5逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析
种子引发对养分缺乏与非生物胁迫下水稻幼苗生长、离子平衡及氧化代谢的影响
种子引发对养分缺乏与非生物胁迫下水稻幼苗生长、离子平衡及氧化代谢的影响植物在生长过程中会遇到许多不同的非生物胁迫。
水稻作为维系着世界上半数以上人口生存的重要粮食作物,对非生物胁迫的忍耐机制组合和敏感性也会不同于其它作物。
尤其是在早期生长阶段的水稻对低温、干旱或盐胁迫会非常敏感。
在自然条件下,水稻通常会同时遇到多种不同的非生物逆境胁迫。
因此,对于多重逆境环境因素的调查研究具有重要的生态学意义。
水稻对多重逆境的反应具有独特性,因此不能简单地理解为其单个逆境因子下的反应叠加。
植物应对特定的胁迫条件需要能量和足够的资源。
然而,养分的限制也会制约着植物对逆境环境的适应过程。
种子引发是在控制条件下使种子缓慢吸水,为萌发提前准备的一种播前处理技术,可以促进种子萌发、提高幼苗活力和保障许多大田作物特别是在不利环境下的正常生长。
目前有关逆境环境下如何进行有效地种子引发处理的报道较少,但在考虑多重逆境胁迫因子方面鲜有报道。
因此,本文通过在人工气候箱进行了一系列的溶液培养试验,研究了不同非生物胁迫(低温、盐分、干旱、镉毒)与不同养分供应条件(完全养分、缺N、缺P 和缺K)交互作用下种子引发处理和非引发处理水稻的生理、生化及矿质营养响应机制。
本研究的假设理论是种子引发处理可能会通过调节代谢过程、调控产生渗透物质和次生代谢物、提高抗氧化防御系统以及维持植物正常养分状况来获得抵抗逆境环境的潜力。
得到的主要结果如下:(1)在18?C低温胁迫条件下会导致水稻出苗缓慢且不整齐,水稻幼苗生长衰弱,水稻体内生理代谢、淀粉代谢和呼吸速率的降低,同时会使脂质过氧化反应增强,水稻秧苗H2O2的积累量增加。
种子引发处理均能明显减轻低温胁迫伤害,其中以化学硒Se处理和水杨酸SA处理的效果更好。
在低温胁迫条件下种子引发处理能促进水稻种子发芽和幼苗生长,与其能够提高淀粉代谢和呼吸速率、维持膜结构完整性、促进代谢合成以及增强抗氧化物活性有关。
(2)在低温胁迫与缺N、缺P或缺K情况下,水稻幼苗的生长都会明显受到影响。
《植物生物学实验》逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析
《植物生物学实验》逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析植物生物学实验是通过一系列的实验操作和分析，来研究植物的生理、生态和分子生物学等方面的知识。
本实验主要通过逆境胁迫处理水稻幼苗，分析逆境胁迫对水稻幼苗生长和生理指标的影响。
实验材料和设备：1.水稻（水稻研究中心提供）；2.生理盐水（NaCl）、二氧化硫（SO2）处理液；3.导电仪、光合仪等生理分析仪器；4.显微镜、离心机等常规实验设备。
实验步骤：1.准备水稻幼苗：从生长良好的水稻幼苗中挑选均匀的幼苗作为实验材料。
2.处理逆境胁迫：将水稻幼苗分为3组，每组包含相同数量的幼苗。
第一组为对照组，用生理盐水处理；第二组为盐胁迫组，用不同浓度的NaCl溶液处理；第三组为二氧化硫胁迫组，用不同浓度的SO2气体处理。
将幼苗放置于适当的处理液或腔室中，进行逆境胁迫处理。
3.观察幼苗生长：每天记录幼苗的外观和生长情况，包括株高、根长、叶片颜色变化等。
4.分析生理指标：适当时间点采集幼苗组织，进行一系列的生理指标分析。
例如，测定叶片的相对含水量、叶绿素含量、叶绿素荧光参数、导电率等指标，来评估幼苗的耐逆性。
5.统计和分析数据：将采集到的数据进行统计和分析，比较不同处理组的差异性，探讨逆境胁迫对水稻幼苗生长和生理指标的影响。
实验结果分析：通过观察和分析数据，可以得出逆境胁迫对水稻幼苗生长和生理指标的影响。
在盐胁迫组中，幼苗的株高和根长可能显著减少，叶片可能出现褪绿现象，并且各项生理指标可能发生异常变化；而在二氧化硫胁迫组中，幼苗的生长可能受到抑制，且可能出现叶片黄化和脱落等症状。
实验结论：通过逆境胁迫处理水稻幼苗，可以发现逆境胁迫对水稻幼苗生长和生理指标有一定的负面影响。
这些实验结果有助于我们深入了解植物在逆境环境下的生理适应机制，为进一步的研究提供理论和实验基础。
总结：本实验通过逆境胁迫处理水稻幼苗，分析逆境胁迫对水稻幼苗生长和生理指标的影响。
在实验过程中，我们需要仔细观察和记录幼苗的生长情况，并进行相应的生理指标分析。
逆境胁迫对植物生理生化指标地影响
本科学生综合性实验报告学号姓名学院专业、班级实验课程名称植物生理学实验教师及职称开课学期 2012 至 2013 学年上学期填报时间 2012 年 12 月 15 日云南师范大学教务处编印逆境胁迫对植物生理生化指标的影响作者：（，云南昆明 650092）摘要：对植物产生危害的环境称为逆境，又称胁迫。
干旱是制约植物生长的主要逆境因素，以小麦幼苗在模拟干旱胁迫下，植株体内的生理生化指标会发生变化。
实验采用PEG处理小麦幼苗，对抗氧化酶；脯氨酸；谷胱甘肽；过氧化氢；可溶性糖；丙二醛在植物体内的含量变化进行了研究，实验通过分光光度计分别在不同的波长中测出吸光率，间接计算出其含量，而通过对正常条件下的和逆境胁迫下一定量小麦体内以上各种物质含量的对比，从而了解小麦体内生理生化指标发生的变化。
关键词：小麦（Triticum aestivumLinn）；干旱胁迫；生理生化1 引言干旱是自然界常见的逆境胁迫因素，而且干旱也是植物最容易受到的胁迫之一。
干旱不仅制约植物的生长发育与产量，也会引起植被结构与功能的时空变化。
因此植物对干旱胁迫的适应及机制一直是植物逆境适应策略研究的一个热点【1-3】作物抗旱性的研究方法有多种，适应能力进行了研究：植物对干旱胁迫的适应过程和受伤害程度与干旱胁迫的强度以及植物自身的抗性紧密联系，并从生化代谢、生理功能、形态适应、生长发育以及生物生产力等多种形式表现出来【1-5】。
土壤有效水分状况与植物之间的关系一直是植物生理生态学研究领域的热点问题。
大多数植物在短期或轻度土壤缺水情况下叶片水势下降，气孔关闭。
限制CO2 摄取和光合作用速率：长期严重干旱条件下可限制植物生长,引起形态结构发生变化。
甚至导致植物死亡【6】。
大多实验是在人工控制的干旱或人工模拟干旱条件下进行。
其主要方法是室外盆栽控制水分，苗期室内水培或砂培采用PEG渗透胁迫、人工控制的温室、气候室和培养箱等。
其中，PEG渗透胁迫法简单易行、条件容易控制、重复性好、试验周期短。
逆境胁迫对植物生理生化指标的影响讲解
本科学生综合性实验报告学号姓名学院专业、班级实验课程名称植物生理学实验教师及职称开课学期 2012 至 2013 学年上学期填报时间 2012 年 12 月 15 日云南师范大学教务处编印逆境胁迫对植物生理生化指标的影响作者：（，云南昆明 650092）摘要：对植物产生危害的环境称为逆境，又称胁迫。
