃ0.98430.30ʃ0.23418.60ʃ0.87423.70ʃ0.96425.40ʃ0.53D423.00ʃ0.37428.90ʃ0.28419.10ʃ0.85423.90ʃ0.29424.60ʃ0.84表4 混合物组与对照组血清中α-甘露糖苷酶活性测定结果n m o l /(s㊃L )组别α-甘露糖苷酶活性第7天第14天第21天第28天第35天C 1421.40ʃ0.49427.40ʃ0.46425.20ʃ1.98438.70ʃ0.42435.30ʃ0.74C 2434.70ʃ1.54448.60ʃ1.44452.60ʃ0.78a 459.50ʃ0.54a 460.90ʃ0.81aC 3436.40ʃ0.74a 428.20ʃ0.48407.70ʃ0.37a 410.40ʃ0.54a392.60ʃ1.21A C 4424.50ʃ0.75415.80ʃ0.74a 394.20ʃ0.93a 382.60ʃ0.64A 381.30ʃ0.85A D423.00ʃ0.37428.90ʃ0.28419.10ʃ0.85423.90ʃ0.29424.60ʃ0.84从表4可以看出,C 1组的α-甘露糖苷酶活性在整个试验期间有增加的趋势,但与D 组比较差异均不显著(P >0.05);C 2组的α-甘露糖苷酶活性在整个试验期间不断升高,其中在第21㊁28和35天时显著高于D 组(P <0.05);C 3组的α-甘露糖苷酶活性在试验过程中一直在降低,在第7天时显著高于D 组(P <0.05),在第21和28天显著低于D组(P <0.05),而在第35天时极显著低于D 组(P <0.01);C 4组的α-甘露糖苷酶活性在试验过程中一直在降低,在第14和21天时显著低于D 组(P <0.05),而在第28和35天时极显著低于D 组(P <0.01)㊂3 讨 论甘露糖苷酶是机体合成和代谢糖蛋白途径中的一种重要的生化作用酶,对机体正常功能的维持至㊃81㊃试验研究养殖与饲料2013年第6期. All Rights Reserved.关重要㊂研究表明,动物采食疯草类植物后细胞的空泡变性是由α-甘露糖苷酶受到抑制所致,影响了糖蛋白的正常代谢,导致甘露糖苷在细胞内聚积,最终导致细胞空泡变性㊂S W 抑制α-甘露糖苷酶活性的原理是,其与甘露糖苷水解产物的甘露糖阳离子半椅状结构相似,为α-甘露糖苷酶的竞争性抑制剂㊂本试验研究结果表明,S W 能够影响血清中α-甘露糖苷酶的活性,在低剂量(A 1㊁A 2组)时,能够提高血清中α-甘露糖苷酶的活性,且随着试验时间的延长,差异极显著(P <0.05);在中等剂量(A 3组)和高剂量(A 4组)时,在试验的初期均能够提高血清中α-甘露糖苷酶的活性,但随着时间的延长却显著降低血清中α-甘露糖苷酶的活性(P <0.05),且随着试验时间的进一步延长,差异极显著(P <0.01);T s 剂量的增加和时间的延长都对血清中α-甘露糖苷酶的活性没有显著影响(P >0.05);而2种生物碱的混合效果却出现了与S W 类似的结果㊂综上所述,低剂量的S W 能够提高血清中α-甘露糖苷酶的活性;中等剂量或高剂量的S W 短时间内也能够提高α-甘露糖苷酶的活性,但随着时间的延长却能够显著降低血清中α-甘露糖苷酶的活性;T s 不影响血清中α-甘露糖苷酶的活性,这与赵宝玉[9]报道的结果一致㊂参 考 文 献[1] 王金妞.内蒙古棘豆属(O x y t r o p i s D C .)植物的分类学研究[D ].呼和浩特:内蒙古师范大学生命科学与技术学院,2005.[2] MO L Y N E U XRJ ,J AM E SLF .L o c o i n t o x i c a t i o n :i n d o l i z i d i n ea l k a l o i d s o f s p o t t e d l o c o w e e d (a s t r a g a l u s l e n t i g i n o s u s )[J ].S c i -e n c e ,1982,216(4542):190-191.[3] 杨桂云,于荣敏.小花棘豆的有毒成份及冱毒性测定[J ].动物毒物学,1989,4(2):8-10.[4] 于荣敏,李铣,宋丽艳,等.小花棘豆毒性生物碱的研究[J ].中国中药杂志,1991,16(3):160-163.[5] 卢围,路浩,赵宝玉,等.小花棘豆产苦马豆素内生真菌的筛选与鉴定[J ].畜牧兽医学报,2011,42(3):429-436.[6] R O C E SDP ,L U L L MA N N -R A U C H R ,P E N GJH ,e t a l .E f f i -c a c y o f e n z y m e r e p l a c e m e n t t h e r a p y i nα-m a n n o s i d o s i sm i c e :a p r e c l i n i c a la n i m a ls t u d y [J ].H u m a n M o l e c u l a r G e n e t i c s ,2004,13(18):1979-1988.[7] 李培峰,耿久荣,关红.黄花碱对小白鼠中枢神经系统中毒机理的研究[J ].畜牧与饲料科学,2005(3):25-27.[8] 孔祥雅,荆新堂,张丽慧,等.