临床对解脲支原体(uu)的检测方法
生殖道解脲支原体感染与自然流产的临床探讨
生殖道解脲支原体感染与自然流产的临床探讨【摘要】目的：探讨解脲支原体（uu）与自然流产的相关性。
方法：采用免疫层析法和分离培养法对150例自然流产者（观察组）和150例人工流产患者（对照组）的宫颈分泌物进行uu的检测。
结果：①观察组宫颈分泌物uu的总检出率为90.00%，对照组为43.33%，两组比较差异有统计学意义（p<0.05）。
②自然流产次数≥2次者， uu检出率与只有1次自然流产史者相比，差异有统计学意义（p<0.05）。
结论： uu感染与自然流产的发生可能相关，尤其与复发性自然流产关系密切，对自然流产患者进行uu的检测并积极治疗对防止不良妊娠结局再次发生有重要意义。
【关键词】解脲支原体；自然流产【中图分类号】r711 【文献标识码】a 【文章编号】1004—7484（2013）09—0128—01支原体是目前国际上最为关注的与不良妊娠结局相关的病原体之一，特别是解脲支原体能在妊娠的全过程定位于滋养细胞内并增殖，引起细胞超微结构的改变，[1～5]，反复自然流产或胚胎停育均为病理现象，其病因非常复杂。
目前认为其可能的病因除遗传、内分泌、生殖器官解剖异常、自身免疫性疾病外，尚有生殖系统感染，而妊娠妇女生殖道支原体感染可能是早期流产的重要原因之一。
本课题收集大量样本研究解脲支原体与早期自然流产的关系，以便在今后自然流产的病因学研究中，解脲支原体感染应作为一个重要因素加以考虑。
1 资料与方法1.1 研究对象 2011年2月～2013年4月河南省中医院生殖中心收集的300例自然流产妇女作为观察组，自然流产发生年龄20～36岁，平均（25·6±3·4）岁；发生孕周5～12周；发生次数1～4次；既往成功妊娠次数0～2次；经外周血检测排除 torch的近期感染；经相关检排除生殖器官畸形，遗传性及内分泌疾病、血型不合及免疫异常；此外，经配偶的精液检查，排除配偶精液质量不佳的问题并排除配偶染色体异常。
解脲脲原体UU
解脲脲原体(UU)一解脲脲原体（ureaplasma urealyticum，UU）感染解脲脲原体又叫解脲支原体、溶脲脲原体，是支原体的一种，因为能够合成尿素酶分解尿素而命名。
现已明确解脲脲原体是引起性传播疾病的病原体之一。
解脲脲原体的主要致病原因是掠夺宿主细胞膜固醇等脂类营养，分解尿素，产生大量毒性代谢产物氨类，损害细胞，并可促进局部形成结石。
在非淋球菌性尿道炎中，除衣原体外，解脲脲原体的感染占第二位，有30～40%的男性尿道炎是由解脲脲原体感染所致。
解脲脲原体可形成继发感染，在淋球菌尿道炎患者中解脲脲原体的检出率高于非淋球菌性尿道炎的2.16倍，也是一些淋病患者治愈后仍有后遗症的原因之一。
大量的研究证明解脲脲原体与自然流产、先天缺陷、死胎和不孕症有关。
自然流产1～8次妇女的宫颈分泌物或流产胎儿组织解脲脲原体的检出率为68%，其中流产超过4次以上者检出率高达80%，而正常妇女检出率仅为10.5%。
国内对2181例不孕患者研究报道，解脲脲原体检出率明显高于对照组。
阳性患者经强力霉素治疗后转阴者为83.7%，其中恢复妊娠者为38.7%，说明不孕症与解脲脲原体感染高度相关。
解脲脲原体感染除引起男性非淋性尿道炎、前列腺炎、附睾炎外，还被认为与男性不育相关，男性不育患者精液中，脲原体检出率高达66.6％。
检出率随精子数减少和精子活动力下降而升高。
有研究证明解脲脲原体引起不孕症的原因可能是：①吸附于精子表面，阻碍精子运动；②产生神经氨酸酶样物质，干扰卵子与精子的结合；③解脲脲原体与精子有共同抗原，刺激机体产生的抗体对精子造成损伤。
二荧光探针定量PCR方法检测UU-DNA的意义对UU感染的病原学诊断通常可用简便的培养法和免疫荧光抗体来检测，但阳性率偏低，而且费时。
培养法检测是利用脲原体能合成尿素酶分解尿素产生氨，使液体培养基pH 值增高，酚红指示剂变色。
一些非致病的脲原体或培养过程中的污染都可能导致假阳性的结果。
利用液体培养法检测解脲支原体的特异性分析
利用液体培养法检测解脲支原体的特异性分析摘要】目的探讨利用单相液体培养法培养解脲支原体的特异性。
方法分别采用液体培养法和固体培养法对215例非淋病性泌尿生殖道炎症患者进行了解脲支原体检测分析,以固体培养法作为对照，分析液体培养法的特异性。
结果采用液体培养法进行解脲支原体的检测，出现了59例假阳性标本，特异性仅为65.6%。
结论采用液体培养法进行解脲支原体的检测，特异性不高。
经常会出现假阳性。
只能作为临床实验室的初筛实验。
【关键词】解脲支原体液体培养法固体培养法解脲支原体是导致人体泌尿生殖系感染的主要病原体,可以引起非淋球菌性尿道炎、阴道炎、慢性前列腺炎。
