肺癌组织和肿瘤细胞系中BRG1的表达分析
Brg1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义
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Brg1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义崔香艳;汪欣;陈玮伦;于红;黄可新;祝威【摘要】目的:研究Brg1在喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中的表达,探讨其与喉癌发生发展的关系.方法:应用免疫组织化学技术分析30例LSCC及10例癌旁正常黏膜中Brg1的表达情况. 结果:Brg1在癌旁正常黏膜中阳性表达(灰度值为124.60±4.51),LSCC组织中表达降低(灰度值为159.20±7.69),两组比较差异有显著性(P<0.01).Brg1在高、中、低分化LSCC组织中表达灰度值分别为132.80±1.92、165.20±2.59和179.60±1.52,高分化LSCC与中分化、低分化LSCC比较差异有显著性(P<0.01);Brg1在Ⅰ-Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期LSCC表达的灰度值分别为145.30±2.36、165.20±4.31和179.40±3.03,Ⅲ期、Ⅳ期分别与Ⅰ-Ⅱ期比较差异有显著性(P<0.05).Brg1在有脉管侵润组和无脉管侵润组表达灰度值分别为176.80±3.48和143.50±8.26,两组比较差异有显著性(P<0.01).Brg1在有淋巴结转移组和无淋巴结转移组表达灰度值为155.60±4.02和161.70±3.52,两组比较差异无显著性(P>0.05).结论:Brg1在LSCC中表达低,并与其发展及病理因素有关,可能是LSCC发生的一个重要因素.【期刊名称】《吉林大学学报(医学版)》【年(卷),期】2010(036)003【总页数】5页(P546-549,封3)【关键词】喉肿瘤;Brg1;免疫组织化学【作者】崔香艳;汪欣;陈玮伦;于红;黄可新;祝威【作者单位】吉林大学第一医院耳鼻咽喉-头颈外科,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院耳鼻咽喉-头颈外科,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院耳鼻咽喉-头颈外科,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院耳鼻咽喉-头颈外科,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院组织学与胚胎学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学第一医院耳鼻咽喉-头颈外科,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R739.65肿瘤的发生发展是一个多因素、多步骤的复杂过程,其中癌基因的活化和抑癌基因的失活起到关键性的作用。
喉鳞癌组织中CBLL1蛋白表达变化及意义
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喉鳞癌组织中CBLL1蛋白表达变化及意义作者:侯思哲王雪峰来源:《医学信息》2020年第05期摘要:目的 ;分析喉鱗状细胞癌组织中E3泛素连接酶CBLL1的表达及其临床意义。
方法 ;选取2017年9月~2019年7月我院60例喉鳞状细胞癌石蜡组织切片及对应30例癌旁石蜡组织切片,采用免疫荧光法检测喉癌组织及癌旁组织中CBLL1蛋白的表达,比较喉癌组织和癌旁组织、不同性别、年龄、临床分期、淋巴结转移、组织分化程度及肿瘤分型患者中CBLL1蛋白的表达;另选取10例冰冻喉癌组织及对应癌旁组织,应用实时定量PCR方法检测CBLL1蛋白中mRNA的表达。
结果 ;喉癌组织中CBLL1的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05);不同临床分期、淋巴结转移的患者喉癌组织中CBLL1蛋白表达比较,差异有统计学意义(P关键词:E3泛素连接酶CBLL1;喉鳞状细胞癌;免疫荧光;RT-PCR中图分类号:R739.65 ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; 文献标识码:A ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;DOI:10.3969/j.issn.1006-1959.2020.05.002文章编号:1006-1959(2020)05-0005-04Abstract:Objective ;To analyze the expression of E3 ubiquitin ligase CBLL1 in laryngeal squamous cell carcinoma and its clinical significance. Methods ;From September 2017 to July 2019,60 paraffin sections of laryngeal squamous cell carcinoma in our hospital and 30 paraffin sections adjacent to cancer were selected to detect the expression of CBLL1 protein in laryngeal cancer tissue and adjacent tissues by immunofluorescence. Compare the expression of CBLL1 protein in laryngeal cancer tissues and adjacent tissues, different genders, ages, clinical stages, lymph node metastasis, tissue differentiation, and tumor typing; another 10 frozen throat tissues and corresponding adjacent tissues were selected and applied in real time quantitative PCR was used to detect mRNA expression in CBLL1 protein.Results ;The expression of CBLL1 in laryngeal cancer tissues was higher than that in adjacent tissues,the difference was statistically significant(P<0.05). Comparison of CBLL1 protein expression in laryngeal cancer tissues of patients with different age, gender, tumor classification and degree of tissue differentiation, there was no significant difference (P>0.05); The expression of CBLL1 protein in laryngeal cancer tissues of patients with different clinical stages and lymph node metastasis was statistically significant(P<0.05); the relative expression of CBLL1 protein mRNA in laryngeal cancer tissues was higher than that in adjacent tissues,the difference was statistically significant (P<0.05).Conclusion ;The abnormal expression of CBLL1 protein in laryngeal cancer tissues is closely related to the occurrence, development, invasion and metastasis of laryngeal squamous cell carcinoma, which may be a new target for the future treatment of laryngeal cancer.Key words:E3 ubiquitin ligase CBLL1;Laryngeal squamous cellcarcinoma;Immunofluorescence;RT-PCR喉癌(laryngeal cancer)是头颈部肿瘤中常见的恶性肿瘤之一,占耳鼻咽喉部位恶性肿瘤的7.9%,头颈部恶性肿瘤的第3位[1]。