苦马豆素抑制α-甘露糖苷酶的剂量效应关系[J ].动物医学进展,2011,32(1):43-46.[9] 赵宝玉.疯草(甘肃棘豆)生物碱系统分析及其毒性的比较病理学研究[D ].杨凌:西北农林科技大学动医学院,2001.(责任编辑:郭会田췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍췍)国家收储冻猪肉扭转生猪生产亏损局面据国家发展和改革委员会5月22日介绍,自3月初生猪生产出现亏损后,有关部门以略高于市场的价格,先后2次在全国20多个省份开展中央储备冻猪肉收储㊂近期,生猪价格趋稳回升,快速下跌的趋势得到初步遏制㊂据国家发展和改革委员会提供的数据,截至5月15日,全国平均生猪出场价格为每千克12.79元,连续3周出现小幅上涨,每千克较前期低点回升0.18元;猪粮比价为5.33ʒ1,连续4周小幅回升㊂3月初,猪粮比价跌破6ʒ1盈亏平衡点后,国家迅速启动缓解生猪市场价格周期性波动调控预案,发布预警信息,建议广大养殖户合理调整生产,避免大的亏损;4月份以来,以略高于市场的价格,先后2次在全国20多个省份收储冻猪肉;10余个省份还按照当地预案要求,及时开展了地方冻猪肉收储㊂国家发展和改革委员会表示,下一步,国家有关部门将密切跟踪生猪生产和市场价格变化,准确研判生产和市场价格走势,认真执行好缓解生猪市场价格周期性波动调控预案,根据市场价格变化,适时适度组织收储㊂建议广大养殖户加快调整养殖结构,以充分发挥市场调节和政府调控合力,促进生猪生产和市场尽快恢复平衡㊂来源:新华网㊃91㊃养殖与饲料2013年第6期试验研究. All Rights Reserved.。
苦马豆素抑制α-甘露糖苷酶的剂量效应关系
苦马豆素抑制α-甘露糖苷酶的剂量效应关系孔祥雅;荆新堂;张丽慧;李勤凡;郭伟【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2011(032)001【摘要】根据苦马豆素(Sw)抑制α-甘露糖苷酶(AMA)的特点,建立了SW抑制AMA的剂量效应关系曲线和酶法测定SW溶液浓度的方法.SW溶液浓度范围在5×10-8mol/L～5×10-6mol/L时,SW溶液浓度的负对数与其抑制AMA活性百分比呈线性关系,线性方程Y=0.026X+5.167 4,R2=0.994 7.建立了酶法测定SW溶液浓度的方法,为疯草的进一步研究提供技术支持.【总页数】4页(P43-46)【作者】孔祥雅;荆新堂;张丽慧;李勤凡;郭伟【作者单位】西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】S856.9【相关文献】1.离子抑制色谱法测定棘豆属植物提取物中的苦马豆素 [J], 郭治安;张小辉;赵景婵;袁红安;梁小云2.苦马豆素对小鼠肝癌Hepa1-6细胞体外生长的抑制作用 [J], 杨慈清;李小英;刘丽君;刘红梅3.α-甘露糖苷酶法测定家兔血清中苦马豆素含量 [J], 王帅;吴书奇;陈根元;胡建军;张玲;马春晖4.小花棘豆苦马豆素对小白鼠肝脏α-甘露糖苷酶基因相对表达的影响 [J], 张建军;韩敏;王宇;白颖5.苦马豆素抑制N-聚糖加工对生殖激素分泌功能的影响 [J], 李中央;王圣翔;强煜云;田甜;赵宝玉;吴晨晨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
离子对反相高效液相色谱法测定兔血浆中氧化苦参碱含量
离子对反相高效液相色谱法测定兔血浆中氧化苦参碱含量
仇峰;何仲贵;李好枝;李芸
【期刊名称】《沈阳药科大学学报》
【年(卷),期】2002(19)5
【摘要】目的建立测定家兔血浆中氧化苦参碱含量的离子对反相高效液相色谱法。
方法血浆样品用 6%高氯酸沉淀蛋白 ,上清液经碱化后以氯仿正丁醇(98∶2 ,V∶V)提取 ,分取有机相N2 吹干后以流动相溶解进样测定。
色谱柱为DiamonsilTM
C18柱 ;流动相为乙腈水(2 0∶80 ,V∶V ,含庚烷磺酸钠 5mmol/L,磷酸调pH 3
2 ) ,流速 1 0mL/min;检测波长为 2 2 0nm ,以非那西丁为内标物。
结果在氧化苦
参碱质量浓度为 0 5～1 0 0 μg/mL内线性关系良好 (r=0 9965 ) ,日内、日间RSD分别≤ 6 6%和≤1 3 8% ,平均回收率为 99 1 %。
结论方法简便可行。
【总页数】4页(P328-331)
【关键词】离子对反相高效液相色谱法;氧化苦参碱;血药浓度
【作者】仇峰;何仲贵;李好枝;李芸
【作者单位】沈阳药科大学药学院;沈阳药大集琦药业有限责任公司
【正文语种】中文
【中图分类】R969.1
【相关文献】
1.反相离子对高效液相色谱法测定SD大鼠血浆中河豚毒素的含量 [J], 郑雍怡;王彦;张计;王刃锋;阎超
2.反相离子对液相色谱法测定兔血清和心肌中ATP及ADP的含量 [J], 张阳
3.反相离子对高效液相色谱法测定血浆吗啡及其代谢物M3G的含量 [J], 贺瑞英;刘丽京;邓艳萍
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家兔血浆中甘露醇浓度测定
