双波长分光光度法测定
双波长分光光度法测定复方磺胺嘧啶片制剂含量
双波长分光光度法测定复方磺胺嘧啶片制剂含量1．把握双波长分光光度法消退干扰的原理和波长挑选原则； 2．把握紫外一标准对比法测定药物含量及计算办法； 3．认识紫外分光光度仪的构造和用法操作。
二、实训原理复方磺胺嘧啶片系由磺胺嘧啶和甲氧苄啶组成的复方制剂。
两者在紫外区有较强的汲取。
在稀盐酸溶液中，磺胺嘧啶在308nm处有汲取，而甲氧节吮在此波特长无汲取，故可在此波特长挺直测定磺胺嚓咤的吸光度而求得含量。
甲氧苄啶在277.4nm波特长有较大汲取，而磺胺嘧啶在277.4nm处与308nm处有等汲取点。
故可采纳双波长法以277.4nm为测定波长，308nm为参比波长，测定甲氧苄啶在该两波特长的ΔA(ΔA-A277nm-A308nm）值来计算含量。
复方磺胺嘧啶片（CompoundSulfadiazineTablets）每片中含磺胺嘧啶(C10H10N4O2S）应为0.360-0.440g；含甲氧苄啶(C14H18N4O3）应为45.0-55.0mg。
处方磺胺嘧啶 400g 甲氧苄啶 50g ————————制成 1000片三、实训仪器与试剂 1．仪器 751紫外分光光度仪；容量瓶（100mL)；石英比色皿；移液管。
2．试剂磺胺嘧啶对比品；甲氧苄啶对比品；复方磺胺嘧啶片；0.4%氢氧化钠溶液；稀盐酸溶液（0.0lmol/L)；冰醋酸。
四、实训步骤 1．磺胺嘧啶测定取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺嘧啶0.2g）置于100mL量瓶中，加0.40o氢氧化钠溶液适量，振摇使磺胺嘧啶溶解，并稀释至刻度，摇匀，过滤。
精密量取续滤液2mL，置于另一100mL 容量瓶中，加稀盐酸溶液，稀释至刻度，摇匀，在308nm的波特长测定吸光度。
另取105℃干燥至恒重的磺胺嘧啶对比品适量，精密称定，加稀盐酸溶液，溶解并定量稀释制成每1mL中约含40μg的对比品溶液，同法测定。
c供试＝A供试/A对比×c对比 c供试——供试品溶液的浓度； c对比——对比溶液的浓度； A供试——供试品溶液的吸光度； A对比——对比溶液的吸光度。
PPT-双波长分光光度法测定复方磺胺甲恶唑片中磺胺甲恶唑的含量
3. 本法的主要误差来源何在？ 4. 在选择实验条件时，是否应考虑赋形剂等
辅料的影响？如何进行？ 5. 如果只测定磺胺甲恶唑，甲氧苄啶对照品
溶液的浓度是否需要准确配置？
E11c%m
10 M
o 物质在某一波长下的吸光系数 ，是物质对某一特定波长光吸
收能力的衡量；吸光系数越大 ，吸光能力越强，测定时灵敏 度越高。同一吸收物质在不同
。 波长下的E值是不同的
A是波长的函数，当LC=1 时，A＝E，可见吸光系数 也是波长的函数。
A AB 1
AA 1
AB 1
A 2
A 1
)lc
A
可见，在双波长分光光度法中吸光度的差值与干扰组
份B无关。
四 操作步骤
l 1）.对照品溶液的配制 精密称取105℃干燥至恒重的甲氧 苄啶对照品约10mg，用乙醇溶解并定容至100mL，精取 2.00mL置100mL量瓶中，用0.4%NaOH稀释至刻度，摇匀 。取在105℃干燥至恒重的磺胺甲恶唑对照品约50mg，精 密称定，同法配制溶液。
A 1
lc
A
B 1
lc
B
A AB 2
AA 2
AB 2
A 2
lc
A
B 2
lc
B
o 双波长分光光度法(双波长等吸收法)
当光谱重叠时，在其光谱中选择两波长，在选定的 波长处，干扰组分有相同的吸收；被测组分与干扰组 分的吸收有足够大的差别。则两波长处吸光度的差值 与被测组份的浓度成正比。
双波长分光光度法测药品含量偏低的原因
双波长分光光度法是一种常用的药品含量测定方法，其原理是利用物质在不同波长下吸光度的差异来测定样品的含量。
然而在实际的药品生产和质量控制过程中，有时会出现药品含量偏低的情况，而双波长分光光度法测得的结果也会出现偏差。
那么，造成药品含量偏低的原因是什么呢？1. 药品成分不均匀药品在生产过程中，可能会出现成分不均匀的情况。
这可能是由于原料混合不均匀、加工过程中受热不均、或者贮存条件不当等因素导致的。
当药品成分不均匀时，使用双波长分光光度法测定含量就会出现偏低的情况。
2. 良品率不足在药品生产过程中，如果生产线上的设备不稳定或者操作不当，很可能会导致药品的良品率不足。
这样一来，部分药品的含量就会偏低，从而影响到双波长分光光度法的测定结果。
3. 样品制备不当样品的制备过程也是影响双波长分光光度法测定结果的关键因素之一。
如果样品制备不当，比如溶解不彻底、稀释比例错误等，都有可能导致测定结果偏低。
4. 仪器故障双波长分光光度法依赖于专用的分光光度计来进行测定，而仪器的精准度和稳定性直接影响着测定结果的准确性。
如果仪器发生故障或者未经过定期校准，就有可能导致测定结果偏低。