晚期非小细胞肺癌患者化疗疗效与BRCA1表达水平的Meta分析
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晚期非小细胞肺癌患者化疗疗效与BRCA1表达水平的Meta分析金红艳;何为;刘倩;王晓凤;柳艳飞;田勇;葛四平;魏泽雄【期刊名称】《肿瘤防治研究》【年(卷),期】2016(43)9【摘要】目的运用Meta分析BRCA1表达与晚期非小细胞肺癌患者经铂类化疗后疗效之间的关系,探索BRCA1基因表达能否预测铂类化疗的疗效。
方法计算机检索PubMed、CNKI和万方中文数据库,按照制订的纳入与排除标准筛选关于BRCA1表达预测非小细胞肺癌铂类化疗后获益相关的临床研究,检索时限为数据库建库至2015年7月。
获得所需的数据,使用RevMan5.4.1进行统计分析。
结果共纳入相关研究19项。
Meta分析结果:BRCA1表达阳性患者与阴性患者的铂类化疗疗效无明显差异,合并比值比为0.80(95%CI: 0.54~1.17)。
黄种人亚组的BRCA1阴性表达与晚期NSCLC患者铂类化疗敏感度正相关。
对检测方法的亚组分析显示:用免疫组织化学、PCR法检测BRCA1表达水平与晚期NSCLC 患者铂类药物化疗敏感度无关。
BRCA1与晚期NSCLC患者铂类PFS、OS获益并不相关。
结论本组研究异质性较大,BRCA1表达与NSCLC患者对铂类药物化疗后疗效的关系仍应开展更多大样本随机对照试验加以验证。
【总页数】7页(P767-773)【关键词】非小细胞肺癌;BRCA1;铂类药物化疗【作者】金红艳;何为;刘倩;王晓凤;柳艳飞;田勇;葛四平;魏泽雄【作者单位】武汉市普仁医院肿瘤科【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.晚期非小细胞肺癌组织中 BRCA1、RAP80的表达与化疗疗效的关系 [J], 张贤兰;黎少琴;苏宁;薛丽京;刘燕2.ERCC1/BRCA1表达与基因多态性对是否使用顺铂化疗的晚期非小细胞肺癌患者的预后及预测价值 [J], 刘晓晴3.非小细胞肺癌患者 BRCA1表达与铂类化疗疗效的 Meta 分析 [J], 高雅;刘丹;屈艳丽;王鹤潼;陈延志;于洪;赵玉霞4.晚期非小细胞肺癌患者血清Pokemon表达水平及其在评估化疗效果和预后中的价值 [J], 张全乐;邢喜芝;李静;邢雅娟;刘三香;张立英;刘刚5.STAT3表达水平与晚期非小细胞肺癌患者化疗疗效的相关性研究 [J], 孙绍娟;唐凤鸣;舒运兵因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
非小细胞肺癌组织中ERCC1、BRCA1的表达变化及意义
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组标本均经 1% 甲醛固定 , 0 常规石蜡包埋 , I 5x m连 续切 片 , 常规 H E染色 。采用 免疫 组织化 学 s P法 检
测两 组标 本 中 的 E C 1及 B C 1蛋 白 , 作 按 试 RC RA 操
阴性 B C 1 R A 表达 阳性 ,R C 和 B C 1 N C C EC1 R A 在 S L 中的表达呈正相关 ( = .4 , 0 o ) r 0 4 1 P< . 1 。观察组 E C 1B C 1 白表 达与 肿瘤 临 床病 理 参 数 的关 R C 、R A 蛋
( R C ) 人 乳 腺 癌 易 感 蛋 白 1 B C 1 表 达 的 E C 1和 (R A ) 变化 , 现报 告如下 。
1 资料 与方 法
11 临床 资料 .
19 95年 6月 ~20 0 3年 l 行 根 0月
治 性手术 , 为术后 病 理证实 的 6 且 3例 N C C 患者 , SL 男4 8例 、 1 女 5例 , 年龄 3 7 5— 5岁 , 中位 年 龄 6 1岁 。 根 据 20 0 4年世 界卫 生组 织 ( WHO 肺癌 组织 病 理学 )
( P均 < . 5 。 0 0 )
分 类标 准 , 癌 4 鳞 2例 , 腺癌 2 l例 ; 国 际抗 癌联 盟 按 ( IC 20 UC )0 2年 的肺 癌 T M 分期 标 准 ,I 2 N 期 8例 ,
Ⅱ期 2 4例 , Ⅲ期 1 1例 ; 淋 巴结转移 4 有 O例 , 淋 巴 无 结 转移 2 3例 ; 高分 化 9例 , 中分 化 3 4例 , 分 化 2 低 0 例 。所 有标 本 术 前 均 未 接 受 过 放 化 疗 等 抗 肿 瘤 治 疗, 取手术 切 除肿瘤 组织 为观察 组 。选取其 中 3 0例
人肺癌细胞、组织中BRCA1蛋白的表达及与顺铂化疗的相关性研究
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( 1解 放军3 7 0 医院肺部肿瘤科 ,北 京10 7 00 1 l 2解放军3 1 0 医院泌尿外科 ,北京 10 5 ; 0 8 3 3第四军医大学组织胚胎学教研 室 ,陕西 西安7 0 3 ) 10 3
【 摘要】目的 研 究肿瘤抑制基因B C 1在肺癌中的作用,其蛋 白在肺癌组织中的分布特征和肿瘤发生中的蛋 白特性。B C 蛋白在肺 R A R A1
癌 临床 治疗 的 生物靶 点 。研 究也 提 示预 测 B C 蛋 白表后 。 R A1 低 【 关键 词 】 肺癌 ;B C ;组织 ; 出核 R A1
中 图分类 号 :R 3 . 7 42
文献标 识 码 : B
文章 编号 :17- 14 (02 3 0 1- 3 6 1 8 9 21 )1 - 0 9 0
Hu n L ngCa e su : srb to n E p e s n o ma u ncrTis e Diti ui n a d x rsi f o BRCA1Pr ti Reae o Ou c meo o du a t o en ltdt to fNe aj v n
胞 浆 中存 在 B C R A1蛋 白。肺 癌组 织呈 B C 低 表 达 ( R A1 占患者 总人 数 4 %)和 高表 达 ( 0 占患者 总人 数 3%) 的患者 其预 后 与顺铂 治 疗有 0 相 关性 。结 论 我们 的 多病例研 究结 果都 证 实 B C R A1的胞 浆胞 核 有 明确 比 例 分布 ,提 示 其 可 能参 与肺 癌 组织 中蛋 白功 能调 节机制 。并可 能具有 与肺癌 发 生 相 关的蛋 白特 性 ,B C R A1表达 与顺 铂 化疗 预后 的相 关性得 到 证 实。在 肺癌 细 胞其 亚细 胞 分布现 象预示 着将 有 更好 的肺
胃癌中BRG1蛋白的表达及意义
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胃癌中BRG1蛋白的表达及意义李青;周晓军;谢海龙;苏宁;邓红;孟奎【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2004(020)004【摘要】目的探讨BRG1基因蛋白在胃癌组织中的表达及与pRb、p53基因的相互关系.方法应用S-P免疫组化法检测30例胃癌组织中BRG1及pRb和p53的表达情况,分析其相关性,并且结合临床病理因素,初步探讨其和胃癌发生、发展及预后的关系.结果BRG1与pRb的表达有相关性,而和p53无关.BRG1在胃癌中的表达率为76.67%(23/30),与正常组织相比呈高表达.BRG1和pRb的表达与胃癌的浸润、淋巴结转移、分级和分期有关.结论BRG1蛋白在胃癌中高表达,对胃癌的发生、发展可能起重要作用.BRG1及pRb的表达可作为判断胃癌恶性程度及预后的重要指标.【总页数】4页(P402-405)【作者】李青;周晓军;谢海龙;苏宁;邓红;孟奎【作者单位】南京军区南京总医院病理科,南京,210002;南京军区南京总医院病理科,南京,210002;南京军区南京总医院病理科,南京,210002;东南大学基础医学院病理学教研室,南京,210014;东南大学基础医学院病理学教研室,南京,210014;南京军区南京总医院病理科,南京,210002【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.Brg1蛋白在宫颈鳞癌中的表达及其与P16、Rb蛋白的关系 [J], 何莲芝;王秀明2.钙粘蛋白E-cadherin(E-CD)及相关蛋白α-,β-和γ-连环蛋白(catenin)在胃癌中的表达及意义 [J], 盛友华;姚琼;吴瑜梅3.COX-2蛋白和VEGF-C蛋白在胃癌和非胃癌黏膜病变组织中的表达及临床意义[J], 陈美霓;郭浩;郭巍;郝琴;赵菊梅;魏晓丽;王爱红;庞秋霞4.Peutz-Jeghers综合征中Brg1蛋白的表达及临床意义 [J], 刘金霞;周平;胡志民;赵晓;时凤敏;林艳华;毛高平5.Brg1及VEGF信号通路相关蛋白在Peutz-Jeghers综合征中的表达及意义 [J], 刘金霞;周平;胡志民;毛高平因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