家兔血浆中甘露醇浓度测定邓晶晶;冯云;李亭亭;尤思路【摘要】目的建立家兔血浆中甘露醇含量的测定方法.方法家兔血浆样品沉淀蛋白后,加入高碘酸钠使之氧化成为甲醛,再加入Nash试剂显色,在412 nm处采用比色法进行测定.结果用本法测定的血浆中的甘露醇在0.50～6.00 mg/ml范围内线性关系良好,相关系数r为0.9987;其平均加样回收率为97.59%,RSD为2.51%.结论采用本法测定血浆中甘露醇含量的精密度和重复性良好,并且操作简单易行.【期刊名称】《西南国防医药》【年(卷),期】2010(020)002【总页数】3页(P129-131)【关键词】血浆;甘露醇;测定;比色法【作者】邓晶晶;冯云;李亭亭;尤思路【作者单位】610083,成都医学院药学院实验教学中心;610083,成都医学院药学院实验教学中心;610083,成都医学院药学院实验教学中心;610083,成都医学院药学院实验教学中心【正文语种】中文【中图分类】R977.7甘露醇作为利尿药和脱水药，多年来临床广泛用于降低颅内压、眼内压、利尿及防治早期急性肾功能不全。
但使用甘露醇可引起脑压反跳而致死，且大剂量、频繁使用可产生严重的肾毒性〔1〕，因此，有必要对甘露醇进行血药浓度监测，以预防上述严重不良反应。
笔者按参考文献报道[2]，采用比色法对实验家兔血浆中的甘露醇注射液进行了含量测定及系统的方法学考察。
1 仪器与材料1.1 仪器 UV - 1102型紫外可见分光光度计(上海天美科学仪器有限公司)，80 - 2型离心机(上海手术器材厂)，XW - 80型漩涡混合器(上海第一医学院仪器厂)，HH - 2型恒温水浴锅(上海常思工贸有限公司)。
1.2 试剂高碘酸钠、三氯醋酸、硫代硫酸钠、醋酸铵、乙酰丙酮、冰醋酸均为分析纯。
20%甘露醇注射液(国药准字H3023037，石家庄四药有限公司)，甘露醇对照品(中国药品生物制品检定所)。
10%三氯醋酸溶液，0.015 mol/L高碘酸钠盐酸溶液，0.1 mol/L硫代硫酸钠溶液，Nash试剂[称取醋酸铵15 g置于100 ml容量瓶中，加入约70 ml蒸馏水溶解后，加冰醋酸和乙酰丙酮各0.2 ml后振摇，再加蒸馏水稀释至100 ml定容，摇匀即得(需临用新配)]。
气相色谱-甲基化-α-D-甘露糖苷内标法测定变异黄芪中的苦马豆素
准 确量 取 １０ Ｌ标准 溶液 和样 品溶液 ， ０ 各加 入 １ Ｌ内标 溶 液 （ ／ － ａ 溶 液 ） 再 加 入 １ ０ ０ ５ ｇ Ｌ ｍｅＧ ｌ ， ０
ｕ ＳＦ Ｌ Ｂ Ｔ Ａ＋Ｔ Ｓ硅 烷 化 试 剂衍 生 ， 闭 ， 温 放 ＭＣ 密 室
置 １ｈ 。
１ 实验 部 分
中 图分 类 号 ： ６ ８ ０ ５ 文献 标 识 码 ： Ｂ 文 章 编 号 ：０ ０ ８ １ （ ０ ７ ０ —７ １ ２ １０ —７ ３ ２ ０ ） ５ ０ ８ 一 Ｏ 栏 目类 别 ： 术 与 应 用 技
疯 草 （ｏ ｏ ｅ ） １ｃ ｗｅ ｄ 是棘 豆属 （ ｘ ｔｏ ｉ ） 黄芪 Ｏ ｙｒｐ ｓ 和 属 （ ｓｒ ｇ ｌｓ 植物 的统 称 ， 遍 布 世 界 的有 毒 植 Ａ ｔａ ａｕ ） 是 物， 会导 致 大量家 畜 中毒 ， 畜牧 业有 严重 危害 。变 对 异黄芪是 危 害较严 重 的一 种 疯 草 ， 泛分 布 于 内蒙 广 古 、 海 、 肃 等 省 区。 苦 马 豆 素 （ ｗａｎ ｏ ｉｅ 青 甘 ｓ ｉｓ ｎｎ ， Ｓ 是 一种 水溶性 吲 哚兹 定 生 物 碱 ， Ｗ） 是疯 草 类 植 物
ｎ ｐ ｒｎ ｓ ｅ ｍｅＧ １为 内标物 对 Ｓ 进 行 Ｇ ｏ ｙａ ｏ ｉ ， － ａ ） ｄ Ｗ Ｃ分
准 确称 取 １ ０ｇ变 异黄 芪 干草粉 于烧 瓶 中 ， 加入 ５ ０ｍＬ甲醇 超声 提取 ３ ｎ ０ｍｉ 。重复 一次 。合并 提取
液， 回收 甲醇 ， 膏用 １ｍｏ Ｉ 浸 ＶＬ ＨＣ 溶解 ， 氯仿 萃取 ， 去除杂 质 ， 水 相 的 ｐ 为 １ 用 正 丁醇 萃 取 ， 调 Ｈ ０， 回收 正丁醇 ， 再用 ２ｍＬ吡啶溶 解残 留物 为供试 样 品 。
荧光光度法测量苦马豆素的研究
性 （ 激发 波长 ：３ ６ ０ ｎ ｍ，发射 波 长 ：４ ４ ６ ｎ ｍ）。 ． 方法 ：对 血清 样 本 ，在 酶 活 性 较 稳 定 的６ ｈ 内 ，进行 活性 测 甘 氨 酸 ，氢 氧 化 钠 ，醋 酸钠 ，底 物 ：４ Ｍｕ ａ Ｍａ ｎ（ Ｓ Ｉ Ｇ ＭＡ 公 定 ，抽取 血 清样本 １ ０ ０Ｉ Ｘ ｌ ，分 别在 ｐ Ｈ ３ ． ８ 、ｐ Ｈ ４ ． ５ 、ｐ Ｈ ５ ． ０ 条 件 下 司 ），荧 光 物 质 ：４ 一 ｍ ｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ｕ ｍ ｂ ｅ ｌ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ｏ ｎ ｅ（ Ｓ Ｉ Ｇ ＭＡ 公 司 ），乙酸 的４ ０ ０ Ｘｌ Ｉ 反应缓冲液中持续反应１ ｈ ，而后加入２ ｍ ｌ 中止缓冲液反应 钠。 １ ５ ｍｉ ｎ ，最后 加入 ２ ５ ｌ 的 底 物溶 液５ ｍ ｉ ｎ 后用 荧 光计 测 量 释放 的荧 １ ． ３ 仪器
备灵敏度高、选择性好 、取样量少等优点。
１ 材料 与仪 器
次以制 成标 准 曲线 。 ２ ． ２ 不 同ｐ Ｈ条 件下 ｏ 【 一 甘露 糖苷 酶活 性测 定
Ｉ ． １ 血 清样 品
