动物细胞工程精选习题习题非选择题

a
b
d
c
e 甲 乙 f
不遵循，多莉羊的多数性状象c羊，个别性 状象d羊，发育也会受到f羊影响。 19
9、下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图， 请据图作答。
（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？ 不能 ，为什么？ 皮肤细胞中的胰岛素基因未表达，不能形成胰岛素mRNA 。 逆转录 （2）过程②必需的酶是 酶，过程③必需的酶 解旋 是 酶。 20
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e 甲 乙 f
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(2)产生 甲和乙的过程分别 有性生殖 克隆 是—————和————
a
b
d
（3）在形成乙是的过程中， 需要将d的细胞核取出，将c 细胞核移入d细胞内，此技术 e 核移植 叫———。所需的受体细胞 大多采用动物卵细胞的原因 卵细胞大，易于操作；卵细 是——————————— 甲 胞具有继续分化的潜能。 ———————————— （4）绵羊的白色对黑色为显 色。若甲是白色绵羊，要判 断它是否纯合体，选用与它 黑毛 交配的绵羊最好是————--
（3）与人体细胞中胰岛素基因相比，通过②过程获得的目的基 因不含有非编码区和 内含子 。
（4）若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连
续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶 15（a－b） 个。 能在受体细胞中进行自我复制 （5）图中B应该符合的条件为____________________、 有多个限制酶的切点便于目的基因插入 有标记基因 ___________________________________、_________________. 受体 图中的D是基因工程中的___________细胞。 CaCl2 （6）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。 21 21
该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原，故而
可选用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗；
确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒， 可以进行核酸序列的比对； 也可以利用单克隆抗体具备特异性，利用抗A 蛋白的特异性单克隆抗体通过能否特异性结合判 断病毒表面是否有A蛋白的存在进一步进行检测是 否为目的RNA病毒。
杂交瘤细胞 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 不能 3、A是从小鼠的脾脏中取得 C 抗体 _______,该细胞能够产生______ B细胞 细胞融合 4、图中B为________过程，常用 足够数量的细胞群 灭活病毒 _________作为诱导剂，该细胞继 双亲细胞 承___________的遗传特性，既能 体外培养 注射到 分泌抗体 无限增殖 __________,又能___________。 5、C过程指细胞培养，该过程包括 小鼠腹腔 原代 传代 _____培养和_____培养两个阶段。 8
纤维素酶和果胶酶 (2)③过程所用的酶是_________________________。
（3)④过程除了用电激之外，还可以用________、 灭活的病毒 _____ ___等作为诱导因素。 聚乙二醇 (4)⑤过程动物细胞体外培养需要满足的条件是 95%空气 无菌无毒 充足营养 适宜温 ________、________、________、________。 12 度和pH +5%CO
图10
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6．自然界中有一种含有叶绿体的原生动物——眼虫， 这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活。 某同学提出问题：“动物细胞与植物细胞之间可以实 现杂交吗？”他尝试设计出下列具体的实验方案。
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结合实验方案回答： 实验原理：根据眼虫的 特点，动物细胞和植物细胞 之间在理论上是可以实现杂 交的。实验步骤如下： (1)①中选的植物材料细胞中ຫໍສະໝຸດ Baidu须有的细胞器是_______ 叶绿体
请回答： （1）过程①代表的是 逆转录 。 （2）过程②构建A基因表达载体 时，必须使用 限制性核酸内切酶 和 DNA连接酶 两种工具酶。
抗A蛋白的 单克隆抗 体
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病毒
RNA
①
② DNA A基因
A基因 表达载体
受体 细胞
A蛋白
（3）过程③采用的实验技术 小鼠皮下 是 细胞融合 ，获得的X是杂交瘤细胞 。 小鼠骨髓 效应B淋 巴细胞 （4）对健康人进行该传染病免疫预 瘤细胞 ③ 防时，可选用图中基因工程生产的 X A蛋白 所制备的疫苗。 对该传染病疑似患者确诊时， 抗A蛋白的 单克隆抗体 可以疑似患者体内分离病毒，与已 知病毒进行 核酸（基因）序列 比较； _________ 或用图中的 ___ ____ 进 抗A蛋白的单克隆抗体 5 行特异性结合检测。
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((5)在整个实验过程中，要 强调所用的器械的灭菌和无 菌操作，原因是各种杂菌可 以在培养基上面迅速生长， 培养基一旦被污染，迅速生 长的各种杂菌不但会和 培养物 ________争夺营养，而且这 些杂菌生长的过程中会生成 有害的物质 大量_____ ___导致培养 物迅速死亡。
(6)在⑤⑥过程中，通常要添加血清，原因是 ________________________。 人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清
5、975年Kohler和Milstein的单克隆抗体技术在生产和 使用抗体方面开创了新纪元，图10示单克隆抗体制备流 程阶段示意图。请据图回答下列问题： （1）该技术是在动物细胞培养 技术和 动物细胞融合 技术的基础 上发展起来的。 （2）图10中细胞A体外培养 不具有分裂能力，但能分泌 特异性抗体 ，细胞B体外 培养能够 无限增殖 。 （3）动物细胞融合常用的 方法是 PEG（灭活的病毒、电激） 。
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠 细胞的细胞核 转入 去核的卵母细胞 细胞中构成重 组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技 术称为 细胞核移植 。该重组细胞发育的过程中还 16 应用了 动物细胞培养 技术。