5. 操作不当操作人员的技术水平和操作规范也会对双波长分光光度法的测定结果产生影响。
样品的操作过程中如果没有按照要求操作，或者操作人员缺乏相关经验和训练，都有可能导致测定结果出现偏差。
导致药品含量偏低的原因包括药品成分不均匀、良品率不足、样品制备不当、仪器故障以及操作不当等多个方面。
在实际生产中，为了确保药品含量的准确性，需要从原料采购、生产工艺、仪器选择和操作规范等多个环节进行全面的管理和控制，以确保药品含量测定结果的准确性和可靠性。
在实际的药品生产过程中，药品含量偏低可能会给企业带来不小的损失，因为药品的含量不足会直接影响其疗效和安全性，甚至可能引发法律纠纷和产品召回。
对于药品含量偏低的原因以及如何预防和解决这一问题，企业必须高度重视，并加以有效管理。
实验九 双波长分光光度法测定复方制剂含量-推荐下载
Байду номын сангаас
实验注意事项：
1. 石英比色皿的正确使用和吸收度校正。 2. 吸收度读数三次，取平均值计算含量。 3. 读数后及时关闭光闸以保护光电管。 4. 片剂取样量应是根据平均片重和片剂规格量，计算出来的相当于规定量主药的片粉
重量（片粉重量=平均片重 / 标示量×规定的取样量）。 5. 片剂的含量计算（相当于标示量的百分含量）。 根据药品获得的难易情况，任选一个内容进行实验。
磺胺嘧啶 取本品 10 片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺嘧啶 0.2g），置 100mL 量瓶中，加 0.4%氢氧化钠溶液适量，振摇使磺胺嘧啶溶解，并稀释至刻度，摇匀， 滤过，精密量取续滤液 2mL，置另一 100mL 量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度， 摇匀，照分光光度法（附录），在 308nm 的波长处测定吸收度；另取 105℃干燥至恒重的 磺胺嘧啶对照品适量，精密称定，加盐酸溶液（9→1000）溶解并定量稀释制成每 1mL 中约 含 40μg 的溶液，同法测定；计算，即得。 甲氧苄啶 精密称取上述研细的细粉适量（约相当于甲氧苄啶 40mg），置 100mL 量瓶中， 加冰醋酸 30mL 振摇使甲氧苄啶溶解，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品 溶液；另精密称取甲氧苄啶对照品 40mg 与磺胺嘧啶对照品约 0.3g，分置 100mL 量瓶中， 各加冰醋酸 30mL 溶解，加水稀释至刻度，摇匀，前者作为对照品溶液（1），后者滤过， 取续滤液作为对照品溶液（2）。精密量取供试品溶液与对照品溶液（1）、（2）各 5mL， 分置 100mL 量瓶中，各加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法测定。取 对照品溶液（2）的稀释液，以 308.0nm 为参比波长 λ1，在 277.4nm 波长附近（每间隔 0.2nm）选择等吸收点波长为测定波长（λ2），要求 ΔA=Aλ2-Aλ1=0。再在 λ2 和 λ1 波长处分别测定供试品溶液的稀释液与对照品溶液（1）的稀释液的吸收度，求出各自的吸 收度差值（ΔA），计算，即得。 （二）、复方氨基比林注射液（Compound Aminopyrine Injection） 本品每 1mL 注射液中含氨基比林（C13H17N3O）应为 47.5～52.5mg，含安替比林 （C11H12N2O）应为 18.0～22.0mg，含巴比妥（C8H12N2O3）应为 8.55～9.45mg。 [处方]
双波长分光度法原理
双波长分光度法原理
双波长分光度法是一种在化学和生物分析中常用的分析方法，它利用物质在不同波长下的吸收性质来定量分析。
其原理如下：
1. 波长选择：选择两个不同的波长，一般一个波长用于测定待测物质的吸光度，另一个波长则用作基准。
这两个波长的选择应保证待测物质在其中一个波长下的吸光度较大而在另一个波长下的吸光度较小。
2. 校正基准吸光度：在基准波长下测量样品吸光度，并用其作为基准吸光度。
这一步骤旨在消除样品中其他物质的干扰。
3. 测定待测物质吸光度：在测定波长下测量样品吸光度，其绝对值与待测物质的浓度成正比。
将所得吸光度减去基准吸光度，可以消除其他物质的干扰，使吸光度仅与待测物质有关。
4. 构建标准曲线：在一系列已知浓度的标准溶液中重复上述步骤，得到一系列吸光度值。
将这些吸光度值与其对应的标准溶液浓度绘制在坐标图上，通过拟合曲线可以建立标准曲线。
5. 样品浓度测定：根据待测样品的吸光度，利用标准曲线可以得到对应的浓度。
双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量
双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量目的建立双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量的测定方法。