干旱是制约植物生长的主要逆境因素，以小麦幼苗在模拟干旱胁迫下，植株体内的生理生化指标会发生变化。
实验采用PEG处理小麦幼苗，对抗氧化酶；脯氨酸；谷胱甘肽；过氧化氢；可溶性糖；丙二醛在植物体内的含量变化进行了研究，实验通过分光光度计分别在不同的波长中测出吸光率，间接计算出其含量，而通过对正常条件下的和逆境胁迫下一定量小麦体内以上各种物质含量的对比，从而了解小麦体内生理生化指标发生的变化。
关键词：小麦（Triticum aestivumLinn）；干旱胁迫；生理生化1 引言干旱是自然界常见的逆境胁迫因素，而且干旱也是植物最容易受到的胁迫之一。
干旱不仅制约植物的生长发育与产量，也会引起植被结构与功能的时空变化。
因此植物对干旱胁迫的适应及机制一直是植物逆境适应策略研究的一个热点【1-3】作物抗旱性的研究方法有多种，适应能力进行了研究：植物对干旱胁迫的适应过程和受伤害程度与干旱胁迫的强度以及植物自身的抗性紧密联系，并从生化代谢、生理功能、形态适应、生长发育以及生物生产力等多种形式表现出来【1-5】。
土壤有效水分状况与植物之间的关系一直是植物生理生态学研究领域的热点问题。
大多数植物在短期或轻度土壤缺水情况下叶片水势下降，气孔关闭。
限制CO2 摄取和光合作用速率：长期严重干旱条件下可限制植物生长,引起形态结构发生变化。
甚至导致植物死亡【6】。
大多实验是在人工控制的干旱或人工模拟干旱条件下进行。
其主要方法是室外盆栽控制水分，苗期室内水培或砂培采用PEG渗透胁迫、人工控制的温室、气候室和培养箱等。
其中，PEG渗透胁迫法简单易行、条件容易控制、重复性好、试验周期短。
水稻水分胁迫下不同环境胁迫周期的耐受性和回复能力
水稻水分胁迫下不同环境胁迫周期的耐受性和回复能力水稻是世界上最重要的粮食作物之一，被广泛种植并被广泛消费。
然而，水稻的生长和产量受到许多环境胁迫的影响，其中包括水分胁迫。
水分胁迫是指土壤中水分供应不足或不连续，导致植物减少水分吸收的现象。
这种胁迫对水稻的生长和发育产生不利影响，同时会导致水稻产量的减少。
然而，水稻在经过一段时间的水分胁迫之后，可以逐渐适应这种环境胁迫并恢复正常的生长和发育。
本文将探讨水稻在不同水分胁迫周期下的耐受性和回复能力。
水稻受水分胁迫的机制水稻的生长和发育需要大量的水分供应，因此，水分胁迫会对水稻产生严重的影响。
水分胁迫主要通过两个机制影响水稻：（1）降低叶片水势：在水分胁迫下，水稻根系吸收的水分减少，导致植物叶片的水势下降。
因此，水稻的叶片会出现弯曲、萎蔫、卷曲等现象。
（2）阻碍光合作用：在水分胁迫下，水稻的光合作用受到阻碍。
这是因为水稻叶片中的叶绿素分子无法正常地接收阳光，从而导致光合作用的效率降低。
水稻的蒸腾作用会受到抑制，进一步影响了植物的生长和发育。
耐受性和回复能力的影响因素水稻对水分胁迫的耐受性和回复能力受到多种因素的影响。
其中最主要的因素是胁迫周期。
当水稻遭受短期水分胁迫时，植物可以通过调节植物体内的物质和能量代谢来适应这种环境胁迫。
然而，当水稻遭受长期水分胁迫时，植物的代谢过程会遭受破坏，导致植物难以维持生长和发育所需的基本生理功能。
另一个影响因素是水稻的品种。
不同品种的水稻在耐受性和回复能力方面存在差异。
一些品种具有更强的适应力，可以在不适宜的环境下存活和产生更高的产量。
有些品种擅长在苛刻的环境中生长，并且可以更快地从环境胁迫中恢复。
另一个因素是水稻生长的阶段。
在生长的早期，水稻对水分胁迫的耐受性较高。
在生长的后期，耐受性下降，因此，当水稻处于同一胁迫期，生长阶段不同的植株可能表现出不同的耐受性。
耐受性和回复能力的提高途径有多种方法可以提高水稻对水分胁迫的耐受性和回复能力。
最新5逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析汇总
逆境胁迫对植物伤害的表现
形态变化：生长停滞，叶片萎蔫、卷曲、变黄、枯 死等。
生理生化：叶绿素含量减少，光合速率下降，呼吸 速率下降或升高，细胞膜系统破坏，酶活性紊乱等。
植物对逆境胁迫的适应
适应方式： 避逆性（stress avoidance）：植物会在时空上躲避开不良环境，
如沙漠植物只在雨季生长、阴生植物在树荫下生长等。 耐逆性（stress tolerance）：植物能够忍受逆境的作用。
实验二：用氮蓝四唑（NBT）法测定 植物超氧化物歧化酶（SOD）活力
一、实验目的
学习掌握用氮蓝四唑（NBT）法来测定植物超氧化物 歧化酶（superoxide dismutase, SOD）的活力。
了解不同盐浓度胁迫对水稻幼苗叶片SOD酶的影响。
二、实验原理
SOD发现： 1938年Marn等人首次从牛红血球中分离得到SOD。
K+，其中脯氨酸是最有效的。
4. 增加脱落酸(ABA)含量。
植物盐胁迫
盐胁迫（盐害）：土壤盐分过多对植物造成危害。通常土壤含 盐量达0.2-0.5%时就不利于植物生长，主要盐分：氯化钠、 硫酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠等。
盐土：氯化钠和硫酸钠较多的土壤。 碱土：碳酸钠和碳酸氢钠较多的土壤。 盐碱土：含盐量0.6-10%。
五、实验分组
四个人组成一个小组进行水稻幼苗盐胁迫反应实验。 每小组设置3个处理：1个对照和2个不同盐浓度，每
处理2个重复，共6份样品。 注意每杯要做好自己的标记、写上组别或姓名。
预
《植物生物学实验》
逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析
避盐：植物通过某种方式将细胞内盐分控制在伤害阈值之下，以避 免盐分过多对细胞伤害。 泌盐：植物通过茎、叶上专门分泌盐分的盐腺(或盐囊泡)将盐分分 泌到体外，减少或避免盐分对植物的伤害，如红树植物。 稀盐：植物通过吸收大量水分和加速生长，稀释细胞内盐分浓度， 并将盐分积累在茎叶的肉质化组织，维持体内盐分浓度的恒定，如 碱蓬。 拒盐：植物对盐有一定的选择性吸收，并能将盐分重新分配在植物 的安全部位，从而降低盐分对地上部的伤害，如芦苇、灯芯草。
(完整)模块四 逆境胁迫对植物生理生化指标的精品PPT资料精品PPT资料
根据生物膜透性
染料法
5%红墨水染色法 0.1%靛蓝、曙红等染色法
纸上荧光法：种皮的透性，十字花科
TTC法:作为H受体
根据呼吸作用
BTB法：外界pH的变化 I2-KI染色法：松、衫科种子
实验原理I
实验原理I
95 ml，加入酶液50 ml（空白调零用PBS取代），立即记时，摇匀，读出反应2 min时的A470。 实 验 原 理 VII 实 验 原 理 IV 3%三氯乙酸（TCA）和少许石英砂→充分研磨→用2 mL TCA洗研钵→5000 rpm离心10 min →量上清液体积。 1%Ti(SO4)2 [用20%(v/v) H2SO4配制]0.
