微生物形态学检验
检验科微生物(细菌)室检测项目有哪些
检验科微生物(细菌)室检测项目有哪些发布时间：2023-06-16T11:56:01.495Z 来源：《医师在线》2023年3月5期作者：舒宇[导读]检验科微生物(细菌)室检测项目有哪些舒宇（成都市温江区人民医院；四川成都611130）微生物(细菌)是检验科常见检测项目之一，其包含的检验项目众多，下面就来说说检验科微生物(细菌)室检测项目有哪些？1.细菌分离培养细菌分离培养包含了血培养、痰培养、咽拭子培养、尿培养、粪便培养、脑脊液培养等，其中，血培养检测能检出血液中的多种细菌，如表皮葡萄球菌、布鲁氏菌、厌氧菌、真菌等，从而能诊断出菌血症、亚急性心内膜炎、败血症等疾病。
痰培养能检出?肺炎克雷伯氏菌、结核杆菌、奈瑟氏菌、甲型链球菌等，从而能检出肺炎、结核病等疾病。
咽拭子培养主要是采取患者咽部及扁桃体分泌物作细菌培养，这是因为鼻、咽部的细菌感染病原菌多源于口腔，通过咽拭子培养能找到细菌感染的源头。
尿培养主要是取患者尿道排出的中断尿作为检验标本，利用标本制作玻片，然后，将玻片置于显微镜下观察细菌形态和数量，该项检验技术不仅能准确反映出尿道、肾脏、前列腺等部位的炎症变化，从而为临床诊断泌尿道系感染疾病提供可靠的参考依据，还能指导临床选择有合理的抗菌药物对患者治疗，从而提升其抗菌治疗效果。
粪便培养不仅能检测出肠道内的致病菌，从而指导临床准确诊断出受检者肠道健康状态和肠道疾病类型，还能监测肠道菌群，提醒临床及时给患者提供合理的肠道菌群调节，从而能有效避免患者发生菌群紊乱。
脑脊液培养能检测受检者脑脊液中是否存在细菌、真菌和结核菌等病原菌，从而能判断其是否存在脑脊髓膜炎。
2.血清学检测血清学检测包含了革兰阴性菌脂多糖检测、真菌（1-3）-β-D-葡聚糖检测、新型隐球菌抗原检测等，其中，革兰阴性菌脂多糖检测主要是以鲎实验对内毒素进行检测，能检测出革兰氏阴性细菌败血症、革兰氏阴性细菌感染、内毒素血症等疾病。
真菌（1-3）-β-D-葡聚糖是真菌细胞壁上特有的成分，其他微生物中均不含有该物质，因此，真菌（1-3）-β-D-葡聚糖检测是诊断真菌感染的重要依据。
微生物分类鉴定方法
微生物分类鉴定方法
微生物分类鉴定方法是指利用生物学和化学原理,对微生物进行分类和鉴定的方法。
随着微生物学的不断发展,微生物分类鉴定方法也在不断更新和完善。
下面将介绍几种常见的微生物分类鉴定方法。
1. 双盲分离法
双盲分离法是指将待分类的微生物样本随机分成两组,一组用于实验,一组用于对照。
实验组和对照组分别使用不同的培养基进行培养,然后通过分离技术将两种培养基中的微生物进行分离。
通过双盲分离法可以消除实验者的主观因素,提高分类的准确性。
2. 形态学鉴定法
形态学鉴定法是指通过观察微生物的形态结构,对其分类进行鉴定的方法。
常见的形态学鉴定方法包括细胞壁结构、细胞骨架、鞭毛、伪足等特征。
通过比较不同微生物的形态结构,可以初步确定其分类方向。
3. 基因组学鉴定法
基因组学鉴定法是指通过分析微生物的基因组序列,对其分类进行鉴定的方法。
基因组学鉴定法可以通过比对微生物基因组序列,确定其属于同一类微生物的不同亚种。
该方法对于复杂微生物的鉴定和分析非常有用。
4. 代谢谱鉴定法
代谢谱鉴定法是指通过分析微生物代谢物的结构、组成和功能,对其分类进行鉴定的方法。
代谢谱鉴定法可以确定微生物的代谢途径和代谢物,从而确定其分类方向。
除了上述方法外,还有其他许多微生物分类鉴定方法,如免疫学鉴定法、荧光
法、PCR法等。
不同的分类方法有不同的优缺点,选择合适的分类方法,可以有效提高微生物分类鉴定的精度和效率。
微生物试验-细菌的人工培养及形态学检查
实验一 细菌的人工培养
一、细菌在自然界的分布
1.空气中细菌的检查：每班两个血平板，标记 方法：在室内选择一处放一个平皿，揭开皿盖，
暴露放置10min，即盖上皿盖，放入37℃温箱 培养24小时，观察结果。
2.人体表面细菌的检查---手 指（每组1个平皿）
方法：取一普通平皿培养 基，一部分标记“前”， 另一部分标记“后”，然 后将手指在标记“前”的 部分沾一下，洗手后在标 记“后”的部分沾一下。 放入37℃温箱培养24h后 观察细菌的生长情况。
呼吸道咽部常驻菌群种类较多，正常人咽部需氧菌 中，甲型链球菌检出率最高，其次是奈瑟球菌属和表 皮葡萄球菌。
二、 理化因素对细菌的影响
1.物理因素对细菌的影响---紫外线
