血培养生长曲线

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e7微生物在全自动血培养仪中的生长曲线及其意义

e7微生物在全自动血培养仪中的生长曲线及其意义

pc西ti、陀al锄ing E川研妣抛—彻P 丘鸭弘s kd respective typ鹤of毋.0wth curve.The
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【Key wordsJ au胁latic b1∞d cultivator;mi口Ⅸ硼;a11ism;舒uw出curve
特别(角度大,阳性报警时看不到稳定期曲线)。肠杆菌科的阳性报警时间出现最早,与其他类型微生物差异有显 著性(P<0.01)。结论通过仪器对微生物生长曲线表达的线型、阳性报警时间。结合微生物生长生化特点,可初 步判断微生物的生长和类型。 [关键词】全自动血培养仪;微生物;生长曲线 【中图分类号]R446 [文献标识码】A [文章编号】1671—9638(2006)03—0206—04
肠杆菌科细菌一般为兼性厌氧,在普通培养基 上生长良好,对培养的条件要求不高,发酵葡萄糖产 酸产气,生长期明显迅速,细菌增殖快,数量多,CQ 的产生快且量多,所以在培养仪显示生长曲线延缓 期短,线型短,角度大,阳性报警时尚看不到稳定期 曲线,是最特别的一条曲线,与其他种类微生物的生 长期曲线线型有明显的区别。其阳性报警所需培养 时间比其他菌属快,最早出现阳性报警的是大肠埃 希菌,其中1株培养时间仅为1.92 h,与国内报道[9] 接近。39株肠杆菌科细菌,12 h内出现阳性报警19 株,占肠杆菌科阳性的48.72%;24 h内出现阳性报 警37株,占肠杆菌科阳性的94.87%,比国内报道的 阳性率高【7 o;培养时间最长的是1株副伤寒甲沙门 菌,39 h才显示出阳性警报。

全自动血培养系统临床应用评价

全自动血培养系统临床应用评价

论著作者单位:100730卫生部北京医院全自动血培养系统临床应用评价张秀珍 宣天芝 胡云建摘要! 目的 评价全自动血培养系统Bac T /Alert 系统的功能及影响因素。

方法 1800份血标本应用Bac T /Alert 系统的分析结果对其分离阳性率、假阳性率、阳性最早出现时间及所分离出有意义的病原微生物进行讨论和评价。

结果 1800份血液标本用BacT/Alert 全自动血液培养仪检测,检出阳性标本363份(20.2%);平均假阳性率为1.6%;系统总体阳性出现时间分别为∀10小时占20.8%;10~24小时占41.6%;24~48小时占35.6%;超过48小时报告阳性占2%。

结论 BacT/Alert 系统全自动血液分析仪具有自动化程度高、快速、正确等优点,严格控制各项操作条件是正确报告的关键。

关键词! 血培养系统 细菌Clinical evaluation of BacT/Alert and the factor for false positive Zhang Xiuzhen ,Xuan Tian zhi ,Hu Yun jian.Bei j ing H ospital ,Beijing 100730Abstract ! Objective To evaluate function and Analyze the factor for false posi tive for BacT/Alert blood culture system.Methods A total of 1800blood culture sets were obtained from inpatients and outpatien ts.For each culture 8ml of blood was i nocu lated into both the aerobic and anaerobic standard bottle of BacT /Alert sys tem.We evaluated positive rates,false positive rates 、speed and the ability to detect aerobic anaerobic and facul ta ti vely microorganism.Results In a total of 1800culture sets,363cases were obtai ned positive.positive cases were distribu ted in respiratory,emergency and IC U department.To calculate the time of 101strains,20.8%were found positive in less than 10hours,41.6%positive in less than 24hours,35.6%positive d urin g 24~48hours.and 2%positive over 48hours.Among the 1119strains, 1.6%were false positive.Conclusion The automated blood system BacT/Alert appears to be of speedy,reliable,and labor saving features.Key w ords ! Blood culture system Organism第三代全自动血培养Bac T/Alert 、VITAL 和Bactec 9120等系统的引进和临床应用,为败血症及严重感染的诊断和治疗提供了快速正确的报告,在临床细菌学快速诊断的过程中迈出了一大步。