11例SMARCA4(BRG1)缺失性癌的临床病理分析
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11例SMARCA4(BRG1)缺失性癌的临床病理分析江晓珍;郭峰棻;盛以芸;梁圣楠;万红萍;邓葵【期刊名称】《肿瘤防治研究》【年(卷),期】2024(51)6【摘要】目的探讨SMARCA4(BRG1)缺失性癌患者的临床病理特征、免疫表型及诊治要点。
方法回顾性分析11例SMARCA4(BRG1)缺失性癌患者的临床资料,总结其HE染色后的形态及免疫组织化学特征,并结合文献进行分析。
结果11例患者中男性8例,女性3例;中位年龄60岁。
8例行根治性手术切除,3例行传统化疗联合靶向及免疫治疗。
镜下肿瘤细胞胞质丰富、红染,呈上皮样、横纹肌样或梭形,具明显的嗜酸性核仁,核分裂象易见(>5/10 HPF),肿瘤组织内见多灶状坏死,脉管内见大量癌栓,可伴间质黏液样变性。
11例肿瘤细胞SMARCA4(BRG1)表达缺失,同时表达上皮源性CK和间叶源性Vim标记,SMARCB1(INI1)表达保留,p53突变型,肿瘤细胞呈高增殖活性(Ki-67>60%),突触素Syn呈中等强度阳性。
3例为错配修复蛋白缺陷,分别表现为MLH1/PMS2、PMS2、MSH6表达缺失,其中1例经Sanger测序法检测证实为高度微卫星不稳定型。
结论SMARCA4(BRG1)缺失性癌发病率低,易与其他肿瘤混淆,术前诊断困难,需依靠免疫组织化学明确诊断。
【总页数】6页(P469-474)【作者】江晓珍;郭峰棻;盛以芸;梁圣楠;万红萍;邓葵【作者单位】南昌大学第一附属医院病理科;南昌大学第一附属医院骨科【正文语种】中文【中图分类】R365【相关文献】1.SMARCA4缺失性子宫未分化肉瘤(子宫恶性横纹肌样瘤)是一组与未分化癌具有不同临床病理特征的肿瘤实体2.SMARCA4/BRG1缺陷型非小细胞肺癌的临床病理特点和治疗策略3.胸部SMARCA4缺失肿瘤4例临床病理分析4.胃SMARCA4缺失性未分化癌6例临床病理分析5.SMARCA4缺失型非小细胞肺癌患者的临床病理特征及预后影响因素分析因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
BRG1在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义
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BRG1在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义时梅林;白津;梅鹏金;郑骏年【期刊名称】《中国医学创新》【年(卷),期】2014(11)36【摘要】Objective:To investigate the expression level of BRG1 in human glioma,and to explore the relationship BRG1 with malignantdegree,tumorigenesis, and progression of human glioma.Method:BRG1 staining in 120 benign glioma tissues (Grades I to II), 70 malignant glioma tissues (Grades III to IV) ,8 normal brain tissues and 8 tumor adjacent normal brain tissues were tested by tissue microarray and immunohistochemistry.Result:BRG1 nuclear staining was observed in 25%(2/8) normal brain tissue,25%(2/8) tumor adjacent normal brain tissue, 80.8%(97/120) benign tumor and 82.9%(58/70) malignant tumor. The significant difference in BRG1 staining was observed between tumor adjacent normal brain tissue and benign tumor and between tumor adjacent normal brain tissue and malignant tumor (P=0.000). However, there was no significant difference in BRG1 staining between benign tumor and malignant tumor (P=0.847). It was showed that there was no significant correlation between BRG1 expression and clinicopathological parameters.Conclusion:BRG1 expression is significantly increased in human glioma than in normal brain tissues and tumor adjacent normal brain tissues. The BRG1 gene plays an important role in the progression ofhuman glioma, knockdown of BRG1 may serve as a potential therapeutic target for human glioma.%目的:研究BRG1在人脑胶质瘤中的表达情况,并探讨其表达水平与胶质瘤的恶性程度及发生、发展的关系。
关于Brg1基因
![关于Brg1基因](https://img.taocdn.com/s3/m/a2d135dd3186bceb19e8bb25.png)
Brg1基因作为一种新的抑癌基因,已在许多肿瘤的研究中发现它是一种重要的抑癌基因,许多肿瘤的发生与其功能失活或出现基因突变、缺失有关。
同时发现其与细胞有丝分裂过程中的信号传导有关,与许多重要的抑癌基因如Rb基因、CD44等有密切的关系。
本文拟就Brg1基因的研究现状及进展作一阐述。
分子遗传学在人类肿瘤研究中的应用,使人们认识到肿瘤的发生不仅与激活的细胞癌基因有关,而且与抑癌基因的失活或纯合缺失有关。
抑癌基因的发现是癌基因研究中的重大进展,这类基因在抑制细胞生长、增殖及分化过程中起着十分重要的负调节作用,并能潜在地抑制肿瘤生长。
如果其功能失活或出现基因缺失、突变等异常,可导致细胞恶性转化而发生肿瘤。
90年代以来由于实验室技术的发展,目前已被克隆和未被克隆的抑癌基因已达30余种,而且新的抑癌基因还在不断出现。
Brg1基因作为一种新发现的抑癌基因,国外有人在研究Brg1与肺癌、前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌等的关系中,发现它是一种重要的抑癌基因。
本文拟就Brg1基因的研究现状及进展作一综述。
1 概述Brg1基因是SWI/SNF家族的重要组成成分,最初是20世纪90年代在酿酒酵母中发现,后在人类多种组织中也发现该基因。
研究表明,在细胞分裂过程中,具有高度浓缩和动态性染色质必须暂时重排,使得一些特异性基因才能表达和抑制。
SWI/SNF复合体首次在酵母中鉴定,并在酵母、果蝇和哺乳动物中具有保守性,代表了执行这一功能的一种机制。
SWI/SNF复合体是一个分子量为2MD,含有多个亚单位的DNA依赖性ATP酶,遗传学上显示可调控酵母菌中一些诱导基因的表达,生物化学上可促进不同转录因子与核小体DNA的相互作用。
目前的研究表明,SWI/SNF复合体能够使DNA从核小体部分解离而没有组蛋白丢失,并使八聚体移动和改变核小体结构,但该复合体如何靶向特异性促进之而产生转录活化因子还不十分清楚[1]。
另有研究发现,SWI/SNF复合体与基因活化和细胞增殖的多个调控因子密切相关,这些调控因子包括糖皮质激素受体、雌激素受体和Rb、C-myc原癌基因和HpvE1蛋白能各自与SWI/SNF复合体相互作用并发挥功能,进一步支持了该复合体参与细胞生长调控[2]。
BRCA-1 在胃癌组织中的表达
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国 学创新
21年 1月 00 1
第7 1 卷勇 期 ei lnoao h aNvm e 21 ,o 7N .1 —c nv i oC i ,oe br 00V 1 o3 d aI tn f n . .
