猪肉中氟喹诺酮类药物残留检测国标方法的改进-论文
畜产品中氟喹诺酮类药物残留高效液相色谱法检测技术
2016年第9期（下半月）农民致富之友 Nong Min Zhi Fu Zhi You276财经◎畜牧兽医畜产品中氟喹诺酮类药物残留高效液相色谱法检测技术穆伟峰（新乡市畜产品质量监测检验中心，河南新乡 450003）[摘 要] 目的改善畜产品中氟喹诺酮类药物残留检测。
方法样品经过磷酸盐缓冲液提取，过HLB固相萃取柱，用适当乙腈比例的流动相进行分离。
结果鸡肉、鸡蛋、猪肉样品回收在85%—95%之间。
结论操作简单，回收稳定。
[关键词] 畜产品 氟喹诺酮 药物残留 高效液相色谱法[中图分类号] S826 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650(2016)09-0276-011 材料与方法1.1 仪器与试剂Waters2695高效液相色谱仪，15厘米C 18粒径5um 液相色谱柱，WatersHLB 固相萃取柱（30mg ），安捷伦1200荧光检测器，高速离心机，高速振荡匀浆器。
恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、达氟沙星标准品，色谱纯乙腈、甲醇，超纯水，其他试剂均为分析纯。
1.2 工作试剂配制5.0mol/L 氢氧化钠溶液：取氢氧化钠饱和溶液28mL 加水稀释至100mL 。
0.03mol/L 氢氧化钠溶液：取5.0mol/L 氢氧化钠溶液0.6mL 加水稀释至100mL 。
0.05mol/L 磷酸三乙胺溶液：取浓磷酸3.4mL 用水稀释至1000mL ，用三乙胺调pH 至2.4。
30%乙腈缓冲液：取30mL 乙腈和70mL0.05mol/L 磷酸三乙胺溶液混合。
磷酸盐提取液：取磷酸二氢钾6.5g 加水稀释至500mL ，用5.0mol/L 氢氧化钠溶液调pH 至7.0。
洗脱液：乙腈与0.05mol/L 磷酸三乙胺溶液2比8配制。
流动相：乙腈与0.05mol/L 磷酸三乙胺溶液14比86配制。
1.3 标准溶液配制准确称取恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星约25.00mg ，达氟沙星5.00mg ，用0.03M 氢氧化钠溶液定容于25mL 容量瓶中，制成标准储备液，根据称量量和标准品浓度计算标准溶储备液浓度，分别约为1mg/mL 和0.2mg/mL 。
猪肉组织中氟喹诺酮类药物残留检测
学术研究doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2014.05.007氟喹诺酮类药物属第3代喹诺酮类抗菌药，适应于敏感病原菌所致的呼吸道、胃肠道等感染，具有吸收好、组织浓度高、半衰期长、抗菌谱广等优点，已成为兽医临床的常用药。
但随着临床用量的不断增长，因不合理用药或滥用药而导致的畜产品质量安全问题时有发生，并越来越引起社会的广泛关注。
本文在运用“农业部1025号公告-14-2008”标准[1]的基础上，结合本实验室的工作实际，随机选取8名本实验室的化验员，同时并独立完成猪肉组织中氟喹诺酮类药物残留检测工作，得出检测回收率，分析和判断测定结果的准确性。
1仪器与试药1.1仪器天平，感应0.01g；分析天平，感应0.00001g；Aglient1200高效液相色谱仪-配荧光检测器；振荡器；组织匀浆机；离心机；Varian BondElut C18柱（100mg/mL）固相萃取柱；0.45μm微孔滤膜。
猪肉组织中氟喹诺酮类药物残留检测张漫1,李娜2,高木珍1,张宁1,刘晓辉1,王辉1（1.天津市兽药饲料监察所天津300402；2.天津市农产品质量监督检验测试中心天津300381）摘要：随机选取本实验室内的8名化验员，分别测定猪肉组织中氟喹诺酮类药物残留量，通过对结果数据的分析，得出本实验室测定结果的准确程度。
通过磷酸盐缓冲溶液提取猪肉组织中的氟喹诺酮类药物残留，经C18柱净化后，用高效液相色谱法测定含量。
环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星的平均回收率（%）分别为：95.6、86.9、89.3和95.6，批内变异系数均≤14%，批间变异系数均≤6%。
结果数据满足标准要求，证明本实验室能准确开展此项检测活动。
关键词：氟喹诺酮类药物；达氟沙星；恩诺沙星；环丙沙星；沙拉沙星；残留检测Determination of Fluoroquinolones Residues in Pork TissueZhang Man1,Li Na2,Gao Muzhen1,Zhang Ning1,Liu Xiaohui1,Wang Hui1（1.Tianjin Institute of Veterinary Drugs and Feed Control,Tianjin,300402.2.Tianjin supervision and Testing Center of Agricultural Product Quality,Tianjin,300384）Abstract:We selecting8technicians in our laboratory randomly,letting they determine fluoroquinolonesresidues in pork tissues separately.Based on the analysis of the experimental data,we concluded the accuracy ofmy determination results.The Fluoroquinolones residues are extracted with phosphate buffer solution,cleaned byC18SPE cartridge,then content was determined by HPLC.The average recoveries of four components were95.6%,86.9%,89.3%,95.6%.The variation coefficient of inter-assay were below14%,intra-assay were below6%.The results meet requirements,so we can carry out the test.Key word:fluoroquinolones;danofloxacin;enrofloxacin;ciprofloxacin;sarafloxacin;residues determination. All Rights Reserved.学术研究1.2药品与试剂达氟沙星，批号10301，含量93.5%,Dr.Ehren-storfer Gmbh公司；恩诺沙星，批号H0081206，含量99.9%,中国兽医药品监察所；环丙沙星，批号130451-201203，含量84.2%,中国食品药品检定研究所；沙拉沙星，批号20629，含量95.0%,Dr. Ehrenstorfer Gmbh公司。