原理：紫外线主要作用于 DNA，使一条DNA链上相邻 的两个胸腺嘧啶以共价键结合成二聚体，从而干扰 DNA 的复制与转录导致细菌变异或死亡。
3.人体内部细菌的检查--咽喉部
方法：用“咳碟法”进行检查，取一个血琼脂平 皿培养基，打开平皿盖，置于口腔前约 10cm， 对着平皿咳嗽几次，标记时间，姓名，然后放 入37℃温箱培养24h后观察菌落特征。
二、外界因素对细菌的影响：
1.物理因素对细菌的影响 ：
紫外线：全班两份普通平板：一组大肠杆菌， 一组葡萄球菌，比较紫外线对G+，G-的抑制作 用。
满足a充足的营无菌
（三）分类：1、按物理性状
分类：
+0.3~0.5%琼脂
+1.5~2.5%琼脂
半固体培养基 液体培养基
固体培养基
观察细菌动力 大量繁殖细菌 细菌的分离和纯化
短期保存菌种
固体平板培养基
液体培养基
固体斜面培养基 半固体培养基
「微生物检验」形态学检查对细菌鉴定的导航作用
「微生物检验」形态学检查对细菌鉴定的导航作用「微生物检验」形态学检查对细菌鉴定的导航作用细菌鉴定的原则之一就是用最少的试验完成鉴定。
细菌形态学检查是最基本、简单、快速的常规鉴定方法。
细菌形态学包括细菌细胞形态学和细菌菌落形态学。
细菌形态学正确描述依赖于方法、培养基、培养时间、染色试剂等，培养基和培养时间不同会影响细菌的形态。
下面是yjbys店铺为大家带来的关于形态学检查对细菌鉴定的导航作用的知识，欢迎阅读。
1 菌落特征观察细菌在固体培养基表面生长形成菌落。
对菌落进行描述应包括菌落大小(分大、中、小，以1mm为界)、形状、高度、边缘、表面状态、密度(透明度)、硬度(用接种环刮取菌落时的感觉)、菌落内部结构、颜色、光泽以及与培养基表面的黏附程度，还应包括菌落的溶血、气味和色素产生情况等特性。
观察菌落特征的目的是为了对细菌进行初步鉴定。
有些特征是某些细菌所特有的，具有属或种的鉴别价值，如肺炎链球菌在绵羊血琼脂平板上的脐窝状菌落(如图1所示)、伴放线凝集杆菌菌落特殊的内部结构(如图2所示)、侵蚀艾肯菌的斗笠样菌落、斯氏假单胞菌皱纹样菌落、变形杆菌迁徙样菌落、铜绿假单胞菌的水溶性色素、紫色色杆菌的'脂溶性色素(如图3所示)、粘质沙雷菌的红色色素(如图4所示)、产吲哚金黄杆菌产生的吲哚气味、嗜血杆菌产生的鼠穴气味、诺卡菌产生的腐土气味、厌氧菌产生的腐氨气味、荧光假单胞菌产生的黄色荧光素、某些厌氧菌可产生砖红色荧光素等。
有些细菌产生色素受到气体的影响(粘质沙雷菌在厌氧环境下不产色)，有些细菌产生色素受到光线的影响(某些快速生长分枝杆菌是光产色或暗产色)。
对细菌菌落特征的观察和描述是细菌鉴定的第一步骤，其主要目的体现在以下几方面。
1.1 病原菌定量或半定量在对标本进行定量或半定量接种后，通过菌落计数可获得定量或半定量结果，细菌的定量在尿液分析和疗效动态观察中具有临床意义，半定量适用于开放性标本的结果分析(确定优势菌)。
现代微生物学检验基本技术
现代微生物学检验基本技术随着现代医学及相关科学技术的发展，各学科相互交叉和渗透，医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平，许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。
医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术，准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物，并对引起感染的微生物进行耐药性监测，为临床对感染性疾病诊断、治疗、流行病学调查及研究等提供科学依据。
第一节微生物形态学检查细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一，它是细菌分类和鉴定的基础，可根据其形态、结构和染色反应性等，为进一步鉴定提供参考依据。
一、显微镜检查由于细菌个体微小，肉眼不能看到，必须借助显微镜的放大才能看到。
一般形态和结构可用光学显微镜观察，其内部的超微结构则需用电子显微镜才能看清楚。
常用显微镜有如下几种。
1．普通光学显微镜采用自然光或灯光为光源，其波长约为0.4μm。
显微镜的分辨率为波长的二分之一，即0.2μm，而肉眼可见的最小形象为0.2mm。
故用油（浸）镜放大1 000倍，能将0.2μm的微粒放大成肉眼可见的0.2mm。
普通光学显微镜可用于细菌、放线菌和真菌等的观察。