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6l・
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临 床 研 究
・
BC R A—l在 胃癌 组织 中的表 达
陈永宏 陈一 民
【 摘要 】 目的
廖 晓丹
探讨 B C R A—l j在胃癌组织 中的 表达及J 意义。方法 采 北 京中杉金桥 生物技 术有 限 基I [ = 『 七
BC R A一1胃癌 组 织 中 阳性 卒 为 3 2 % , 胃 黏 .8 在
公 司 的 二步 法 免 疫组 化法 检 测 胃癌组 织 巾 B C R A—I的 表达 。结 果
巴结转 移 2 7例 , 尢淋 巴结转移 3 。4 甲醛 【 定 , H 4例 % 古 经 E J
染色 、 病 榆 确 诊 , 照 的 正 常 胃黏膜 巾 没有 痛 细胞 存 存 。 对 B C 一1免 疫 纰 化 采川 二 步 法试 剂 , RA 购 北 京 巾 杉 金桥 生 物
技 术有 限公 司 , 品型 号 :V 一 0 0一G 产 P 60 。
( ) 馏 水 冲洗 , B 2蒸 P S浸泡 5r n 高 亚 热 修 复 2m n ( ) % i, a i。 3 3 H0 , ,室 温 孵育 5~1 i, 消 除 内源 性 过 氧 化 物 酶 的活 性 , 0r n 以 a P S冲洗 , i 次 。 ( 滴 加 B C —lT 作 液 ,  ̄ B 2r nX a 3 4) R A 4C过 夜 。( )B 5 P S冲洗 , kl 。 ( )滴 加 通 用 型 IG 抗 体 2 I rX3次 l i 6 g ( a 段 )一H P多 聚 体 , 温 1 mi,B Fb R 室 5 n P S冲洗 , mi 3次 。 2 n×
BRCA1在肿瘤中的表达与肿瘤耐药的研究进展
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BRCA1在肿瘤中的表达与肿瘤耐药的研究进展摘要】乳腺癌易感基因1是一个重要的DNA损伤修复基因。
通过研究它在多种肿瘤中的表达水平及其与抗微管药物、顺铂药物敏感性的关系,发现其可作为抗微管药物、铂类药物化疗疗效的预测指标,有助于制定个体化化疗方案。
【关键词】乳腺癌易感基因1 抗微管药物顺铂【中图分类号】R730.23 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2012)06-0107-02化疗是肿瘤综合治疗的重要组成部分,临床上导致化疗失败的原因有很多,其中,肿瘤耐药是其重要因素之一。
由于分子遗传学的不同,不同个体对于同一种化疗药物敏感性也相差甚远。
因此,要想提高化疗疗效,就要寻找一种能预测化疗疗效的方法,针对每个个体合理的、准确的用药,同时也使患者免受不必要的毒副作用和经济负担。
在 2004 美国肿瘤临床学会(American Society of Clinical Oncology ASCO)年会上有人提出了个体化化疗(tailor chemotherapy TC)的概念,并指出未来 5~10 年是“标准化疗”向“个体化化疗”的过渡期[1]。
所谓“个体化化疗”即指,通过基因、蛋白等生物学指标的检测,肿瘤药敏检测筛选出最能够从化疗中获益的个体或人群。
有研究认为与肿瘤化疗相关的基因有以下六大类:药物动力学相关基因;各种生物酶相关基因;DNA损伤与修复相关基因;凋亡相关基因;致癌、抑癌基因;细胞增殖、转移相关基因等。
其中DNA损伤与修复相关基因较为关键,比如BRCA1、ERCC1、RRM1等。
随着肿瘤分子生物学的发展,发现B R C A1的表达水平与紫杉醇及顺铂化疗疗效有密切关系。
本文就这一领域的相关研究作一简单综述。
1 DNA损伤修复与肿瘤的关系DNA作为一种遗传物质,必须保持相对的稳定性。
各种物理的、化学的、生物的因素均可能造成DNA结构不同类型的损伤,如:DNA单、双链断裂;DNA链间以及DNA链和蛋白之间的交联;糖基氧化;碱基修饰等。
BTG1在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移的作用
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S U N G u o g u i , Z H A N G J i e , C U l D a w e i , L I C h e n g l i n , Y A NG C o n g r o n g, z H A N G J u n , C H E N G Y u n j i e . D e p a r t —
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临床 肿 瘤 学 杂 志 2 0 1 4年 1 1 月第 1 9卷 第 1 1 期
C h i n e s e C l i n i c a l O n c o l o g y , N o v . 2 0 1 4 , V o 1 . 1 9 , N o . 1 1
B T G1 在 非 小 细 胞 肺 癌 中 的表 达 及 其 对 肺癌 细胞 增殖 、 凋 亡 和侵 袭 转 移 的作 用
( N S C L C )a n d i t s b i o l o g i c a l e f e c t i n N S C L C c e l l l i n e b y B T G1 o v e r e x p r e s s i o n . Me t h o d s I mm u n o h i s t o e h e m i s t r y a n d We s t e n r b l o t t i n g w e r e u s e d t o d e t e c t B T G 1 p r o t e i n e x p r e s s i o n i n 8 2 c a s e s o f N S C L C a n d 3 8 c a s e s o f a d j a c e n t n o r m a l l u n g t i s s u e s ,a n d t h e r e l a t i o n s h i p
非小细胞肺癌组织中 BRCA1和 MDM2表达意义