喹诺酮类药物残留量的测定 标准
喹诺酮类药物残留量的测定标准一、引言喹诺酮类药物是一类常用的抗菌药物，被广泛应用于畜禽养殖业和养殖水产业中，以预防和治疗动物植物的感染疾病。
然而，由于长期和滥用使用，喹诺酮类药物在畜禽产品中的残留量问题日益严重，给食品安全带来了一定的挑战。
为了保障消费者的健康和食品安全，加强对喹诺酮类药物残留量的测定标准显得尤为重要。
二、国内外对喹诺酮类药物残留量的测定标准1. 国际标准在国际上，对于喹诺酮类药物残留量的测定标准，主要是由国际食品安全标准委员会（Codex Alimentarius Commission）和世界卫生组织（WHO）制定并发布的《动物兽药残留限量国际标准》。
在该标准中，对不同种类的喹诺酮类药物在畜禽产品中的残留量都有详细的规定和限定，以确保产品的安全合格。
2. 国内标准在我国，对于喹诺酮类药物残留量的测定标准主要由国家食品安全标准委员会负责制定和管理。
国家食品安全标准委员会及其下属的各专业委员会，根据国家食品安全相关法律法规的要求，不断进行标准的修订和完善，以适应国内外食品安全形势的发展和变化。
三、喹诺酮类药物残留量的测定方法1. 高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是目前国际上常用的一种喹诺酮类药物残留量测定方法。
该方法准确、灵敏度高，并且可对多种喹诺酮类药物进行同时测定，适用于不同类型的畜禽产品。
2. 超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）超高效液相色谱-串联质谱法是一种新型的分析技术，具有分辨率高、灵敏度高和分析速度快的特点。
该方法适用于对喹诺酮类药物残留量进行快速准确的测定，是当前国内外研究和应用的热点之一。
四、个人观点和理解在我看来，喹诺酮类药物残留量的测定标准是食品安全监管中的重要环节，它不仅关乎着畜禽产品的质量和安全，更关系着广大消费者的身体健康和生命安全。
当前，我国在食品安全监管方面已取得了一定的成绩，但也面临着一些挑战和问题，如标准的实施和监管不到位等。
浅析氟喹诺酮类兽药残留检测方法
３ 氟喹诺酮 类药物残 留的检测方法
目前 ，常用 于氟 喹诺酮 类药 物残 留 的检 测方 法 可分 为４ 液相色 谱法对 猪 肉组织 中恩诺沙 星和环 丙沙 星残 留量 进行 检 大类 ：微 生物法 、仪器分 析法 、化学发 光与 电化学发光 分析 测 ，结 果 环丙 沙星 、恩 诺沙 星 的质量 浓度 在 ２ｇＬ～１ ０ ｇＬ ／ ０ ／ ｇｋ 。 法及免疫分析法。其中仪器分析法常见的有高效液相色谱法 范 围内呈线性关 系 ，它们 的最低定量限均为２／ｇ （ＰＣ Ｈ Ｌ ）、液一 质联用分析法 （ ＣＭ ）、高效毛细管电泳法 ３ ２ ２ 高效液相 色谱 一 Ｌ／Ｓ ．． 质谱联 用法 （ ｃ Ｍ ） 随着研究 的深 Ｌ— Ｓ （ Ｐ Ｅ）等 ；免疫 分析检测法包括 间接竞 争Ｅｉ 测定法 、免 入 和对食 品安全越 来越 高 的重 视 ，定 性准 确 ，灵 敏度更 高 的 ＨＣ ｌａ ｓ 疫传感器分析法 、免疫亲和色谱 （ＡＣ）分析法等【 。 Ｉ ｌ 液质联 用技 术渐渐 被人 们采纳 ，这种 技术不 仅可 以更精 确 的
兽 药 应 用
中国畜牧兽 医文摘
２ １年 ０１
２卷 ７
第３ 期
浅析氟喹诺酮 类兽药残 留检测方法
将 ，、 Ｊ武 ・
（ 南大 学荣昌校 区，重庆 西
４ ２６ ） ０ ４ ０
［ 要］ 解决兽 药残留监 控 问题是提 高动物源性食 品质 量，保障食品安全 的关键 性环节之一 ，因此在食 品检 验 中建立 一 摘 些 方便 快捷 的检测方 法显得 尤为重要 。本 丈以兽 药氟喹诺酮类为例 ，系统 阐述 了目前在临床检测 中 已经建立的有关 氟喹诺酮类 药物 残留的检 测技 术 ，以期能为其他药物残 留检测提供参考方 向。
猪肉中兽药残留检测技术与防控措施
畜 牧 兽 医2021年第2期新农民猪肉中兽药残留检测技术与防控措施丁春晖（南京市农产品质量检测院，江苏 南京 210000）摘要：兽药残留问题已引起全世界的普遍关注，尽管从根本上改善与解决这一问题需要很长时间，但在全球范围内食品安全法治、兽药残留防控治理体系日渐完善，也相继研制与开发畜类各类绿色兽药与制剂，全民提高自身的食品安全意识，可最大限度地降低猪肉中的兽药残留，为广大人民群众提供安全、放心的猪肉产品。
关键词：猪肉；兽药残留检测技术；防控措施1 兽药残留概述兽药是对畜禽进行疾病治疗或保健的药物，随着养殖业不断发展，畜禽养殖规模也在不断加大。
在这样背景下，越来越多的药物被开发出来应用在畜禽疾病的治疗和日常保健中，进而帮助畜禽得到更好的成长，同时也对畜禽肉质进行改善。
目前已经有很多种药品都被认定属于兽药范围。
兽药残留，是在对畜禽应用药品后，一部分药物的原形、杂质或代谢物储存在畜禽的体内细胞或器官中。
兽药残留种类有很多，具体包括抗生素、抗寄生虫及激素类药物，其中抗生素类药物主要包括氯霉素、红霉素和诺氟沙星等。
抗寄生虫类药物主要包括有机磷化合物等，能对畜禽体内的寄生虫进行有效驱杀。
激素能帮助畜禽更快发育，进而提升畜禽产量，如甲地孕酮、乙烯雌酚等药物。
2 猪肉中兽药残留检测技术2.1 免疫分析法在抗原抗体协助下利用该方法结合特异性与可逆性反应特点检测药物残留，能实现快速筛选，本身具有较高的选择性，前期便于处理，且具有较高的灵敏度，常见的有胶体、荧光、酶免疫测定法。
其中，酶联免疫吸附法最为常见，能对猪肾脏中的镇静剂等含量进行准确测定，具有一系列优势，如精确度高、灵敏度高、操作简单等，可迅速推广使用。
2.2 理化分析法与上述方法相比，利用该方法前期需要高度重视样品处理，以此得到的结果更具准确性与灵敏度。
当下，应用较好的方法有3种，即气相色谱法、超高效液相色谱法及超高效液相色谱质谱联用法。
色谱质谱联合能有效结合色谱高效分离能力、质谱高效灵敏与强大的定性分析能力，这是当下最为强度的分析方式，特征主要表现为定性定量，如类四环素类、喹诺酮类、激素类等。
氟喹诺酮类药物残留检测国标解读
氟喹诺酮类药物残留检测国标解读氟喹诺酮类药物残留检测国标解读近年来，随着氟喹诺酮类药物的广泛应用，对其残留问题的关注也逐渐加深。
为了确保食品和环境的安全，国家相关部门制定了氟喹诺酮类药物残留检测国家标准，以规范和指导药物残留检测工作。
氟喹诺酮类药物是一类广谱抗生素，常用于治疗细菌感染。
然而，过量使用或不当使用氟喹诺酮类药物可能导致残留物在食品和环境中的积累，对人体和生态环境造成潜在风险。
因此，建立合理的检测标准对于保护公众健康和环境安全至关重要。