目的
• 掌握逆境胁迫下一些植物生理指标的测定方法； • 了解逆境胁迫下植物生理生化指标的变化以及逆境伤害和
适应的原因。
流程图
玉米幼苗
盐胁迫 高温胁迫 水涝胁迫
干旱胁迫
重金属 胁迫
低温胁迫
发芽率
呼吸速率
抗氧化酶 (POD)
脯氨酸 （Pro）
GSH/ASA 可溶性糖
丙二醛 （MDA）
H2O2
实验原理I
另50个半粒进行曙红染色（室温染色10 min）→洗净后观察
根据两种方法的染色情况，分别计算发芽率。
实验方法I
品种为晴3或鲁玉13的玉米种子或小麦种子（购于西山种 子公司）→ 用0.1% HgCl2消毒10 min后 → 用蒸馏水漂洗干净 → 用蒸馏水于26℃下吸涨12 h → 播于垫有6层湿润滤纸的带盖 白磁盘（24cm×16cm）中 → 于26℃下暗萌发60 h →计算发芽 率（注意与前面结果比较） → 选取长势一致的玉米幼苗做干旱 5天、高温、盐渍或低温下处理（去除较矮或较高的玉米幼苗）。
水稻（Oryza+sativa+L.）碳酸酐酶基因在逆境胁迫下的功能解析
东北林业大学硕士学位论文水稻（Oryza sativa L.）碳酸酐酶基因在逆境胁迫下的功能解析姓名：***申请学位级别：硕士专业：园林植物与观赏园艺指导教师：***20060601２氯化钠和碳酸氢钠胁迫下水稻的生长特性图２—５Ｎａｃｌ和ＮａＩＩｃ０３胁迫对水稻叶和根重量的影响ｃｏｎｔｒｏｌ为水稻在水溶液中的生长量，其它分别为水稻叶和根在２０一８０ｍＭＮａｃｌ和ＮａＨｃ０３处理时生长量（５０棵幼苗的总重量）。
ｃ盱酏ｔｓ∞ｔｈｅｗｅｉｇｂｔｏｆｆｉｃｅｌ髓ｆ卸ｄｒ∞ＬＦｉｇｕｒｃ２—５ｓａｌｔｓ１ｈｅｓ∞ｄｌｊｎｇｓｗｅ愆ｃｕｌ缸ｌｒｃ证Ⅱｌｅ∞ｈ垢彻ｏｆＨ２０（ｃ蛐舡Ｄ１）ａｎｄ虮啦ｃｄｗｉ血ＮａＣｌ锄ｄＮａＨｃ０３舫ｍ２０ｍＭｔ０８０ｍＭ．Ｔｈｅｗｅｉｇｈｔｏｆｌｅａｖ嚣眦ｄｒ００ｔｓｗ哪ｍｅ船Ｉ矾ｄａｆｂ盯ｌｌｄａｙｓ（１ｂｅｗｅｉｇｈｔｏｆ６ｆｌｙｓｃｃｄｌ吣）．２＿２＿２氯化钠和碳酸氢钠胁迫在稳定ｐＨ值条件下对水稻生长的影响在盐碱化土壤中盐离子浓度较高的情况下，除了造成水势降低对植物产生水分胁迫外，同时对植物还可以产生离子胁迫，首先破坏细胞的离子平衡，干扰离子代谢。
其次，细胞中离子浓度增高以后，对植物细胞会产生毒害作用，抑制酶活性，干扰植物的正常代谢，使植物中毒。
对于ＮａＣｌ胁迫而言，虽然Ｃｒ是植物的必需元素，Ｎａ＋也是Ｃ４植物的矿质养分，但它们的浓度超过其必需范围以后就会引起伤害。
而对于ＮａＨＣ０３和Ｎａ２Ｃ０３胁迫而言，不仅提供了高浓度的Ｎａ＋而且还伴随着由于水解引起的高ｐＨ值，并且大量的ＨＣ０３－和Ｃ０３２。
也可能对植物的生长产生有害的影响。
实验中为了证实过高浓度的Ｈｃ０３‘对植物的生长有影响，我们使用由磷酸盐配制的缓冲溶液为植物生长提供一个较高、较稳定的ｐＨ值环境，实验结果如图Ｆ远．２．６，２．７所示。
３水稻ＣＡ基因与逆境关系的研究图３一ｌｐＢｎ２１一ＣＡ重组质粒的结构图Ｓｎｕｃｔｕ∞ｏｆｔｈｅ—ｘⅪ啪曲ｉＩ啪ｔｐｌ姗ｉｄｐＢｌｌ２ｌ·ＣＡＦｉｇｕ∞３－ｌ３．１．２．７植物表达载体的构建１．ｐＢＩｌ２１．ＣＡ二元植物表达载体的构建：上游引物：５’．ＧＧＡＴＣＣＡＣＡＡＴＧＴＣＧＡＣＣＧＣＣＧＣＣ．３’（下划线为肋聊ＨＩ的酶切位点），下游引物：５’．ＣＣＣＧＧＧＧＧＡＣＧＧＡＣＧＧＴＣＧＧＡ朋ｒＩ’．３’（下划线为．Ｓ珈口Ｉ的酶切位点），将扩增的ＰＣＲ片段连接到ｐＭＤ．１８．Ｔ载体上形成ｐＴ－Ｃ么质粒。
《植物生物学实验》逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析
《植物生物学实验》逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析植物生物学实验是研究植物的各个方面的生理和生态特性的实验。
本实验主要研究逆境胁迫对水稻幼苗的影响及其生理指标分析。
一、实验目的1.了解逆境胁迫对水稻幼苗生长发育的影响；2.比较正常生长条件下和逆境胁迫条件下水稻幼苗的生理指标差异。
二、实验材料和方法1.材料-水稻种子；-培养基；-高温胁迫设备；-蚕豆细菌物质（ABA）；-叶绿素测定试剂盒；-盐溶液。
2.方法1)水稻种子发芽：将水稻种子在培养皿中用纱布覆盖并加入适量的蒸馏水，放置于暗处，保持湿润，等待种子发芽；2)分别将发芽的水稻种子均匀撒在含有培养基的培养皿中；3)正常生长条件下：将培养皿放置在温度适宜、光照强度合适的环境下进行培养；4)逆境胁迫条件下：在高温胁迫设备中将培养皿放置在高温胁迫条件下进行培养；5)取出生长一定时间后的水稻幼苗，测量其生长指标，包括根长、茎长、叶片数量等；6)取幼苗叶片进行叶绿素含量测定：将若干鲜叶片取出，放入离心管中，加入适量乙醇，用电子天平称量叶片重量，并记录下来；7)使用叶绿素测定试剂盒按照说明书进行测定，并记录下结果；8)构建高盐胁迫实验组：将一部分水稻幼苗放入含有一定浓度盐溶液的培养皿中，对比正常生长条件下的水稻幼苗。
三、预期结果及讨论1.高温胁迫对水稻幼苗生长发育的影响：预期结果：高温胁迫条件下，水稻幼苗的生长速度将减慢，叶片数量明显减少。
讨论：高温胁迫会破坏水稻幼苗的细胞结构，导致生长发育受到抑制。
温度过高会影响光合作用，导致光合产物减少，从而影响生长速度。
2.叶绿素含量测定结果：预期结果：高温胁迫条件下，水稻幼苗叶绿素含量将下降。
讨论：高温胁迫会破坏叶绿素分子结构，降低光合作用的效率，从而导致叶绿素含量下降。
3.盐胁迫对水稻幼苗生长发育的影响：预期结果：高盐胁迫条件下，水稻幼苗的根系生长受到抑制，茎长也将减慢。
讨论：高盐浓度会破坏水稻幼苗的细胞结构，导致水分和营养的吸收受到限制，从而影响生长发育。
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五、实验分组
四个人组成一个小组进行水稻幼苗盐胁迫反 应实验。
每小组设置3个处理：1个对照和2个不同盐浓 度，每处理2个重复，共6份样品。
注预意习每下杯周要实做验好：自应己用的氮标蓝记四、唑写（上NB组T别）或法姓测 名定。植物超氧化物歧化酶（SOD）的活力。
理指标分析
实验二：用氮蓝四唑 （NBT）法测定
代谢破坏：叶绿体解体、光合速率下降；蛋白质合成受抑制、 分解加强，产生有毒物质，对细胞产生毒害。
膜透性改变：高浓度 NaCl 可置换细胞膜结合Ca2 +、K +，膜 结构破坏、功能改变，细胞内K+ 、有机质等外渗。