2．暗视野显微镜常用于观察不染色微生物形态和运动。
在普通显微镜安装暗视野聚光器后，光线不能从中间直接透入，视野呈暗色，当标本接受从聚光器边缘斜射光后可发生散射，因此可在暗视野背景下观察到光亮的微生物如细菌或螺旋体等。
3．相差显微镜相差显微镜利用相差板的光珊作用，改变直射光的光位相和振幅，将光相的差异转换为光强度差。
在相差显微镜下，当光线透过不染色标本时，由于标本不同部位的密度不一致而引起光相的差异，可观察到微生物形态、内部结构和运动方式等。
4．荧光显微镜荧光显微镜与普通光学显微镜基本相同，主要区别在于光源、滤光片和聚光器。
目前大多数使用的是落射光装置，常用高压汞灯作为光源，可发出紫外光或蓝紫光。
滤光片有激发滤光片和吸收滤光片二种。
用蓝光的荧光显微镜除可用一般明视野聚光器外，也可用暗视野聚光器，以加强荧光与背景的对比。
微生物分类鉴定方法
微生物分类鉴定方法微生物分类鉴定是微生物学领域的重要研究内容之一，它涉及到对微生物的形态、生理生化特性、遗传特征等方面进行综合鉴定和分类。
准确地鉴定和分类微生物对于了解其生态学、分子进化等方面的特征以及应用于医学、农业等领域具有重要意义。
本文将介绍几种常用的微生物分类鉴定方法。
1.形态学鉴定法：形态学鉴定法是最传统和常用的微生物分类鉴定方法。
通过观察微生物在显微镜下的形态特征，如细胞形态、细胞大小、结构特征、胞壁形态等来对微生物进行鉴定和分类。
例如，革兰氏染色可以用于区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌；芽孢形态特征可以用于区分芽孢杆菌属和其他杆菌属等。
2.生理生化鉴定法：生理生化鉴定法是通过微生物对不同生理生化试验的反应特征来鉴定和分类微生物。
常用的试验包括碳源利用试验、氧需求性试验、双氧水试验、酸碱度试验等。
例如，氧需求性试验可以区分厌氧菌和好氧菌；双氧水试验可以区分产气乳杆菌和其他乳杆菌属。
3.免疫学鉴定法：免疫学鉴定法是通过检测微生物产生的抗原或对抗原的反应来对微生物进行鉴定和分类。
包括血清学鉴定、补体结合试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫电泳等。
例如，通过检测微生物产生的特定抗原来诊断细菌感染。
4.分子生物学鉴定法：分子生物学鉴定法是近年来发展迅速的微生物分类鉴定方法。
通过检测微生物的核酸序列来鉴定和分类微生物。
常用的方法包括PCR、序列分析、比较基因组学等。
例如，16SrRNA基因序列分析可以用于鉴定和分类细菌。
此外，还有一些综合鉴定方法，如荧光原位杂交（FISH）、质谱分析、流式细胞术等。
这些方法在微生物分类鉴定中各具特色，能够提供更准确和细致的分类信息。
总之，微生物分类鉴定方法多种多样，各种方法常常结合使用，以提高鉴定的准确性。
随着基因测序技术的发展，分子生物学鉴定方法在微生物分类鉴定中的地位越来越重要并逐渐取代了传统的鉴定方法。
鉴别细菌的方法
鉴别细菌的方法细菌是一类微生物，其大小范围从0.2到2微米不等，形态多样，有球形、杆状、螺旋形等。
为了识别和鉴别不同的细菌，科学家们发展了许多方法。
本文将介绍几种常见的鉴别细菌的方法。
1. 形态学鉴别法形态学鉴别法是通过观察细菌的形态、大小、形状、胞外结构和运动等特征来进行鉴别的方法。
在实验室中，我们可以使用显微镜观察细菌的形态，分析其细胞壁、荚膜、鞭毛等结构，还可以观察其运动情况。
细菌的形态和结构不同，可以帮助我们鉴别不同的细菌。
2. 生理生化鉴别法生理生化鉴别法是通过检测细菌对不同环境的反应来进行鉴别的方法。
包括细菌对养分、PH值、盐度、气体和温度等环境因素的反应。
例如，某些细菌只能在氧气充足的环境中生长，而另一些细菌只能在无氧环境中生长。
通过观察细菌在不同环境下的生长情况并比较其生理生化特征，可以帮助我们鉴别不同的细菌。
3. 分子生物学鉴别法分子生物学鉴别法是通过检测细菌的DNA序列来进行鉴别的方法。
这种方法通常使用PCR技术将细菌DNA序列扩增，然后通过比较DNA序列的差异来鉴别不同的细菌。
这种方法具有高度的准确性和灵敏度，因此在现代细菌学中被广泛应用。
4. 免疫学鉴别法免疫学鉴别法是通过检测细菌所产生的抗原和抗体来进行鉴别的方法。
抗原是一种可以诱导机体产生免疫应答的分子，而抗体是机体针对外来抗原产生的免疫反应产生的分子。
通过检测细菌所产生的抗原和抗体，可以确定细菌的种类和数量。