原理 ：荧光底物４ ＭＵ ａ Ｍａ ｎ 在 仪一 Ｍａ ｎ ａ ｓ ｅ 的作用下 ，水解产
一 ｍ ｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ｕ ｍｂ ｅ ｌ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ｏ ｎ ｅ ，用 荧 光 光 度 计 测 定 产 生 的 本试验随机抽取周边倒淌河、江西沟 、黑马河３ 个乡镇健康藏 生 甘 露糖 和４ ４ 一 ｍ ｅ ｔ ｈ Ｙ ｌ ｕ ｍ ｂ ｅ ｌ ｌ ｒ （ １ ｎ ｅ 含 量 ，与 标准 曲线 对 照 ，求 出 ｎ— Ｍａ ｎ ａ ｓ ｅ 活 系 羊血 清各 １ ０ 份 ，共３ ０ ４ ９，分 ３ 组 ，立 即分 离血 清 ，保 存备 用 。
HPLC-MS(TOF)法测定家兔血浆中黄芪甲苷的浓度
HPLC-MS(TOF)法测定家兔血浆中黄芪甲苷的浓度贾晓斌;陈彦;蔡宝昌;池玉梅;李伟;施亚芳【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2005(027)003【摘要】目的:建立测定家兔血浆中黄芪甲苷的HPLC-MS(TOF)法.方法:含药血浆用C18固相萃取小柱纯化样品,用LC/MS(TOF)联用技术,以电喷雾(ESI)作为接口技术,选择黄芪甲苷的离子([M+Na]+:807)和内标人参皂甘Rg1的离子([M+Na]+:823)作为测定离子,测定血浆中黄芪甲苷的浓度.结果:黄芪甲苷的回归方程:As/Ai=1.2668×103C+0.096557,r=0.999;线性范围为10～5000 ng·mL-1,定量限为5 ng·mL-1,回收率大于90%.结论:该测定方法灵敏度高、专属性好、快速,可满足黄芪甲苷药代动力学研究要求.【总页数】3页(P323-325)【作者】贾晓斌;陈彦;蔡宝昌;池玉梅;李伟;施亚芳【作者单位】江苏省中医药研究院,江苏省现代中药制剂工程技术研究中心,江苏,南京,210028;江苏省中医药研究院,江苏省现代中药制剂工程技术研究中心,江苏,南京,210028;南京中医药大学,江苏,南京,210029;南京中医药大学,江苏,南京,210029;南京中医药大学,江苏,南京,210029;江苏省中医药研究院,江苏省现代中药制剂工程技术研究中心,江苏,南京,210028【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.四氮杂杯[2]芳烃[2]三嗪键合硅胶固相萃取/HPLC-MS/MS法测定家兔血浆中的TSNAs [J], 王磊;赵文杰;王昇;郎海磊;张书胜;张建勋2.HPLC-MS/MS法测定兔血浆中黄芪甲苷的含量 [J], 王锐;刘昳n;卢红波3.HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中丹参酮ⅡA的质量浓度及应用 [J], 闻娜; 谭皓文; 石心红4.HPLC-MS/MS法测定血液病患者血浆中伊布替尼血药浓度的方法学研究及临床应用 [J], 位宁;郭进艳;孙文利;王磊5.固相萃取前处理HPLC-MS法测定口服给药后家兔血浆中的灯盏乙素(英文) [J], 李妮;黄建明;翁伟宇;黄照昌;蔡佳;郁韵秋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小花棘豆苦马豆素对小白鼠肝脏α-甘露糖苷酶基因相对表达的影响
小花棘豆苦马豆素对小白鼠肝脏α-甘露糖苷酶基因相对表达的影响张建军;韩敏;王宇;白颖【摘要】本试验旨在研究不同剂量苦马豆素(SW)胃内灌服小白鼠,检测其对肝脏α-甘露糖苷酶(AMA)基因在不同时间转录表达的影响.采用动物组织总RNA试剂盒提取肝脏组织总RNA,酶标仪法测定RNA纯度,凝胶电泳检测RNA完整性,实时荧光定量PCR技术检测AMA基因的转录表达水平.结果显示,试验组及对照组AMA基因均有表达,但各试验组中转录表达水平不同,与对照组相比,低剂量SW能促进肝脏AMA基因的表达,且随着试验的进行促进效果更加明显,高剂量和中等剂量SW初期也能提高AMA基因的相对表达,长时间却能严重抑制AMA基因的表达,随着试验的进行抑制效果愈明显.结果表明,不同剂量SW能在不同时间、不同程度地影响小白鼠肝脏AMA基因的转录表达.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2014(041)002【总页数】5页(P50-54)【关键词】苦马豆素;α-甘露糖苷酶基因;实时荧光定量PCR【作者】张建军;韩敏;王宇;白颖【作者单位】内蒙古农业大学兽医学院,农业部动物临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,农业部动物临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,农业部动物临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特010018;鄂尔多斯市东胜区动物疫病预防控制中心,内蒙古东胜017000【正文语种】中文【中图分类】Q786小花棘豆（Oxytropis glabra DC.）俗称醉马草，是豆科棘豆属（Oxytropis）多年生草本植物，是疯草的一种，全草有毒（王帅等，2012）。