方法样品操作及测定方法同重复性试验，平行操作5批样品，另按照中和滴定法测定，比较两种测定方法测定所得样品的百分标示量。
结果双波长法：99.2%，97.9%，98.5%，96.5%，98.2%；中和法：100.8%，98.7%，99.8%，97.1%，99.4%。
乙酰水杨酸在255nm的波长处有最大吸收，盐酸吗啉胍在250nm的波长附近为225nm波长的等吸收波长，经过精选，选择250.1nm波长为参比波长，225nm波长为测定波长。
乙酰水杨酸乙醇溶液放置3h基本稳定，其他成分的乙醇溶液均稳定。
结论采用双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量，操作简单，所用试剂方便易得，通过两种试验方法的比较，效果较满意。
标签：双波长分光光度法；爱索尔感冒片；乙酰水杨酸；含量爱索尔感冒片是乙酰水杨酸和盐酸吗啉胍的复方制剂，原质量标准采用中和滴定法测定乙酰水杨酸含量，且操作繁琐，本文改用双波长分光光度法测定爱索尔感冒片中乙酰水杨酸的含量，取得较满意的效果。
1 仪器与试药岛津UV-2100型紫外分光光度计；乙酰水杨酸对照品、盐酸吗啉胍对照品（符合中国药典2005年版规定）；乙醇为分析纯；爱索尔感冒片为市售品。
2 实验条件的选择精密称取乙酰水杨酸对照品适量，用乙醇配制成10ug/ml的溶液，按处方量配制盐酸吗啉胍溶液及辅料溶液，在200nm～300nm的波长范围内绘制吸收曲线。
结果表明：乙酰水杨酸在255nm的波长处有最大吸收，盐酸吗啉胍在250nm 的波长附近为225nm波长的等吸收波长，经过精选，选择250.1nm波长为参比波长，225nm波长为测定波长。
乙酰水杨酸乙醇溶液放置3h基本稳定，其他成分的乙醇溶液均稳定。
3 标准曲线的制备精密称取乙酰水杨酸约25mg和盐酸吗啉胍10mg，同置50ml量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解，并稀释至刻度摇匀。
双波长测定实验报告
一、实验目的1. 掌握双波长分光光度法的原理和应用；2. 学习使用紫外-可见分光光度计进行定量分析；3. 通过实验测定待测物质的含量。
二、实验原理双波长分光光度法是一种基于物质在特定波长处吸光度与浓度成正比关系的定量分析方法。
该方法通过选择两个特定波长，分别测定待测物质在这两个波长下的吸光度，从而消除共存物质对测定结果的干扰。
实验原理如下：A1 = ε1c1λ1A2 = ε2c2λ2式中，A1、A2分别为待测物质在波长λ1、λ2处的吸光度；ε1、ε2分别为待测物质在波长λ1、λ2处的摩尔吸光系数；c1、c2分别为待测物质在波长λ1、λ2处的浓度。
通过联立上述两个方程，可以消去ε1、ε2，得到待测物质的浓度：c = (A1λ2 - A2λ1) / (λ1λ2)三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外-可见分光光度计、移液管、容量瓶、锥形瓶、比色皿、洗耳球等；2. 试剂：待测物质标准溶液、参比溶液、溶剂等。
四、实验步骤1. 准备标准溶液：准确移取一定体积的待测物质标准溶液，加入适量的溶剂，定容至一定体积，配制成一系列浓度梯度的标准溶液；2. 配制参比溶液：准确移取一定体积的参比溶液，加入适量的溶剂，定容至一定体积；3. 测定吸光度：在紫外-可见分光光度计上，选择两个特定波长，分别测定标准溶液和参比溶液的吸光度；4. 数据处理：根据实验数据，绘制吸光度-浓度曲线，通过线性回归得到线性方程，代入待测样品的吸光度，计算待测样品的浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：以标准溶液的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线；2. 线性回归：对吸光度-浓度曲线进行线性回归，得到线性方程；3. 待测样品浓度计算：代入待测样品的吸光度，根据线性方程计算待测样品的浓度。
六、实验讨论1. 实验误差分析：实验误差主要来源于仪器误差、操作误差和试剂误差。
在实验过程中，应尽量减小误差，提高实验结果的准确性；2. 双波长选择：在双波长分光光度法中，选择合适的波长对消除共存物质干扰至关重要。
双波长分光光度法测定
邹 晓 菊
目
录
前言
实验原理 实验部分
结果与讨论
结论
前言
5- Br - PADAP 是一个性能优良的杂环偶氮指示 剂。已被用于铁、锰、镍、锌等微量金属离子 的测定，有关此试剂的性能及应用已有报道。 测定解离常数的方法有电位滴定法，分光光度 法，电导率法和毛细管电泳法等。