血培养仪使用说明

血培养仪使用说明

⾎培养仪使⽤说明全⾃动⾎培养系统分析软件使⽤说明书(1.0版)珠海美华医疗科技有限公司珠海市唐家湾镇港湾⼤道科技⼀路10号副楼三层3B-3单元电话:0756-******* 传真:0756-******* 邮编:519085⽬录1仪器名称、型号 (3)2性能与⽤途 (3)3结构⽰意说明 (3)4计算机配置条件 (5)5运⾏条件 (5)5.安全条款 (6)6.安装 (6)7样本测定程序 (7)8售后服务 (19)9开箱与检查 (19)10运输和储存 (19)全⾃动⾎培养系统分析软件使⽤说明书1仪器名称、型号【名称】全⾃动⾎培养系统分析软件【型号】BC642性能与⽤途【正常⼯作条件】环境温度:5-40℃相对湿度:≤80%⼤⽓压⼒:76KPa-106KPa电源电压:a.c.220V±22V,50Hz±1Hz光照度:避免阳光直射。

【性能指标】鉴定能⼒:可同时检测64个⾎培养瓶,72⼩时内出结果。

扫描频率:每10分钟⾃动扫描⼀次。

温度偏差:⼩于±1.5℃。

额定功率:250W【仪器⽤途】该产品⽤于进⾏临床⼈体⾎液或其它⽆菌体液中微⽣物的⾃动化培养、检测。

3结构⽰意说明【体积】810mm×565mm×465mm【重量】80Kg【结构】①框架②侧板③指⽰灯④温度显⽰屏⑤开关⑥瓶架托盘进出仓⑦底板⑧加温室⑨培养室⑩控制器4计算机配置条件硬件系统要求:x86型主流PC机,2个RS232串⼝。

软件系统要求:Windows XP SP2、Microsoft Office 2003中⽂版以上。

5运⾏条件为保证仪器的正常运⾏,仪器必须在满⾜下列各条件和维持相应环境的情况下使⽤:1.1.灰尘少,换⽓良好的环境。

房间内没有腐蚀性,易燃易爆⽓体或者蒸汽。

1.2.避免阳光直接照射或者热源辐射。

1.3.桌⾯⽔平良好(斜度1/200以下)。

1.4.桌⾯强度要能够承受100kg的重量。

1.5.室内温度保持在5~40℃。

BC120全自动血培养系统sop

BC120全自动血培养系统sop

BC120全自动血培养系统(一)检测原理安图BC120系统中所使用的每一血培养瓶內底部都含有颜色感应器,其中有半滲透性硅胶膜隔离了培养基及颜色感应器,只有CO2可透过硅胶膜。

当血液培养瓶內有微生物生长时,释出的CO2滲透至感应器经水饱和后,产生氢离子(H)改变感应器酸碱度值,使感应器颜色产生变化,从灰色变为黄色,由颜色变化计算有无微生物生长。

反应如下:CO2+H2O→H2CO3→H+HCO3–。

孵育箱內, 每一测试槽底部都有一组激光器及反射光感应器,反射光感应器随瓶底颜色感应器颜色改变,产生不同的反射值。

光度信息经扩大、传送至电脑后,系统会自动连续分析及记录,然后判断阳性或阴性;系统随之以图象及声音报警。

电脑有下列三种阳性生长计算图表:如下图所示:1、加速度法;培养瓶放入孵育箱时细菌还未生长;2、速率法;培养瓶放入孵育箱时细菌正在生长期;3、阈值法;培养瓶放入孵育箱前已经阳性;4.手工修改(二)操作步骤1.开机步骤:插上电源,打开仪器的UPS电源,待UPS亮灯稳定后,再打开仪器的电源开关(仪器开关在仪器的背面),程序会正常启动,登陆安图全自动血培养控制系统V1.0,进入软件主界面(用户名和密码均为“admin”)。

2.放瓶步骤:在主界面下,点击“放入键”,将光标放置在ID号窗体内,输入该培养瓶上的ID号(可手工和扫描输入,为必输项目),和对应的病人信息(可选项目)。

打开抽屉,将培养瓶放入到抽屉中有指示灯亮起的任何空置空位内,会听到提示音,指示灯会闪烁,放瓶界面重新回到空白界面,可继续放瓶,放完之后点击结束键,关闭抽屉,完成此操作。

