一、免疫球蛋白的结构二、免疫球蛋白的异质性三、免疫球蛋白的功能四、各类免疫球蛋白的特性与功能五、人工
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3)IgA 单体:血清,双体:外分泌液
4)IgD 含量低、B细胞成熟标志
5)IgE 含量最低、亲细胞、超敏反应/寄生虫免疫
mIgM
mIgD
未成熟B细胞
成熟B细胞 活化或记忆B细胞
五、抗体的制备
1、多克隆抗体(polyclonal antibody,PcAb) 2、单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb) 3、基因工程抗体(engineering antibody)
1、主要功能
1)与相应抗原特异性结合:Fv 2)激活补体: 3)结合FcR:促吞噬(opsonization)
介导过敏 介导细胞毒(ADCC) 免疫调理 4)穿过胎盘和粘膜 5)调节免疫功能
2、各类抗体的特性与功能
1)IgG 四个亚类,分布广、血清含量最高、唯一能通过胎盘
2)IgM 五个单体J链连接,最早、可诊断宫内及近期感染
• 掌握免疫球蛋白的结构和主要生物学功能 • 熟悉免疫球蛋白异质性 • 熟悉单克隆抗体概念和特点 • 了解单克隆抗体制备、概念、特点
免疫球蛋白
一、免疫球蛋白的结构 二、免疫球蛋白的异质性 三、免疫球蛋白的功能 四、各类免疫球蛋白的特性与功能 五、人工制备抗体
一、基本概念
B细胞接受抗原刺激后增殖分化成浆细胞产生的糖蛋白 与相应抗原特异性结合 主要存在于血清中 又称免疫球蛋白 (Immunoglobulin) 分泌型 sIg、膜型 mIg
组成 针对不同抗原表位的抗体的混 针对单一表位,结构和组成高度
合物
均一,抗原特异性及同种型一致
应用 缺点
疾病的被动免疫治疗
广泛用于疾病诊断、特异性抗原 或蛋白的检测和鉴定、疾病的被 动免疫治疗和生物导向药物制备
特异性不高、易发生交叉反应, 人体应用后可导致人鼠抗体反应 不易大量制备
Humanization (Chimeric/Reshaped Antibody)
免疫球蛋白功能区结构示意图
3、蛋白酶的酶解 木瓜蛋白酶(papain):
Fab、 Fc
胃蛋白酶(pepsin): F(ab’)2 、pFc’
木瓜蛋白酶 (papain)
抗原结合片段(fragment of antigen binding,Fab)
可结晶片段(fragment crystallizable,Fc)
4、功能区(Domain)
1)Ig分子中由链内二硫键构成的致密立体球体(V/C/H) 2)b-sheet、b-barrel、immunoglobulin fold 3)CDRs(Hypervariable regions)、FRs(Framework regions)
免疫球蛋白的结构功能区
四、抗体的主要特性及生物学功能
轻链+VH、CH1 CH2和CH3
胃蛋白酶 (pepsin)
F(ab’)2 pFc’
2个F(ab)及铰链区 小片段
三、免疫球蛋白的类型及血清型
1、类型
类(Class): 重链C区抗原性
IgG、IgA、IgM、IgD、IgE
亚类(Subclass): 重链抗原性/二硫键数目位置
IgG1-4
型(Type): 轻链C区抗原性
利用DNA重组技术和基因 工程手段生产的抗体 包括人-鼠嵌合抗体、改型抗体、双特异性抗体、小分子抗体等
抗血清(多克隆抗体)的制备
多克隆抗体与单克隆抗体的比较
多克隆抗体
单克隆抗体
来源 动物免疫血清、恢复期病人血 多为鼠源性 清或免疫接种人群
特点 来源广泛、制备容易
纯度高、特异性强、效价高、少 或无血清交叉反应、制备成本低
。
二、免疫球蛋白的结构
1、基本结构 1)四肽链通过链间二硫键组成H2L2 重链:五类(isotype: a、g、m、d、e) 轻链:两型(k、l)
单体
2、三个功能区 可变区(Leabharlann Baiduariable region, VH/VL, Fv):结合抗原
VH和VL: 高变区 HVR-抗原结合部位-互补决定区CDR 骨架区 FR1-4 恒定区(Constant region, CH/CL) 绞链区(Hinge region)
k、l
亚型(Subtype): 轻链C区aa差异排列
l1~4
2、血清型
同种型(Isotype): C区决定,非遗传标志。 同种异型(Allotype):个体等位基因,遗传标志。 独特型(Idiotype, Id):Idiotope→Anti-Id