疯草（Locoweed）是豆科棘豆属和黄芪属（Astragalas）2属中能引起动物以慢性神经机能障碍、机体消瘦为中毒特性的有毒植物总称（卢围等，2011）。
苦马豆素（swainsonine，SW）是疯草的主要毒性成分（Molyneux等，1982），属于多羟基吲哚里西啶类生物碱，是一种极强的α-甘露糖苷酶（α-mannosidase，AMA）竞争抑制剂，可使机体甘露糖的代谢发生异常（Wiedrok等，2007），大量蓄积在细胞内而导致细胞空泡变性，造成器官组织损害和功能障碍，并最终导致细胞死亡（Čikoš等，2009）。
高效液相色谱法测定家兔血浆中桂竹糖芥强心甙G
高效液相色谱法测定家兔血浆中桂竹糖芥强心甙G
张书捷;包海花;周金霞;李孟全
【期刊名称】《牡丹江医学院学报》
【年(卷),期】1999(020)004
【摘要】目的建立测定家免血浆中桂竹糖芥强心甙G的高效液相色谱法。
方法选用Shim-packCLC-ODS15cm×6．0ramC185U色谱柱，流动相为乙腈一水一甲醇(2．5：60：15)，以咖啡因为内标物，血浆样品经甲醇提取，N2吹干，流动相定溶，20μl进样t：极管阵列检测波长218nm。
结果线性范围为36．2-
36200μgL1，最低检测难度为36-2ugL1。
精密度、准确度亦符合有关要求。
结
论该分析方法简单、灵敏、专属性强。
【总页数】4页(P5-8)
【作者】张书捷;包海花;周金霞;李孟全
【作者单位】牡丹江医学院中心实验室，157011
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
【相关文献】
1.桂竹糖芥中强心甙的种类及丰度研究 [J], 石秀梅;李孟全;高雪玲;程艳
2.高效液相色谱法测定家兔血浆中丹参素的含量 [J], 梁岩冰;田玉琴
3.桂竹糖芥强心甙G及其制剂HPLC分析 [J], 台宝山;那杰
4.高效液相色谱法测定家兔血浆中Z－47浓度及其在药代动力学研究中的应用 [J],
钟大放;陈仁弟;李雪庆;秦文杰;顾景凯
5.桂竹糖芥中糖芥毒甙的研究 [J], 李葵;陈晓丽
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不同量乙醇对家兔SOD活力和MDA含量的影响
不同量乙醇对家兔SOD活力和MDA含量的影响赵善民;黄俊杰;黄丽娟;何显教;晋玲【期刊名称】《右江民族医学院学报》【年(卷),期】2000(022)005【摘要】为探讨不同量的乙醇对SOD活力和MDA 含量的影响,分别按家兔每公斤体重累加0. 2g、0.5g、1.0g的乙醇给予静注,然后分别测定不同量的乙醇作用下机体内的SOD活力和MDA含量,并进行比较分析.结果显示:0.2g、0.5g/kg体重乙醇时SOD活力增强,MDA含量降低,1.0g/kg体重乙醇时SOD 活力降低,MDA含量增加.认为机体对乙醇反应与用量不同有关,量少可提高SOD的活力和降低MDA含量,而量多则相反.进一步证实"饮酒少量有益, 过量有害"这一提法.【总页数】2页(P689-690)【作者】赵善民;黄俊杰;黄丽娟;何显教;晋玲【作者单位】右江民族医学院应用生理研究室,广西百色533000;右江民族医学院应用生理研究室,广西百色533000;右江民族医学院应用生理研究室,广西百色533000;右江民族医学院应用生理研究室,广西百色533000;右江民族医学院应用生理研究室,广西百色533000【正文语种】中文【中图分类】Q544.6【相关文献】1.异丙嗪对家兔内毒素性发热及血清SOD和MDA含量的影响 [J], 付咏梅2.不同量乙醇对家兔血液流变指标的影响 [J], 赵善民;黄丽娟;晋玲;何显教;黄俊杰;梁祚仁;王映;黄彦峰3.茶多酚对紫外线照射小鼠血清SOD活力和MDA含量的影响 [J], 杨明建;郑燕;申海玉;张浩4.选择性肠道去污染对创伤性截瘫家兔小肠组织MDA含量和SOD、GSH-Px的影响 [J], 聂海;刘鹏;曹德乾;白春宏;周际;刘齐东;安洪5.间歇低氧对小鼠肝肾组织MDA含量及SOD活力的影响 [J], 李文娟;李明华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定家兔血浆中槐果碱浓度
高效液相色谱法测定家兔血浆中槐果碱浓度
李建平;韩吉华
【期刊名称】《色谱》
【年(卷),期】1989(7)1
【摘要】槐果碱(Sophocarpine,Sop)系从豆科槐属植物苦豆子(Sophora alopecuroides L.)中提取出来的生物碱,属于四环的喹诺里西啶类(Quinolizidine)生物碱。
动物实验和临床应用表明,Sop具有平喘、抗肿瘤及抗心律失常等作用,该药毒性低,副作用小。
本文采用高效液相色谱法(HPLC)测定家兔血浆中Sop的浓度,方法灵敏,结果准确,重现性较好,该方法已用于药代动力学的研究。
【总页数】3页(P48-50)
【作者】李建平;韩吉华
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S858.291
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定家兔血浆中红景天苷浓度及其药代动力学研究 [J], 黄佳;李婷;史卫忠;赵志刚