3.取瓶步骤:在培养过程中:当有阳性瓶或阴性瓶时,可按下述步骤操作:主界面下点击“取阳瓶”/“取阴瓶”健,屏幕会显示每个箱体内阳性瓶/阴性瓶的数量。

打开血培养主机抽屉,相应阳性/阴性瓶位指示灯的绿灯会亮起,可依次取出,然后关闭抽屉,完成此操作。

4.信息查询和统计:4.1培养瓶信息查询:主界面下单击某个有血培养瓶的图标,可查看该处血培养瓶的ID、病人信息、位置。

血培养 综述

血培养 综述

血培养综述引言血培养是一种常见的检验方法,用于检测血液中是否存在细菌或真菌等病原体。

它起到了诊断和治疗过程中重要的作用。

本文将对血培养的原理、方法、结果解读以及临床应用进行全面的综述。

原理血培养是通过将患者的血液样本接种到适当的培养基中,并提供合适的温度和湿度条件,利用培养基中的营养物质促进细菌或真菌的生长。

通过观察培养基上是否有细菌或真菌的生长,可以初步判断患者的血液中是否存在感染。

方法1.严格消毒:采集血液样本前,需要对皮肤进行彻底的消毒,以降低采集过程中的污染风险。

2.采集适量样本:使用无菌针头采集一定量的血液样本,一般建议采集两次血液样本,以提高检测的准确性。

3.培养基选择:根据需要检测的病原体类型选择相应的培养基,如肉汤培养基、MacConkey培养基等。

4.培养条件:将血液与培养基充分混合后,将培养瓶置于恒温培养箱中,通常在37摄氏度的条件下培养。

5.培养时间:一般培养时间为24小时,然后观察培养基上是否有细菌或真菌的生长。

6.鉴定分离:若培养基上有细菌或真菌的生长,需进行鉴定分离,确定其种类和数量。

结果解读1.阳性结果:若在培养基上观察到细菌或真菌的生长,说明患者的血液中存在感染。

进一步的鉴定可以确定感染的病原体种类。

2.阴性结果:若培养基上未观察到细菌或真菌的生长,说明患者的血液中暂时没有感染。

但并不能完全排除感染的可能性,需要综合其他临床检验结果进行综合评估。

临床应用1.诊断感染:血培养是诊断细菌性或真菌性感染的重要手段,可以明确感染的病原体种类,有助于选择合适的抗生素治疗。

2.感染监测:血培养可以用于监测患者在治疗过程中细菌或真菌感染的状况,及时调整治疗方案。

3.医院感染控制:通过血培养可以及时发现医院内存在的细菌或真菌感染,采取相应的防控措施,预防感染的扩散。

注意事项1.血培养前应严格消毒,避免污染。

2.采集血液样本时要掌握适量,避免太多或太少的样本。

3.培养基的选择要根据临床需要,充分考虑患者的病情和可能的病原体类型。

血培养方法学

血培养方法学

血培养方法学
血培养是一种常用的微生物诊断方法,用于检测血液中存在的细菌感染。

下面是血培养的一般方法学步骤:
1. 血液采集:首先要采集患者的血液样本,通常使用无菌针和无菌试管采集静脉血。

采集前要进行消毒。

2. 原液处理:将采集的血液样本倒入无菌试管中,一般是
10~20毫升。

如果血液样本较稀,可加入适量的无菌生理盐
水稀释。

3. 培养基选择:将血液样本接种于适合培养细菌的含有富营养物的培养基内。

常用的培养基有肉汤、布鲁菌培养基和三联培养基等。

4. 培养条件:将接种好的培养基放入培养箱中,保持适宜的温度和氧气条件。

一般常温培养或体温培养,有些特定细菌需要氧气气氛,有些则需要无氧气氛。

5. 培养时间:通常培养时间为24-48小时,但也可能需要更长
时间,特别是对于一些特殊细菌如真菌。

6. 结果判断:观察培养基上是否有细菌生长。

如果有细菌生长,会形成菌落或者液体浑浊。

接着要进行细菌鉴定,通过形态特征、生理和生化反应等方法来确定细菌的种类。

7. 抗生素敏感性测试:如果需要,可以进一步进行抗生素敏感
性测试,以确定细菌对不同抗生素的敏感程度。

总的来说,血培养方法学是一种基于培养细菌的技术,通过专门的培养基和培养条件,可以检测血液中存在的细菌感染,并进行细菌鉴定和药物敏感性测试。

这种方法可以帮助医生诊断感染病因并选择合适的治疗方案。

布鲁菌在Bact/Alert血培养仪上生长曲线特点

布鲁菌在Bact/Alert血培养仪上生长曲线特点