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非小细胞肺癌组织中 BRCA1和 MDM2表达意义葛华;丁敏;王虹;王秦;李长江;张美英;王建英【期刊名称】《现代中西医结合杂志》【年(卷),期】2016(000)006【摘要】目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中乳腺癌易感基因(BRCA1)和鼠双微体基因2(MDM2)的表达情况及临床意义。
方法收集NSCLC组织标本48例和癌旁组织20例,采用免疫组化SP法检测各组中BRCA1和MDM2的表达,分析BRCA1与临床病理指标及MDM2的关系。
结果 NSCLC组织中BRCA1异常表达和MDM2阳性率明显高于癌旁组织( P<0.05);BRCA1异常表达与NSCLC的肿瘤分期( TNM)、有无淋巴结转移相关(P均<0.05),与年龄、性别、组织类型、分化程度无显著性相关(P均>0.05)。
MDM2阳性表达与NSCLC的分化程度、肿瘤分期(TNM)、有无淋巴结转移相关(P均<0.05),与年龄、性别无显著性相关(P均>0.05)。
相关性分析得出BRCA1和MDM2的表达存在显著相关性( P<0.05)。
结论 BRCA1和MDM2在NSCLC发生和转移中可能起重要作用,BRCA1和MDM2与NSCLC的浸润转移密切相关,可作为预后的判断指标。
【总页数】3页(P607-609)【作者】葛华;丁敏;王虹;王秦;李长江;张美英;王建英【作者单位】中煤一公司岭北职工医院,河北邯郸056003;河北工程大学,河北邯郸056001;河北省邯钢职工医院,河北邯郸056000;中煤一公司岭北职工医院,河北邯郸056003;中煤一公司岭北职工医院,河北邯郸056003;中煤一公司岭北职工医院,河北邯郸056003; 河北省邯郸市中心医院,河北邯郸056002;中煤一公司岭北职工医院,河北邯郸056003; 河北省邯郸市中心医院,河北邯郸056002【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.晚期非小细胞肺癌组织中 BRCA1、RAP80的表达与化疗疗效的关系 [J], 张贤兰;黎少琴;苏宁;薛丽京;刘燕2.晚期非小细胞肺癌组织中ERCC1、RRM1和BRCA1的表达研究 [J], 高志强;姜丽岩;王慧敏;陈玉蓉;韩宝惠;沈洁;顾爱琴;戚大江;黄进肃;施春雷;熊丽纹;赵怡卓3.非小细胞肺癌组织中BRCA1基因mRNA的表达及临床预后的关系# [J], 王革平;冷雪峰;冼磊;金健;李霭建4.BRCA1和人线粒体转录终止因子3在非小细胞肺癌组织中的表达情况 [J], 杨天真;杨军;邱瑞成;王春梅5.维吾尔民族非小细胞肺癌组织中的ERCC1、BRCA1的表达及预后关系的研究[J], 穆清爽;韩利梅因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
BRCA1在人类肿瘤细胞中的表达
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BRCA1在人类肿瘤细胞中的表达孟庆慧;袁仁起;樊赛军;Itzhak D.Goldberg;Eliot M Rosen【期刊名称】《分子细胞生物学报(英文版)》【年(卷),期】2001(034)001【摘要】Mutations of the human breast cancer susceptibility gene 1 (BRCA1) confers a risk for breast, ovarian and prostate cancers and BRCA1 exerts multiple biological functions. Using Western blot and semi - quantitative reverse transcription- polymerase chain reaction (RTPCR) assays, we have determined the expression of endogenous BRCA1 protein and mRNA in forty- three human tumor cell lines established from eleven types of human tumor tissues. BRCA1 was differentially expressed in tumor cell lines. No significant association was found between BRCA1 expression and the p53 gene status of cell lines. The disruption of wild- type p53 by either the human papillomavirus E6 oncogene or the mutant p53 gene (143Ala→Val) did not cause any significant alteration in basal level of BRCA1 expression, while the knockout of p21 (-/-) by homologous recombination assay and Blocking Gadd45 expression by constitutive antisense expression slightly increased BRCA1 proteinexpression.Therefore, although the functional significance of the differential expression in human tumor cells is currently unknown, the present data provide a valuable background for further study of BRCA1 in tumor cell lines.%人类乳癌易感基因1(BRCA1)是乳癌,卵巢癌和前列腺癌的危险因素之一,而且表现出许多的生物功能.采用Western Blotting和半定量RT-PCR 的方法,我们检测了内源性BRCA1蛋白质和mR-NA在从十一种人类肿瘤组织中建立的四十三种肿瘤细胞系的表达水平.在不同的肿瘤细胞中BR-CA1的表达水平是各不一样的.而且并没有发现BRCA1的表达和细胞的内源性p53基因状况有明显的相关性.通过采用细胞转染乳头状瘤病毒-E6致癌基因或采用畸变的p53基因(143Ala→Va1)而导致的p53基因功能失活并不对内源性BRCA1本底表达水平产生任何的影响,但两种与p53功能有关p21(-/-)和Gadd45基因剔除则轻微地增加BRCA1蛋白质的表达.