3、辅助结构
1)J链(Joining chain) 2)分泌片(Secretory piece,SP)
4)IgD 含量低、B细胞成熟标志
5)IgE 含量最低、亲细胞、超敏反应/寄生虫免疫
mIgM
mIgD
未成熟B细胞
成熟B细胞 活化或记忆B细胞
五、抗体的制备
1、多克隆抗体(polyclonal antibody,PcAb) 2、单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb) 3、基因工程抗体(engineering antibody)
1、主要功能
1)与相应抗原特异性结合:Fv 2)激活补体: 3)结合FcR:促吞噬(opsonization)
介导过敏 介导细胞毒(ADCC) 免疫调理 4)穿过胎盘和粘膜 5)调节免疫功能
2、各类抗体的特性与功能
1)IgG 四个亚类,分布广、血清含量最高、唯一能通过胎盘
2)IgM 五个单体J链连接,最早、可诊断宫内及近期感染
• 掌握免疫球蛋白的结构和主要生物学功能 • 熟悉免疫球蛋白异质性 • 熟悉单克隆抗体概念和特点 • 了解单克隆抗体制备、概念、特点
免疫球蛋白
一、免疫球蛋白的结构 二、免疫球蛋白的异质性 三、免疫球蛋白的功能 四、各类免疫球蛋白的特性与功能 五、人工制备抗体
一、基本概念
B细胞接受抗原刺激后增殖分化成浆细胞产生的糖蛋白 与相应抗原特异性结合 主要存在于血清中 又称免疫球蛋白 (Immunoglobulin) 分泌型 sIg、膜型 mIg
组成 针对不同抗原表位的抗体的混 针对单一表位,结构和组成高度
合物
均一,抗原特异性及同种型一致
应用 缺点
疾病的被动免疫治疗
广泛用于疾病诊断、特异性抗原 或蛋白的检测和鉴定、疾病的被 动免疫治疗和生物导向药物制备
特异性不高、易发生交叉反应, 人体应用后可导致人鼠抗体反应 不易大量制备
Humanization (Chimeric/Reshaped Antibody)
免疫球蛋白功能区结构示意图
3、蛋白酶的酶解 木瓜蛋白酶(papain):
Fab、 Fc
胃蛋白酶(pepsin): F(ab’)2 、pFc’
木瓜蛋白酶 (papain)
抗原结合片段(fragment of antigen binding,Fab)
可结晶片段(fragment crystallizable,Fc)
4、功能区(Domain)
1)Ig分子中由链内二硫键构成的致密立体球体(V/C/H) 2)b-sheet、b-barrel、immunoglobulin fold 3)CDRs(Hypervariable regions)、FRs(Framework regions)
免疫球蛋白的结构功能区
四、抗体的主要特性及生物学功能
轻链+VH、CH1 CH2和CH3
胃蛋白酶 (pepsin)
F(ab’)2 pFc’
2个F(ab)及铰链区 小片段
三、免疫球蛋白的类型及血清型
1、类型
类(Class): 重链C区抗原性
IgG、IgA、IgM、IgD、IgE
亚类(Subclass): 重链抗原性/二硫键数目位置
IgG1-4
型(Type): 轻链C区抗原性
利用DNA重组技术和基因 工程手段生产的抗体 包括人-鼠嵌合抗体、改型抗体、双特异性抗体、小分子抗体等
抗血清(多克隆抗体)的制备
多克隆抗体与单克隆抗体的比较
多克隆抗体
单克隆抗体
来源 动物免疫血清、恢复期病人血 多为鼠源性 清或免疫接种人群
特点 来源广泛、制备容易
纯度高、特异性强、效价高、少 或无血清交叉反应、制备成本低
。
二、免疫球蛋白的结构
1、基本结构 1)四肽链通过链间二硫键组成H2L2 重链:五类(isotype: a、g、m、d、e) 轻链:两型(k、l)
单体
2、三个功能区 可变区(Leabharlann Baiduariable region, VH/VL, Fv):结合抗原
VH和VL: 高变区 HVR-抗原结合部位-互补决定区CDR 骨架区 FR1-4 恒定区(Constant region, CH/CL) 绞链区(Hinge region)
k、l
亚型(Subtype): 轻链C区aa差异排列
l1~4
2、血清型
同种型(Isotype): C区决定,非遗传标志。 同种异型(Allotype):个体等位基因,遗传标志。 独特型(Idiotype, Id):Idiotope→Anti-Id
3、辅助结构
1)J链(Joining chain) 2)分泌片(Secretory piece,SP)