三、实验试剂与材料
➢ 试剂：氯化钠 ➢ 主要仪器与器皿：电子天平，低温冰箱，烧杯，
容量瓶，量筒，PE手套等。 ➢ 材料：水稻幼苗 ➢ 胁迫方式：盐胁迫，配制浓度0~0.3mol/L。
四、实验步骤
1. 自己设计配制2个不同盐浓度的NaCl溶液并设置对照(CK)。 2. 挑选生长整齐一致的水稻秧苗60-90株，然后随机取10-15株
于1个烧杯中，观测记载描述盐胁迫处理前各杯水稻秧苗的农 艺形态性状(如苗高、叶片颜色、叶片数等)。 3. 各杯分别加入不同浓度NaCl溶液50ml左右（原则：根系要浸 入溶液中），然后放置在实验架上进行盐胁迫处理。 4. 处理12-24 h后(具体应视情况而定)，当高盐度处理的秧苗叶 片开始出现卷曲时，观测记载处理后各杯秧苗农艺形态性状 的变化，然后将各杯的秧苗叶片分别剪下、随机称取少量叶 片0.2-0.5g，放入PE手套中并做好标记，置于冰箱冷冻保存备
若盐胁迫强度较小，除盐后，植物生长可以恢复； 若盐胁迫强度较大，除盐后，植物生长不可恢复
植物对盐胁迫的适应
水稻抗旱抗潮逆境生理机制研究与分子遗传育种策略研究
水稻抗旱抗潮逆境生理机制研究与分子遗传育种策略研究水稻是世界上最重要的粮食作物之一，但受气候变化等因素的影响，水稻的生产受到了严重的影响。
其中，干旱和富水是影响稻米产量和质量的最主要因素之一。
因此，对水稻的抗旱抗潮逆境生理机制研究和分子遗传育种策略研究至关重要。
一、水稻抗旱逆境生理机制研究1.1 水稻抗旱特性水稻的生长需要满足一定的水分条件。
当水分不足时，水稻会出现生长停滞、叶片发黄、减少叶面积等现象。
而具有较强抗旱能力的水稻则能够在干旱情况下保持一定的生长和收获。
因此，了解水稻的抗旱特性是进行抗旱逆境生理机制研究的前提。
1.2 水稻抗旱逆境生理机制在干旱逆境下，水稻的生理机制发生了很大的改变，主要表现在以下几个方面：(1) 保持水分稳定：水稻在干旱环境下，通过调节根系结构，延长根系和减少蒸腾等方式来减少水分的丢失，从而保持水分稳定。
(2) 维持细胞壁水分：在干旱逆境下，水稻细胞壁的水分会受到影响，导致细胞壁的脱水，从而影响细胞的正常代谢。
在这种情况下，水稻会通过积累一定量的可溶性糖来维持细胞壁的水分。
(3) 增强抗氧化能力：在干旱逆境下，水稻会过度产生自由基等造成氧化伤害的物质，从而影响其正常的代谢活动。
而具有较强抗氧化能力的水稻则能够抑制氧化反应，保护细胞膜的完整性和稳定性。
这些逆境适应的机制，都是水稻在干旱逆境下保持正常生长和收获的重要保障。
二、水稻抗潮逆境生理机制研究2.1 水稻抗潮特性除了干旱逆境，富水也是影响水稻生长和产量的重要因素之一。
在大雨或者水浸的环境中，水稻的生长受到了阻碍，出现了气温，缺氧致死等现象。
因此，了解水稻的抗潮特性是进行抗潮逆境生理机制研究的前提。
2.2 水稻抗潮逆境生理机制有研究表明，水稻在面对富水逆境时，会通过以下逆境适应机制来保持正常的代谢和生长：(1) 防止积水：在大雨或者水浸的环境中，水分的积聚会导致水稻植株的生长受阻。
因此，水稻会通过调节根系结构和减少叶面积等方式来防止水分的积聚。
低温胁迫下水稻幼苗抗寒生理指标分析
低温胁迫下水稻幼苗抗寒生理指标分析作者：李进来源：《安徽农学通报》2014年第12期摘要：以龙稻5、龙稻13、中龙香粳1号和东农420为试验材料，测定了低温胁迫后其幼苗叶片中叶绿素、脯氨酸、丙二醛和电导率的变化。
结果表明：低温胁迫后，叶绿素含量与对照相比均呈下降趋势，脯氨酸、丙二醛和电导率3个生理指标与对照相比均呈上升趋势，且不同品种的水稻各个指标的含量变化不同。
低温胁迫对实验材料影响较大，龙稻5耐低温胁迫的能力较强。
关键词：水稻；低温胁迫；生理指标中图分类号 S162.5 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2014）12-21-03Abstract：With Longdao No.5，Longdao No.13，Zhonglong Fragrant Japonica No.1 and Dongnong No.420 as the experiment rice material，the effects of chilling stress on the physiological index such as Chlorophyll，Proline，Malondialdehyde（MDA）and Conductivity Content in seedling leaves were studied. The results showed that： Compared to the control，chlorophyll content declined after chilling stress. While the physiological index such as Proline，MDA and Conductivity Content increased compare to the control. The content of different physiological index was varied in the rice varieties. Chilling stress has a great influence on the experimental materials and the Longdao No.5 rice has great Chill-resistance ability.Key words：Rice；Chilling stress；Physiological index黑龙江地处寒温带，低温发生频繁具有一定的群发性和周期性。
低温胁迫下水稻幼苗抗寒生理指标分析