Y=0.3794pH-4.0195；R2=0.9713 Y=0.3848pH-4.0700；R2=0.9633 Y=0.3292pH-3.5870；R2=0.9563 Y=0.4177pH-4.3413；R2=0.9623 Y=0.5285pH-5.4789；R2=0.9690 Y=0.5549pH-5.6193；R2=0.9705
10.59 10.58 10.90 10.39 10.37 10.13
表3 本文结果与文献值的比较
离解常数 测量值 文献值
pKa2 2.37 2.39
pKa3 10.59 11.64
结论
1、由于测量时溶液与文献值测量时条件不同，而且未 在实验条件及操作完全相同的情况下采取多做几组取 平均值的方法，因而测量值与文献值有所不同。 2、 应用双波长分光光度法测定药物的pKa值时无需知 道供试液的准确浓度，只要求各份溶液的浓度相等， 因此操作较为方便和迅速。本文虽控制离子强度为一 定值，但在离子强度确定的情况下，酸解离常数仍然 会受有机溶剂的影响，由此可 A2
(5)
-1)则
Y= pH-pKa （6）
若其酸式体的摩尔吸光系数相等，即 εHL1 =εHL2 。 在这种情况下，根据类似的数学推导，可以得 到下式： AHL1 AHL 2 lg( -1)=pKa-pH (7) A A
双波长紫外分光光度法
②样品测定：取阿司匹林肠溶片20片，精密称定，研细。精密称取约 相当于阿司匹林50mg置于50mL容量瓶中，加乙醇适量，振摇使溶解 并定容，摇匀，滤过。精密量取续滤液2mL置25mL容量瓶中，加乙 醇至刻度，摇匀。分别在276nm、322nm波长处测定吸收度，用回 归方程计算阿司匹林的含量。
含量计算
阿司匹林制剂在体外的含量测定
——双波长紫பைடு நூலகம்分光光度法
原料
阿司匹林肠溶片
原理
采用双波长紫外分光法（测定波长为276nm和322nm），测定了阿 司匹林肠溶片的含量，可消除附加产物水杨酸的干扰。
方法
①标准曲线的绘制：精密称取阿司匹林对照品适量，加乙醇溶解使成 1000μg/mL的溶液。精密吸取1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mL，分置于 25mL容量瓶中，加乙醇至刻度，分别制成40，60，80，100和 120μg/mL的对照品溶液，以乙醇为空白，分别在276nm、322nm波； 长处测定吸收度，以浓度C和ΔA进行线性回归得出方程式。
双波长分光光度法测定土壤硝态氮
211 主要仪器与试剂 UV - 2401 紫 外 - 可 见 分 光 光 度 计 ; 振 荡 器
收稿日期 : 2005 - 01 - 07 作者简介 : 涂常青 (1970 - ) , 女 , 广东平远人 , 高级实验师 , 在读硕士 , 主要从事环境分析化学的研究 。
— 50 —
千粒重 (g) 2610 2518 2517
实际产量 (kg/ hm2) 704715 671015 635510
差异显著性
0105
0101
a
A
b
AB
c
B
注 : LSD0105 = 282132 kg/ hm2 , LSD0101 = 401190 kg/ hm2 。
3 小结
促进水稻分蘖 , 从而提高有效穗和实粒数 , 最终产 生显 著 的 增 产 效 果 , 可 比 浅 施 、面 施 分 别 增 产
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土壤肥料 2006 (1)
21213 样品测定方法
准确称取 10 g 充分拌匀的鲜土壤 , 分别置于
y = 015283 x - 010009 …………………… (1)
3 结果与讨论
311 精密度和准确度实验 31111 沙田柚果园土壤硝态氮的测定
随机抽取 4 份沙田柚土壤 , 按 21213 所述方法 进r = 019999 (n = 7)
Abstract : A method of determining nitrate nitrogen concentration of vegetables applying nitrate electrode was introduced in this paper. The results showed that this method was convenient , swift , and precise according to the evaluation of re2 covery trial , contrast experiment , and precision test . The method could be applied to the swift determination of nitrate in vegetables. Key words : vegetable ; nitrate ; determination method ; nitrate electrode