氟喹诺酮类药物残留检测国标主要包括以下几个方面：1. 检测对象：国标规定了需要进行氟喹诺酮类药物残留检测的食品和环境样品，包括肉类、蛋类、奶类、水产品、农产品等。
这些样品是人们日常生活中常见的食品和环境来源，对其残留物的监测可以及时发现问题并采取相应措施。
2. 检测方法：国标明确了氟喹诺酮类药物残留检测的方法和技术要求。
这些方法包括高效液相色谱-质谱联用（HPLC-MS/MS）、气相色谱-质谱联用（GC-MS）等。
这些方法具有高灵敏度、高准确度和高选择性，能够有效检测氟喹诺酮类药物的残留量。
3. 残留限量：国标规定了各类食品和环境样品中氟喹诺酮类药物残留的限量要求。
这些限量值是通过科学研究和风险评估确定的，旨在保护公众健康和环境安全。
各类食品和环境样品的残留限量不同，根据实际情况进行调整。
4. 检测结果评价：国标规定了氟喹诺酮类药物残留检测结果的评价标准。
根据检测结果，对食品和环境样品进行分类评价，确定是否合格或超标。
对于超标样品，相关部门将采取相应措施，例如责令停产、销毁或处罚等。
总之，氟喹诺酮类药物残留检测国标的制定和解读对于保障公众健康和环境安全具有重要意义。
只有严格依照国标进行检测，及时发现和控制氟喹诺酮类药物残留问题，才能确保食品的健康与安全。
同时，相关部门应加强监管和执法力度，加大对氟喹诺酮类药物的合理使用宣传和教育，以减少其残留物在食品和环境中的污染。
肉制品中兽药残留的测定—兽药残留的测定国标解读
二、兽药残留的国标解读
以氟喹诺酮类残留为例：检测方 法依照《动物性食品中氟喹诺酮类 药物残留检测高效液相色谱法》 （农业部1025号公告-14-2008）操 作。
国家标准里规定氟喹诺酮类残留 限量为氟喹诺酮类残留为例：检测方 法依照《动物性食品中氟喹诺酮类 药物残留检测高效液相色谱法》 （农业部1025号公告-14-2008）操 作。
国家标准里规定氟喹诺酮类残留 限量为100ug/kg
5
4
临床应用最多的一类抗
菌药物，青霉素类、 抗生素类 β-内酰胺类、氨基糖
苷类、大环内酯类、四
环素类、氯霉素类等
磺胺类 主要用于抗菌消
2
炎，如磺胺嘧啶、
磺胺二甲嘧啶
3 硝基呋喃类 喹诺酮类
毒副作用大， 因具有致癌和 致突变作用， 已禁止用作饲 料添加剂
特点抗菌谱广，杀菌力 强，如诺氟沙星、氧氟 沙星等
兽药残留的测定
国标解读
目录页
兽药残留的种类 兽药残留的测定国标解读
一、兽药残留的测定意义
抗病毒类
7 金刚烷胺、利
巴韦林（病毒
唑）
抗寄生虫
6
驱虫或杀虫，如左 旋咪唑、克球酚
激素类
主要用于提高动物 的繁殖和加快生长 发育速度，使用于 动物的激素有性激 素和皮质激素，而 以性激素最常用
1
兽药残留 分类
二、兽药残留的国标解读
兽药最高残留限量(MRLVD)是指 某种兽药在食物中或食物表面产 生的最高允许兽药残留量(单位 μg／kg，以鲜重计)。
二、兽药残留的国标解读
兽药最高残留限量标准 不需要制定最高残留限量的药物：88种 需要制定最高残留限量的药物：94种 可以使用，但不得在食品中检出的药物：9种 禁止使用，且不得在食品中检出的药物有：31种
氟喹诺酮类药物残留检测国标解读
氟喹诺酮类药物残留检测国标解读氟喹诺酮类药物残留检测国标解读氟喹诺酮类药物是一类广泛应用于人类及动物医药领域的抗菌药物，包括诸如氟苯尼考、氟哌酸、氟氧氟嗪等。
在兽药的使用中，为了保证食品中不残留过多的药物，国家制定了一系列的标准和方法来检测氟喹诺酮类药物的残留。
国标是指国家发布的关于特定物品或行为的规范和标准，是行业内进行质量控制和监督的重要依据。
对于氟喹诺酮类药物残留检测而言，国标主要涉及以下几个方面的内容：1. 检测方法：国标要求制定适用于氟喹诺酮类药物残留检测的方法，包括样品的采集、处理、提取、分离和定量等方面的技术要求。
这些方法通常采用高效液相色谱仪（HPLC）或质谱仪（MS）等仪器设备进行分析，以确保准确度和可靠性。
2. 检测限值：国标规定了氟喹诺酮类药物在食品中的残留限值，即食品中允许存在的最大药物残留浓度。
这些限值根据食品的种类、人们对该食品的摄入量以及药物的毒性等因素来确定，旨在保证食品的安全性和合规性。
3. 样品类型：国标规定了适用于氟喹诺酮类药物残留检测的样品类型，包括肉类、乳制品、水产品、蔬菜等。
针对不同的样品类型，可能需要不同的样品处理和预处理方法，以确保药物残留的有效提取和准确测定。
4. 检测设备和操作要求：国标还规定了氟喹诺酮类药物残留检测所需的设备和操作要求，包括仪器的性能指标、试剂的选择和使用、流程的标准化等。
这些要求有助于确保检测结果的准确性和可比性。
氟喹诺酮类药物残留的检测国标的制定和执行，对保障食品安全、合规经营和消费者权益具有重要意义。
遵循国标的要求进行药物残留检测，可以有效监控食品中的氟喹诺酮类药物残留情况，减少潜在的食品安全风险，保障公众健康。
同时，对于相关行业从业人员而言，了解并遵守国标的要求也是履行职责、提升专业素养的必要条件。
猪肉中氟喹诺酮类药物检测
依据 GB /T 22388-2008
1. 前处理（以猪肉为例）
预处理：
准确称取2g 猪肉样品，加入10mL 磷酸盐提取液（pH=7），水平振荡5min，10000g 离心 5min，吸取上层液，重复提取一次，合并上层液，上层液中加入10mL 正己烷，涡旋1min， 10000g 离心5min，吸取下层液体，待净化。
净化：
固相萃取小柱：
InertSep Pharma 3ml/60mg 货号5010-27101（品牌：岛津技迩）
活化、平衡：3ml 甲醇、3mL 磷酸盐提取液
上样：取预处理的5ml 下层液体过柱
淋洗：3ml 水
抽干
洗脱：2mL 流动相 0.05M 磷酸三乙胺：乙腈=18：82
过滤上机
2. 色谱分析
色谱柱：C18 , 250×4.6mm（i.d.）, 5μm
流动相：A:0.05M 磷酸三乙胺+B:乙腈=18+82，等度洗脱
柱温：35℃
检测波长：Ex:280nm; Em450nm
3. 基质加标回收率结果
三次平行实验结果的回收率（基质加标浓度均为0.05mg/kg）：
4. 结论
在此实验条件下，将固相萃取小柱InertSep Pharma 3ml/60mg 应用于猪肉中氟喹诺酮类残留前处理，基质去除效果好，回收率完全满足要求。
氟喹诺酮类药物残留限量及检测技术研究进展
氟喹诺酮类药物残留限量及检测技术研究进展张运尚，杜加茹，王伟东，樊剑鸣*（郑州大学公共卫生学院，河南郑州 450001）摘 要：氟喹诺酮类药物（FQS）是第3代喹诺酮类抗生素，具有良好的生物利用度和耐受性，不仅对革兰氏阳性菌和阴性菌有杀菌作用，还具有抗真菌和抗病毒活性，因此被广泛应用于治疗畜牧动物养殖过程中的细菌性感染。
但当人类过多食用含有FQS残留的食品后，将会损害身体多个系统并引起细菌耐药性，因此建立灵敏度高、简便的检测方法十分必要。
本文综述了FQS残留的检测标准和常用的检测方法及优缺点，酶联免疫分析法（ELISA）具有灵敏度高、操作简便等优势，预测ELISA法在今后FQS残留检测中发挥重要作用。