解脲支原体还可以通过胎盘感染胎儿，引起自发性流产、死胎与低体重胎儿，并吸附于精子表面，阻碍精子与卵子结合，引起不孕[1,2]。
在我国此病发生率已逐年呈上升趋势。
实验室检查是诊断和发现解脲支原体的重要手段,而选择合适的检查方法对临床准确诊断具有重要意义。
其中利用常规的单相液体培养基，通过液体变色来完成检测占有相当大的比重。
为了了解这种方法的特异性，我们分别利用液体培养基和固体培养基对215例非淋病性泌尿生殖道炎症患者进行了解脲支原体培养。
现将分析结果报告如下。
1 材料与方法1.1病例来源：2006年9月至2009年9月对我院性病门诊就诊后被确诊为非淋病性泌尿生殖道炎症的患者215例,实验组采用液体培养基试验对解脲支原体进行培养检测。
对照组采用采用固体培养基试验对解脲支原体进行培养检测检测,两组患者其它方面均无差异，无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2试剂：液体培养基是由珠海市迪尔生物工程有限公司提供的支原体（Uu/Mh）分离培养药敏试剂盒。
固体培养基由上海第二医科大学生产。
1.3标本采集方法：标本采集前，患者应停止使用全身及局部抗生素1周以上。
男性患者禁排尿2h以上，用一次性无菌棉拭子由前尿道2～4cm处取分泌物；女性患者先清洁宫颈口分泌物，用一次性无菌棉拭子在宫颈管内1～2cm处取分泌物，拭子应在宫颈（或尿道）内旋转并至少停留20s以上，取出时不触及阴道壁。
荧光定量PCR检测宫颈分泌物中解脲支原体
荧光定量PCR检测宫颈分泌物中解脲支原体张宁;唐轶;李力;段云葵;齐倩【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2001(019)003【摘要】@@我们用荧光定量PCR检测宫颈分泌物中Ureaplasma urealyticum(解脲支原体，简称Uu)，结果如下。
rn1 材料和方法rn1.1 仪器 PE-5700荧光定量PCR仪，万分之一天平Chyo JK180。
rn1.2 试剂盒达安基因诊断中心产品。
rn1.3 方法rn1.3.1 标本来源培养法阳性的解脲支原体感染病人的宫颈分泌物41份。
rn1.3.2 棉拭子取样法将长8 cm棉拭子装入长10 cm的塑料离心管中，加热封口，经60Co照射灭菌。
在分析天平上称量每只管的重量，标于管上。
取样时，在管上端剪口，取出拭子，插入宫颈口捻转并停留数秒，取样后小心放回试管中，立即送检，称取该管重量。
将取样后总管重量减去取样前总管重量即为所取宫颈分泌物的重量。
加入1 ml生理盐水，震荡提取分泌物，分取定量体积(d)于1.5 ml塑料离心管中，10 000 r/min 离心10 min,弃上清液，加入50 μl裂解液，沸水裂解10 min，吸取2 μl于反应管中与标准曲线反应管一同按下列条件扩增:93℃ 2 min预变性，然后按93℃ 45 S、55℃ 120 S共40个循环。
反应结束后电脑按标准曲线计算待测样品反应管中每微升体积Uu的考贝数(Copy/μl)，最后按下列公式计算每克分泌物中含Uu的拷贝数(Copy/g):rnCopy/g=(Copy/μl×50 μl)/(g×d/1000)【总页数】1页(P179)【作者】张宁;唐轶;李力;段云葵;齐倩【作者单位】中国人民解放军第202医院全军优生优育中心实验室,;中国人民解放军第202医院全军优生优育中心实验室,;中国人民解放军第202医院全军优生优育中心实验室,;中国人民解放军第202医院全军优生优育中心实验室,;中国人民解放军第202医院全军优生优育中心实验室,【正文语种】中文【中图分类】R446.5【相关文献】1.荧光定量PCR检测宫颈分泌物中病原微生物样本采集方法研究 [J], 张宁;唐轶;等2.解脲支原体在1000例已婚女性宫颈分泌物中的检出情况和药敏情况分析 [J], 赵佳;莫璟娟;徐建阳;尚贤文3.PCR法宫颈分泌物沙眼衣原体、解脲支原体检测在女性不孕症患者检查中的应用 [J], 安爱平4.不孕症患者宫颈分泌物沙眼衣原体和解脲支原体的检测及临床意义 [J], 宋玉美5.宫颈糜烂患者宫颈分泌物中沙眼衣原体、解脲支原体感染和分泌型免疫球蛋白、干扰素-γ水平及意义 [J], 侯春霞;孟梦;郭利彩因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
应用固体与液体两种培养基检测支原体结果的比较
应用固体与液体两种培养基检测支原体结果的比较目前实验室用于检测泌尿生殖道解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)的方法主要有PCR法、培养法(液体、固体培养基)。