因此,虽然我们目前还不清楚BRCA1在人类肿瘤细胞中不同表达的功能意义,但本文的结果为进一步研究BRCA1在不同肿瘤细胞系的生物功能提供了有价值的背景资料.【总页数】10页(P55-64)【作者】孟庆慧;袁仁起;樊赛军;Itzhak D.Goldberg;Eliot M Rosen【作者单位】纽约长岛犹太人医学中心,放射肿瘤系分子肿瘤学研究室纽约爱因斯坦医学院长岛附属医院,纽约 11040,美国;纽约长岛犹太人医学中心,放射肿瘤系分子肿瘤学研究室纽约爱因斯坦医学院长岛附属医院,纽约 11040,美国;纽约长岛犹太人医学中心,放射肿瘤系分子肿瘤学研究室纽约爱因斯坦医学院长岛附属医院,纽约11040,美国;纽约长岛犹太人医学中心,放射肿瘤系分子肿瘤学研究室纽约爱因斯坦医学院长岛附属医院,纽约 11040,美国;纽约长岛犹太人医学中心,放射肿瘤系分子肿瘤学研究室纽约爱因斯坦医学院长岛附属医院,纽约 11040,美国【正文语种】中文【中图分类】R73因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
BRG1在肺癌组织和肿瘤细胞系中表达下调原因初探
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BRG1在肺癌组织和肿瘤细胞系中表达下调原因初探摘要:前期的研究表明:在肺癌及多种肿瘤细胞系中,BRG1(brahma-related gene 1)的mRNA和蛋白质表达下调或缺失,但影响BRG1表达下调的原因并不清楚,因此,用PCR-SSCP(single strand conformation polymor-phism)方法检测18例肺癌组织和15株肿瘤细胞系DNA,并经测序证实:其中有1例肺癌组织的BRG1外显子25第3590位碱基存在T→C的点突变,其编码的BRGI蛋白第1171位氨基酸相应地由Val(缬氨酸)→Ala(丙氨酸),该突变位于BRG1蛋白最重要的功能区(依赖DNA的ATP酶区),提示BRG1突变在肺癌发生中可能起一定的作用,同时,对未检测到BRG1 mRNA表达的6例肺癌组织和9株肿瘤细胞系还进行了DNA甲基化分析,结果发现:这些肺癌组织和肿瘤细胞系中BRGI启动子区均无异常甲基化,这说明BRG1在肺癌中表达下调的机制尚需进一步研究。
关键词:BRG1;肺癌;突变检测;甲基化分析BRG1(fbrahma-related gene 1)是进化上高度保守的SWI/SNF染色质重塑复合物的成员之一,我们和其他人的研究均发现:在肺癌组织及多种肿瘤细胞系中,BRGI的mRNA与蛋白质表达下调或缺失,但影响BRGl在肺癌中表达下调的原因仍不清楚,我们采用PCR和PCR-SSCP方法对肺癌组织和多种肿瘤细胞系进行检测,为阐明BRG1在肺癌中表达改变的机制提供证据。
1材料与方法1.1细胞与组织永生化人支气管上皮细胞系HBE,肺鳞癌细胞系NCI-H520,肺腺癌细胞系A549,鼻咽癌细胞系CNE1、CNE2、HNE1、HNE2、HNE3、HONE1,宫颈癌细胞系Hela,喉癌细胞系Hep-2,肾癌细胞系RLC和肝癌细胞系SMMC由本室提供,18例原发性肺癌组织取自中南大学湘雅二医院经病理确诊且未经放疗和化疗的患者,其中肺鳞癌12例,小细胞癌3例,腺癌、腺鳞癌和大细胞癌各1例。
人肺癌细胞、组织中BRCA1蛋白的表达及与顺铂化疗的相关性研究
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人肺癌细胞、组织中BRCA1蛋白的表达及与顺铂化疗的相关性研究王红;秦海峰;王春杨;张金山【摘要】目的研究肿瘤抑制基因BRCA1 在肺癌中的作用,其蛋白在肺癌组织中的分布特征和肿瘤发生中的蛋白特性.BRCA1 蛋白在肺癌肿瘤组织的低、高水平表达.回顾性分析BRCA1 表达水平与顺铂- 化疗的相关性.方法以乳腺癌的细胞株作为阳性对照组,对肺癌组织中的BRCA1 亚细胞分布做了免疫荧光双重染色,免疫组织化学等实验并进行量化.病例资料回顾性分析采用SPSS 统计学系统.结果 BRCA1 蛋白在肺癌的组织中呈一定比例分布,这点在不同的非小细胞肺癌细胞系、非小细胞肺癌患者组织标本中均得到证实.免疫荧光双重染色法证实BRCA1 蛋白在肺癌细胞胞浆和胞核间互动,24% BRCA1 蛋白在细胞核分布,40.3% 胞核、胞浆同时存在,35.7% 只在胞浆中存在BRCA1 蛋白.肺癌组织呈BRCA1 低表达(占患者总人数40%)和高表达(占患者总人数30%)的患者其预后与顺铂治疗有相关性.结论我们的多病例研究结果都证实BRCA1 的胞浆胞核有明确比例分布,提示其可能参与肺癌组织中蛋白功能调节机制,并可能具有与肺癌发生相关的蛋白特性,BRCA1 表达与顺铂化疗预后的相关性得到证实.在肺癌细胞其亚细胞分布现象预示着将有更好的肺癌临床治疗的生物靶点.研究也提示预测BRCA1 蛋白表达水平(低表达)预示以顺铂化疗有更好的预后.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2012(010)013【总页数】3页(P19-21)【关键词】肺癌;BRCA1;组织;出核【作者】王红;秦海峰;王春杨;张金山【作者单位】解放军307医院肺部肿瘤科,北京100071;解放军307医院肺部肿瘤科,北京100071;解放军301医院泌尿外科,北京100853;第四军医大学组织胚胎学教研室,陕西,西安710033【正文语种】中文【中图分类】R734.2乳腺癌相关蛋白有很多种,其中BRCA1是作重要的一种,源于肿瘤抑制基因之一(抑癌基因),且位于染色体17q21区域,它的功能和双链DNA损伤后修复有关。
直肠癌组织中BRG1的表达及其与病理特征和预后的关系
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直肠癌组织中BRG1的表达及其与病理特征和预后的关系赵楠;魏东;高春芳【期刊名称】《数理医药学杂志》【年(卷),期】2022(35)3【摘要】目的:研究直肠癌组织中BRG1(Brahma-related gene1)表达情况及其与病理特征、预后的相关关系。
方法:选择2015年8月~2019年6月期间某院手术切除的62例直肠癌标本,采用免疫组化法测定直肠癌组织中BRG1的表达情况,采用荧光定量PCR法测定直肠癌组织中癌基因的表达,随访手术后的无病生存时间、总生存时间。