关键词：氟喹诺酮类药物；药物残留限量；残留检测技术；酶联免疫分析法中图分类号：S816.7 文献标识码：A DOI编号：10.19556/j.0258-7033.20200516-05氟喹诺酮类药物（Fluoroquinolones，FQS）是第3代喹诺酮药物，其化学结构是在喹啉环的6位上加入了氟原子，7位上连有哌嗪基的一类衍生物，此特点使得原本亲脂性的吡酮类药物增加了适度的亲水性，同时降低了蛋白结合率，提高生物利用度[1-2]。
该类药物通过抑制细菌的DNA和RNA合成从而达到抑菌作用[3]。
相比第1代及第2代喹诺酮药物，FQS的抗菌活性明显增加，抗菌谱显著扩大，对革兰氏阳性菌（金葡球菌、链球菌、肺炎球菌）和革兰氏阴性菌（肠杆菌科、流感杆菌和奈瑟菌属）[4]以及一些衣原体、支原体和螺旋体均有抗菌作用[5]，因此被广泛应用在临床上治疗细菌感染性疾病。
FQS代表药物主要包括恩诺沙星（Enrofloxacin，ENR）、环丙沙星（Ciprofloxacin，CIP）、诺氟沙星（Norfloxacin，NOR）、达氟沙星（Danofloxacin，DAN）、氟罗沙星（Flero xacin，FLE）、沙拉沙星（Saraflaxacin，SFX）、依诺沙星（Enoxacin，EX）等。
氟喹诺酮类药物在畜产品中残留原因及对策
Ｋ ｅ ｒ ｓ ｆ ｏｏ ｕｎ ｌｎ ｓ ｒ ｇ ； ｎｍａ ｒｄ ｃｓ ｒ ｓ ｕ ｌａ ａｙ ｉ； ｏ ｎｅｍｅ ｓ ｒ ｓ ｙｗｏ ｄ ： ｕ ｒｑ ｉｏｏ ｅ ｕ ｓ ａ ｉ ｌ ｏ ｕ ｔ； ｅ ｉ ａ； ｎ ｌｓｓ ｃ ｕ ｔｒ ａｕ ｅ ｌ ｄ ｐ ｄ
氟喹诺酮类 （Ｑ ｓ药物是喹诺酮类药物 的第 Ｆ Ｎ） 三代产品。第一代喹诺酮类只对大肠杆菌 、痢疾杆 菌 、克 雷伯 杆菌等 少数 Ｇ 杆 菌有 效 ，口服 吸收 一 差 ，副作 用 多 ，仅用 于敏感 菌所致 的尿路感 染 ， 代 表药 物为萘 啶酸等 。第二代 喹诺酮类在抗菌谱 方面有所扩大 ，对肠杆菌属、枸橼酸杆菌 、绿脓杆 菌 、沙雷杆菌也有一定抗菌作用 ，代 表药物为吡 哌酸 。第 三代 喹诺酮类 由于结构 的改进 ，其性状
液 、胶囊 、糊 剂 、泡腾 剂等 ９ 。 类
应 。Ｆ Ｎ 的不 良反应可涉及人体各个 系统 ，临床 Ｑｓ
表现也 多种多样。Ｆ Ｎ 残留不但对人体有直接的 Ｑｓ 危害 ，更为严重 的是致病菌对其耐药性正逐渐增 强 ，致使人体产生耐药性 ，从而不利于该类药物治 疗人类相关疾病 。 ３ 氟 喹诺 酮类 药物残 留的检测 方法 及用药 原 则
（． ｅｌｎｊ ｎ ｅｅ ｎｒ ｄｃｎ ｅｄＳ ｐ ｒｉ ｒ， ａｂｎ１０ ６ ， ｈｎ ； １ Ｈ ｉ ｇ ａｇＶ ｔｒ ａｙＭｅｉｉｅＦ ｅ ｕ ｅｖ ｏｙ Ｈ ｒｉ ５０ ９ Ｃ ｉａ ｏ ｉ ｉ ｓ
２ Ｔａｊ ｅｅｉａ ｄｃ ｅＦ ｅ ｎｔｒ ｇ Ｔａｊ ０４ ２ Ｃ ｉａ ． ｉｎｉ Ｖ ｔｒ ｒ Ｍｅｉｉ ｅｄＭｏｉ ｉ ， ｉｎｉ ３０ ０ ， ｈｎ ） ｎ ｎｙ ｎ ｏｎ ｎ
２１￣Ｕｌｍ 饲料博览 ４９ ０１ ｏ
药典》 二Ｏ Ｏ五年版 ） 兽药质量标准》一九九六 （ 、《 （ 年版 、一九九九年版及二 ｏｏ三年版） 进 口兽药 、《 质量标准》一九九九年版 、－ ＯＯ六年版） 兽药 （ ＇ 和《 地方标注 上升国家标准》 饲料药物添加剂使用规 及《
实验九 荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留
实验九 荧光分析法测定肉类食品中诺氟沙星的残留一、实验背景：诺氟沙星（Norfloxacin, NFLX ）又名氟哌酸，为第三代喹诺酮类抗菌药物，具有抗菌谱广、抗菌活性强，毒副作用低和临床疗效高的特点，是临床应用最广泛的喹诺酮类药物之一。
诺氟沙星系化学合成药物，合成容易，价格低廉，故也是动物和水产养殖中最重要的抗感染药物之一，然而由于滥用现象严重，导致药物残留，给食品安全带来严重的威胁。
该类药物的残留除其本身的毒副作用对人体造成直接危害外，更为严重的是人类长期食用含较低浓度药物的动物源性食品，容易诱导人类致病菌产生耐药性，从而影响该类药物的临床疗效。
二、实验目的：使用荧光分析法方法简单、快速、灵敏、准确地测定肉类食品中诺氟沙星含量。
学习荧光分光光度计的使用方法和分析手段。
三、实验原理：Al 3+与诺氟沙星配位增强荧光强度，下图是诺氟沙星的分子结构式。
NO OH O FN HN图1 诺氟沙星的分子结构式四、实验药品和仪器1. 诺氟沙星（中国药品生物制品检定所，99.2%），标准溶液质量浓度为100 g/mL ，Al 3+标准溶液是用Al(NO 3)3（国药集团化学试剂有限公司，分析纯）配成浓度为0.1 mol/L ，实验所需的各种肉类食品为市场上随意购买，其他所用试剂均为分析纯，水为去离子水。
2. Fluoromax-4荧光分光光度计（法国JY 公司）；超声清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；万分之一电子天平（上海恒平科学仪器有限公司）；离心机（上海手术器械厂），pHS-3C 酸度计（上海精密科学仪器公司）。
五、实验步骤1. 样品前处理方法取2g 经绞碎的各种肉类食品，每次加入10 mL pH = 4的盐酸溶液超声提取三次，每次10 min ，各离心10 min （3000r/min ），合并三次上清液，加入1mL 的Al 3+标准溶液，定容至50 mL ，待测．2. 测定方法于5 mL 的具塞刻度试管中配制NFLX-Al 3+的最佳体系溶液，使体系溶液中C Al3+ = 2.0mmol/L、pH=4，静置5 min，取试液置于1 cm×1 cm石英液池中，设置激发和发射单色仪狭缝宽度均为5 nm，利用荧光分析法测定。
氟喹诺酮类药物残留检测国标解读
氟喹诺酮类药物残留检测国标解读氟喹诺酮类药物是一类广泛应用于人类和动物医疗领域的抗生素药物。
由于其广泛使用以及潜在的药物残留问题，对氟喹诺酮类药物残留进行检测和监管变得尤为重要。
为此，国家标准对氟喹诺酮类药物残留的检测方法和限量要求进行了规定。
国家标准对氟喹诺酮类药物残留的检测方法主要包括色谱法和质谱法。
色谱法是一种常用的分析方法，通过分离样品中的药物成分，再进行定量分析。
常用的色谱法包括高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱法（GC）。
质谱法则是一种能够识别和定量药物成分的高灵敏度分析方法，包括气相质谱法（GC-MS）和液相质谱法（LC-MS）。
这些分析方法能够快速准确地检测氟喹诺酮类药物残留。
国家标准还规定了氟喹诺酮类药物残留的限量要求。
限量是指在食品、饲料和水产品中，允许的最高残留量。
这些限量值是根据对药物的毒理学评估和风险评估结果确定的。
国家标准对不同食品和饲料中氟喹诺酮类药物的限量值进行了详细的规定，以确保人类和动物食品的安全。