中 图分 类 号 : R 3 7 8 . 5 文献标志码 : A 文章编号 : 1 0 0 9 — 7 7 0 8 ( 2 0 1 3 ) 0 6 — 0 4 7 3 — 0 3
C h a r a c t e r i s t i c s o f B r u c e l l a ’ S g r o wt h c u r v e i n t h e B a c t / Al e r t b l o o d c u l t u r e s y s t e m
f i r me d by po s i t i v e s e r ol o gi c a l t e s t a nd br u c e l l o s i s a gg l ut i na t i on t e s t . Re s u l t s A l l t he 1 5 p a t i e n t s ha d i r r e gul a r f e ve r a nd hi s t or y o f an i m al e xp os u r e,e v e n t ho ugh t h ei r c l i ni c a l f e a t u r e a n d s i gns va r i e d gr e a t l y . The gr owt h c ur v e of Br u c e l l a i n bl o od c ul t ur e s howe d t he s a me c hr a c t e r i s t i c s i n t h e 1 5 pa t i e nt s,i n c l u di ng:t h e t i me t o po s i t i v e a l a r m wa s a bou t 7 2 hou r s ,a l on ge r l a g ph a s e, s hor t e r l og a r i t hm i c pha s e, a s h or t e r v e r t i c a l ax i s c or r e s p on di ng t o t he l og a r i t hm i c p ha s e,an d a f l a t s t ab l e ph a s e . Co nc l u s i o ns T he c l i ni c a l ma ni f e s t a t i o n o f br uc e l l os i s i S va r i a b l e a n d n on - s pe c i f i c . La c k of a wa r e ne s s of t hi s di s e a s e ma ke s t he c l i ni c i a ns mi s — di a gn os e i t e a s i l y .Th er e f o r e,b l o od c u l t ur e i s c r i t i c a l f or c l a r i f y i n g t h e e t i ol o gy i n f e br i l e p at i e nt s .T he gr o wt h c ur ve o f ba c t e r i a dur i n g bl o od c ul t u r e i s u s e f ul f or e a r l y d i a g nos i s of br uc e l l os i s a n d pr e v e nt i on of l a b or a t or y i nf e c t i o ns . Ke y wor d s: Br u c e l l a ;hl o od c ul t u r e;gr owt h c ur v e

MTT法测定细胞生长曲线

MTT法测定细胞生长曲线

MTT法测定细胞生长曲线
1、取生长状况良好的细胞,常规消化制成单细胞悬液并计数,调整细胞成六个浓度梯度,依次为:5x103、1x104、2x104、3x104、4x104、5x104/ml,均匀接种细胞于96孔细胞培养板,每孔加细胞悬。