结果:TNMⅢ期直肠癌组织中BRG1的高表达率低于TNMⅡ期直肠癌组织,中低分化直肠癌组织中BRG1的高表达率低于高分化直肠癌组织,有淋巴结转移的直肠癌组织中BRG1的高表达率低于无淋巴结转移的直肠癌组织;BRG1高表达的直肠癌组织中细胞周期蛋白(Cyclin)B1、CyclinE的mRNA表达量明显低于BRG1低表达的直肠癌组织,p21、p27的mRNA表达量明显高于BRG1低表达的直肠癌组织;直肠癌组织中BRG1高表达的患者的无病生存时间、总生存时间均长于BRG1低表达的患者,5年总体生存曲线高于BRG1低表达的患者。
结论:直肠癌组织中BRG1的低表达与病理进程发展、增殖活力加剧、生存时间缩短有关。
【总页数】4页(P326-329)【作者】赵楠;魏东;高春芳【作者单位】中国人民解放军联勤保障部队第989医院结直肠乳腺疝外科【正文语种】中文【中图分类】R735.37【相关文献】1.RRBP1与RABEX-5蛋白在结直肠癌组织中的表达及与临床病理特征和预后的关系2.结直肠癌组织及血清中miRNA-107相对表达水平与临床病理特征及预后的关系3.神经突起导向因子-1蛋白在结直肠癌组织中的表达与临床病理特征及预后的关系4.结直肠癌组织中EZH2、NF-E1b表达与临床病理特征及预后的关系5.乙醛脱氢酶1B1、LRFN4在结直肠癌组织中的表达与临床病理特征及预后的关系因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
BRG1在非小细胞肺癌中的作用研究进展
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BRG1在非小细胞肺癌中的作用研究进展
张颖;郑燕芳
【期刊名称】《广东医学》
【年(卷),期】2016(037)021
【摘要】肺癌是目前全球发病率和病死率最高的肿瘤,全球范围内每年新发肺癌患者超过100万例。
在中国,肺癌的发病率和病死率也居各种肿瘤之首。
肺癌的病理类型包括非小细胞肺癌(non—small cell lung cancer,NSCLC)和小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)两大类,其中80%以上为NSCLC,其对放化疗不敏感且预后差。
【总页数】4页(P3283-3286)
【作者】张颖;郑燕芳
【作者单位】南方医科大学珠江医院肿瘤中心广州510282;南方医科大学珠江医院肿瘤中心广州510282
【正文语种】中文
【相关文献】
1.非小细胞肺癌中miRNAs的表达水平及作用机制研究进展 [J],
2.Dickkopf家族蛋白在非小细胞肺癌中的作用机制和治疗应用的研究进展 [J], 董程
3.自噬在非小细胞肺癌EGFR⁃TKI耐药中作用的研究进展 [J], 唐心蔚;高天敏;张君国
4.氧甾醇在非小细胞肺癌中的作用及研究进展 [J], 宋云浩;刘特;邱小宇;严珺;楚师
成;高学军
5.长非编码RNA在非小细胞肺癌治疗抵抗中的作用及机制研究进展 [J], 刘俊霞;王朝霞
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肺癌组织和肿瘤细胞系中BRG1的表达分析摘要:BRGJ(brahma-related gene 1)是进化上高度保守的SWI/SNF染色质重塑复合物的成员之一,研究表明:BRGI具有抑瘤基因的特征,可能与肿瘤的发生发展有关,我们采用RT—PCR、NortherR杂交和Westemblotting证实:肺腺癌细胞系A549和鼻咽癌细胞系HNE2、HNE3、CNE1中无BRG1的表达,而肺鳞癌细胞系NCI—H520、永生化正常人支气管上皮细胞系HBE和鼻咽癌细胞系HONE1、HNE1、CNE2中有BRGJ的表达,同时,通过RT—PCR检测10例肺癌组织标本,发现60%(6/10)的肺癌组织中日BRG1的mRNA水平明显下调,而配对正常肺组织中BRG1,的mRNA表达未见改变,对29例肺癌组织和10例配对正常肺组织切片进行免疫组化染色,结果显示:肺癌组织中BRG1蛋白表达的阳性率为37.9%(11/29),配对正常肺组织中BRG1蛋白表达的阳性率为90%(9/10),两者的差异有显著性(P<0.05),这提示BRG1确实在肺癌组织及多种肿瘤细胞系中表达下调或缺失,在肺癌发病过程中可能起一定的作用。
关键词:BRG1;表达;肺癌;肿瘤细胞系肺癌是目前全球发病率最高的恶性肿瘤,严重威胁人类的健康和生命,近年来我国肺癌的发病率和死亡率迅速上升,有人预计中国将成为21世纪的肺癌大国,肺癌一般分为4种主要的组织学类型:鳞癌、腺癌、大细胞癌和小细胞癌,前三者统称为非小细胞肺癌(NSCLC),约占肺癌总数的75%,后者称小细胞肺癌(SCLC),约占25%,肺癌的发生发展是一个多因素、多步骤的复杂过程,其中瘤基因和抑瘤基因发挥着至关重要的作用,已有研究显示,肺癌在临床前期就有大约10个分子事件,包括瘤基因myc、K-ras、EGFR、Her-2/neu、Bcl-2的激活与抑瘤基因p53、Rb、FHIT、p16的失活等,但这些基因在多种肿瘤中都普遍存在改变,还不足以完全解释肺癌发生发展的机制,因此有必要继续寻找和鉴定新的肺癌相关基因。
Girard等利用399个微卫星标记对肺癌细胞系及组织标本进行全基因组等位基因分析(allelotyping),发现NSCLC中19p13区域存在高频率的杂合性丢失(LOH),已知定位于19p13.3的抑瘤基因LKB1/STK11,在约30%-50%有19p LOH 的肺腺癌中失活,但定位于该区域的其他基因仍可能是肺癌的候选抑瘤基因,因为LKB1/STK11的突变目前只发现于肺腺癌中,而占NSCLC大多数的鳞癌中并未检测到LKB1/STK11的突变。
BRGl是1993年Khavari等利用果蝇的Brm(Brahma)DNA片段为探针,筛选Hela细胞cDNA文库而分离得到的一个人类基因,属于进化上高度保守的SWI/SNF染色质重塑复合物的成员之一,它由35个外显子和34个内含子组成,其转录本的大小约为5kh.BRG1蛋白由1613个氨基酸组成,共有4个结构域:I 脯氨酸富集区、Ⅱ电荷富集区、Ⅲ依赖DNA的ATP酶区、IV溴化区,其相对分子质量为205kD,是一种磷酸化核蛋白,主要以ATP依赖的方式通过破坏组氨酸一DNA的接触而调节基因的表达,通过放射杂交图谱分析,已将BRGl定位于19p13,大量研究表明:将BRGl重新导入到其缺陷的肿瘤细胞系中,可阻滞细胞生长并逆转细胞的转化表型;BRGl及SWI/SNF复合物的其他成员,能与Rb1、p53、BRCA1、LKB1/STK11等抑瘤基因产物相互作用,参与细胞生长和分化的调节,另外,转基因动物实验也证实:BRGl纯合子突变(Brgl-/-)小鼠因不能发育而致死;BRGl杂合子突变(Brgl+/-)小鼠虽发育正常,但较BRGl野生型(Brgl+/+)小鼠容易发生肿瘤,这说明BRGl具有抑瘤基因的特征,可能与肿瘤的发生发展有关。