二合一液体培养基因具有快速且培养与药敏结果同时进行等特点而在临床广泛应用。
近来，有学者对液体培养基检测支原体的可信度提出质疑。
为了验证液体培养基的特异性，本研究采用临床标本拭子平行接种选择性固体培养基和液体培养基的方式，对两种方法检测结果进行了对比分析。
1 材料和方法1.1 材料1.1.1 试剂与仪器液体培养基：Uu和Mh分离、鉴定、药敏试剂盒(珠海丽珠试剂有限公司生产)。
固体培养基：Uu和Mh的选择性鉴定固体培养基(二合一培养基)带有CO2发生片(上海恩康生物科技有限公司生产提供)。
生产批号：060410,显微镜：日本奥林帕斯。
1.1.2 标本来源2006年5月至7月108例我院妇科和皮肤科门诊患者的泌尿生殖道标本拭子。
采集方法：男性患者用无菌棉球擦干尿道口后，用无菌棉拭子插入尿道口2～3厘米，轻轻旋转后取出；女性患者清除阴道口分泌物后，用无菌棉拭子插入宫颈口1～2厘米，轻轻旋转后取出。
用拭子先接种固体培养基然后用于液体培养基接种。
2方法2.1 接种方法先用拭子的一面“N”型划线接种固体培养基，然后立即进行液体培养基的接种。
均严格按照说明书进行，36℃培养。
2.2 结果判定方法液体培养基：分别于24至48小时观察液体培养基颜色由黄色变红色，严格按照结果判读表读取结果。
固体培养基：24小时后逐日观察培养基颜色的变化(黄色变为红色)，同时在显微镜下观察典型支原体菌落：Mh：煎蛋样菌落(100～300μm)，Uu：棕褐色颗粒、棕褐色菌线或棕褐色团块样菌落。
2.3 统计学方法Kappa检验(一致性检验)。
3 结果以显微镜下见到典型支原体生长菌落(如图所示)，结合生化反应确认Uu、Mh为“金标准”。
两种培养基支原体检测结果见附表。
108份标本液体培养基报告支原体阳性标本4l例，阳性率为37．96%；固体培养基检测的阳性标本37例，阳性率为34．26%。
解脲支原体几种临床检测方法的比较
分离法 +
荧光法
+
-
36 ( a)
5 ( b)
合计 41
剂器材部的产品 。试剂也由该公司提供 。
-
15 ( c)
30 ( d)
45
31计算 机 落 射 荧 光 显 微 镜 由 沈 阳 八 达 公 司 提 供 ,并使用相配 UU 荧光试剂 。
素影响 。而荧光染色法如果载玻片不洁净或者其它 因素污染标本 ,就会将污染颗粒或杂菌误染色荧光 绿 ,误认为是 UU。
使用 UUSM 单管培养基 ,与经典法相比 ,其符合 率高 ,二法结果无显著差异 ( PCR > 0. 05) ,说明单管 培养法 结 果 准 确 性 好 , 认 为 选 择 使 用 已 商 品 化 的 UUSM 作为培养基 ,效果不错 ,而且操作十分简便 ,结 果易判断 ,实验所需时间短 ,很适合基层医疗单位普 及开展 。
资 料 与 方 法
结
果
本文选择为多数学者公认的分离鉴定法作为金 标准 。
一 、经典分离鉴定法和荧光染色法检测结果及分 析 ,见表 1。
一 、一般资料 :采自本院妇科及泌尿科病人的宫
表 1 分离法与荧光法检验结果比较
颈分泌物及尿道分泌物标本共 86份 。 11解脲支原体选择性培养基 (UUSM )采用三明
腺炎 、流产 、产后热及新生儿低体重的重要原因之一 。 盖涂膜 ,在 37℃水浴箱中染色 20分钟 ,取出后用 PH
目前 ,泌尿生殖支原体感染的检测不仅是 STD 门诊 的常规项目 ,在泌尿科 、妇科 、妇幼保健和计划生育等 医疗单位已广泛进行监测和防治 。UU 的培养和鉴 定多采用以下几种方法 : 1. 经典的分离鉴定法 : 2. 简
PCR法和液体培养法检测解脲支原体结果分析
PCR法和液体培养法检测解脲支原体结果分析摘要：目的：比较聚合酶链反应（pcr）法和液体培养法在解脲支原体检测中的诊断价值和治愈判定价值。
方法：用聚合酶链反应（pcr）法和液体培养法对164例患者的泌尿生殖道分泌物进行检测解脲支原体。
结果：pcr法检测uu阳性71例，阳性率为43.3%，液体培养法阳性例数62例，阳性率为37.8%，pcr法阳性患者液体培养法有8例阴性，液体培养法阳性患者pcr法有2例阴性。
结论：pcr法检测解脲支原体，敏感性高，特异性强，并且简便、快速，适合门诊初查病人，液体培养法虽然敏感性比pcr法低，但能区别病原菌是否存活，且对指导临床用药有着不可替代的作用。
关键词：pcr法液体培养法解脲支原体【中图分类号】r4【文献标识码】a【文章编号】1671-8801（2012）11-0020-01支原体是泌尿生殖系统的正常寄生菌，属于条件致病菌，解脲支原体（uu）是支原体的一种，是引起泌尿生殖道非淋球菌性炎症中常见的病原菌之一[1]，可导致男女不育不孕、流产、死胎、女性生殖道炎症等一系列疾病。