鉴别细菌的方法有很多种，不同的方法可以提供不同的信息。
在实际应用中，我们通常需要结合多种方法进行综合分析，才能得出准确的鉴别结果。
微生物鉴定的方法
微生物鉴定的方法
微生物鉴定是确定或识别微生物种类的过程。
以下列出了常用的微生物鉴定方法：
1. 形态学鉴定：通过观察微生物的形态特征，如大小、形状、颜色和结构，来鉴定微生物。
这可以通过显微镜观察微生物细胞和组织的特征来实现。
2. 培养基鉴定：将微生物分离培养在特定的培养基上，根据不同的培养特性（如生长速度、形态、生理特征等）来鉴定微生物。
培养基可以提供适宜的营养和环境条件，促进微生物的生长。
3. 生化测试：通过测试微生物代谢产物的变化来鉴定微生物。
常用的生化测试方法包括酶活性测试、代谢途径测试和糖发酵测试等。
4. 分子生物学方法：利用分子生物学技术鉴定微生物，包括引物PCR扩增、序列分析、DNA指纹图谱等。
这些技术可以检测微生物的DNA序列并与已知的序列进行比较，从而确定微生物的种类。
5. 免疫学方法：利用免疫学技术鉴定微生物，包括血凝法、免疫荧光染色、酶联免疫吸附试验（ELISA）等。
这些方法可以检测微生物特异性抗原或抗体，从而确定微生物种类。
6. 质谱法：利用质谱技术鉴定微生物，如质谱分析、质谱成像等。
这些技术通
过分析微生物代谢产物或特定的质谱图谱，来确定微生物的种类。
综合使用上述的方法，可以更准确地鉴定微生物种类，特别是对于难以通过传统的形态学观察进行鉴定的微生物。
微生物的鉴定与鉴别方法
微生物的鉴定与鉴别方法微生物是一类微小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们在自然界中广泛存在，对人类的生活和健康有着重要的影响。
鉴定和鉴别微生物是微生物学研究的基础，也是保障食品安全和公共卫生的重要手段。
本文将介绍一些常用的微生物鉴定和鉴别方法。
一、形态学鉴定法形态学鉴定法是通过观察微生物的形态特征来进行鉴定和鉴别的方法。
在细菌的鉴定中，常用的方法包括显微镜观察细菌形态、染色和培养基特性等。
例如，革兰氏染色可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，进一步缩小了鉴定范围。
二、生理生化鉴定法生理生化鉴定法是通过检测微生物的生理和生化特性来进行鉴定和鉴别的方法。
这些特性包括生长要求、代谢产物和酶活性等。
比如，葡萄糖发酵试验可以区分肠道埃希菌和沙门菌，鉴定其是否具有肠道致病性。
三、分子生物学鉴定法分子生物学鉴定法是通过检测微生物的基因组DNA或RNA序列来进行鉴定和鉴别的方法。
这些方法包括PCR、序列分析和基因芯片等。
PCR技术可以扩增微生物的特定基因片段，通过比对序列来确定微生物的种属和亚种。
这些方法具有高度的准确性和灵敏度，已经成为微生物鉴定的重要手段。
四、免疫学鉴定法免疫学鉴定法是通过检测微生物与宿主之间的免疫反应来进行鉴定和鉴别的方法。
这些方法包括免疫荧光、酶联免疫吸附试验和免疫印迹等。
免疫荧光技术可以通过标记抗体来检测微生物的特定抗原，从而确定微生物的种类和数量。
五、质谱鉴定法质谱鉴定法是通过检测微生物样品中的分子质量来进行鉴定和鉴别的方法。
质谱仪可以将样品分子离子化，并根据其质量-电荷比进行分析和鉴定。
质谱鉴定法具有高度的准确性和灵敏度，已经成为微生物鉴定的重要手段。
总结起来，微生物的鉴定和鉴别方法多种多样，每种方法都有其特点和适用范围。
在实际应用中，常常需要结合多种方法进行综合分析，以提高鉴定的准确性和可靠性。
微生物的鉴定和鉴别工作对于食品安全、疾病预防和环境保护等方面都具有重要意义，值得我们继续深入研究和应用。
微生物形态学检验发展历史
微生物形态学检验发展历史《微生物形态学检验发展历史篇一》微生物，那些微小得肉眼难以看清的小生命，却在微生物形态学检验的发展历程中逐渐揭开神秘的面纱。
这一路走来，那可真是一部充满惊喜、波折与脑洞大开的历史啊！咱先把时光拉回到古代。
那时候的人们可能对微生物没啥概念，但其实已经在不知不觉中接触到微生物形态学检验的雏形了。
比如说酿酒，古人虽然不知道是微生物在捣鬼，但他们通过经验知道某些东西发酵了就能变成美酒。
这就好比是在黑暗中瞎摸，偶尔碰到了正确的开关，灯亮了，但还不知道为啥亮的。
这时候的微生物形态学检验？那就是两眼一抹黑，全靠运气和经验。
后来，显微镜这个超级神器出现了。
就像给人类打开了一扇通往微观世界的大门。