目前,国外关于肺癌中BRGl的研究较少,国内则未见报道,从已有的研究得知:BRG1蛋白在至少10%-30%的NSCLC组织和细胞系中表达下调或缺失,且这些BRGI蛋白表达缺失的NSCLC病例预后较差,但BRG1在我国肺癌患者中的表达情况及其mRNA和蛋白质表达的相关性仍不清楚,为此,我们从mRNA 和蛋白质两个水平对肺癌组织和细胞系进行BRG1表达分析,旨在阐明BRG1表达与肺癌发病的关系。
1 材料与方法1.1 细胞、组织与质粒永生化人支气管上皮细胞系HBE,肺鳞癌细胞系NCI.H520,肺腺癌细胞系A549,鼻咽癌细胞系CNE1、CNE2、HNE1、HNE2、HNE3、HONE1,大肠腺癌细胞系SW480、HT-29,宫颈癌细胞系HeLa,喉癌细胞系HEp-2,肾癌细胞系RLC和肝癌细胞系SMMC由本室提供,10例原发性肺癌组织标本,取自中南大学湘雅二医院经病理确诊且未经放疗和化疗的患者,其中肺鳞癌7例、腺癌2例、小细胞癌1例,29例肺癌及10例配对正常肺组织石蜡块取自湘雅医院病理科,包括肺鳞癌17例、腺癌5例、小细胞癌5例和腺鳞癌2例,质粒pBJ 5-BRGl由美国斯坦福大学Crabtree博士惠赠.1.2 主要试剂Taq DNA聚合酶(大连宝生物工程公司),限制性内切酶BamH I、Msp I、Hpa Ⅱ(MBI公司),逆转录试剂盒(Promega公司),蛋白酶K、SDS(Sigma公司),小牛血清、RPMI1640培基、TRIzol试剂、鲑精DNA、低熔点琼脂糖(Invitrogen公司),BCA蛋白质浓度测定试剂盒(PIERCE公司),羊抗人BRGl抗体(Santa Cruze 公司),辣根过氧化物酶标记兔抗羊二抗、ECL Western blotting检测试剂盒(Amersham Pharmacia公司),dCTP(北京亚辉公司),胰酶、λDNA/HindⅢ和PCR marker、琼脂糖(华美生物工程公司),PCR引物用Primer3软件设计,由上海生工生物工程公司合成,PCR引物序列和产物大小见表1。
1.3 方法1.3.1 RNA抽提及Northern杂交细胞/组织RNA按TRIzol试剂操作程序提取。
RNA电泳以及Northern杂交均参照文献[14]的方法,探针标记则按试剂盒说明书进行,1.3.2 RT-PCRcDNA合成:取1μg RNA样品,加1μLoligodT(0.5g/L),65℃变性10min,冰上骤冷后加10×逆转录缓冲液2μL,25mmol/L MgCl15%为BRGI表达阳性(+);阳性细胞数>50%为BRGI表达强阳性(++)。
统计学分析:运用SPSS软件包进行秩和检验。
2 实验结果2.1 RT-PCR检测肺癌组织和肿瘤细胞系中BRGl的mRNA表达以β-actin为内对照,应用RT-PCR方法检测了15株肿瘤细胞系和10例肺癌组织中BRG1的mRNA表达.结果如图1所示,BRGl在53.3%(8/15)被检测的肿瘤细胞系中mRNA表达下调或缺失;10例肺癌组织中有6例BRGl的mRNA 表达下调或缺失,而10例配对正常肺组织中均有BRGl的mRNA表达。
2.2 Northern杂交分析肿瘤细胞系中BRGl的转录情况以GAPDH作为内对照,用Northern杂交证实BRG1在肺癌和鼻咽癌细胞系中的转录情况,结果如图2所示,在A549、CNEI、HNE2和HNE3等4株细胞系中检测不到BRGl的转录,而在另外4株细胞系即NCI-H520、CNE2、HNE1和HONE1中能检测到BRG1的转录本,大小约5kb。
2.3 Western Blotting检测肿瘤细胞系中BRGl蛋白的表达以Hela细胞为阳性对照,进一步用WesternBlotting检测肺癌和鼻咽癌细胞系中BRGl蛋白的表达情况.从图3可见,A549、CNE1、HNE2和HNE3细胞中无BRGl蛋白表达信号,而HNE1、HONE1、CNE2和NC1-H520细胞中可检测到BRGl蛋白的表达。
2.4 免疫组化分析BRGI蛋白在肺癌及配对正常肺组织中的表达结果显示:BRGI蛋白在配对正常肺组织中有较强表达,细胞核多呈棕褐色(见图4A),而BRGI蛋白在肺癌组织中表达程度明显降低,细胞核多呈淡黄色或不着色(见图4B),对BRGI蛋白在肺癌和配对正常肺组织中的表达水平进行统计分析(见表2),利用SPSS软件,采用秩和检验,结果显示:BRGI蛋白在肺癌组织中的表达水平明显低于配对正常肺组织,Z=-2.594。
P=0.016(P<0.05),差异具有显著性意义.3 讨论肺癌在染色体19p13区域存在高频率的LOH,通过放射杂交图谱分析,BRGl 已定位于19p13,根据Knudson的“二次打击”学说,高频率、非随机的染色体LOH往往暗示该缺失区域中可能含有抑瘤基因,因而推测BRG1作为候选的抑瘤基因与肺癌的发生发展相关,另一方面,BRGl作为进化上高度保守的SWI/SNF 染色质重塑复合物的成员之一,在哺乳动物细胞中可通过与Rb1、p53、BRCA1、LKB1/STK1,等抑瘤基因产物相互作用,参与细胞生长和分化的调节,同时,细胞转染和转基因动物实验也证实BRGl具有抑癌基因的特征,但迄今国外关于肺癌中BRGI的研究还较少,国内则未见报道,从已有的研究得知:BRGl蛋白在至少10%-30%的NSCLC组织和细胞系中表达下调或缺失,且这些BRGl蛋白表达缺失的NSCLC病例预后较差,不过这些资料均来自美国肺癌病人标本的研究,而BRGl在我国肺癌患者中的表达情况及其mRNA和蛋白质表达的相关性目前仍不清楚。
我们通过RT-PCR和Northern杂交,检测到在60%(6/10例)的肺癌组织及肺腺癌细胞系A549等多种肿瘤细胞系中BRG,的mRNA表达下调或缺失.采用Western blotting方法则进一步证实,在BRGl转录下调的肿瘤细胞系中BRGl蛋白质的表达也下调或缺失,两者间为正相关,对29例肺癌组织及10例配对正常肺组织标本进行免疫组化检测,结果显示BRG1蛋白在肺癌组织中表达的阳性率为37.9%(11/29例),在配对正常肺组织中表达的阳性率为90%(9/10例),经秩和检验分析,两组间BRGl蛋白的表达水平具有显著性差异(P<O.05),上述结果表明,BRG1确实在我国肺癌病人组织标本和多种肿瘤细胞系中表达异常,且其mRNA和蛋白质表达呈正相关,BRG1在肺癌中表达改变的原因值得进一步研究,这对于阐明BRG1在肺癌发病中的作用具有重要意义。
注:本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。