在一般情况下，被感染者多数无明显临床症状，易被忽略，临床上的漏诊率和误诊率也相对较高。
常用检测uu的方法有液体培养法和pcr法，今对164例泌尿生殖道炎症患者同时采用pcr法和液体培养法进行检测，并对结果进行分析比较，报道如下。
1材料与方法1.1一般资料。
选择2012年6月我院门诊患者164例，其中男性26例，女性138例，年龄18-52岁。
用无菌棉拭子插入女性宫颈1.0-1.5cm或男性尿道2-3cm，转动10秒并停留数秒钟后将棉拭子取出密闭送检。
1.2仪器与试剂。
1.2.1pcr法。
仪器为达安基因股份有限公司生产的da7600全自动荧光定量pcr分析仪，试剂盒为达安基因股份有限公司的配套产品。
1.2.2液体培养法。
珠海浪峰生物技术有限公司生产的支原体培养、鉴定药敏试剂盒。
1.3方法。
1.3.1pcr法。
解脲-人型支原体分离培养与药敏实验分析
解脲/人型支原体分离培养与药敏实验分析目的：了解本地区解脲支原体耐药状况，指导临床合理用药。
方法：应用支原体微量培养及同步药敏试剂盒，检测解脲支原体及其药敏分析。
美满霉素、交沙霉素、克拉霉素三种抗生素敏感性高，不易产生耐药性，且耐药率变化不大；结论：临床治疗UU引起的非淋菌性尿道炎，本地区应推荐美满霉素、强力霉素、交沙霉素作为治疗解脲支原体的首选药物。
不论是UU单项感染或是UU+MH混合感染均产生多重耐药，支原体的耐药问题严重，治疗要根据药物敏感性报告用药。
提示：在进行治疗前做支原体药敏试验很有必要。
支原体（mycoplasma）是细胞外生存的最小微生物。
是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3～0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态，能在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。
它不同于细胞，也不同于病毒。
种类繁多、分布广泛、造成的危害相当大，涉及人、动物、植物及昆虫等多个领域，给人类健康和科研工作带来不利影响。
从人体分离的16种支原体中，5种对人有致病性，即肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、生殖支原体及发酵支原体。
脲解支原体属（ureaplasma）含脲解支原体等体、脲解支原体及人型支原体等对人有致病性。
肺炎支原体是呼吸道感染、肺炎的主要原因。
能引起人类泌尿生殖道感染的有解脲支原体（UU）、人型支原体（MH）、生殖道支原体等，其中最常见的是UU，约有30%～40%男性的非衣原体、非淋病性尿道炎是由UU所致；此外UU可通过胎盘感梁胎儿，引起早产、死胎、低体重胎儿和新生儿呼吸道感染。
由于不合理使用抗生素，支原体对常用抗生素耐药已非常普遍，对其进行培养及耐药性监测显得尤为重要。
解脲支原体（M.urealyticum）为支原体属中唯一的一个种，因生长需要尿素而得名。
菌落微小，直径仅有15～25um，须在低倍显微镜下观察，故旧称T株（tiny strain）。
三种检测方法对支原体检出率的对比及用药指导
多功能高倍显微分析系统 ， 对泌尿生殖道患者的分泌物标本进行支原体活体动态观察 、 分析、 定性。 B 组应用 解脲支原体（ UU） 核酸扩增荧光定量检测法对泌尿生殖道患者的分泌物标本进行支原体定性 、 定量分析。 C 组 应用支原体 IST 2 试剂盒进行 UU 培养基药敏分析。结果 A 组能在极短时间内（ 约 10 min） 快速、 准确地检测 阳性率为 54． 9% ； B 组亦能在较短时间内（ 约 5 h） 准确地检测出支原体， 阳性率为 61． 1% ， 但对实验 出支原体， C 组此法为推荐的检测支原体的金标法 ， 室有较高的要求， 技术的误差也容易有假阴性及假阳性结果 ， 检测时 间相对较长， 检出率相对较低， 阳性率为 47． 2% 。但因其有药敏记过， 对于临床用药有决定性的作用 。 结论 ， ， 医务工作应合理应用不同的检测方法 并根据药敏试验情况 指导临床及时、 合理、 规范用药， 以减少耐药菌株 的出现。 关键词：解脲支原体； 多功能超高倍显微镜； 核酸扩增（ PCR） 药敏试验 中图分类号： R518． 9 文献标识码： B 解脲支原体（ UU ） 作为人类致病微生物， 可引起一系列 泌尿生殖道感染性传播疾病 ， 其发病率呈逐年上升趋势 ， 已 越来越引起临床关注。 UU 不但能引起男性非淋性尿道炎 ，
［2 ］
。因此， 如何更快更准确第检测