荷兰的列文虎克，那可是这个微观世界的开拓者。
他用自制的显微镜看到了微生物，那些像小虫子一样的东西在镜头下活灵活现。
我就想啊，他当时看到那些微生物的时候，心里肯定是又惊又喜，就像发现了新大陆一样。
这时候的微生物形态学检验，就像是一个蹒跚学步的孩子，刚刚迈出了第一步。
随着时间的推移，微生物形态学检验开始像开了挂一样发展。
染色技术的出现就像是给微生物穿上了不同颜色的衣服，让它们在显微镜下更容易被区分。
革兰氏染色法就是其中的佼佼者。
我记得我第一次在实验室做革兰氏染色的时候，那紧张劲儿，就像在给超级重要的嘉宾化妆，生怕化错了。
这染色技术一出来，微生物的分类就更清晰了，细菌啊、真菌啊这些就像不同门派的武林高手，各有各的特点。
可是呢，这微生物形态学检验的发展也不是一帆风顺的。
在很长一段时间里，人们对于微生物的认识还是存在很多争议的。
就像到底微生物是怎么产生的，是自然发生的呢，还是有什么特殊的来源？这个问题就像是一团迷雾，笼罩着当时的科学界。
有人觉得微生物是自然发生的，就像脏东西放久了自然就会长出微生物来。
但也有人坚决反对，也许他们就觉得这事儿没那么简单，背后肯定有更深层次的原因。
再后来，随着分子生物学技术的兴起，微生物形态学检验又迎来了新的挑战和机遇。
微生物的鉴定方法
微生物的鉴定方法微生物是一类广泛存在于各种环境中的生物，包括细菌、真菌、病毒等。
通常情况下，鉴定微生物首先需要通过一系列的实验室技术和方法进行，以便确定其种类和特征。
下面将介绍一些常用的微生物鉴定方法。
一、形态学鉴定法：形态学是鉴定微生物的基础方法之一、通过观察微生物的形态特征，可以初步判断其种类。
细菌通常可以通过对菌落形状、色素、大小、边缘、透明度等进行观察和比较，以确定其菌属；真菌则可以通过判断菌落的形状、颜色、质地等特征，以及孢子形态和产孢器的形式来进行鉴定。
二、生理生化鉴定法：生理生化鉴定是通过测试微生物在培养基上的生理和生化特征来确定其种属。
这些特征包括生长条件（如温度、pH值）、营养需求（如对碳源、氮源的利用）、代谢产物（如气体产物和酸碱指数）等。
通过对微生物的这些表现进行定性、定量和定位观察，可以推断其种属。
三、分子生物学鉴定法：随着分子生物学技术的快速发展，分子鉴定已成为现代微生物学中重要的鉴定方法之一、其中，16SrRNA基因序列分析是最常用的鉴定细菌的分子生物学方法。
通过从微生物中提取总RNA，然后使用聚合酶链反应（PCR）扩增16SrRNA基因，在测序后与数据库进行比对，可以准确地鉴定细菌的种类。
对于真菌的鉴定，通常使用ITS区域（内转录间隔序列）进行分析。
四、免疫学鉴定法：免疫学鉴定法是通过检测微生物的免疫特异性反应来进行鉴定。
具体方法包括免疫荧光检测、酶联免疫吸附试验（ELISA）、凝集反应和免疫印迹等。
这些方法可以检测微生物中的抗原和抗体，并通过与特异性抗体的结合来确认微生物的种属。
五、基因测序鉴定法：随着测序技术的迅速发展，基因测序已经成为鉴定微生物的重要手段之一、通过对微生物基因组的整个或部分DNA序列进行测序分析，可以确定微生物的种属。
目前，全基因组测序、宏基因组测序、特定基因测序等方法已经成为微生物鉴定常用的手段。
综上所述，微生物的鉴定方法包括形态学鉴定法、生理生化鉴定法、分子生物学鉴定法、免疫学鉴定法和基因测序鉴定法等。
微生物分类鉴定的方法
微生物分类鉴定的方法1.形态学分类：这是最基本也是最传统的微生物分类方法。
通过观察微生物的形态特征，如细胞形状、大小、颜色、胞壁结构等，来进行分类鉴定。
典型的形态学分类方法包括显微镜观察、染色法、显微观察等。
2.生理学分类：通过对微生物的生理特征进行观察和测定，来进行分类鉴定。
生理学分类侧重于微生物的生长环境、生长要求、生长曲线等特征，能够揭示微生物与环境的相互关系。
常见的生理学分类方法包括生物化学试验、生长条件试验等。
3.生化学分类：通过观察和测定微生物的生化特征，如碳源利用能力、氮源利用能力、氧需求量等，来进行分类鉴定。
这种分类方法可通过对微生物的代谢产物分析，从而更直接地鉴定微生物的分类位置。
4.分子生物学分类：这是一种相对新兴的分类方法，通过对微生物的遗传物质进行分析，来进行分类鉴定。
分子生物学技术如DNA序列分析、PCR等，能够更精确地鉴定微生物的分类位置，并且具有高度的重复性和可靠性。
除了以上几种常用的分类方法，还有一些特殊的分类鉴定方法，如：5.免疫学分类：通过对微生物的免疫特征进行观察和测定，来进行分类鉴定。
