毛细管区带电泳解析资料
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毛细管区带电泳的应用
区带电泳的应用与发展
* 新技术的应用比如衍生化法使得区带电泳能分离的 物质的范围得以拓展。
* 区带电泳与其他仪器的连用能使得其定性 定量可靠性提高。
*溶质的流出顺序:阳离子> 中性粒子>阴离子
*质荷比越大的粒子流出上网 速度越快。
区带电泳的操作条件 *选来自百度文库缓冲溶液的类型 *改变溶液的离子强度
*改变pH值 *加入添加剂
缓冲溶液、离子强度、pH影响电渗流的大小和方向,决 定区带电泳的柱效、选择性以及分离度和分离时间。
缓冲溶液的选择应遵循的要求:
1.中性盐
加入高浓度的中性盐,大量的阳离子争夺毛细管壁的负电荷从而降低管 壁对蛋白质的吸附。
2.手性添加剂
手性冠醚、环糊精的加入可以实现对光学异构体的手性拆分。
3.添加高分子非电解物质
高分子添加剂的加入可以形成分子或者特殊的局部结构,从而影响分离 过程,如纤维素、聚乙烯醇、多糖等。
4.表面活性剂
表面活性剂具有增溶, 吸附形成胶束的功能。低浓 度的阳离子表面活性剂,能 在毛细管壁形成单层或者双 层吸附,改变电渗流的大小 甚至方向。必须说明的是, 加入的表面活性剂的浓度必 须小于其临界胶束浓度。
毛细管区带电泳
(capillary zone electrophoresis)
毛细管区带电泳的定义
区带电泳的分离原理
区带电泳的操作条件
毛细管区带电泳的应用
毛细管区带电泳的定义
*毛细管区带电泳(capillary zone electrophoresis):
也称为毛细管区带电泳自由溶液电泳,是毛细管电泳最基本,应用最广泛的 一种分离模式。
(1)在所选的pH范围内有合适的缓冲容量。 (2)本底的响应值低。
(3)自身的淌度要低,离子大而带电小。
硼酸盐、三羟甲基氨基甲烷等缓冲溶液,因缓冲容量大,背景干扰小,经 常被作为缓冲溶液使用。
缓冲溶液的pH决定了弱电离试样的有效淌度,同时控制着电渗流的大小和 方向,一般通过实验来优化最佳pH值。
添加剂的种类及作用
*毛细管区带电泳的分离依据:
基于试样组分质荷比的差异。
*毛细管区带电泳的分离对象:
特别适合分离带电化合物,包括 无机阴离子、无机阳离子、有机酸、胺类化合物、氨基酸、蛋白质等,不能 分离中性化合物。
毛细管区带电泳的分离原理
*溶质中具有不同质荷比的带 电粒子在电渗流的作用下流出 速度的差异,达到分离。