A 组阳性率为 54． 9% ； B 组阳性率为 61． 1%显著性 率为 47． 2% ； A 组与 B 组、 （ P ＞ 0． 05 ） 。B 组与 C 组比较检出率差异有显著性 （ P ＜ 0． 05 ） ； 见附表。 附表
［1 ］ 与男性不育症亦有很大的关系 。 同时因感染众多及治疗 的不规范， 使国内不断出现多重耐药性的支原体菌株 ， 给临
解脲支原体(UU)核酸定量检测标准操作规程(PCR-荧光探针法)
解脲支原体（UU）核酸定量检测标准操作规程（PCR－荧光探针法）1.目的:规范解脲支原体（UU）核酸DNA（PCR－荧光探针法）检测操作流程，保证检测结果的准确性。
2.应用范围：解脲支原体（UU）荧光定量检测。
3.职责:3.1 文件编写：实验室技术员。
3.2 文件审核：实验室主管。
3.3 文件审批：实验室主任。
3.4 执行：PCR实验室所有工作人员。
4.参考文献：4.1 中山大学达安基因股份有限公司解脲脲原体（UU）核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒（PCR-荧光探针法）说明书。
4.2 中山大学达安基因股份有限公司DA7600核酸序列检测系统用户手册。
5. 内容：5.1 检测方法：PCR-荧光探针法5.2 实验原理：用一对解脲脲原体特异性引物和一条解脲脲原体特异性荧光探针，配以PCR反应液、耐热DNA聚合酶（Taq酶）、核苷酸单体（dNTPs）等成分，通过PCR体外扩增法，即高温变性、低温退火、适温延伸进行DNA扩增，并对PCR全过程进行实时监测，从而检测解脲脲原体（UU）DNA。
主要用于（UU）感染的辅助诊断及其疗效监测的标准。
5.3 性能参数：5.3.1 精密度：检测下限为5.0Χ102 copies。
5.3.2 线性范围：5.0×102～5.0×108 copies。
5.4 标本采集：由合作单位按照以下要求进行采集5.4.1 标本类型：泌尿生殖道分泌物等。
5.4.2 标本采集：5.4.2.1 泌尿生殖道分泌物：5.4.2.1.1 男性尿道分泌物：用细小棉拭子伸入尿道约2～4厘米，捻动拭子采集分泌物，将棉拭子置于无菌玻璃管中，密封送检（采集分泌物前2小时禁小便）。
5.4.2.1.2 女性生殖道分泌物：用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用宫颈刷或无菌棉拭子插入宫颈内，停5s后旋动宫颈刷或棉拭子采集宫颈分泌物，将宫颈刷或棉拭子置于无菌玻璃管中，密封送检。
5.4.2.1.3 女性尿道分泌物：用无菌生理盐水棉球洗净尿道口，再用无菌棉拭子插入尿道约2厘米，捻动拭子采集分泌物，将棉拭子置于无菌玻璃管中，密封送检。
泌尿生殖道解脲脲原体和人型支原体菌落培养最佳方法的探讨
泌尿生殖道解脲脲原体和人型支原体菌落培养最佳方法的探讨摘要】目的探讨泌尿生殖道解脲脲原体（Uu）、人型支原体（Mh）菌落培养的实用方法，通过生化鉴定和菌落的确认，提高Uu、Mh检验质量。
方法用拭子直接划线接种A7平板和培养液直接接种以及孵育后的培养液接种A7平板3种方法培养菌落，同时做生化鉴定。
结果以Uu、Mh生化鉴定阳性（排除细菌生长）作为比对依据。
用培养液直接接种A7平板生长的菌落阳性率最高，75例Uu生化阳性者，49例长出Uu菌落（26例不生长），阳性率 65.3%（49/75）；30例Mh生化阳性者，27例长出Mh菌落，阳性率 90.0%（27/30）。
对26例不生长Uu菌落的培养液，用DNA荧光定量法检测，全部>500copies，均为Uu阳性，说明Uu已死亡。
结论用接种生化药敏条后的余液直接接种A7平板，生化鉴定和观察菌落同步，操作简便易行，可同时验证生化鉴定的结果，优于另外2种菌落培养方法，可作为常规操作推广应用。
但是，提高UU菌落的阳性率仍需要进一步的探讨。
【关键词】解脲脲原体，人型支原体，泌尿生殖道；菌落培养，支原体；方法学【中图分类号】R874.2【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)08-0422-02 泌尿生殖道解脲脲原体（Uu）和人型支原体（Mh）为快速生长的支原体，它们的人工培养、鉴定已不困难[1]。
但是，生化鉴定仅以Uu分解尿素、Mh分解精氨酸为唯一特征，因泌尿生殖道中的一些细菌也分解上述物质，其结果的准确性遭到质疑[2-5]。
Uu、Mh菌落有独特的形态，若生化鉴定和菌落特征结合起来，就可以准确的鉴定出Uu、Mh。
目前，菌落培养缺少统一要求和操作标准，也未得到检验人员的重视，虽有相关报道[4]，但多数实验室不做菌落培养。
为此，我们在生化鉴定的同时，观察了标本直接划线接种A7平板以及培养液直接和孵育后再接种A7平板的3种方法培养菌落，对支原体菌落培养方法进行了探讨，现将结果报道如下。