低温胁迫下水稻幼苗抗寒生理指标分析李进【摘要】With Longdao No.5,Longdao No.13,Zhonglong Fragrant Japonica No.1 and Dongnong No.420 as the experiment rice material,the effects of chilling stress on the physiological index such as Chlorophyll,Proline,Malondialdehyde(MDA)and Conductivity Content in seedling leaves were studied. The results showed that: Compared to the control,chlorophyll content declined after chilling stress. While the physiologi-cal index such as Proline,MDA and Conductivity Content increased compare to the control. The content of different physiological index was varied in the rice varieties. Chilling stress has a great influence on the ex-perimental materials and the Longdao No.5 rice has great Chill-resistance ability.%以龙稻5、龙稻13、中龙香粳1号和东农420为试验材料，测定了低温胁迫后其幼苗叶片中叶绿素、脯氨酸、丙二醛和电导率的变化。
结果表明：低温胁迫后，叶绿素含量与对照相比均呈下降趋势，脯氨酸、丙二醛和电导率3个生理指标与对照相比均呈上升趋势，且不同品种的水稻各个指标的含量变化不同。
逆境胁迫对植物生理生化指标的影响1
1.1 供应材料。
小麦种子；主要试剂：0.1% HgCl2，TTC，3%磺基水杨酸（SSA），冰乙酸，茚三酮，PBS(pH=7.8) ，0.6%TBA（用0.6% TCA配制）， PBS (pH=6.8，内含1mMHA)，0.1%Ti(SO4)2[用20%(v/v) H2SO4配制] ，PBS, （pH=5.8,内含0.１mmol/ LEDTA, 1%PVP）， POD反应混合液（10 mmol/L愈创木酚，5 mmol/L H2O 2 ,用PBS溶解），PPO反应混合液（ 20 mmol/L邻苯二酚，用PBS溶解）5%三氯乙酸，PBS (pH=7.7) ，4 mM DTNB (用0.1M pH=6.8PBS现配)。
主要仪器：分光光度仪，离心机，试管，微量加样器，研钵等。
1.21 Pro脯氨酸是水溶性最大的氨基酸，具有很强的水合能力，其水溶液具有很高的水势。
脯氨酸的疏水端可和蛋白质结合，亲水端可与水分子结合，蛋白质可借助脯氨酸束缚更多的水，从而防止渗透胁迫条件下蛋白质的脱水变性。
因此脯氨酸在植物的渗透调节中起重要作用，而且即使在含水量很低的细胞内，脯氨酸溶液仍能提供足够的自由水，以维持正常的生命活动。
正常情况下，植物体内脯氨酸含量并不高，但遭受干旱等胁迫时体内的脯氨酸含量明显增加，它在一定程度上反映植物受环境干旱胁迫的情况，以及植物对水分和盐分胁迫的忍耐及抵抗能力。
1.22 MDA植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛（MDA）是膜脂过氧化的最终分解产物，从膜上产生的位置释放出后，与蛋白质、核酸起反应修饰其特征；使纤维素分子间的桥键松驰，或抑制蛋白质的合成。
MDA的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害，它在一定程度上也反映了植物受环境干旱胁迫的情况。
1.23 抗氧化酶植物体内存在着一套负责清除活性氧所产生的抗氧化系统，在植物正常生长情况下，它使活性氧的产生和清除处于动态平衡状态，在逆境诸如干旱胁迫下，这种平衡被打破。
逆境胁迫对植物生理生化指标的影响
本科学生综合性实验报告学号：124120469 姓名：朱曦鉴学院：生命科学学院专业、班级：12级生物技术实验课程名称：干旱对禾本科植物玉米和燕麦种子活性和小麦幼苗生理生化指标的影响教师：刘娴开课学期：2014 至2015 学年上学期云南师范大学教务处编印干旱对禾本科植物玉米和燕麦种子活性和小麦幼苗生理生化指标的影响摘要：逆境条件如干旱，高温，低温，盐碱等环境因子，能够影响植物生理生化过程中的各种细胞的活性，通透性，DNA的甲基化，基因的表达酶的合成及活性，细胞内甾类，酸脂类及植物激素的活性等方面，从而影响植物的整个生理生化过程。
对不同植物逆境胁迫生理生化指标的研究，对该物种在农业上的引种，驯化，改良及生产过程的中的管理都具有指导意义。
本课题通过对干旱和正常条件下玉米与燕麦种子胚的活性的研究及小麦幼苗叶片中脯氨酸，MDA，过氧化氢，抗氧化酶，GSH，ASA含量的测定，以探究干旱条件对小麦幼苗的生理影响。
关键词：逆境胁迫干旱小麦燕麦植物常遭受的有害影响之一是缺水。
当植物耗水大于吸水时，组织内水分亏缺。
过度水分亏缺的现象叫干旱[张会,植物干旱逆境胁迫研究综述]。
小麦为旱地作物，在我国南北方均有种植，是重要粮食作物。
干旱对于小麦来说是主要的逆境胁迫因子。
干旱缺水会对小麦的细胞膜通透性，细胞形态，酶活性，光合作用，渗透作用，细胞内外环境的离子浓度及胞间信号传导产生影响。
干旱导致的缺水能够破环细胞膜的结构，使膜蛋白流失，细胞质溶胶和会失活甚至完全变性，有研究表明生物自由基是伤害细胞膜系统的主要原因，而水分胁迫造成的膜系统的伤害就是细胞内氧气的产生与清除的不平衡引起的，同时导致细胞质外渗引起质膜透性(PMP)上升[陈洪，2000]。
SOD、CAT 和 POD三种酶系统协调一致，使得植物自由基维持在较低水平，防止自由基对植物细胞的伤害[孙国荣等，2003]所以，干旱情况下以上酶系的几种重要酶含量会上升。
毕会涛等研究表明，在干旱胁迫下灰枣 SOD、 CAT、 POD活性升高，超出忍受范围后降低，细胞膜受到伤害，通透性、膜脂过氧化产物丙二醛含量均有所增加。
水稻逆境胁迫下的生理响应及适应机制研究
水稻逆境胁迫下的生理响应及适应机制研究水稻作为全球重要的粮食作物之一，广泛种植在许多国家和地区。
然而，由于气候和环境的变化，水稻面临着来自逆境胁迫的挑战。
逆境胁迫指的是水稻生长和发育过程中受到的各种压力，如干旱、高温、盐碱地等。
这些逆境胁迫对水稻的正常生理功能和产量产生了负面影响，因此，深入研究水稻逆境胁迫下的生理响应及适应机制显得尤为重要。
一、水稻逆境胁迫下的生理响应1. 干旱胁迫下的生理响应干旱是水稻生长中最常见的逆境胁迫之一。
在干旱条件下，水稻植株会出现减少气孔开放、减少叶绿素含量、降低光合作用速率等生理现象。
此外，干旱还会引发植物细胞内水分丧失和活性氧化物的积累，导致细胞膜的损伤和氧化应激的发生。
2. 高温胁迫下的生理响应高温对水稻的生长和发育也具有显著影响。