常用的免疫学分类方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、流式细胞术等。
6.基因组学分类：利用整个基因组序列和基因组结构等信息对微生物进行分类鉴定。
这种分类方法可以揭示微生物间的亲缘关系，为微生物分类提供了更深入的信息。
需要注意的是，用于微生物分类鉴定的方法往往需要多种方法的综合应用。
使用不同的分类方法，可以得到更全面和准确的鉴定结果。
此外，随着技术的不断发展和创新，还会出现更多精确和快速的微生物分类鉴定方法。
常见的微生物鉴定方法(一)
常见的微生物鉴定方法（一）引言概述：微生物鉴定方法是一种利用生物特性和化学反应来判断微生物种属和类别的技术手段。
它在医学、环境科学、食品安全等领域具有广泛的应用。
本文将介绍常见的微生物鉴定方法，以帮助读者更好地了解和运用这些方法。
正文：一、形态学鉴定方法1. 眼镜检查法：通过裸眼观察微生物的各种形态特征，如颜色、形状、大小等，判断其种属。
2. 显微镜观察法：利用显微镜观察微生物的细胞形态、排列方式、黏附物等特征，进行鉴定。
3. 染色鉴定法：运用染色技术对微生物进行染色，并观察染色后的颜色、形态等变化，以帮助鉴定。
二、生理生化鉴定方法1. 拮抗试验：通过接种不同微生物组合进行拮抗试验，观察是否发生拮抗反应，从而判定其是否属于同一种。
2. 酶活性检测：通过检测微生物体内特定酶的活性，如氧化酶、淀粉酶等，来进行鉴定。
3. 营养代谢检测：通过培养微生物在不同营养基质上的生长情况，了解其对不同营养物质的利用能力，进行鉴定。
三、分子生物学鉴定方法1. PCR技术：利用聚合酶链反应（PCR）扩增微生物DNA片段，通过比对标准数据库中的DNA序列进行鉴定。
2. DNA测序：直接对微生物的基因组DNA进行测序，然后与已有的DNA序列进行比对，来鉴定微生物。
四、免疫学鉴定方法1. 血清学鉴定法：利用微生物分泌的特定抗原与抗体结合反应来鉴定微生物，如凝集反应、免疫层析等。
2. 免疫荧光染色法：利用荧光标记的抗体与微生物特定抗原结合，在显微镜下观察荧光信号，进行鉴定。
五、生物化学鉴定方法1. 脂多糖检测：通过检测微生物产生的脂多糖，来判断其属于革兰氏阴性菌还是阳性菌。
2. 呼气气味检测：通过检测微生物代谢产物中挥发性化合物的气味，来鉴定微生物种类。
总结：微生物鉴定方法是一个多样化的领域，通过不同的技术手段可以对微生物进行准确的鉴定。
形态学鉴定方法、生理生化鉴定方法、分子生物学鉴定方法、免疫学鉴定方法和生物化学鉴定方法都是常见的方法。
实验室微生物溯源鉴定方法
实验室微生物溯源鉴定方法在实验室微生物鉴定中，形态学、生物化学、分子生物学、血清学、质谱学、基因型鉴定以及抗原抗体鉴定等方法都为微生物的溯源提供了有效的手段。
这些方法的综合应用可以帮助我们更准确、更快速地鉴定微生物，进一步为疾病诊断、治疗以及公共卫生等方面提供依据。
1. 形态学鉴定：形态学鉴定是利用显微镜观察微生物的形态和结构，从而鉴定不同种类的微生物。
包括细菌、病毒、立克次体、衣原体和支原体等微生物都可以通过形态学方法进行鉴定。
鉴定过程涉及样品的制备、染色和观察，可以观察到微生物的大小、形状、排列、鞭毛、芽胞等特点，根据这些特点判断微生物的种类。
2. 生物化学鉴定：生物化学鉴定是通过分析微生物的生物化学特性，鉴定不同种类的微生物。
主要包括糖类、脂肪、蛋白质等成分的分析。
鉴定过程中，需要对微生物进行培养，然后分析其代谢产物、酶活性等生化指标，再根据这些指标判断微生物的种类。
生物化学鉴定对于一些难以培养的微生物尤为重要。
3. 分子生物学鉴定：分子生物学鉴定是基于微生物的DNA或RNA序列进行分析，从而鉴定不同种类的微生物。
常用的方法包括DNA提取、PCR扩增和基因分型等。
通过分析微生物的基因组序列，可以获得微生物的基因信息，进而判断其种属和亚种。
此外，分子生物学鉴定还可以检测微生物的耐药性基因，为临床治疗提供指导。
4. 血清学鉴定：血清学鉴定是通过分析血清中的抗体与微生物抗原的反应，鉴定不同种类的微生物。
常用的方法包括凝集反应、沉淀反应、补体结合试验等。
血清学鉴定的优点是特异性高，可以区分相似微生物种类。
同时，血清学鉴定还可以用于流行病学调查和传染源追踪，有助于疾病的诊断和治疗。
5. 质谱鉴定：质谱鉴定是利用质谱技术对微生物的蛋白质进行检测和分析，从而鉴定不同种类的微生物。