双波长分光光度法测定头孢米诺钠含量及配伍稳定性
双波长分光光度法测定头孢米诺钠含量及配伍稳定性摘要：本次研究中主要对双波长分光光度法的工作原理进行分析，并且通过具体的实验来研究这一方法在测定头孢米诺钠含量以及配伍稳定性方面的应用。
这种方式在医药研究领域受到了高度关注，并且已经得以推广。
医药研究人员只有提升对这种方式的掌握程度，才能够保证实验的准确性。
关键词：双波长分光光度法；头孢米诺钠；含量测定；配伍稳定性从医药研究的角度上看，头孢米诺钠属于一种抗生素药物。
从一些医药应用的记载中可以看出，头孢米诺钠药物在使用的过程中，主要是和注射用水、氯化钠等注射液配伍。
在本次研究中，研究人员主要对双波长分光光度法在测定这一药物含量以及配伍情况进行研究和分析，提升药物研究工作的高效性。
一、双波长分光光度法的基本原理及应用在对药物进行测定的过程中，分光光度法主要是以定量测定的形式为主，在应用方法上主要采用的是双波长法、三波长法以及导数光谱法。
其中，双波长分光光度法是比较常见的测定方法，不仅检测方式相对比较简便，而且应用范围也比较广。
这种检测方式的精准度较强。
通常情况下，双波长法在应用的过程中，比较典型的方式有两种，第一是等吸收波长法，第二是系数倍增法。
这两种方式都有相应的测定条件，而且同样存在着一定的影响因素。
在实际的应用的过程中，工作人员应该对双波长分光光度法加强重视。
二、双波长分光光度法测定头孢米诺钠含量实验在本次实验中，研究人员主要是对不同条件下的头孢米诺钠含量以及配伍情况进行测定。
具体来说实验的过程中主要表现在以下几个方面：1、实验材料在实验的过程中，研究人员主要选择的是可见紫外分光光度计，此设备是UV系列，产地为日本的岛津。
实验所用的头孢米诺钠药物主要取材于南昌市立健药业。
另外，还包括果糖注射液、转化糖注射液以及水注射液等等。
这些试剂都是来自于大的生产厂家，其质量可以保证。
2、方法与结果2.1波长的选择首先，研究人员要将头孢米诺钠和水溶液进行配置，将其控制在200-400nm的范围内，通过观察和分析可以得出，在273nm左右的范围内吸收率最高。
双波长分光光度法
双波长分光光度法建立在Lambert—beer定律基础上的单波长分光光度分析技术，应用极为广泛，但由于单波长法存在混浊试样对光的散射和比色杯背景吸收等难以克服的缺点，它在高精度测量中的应用受到一定的限制。
为了解决浑浊试样对分光光度测定的干扰问题，美国的B.Chance于1951年制成了用振动镜使两束不同波长的单色光交替通过待测溶液的双波长分光光度计（Double Wavelength Spectrophotometer）,从而奠定了双波长分光光度法的基础。
随着科学技术的发展，双波长分光光度分析技术已日臻完善，与先进的后分光技术相结合，在生化自动化分析中得到了广泛的应用并显示出了光明的发展前景。
1 双波长分光光度法的原理双波长分光光度法是在传统分光光度法的基础上发展起来的，它的理论基础是差吸光度和等吸收波长。
它与传统分光光度法的不同之处，在于它采用了两个不同的波长即测量波长（又叫主波长λp,Primary Wavelength）和参比波长（又叫次波长λs, SecondWavelength）同时测定一个样品溶液[1,2]，以克服单波长测定的缺点，提高了测定结果的精密度和准确度。
早期的双波长分光光度计在测定时，两束不同波长的单色光经斩光器（Chopper，一种用于双波长分光光度计中使光束按一定周期反射，遮断或通过的装置）处理后，以一定的时间间隔交替照射[1]比色杯，经待测溶液吸收后，再照到光电管上，产生两个不同的吸光度，再将这两个吸光度相减，就得到了差吸光度ΔA。
根据Lamber—Beer定律, 得：Aλp=ελpLC+Ap (1)A λs=ελsLC+As (2)式中Aλp 、 A λs—分别为待测溶液在主波长和次波长处的吸光度，ελp 、ελs—分别为待测溶液在主波长和次波长处的摩尔吸光系数L—光径C—待测溶液的浓度Ap 、As—分别为待测溶液在主波长和次波长处的散射或背景吸收当λp 、λs相差不太大时，由同一待测溶液产生的光散射吸光度和背景吸光度大致相等，即Ap＝A s，将（1）式－（2）式得：Aλp－A λs＝ΔA＝（ελp－ελs）LC （3）对于同一待测溶液来说，ελp－ελs是一常数K，在光径L不变的情况下，（3）式可简化为：ΔA＝KC （4）（4）式说明，待测溶液在λp与λs两个波长处测定的差吸光度ΔA与试样中待测物质的浓度C成正比。
双峰双波长分光光度法测定水中的铅
双峰双波长分光光度法测定水中的铅摘要：目前我国环境地表水和污水中铅的测定方法，常用的分光光度法主要以二硫棕萃取法为主，该法选择性不高，灵敏度低，使用剧毒氰化物作掩蔽剂，且操作繁琐。
文章在铅与二甲酚橙在溶液形成紫1∶1的红色配合物而建立的光度法基础上进行改进，研究了一种双峰双波长测定铅的新方法，与单波长光度法相比其灵敏度显著增加。
