三点测交

三点测交

一、实验目的

1、验证连锁互换定律

2、掌握并进行连锁分析，熟悉作染色体图的实验方法

3、了解伴性遗传与非伴性遗传的区别，了解伴性遗传在正反交中的差

异

二、实验原理

三点测交是指三个基因包括在一次交配中，那就是用三杂合体abc/+++或ab+/++c跟三隐性个体abc/abc测交。

三点测交实验的优点：①一次三点测交实验即与三次两点测交实验的结果相同。②一次三点测交实验中得到的三个重组值是在同一基因型背景同一环境条件下得到的，而三次两点测交就不一样了。事实上，我们知道重组值既受基因背景的影响，也受各种环境条件的影响，所以只有从三点试验所得到的三个重组值才是严格地可以互相比较的。③通过三点测交实验，还可以得到三次两点测交无法得到的资料，即双交换。

果蝇的白眼，小翅，卷刚毛为X-连锁基因，全部隐性于各自的野生型基因（红眼、长翅、直刚毛），把白眼、小翅、卷刚毛雌蝇(WNSn/WMSn)与野生型雄蝇交配（+++/y）。F1雌蝇全部为野生型，雄蝇则全表现为三隐性突变型，让F1雌雄蝇互交，在F2中，不管雌雄性别，除了出现双亲类型外，还会出现新的表型种类，这是由于F1雌雄中两个染色体之间发生了互换的结果，根据基因在染色体上线性排列的遗传理论，对F2进行分析即可知不同基因间的连锁距离。

且在F2的雌性当中两条染色体为杂合的，故可以发生交换，所以F2当中还会出现一些发生单交换和双交换的基因型。

因为这三个基因位于性染色体上，所以这个实验也可用来作为伴性遗传实验，当基因位于性染色体上时，它与性别相连系的遗传现象，跟常染色体上的基因的遗传现象有所不同，这种遗传称为伴性遗传。在果蝇中，性染色体是XY型，即在雌体上有一对X染色体（X,X），在雄体上有一条X染色体一条Y染色体（X,Y），当基因位于X染色体而Y染色体一般不含有相对的基

因就产生伴性遗传，在伴性遗传中，正交和反交产生不同的结果，例如，在本实验中

三、实验材料

野生型果蝇，白眼、小翅、卷刚毛三隐性纯合体的果蝇

装有培养基的空培养管，麻醉瓶，镊子，毛笔，乙醚，解剖镜

四、实验步骤

1、4月12日星期五早上10点至12点之间，在实验室向两瓶新培养基

中分别放入5-6对的纯种野生型果蝇和纯种三隐型果蝇。带回寝室并带三个新鲜的培养瓶回寝室，记住经常观察，收集处女蝇分别放入贴了野生型和三隐型标签的新鲜培养瓶中，其中两个为野生型的瓶子。

2、4月19日星期五早上10点至12点之间，将五个培养瓶带回实验室，

将上星期带回去的两个瓶子中的果蝇用滴了乙醚的麻醉瓶麻醉，从其中分别找出野生型和三隐型的雄果蝇1-2只。将野生型的雄果蝇放入装有三隐型处女蝇的培养瓶中，贴上标签，写上反交和日期。将三隐型的雄果蝇放入装有野生型处女蝇的培养瓶中，贴上标签，写上正交和日期。交给老师观察了以后，放入恒温培养箱中培养。

3、4月26日星期五早上10点至12点之间，到实验室以后将置于培养箱中的培养瓶拿出，观察到正交与反交中都有足够多的幼虫，用麻醉瓶滴入乙醚后将两瓶中的亲本麻死，倒入死蝇瓶中。再将清过亲本的培养瓶继续放入培养箱中培养。

4、5月3日星期五早上10点至12点之间，到实验室后将培养瓶从培养箱中拿出，观察正反交的F1的性状与预期的相同。观察有足够多的F1，将F1分别转接入新的培养瓶中，每个瓶中中转入5-6对，贴上对应的标签后，交给老师观察了再放入培养箱中培养。

5、5月10日星期五早上10点至12点之间，到实验室后再次将培养瓶从培养箱中拿出，观察到正交和反交中都有足够多的幼虫。在麻醉瓶中滴入乙醚后将三瓶中的F1麻死。在标签上写上“F1已清”后，给老师登记，再放回培养箱中。

6、5月17日星期五早上10点至12点之间，到实验室中后将培养瓶拿出，用滴了乙醚的麻醉瓶将正交的F2麻醉，倒在白纸上，用毛笔等在解剖镜下将果蝇以8个不同的性状分出，分别数出每种果蝇的个数，进行记录。对于反交的果蝇也是如此，但是反交时只数雄果蝇。数好后，将培养瓶继续放入培养箱中培养。

7、5月24日早上10点至12点之间，到实验室后，用与上次一样的方法将正反交的果蝇分别数出不同的性状的数量。将两次的数量相加后，登记在老师的记录本上。

五、实验数据记录

所统计的果蝇总数为281只。

六、实验结果

由实验数据可得白卷小和红直长为两种亲本型的性状，白直小和红卷长为两种双交换的性状，其余四种为单交换的性状。

写遗传表和作基因连锁图

七、实验注意事项

在统计F2的果蝇数时必须要连瓶中的死蝇一起统计，两周过后就要停止统计，因为F3代可能已经出来，会影响统计的结果。