在高温条件下，水稻植株会出现叶片卷曲、表皮脱落、细胞膜的液态晶体相变等现象。
高温还会增加植物呼吸速率，导致能量代谢异常和细胞内ROS（活性氧化物）的积累，从而引发细胞质液泡的破裂和细胞结构的受损。
3. 盐碱胁迫下的生理响应盐碱逆境对水稻的影响与干旱和温度有许多相似之处。
在盐碱地上生长的水稻植株会出现水分胁迫、养分不平衡等现象。
高盐环境会干扰水稻的渗透调节和离子平衡，并增加植物细胞内钠离子和氯离子的含量，导致细胞膜的稳定性下降。
二、水稻逆境胁迫下的适应机制1. 调控基因表达水稻在逆境胁迫下会通过调控基因表达来适应环境的变化。
一些转录因子和信号分子参与了逆境应答过程中的基因调控，如DREB、SNAC、ABRE等转录因子以及激素信号分子抗氧化物和保护性酶的合成。
2. 激活信号传递途径适应逆境胁迫的水稻植株会激活一系列信号传递途径，如MAPK（丝裂原激活蛋白激酶）、Ca2+信号通路和ABA（脱落酸）信号通路。
这些信号通路在细胞内启动一系列反应，参与了逆境胁迫下的适应机制。
3. 产生保护性物质水稻在逆境胁迫下能够产生一些保护性物质，如脯氨酸、抗坏血酸、多酚等，以抵抗逆境胁迫引起的氧化损伤。
5逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析
5逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析逆境和胁迫环境对水稻幼苗的生理指标有一定的影响。
本文将从逆境胁迫的定义、逆境胁迫对水稻幼苗的影响以及水稻幼苗的生理指标分析三个方面进行探讨。
首先，逆境和胁迫环境指的是与生物体自身生理功能发生冲突或者超出其耐受极限的外界环境条件。
逆境胁迫环境中的高温、低温、干旱、盐碱等因素会对水稻幼苗的生长发育产生重要影响。
例如，高温会导致水稻幼苗受热休克，并影响光合作用以及营养物质的合成和运输，从而降低生物体的生长速度。
低温则会抑制水稻幼苗的生长，降低光合效率，影响营养物质的吸收和代谢。
干旱会导致水稻幼苗的渗透调节能力下降，进而引发脱水现象，影响光合作用和碳水化合物代谢。
盐碱环境会造成水稻幼苗的根系受限，抑制气体交换和水分吸收，影响生长发育。
其次，逆境胁迫对水稻幼苗的影响可以通过分析生理指标来进行评估。
其中，包括叶绿素含量、叶片相对含水量、根系活力、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（POD）活性等指标。
叶绿素是水稻幼苗的主要光合色素，其含量的变化可以反映光合作用的活性。
叶片相对含水量能够反映水稻幼苗对干旱和胁迫的耐受性。
根系活力是水稻幼苗适应根系对逆境胁迫的适应能力的重要指标。
SOD和POD是水稻幼苗抗氧化系统中的重要酶，能够清除自由基，维持细胞内稳定环境。
最后，通过对水稻幼苗生理指标的分析可以了解逆境胁迫对水稻幼苗的影响程度。
例如，逆境胁迫会使水稻幼苗叶绿素含量下降，说明光合作用受到抑制；叶片相对含水量降低，说明水分胁迫对水稻幼苗的影响较大；根系活力降低，说明逆境环境对水稻幼苗的根系发育和功能产生了不利影响；SOD和POD活性的变化能够反映水稻幼苗的抗氧化能力。
综上所述，逆境胁迫环境对水稻幼苗的生理指标有一定的影响。
通过对这些指标的分析，可以评估逆境胁迫对水稻幼苗生长和发育的影响程度，并为后续的逆境胁迫抗性育种提供科学依据。
高温胁迫下水稻幼苗几个相关生理指标的变化
高温胁迫下水稻幼苗几个相关生理指标的变化黄显波;严寒;胡建林;田志宏【摘要】以谷优1292杂交籼稻为供试材料,研究了38 ℃的高温胁迫对水稻幼苗的相关生理指标的影响.结果表明,随胁迫时间(0、1、3、5、7 d)的延长,幼苗叶片中的丙二醛(MDA)、游离脯氨酸(Pro)的含量逐渐升高,而叶片的相对含水量(RWC)、叶绿素的含量以及超氧化物岐化酶(SOD)的活性则逐渐降低.表明水稻幼苗受到高温的伤害,并且高温持续越久,伤害越严重.【期刊名称】《长江大学学报（自科版）农学卷》【年(卷),期】2008(005)002【总页数】4页(P50-53)【关键词】水稻(Oryza sativa L.);高温胁迫;生理指标;抗逆性【作者】黄显波;严寒;胡建林;田志宏【作者单位】福建省三明市农业科学研究所,福建,沙县365509;长江大学生命科学学院,湖北,荆州,434025;长江大学生命科学学院,湖北,荆州,434025;长江大学生命科学学院,湖北,荆州,434025【正文语种】中文【中图分类】Q945.78水稻(Oryza sativa L.)是中国最重要的粮食作物之一，大田生长的水稻一直处于广泛变化的光温生态条件下，高低温直接限制了水稻的光合生产能力[1]。
水稻高温热害在许多国家都有发生，也是中国稻作的主要自然灾害之一[2]。
近年来，随着夏季极端高温和持续高温的频繁出现，我国南方稻区水稻发生热害的频率随之加大，对水稻产量的影响也越来越严重[3]。
高温直接影响水稻的一系列生理生化反应，如膜系统的稳定性、酶促反应、水分和养分的利用和激素合成分泌等；叶绿体类囊体膜上分布有许多与光合作用相关的酶、膜蛋白复合体，高温下膜系统是否稳定直接影响水稻的光合能力。
中国南方水稻生长季节天气多变，冷暖交替频繁，在早、中、晚稻的开花期经常遇到热害或冷害，这是造成水稻产量不稳定的重要原因。
气候预测表明，温室效应将导致全球气温上升，整个种植业面临高温挑战，因此作物耐热性研究日趋重要[4]。
植物生物学实验逆境胁迫水稻幼苗与其生理指标分析
植物生物学实验逆境胁迫水稻幼苗与其生理指标分析植物生物学实验是研究植物的生理、生态和遗传等方面的科学实验，通过实验可以深入了解植物的逆境胁迫响应机制，探究植物在逆境条件下的生理指标变化，为植物的适应性进化和逆境胁迫耐受性的提高提供理论依据和实践指导。
本文将围绕植物生物学实验逆境胁迫水稻幼苗与其生理指标分析展开讨论。
实验目的：通过模拟不同的逆境条件，如高温、低温、干旱、盐碱等，分析水稻幼苗在逆境胁迫下生理指标的变化，了解水稻幼苗的抗逆性能以及与逆境胁迫之间的关联，为水稻逆境胁迫耐受性的提高提供理论依据。
实验步骤：1.准备实验材料：选取生长健康的水稻种子，洗净杂质并用干燥纸巾将其表面水分吸干。
2.实验设计：根据实验目的，设置逆境处理组和对照组，每组各设置若干个重复。
对逆境处理组，分别设置高温、低温、干旱和盐碱处理。
对照组则维持正常生长条件。
3.播种和培养：将水稻种子均匀撒在生长介质上，加入逆境处理组指定的处理方法，保持适宜温度和湿度条件下培养水稻幼苗。