该法已用于水样中铅含量的直接测定，结果令人满意。
关键词：铅；二甲酚橙（XO）；分光光度法；双峰双波长；单波长铅是一种具有蓄积性、多亲和性的毒物，可与体内一系列蛋白质、酶和氨基酸中的官能团（巯基）结合，干扰机体的生化和生理活动引起中毒，对肝和肾的危害尤为严重。
我国对于生活饮用水中铅含量明确规定不得超过10 μg/L。
因此，研究监测及分析水体中铅含量的方法有重大的社会意义。
本文在原有分光光度法的基础上得到一种新的双峰双波长分光光度法测定铅，取得良好的效果。
1 实验部分1.1 实验原理对某一个显色反应：M＋nR＝MRn当配合物MRn和显色剂R都有最大吸收时，以配合物的最大吸收波长作测定波长λ2，色剂的最大吸收波长λ1作参比波长。
设待测组分的总浓度为CM，在λ1和λ2处各组分的摩尔吸光率分别为、、和。
若反应生成的配合物很稳定，反应达平衡时消耗的显色剂量为nCM，那么用双峰双波长分光光度法测得吸光度△A为：△A＝△Aλ2－△Aλ1＝（CM －nCM ）－（CM －nCM ）＝CM（－n ）＋CM（n －）＝CM［（－n ）＋（n －）］△A与待测组分M的浓度CM成正比，据此可求出M的含量。
式中，前一项CM（－n ）为单波长法测量的吸光度，后一项CM（n －）中，对显色剂来说，在波长λ1处，且n≥l，必有＞，故n －项必为正值。
因此，用双峰双波长分光光度法进行单组分测定时，其灵敏度比单波长法高。
上式为双峰双波长分光光度法的测定原理。
1.2 仪器与试剂1.2.1 主要仪器VIS－723G型可见分光光度计；PB220型标准pH计。
双波长法测定混合物
双波长法测定混合物
双波长法是一种常用的光谱分析方法，用于测定混合物中不同成分的含量。
该方法利用物质在不同波长下的吸光特性来进行定量分析。
在测定混合物时，可以利用双波长法来区分和测定混合物中不同成分的浓度。
首先，双波长法利用混合物中各成分在不同波长下的吸光特性来进行测定。
通过选择适当的波长，可以使得混合物中的各成分在不同波长下具有不同的吸光度，从而可以利用这种差异来进行定量分析。
其次，双波长法通常需要使用双波长分光光度计或者双波长分光光度计来进行测定。
这些仪器可以同时测量样品在两个不同波长下的吸光度，并利用吸光度的差异来计算混合物中各成分的含量。
双波长法的优点之一是可以减小测量误差。
通过在两个不同波长下进行测量，可以减小由于样品浓度、溶剂影响等因素引起的误差，提高测定的准确性。
另外，双波长法还可以用于测定混合物中多个成分的含量，因
为可以通过选择不同的波长来测定不同成分的吸光度，从而实现对多个成分的同时测定。
总的来说，双波长法是一种常用的光谱分析方法，可以用于测定混合物中不同成分的含量。
通过选择适当的波长和使用合适的仪器，可以实现对混合物中各成分含量的准确测定。
双波长分光光度法测定氯硝唑酊中氯霉素与甲硝唑的含量_施春阳
双波长分光光度法测定复方水杨酸酊的含量
双波长分光光度法测定复方水杨酸酊的含量【摘要】目的建立用分光光度法测定复方水杨酸酊中苯酚和水杨酸含量的方法。
方法采用双波长分光光度法，消除组分干扰，直接测定。
苯酚的测定波长为269．5 nm,参比波长为327．5 nm;水杨酸的测定波长为302．5 nm,无需参比波长。
结果苯酚的平均回收率为100．4%,RSD为0．93%，相关系数r=0．9995；水杨酸的平均回收率为99．7%,RSD为0．37%，相关系数r=0．9998。
结论本法快速、简便，结果满意。
【Abstract】Objective To develop a method for determining phenol and salicylic acid in compound salicylic acid tincture.Methods The dual-wavelength spectrometry method was used for eliminating mutual interference direct determination.Determination of phenol wavelength of 269．5 nm,the reference wavelength of 327．5 nm; smlicy acid in the wavelength of 302．5 nm with reference wavelength.Results Average recovery rate of 100．4%(RSD=0．93%)for phenol and 99．7%(RSD=0．37%)for salicylic acid coeflicient of r=0．999 5 for phenol and r=0．999 8 ofr salicylic acid.Conclusions The method was simple and accurate with satisfactory results.【Key words】Dual-wavelength spectrometry; Ｐhenol; Ｓalicylic acid复方水杨酸酊为胶州中心医院协定处方，具有溶解角质和杀霉菌作用，用于白癣及其他皮肤霉菌感染，疗效确切。