氟喹诺酮类药物残留检测国标的解读对于药物残留监管机构、食品和饲料生产企业、检验检测机构以及消费者都具有重要意义。
对于药物残留监管机构来说，国家标准的解读能够帮助他们制定监管政策和规范，确保食品和饲料中的氟喹诺酮类药物残留不超过限量要求。
对于食品和饲料生产企业来说，国家标准的解读可以帮助他们确保产品符合法规要求，提高产品质量和竞争力。
对于检验检测机构来说，国家标准的解读则是他们进行检测和评估的基础，确保检测结果准确可靠。
对于消费者来说，国家标准的解读能够提供关于食品和饲料安全的信息，保护消费者权益。
总之，氟喹诺酮类药物残留检测国标的解读对于保障食品和饲料安全、规范药物残留监管具有重要意义。
各相关方应根据国家标准的要求，加强对氟喹诺酮类药物残留的监管和控制，以确保公众的健康和安全。
猪肉兽药残留检测技术防控措施
猪肉兽药残留检测技术防控措施随着我国经济水平的不断提升，人们的生活质量也有了很大的提高，猪肉作为我国居民的主要食用肉类，其安全性受到广大人民群众的重视，尤其是猪肉中兽药残留问题，成为了人们日常注重的重点问题。
为了提高猪肉的安全性，必须要做好猪肉中兽药残留的检测工作，并依据检测结果加强对容易出现问题的环节的防控工作，从而保障市场上猪肉的安全性，让人们吃上安全、放心的猪肉。
一、猪肉中兽药残留检测技术介绍在生猪的养殖过程中，兽药是必不可少的一种物质。
兽药能够有效提髙生猪的存活率，但是因为很多养殖户并没有对兽药的危害性有正确认识，所以在生猪养殖过程中大量使用兽药，最终导致猪肉中兽药残留严重，近年来猪肉中兽药残留严重超标的问题时有发生。
人们若经常食用这种兽药残留超标的肉类，会对身体健康有很大的负面影响，严重时甚至致畸、致癌。
不过，随着我国技术的进步，畜牧养殖行业也在不断朝着集约化、规模化、自动化方向发展，肉制品中药物残留问题也在慢慢减少。
猪肉中最常见的残留兽药有磺胺类、四环素类、佛喳诺酮类以及各种抗生素类药物。
当前，我国已经将兽药残留检测作为猪肉流通前的重要一环，通过专业的检测不但能够及时发现猪肉中存在的问题，还能最大程度保证猪肉的安全性。
下面，作者简单介绍一下猪肉中兽药残留的相关检测技术。
1・免疫分析法。
我国用于检测猪肉中兽药残留的技术有很多，大多都是对猪肉中一些元素成分的含量进行分析，免疫分析法就是我国最常见的猪肉兽药残留检测方法。
免疫分析法主要是利用了抗原和抗体，能够进行特异性结合和可逆性反应的特点而进行兽药残留检测。
这种检测方法的优点在于能够快速筛选，同时还有很高的选择性，且操作简单。
常见的免疫分析法主要包括酶免疫测定法、荧光免疫测定法、胶体金免疫测定法。
其中酶免疫测定法是使用范围相对较广、操作步骤也比较简单的测定方法，这种方法的具体原理是用特定的酶标记猪肉兽药残留中的一些元素以及同位素。
酶联免疫吸附法就是其中被大力推广的检测方法，它能够很好地测定猪肾脏中残留的镇静剂、氯丙嗪、B阻断剂卡拉洛尔等的含量，是我国当前猪肉兽药检测的主要方法。
猪肉中的抗生素残留问题与控制方法
猪肉中的抗生素残留问题与控制方法近年来，人们对食品安全问题的关注越来越高。
其中，农产品中抗生素残留问题引起了广泛的关注。
猪肉作为人们餐桌上的重要食材之一，其抗生素残留问题备受瞩目。
本文将探讨猪肉中抗生素残留的原因及相应的控制方法，以提高食品安全意识，保护消费者健康。
一、抗生素在猪肉中残留的原因抗生素在养殖过程中被广泛使用，其目的是预防和治疗猪只的疾病。
然而，不合理的使用和管理往往导致抗生素在猪肉中的残留。
主要原因包括：1. 滥用抗生素：一些养殖场为了提高猪只的生长速度和抗病能力，常常滥用抗生素，导致猪肉中抗生素残留严重。
2. 使用非法药物：一些不具备药品生产和销售资质的小作坊和黑市，使用非法的、不符合标准的抗生素，从而导致猪肉中抗生素残留。
3. 用药不规范：一些养殖户在使用抗生素时，没有按照药品说明书的要求进行正确的用药，导致抗生素滞留在猪体内，进而残留在猪肉中。
二、抗生素残留对人体健康的影响猪肉中的抗生素残留对人体健康带来了一定的风险。
抗生素残留可能导致以下问题：1. 抗生素耐药性：长期食用含有抗生素残留的猪肉，易导致人体内的细菌产生抗药性，从而使得抗生素治疗失效，增加了感染疾病的风险。
2. 过敏反应：一些人对某些抗生素过敏，食用含有抗生素残留的猪肉可能引发过敏反应，如皮疹、呼吸道症状等。
3. 残留物积累：长期摄入含有抗生素残留的猪肉，残留物可能积累在人体内，对人体器官和组织造成慢性损害，增加疾病的发生。
三、控制猪肉中抗生素残留的方法为了保障消费者的健康，控制猪肉中抗生素残留至关重要。
以下是一些控制方法的推荐：1. 加强监管：政府部门应加大对养殖场和药品销售商的监管力度，严厉打击非法使用和销售抗生素的行为，确保市场上销售的猪肉符合安全标准。
2. 提高标准：制定相应的养殖和药品使用标准，规定抗生素的使用剂量和使用周期，确保合理使用抗生素。
3. 加强兽药管理：加强兽药管理，禁止非法销售和使用不符合标准的兽药，以减少抗生素滥用的风险。
高效液相色谱法测定猪肉中氟喹诺酮类药物
猪 肉为 各 地 方送 检 样 品 。 乙腈 、 正 己烷 、磷 酸 二 氢钠 、磷 酸 天 津 市光 复 精 细 化 工研 究所 ； 三 乙胺 上 海 晶 纯 实 业 有 限 公 司 ； 无 水硫 酸 钠 烟 台三 和 化 学试 剂有 限 公司 。 ｌ 仪 器 与设 备 － ２
童中枢神经系统 的副作用也有报道 ，另氟喹 诺酮类药物 还有潜在的致癌性和遗传毒性 ，同时还容 易使病菌产生
耐药 性 ，所 以欧盟 和 北 美等 国家 只 批准 恩 诺 沙星 为动 物 专 用 的 抗 菌 药 ， 环 丙 沙 星 已禁 止 在 水 产 养 殖 业 中 使用 。 动物 源 性 食 品 的安 全 性 ，对 其 残 留最 的检 测 越 来越 受 到 关注 【 ｌ ＿ 。氟 喹 诺酮 类 药物 在动 物 组织 中的残 留分析 方 法 主 要 有 酶联 免疫 吸 附测 定法 （ Ｌ Ｓ 、高 效 液相 色 谱法 Ｅ Ｉ Ａ） （ Ｐ Ｃ ｔ 和液 相色谱 一 Ｈ Ｌ） 】 质谱法（ ＣＭＳ。本方 法研 究建 立 Ｌ — ） 的 Ｈ Ｌ ．Ｌ Ｐ Ｃ Ｆ Ｄ检测方法 ＿］ ９】 ＿ ，用 １ 醋酸 一 腈 溶液 ［ １作 Ｉ ％ １５ ４】 － 为提 取 液 ， 町同 时检 测 猪 肉 中环 丙 沙星 、恩 诺沙 星 两 种 氟 喹 诺 酮 类 药 物 ， 该 方 法 分 析 时 间 短 、 操 作 简 单 、 节
文献标识码 ：Ａ
文章编号 ：１０ ．１ ３２ ）００ ２ —３ ０ １８ ２ （０ １１．０ ９０
氟 喹诺 酮（ ｕ ｒｑ ｉｏｏ ｅ ，Ｆ ｓ类 药 物 ，具 抗菌 ｎ ｏｏ ｕｎ ｌｎ ｓ Ｑ ） 谱 广 、 高 效 、 低 毒 、 组 织 穿 透 力 强 等 特 点 ， 目前 氟 喹诺 酮 类 药 物在 医学 和 兽 医学 中应 用广 泛 ，但 其 残 留可 导致 人 体 病 原体 的耐 药 性 ，而 Ｈ有 关 氟喹 诺 酬 类 药物 儿 ．