4.观察记录：每天记录水稻幼苗的外观特征，包括植株高度、叶片颜色、根系状态等。
同时，定期采集样品进行生理指标分析。
5.生理指标分析：采集水稻幼苗叶片和根系样本，进行相应生理指标的测定，如叶绿素含量、叶片相对含水量、叶片气孔导度、叶片超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化氢酶（CAT）活性、丙二醛（MDA）含量等。
6.数据统计分析：对比逆境处理组与对照组的数据，进行统计学分析，比较各生理指标的差异。
预期结果：通过逆境胁迫处理后，预计水稻幼苗会出现生长受抑制，叶片变黄、枯萎，根系发育受限等逆境响应现象。
而生理指标分析可能显示，叶绿素含量下降，叶片相对含水量减少，叶片气孔导度增加，SOD和CAT活性提高，MDA含量升高等。
这些变化表明水稻幼苗在逆境胁迫下发生了一系列生理代谢的变化。
实验结论：逆境胁迫会引发水稻幼苗的一系列生理指标的变化，这些变化反映了水稻幼苗对逆境的胁迫响应机制。
《盐胁迫下水稻苗期生理响应及应答机制》
《盐胁迫下水稻苗期生理响应及应答机制》一、引言随着全球气候的变化，土壤盐渍化问题日益严重，对农业生产造成了巨大的威胁。
水稻作为我国最重要的粮食作物之一，其生长过程中常常会遭受到盐胁迫的危害。
因此，研究盐胁迫下水稻苗期的生理响应及应答机制，对于提高水稻的抗盐性、保障粮食安全具有重要意义。
二、盐胁迫对水稻苗期生长的影响盐胁迫对水稻苗期的生长具有显著的抑制作用。
在盐胁迫条件下，水稻苗期生长速度减缓，叶片出现黄化、卷曲等现象，严重时会导致植株死亡。
这种抑制作用主要表现在以下几个方面：1. 生长指标：盐胁迫会降低水稻苗期的株高、根长和鲜重等生长指标。
2. 叶片形态：盐胁迫导致叶片叶绿素含量降低，叶片结构受损，光合作用能力下降。
3. 生理代谢：盐胁迫会影响水稻苗期的水分代谢、养分代谢和激素代谢等生理过程，进而影响其正常生长。
三、盐胁迫下水稻苗期的生理响应在盐胁迫下，水稻苗期通过一系列生理响应来适应环境变化。
这些生理响应主要包括：1. 渗透调节：水稻通过积累可溶性物质来调节细胞内的渗透压，以维持细胞的正常功能。
2. 离子平衡：水稻通过调节离子吸收和排放来维持细胞内的离子平衡，防止盐离子对细胞造成伤害。
3. 抗氧化系统：水稻通过增强抗氧化酶的活性，清除活性氧等有害物质，减轻盐胁迫对细胞的氧化损伤。
四、盐胁迫下水稻苗期的应答机制为了应对盐胁迫，水稻苗期通过一系列复杂的应答机制来适应环境变化。
这些应答机制主要包括：1. 基因表达调控：水稻通过调节相关基因的表达，来增强对盐胁迫的抗性。
这些基因参与渗透调节、离子平衡、抗氧化等生理过程。
2. 信号转导：在盐胁迫下，水稻通过感知和传递信号来启动一系列防御反应。
这些信号包括激素信号、钙信号等。
3. 根系发育：水稻通过增加根系发育，提高根系对土壤中养分的吸收能力，以增强对盐胁迫的抵抗力。
五、结论本文研究了盐胁迫对水稻苗期生长的影响及其生理响应和应答机制。
结果表明，盐胁迫会抑制水稻苗期的生长，并导致一系列生理变化。
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主要试剂配制（供参考）：
（1）50mmol/L 磷酸钠缓冲液（pH7.8）： A液：NaH2PO4 · 2H2O（分子量156.01）： 3.12g溶于蒸馏水， 定溶至100ml。 B液：Na2HPO4 · 12H2O（分子量358.14）： 7.17g溶于蒸馏水， 定溶至100ml。 取A液8.5ml与B 液91.5ml混合，定容至400ml，pH7.8。 （2）SOD提取液：50mmol/L磷酸缓冲液 [含0.1mmol/L EDTA； 0.3%(w/v) Triton X-100；2-4%（w/v）聚乙烯聚吡咯烷酮（PVP ） , pH7.8]。 即每升磷酸缓冲液中加20g PVP，200μl 0.5mol/L的EDTA母液， 3ml Triton X-100。
二、实验材料、仪器与试剂
材料：水稻幼苗盐胁迫处理后的叶片。 仪器设备：电子天平，高速台式离心机，分光光度计，移液器， 荧光灯（反应试管处照度为4000Lx），试管数支，研钵，烧 杯，离心管，量筒等。 试剂： SOD抽提液：50mmol/L 磷酸缓冲液（pH7.8） 14.5mmol/L 甲硫氨酸（Met）溶液：现配现用。 2.25mmol/L 氮蓝四唑溶液（NBT）：避光保存，现配现用。 60μmol/L 核黄素溶液：避光保存，现配现用。 3μmol/L EDTA－Na2溶液
4. 正式实验
准备8支相同型号的试管：6支样品、2支对照。 混合液配制：按8-10支试管的用量配制（同预实验）。 加酶液：各管加入混合液2.95ml，6支分别加入相对应的酶 液量，2支对照管用提取液代替，混匀，遮光。
碱蓬。
拒盐：植物对盐有一定的选择性吸收，并能将盐分重新分配在植物 的安全部位，从而降低盐分对地上部的伤害，如芦苇、灯芯草。
泌盐的红树植物（盐腺）
稀盐的碱蓬（肉质化）
拒盐的盐生植物
芦苇——地上部分拒盐
灯芯草——地上部分拒盐
植物盐胁迫的伤害表现
生理干旱：土壤中盐分过多使土壤溶液水势下降，导致植物
3. 做预实验：在正式测定SOD活性之前，要进行酶液加入量的预实验，
以确定最佳酶液浓度。 酶液稀释：取其中一管酶液按1倍、10倍、100倍稀释。 混合液配制：计算4-5支试管的用量，按反应体系表中各溶液(除酶液外)
配制1份混合液(现用现配)。
加酶液：在每支试管中加混合液2.95ml，再分别加入相对应的酶液量， 其中2支空白对照用提取液代替酶液，混匀，马上用黑色塑料袋罩住。
植物对逆境胁迫的适应
适应方式： 避逆性（stress avoidance）：植物会在时空上躲避开不良环境，
如沙漠植物只在雨季生长、阴生植物在树荫下生长等。
耐逆性（stress tolerance）：植物能够忍受逆境的作用。
适应的形态生理变化：
形态变化： 如干旱条件下叶小、根系发达；
淹水时扩大根部通气组织； 冬季低温来临前生长停止、进入休眠等。
将各杯的秧苗叶片分别剪下、随机称取少量叶片0.2-0.5g，放入PE
手套中并做好标记，臵于冰箱冷冻保存备用。
五、实验分组
四个人组成一个小组进行水稻幼苗盐胁迫反应实验。 每小组设臵3个处理：1个对照和2个不同盐浓度，每
处理2个重复，共6份样品。
注意每杯要做好自己的标记、写上组别或姓名。
预习下周实验：应用氮蓝四唑（NBT）法测
粗提液，臵于冰箱保存备用。