液200ul,每个浓度组设6个复孔,共接种7块培养板,37℃、5%C02浓度,饱和湿度培养箱中连续孵育24/48/72/96/120/148/172小时后。

2、每孔加入20ulMTT溶液(smg/m1用PBS<ph=7.4>配),继续孵育4h后终止培养。

3、快速翻转培养板,弃去上清液,每孔加入150ulDMSO,振荡10min,使MTT蓝紫色结晶完全溶解。

4、用酶联免疫检测仪于490nm处检测各孔的吸光值(OD值),并以未接种细胞只加培养基孔的吸光值为空白对照调零,取6孔平均值。

5、实验重复3次,以培养“时间”为横轴,“吸光值”为纵轴绘制细胞生长曲线。

血细菌培养指导原则和操作指南

血细菌培养指导原则和操作指南

重庆市医疗机构临床实验室血培养指导原则和操作指南(试行)重庆市医学检验质量控制中心重庆市细菌耐药监测网重庆市医院感染控制中心(联合编写)2013年4月目录第一节血培养的含义及临床意义 (1)第二节标本的采集与运送 (1)一、总体要求 (1)二、血培养标本的采集 (2)三、血培养标本的运送 (3)四、血培养标本的拒收标准 (3)五、血培养标本中病原菌分离的关键因素 (4)六、几种特殊要求的血培养 (5)第三节血培养结果的报告 (8)一、血培养的报告原则 (8)二、阳性血培养的分级报告制度 (8)三、其他报告和记录 (9)第四节血培养安全保证 (9)第五节血培养质量保证 (10)一、分析前质量控制 (10)二、分析中质量控制 (11)三、分析后质量控制 (11)附录 (13)附录一血培养相关注释 (13)附录二血培养相关专业术语 (14)附录三血培养的污染问题 (15)参考文献 (17)第一节血培养的含义及临床意义当微生物侵入血液迅速繁殖超出机体免疫系统清除这些微生物的能力时形成菌血症或真菌血症(统称血流感染),并可感染血管外组织,临床上应该进行急症处理,尽快采集血液进行培养。

血培养是采集患者血液标本并接种到培养瓶中,用以发现、识别引起菌血症或真菌血症的病原微生物,是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法。

血培养结果对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义。

第二节标本的采集与运送一、总体要求(一)血培养临床指征患者出现以下一种或同时具备几种临床表现时可作为血培养的重要指征:1.发热(≥38 ℃)或低温(≤36 ℃),以间歇驰张型多见,革兰阴性杆菌(如大肠埃希菌)引起的感染可见双峰热;2.寒战;3.白细胞增多(>10.0×109/ L,特别是有“核左移”时);4.粒细胞减少(<1.0×109/ L);5.血小板减少;6.皮肤、黏膜出血;7.昏迷;8.多器官衰竭;9.血压降低;10.呼吸加快(呼吸率>20/分或CO2分压<32mmHg);以及肝脾肿大;关节疼痛;C反应蛋白、内毒素、降钙素原或1,3-β-D葡聚糖升高等。

血培养

血培养

血培养标准操作规范及结果解读山东省立医院检验科邵春红2014/9/91必须早期治疗脓毒血症! 2014/9/92血流感染的发病率发病率高:0.11-0.95%(占医院感染的4.9-5.0%)。

涉及面广:各组织器官感染均可继发各临床科室均有发生。

病情严重:发病急,病死率高。

2014/9/93脓毒血症的原发感染BMJ Open.2014 Jan 17;4(1):e004283.血流感染的分类菌血症细菌侵入血流,尚未大量繁殖且未引发临床症状,往往是一过性败血症细菌在血流中大量繁殖,引发严重的临床感染症状脓毒血症化脓菌引发的败血症,可导致全身性脓肿导管相关血流感染血管导管继发的血流感染。

细菌性心内膜炎草绿色链球菌等条件致病菌引发的心内膜感染。

2014/9/95血流感染诊断的金标准•病原学检查——血培养No microbiological test is more essentialto the clinician than the blood culture.L. Barth Reller, Clin. Infect. Disease,1996.2014/9/96血培养的目的•将新鲜离体的血液标本接种于营养培养基上,在一定温度、湿度等条件下,使对营养要求较高的细菌生长繁殖并对其进行鉴别,从而确定病原菌的一种人工培养法。