2.高效液相色谱法测定家兔血浆中的乌头碱浓度 [J], 郭丹;林静瑜;周春权;姚欣;倪峰
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5.高效液相色谱法测定家兔血浆中Z－47浓度及其在药代动力学研究中的应用 [J], 钟大放;陈仁弟;李雪庆;秦文杰;顾景凯
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苦马豆素抑制α-甘露糖苷酶的剂量效应关系
Ｗ ＡＮＧ ｉ ｅ ＬＩ Ｗ ａ ｇ ｇ ｎ ， ａ — ｕ ｊ～ ｉ ｍ ， Ｕ ｎ — ｅ 。 ＬＩＺｈ ｏ ｘ ｅ
ｂｅ ｕ ｅ ｎ Ｗ ｅ ｔ ｒ — ｏｔ ｅ ｅ ｔｏｎ ｆ ｒｏｔ ｅ ｕ ｉ ｏ ｅｎｓ，ａ ｔ ｃ ｎ ｂ ｅ ｏ ｓ ｔ ｕ ｈ ｅ ｈ ｓ ｆ ｒ ｓ ｄ ｉ ｓ ｅ ｎ ｂｌ ｔ ｄ ｔ ｃ ｉ ｏ ｈ ｒ ｆ ｓｏｎ ｐｒ ｔ ｉ ｎｄ ｉ ａ ｅ ｕｓ ｄ ｔ ｅ ｐ ｔ ｅ ｍ ｔ ｏｄ ｏ Ｄｕ ｉｉ ａ ｉ ｎ ｔ ｃ ｉ ｎ ａ ａ ｎｓ ｈｅｆ ｓｏ ｏ ｅ ｎ ｗ ｉｈ Ｆｌ ｇ ｔ ｇ Ｔｈｅ ｓ ｕｄ ｕｃ ｅ ｓ ｕｌｙ ｇｏ ｈｅｃ ｕｐ ｉ ｒｆｃ ｔｏｎ ａ ｄ ｄｅ ｅ ｔｏ ｇ ｉ ｔｔ ｕ ｉ ｎ ｐｒ ｔ ｉ ｔ ａ — ａ ． ｔ ｙ ｓ ｃ ｓ ｆ ｌ ｔｔ ｏ ｌｎｇ ｏ ｈｅ ＦＡ ＬＧ ｏｍ ｐｌｔ ｎｔｇｅ ａ ｄ ｐｒ ｄｕｃ ｄ ｆｔ ｃ ｅｅ ａ ｉ ｎ ｎ ｏ ｅ ｍ ｏ ｃ ｏ ｌａ ｉ ｄｙ ｔ ｐｒ ｖ ｄ ｓ ｎ ｍ ｐ ｔ ｎｔ ｏｏ ｏ ｈｅ ｎｏ ｌ ｎａ ｎｔｂｏ ．Ｉ ｏ ｉ ｅ ａ ｉ ｏｒ ａ ｔ ｌｆ ｒ ｔ ｐｕ ｉｉａ ｉ ｆｆ ｓ ｏ ｏ ｅｎ ｔ ｇ ｄ ｗ ｉｈ Ｆｌ ｇ． ｒｆｃ ｔｏｎ ｏ ｕ ｉ ｎ ｐｒ ｔ ｉ ａ ｇｅ ｔ ａ
法 － 等 。但 以上方 法 都存 在 一 定 的 不足 ， ６ ］ 本试 验 根
ａ ｄ ５Ｆ一 ｒ ｂｔ ｉ ｄ。ａ ｌ ｏ ｈｅ ｓ ｃ ｅ ｅ ｏ ｃｏｎ ｌａ ｉ ｄｉｓ ｏ ｇＧ１ ｔ ｐｅ ｎ ２ ｗｅ ｅ ｏ ａｎｅ ｎｄ ａ ｌ ｆｔ ｍ ｅ ｒ ｔ ｄ ｍ ｎｏ ｌ ａ ｎｔｂｏ ｅ ｆＩ ｙ ．Ｔｈ ｒ ｓ ｎｏ ｃ ｏ ｓ ｅ ｅ ｗａ ｒ ｓ —
卵磷脂水解抑制试验测定家兔血清中的抗α毒素水平
卵磷脂水解抑制试验测定家兔血清中的抗α毒素水平陈兴祥;薛家宾;黄克和;王启明;徐为中【期刊名称】《江苏农业学报》【年(卷),期】2002(018)003【摘要】以卵磷脂水解试验为基础,根据α毒素在被抗毒素完全中和后将出现水解抑制这一原理,建立了测定家兔血清抗α毒素水平的卵磷脂水解抑制试验方法.结果显示,卵磷脂水解抑制试验可用于测定不同血清样品的抗α毒素水平,抗血清完全中和单位剂量α毒素时,水解抑制试验结果明显.所能测定出的最小血清抗体量相当于中和1/64 MLD毒素的量,最适毒素中和时间为30 min,其敏感性和精确性优于小鼠毒素中和试验,且操作简单,取材经济,易于推广应用.【总页数】4页(P163-166)【作者】陈兴祥;薛家宾;黄克和;王启明;徐为中【作者单位】南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095;江苏省农业科学院兽医研究所,江苏,南京,210014;南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095;江苏省农业科学院兽医研究所,江苏,南京,210014;江苏省农业科学院兽医研究所,江苏,南京,210014【正文语种】中文【中图分类】S852.4+4【相关文献】1.板蓝根对内毒素性DIC家兔血清LPO、SOD水平的影响 [J], 汤杰;施春阳;方建国;王文清;刘云海2.D型肉毒梭菌毒素海猪家兔免疫试验和高免血清效价测定试验 [J], 张西云;杨家华3.大黄与纳络酮在肝昏迷中的治疗作用以及血清内毒素结合蛋白水平的测定 [J], 郭宏伟;张爱军;张颖4.抗内毒素多肽对内毒素休克模型家兔的治疗作用 [J], 卫国;吕根法;郭毅斌;郑江5.恶性疟原虫保护性抗原复合基因—痘苗病毒重组活疫苗株家兔免疫血清及IgG 对恶性疟原虫的体外抑制试验 [J], 董文其;毕惠祥;李明;李英杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
绵羊血清α甘露糖苷酶活性测定
绵羊血清α甘露糖苷酶活性测定
樊泽峰;赵宝玉;李明涛;樊月圆;王建军
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2005(26)12
【摘要】为了测定绵羊体内α甘露糖苷酶最适反应的pH,建立一种适合于绵羊血清α甘露糖苷酶活性的检测方法.根据对-硝基苯基-α-D-甘露糖苷在α甘露糖苷酶的作用下可水解产生对硝基酚和甘露的活性,用比色法测定产生的对硝基酚含量,与标准曲线对照,从而求出α甘露糖苷酶活性.试验对2份绵羊血清的α甘露糖苷酶活性在不同pH条件下进行了测定.研究表明,绵羊血清中α甘露糖苷酶在pH 3.8时活性比pH 4.6和pH5.0高,差异显著(P＜0.05),初步推测绵羊体内α甘露糖苷酶最适反应的pH为3.8.