8、世界上第一只克隆羊 “多莉”的培育过程如 图所示，请据图回答： (1)图中的甲为苏格兰绵羊， 乙为多莉羊。那么，a和b 是通过_______分裂形成的， 减数 其DNA含量是体细胞的 _______一半 ；c肯定是__ 细 胞，乙的遗传性状与提供 体 ___________的绵羊 一致. 细胞核
动物细胞工程精选习题习题
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1、1975年Kohler和Milstein的单克隆抗体技术在生产和
使用抗体方面开创了新纪元，图10示单克隆抗体制备流程 阶段示意图。请据图回答下列问题： （1）该技术是在动物细胞培养 技术和 动物细胞融合技术的基础
上发展起来的。
（2）图10中细胞A体外培养 不具有分裂能力，但能分泌 特异性抗体 ，细胞B体外 培养能够 无限增殖 。
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黑面绵羊去 白面绵羊卵 ⑴写出 ａ、ｂ所指的细胞工程各称： 核卵细胞 腺细胞核 ａ 核移植 ｂ 胚胎移植 。 a
3.世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序如图所示。 请仔细看图后回答问题：
⑵实施细胞工程ａ时，所需的受体 细胞大多采用动物卵细胞的原因是
重组细胞 电脉冲处理 早期胚胎 b
卵细胞体积大，易于操作，卵细胞中有 ： 。 启动核基因表达的物质
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(3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培 养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入 0.1 mL细胞稀释液，其目的是 使每个孔内不多于 一 个细胞，达到单克隆培养的目的(或单一细胞培 ________________________ ____。 (4)若用 N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞， 放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是 核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜 ______________________________________________。 15
养以保证抗体的纯度) 15
25、继哺乳动物乳腺发生器研发成功后，膀胱生物发生 器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培养出一种 转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并 分泌到尿液中。请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方 法是 显微注射法 。 （2）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠 的 膀胱上皮 细胞中特异表达。
楚，通常加入血清、血浆等一些天然成分
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7．下图为单克隆抗体制备流程示意图。
(1)单克隆抗体制备技术的基础是________________。 动物细胞培养 (2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的 是________________。在细胞培养过程中，培养液中需 筛选杂交瘤细胞 种类和数量(浓度) 要添加无机盐，但要注意无机盐的__ ______， 以保证生命活动的正常进行。
⑶多莉面部的毛色是 白色 ， 多利的核基因全部来自白面绵阳 判断依据是： 。
⑷继植物组织培养之后，克隆绵羊 培育成功，证明动物细胞也具 有 全能性 。
另一头母绵羊子宫 妊娠、出生 克隆绵羊多莉 7
⑸请举例说明克隆绵羊培育成功的 保存濒危物种，繁殖优良品种，医学上克隆器官 实际意义： 。
4、下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌 的抗体实验方案 A 制备单克隆抗体 1、该实验方案的目的是__________ 骨髓瘤细胞 B
图10
2、（09山东卷）人类在预防与诊疗传染性疾病过 程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病 的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要 抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
病毒 提取 RNA ① DNA ② A基因 A基因 表 达 载 体 受体 细胞 A蛋白 小 鼠 皮 下 小 鼠 骨 髓 瘤 细 胞 效应B淋 巴细胞 ③ X
图10
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（4）细胞融合是随机的过程， 在HAT培养基中培养，要筛选出 杂交瘤 细胞。在细胞培养过 程中，为了促进细胞摄取葡萄糖， 常向培养液中加入 胰岛素 (激素) （5）培养2周后，即测定培养 细胞的特征，筛选出 特异性分泌 抗X蛋白抗体的 细胞置于不 同孔内（如图所示）培养。此操 作前要将培养细胞稀释到7～10 个细胞/ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的 保证每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（单一细胞培养 是 以保证抗体的纯度） 。 （6）要获得大量的单克隆抗体，可对获得的杂交瘤细 胞进行 体外或体内 培养。
c
f 乙
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（5）在产生多莉羊时，需将f 细胞形成的早期胚胎移入另一 头母羊子宫里，这种技术在细 胚胎移植 胞工程中叫——————
（6）继植物组织培养后，克隆 绵羊的培育成功，证明动物细 胞也有——— 全能性 （7）在繁殖多莉羊的过程中， 是否遵循孟德尔遗传规律？多 莉羊的性状与d羊、c羊及f羊的 关系是什么？
图10
（3）动物细胞融合常用的
方法是 PEG（灭活的病毒、电激） 。
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（4）细胞融合是随机的过程， 在HAT培养基中培养，要筛选出 杂交瘤 细胞。在细胞培养过 程中，为了促进细胞摄取葡萄糖， 常向培养液中加入 胰岛素 (激素) （5）培养2周后，即测定培养 细胞的特征，筛选出 特异性分泌抗 X蛋白抗体的 细胞置于不 同孔内（如图所示）培养。此操 作前要将培养细胞稀释到7～10 个细胞/ml，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的 保证每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（单 是 一细胞培养以保证抗体的纯度） 。 （6）要获得大量的单克隆抗体，可对获得的杂交瘤细 胞进行 体外或体内 培养。 3