畜禽肉制品中氟喹诺酮类药物残留检验检测方法的研究进展
畜禽肉制品中氟喹诺酮类药物残留检验检测方法的研究进展摘要：氟喹诺酮类药物在畜牧、水产等养殖业应用广泛，但由于其给药过程中仅有一部分药物能被生物体吸收转化，并以代谢产物的形式排除体外，大部分的药物则以原型药物的形式经生物体进入自然环境，因此对各类畜、禽产品氟喹酮类抗生素残留量的检测越来越受到监管部门和检测机构的重视。
本文将综述氟喹诺酮药物残留的重要检测方法,并阐述我院关于肉类食品中氟喹诺酮类药物残留检测方法的研究进展。
关键词：氟喹诺酮类药物；联用技术；固相萃取1 氟喹诺酮类药物介绍氟喹诺酮类药物是上个世纪80年代开发出来的第三代喹诺酮类抗菌药物，代表产品有诺氟沙星（Norfloxacin hydrochloride）、氧氟沙星（Ofloxacin）、环丙沙星（Ciprofloxacin）、恩诺沙星（Enrofloxacin）、盐酸沙拉沙星（Sarafloxacin hydrochloride）、加替沙星（Gatifloxacin）、巴洛沙星（Balofloxacin）等。
氟喹诺酮类药物因为其有结构相似、取代位点多、抗菌谱广、药物活性高等特性而受到广泛的应用。
上述常见的氟喹诺酮类药物结构式如图1所示，这类药物的作用机理是可直接作用于细菌的细胞核，通过抑制细菌的DNA旋转酶，使旋转酶不能在DNA的双链上引入切口，进而从分子机制上破坏细菌的代谢和增殖，如此既能杀灭细菌也能抑制细菌繁殖。
图1 几种常见氟喹诺酮药物的分子式欧盟自1999年开始对动物的肌肉、肝和肾中氟喹诺酮类兽药残留量规定限值；在中国加入WTO后，对我国出口的动物源性食品中氟喹诺酮类抗生素的残留量实施监测，将检测残留限量控制在0.05mg/kg以内。
联合国粮农组织FAO规定氟喹诺酮类抗生素在牛、猪、禽等可食用肌肉组织中的允许残留量为0.2mg/kg。
我国虽然对喹诺酮类药物开发应用研究较晚，但目前氟喹诺酮类药物经过药监局批准的已经有十余种，其中主要有诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星等。
畜产品中喹诺酮类药物检测技术
畜产品中喹诺酮类药物检测技术随着畜牧业的发展和畜产品的广泛消费，药物残留成为食品安全领域的一个重要问题。
喹诺酮类药物是一类常用的抗生素，被广泛用于畜禽养殖以预防和治疗疾病。
喹诺酮类药物在畜产品中的残留问题一直备受关注，因为其残留会对人体健康造成影响。
开发和应用高效、灵敏、快速的畜产品中喹诺酮类药物检测技术成为当前的研究热点之一。
喹诺酮类药物包括氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星等多种成员，它们广泛用于家禽、家畜以及水产养殖中。
目前，常用的检测方法包括高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS/MS）、酶联免疫吸附法（ELISA）、光学传感技术等。
这些技术在喹诺酮类药物残留检测中起着至关重要的作用。
HPLC-MS/MS技术是一种高效的色谱质谱联用技术，它结合了高效液相色谱和质谱的优势，具有灵敏度高、选择性好、分析速度快等优点。
该方法可以对畜产品中喹诺酮类药物进行准确、快速的定量分析，同时可以对多种样品进行高通量分析，适用于大规模的畜产品安全监测和检测需求。
由于其高效性和可靠性，HPLC-MS/MS技术已成为目前喹诺酮类药物残留检测的主流方法之一。
除了HPLC-MS/MS技术外，酶联免疫吸附法（ELISA）也是一种常用的喹诺酮类药物残留检测技术。
ELISA技术基于抗体与抗原的特异性结合原理，通过对反应的光学信号进行测量来定量检测样品中的药物残留。
ELISA技术具有操作简便、分析周期短、灵敏度高等优点，适用于实验室内的小样品分析和初步筛查。
与HPLC-MS/MS技术相比，ELISA技术的特异性和准确性稍显不足，因此在实际应用中通常需要结合其他检测技术来验证结果。
光学传感技术也是一种新兴的畜产品中喹诺酮类药物残留检测方法。
该技术利用光学传感器对样品中的特定化合物进行实时监测和分析，具有实时性强、操作简便、成本低廉等特点。
光学传感技术在喹诺酮类药物残留检测中具有较大的应用潜力，尤其适用于快速筛查和现场监测。
快速分离柱HPLC测定猪肉中氟喹诺酮类兽药的残留
第１ ６卷 第 ３期 ２０ ０７年 ７月
云南民族大学学 报（ 自然科学版 ） Ｊｕ ａ ｏ Ｙ ｎ ａ ａｉ ａ ｔ ｓＵ ｉｅｓｙ Ｎ ｔｒ ｃ ｎｅ ｄｔ ｎ ｏｒ ｌ ｆ ｕ ｎｎ Ｎ ｔ ｎｌ ｅ ｎｖｒｔ（ ａ ａ Ｓｉ ｃｓＥ ｉｏ ） ｎ ｏ ｉ ｉ ｉ ｕｌ ｅ ｉ
Ｓａｌ Ｂ ｕｄ（ ． ｔｂ ｏｎ ４ ６ｍｍ× ０ｉｎ ． ｍ）快速分离柱为 固定相 ，０ 的乙腈 （ ０ １ 的磷 酸） ｅ ５ ｌ，１８ ｎ ２％ 含 ．％ 为流动 相 ， 检测 波长为 ２ １ｎ ８ ｍ，
主要氟喹诺酮类兽药在 ３５ ｉ ． ｍｎ内可达到基线分离 ． 待测组分与峰 面积在 ０２～ ０￣／ Ｌ内成 良 的线性 关 系 ， ． ５ ｇｍ Ｉ 好 方法检 出 限
ｔｌ ｃｎ ｉｉｇ０ １ ｏ ｈ ｓｈ ｔ ｃｄ ｓ ｂｌ ｐ ａｅａ ｏ ｒｅ（ｏ ｔ ｎｎ ． ％ ｆ ｏｐ ａ ｃａｉ）ａ ｉ ｈ ｓ ｔ ｆ ｗ—ｒｔ ｏ ． ／ ｉ ｎ ｅ ｃ ｄ ａ ２ ｉ ａ ｐ ｉ ｍｏ ｅ ａｌ ａ ｆ ０ ｍＬ ｍ ｎａ ｄ ｄｔ ｔ ｔ ８ ｅ ２ ｅｅ １ ｎ ．Ｔ ｅｓｖｎｆ ｏｏｕｎ ｌ ｅ ａ ｅｓｐｒｔｄｃｍｐｅ ｌ ｉ ． ｎ ｈ ｅｌ ｔ ｏ ｅ ｃ ｏ Ｌ Ｄ ｅｅ ｉ ｈ ｅｅ ｕ ｒｑ ｉ ｏ ｓ ｎｂ ｅ ａａ ｏ ｌ ｅ ｗｔ ｉ ３ ５ｍｉ．Ｔ ｍｉ ｆ ｔ ｔ ｎ（ Ｏ ）ｗ ｒ ｎ ｌ ｏｎ ｃ ｅ ｔｙ ｈ ｎ ｉ ｓ ｄｅｉ
摘 要 研究了用快速分离柱高效液相色谱法测定猪 肉 中 ７种 氟喹诺酮 类兽药残 留 的方 法 （ 恩诺沙 星、 环丙 沙星 、 氧 左
氟沙星 、 依诺沙星 、 诺氟沙星 、 氟罗 沙星及洛 美沙星 ） 样 品采用 １ ． ％醋 酸／ 乙腈提取 ， ｃ 经 固相 萃取小 柱预 分离 ； Ｚ Ｒ Ａ 以 Ｏ ＢＸ
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
１材料和 Байду номын сангаас法