【总页数】3页(P75-77)
【作者】樊泽峰;赵宝玉;李明涛;樊月圆;王建军
【作者单位】西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨陵,712100;陕西省畜牧兽医总站,陕西西安,710016;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨陵,712100;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨陵,712100
【正文语种】中文
【中图分类】S852.21
【相关文献】
1.荷斯坦奶牛和藏系绵羊不同怀孕期血清骨型碱性磷酸酶活性的测定 [J], 赵有红
2.血清α-甘露糖苷酶活性的比色测定法 [J], 张世民
3.血清锌与α—D—甘露糖苷酶活性地恶性肿瘤诊断价值初探 [J], 王先酉;李明
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5.小尾寒羊和青海本地杂种绵羊3项血清酶活性的测定 [J], 沈明华
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家兔血浆中龙胆苦苷浓度的高效液相色谱测定
家兔血浆中龙胆苦苷浓度的高效液相色谱测定赵淑红，蒋袁絮，马学琴，高亦珑，杨光，李记诤，马琳，余建强【摘要】目的成立家兔血浆中龙胆苦苷的HPLC检测方式,研究秦艽中龙胆苦苷在家兔体内的药代动力学规律。
方式以秦艽水煎醇沉液家兔耳静脉注射后按时取血, 色谱条件: SHIM-PACK VP-ODS色谱柱(150 mm× mm,5 μm) ;流动相: 甲醇-乙腈-水（5∶10∶85） ;检测波长: 271 nm;流速: ml·min-1，测定血浆药物浓度，采纳DAS 软件计算药动血参数。
结果龙胆苦苷血药浓度在～μg·ml-1范围内线性关系良好(r= 5),最低定量浓度为μg·ml-1。
日内、日间周密度均小于10﹪,回收率为﹪～。
药-时曲线符合三房室模型，要紧药动学参数：Tmax= h，Cmax= mg·L-1，V=·kg-1，CL= L·h-1·kg-1，t1/2= h, AUC(0～∞)= mg·L-1·h-1。
结论该方式具有准确、简便、快速的特点,可用于秦艽中龙胆苦苷的检测。
【关键词】龙胆苦苷；高效液相色谱法；血药浓度；药动学秦艽作为一种经常使用的传统中药,野生品种早已不能知足临床需要，栽培秦艽开发利用尚处于起步时期，对其的研究多见于化学成份及药效学方面，少有对药动学的研究。
有报导龙胆苦苷在Beagle犬体内的药动学进程表现为静脉内给药一房室模型［1］;大鼠灌胃给予含龙胆苦苷药物后［2］；用HPLC法测定龙胆苦苷呈静脉外给药的二房室模型。
龙胆苦苷是裂环烯醚萜苷类化合物，极性大，吸收较少，静脉外给药其血药浓度均较低。
为此本实验选择兔耳静脉注射秦艽水煎醇沉液，用HPLC法定量测定家兔体内龙胆苦苷的药动学进程。
1 材料与仪器药品三年生栽培秦艽采于宁夏六盘山药材栽培基地(由宁夏六盘山药材栽培基地张守宗高级农艺师提供)，经宁夏药检所邢世瑞主任药师鉴定原植物为秦艽Gentiana macrophylla Pall.的生药材；按中药制剂药理学实验的常规制备方式制备秦艽水煎醇沉液 g/ml（以生药计），于冰箱内冷藏保留。
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性 的 抑 制程 度 与其 浓度 呈线 性 相 关 。 以对 硝 基 苯 基一ｔＤ 甘 露糖 苷 为底 物 ， 过 分 光 光 度 法 （０ ｍ） 测 仅 Ｏ 一 — 通 ４ ５ａ 检 一
中国草食动物
２ １ 钲 ０２
高鲜奶组羔羊保持 了良好的健康状况 。羔羊颗粒饲料摄 人过 多可能是造成低鲜奶 高精料组腹泻率 过高 的原 因。 哺乳期 早期羔羊饲 喂精料较多 ，不能有效 消化吸 收 ， 会 导致下痢 。羔羊腹泻率与羔羊的生长发育密切相关 ，０ ３～
６ ０日龄 时 ， 本试验 中羔羊培育 中期 由于羔羊腹泻从 而明 显降低 了羔羊的生长发育 ， 导致 Ｅ增重较 为缓慢 。 ｌ
［ ］ ａｄｅｕＪＭ，ｒ ｓｎ ．ｂ ｍ ｓｍ ｅ ｔ ｎ ｎｄ ｉ ａｖｓｆｄ ６ Ｇ ｕ ｒａ Ｂｉ ｏ ｓＧ Ｊ ｏ ａｕ ｍｐｙ ｇ ｉ ａｒ ｃｌｅ ｅ ｓ Ａ ｉ ｙ
ｍｉ ｅｌｃｓ ｗｔ ｖｒｉｇ ｅｏｒｅ ｏ ｒｔｉ Ｊ － ａｒ ｃ， ｌ ｒｐａｅ ｉ ａｙｎ ｒｓｕｃｓ ｆ ｐｏｅｎ［ ］ Ｄ ｉ Ｓｉ ｋ ｈ Ｊ ｙ