质谱技术能够检测微生物的特异性和非特异性蛋白质，对于一些难以培养或不可培养的微生物尤为适用。
通过与数据库中已知蛋白质的对比，可以快速准确地确定微生物的种类。
临床微生物学检验技术
二、染色标本
· 细菌标本经染色后，除能清楚看到细菌的形态、大小、 排列方式外，还可根据染色反应将细菌进行分类，因 此染色标本的检查在细菌的初步鉴定中应用最广，起 着非常重要的作用。
· （一）常用染料：酸性染料、碱性染料、复合染料。 · （二）常用的染色方法：革兰染色、抗酸染色、
荧光染色。
革兰染色
三、生化反应
（一）碳水化合物的代谢试验 1.糖（醇、苷）类发酵试验
原理：不同种类细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶， 因而对各种糖（醇、苷）类的代谢能力也有所不同，即使能分 解某种糖（醇、苷）类，其代谢产物可因菌种而异。检查细菌 对培养基中所含糖（醇、苷）降解后产酸或产酸产气的能力， 可用以鉴定细菌种类。
方法：将待试菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中， 35℃孵育48~96h后，于5ml培养基中滴加5~6滴甲基红指示 剂，立即观察结果。
结果判定：呈现红色者为阳性，桔黄色为阴性，桔 红色为弱阳性。
应用：常用于肠杆菌科内某些种属的鉴别，如大肠 埃希菌和产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。肠 杆菌属和哈夫尼亚菌属为阴性，而沙门菌属、志贺菌 属、枸橼酸杆菌属和变形杆菌属等为阳性。
3
革兰阳性菌细胞内含有大量核糖核酸镁盐，可与结
晶紫和碘牢固的结合成大分子复合物，不易被乙醇脱色；而革
兰阴性菌细胞内含极少量的核糖核酸镁盐，吸附染料量少，形
成的复合物分子也较小，故易被乙醇脱色。
2. 染色方法
1 标本涂片、干燥和固定。 2 染色：在已固定细菌涂片上滴加结晶紫染液数滴， 室温作用1min，用细流水轻轻冲洗，甩去积水。再滴 加碘液数滴，室温作用1min，冲洗。滴加95%酒精数滴， 轻轻摇动玻片几秒钟，使均匀脱色，然后斜持玻片， 使脱掉的染料随酒精流去，再滴加酒精，直到流下的 酒精无色为止（约需30s），立即用细流水将酒精冲掉。 再滴加稀释石炭酸复红液复染约30s后用细流水冲洗。 3 标本染色后，晾干或用吸水纸吸干，滴香柏油后 用油镜观察。
微生物的鉴定与分类方法
微生物的鉴定与分类方法微生物是指在肉眼下无法看到的微小生物，包括细菌、真菌、病毒等多种类型。
微生物在人类社会中具有非常重要的作用，既有益处也有危害。
因此，对微生物进行鉴定和分类是十分必要的，本文将介绍一些微生物的鉴定与分类方法。
一、细菌的鉴定与分类方法1. 形态学方法细菌的形态学特征包括菌体的大小、形状、颜色、质地等。
通过显微镜观察细菌的形态特征，可以初步判断细菌的类别。
2. 染色法常用的染色法有革兰氏染色法、酸杆菌染色法等。
这些染色方法可以通过染色后的颜色反映出不同细菌的内部构造和化学成分。
3. 生化试验法利用不同细菌对同一物质的不同反应进行分类。
比如利用MM测试葡萄糖在酵母菌中的代谢反应情况，初步判断出酵母菌的种类。
二、真菌的鉴定与分类方法1. 形态学方法真菌的形态学特征与细菌相似，包括菌体的大小、形状、颜色、质地等。
通过显微镜观察真菌子实体的形态，可以初步判断真菌的类别。
2. 细胞壁化学成分分析法真菌的细胞壁主要由多糖、蛋白质和小分子化合物组成，通过分析细胞壁中的化合物种类和含量，可以对真菌进行分类。
3. 分子生物学方法利用PCR扩增真菌的特定基因或DNA序列，然后对扩增产物进行分析，可以快速准确地对真菌进行鉴定和分类。
三、病毒的鉴定与分类方法1. 组织培养法通过利用感染病毒的细胞进行培养，观察细胞的病变情况并检测病毒复制情况，确定病毒类型。
2. 免疫学方法利用病毒所携带的特异抗原，通过免疫学试验检测血清中的抗体和抗原，对病毒进行鉴定和分类。
3. 分子生物学方法利用PCR扩增病毒的特定基因或DNA序列，然后对扩增产物进行分析，可以快速准确地对病毒进行鉴定和分类。
总之，微生物的鉴定与分类方法有多种，需要根据不同微生物类型采用不同方法。
除了以上三类微生物外，还有其他微生物如真菌的一种子类物质被称作酵母菌,氧化器类蛋白與乙白酒酵母等微生物也需要进行分类和鉴定，才能最大程度地了解其性质和应用前景。