１ ． １试验 材 料和 主要 仪 器 岛津 Ｌ Ｃ ． ２ ０ Ａ高 效液 相色 谱系 统 ，包 括二 元象 、自动进 样 器、 荧 光检 测器 、柱 温箱 、Ｌ Ｃ — ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ工 作站 ；色 谱柱 Ｗｏ ｎ ｄ ａ Ｓ ｉ ｌ Ｃ １ ８ Ｓ ｕ ｐ ｅ ｒ ｂ （ ４ ． ６ ｍｍｘ ２ ５ ｍｍ，５ ｐ ｍ） ；固相 萃 取小 柱 Ａ ｇ ｉ ｌ ｅ ｎ ｔ １ ０ ０ ｍｇ ／ ｌ ｍ Ｌ，Ｓ ｕ ｐ ｅ ｌ ｃ ｌ ｅ ａ ｎ １ ０ ０ ｍｇ ／ ｌ ｍ Ｌ ；高速 匀浆 机和 振荡 器（ Ｉ Ｋ Ａ，德 国） ： 离心 机 （ Ｔ ＧＬ ． １ ６ Ｇ，上 海 安亭 ） ；天 子天 平（ Ｅ Ｌ ｌ ０ ４ ，梅特 勒） 。 环 沙 、达 氟 沙 星 、 恩 诺 沙 星 和 沙 拉 沙 星 标 准 品 （ 德 国 Ｄ ｒ ． Ｅ ｈ ｒ ｅ ｎ ｓ ｔ ｏ ｒ ｆ ｅ ｒ ） ，磷 酸 、氯 氧 化钠 、三 乙胺 、磷 酸 ■ 氧 钾 、王 氯 乙酸 （ 分 析纯 ，Ｊ ｌ 试 剂厂 ） ，甲醇（ 色 谱纯 ， Ｍｅ ｒ ｃ ｋ ） 、乙腈（ 色谱 纯 ， Ｍｅ ｒ ｃ ｋ ） ，供试 样 品为 市售 新鲜 猪 肉。 １ ． ２ 溶液 制 标 准溶 液 ：分 别取 达氟 沙星 标准 品约 １ ０ ｍｇ ，恩 诺沙 星 、环 丙沙 和沙 拉沙 星标 准 品各 约 ５ ０ ｍ ｇ ，精 密称 定 ，用 Ｏ ． ０ ３ ｍｏ ｌ ／ Ｌ 氢氧化钠溶液溶解并稀释成浓度 为 ０ ． ２ ｍ ｇ ／ ｍＬ （ 达 氟沙 星） 和 ｌ ｍ ｇ ／ ｍＬ （ 恩 诺 沙 星 、环 丙沙 星 、 沙拉 沙星 ） 的标 准储 备 液 。然 后 准 确鼙 取 适精 标准 储 备液 用 乙腈稀 释成 １ 、５ 、１ ０ 、５ ０ 、ｌ ０ ０和 ２ ０ ０ ｐ ｇ ／ Ｌ （ Ｏ ． ２、ｌ 、２ 、１ ０ 、２ ０和 ４ ０ ｐ ｇ ／ Ｌ） 的标 准工 作液 。
２ ０ １ ５年 第 ６ 期
第４ ２ 卷 总第 ２ ９ ６ 期
广
东
化
工
１ ６ ９
ｗｗｗ． ｇ ｄ ｅ ｈ ｅ ｍ． ｅ ｏ ｍ
猪 肉中氟喹诺酮类 药物残 留检 测 国标方法 的改进
李丰 ，郝 燕 娟 ， 叶竹 林 ， 陈妙 婵 ，何彩 凤 ，彭 志 通
（ ， ‘ 州｝ Ｌ ＝ 标 枪测 技 术 中心 ，Ｊ 一东 广 州 ５ １ ０ ３ ０ ０ ）
ｍｉ ｘ ｕｒ ｔ ｅ ｏ ｆ ａ ｃ ｅ ｔ ｏ ｎ ｉ ｔ ｒ ｉ ｌ ｅ ａ ｎ ｄ Ｔ Ｃ Ａ（ ｔ ｈ ｅ ｍａ ｓ ｓ ｆ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ２％） ， ｈ ｉ ｇ ｈ － ｓ ｐ ｅ ｅ ｄ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ｉ ｆ ｕ ｇ ａ ｌ ｐ ｕ ｉ ｒ ｉ ｆ ｃ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ， ｈ ｉ ｇ ｈ ｐ ｅ ｆｏ ｒ ｒ ｍａ ｎ ｃ ｅ ｌ ｉ ｑ ｕ ｉ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍ ａ ｔ ｏ ｇ ｒ ａ ｐ ｈ ｙ ｗｉ ｔ ｈ ｌ ｆ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｏ ｒ ．
氟 喹 讲酮类 足 一类 人 工合 成 的广谱 杀 菌性 抗 菌药物 ， 其 抗 菌 谱广 、抗 菌 活性 强 、 与其它 抗菌 药物 无 交叉 耐 药性 等特 点而 广 泛 应用 ｒ 禽和 水 产养 殖 业 【 ｌ 】 ，如 环 丙沙 星 、达氟 沙星 、恩诺 沙 星 和沙 拉沙 星 等 。此类 药 物使 用 不当 导致 的药 物残 留可能 直接 危 害 人 体健康 ，也 ｜ 丁 能 使致病 菌 产 生耐 药性 ， 接对 人 类健 康造 成 影 响 ，闪此 人 们越 来越 关注 氟喹 诺 酮类 药物 的残 留 安全 问题 ｌ 】 － ２ 】 。 联 合 田 粮 农组 纵 ／ 世 界卫 生 组 织食 品添 加 剂专 家联 席 委 员会 、欧 盟 、美 国 Ｆ Ｄ Ａ 等 都制 定 了相应 的最 高 残 留限量 和禁 用 法规 ，我 国 侄２ ０ ０ ２ 年 公 夼 的农业 部 ２ ３ ５ 号公 告规 定 了部 分氟 喹诺 酮类 药物 在 动 物肌 肉组 织 中 的最 高残 留限 量为 ｌ ０ ～ ５ ０ ０ ｐ ｇ ／ ｋ ｇ Ｉ ｊ Ｊ 。 氟 喹 诺酮 类药 物在 动物 源 食 品中 的残 留分 析方 法 主要 有酶 联 免 疫Ｉ 吸附法 （ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ ） 、高效 液相 色谱 法（ Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ） ￣ ［ Ｉ 高效 液相 色谱 ． 质 谱 联用 法 （ Ｈ Ｐ Ｌ ｃ — ＭＳ ） 等【 ４ Ｊ 。 目前 ，在猪 肉产 品的 检测 中， 主要 用 到 困 家标准 方法 《 动物 性食 品 中氟喹 诺 酮类 药物 残 留检测 ． 高 效液 相 色谱 法 》 ｆ 农 业部 １ ０ ２ ５弓公 告 １ ４ － ２ ０ ０ ８ ） Ｊ 。笔者 在研 究过 程 中发 现 ，此 国标 方 法 的净化 步骤 不 能完 全 收集 目标 物 ，造 成回 收率 偏 低 。本 研 究针对 回收 率偏低 问题 ，对 国标 方法 的提 取 、净 化步 骤 进 行 改进 、优化 。经试 验验 证 ， 改进后 的方 法 的检 出限 、回收 率 符 合要 求 ，简便 、高效 、准 确 。
Ｉ ｍ ｐｒ ｏ ｖｅ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｄｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ Ｍｅ ｔ ｈｏ ｄ ｆ ｏ ｒ Ｆｌ ｕＯ ｒ Ｏ ｑｕｉ ｎＯ ｌ Ｏ ｎｅ ｓ Ｒｅ ｓ ｉ ｄ ｕｅ ｓ ｉ ｎ Ｐｏ ｒ ｋ ｏ ｆ
Ｎａ ｔ ｉ ｏ ｎａ ｌ Ｓ ｔ ａ ｎｄａ ｒ ｄ
Ａｂｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：０ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ：Ｍ ｉ ｎｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ｏ ｆ Ａｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕｒ ｅ Ｂｕ ｌ ｌ ｅ ｔ ｉ ｎ Ｎｏ ．１ ０２ ５ ｌ ４ — ２ ０ ０ ８“ Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｌｕ ｆ ｏ ｒ ｏ ｑ ｕ ｉ ｎ ｏ ｌ ｏ ｎ ｅ ｓ ｒ ｅ ｓ ｉ ｄ ｕ ｅ ｓ ｉ ｎ ａ ｎｉ ｍａ ｌ ｄ ｅ ｒ ｉ ｖ ｅ ｄ ｏ０ ｆ ｄ ｂ ｖ ＨＰ ＬＣ”