什么是解脲支原体uu
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢什么是解脲支原体uu导语：解脲支原体是一种非常常见的性传播疾病，是尿道支原体的一部分，尽管许多的人对于解脲支原体都不是很熟悉，但是大部分的人认为，性病就是其解脲支原体是一种非常常见的性传播疾病，是尿道支原体的一部分，尽管许多的人对于解脲支原体都不是很熟悉，但是大部分的人认为，性病就是其主要的代名词，其实在外面的日常工作生活中，要想了解解脲支原体是否已经感染，就得了解是否是阳性，通过解脲支原体uu 来表示，那么什么是解脲支原体uu呢？1、一般来讲，对于UU解脲支原体的检测用的主要是UU-DNA检测的FQ-PCR试剂，其中荧光定量PCR法检测灵敏度有（10的2次方）拷贝/ml、有（10的4次方）拷贝/ml，参考值取决于仪器的精敏程度。
现在多数的单位的参考值都是小于500拷贝/ml或小于500copy/ml，这里我们就来打个比方。
2、如某患者检查结果显示为5.18E+6单位拷贝/ML，参考<500拷贝/ML；或检查支原体UU-DNA定量测定 3.09E+03copy/ml，参考值<500copy/ml。
这里面的“5.18E+6”就是5.18*10的六次方，这个值远远大于500参考值的，所以就说明UU解脲支原体是阳性。
“3.09E+03”也就是表示3.09*10的三次方，也是大于500参考值，所以也同样说明UU解脲支原体呈阳性。
3、当然，解脲支原体的检查还有另一种表示方法，如显示说菌量大于等于10000CCU/ML以及支原体培养24小时有生长，计数大于10E4。
这种情况下，参考值小于10000CCU/ML，若提示说是大于等于，那么就代表的有感染。
而出现“有生长”，说明的是有一定的传染性，这点可做了解。
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解脲脲原体的基因诊断
解脲脲原体的基因诊断
【基本信息】
[简要描述]
解脲脲原体(UU)因能分解尿素而得名，寄生于泌尿生殖道又称生殖器支原体(M．Genitalium, MG)，在一定条件下可致病并通过性传播。
[其他名称]
解脲支原体(MU)、人型支原体(MH)、生殖器支原体(MG)
【测定方法及参考值范围】
PCR：阴性。
【结果及临床意义】
[阳性]
◇疾病因素
·解脲脲原体感染
注释：检测到解脲脲原体DNA，则确诊解脲脲原体感染。
【样本准备与采集】
[样本类型]
尿道分泌物、宫颈分泌物、尿液
【注意事项】
·UU可引起非淋菌性尿道炎、阴道炎、前庭大腺炎、输卵管炎、宫颈炎、子宫内膜炎、男性不育症、前列腺炎、尿路结石等。
·孕妇生殖道带有解脲脲原体，可通过胎盘传染给胎儿。
解脲脲原体感染后，妊娠早期可引起受精卵脱落、妊娠终止；妊娠晚期可引起妊娠高血压综合征、羊水过多、早产、胎膜早破、死胎等；分娩时可引起新生儿呼吸道感染。
男性尿道解脲支原体检测两种取材方法比较
男性尿道解脲支原体检测两种取材方法比较
朱尚理;周丽萍
【期刊名称】《浙江医学》
【年(卷),期】1998(20)6
【摘要】解脲支原体(UU)是非淋菌性尿道炎的主要病原体之一。
目前国内外已将UU的检测作为非淋菌性尿道炎的诊断指标,实验室诊断最好的方法是分离培养。
其标本的采集十分重要,人们一直希望能以留取尿液标本来代替常规的侵入性取材方法。
我们通过采用两种方法对235例男性患者的尿道取材进行检测对比,现将结果报告如下。
【总页数】1页(P381)
【作者】朱尚理;周丽萍
【作者单位】温州医学院附二院皮肤性病科;温州医学院附二院皮肤性病科
【正文语种】中文
【中图分类】R696.04
【相关文献】
1.两种解脲支原体DNA荧光定量检测试剂的比较 [J], 黄承乐
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4.PCR法与培养法在检测解脲支原体中的两种方法比较 [J],
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解脲脲原体和人型支原体培养鉴定药敏试验操作程序
解脲脲原体和人型支原体培养鉴定药敏试验操作程序1.目的规范解脲脲原体和人型支原体培养鉴定药敏试验操作程序。
2.检测原理本试验适用于解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)和人型支原体(Mycoplasma hominis,Mh)的培养鉴定，半定量计数和药物敏感性试验。
试剂主要包括选择性培养基和试剂条。