•早期诊断细菌是否进入血液,防止败血症。

•明确诊断是何种病原体感染•做药敏试验,减少抗生素的误用和滥用•大大改善患者的预后,减少病死率,减少医疗花费2014/9/971送检率低234阳性检出率低假阳性率高假阴性问题血培养的现况2014/9/982014/9/99血培养的现况✓经验用药阳性率低抢救需要利益因素鉴定时间长费用相对高送检率低2014/9/910血培养的现况•阳性检出率低(20%)✓血流中含菌量低✓血液中抗菌物质✓血标本的质量(采血时机、采血量、抗生素应用、双侧双瓶等)✓培养条件限制2014/9/911血培养的现况假阳性率高判定无依据皮肤消毒不彻底采血操作不规范12血培养的标本采集指征•发热寒战,体温超过38℃或低体温,怀疑血流感染•CRP 、PCT 升高•白细胞增多,特别是有“核左移”•HAP•留置中心静脉导管超过72h •感染性心内膜炎•骨髓炎•有严重基础疾病、免疫缺陷伴全身感染症状•临床医生怀疑有血流感染可能的其他情况132014/9/9Table 1. Characteristics of a critically ill adult patient population studied to determine whether C-reactive protein (CRP) andprocalcitonin (PCT) analyses could be used in the diagnosis of sepsis.Li H et al. Journal of International Medical Research 2014;0300060514528483Copyright © by a Creative Commons Attribution License, unless otherwise noted.血培养阳性率与PCT 的相关性1020304050607080901227.8842014/9/915•提高血培养阳性率--关键在于临床采集1.采集时间2.采血量3.组合4.严格消毒2014/9/916血培养标本采集原则2014/9/917血培养标本采血时机2014/9/918抗菌药使用前2寒战发热初期1停药6-8小时后/下次用药前3血培养采集时间19菌量寒战采血培养体温寒战高热前1h 左右菌量最多,建议在寒战高热时采血培养Time2014/9/9采血部位•静脉血◆动脉血标本无优势,采集静脉血更适宜◆中心静脉导管血—更容易被定植的细菌污染,除非为诊断导管相关血流感染之用,否则绝不要从导管取血进行培养—出生12小时之内的新生儿,可从脐导管进行培养◆每套血培养都要从不同的部位穿刺获得◆切忌在静滴抗菌药物的静脉处采血2014/9/920采血方案-成人及青少年临床条件方案解释血流感染、脑膜炎、骨髓炎、关节炎、肺炎治疗前采血2套不同部位采血,双侧双瓶,8-10ml/瓶急性感染性心内膜炎抗生素使用前2h 内抽取3套血标本亚急性感染性心内膜炎治疗前第1天采血2-3套,间隔30-60分钟如次日未见细菌生长,重复采血3次后,开始抗生素治疗(24小时内采血不超过4套)导管相关血流感染拔除导管:两份外周血+导管培养不拔除导管:1份血培养+1份导管血(间隔时间≤5min )不要仅送导管或导管血培养2014/9/921为什么要求双侧双瓶•提高阳性率•排除污染单一的血培养检出皮肤表面的寄生菌时,结果很难做出临床解释。

微生物生长曲线

微生物生长曲线

微生物生长曲线微生物生长曲线把一定微生物接种到一定的液体培养基中后,在一定条件下培养,定时取样测定活菌数,以活菌数的对数值为纵坐标,以培养时间为横坐标,就可以画出一条有规律的曲线,这就是微生物的典型生长曲线。

根据微生物在不同时期内生长繁殖的特点不同。

一般把典型生氏曲线划分为适应期、对数增长期(指数期)、稳定期和衰亡期等4个时期.该生长曲线只适用于单细胞微生物,包括细菌和酵母菌。

(一)适应期适应期又称停滞期、调整期。

指少量微生物接种到新培养液中后,在开始培养的一段时间内细胞数目不增加或增加非常缓慢的时期。

该时期有几个特点:1.生长繁殖的速度几乎等于零。

2.细胞形态增大,杆菌的长度增加。

例如,巨大芽孢杆菌在位种的当时,细胞长为3.4um,培养至3.5h,其长为9.1um,至5.5h时,竟可达到19.8um。

3.细胞内RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性。

4.合成代谢活跃,核糖体.酶类和ATP的合成加快,易产生诱导酶。

5.对外界不良条件例如NaCl溶液浓度.温度和抗生素等化学药物的反应敏感。

影响适应期长短的因素很多.除菌种外,主要有三:(1)菌种的菌龄:菌龄即“种子”的群体生长年龄.亦即它处在生长曲线上的哪一个阶段。

这是一种生理年龄.实验证明,如果以对数期的“种子”接种,则子代培养的适应期就短,如果以稳定期的”种子”接种.则适应期就相对较长。

(2)接种量:接种最的大小明显影响适应期的长短。

一般说来,接种量大,则适应期短,反之则长。

因此在发酵工业上,为缩短不利于提高发酵效率的适应期,一般采用1/10的接种量.(3)培养基成分:接种到营养丰富的天然培养基中的微生物要比接种到营养单调的合成培养基中的适应期短。