ｉ ｐ ｒ ｏ ｌｏ ｆ ｘ ａ ｃ ｉ ｎ ，ｄ ａ ｎ ｏ ｌ ｆ ｏ ｘ ａ ｃ ｉ ｎ ，ｅ ｎ ｒ ｏ ｌ ｆ ｏ ｘ ａ ｃ ｉ ｎ ａ ｎ ｄ ｓ ａ ｒ ａ ｌｏ ｆ ｘ ａ ｃ ｉ ｎ ｗｅ ｒ ｅ １ ２ ． ４ ｐ ｇ ／ ｋ ｇ ，３ ． ６¨ ｋ ｇ ，１ ３ ． ５／ ． ｔ ｇ ／ ｋ ｇ ，ｌ ８ ５ ｐ ｇ ／ ｋ ｇ ．Ｃｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ：Ｔ ｈ ｅ ｉ ｍｐ ｒ ｏ ｖ ｅ ｄ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｗａ ｓ ｓ ｉ ｍｐ ｌ ｅ ， ｃ ｏ ｎ ｖ ｅ ｎ ｉ ｅ ｎ ｔ ． ｅ ｉｃ ｆ ｉ ｅ ｎ ｔ ａ ｎ ｄ ａ ｃ ｃ ｕ ｒ ａ ｔ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ， ｗｈ ｉ ｃ ｈ Ｗａ Ｓ ｓ ｕ ｉ ｔ ａ ｂ ｌ ｅ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｌ ｆ ｕ ｏ ｒ ｏ ｑ ｕ ｉ ｎ ｏ ｌ ｏ ｎ ｅ ｓ ｒ ｅ ｓ ｉ ｄ ｕ ｅ ｓ ｉ ｎ Ｐ ｏ ｒ ｋ Ｋｅ ｙ ｗｏ ｒ ｄ ｓ ： ＨＰ ＬＣ； ｆ ｌｕ ｏ ｒ ｏ ｑ ｕ ｉ ｎ ｏ ｌ ｏ ｎ ｅ ｓ ；ｏ ｏ ｒ ｋ； ｉ ｍｐ ｒ ｏ ｖ ｅ ｍｅ ｎ ｔ
提取 溶 液 ：磷 酸盐 缓冲 溶液 ：取磷 酸 ＿ Ｉ Ｉ 氯钾 ６ ． ８ ｇ ，加 水使 溶 解 并稀释 至 ５ ０ ０ ｍＬ ，ｐ Ｈ为 ４ ． ０ ～ ５ ． ０ 。三 氯 乙酸／ 乙腈溶 液 ：称取 ２ ｇ 三 氯 乙酸于 容 量瓶 中 ，加水 定容 到 １ ０ ０ ｍＬ ，得 到 的三氯 乙酸 溶 液 与 乙腈 按 体积 比 ３： １ 的 比例 混 合 ，搅拌 均匀 ，备 用 。 磷 酸／ 三 乙胺 溶液 ：取 磷酸 ３ ． ４ ｍＬ ，用 水稀 释至 １ ０ ０ ０ ｍ Ｌ 。用
ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｐ ｕ ｒ ｉ ｉｃ ｆ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ｔ ｅ ｐ ｓ ｔ ｏ ｉ ｍｐｒ ｏ ｖ ｅ ，ａ ｉ ｍｅ ｄ ａ ｔ ｉ ｍｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｇ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｙ ａ ｎ ｄ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｅ ｉｃ ｆ ｉ ｅ ｎ ｃ ｙ Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ：Ｔｈ ｅ ｅ ｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｎ ｇ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｐ ｏ ｒ ｋ ｓ ａ ｍｐ ｌ ｅ ｓ ｉ ｎ ｃ ｌ ｕ ｄ ｅ ｓ ａ
Ｌ ｉ Ｆ ｅ ｎ ｇ ， Ｈ ａ ｏ Ｙ ａ ｎ ｊ ｕ ａ ｎ ， Ｙｅ Ｚ ｈ ｕ ｌ ｉ ｎ ， Ｃ ｈ ｅ ｎ Ｍｉ ａ ｏ ｃ ｈ ａ ｎ ， Ｈｅ Ｃ ａ ｉ ｆ ｅ ｎ ｇ ， Ｐ ｅ ｎ ｇ Ｚ ｈ ｉ ｔ ｏ ｎ ｇ
（ Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｈｕ ｉ ｂ ｉ ａ ｏ Ｔ ｅ ｓ ｔ ｉ ｎ ｇ Ｔｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ Ｃｅ ｎ ｔ ｅ ｒ ， Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ５ １ ０ ３ ０ ０ ， Ｃｈ ｉ ｎ ａ ）
Ｒｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ： Ｔｈ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｉ ｅ ｓ ｏ ｆ ｏｕ ｆ ｒ ｌ ｆ ｕ ｏ ｒ ｏ ｑ ｕ ｉ ｎ ｏ ｌ ｏ ｎ ｅ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ８１ － ３％ ～ １ Ｏ ３ ． ５％ ａ ｔ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｓ ｐ ｉ ｋ ｅ ｄ ｌ ｅ ｖ ｅ １ ． ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｅ ｃ ｉ ｓ ｉ ｏ ｎ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ０ ． ２ ％￣ ４ ． 】％．Ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ｍｉ ｔ ｏ ｆ ｑ ｕ ａ ｎ ｔ ｉ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏｆ
［ 摘 要】 目的：对 农 业部 １ ０ ２ ５号公 告 １ ４ — ２ ０ ０ ８《 动 物性 食 品中 氟喹 诺酮 类药 物残 留检 测． 商 效液 相色 谱法 》的 提取 净化 步骤 进行 改进 ， 旨在 提高 方法 回 收率和 检 测 效率 。方 法 ：样 品改 用体 积 比 ３：１ 的三 氯 乙酸（ ２ ％质璺 分数 ） 溶 液 与 乙腈溶 液提取 高 速离 心净 化 ，高效 液相 色谱 荧光 检 测器 测定 。 结果 ：加 标低 、 中、高 浓度 水平 ， 回收 率为 ８ １ ＿ ３ ％￣ １ ０ ３ ． ５ ％ ，精 密 度为 ０ ． ２％＂ － ４ ． １ ％。方 法检 测环 丙沙 星 、达氟 沙星 、恩 诺沙 星和 沙 拉沙 星 的定 量 限分别 为 １ ２ ． ４ ｐ ． ｇ ／ ｋ ｇ 、３ ． ６￣ ｇ ／ ｋ ｇ 、１ ３ ． ５ ａ ｌ ｇ ／ ｋ ｇ 、１ ８ ． ５￣ ｇ ／ ｋ ｇ 。结 论 ：改善 后 的方法 简便 、离效 、准 确 ，能满 足猪 肉 中氟喹 诺酮 类药 物 残 留的检 测 ［ 关键 词】 高效 液相 色谱 ；氟 喹 诺酮类 药 物 ；猪 肉 ：改进 【 中 图分类 号］ ０ ６ ５ ［ 文献 标识 码 】 Ａ 【 文 章编 号］ １ ０ ０ ７ １ ８ ６ ５ （ ２ ０ １ ５ ） ０ ６ ． ０ １ ６ ９ ． ０ ２