培养基中含有蛋白胨、酵母抽提物、马血清、生长因子等营养物，并加有尿素、精氨酸底物及酚红指示剂，当有Uu和Mh生长时，尿素和精氨酸被分解生成的碱性物质引起PH值上升，培养基由黄色变成红色。
培养基内加有抑菌剂、杀菌剂，可抑制或杀灭泌尿生殖道中细菌和真菌的生长。
营养成分、抑菌剂、杀菌剂均采用冷冻干燥的方法保存，提高了试剂的敏感性、特异性和稳定性。
试剂条的各孔分别用于质控对照以及Uu和Mh的培养鉴定、半定量计数和药物敏感性试验。
3.主要组成成份A．液体培养基：含营养成分、底物、抑菌剂、杀菌剂、指示剂等成分。
B．试剂条：试剂条含有24个微孔，并且分为3个部分，从上至下，从左到右编号。
LC．石蜡油4.样本要求可用以下标本进行检测：4.1.尿液（尿后两个小时内不要采集标本）4.2.尿道分泌物4.3.前列腺液4.4.精液4.5.宫颈分泌物支原体对细胞表面有很强的亲和力，应尽可能收集到更多的细胞。
分泌物标本建议采用无菌涤纶拭子采集。
注意：取样后立即送检，室温保存不得超过2小时。
2℃-8℃不超过5小时。
5.检测方法5.1.将50ul培养基加入C¯空白孔中。
5.2.接种种分泌物标本：将无菌拭子采集的标本插入培养基中，挤压旋转拭子数次，使拭子中标本渗入，弃拭子。
5.3.接种液体标本：尿液经每分钟2000转离心10分钟，取沉渣约0.2ml；其他液体标本取0.2ml，用无菌滴管或定量加样器接种。
5.4.充分混匀接种了标本的液体培养基，用加样器分别准确量取50ul接种到试剂条余下各孔中（除C¯）。
解脲支原体（UU）核酸检测试剂盒（PCR荧光法）说明书
解脲支原体（UU）核酸检测试剂盒(PCR荧光法)说明书【产品名称】通用名：解脲支原体(UU)核酸检测试剂盒(PCR荧光法)英文名：Ureaplasma Urealyticum polymerase chain reaction (PCR) Fluorescence Diagnostic Kit【包装规格】32人份/盒【预期用途】可作为临床实验室对男性尿道拭子样本或女性宫颈拭子样本中解脲支原体核酸定性检测，为临床早期发现尿道炎或子宫颈炎及性病高危人群的筛查提供分子生物学上的参考依据。
适应症：由解脲支原体感染引起的尿道炎及宫颈炎【检验原理】本试剂盒选用解脲支原体(UU)保守基因片段设计特异引物及特异Taqman 探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段DNA模板发生特异性结合，在PCR延伸反应过程中，Taq酶的外切酶活性将5’端荧光基团从探针上切割下来，使之游离于反应体系中，从而脱离了3’端荧光淬灭基团的屏蔽，即能接受光刺激而发出可供仪器检测的荧光，从而实现在全封闭反应体系中对解脲支原体(UU)核酸的自动化检测。
【主要组成成份】注:不同批号试剂盒中各组份不可以互换【储存条件及有效期】试剂-20℃可保存12个月，未使用完的试剂继续冷冻保存不影响其稳定性，但试剂反复冻融不得超过三次。
【适用仪器】具有FAM荧光通道的ABI7000型荧光PCR扩增仪。
【样本要求】1. 标本：男性尿道拭子样本或女性宫颈拭子样本2. 采集容器：应当选用国家批准生产的一次性使用的男性拭子或女性拭子，拭子应当包括套管、棉签杆、塞子，棉签杆与塞子都应连接牢固。
3. 采集：样本采集具体方法请参考《微生物标本采集手册》一书。
【男性】先清洁尿道口，要求病人在采样前2小时不能排尿。
取尿道分泌物或细小棉拭子伸入尿道约2-4cm，略捻拭子取出分泌物（应略带黏膜）。
将分泌物或棉拭子置入无菌玻璃管，密闭送检。
【女性】先用棉/麻拭子将宫颈口过多的分泌物擦去，用扩阴器扩阴，再换取棉拭子伸入宫颈，通过上皮交界处，直到看不到拭子头，旋转10-20秒，取出拭子，将拭子置入无菌玻璃管中，密闭送检。
不同取材对解脲支原体培养结果的影响
不同取材对解脲支原体培养结果的影响解脲脲原体Uu寄居于人泌尿生殖道，偶可自呼吸道分离出。
主要传播途经为性接触传播，和母婴传播。
Uu所致疾病最常见的是非淋菌性尿道炎，据报道，有30%—40%的非淋菌性尿道炎由Uu所致。
本文采用3种不同标本采集方法对男性病人进行Uu培养，结果报告如下： 1 材料与方法1.1所用材料均为珠海黑马公司生产的支原体培养加药敏试剂盒。
1.2临床资料门诊男性不育症，前列腺炎及淋病患者217例，年龄20―50岁。
临床表现为不育，尿道刺激，个别有尿道口分泌物。
.1.3取材与方法将217例病人随机分为3组，分别用3种取材方取材。
方法1：病人排尿后，取胸膝卧位，按常规方法行前列腺按摩出前列腺液于无菌试管中，取200－300ul培养。
方法2：病人禁欲3d,手淫方法采集一次射精全部精液于无菌试管，取200―300ul培养。