双波长分光光度
双波长分光光度
双波长分光光度法是一种用于测定物质浓度的光谱分析方法。
它利用两个不同波长的单色光交替照射同一吸收池的溶液，然后通过检测器和电子控制系统计算出这两个波长下吸收度的差值△A，与被测定物质的浓度成正比。
双波长分光光度法的关键在于正确选择两个波长，以确保被测组分的吸光度足够大，同时干扰组分和背景在两个波长下的吸光度相同（DA=0）。
通常，将长波长λ1选在待测组分的最大吸收波长处，而短波长λ2选在干扰组分等吸收波长处。
该方法的特点是消除了干扰组分对测定结果的影响，提高了测定的准确度和灵敏度，因此在生物、医学、环境监测、食品分析等领域得到了广泛应用。
双波长分光光度如何操作
双波长分光光度如何操作
双波长分光光度操作如下：
1. 首先，准备工作。
将样品转移到分光光度计的样品室中。
根据实验需求，选择适当的波长进行测量。
2. 打开分光光度计的电源，让其预热一段时间（根据具体仪器，通常需要几分钟），以确保仪器稳定。
3. 选择两个合适的波长。
对于双波长分光光度，一般选择一个吸收峰值处和一个不吸收的波长进行测量。
4. 设置仪器。
通过按键或旋钮来选择所需的波长，并在仪器显示屏上调整所需的参数，如光强、零位等。
5. 标定仪器。
使用标准溶液进行标定，以保证结果的准确性。
根据仪器的使用说明进行标定操作。
6. 获取基准吸光度值。
选择不吸收光的波长，用该波长下样品的吸光度值作为基准吸光度值。
7. 测量样品吸光度。
通过选择吸收波长，测量样品的吸光度值。
将结果与基准
吸光度值进行比较，计算出样品的吸光度差。
8. 计算浓度或其他参数。
根据样品的吸光度差值，利用已知的标准曲线或公式计算出样品的浓度或其他所需参数。
9. 记录结果。
将测量结果记录下来，包括所用的波长、基准吸光度值、样品吸光度值等。
10. 清洁仪器。
使用完毕后，及时清洁仪器，避免样品残留对仪器影响。
注意事项：
- 在测量过程中，避免将仪器暴露在光线直接照射下，可能会影响测量结果。
- 样品室应保持干净，避免灰尘和其他污染物干扰测量结果。
- 严格按照使用手册操作仪器，确保操作正确和安全。
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实验方法
工作波长的选择和AHL1，AHL2的测定
量取两份 0.5 mL 已配制的 5-Br-PADAP乙醇溶液分别于 10mL比色管中，调解溶液的pH，使其全部以酸式体形 式存在；另一支使其全部以碱式体形式存在；加纯净水 稀释至刻度，摇匀。在350～700 nm波长范围内，以纯 净水为参比，分别测定其酸式形体和碱式形体的吸收光 谱。
表1 不同pH的溶液在λ1、λ2处相应的Y1值
pH 9.16 10.7 10.93 11.77 12.09 13.17 A1(λ1=440 nm) 0.195 0.127 0..113 0.087 0.081 0.063 A2(λ2=574n m) 0.032 0.031 0.031 0.044 0.041 0.038 Y1 -0.6211 0.0430 0.1654 0.5679 0.6075 0.8500
选择酸式体最大的吸收处波长附近的任 一波长λ1为第一个工作波长，与其共轭 碱式在λ1处有等吸收的波长λ2为第二个工 作波长，并测定其酸式体在此两处的吸 光度AHL1和AHL2 。
pKa的测定 移取0.5mL上述溶液于6～10支25 mL容量瓶中，用 稀HCl（或NaOH）溶液调配成一系列浓度相同，但
实验原理
一元弱酸HL(总浓度为c。)在溶液中存在如下解离 平衡： HL H++L(2) (1)
在λ1处A1=εHL1bcHL+εL1bcL 在λ2处A2=εHL2bcHL+εL2bcL
(3)
假定其酸式体(HL)和共轭碱式体(L-)具有如图1所示的 吸收光谱曲线。
AHL1
碱式体
A
酸式体
AHL2 λ2 λ1
双波长分光光度法测定 5-Br-PADAP的解离常数
邹 晓 菊
目
录
前言
实验原理 实验部分
结果与讨论
结论
前言
5- Br - PADAP 是一个性能优良的杂环偶氮指示 剂。已被用于铁、锰、镍、锌等微量金属离子 的测定，有关此试剂的性能及应用已有报道。 测定解离常数的方法有电位滴定法，分光光度 法，电导率法和毛细管电泳法等。
0.25
酸式体
0.20 0.15
碱式体
A
0.10 0.05
从实验原理部分可 0.00 知，在实验条件下， 350 该工作波长可选取： λ1=440nm ；
400
450
500
550
600
650
700
λ/nm