2. 反应体系
试剂 50 mM SOD提取液 14.5 mM 甲硫氨酸 2.25mM NBT 3 μM EDTA-Na2 60 μM 核黄素 蒸馏水 酶液
总体积
用量（ml/管） 1.5 0.3 0.3 0.3 0.3 0.25 0.05 （2支对照管以提
取液代替酶液）
3.0
H2O2，从而抑制蓝色甲腙形成。SOD催化反应如下：
O2 O2 2H SOD H 2O2 O2
盐胁迫对植物叶片SOD酶的影响
（1）在一定盐度的胁迫下，植物叶片中SOD活性随盐浓度的 升高而增强。 （2）SOD酶能有效抑制膜脂过氧化作用，具有一定的保护作 用。因此，盐胁迫的损伤在一定范围内是可以修复。 膜系统的修复与SOD、CAT、POD等抗氧化酶的活性和抗 坏血酸(ASA)、谷胱甘肽(GSH)等抗氧化物含量的变化密切 相关。
定植物超氧化物歧化酶（SOD）的活力。
《植物生物学实验》
逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析 实验二：用氮蓝四唑（NBT）法测定
植物超氧化物歧化酶（SOD）活力
一、实验目的
学习掌握用氮蓝四唑（NBT）法来测定植物超氧化物
歧化酶（superoxide dismutase, SOD）的活力。
了解不同盐浓度胁迫对水稻幼苗叶片SOD酶的影响。
三、实验步骤
1. 酶液提取：
将经盐胁迫处理、称好保存的水稻叶片0.2-0.5g臵于
预冷的研钵中，加1-2ml预冷的SOD提取液在冰浴上
研磨成浆，并转移到离心管中，再用提取液清洗研钵，
每次1ml，转移到同一离心管中，终体积不超过4ml；
于6000-8000rpm下离心5-10 min，上清液即为SOD酶
吸水困难，甚至体内水分有外渗的危险，造成生理干旱。 离子失调：植物由于过多吸收某种盐类而排斥对另一些矿质 盐的吸收，导致营养缺乏或产生毒害作用。 代谢破坏：叶绿体解体、光合速率下降；蛋白质合成受抑制、
分解加强，产生有毒物质，对细胞产生毒害。
膜透性改变：高浓度 NaCl 可臵换细胞膜结合Ca2 +、K +，膜 结构破坏、功能改变，细胞内K+ 、有机质等外渗。
生理变化： 1. 生物膜结构改变，形成胁迫蛋白，如热激蛋白、抗冻蛋白等。
2. 保护酶系统受破坏
由超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)
等组成的保护酶系统会降低或消除活性氧的危害。 正常情况下，细胞内自由基的产生和清除处于动态平衡状态，自由 基水平很低，不会伤害细胞。 遭受逆境胁迫时，细胞内自由基积累过多，SOD等保护酶系统被破 坏，产生许多有害的过氧化产物如丙二醛等，会伤害细胞。自由基 会破坏膜结构，损伤大分子生命物质，引起一系列生理生化紊乱，
避盐：植物通过某种方式将细胞内盐分控制在伤害阈值之下，以避
免盐分过多对细胞伤害。
泌盐：植物通过茎、叶上专门分泌盐分的盐腺(或盐囊泡)将盐分分 泌到体外，减少或避免盐分对植物的伤害，如红树植物。 稀盐：植物通过吸收大量水分和加速生长，稀释细胞内盐分浓度， 并将盐分积累在茎叶的肉质化组织，维持体内盐分浓度的恒定，如
生 物 因 素 非 生 物 因 素 病害 虫害 杂草 温度：低温(冷害、冻害)，高温热害 水分：干旱，湿害、涝害 盐害 酸雨 紫外线（UV） 营养亏缺、重金属
逆 境 胁 迫
逆境胁迫对植物伤害的表现
形态变化：生长停滞，叶片萎蔫、卷曲、变黄、枯
死等。 生理生化：叶绿素含量减少，光合速率下降，呼吸 速率下降或升高，细胞膜系统破坏，酶活性紊乱等。
（3）14.5mmol/L 甲硫氨酸（分子量149.21）： 称2.163g溶于蒸馏水，定溶至1000ml(较难溶，需稍微加热）。 （4）2.25mmol/L NBT（分子量817.7）： 称92mg溶于50ml 50mM磷酸磷酸缓冲液（pH7.8），现配现用，
避光保存。
（5）60μmol/L 核黄素（分子量376.36）： 称2.25mg溶于50ml 50mM磷酸磷酸缓冲液（pH7.8） ，现配现用， 避光保存。 （6）3μmol/L EDTA-Na2（分子量372.24）： A、0.5mol/L ：称9.306g溶于蒸馏水，定容至50ml。 （注意：搅拌时用NaOH调pH至8.0才能完全溶解）。 B、0.5mmol/L ：取A液1ml用蒸馏水稀释定容至1000ml。 C、3μmol/L ：取B液3ml用磷酸缓冲液稀释定容至500ml。
若盐胁迫强度较小，除盐后，植物生长可以恢复；
若盐胁迫强度较大，除盐后，植物生长不可恢复 盐害
植物对盐胁迫的适应
根据植物抗盐能力大小分为：
盐生植物：耐盐范围1.5-2.0%，如碱蓬、芦苇、红树
植物等。
甜土植物（非盐生植物）：耐盐范围0.2-0.8%，如甜
菜、高粱等大多数农作物。
盐生植物的避盐机制
之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。
酶单位/样品量 =
核黄素：在有氧物质存在下，还原的核黄素与氧反应产 生氧自由基。
氮蓝四唑(NBT)：氧自由基将无色(或微黄)的NBT还原为
蓝色甲腙。 甲硫氨酸：电子供体——提供核黄素的还原反应所需的 电子供体，使得核黄素的光激发还原反应得以进行。 SOD酶：SOD通过催化氧自由基歧化反应，生成O2与
三、实验试剂与材料
试剂：氯化钠
主要仪器与器皿：电子天平，低温冰箱，烧杯，
容量瓶，量筒，PE手套等。
材料：水稻幼苗
胁迫方式：盐胁迫，配制浓度0~0.3mol/L。
四、实验步骤
1. 自己设计配制2个不同盐浓度的NaCl溶液并设臵对照(CK)。
2. 挑选生长整齐一致的水稻秧苗60-90株，然后随机取10-15株于1个 烧杯中，观测记载描述盐胁迫处理前各杯水稻秧苗的农艺形态性状 (如苗高、叶片颜色、叶片数等)。 3. 各杯分别加入不同浓度NaCl溶液50ml左右（原则：根系要浸入溶 液中），然后放臵在实验架上进行盐胁迫处理。 4. 处理12-24 h后(具体应视情况而定)，当高盐度处理的秧苗叶片开始 出现卷曲时，观测记载处理后各杯秧苗农艺形态性状的变化，然后
《植物生物学实验》
逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析
实验一：水稻幼苗对盐胁迫的反应 实验二：用氮蓝四唑法测定植物超氧化物歧化酶活力
实验一：水稻幼苗对盐胁迫的反应
一、实验目的
了解植物如何对逆境胁迫产生反应。 观察分析水稻幼苗盐胁迫后发生的形态生