方法3：病人取样前致少1h不排尿，取中段尿10ml于无菌试管中，3000转离心5分钟，取沉渣培养。
2 结果见表1:表1 3种取材方法培养结果比较结果表明，方法1的阳性检出率明显高于方法2和方法3。
方法2和法3的阳性率无明显差异。
3 讨论本文分别用3种取材方法对男性病人进行Uu培养，总阳性率为24.88%，表明男性不育病人，前列腺炎及淋病性尿道炎患者中Uu感染率较高，并呈逐年增长趋势。
因此对以上病人进行Uu培养十分有必要。
81例全血采集中血流不畅的分析及护理对策刘颖（江苏省无锡市红十字中心血站体采科 214021）献血的采血过程中必须保持通畅才能保证血液的质量[1]，同时，当血液流速每200ml超过6min，容易引起献血者紧张而发生献血反应[2]。
因此，采血过程中需密切观察血流情况，防止血流中断、凝集，保证血液的质量及献血者的安全。
现将2011年我站全血采集中血流不畅81例进行回顾性分析及防范处理措施报告如下：1 一般资料2011年我站全血采集中血流不畅者81例，平均年龄24.5岁。
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临床对解脲支原体（uu）的检测方法
(一)分离培养方法
Uu在含95% 氮气和5%CO2 环境中生长良好。
其生长最适pH为5.5-6.5,最适温度为36℃-37℃。
Uu具有尿素酶，能分解尿素产氨，使含酚红指示剂的Uu液体培养基pH值上升，颜色由黄色变为红色。
再将液体培养物转种到Uu固体培养基上，能生长成具特征性油煎蛋样集落。
(1 )液体培养基：支原体肉汤培养基80mL，马血清或小牛血清10mL，酵母浸液10mL,
10 %尿素溶液0.5mL-1.5mL, 0.4%酚红溶液0.5mL,青霉素(使其在培养基中的浓度为
500U/mL-2000U/mL,)用1N HCl 调pH值至5.5-6.5, 用小试管分装后置冰箱中备用，每管1.5-2.0mL。
(2 ) 固体培养基：在100mL 支原体肉汤培养基中，加入琼脂1.2-1.4g, ,高压灭菌后冷却到50 ℃左右，逐一加入上述添加剂。
摇匀，倒入无菌平皿中，待凝固后，置冰箱中备用。
接种标本后，经孵育，若培养基发生由黄变红的颜色变化，透明无混浊(有别于某些细菌及真菌生长)则可初步判断为有支原体生长。
大多数Uu在24h内可获得阳性结果。
如果培养基发生颜色变化，但液体又有混浊，则应排除杂菌污染, 可用0.45μm滤膜过滤后，作再接种观察。
进一步诊断需将液体培养物接种到固体培养基上培养, 经Dienes法染色后在低倍显微镜下观察集落形态。
阴性结果最好观察５天。
Uu 在固体培养基上集落核心呈粗颗粒状,具极窄的边，有时呈油煎蛋样。
如用Dienes 法染色，集落为特异的蓝色。
一般细菌的菌落不着色，容易鉴别。
(二)代谢抑制试验
根据特异性抗体能阻止支原体的生长和代谢这一特性，可用病人血清进行代谢抑制试验。
在加有抗血清的培养基中，支原体的代谢受到抑制，从而阻止了培养基的颜色改变。
代谢抑制试验也可用于检测感染支原体患者血清抗体的滴度。
即将血清作10倍连续稀释后，滴入支原体培养液，并以不加血清的支原体试验管和不加支原体液的培养基管作对照。
经37℃培养，不加抗血清的培养管支原体应生长良好，培养基变成红色(Uu或Mh)，未加支原体液培养基管颜色不变。
未发生颜色变化的最高血清稀释度为代谢抑制试验的抗体滴度。
(三) 间接血凝试验
在一定条件下，抗体和相应抗原相遇，可形成抗原抗体复合物。
这种复合物分子团很小,不能形成肉眼可见的反应。
用经鞣酸处理的红细胞作载体，将抗原吸附在其表面，使红细胞致敏，待与相应的血清抗体相遇时，可出现肉眼可见的凝集现象。
(四)生长抑制试验
特异性抗体能阻止支原体的生长和代谢。
用直径为6mm-8mm的圆形灭菌滤纸片，以未稀释抗血清浸透后放入无菌平皿内，于４℃下干燥后待用。
吸取待检菌液0.5mL涂布于固体培养基上，置３7℃使琼脂表面稍干燥。
以无菌操作镊取抗血清纸片放于琼脂表面,培养4日-5日后,在低倍显微镜下观察滤纸片周围有无支原体生长。
若滤纸片周围无菌落生长，出现抑菌圈大于2mm者表示该支原体与抗血清系同种免疫原，小于2mm判为异种。
(五)分子生物学诊断方法
目前主要应用聚合酶链反应(PCR)法及DNA探针技术作诊断。
前者具有高度特异性和敏感性、且快速、简便。
但操作要求极为严格。
聚合酶链反应的原理是DNA片段扩增，其中支原体引物的选择是PCR检测技术中的关键。
1９９1年Willonghby 设计的引物来自脲酶基因。
Zheng等（1995）用MB抗原基因引物对所有14个血清型的Uu均显示良好的PCR扩增效果，其敏感性较Willonghby设计的脲酶基因引物更好。