λ2 =574nm。
图2 溶液pH为7.30（酸式体）和 14.14（碱式体）的光谱吸收曲线
分别移取0.5mL所配制的原溶液于6～10支25 mL容量瓶中，用 NaOH溶液调配成一系列浓度相同，但pH值不同的待测溶液， 用纯净水定容，摇匀后测定其pH，然后以纯净水为参比，在 350～700 nm波长范围内测定上述各溶液的吸收光谱如下图3所 示。
图 光 谱 吸 收 曲 线 3
0.25 0.20 0.15
沿箭头方向溶液的 pH依次为13.17、 12.09、11.77、 10.93、10.70、9.16
A
0.10 0.05 0.00
350
400
450Βιβλιοθήκη 500550600
650
700
有关数据记录如下表所示：λ1=440nm ，λ2 =574nm， AHL1=0.209， AHL2=0.007。
谢 谢 欣 赏
欢 迎 指 正
10.59 10.58 10.90 10.39 10.37 10.13
表3 本文结果与文献值的比较
离解常数 测量值 文献值
pKa2 2.37 2.39
pKa3 10.59 11.64
结论
1、由于测量时溶液与文献值测量时条件不同，而且未 在实验条件及操作完全相同的情况下采取多做几组取 平均值的方法，因而测量值与文献值有所不同。 2、 应用双波长分光光度法测定药物的pKa值时无需知 道供试液的准确浓度，只要求各份溶液的浓度相等， 因此操作较为方便和迅速。本文虽控制离子强度为一 定值，但在离子强度确定的情况下，酸解离常数仍然 会受有机溶剂的影响，由此可能产生一定的误差。
利用上述数据运用公式（8）处理，作Y1-pH图如图4， 由实验原理知：直线与pH轴的交点即为pKa3，则
pKa3=10.59。
0.9 0.5
Y1
0.1 -0.3 -0.7
图4 Y1-pH曲线
9
10
11
12
13 pH
14
pKa2的测定
其测量方法及处理步骤同pKa3的测定
工作波长选择的灵活性
第一工作波长λ 1可选择在其最大吸收波长(446 nm)附 近的任一波长。现我们选择以下六个波长，445、451、 435、460、440、456 nm 。第二个工作波长λ 2为其 共轭碱式体在这些波长处与之对应的等吸收点的波长， 分别为567、562、582、555、574、558 nm。
AHL1 AHL 2 令Y= lg( A1 A2
(5)
-1)则
Y= pH-pKa （6）
若其酸式体的摩尔吸光系数相等，即 εHL1 =εHL2 。 在这种情况下，根据类似的数学推导，可以得 到下式： AHL1 AHL 2 lg( -1)=pKa-pH (7) A A
1 2
令Y=lg(
pH值不同的待测溶液，用纯净水定容，摇匀后测定
其pH，然后以纯净水为参比，在350～700 nm波长
范围内测定上述各溶液的吸收光谱。
结果与讨论
pKa3的测定及处理
移取等量所配制的5×10-4mol·-1的5-BrL PADAP乙醇溶液分别于10mL比色管中，调解 其中一支比色管的溶液pH=7.30，使其全部以 酸式体形式存在；另一支溶液的pH=14.14， 使其全部以碱式体形式存在；加纯净水稀释至 刻度，摇匀。用TU-1901型紫外分光光度计在 350～700 nm波长范围内，以纯净水为参比， 分别测定其酸式形体和碱式形体的吸收光谱。 可得光谱吸收曲线见图2。
Y=0.3794pH-4.0195；R2=0.9713 Y=0.3848pH-4.0700；R2=0.9633 Y=0.3292pH-3.5870；R2=0.9563 Y=0.4177pH-4.3413；R2=0.9623 Y=0.5285pH-5.4789；R2=0.9690 Y=0.5549pH-5.6193；R2=0.9705
表2 不同工作波长下的pKa3值
λ1(nm) λ2(nm) AHL1 AHL2 直线方程 pKa3
440 445 435 451 456 460
574 567 582 562 558 555
0.209 0.212 0.202 0.210 0.202 0.194
0.007 0.011 0.004 0.014 0.016 0.018
AHL 1 AHL 2 A1 A2
-1)则 (8)
Y=pKa-pH
实验部分
实验试剂与仪器
试剂:5-Br-PADAP乙醇溶液 ； pH为4.01、6.86、9.18的标准 缓冲溶液 ；0.1 mol·-1Na0H、 L 0.1 mol·-1 HCl溶液等。 L 仪器：TU-1901双光束紫外 可见分光光度计、pHS-25 型数显pH计等。
λ /nm
图1 吸收光谱曲线
若其碱式体的摩尔吸光系数相等，即 εL1 =εL2 。则 Al—A2=(εHL1-εHL2) b cHL (4) 将一元弱酸的分布分数cHL=c。[H十]／(Ka+[H+])代入式(4)并 整理可得：
AHL 1 AHL 2 lg( -1)=pH-pKa A1 A2