新接种的培养基与菌种的原培养基越接近,适J;z期就越短。

所以,在发酵生产中,常使发酵培养基的成分与种子培养基的成分尽量接近。

适应期的出现,可能是因为在接种到新鲜培养液的细胞中,一时还缺乏分解或催化有关底物的酶,或是缺乏亢足的中间代谢物。

微生物的纯培养生长曲线及繁殖演示文稿

微生物的纯培养生长曲线及繁殖演示文稿
单个的微生物组成的群体。
微生物接种是群体接种,接种后的生长是微生物群体繁殖生长。
对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础
第19页,共112页。
第二节 细菌的群体生长繁殖 一、生长曲线
生长曲线(Growth Curve):
细菌接种到定量的液体培养基中,定时取样测定细胞数量, 以培养时间为横座标,以菌数的对数为纵座标作图,得到的一条反映细菌在 整个培养期间菌数变化规律的曲线。
细菌代谢活性降低,细菌衰老并出现自溶,产生或释放出一些产物 ,如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态,有 时产生畸形,细胞大小悬殊,有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性 反应等。
该时期死亡的细菌以对数方式增加,但在衰亡期的后期,由于部分 细菌产生抗性也会使细菌死亡的速率降低,仍有部分活菌存在。
培养过程中不断的补充营养物质和以同样的速率移出培养物是 实现微生物连续培养的基本原则。
第42页,共112页。
二、连续培养
第二节 细菌的群体生长繁殖
控制连续培养的方法
恒浊连续培养
不断调节流速而使细菌培养液浊度保持恒定
恒化连续培养
第29页,共112页。
t1 – t0
G = ——————
n
(t1 – t0 )
= ————————————
3.322(lgNt-lgN0)
第30页,共112页。
影响微生物增代时间(代时)的因素:
1)菌种,不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同;
2)营养成分,在营养丰富的培养基中生长代时短 3)营养物浓度,在一定范围内,生长速率与营养物浓度呈正比,
活菌计数:
采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
第15页,共112页。

实验八 细菌生长曲线的测定及【内容充实】

实验八  细菌生长曲线的测定及【内容充实】

实验八细菌生长曲线的测定及血球计数板测定微生物生长一、细菌生长曲线的测定及★细菌的生长曲线就是把一定量的菌体细胞接种到恒容积的液体培养基中,在适宜的条件下进行培养,在此过程中,其细胞数目将随培养时间的延续而发生规律性的变化,如以细胞数目的对数值(或O.D.值)为纵坐标,以培养时间为横坐标作一条曲线,即为细菌的生长曲线,它反映了细菌的群体生长规律。

★大多数细菌的繁殖速率很快,在合适的条件下,一定时期的大肠杆菌细胞每20min分裂一次。

★依据其生长速率的不同,可把细菌的生长曲线划分为延滞期,对数期,稳定期和衰亡期等四个时期。

★微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标,OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度。

通常400~700nm 都是微生物测定的范围,505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。

★本实验测定细菌生长曲线的方法是,将待测菌种接入一只大试管的培养液中,在适宜的培养温度和良好的通气状态下,定时取出此试管,在600纳米波长处测定菌液浓度(O.D.值),在一定的范围内,菌液浓度与光密度值成线性关系。

因此,根据菌液的O.D.值可以推知细菌生长繁殖的进程。

将所测得的一组O.D.值与其相应的培养时间作图,即可绘制出该菌的生长曲线。

☆实验操作1、菌种培养:取大肠杆菌斜面菌种1支,以无菌操作挑取1环菌苔,接入肉膏蛋白胨培养液(LB)中,静止培养12--14h,备用。

2、制备LB培养基100ml置于200ml三角瓶内,备用。

3、标记:取11支无菌大试管,用记号笔分别标明培养时间,即0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h。

4、接种:分别用5ml无菌吸管吸取5ml大肠杆菌培养液(培养12~14h)转入盛有100ml LB液的三角瓶内,混合均匀后分别取5ml混合液放入上述标记的11支无菌大试管中。

5、培养:将已接种的试管置摇床37℃振荡培养(振荡频率250r/min),分别培养0、1.5、3、4、6、8、10、12、14、16和20h,将标有相应时间的试管取出,立即放冰箱中贮存,最后一同比浊测定其光密度值。

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