１８ ６ ４ ６ ４ ． ９ ０。 ３： ２ — ４０
［］ ７ 杨凤． 营养学 ［ ． ： 动物 Ｍ］ 北京 中国农业出版社 ，９ ３ １５ １９ ：４ ． ［］ ８ 冯涛 ， 陈玉林 ， 韩卫杰 ， 不 同蛋 白水平补 饲羔羊的效 果研究［ ］ 等． Ｊ． 饲
料 工业 ，０ ５ ２ （ ） ｌ— Ｏ ２ ０ ．６ ５ ：８ ２ ．
甘露糖苷酶水解产生的对硝基酚吸光度 ， 从而间接 测定样 品中 Ｓ 浓度 。结果显 示： ０１７ １ ３ ｇ ＬＳ Ｗ 在 ． — ． ０ｍ ／ Ｗ ０ ７ ｍ 浓度 范围内线性关 系良好 ， 加标平均 回收率 １０６ ０． ４％， Ｓ ＝ ． ３％（ ＝ 试验期 家兔血清 Ｓ 含量 随饲喂 时 ＲＤ２４ ７ ｎ ８ｏ Ｗ
易气化 ， 需进行 衍生化处理 ， 其应用也受 到限制 ； 高效 液 相色谱法需要 的仪 器特殊 ，溶剂 系统选择也不 成熟 ， 需
要进一步研究 ［ ｓ 目前 ， 于 一 。 关 甘露糖 苷酶法测定 家 兔血清 中 Ｓ 含量 的文献报道较少。仅 甘露糖苷酶活性 Ｗ 一 抑制分析属于酶分 析法 （ｎｙ ａ ｃ ｓａ 一 ｅ ｚｍ ｔ ｓｙ ｏ【甘露糖苷酶 ｉａ ０
４ 小结
［］ ４ 赵凤 立． 交肉羊 舍饲 育肥 日粮筛 选［ ］ 杂 Ｊ． 中国草 食动物 ，０ ２ ２ ２ ０ ，２
（ ）３ — Ｏ ４ ：８ ４ ．
［］ ５ 王永军 ， 陈玉林 ， 赵永贞 ， ， 尾寒羊羔羊 隔栏补饲效果研究［ ］ 等＿、 ｊ Ｊ． 家
畜生态学报 ， ０ ， ：４ １ ． ２ ３ ８ １— ６ ０
物 ．０ ５ ２ （ ）２ — ３ ２ ０ ．５ ６ ：２ ２ ．
［ ２ 孙进 ． 同处理大 豆蛋 白源代乳 料哺育早期 断奶 羔羊 的效果 ［ ． １］ 不 Ｄ］ 兰州 ： 甘肃农业大学硕士学位论文 ，０ ３ ２ ． ２ ０ ：４
Ｏ 甘露糖苷酶法测定家兔血清中苦马豆素含量 ｔ 一
王 帅 ， 吴书奇 ， 陈根元 ， 胡建 军， 张 玲， 马春 晖 （ 新疆 生产建设兵 团塔里木畜牧科技 重点 实验 室／ 里木 大学动物科 学学院 ， 塔 阿拉 尔 ８ ３ ０ ） ４ ３ ０
豆素含量测定方法有薄层色谱扫描法 、一 甘露糖苷酶 法［５、 ４］ － 气相色谱法 和高效液相色谱法 ［］薄层色谱扫 ７ ０
可降解甘露糖苷 ，而 Ｓ 与 Ｏ 甘露糖苷酶 的结构相 似 ， Ｗ ｔ 一
间的延长而增 高。该方法准确度较 高、 密度较好 、 精 操作简便 快速 、 特异性较好 ， 可作为 Ｓ 的微量 定量检测方 Ｗ
法。
关键词 ： 甘露糖苷酶 ； 一 家兔 ； 血清 ； 苦马豆素
苦马豆 素（Ｗ ｉｓｎ ｅ Ｓ 是小花棘 豆等疯草 的主 Ｓａｎｏ ｉ ，Ｗ） ｎ 要有 毒成分 ， 严重影响 了新疆畜牧业 的发展 ［２ Ｗ 有 １］ － ￣Ｓ 调节 动物免疫功能 的作用 ，该作用与 Ｓ 的浓度密切相 Ｗ 关。目前 ，Ｗ 的免疫学研 究已成 为热点 ， Ｓ 因此 ， 动物血清 中 Ｓ 含量 的测定显得极为重要。 Ｗ 目前 ， 国内采用的苦马 描法重现性 和精确 性都较差 ；气相 色谱 法前处理 繁琐 ， 检测样 品易受 蒸气压 、 温度 等的 限制 ， 而且苦 马 豆素 不
性别 因素对 羔羊 的生长发育有一定影响 ，公 羔表现
出较 快的生长趋势 。
［］ ９ 王龙坛 ， 焦卫 民 ， 罗军 ， ． 同培育方案对西 农萨能 羊羔羊生长 发 等不 育及血液生化指标的影响［ ］ Ｊ． 畜牧与兽 医，０ ９ ４ （ ２ ：９ ４ ． ２ ０ ， １ １ ）３ — ３
［ １许德 贵． 堂黑 山羊 生产性 能研究 ［ Ｊ １］ 金 Ｊ． 畜牧 兽医 ，０ ６ １ ） 四川 ２０ （ １：
２ －２ ． ５ ６
［］ ２ 赵有璋． 羊生产学［ ． ： Ｍ］ 北京 中国农业 出版社 ， ０ ： ０ ２５ ２ ８ ２ ２２ — ６ ， ． ０ ６ ６ ［ ］ 红远． ３杨 羔羊培 育方 法在云岭黑 山羊 中的应用研 究［ ］ 国草 食动 Ｊ＿ 中
参考 文献
［］ Ｉ 王龙坛 ． 不同培育方 案对西农萨能羊羔羊生长发育及瘤 胃微生物区
系的影响［ ． Ｄ］ 杨凌 ： 西北农林科技大学 ，０ ８ ２０．
［ ｏ 刘武军 ． １］ 早期断 奶对哈 萨克羊 体重及体 尺 的影 响［ ］ Ｊ． 农业 科 新疆
学 ，０ ９ ４ （ ）６ １６ ７ ２ ０ ，６ ３ ：６ — ６ ．