多种真菌毒素的检测方法分析

多种真菌毒素的检测方法分析

摘要：真菌毒素作为产毒细菌的代谢物质，它大量出现在粮谷及饲料当中，产毒真菌具有分布广的特点。现代农业技术和食品加工工艺虽然较为先进，然而真菌却还是会在作物的生长、储存以及加工中造成危害，并且这些危害往往是不可避免的。在适当的温度和湿度条件下，产毒真菌就将会在食用坚果、油料种子、谷物等粮食作物中繁殖与生长。与此同时，这些真菌真毒也可能会由于畜禽食用含有真菌毒素的实物而进入到其蛋和乳中，进而进入到食物链当中。真菌毒素拥有致癌性、毒性、致畸性等危害，能够引发人畜肾中毒、肝中毒以及生殖异常，因而对其进行检测也就变得十分必需了。

关键词：真菌毒素;检测方法;分析

真菌毒素也被学者们称之为毒菌毒素，它是产毒真菌的代谢物，它广泛存在于饲料和粮谷中，一旦人畜食用了被真菌毒素污染过的粮食、饲料，极有可能会出现癌症、肝中毒等严重后果，所以这也是人畜健康和生命的重要威胁之一。从一份分析报告中的数据我们可以大致了解到，世界上大约四分之一的谷类作物都受到了真菌毒素不同程度的污染，每年因此造成的经济损失也已达到数十亿美元。所以，对粮谷、饲料和畜牧产品造成最大危害的问题之一便是真菌毒素污染的问题。以下笔者将结合自身多年实践工作经验，并通过本文，针对多种真菌毒素的检测方法进行分析。

1 生物鉴定检测方法

这种检测方法主要是运用真菌毒素可影响家禽、微生物以及水生动物等生物的细胞来检测真菌毒素是否真正存在，其专一性较差、灵敏度低，通常情况下仅作为化学分析方法的佐证。同时，它的优势在于检测物质无需高纯度，一般用于定性。一共包含十种：（1）植物实验;（2）饲喂实验动物试验;（3）鳟鱼试验;（4）鸡胚试验;（5）鸭胚试验;（6）荧光反应;（7）组织培养检测法;（8）对微生物遗传因子影响试验;（9）细菌发光试验;（10）抑菌试验。

2 化学分析法

化学分析法又被称之为薄层色谱法，它主要应用于分离、分析黄曲霉毒素的检测过程中，是最早、最广的检测技术。为能有效提升薄层色谱的分辨率，部分样品黄曲霉素检测往往都是应用高效薄层层析方法，当薄层分析仪出现之后，高效薄层层析法和薄层色谱法可以实现自动化定量定性，最小黄曲霉毒素量将无需利用目测，分析的速度将得到极大提升，同时结果也将变得更精准。Otta等把光度计和高压薄层色谱法相结合，并对10个样品中黄曲毒素B1、B2、G1、G2情况进行分析，很多食品中均可以实现检测，利用高压薄层色谱法把样品进行分离和提纯，通过光度计实现定量，完成了低耗、有效、快速定量多种食品中的AFT，同时薄层色谱法在镰刀菌毒方面也有大量运用。TLC分离效率及其检测精度伴随高效薄层色谱法和薄层扫描仪的应用与发展得到了相应的提升，进而在真

菌毒素的检测领域中TLC技术也得到了更加广泛的应用。

3 免疫分析法

真菌毒素具有抗原性弱的特点，隶属半抗原。检测食品中真菌毒素较为常用的方法是理化方法或者生物学方法。然而理化方法所使用的器材通常价格比较昂贵，并且操作过程相对繁琐。通过真菌毒素单克隆抗体检测真菌毒素具有特异性强、敏感度高的特点，通常适合在食品样品检测中使用。此种方法主要是应用了酶、免疫和生化技术，开创了一条分析真菌毒素的新领域。从当前形势来看，应用最广泛的方法主要有酶联免疫法、放射免疫法、亲和层析法。其中亲和层析法是通过免疫化学反应原理，应用大量单克隆抗体，有选择性的吸附提取液当中的抗原物质，同时这种技术在试验样品的检测灵敏度和净化效果方面比其它方法具有优势，这主要是因为抗原抗体可以高选择性、高灵敏度、高特异性，特别是使用有害试剂可被控制，其对于环境危害小的特点更是得到了越来越多科学家的好评。

4 生物芯片分析法

这种检测方法是自20世纪90年代中后期逐渐发展起来的新型技术，尤其是近年来生物科学实现了快速的发展。此方法主要是分子生物学、半导体微电子、激光、化学染料等学科和生命科学相互交融的一项技术，关键是凭借核酸杂交等生物分子的反应极其特异性，并通过荧光标记DNA碱基处于不同波长下发射、吸收光，荧光信号强度和样品中靶分子的含量具有一定线性关系来完成分析一项前沿学科已经成为科学家们的关注焦点。与此同时，生物芯片分析技术可以完成高通量、多参数的同步分析，而且可进行全自动、快速分析，以上优点都使其在环境、医药等诸多领域中得到了广泛的应用，因此具有良好的发展前景。在分析真菌毒素的领域中，通过应用抗体芯片技术能够实现同步分析多种真菌毒素，并且提取和检测时间将大幅度降低，从而有效提升了工作效率，该项技术同时也逐渐成为了监督食品安全、质量和卫生的最新方法。

5 仪器分析法

真菌毒素检测的方法主要有液相色谱串联质谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法和荧光光度法。上个世纪70年代，液相色谱进入到了高效液相色谱的时期，测试消耗时间也大幅度降低。高效液相色谱法适用适宜的流动相成分及其比例，通过反相色谱柱来分离各种毒素，然后利用质谱、荧光检测器或者紫外线检测器来完成分析过程。大部分真菌毒素均能够运用上面的方法，并且可靠性、稳定性、灵敏度较高，是当前被广泛认可的检测方式。特别是质谱和液相色谱连用的技术，能够同步提供目标化合物分子结构信息及其保留时间，拥有灵敏度小、杂质影响小、净化要求低、适用多组分析的优势，能够完成定性、定量分析。

各种各样的检测方法虽然均在不断发展和更新，然而高效液相色谱检测方法始终自身的高检测效能、分析速度快、高分离效能等诸多优势，在分析过程中应用最为广泛，同时也正是这一原因使得测定多种真菌毒素的方法能够实现。

6 结语

总而言之，从当前形势来看，真菌毒素所产生的危害范围和长度极大，因此对其进行检测已变得十分必要。与此同时，针对真菌毒素进行检测是一项相对繁琐的工作，因而需要相关工作者在实际检测过程中认真分析、研究，不断总结有关经验教训，并在此过程中发挥自身的创新能力，最终将真菌毒素检测过程中的难点和瓶颈一一击破。

参考文献：

[1]黄广明，李肖红，阳艳林，赵江林，劳晔.2012 年上半年饲料中霉菌毒素污染状况的分析[J].养猪，2012（06）：13-14.

[2]宫小明，任一平，董静等.超高效液相色谱串联质谱法测定花生、粮油中18种真菌毒素[J].分析测试学报，2011（01）：6-12.