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邱 宗 文
第三军医大学附属新桥医院
细菌的形态与结构
细菌基本形态有三种：
ƌ球菌、杆菌、螺形菌
细菌基本结构包括：
ƌ细胞壁、细胞膜、细胞质、核质
细菌的特殊结构有：
ƌ荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢
真菌的形态与结构
真菌形态有两种类型：
单细胞型：呈圆形或卵圆形，常见于酵母菌和酵母样菌 多细胞型：多呈丝状，分支交织成团、称为丝状菌，通称霉菌
ห้องสมุดไป่ตู้
炭疽芽孢杆菌 B.anthracis
形态与染色：为致病细菌中最大的革兰阳性杆菌， 两端截平，体外培养后形成长链，排列呈竹节形。 在体内常单个存在或短链，有荚膜，在人工培养基 上可见芽孢，卵圆形并位于菌体中央，菌体不膨大
培养特性：在血平板上形成较大、灰白边缘不整齐 菌落。在营养琼脂上形成灰白色、扁平、干燥而无 光泽、不透明、边缘不整齐的菌落，对青霉素敏感
真菌的基本结构：
菌丝—由孢子生出芽管，逐渐延长呈丝状 孢子—是真菌的生殖结构，真菌繁殖的微小单位
细菌形态学检查
不染色标本的检查：
主要用于检查细菌动力及运动状况，包括湿片法、 悬滴法、毛细吸管法
染色标本的检查：
观察细菌形态、大小、排列、染色特性、以及荚 膜、鞭毛、芽孢、异染颗粒等结构，有助于细菌 的初步认识或诊断
细菌特殊结构：芽孢大小、位置、鞭毛数目及位置等
细菌培养特性
营养要求：简单或复杂 生长特性：快或慢 气体环境：需氧、兼性厌氧或厌氧
适宜生长温度：25℃、35-37℃、42℃
菌落特征
大小：一般可分为大＞3mm、中2-3mm、小＜2mm 表面：光滑、粗糙、粘液样、皱纹、放射状、同心圆等 透明度：透明、半透明、不透明 外形：圆形、不规则等 高度：扁平、凸起、脐形等 边缘：整齐、锯齿状等 光泽：有光泽、无光泽等 色素：金黄色、白色、乳白色、绿色、紫色、黑色等 气味：酸味、生姜味、恶臭味 溶血性：完全溶血、不完全溶血、不溶血
蜡样芽孢杆菌 B.cereus
形态与染色：革兰阳性大杆菌，卵圆形芽孢，位于 菌体中央，菌体不膨大
培养特性：在血平板上形成较大浅灰色、似毛玻璃 样菌落。在营养琼脂上形成灰白色、不透明、圆形、 凸起的较大菌落，边缘常呈扩展状，迎光看似白蜡 状。故名蜡样芽孢杆菌
枯草芽孢杆菌 E.subtilis
普通变形杆菌 P.vulgaris
形态与染色：革兰阴性杆菌，多数为单个存在、也
可见成对或短链状排列，周身鞭毛
培养特性：在血平板上蔓延生长、布满整个平板表 面（纤徒现象），麦康凯上形成圆形、扁平、无色 （不发酵乳糖）半透明菌落
霍乱弧菌 V.cholerae
形态与染色：革兰阴性、菌体弯曲呈弧形或逗点状， 米泔样粪便直接涂片染色，可见头尾相接、平行排 列的弧菌，悬滴法直接镜检可见活泼的运动
粪肠球菌 E.faecalis
形态与染色：阳性球菌、单个、成双或短链排列
培养特性：在血平板上形成较小、灰白色、湿润、 凸起、有α或β溶血环的菌落，在麦康凯琼脂平板 上形成较小、干燥、粉红色菌落
脑膜炎奈瑟菌 N.meningitidis
形态与染色：阴性双球菌、肾形或咖啡豆状，常成 双排列，凹面相对，在脑脊液直接涂片中常位于中 性粒细胞内
3、粗糙型：菌落呈纽 扣状，表面粗糙，或菌 落中央隆起边缘扁平
4、粘液样：菌落光滑、隆 起、呈粘液状，嵌入培养 基内，不易挑起，似肺克
5、侏儒型：生长缓慢、培 养24h后才有小菌落生长
铜绿假单胞菌特征：蓝绿色或荧光色素，有生姜味， 动力和氧化酶试验阳性
荧光假单胞菌 P.fluorescens
培养特性：具有耐硷性，pH9.2时仍能生长，硷 性蛋白胨水增菌时液体浑浊、表面形成菌膜；在 TCBS平板上形成较大、黄色菌落
非发酵阴性杆菌 Nonfermentative
基本特征：在最初分离培养基上，如果有菌落生长 并有下列三种情况之一，可认为有非发酵菌存在
在血平板上生长而在麦康凯上不生长或生长很差，菌落呈无 色、针尖大或完全看不到生长 麦康凯上生长的无色菌落（不发酵乳糖），氧化酶试验阳性 在三糖铁或克氏双糖培养基内，斜面与底层均不变色，表明 该菌不分解葡萄糖与乳糖，提示为非发酵菌 注意：不能在麦康凯、SS及其他含糖培养基上作氧化酶试验， 而应在营养琼脂或半固体培养基上做氧化酶试验，因糖分解 产酸会影响氧化酶试验结果
培养特性：在沙氏培养基或营养琼脂上培养5-7日 可见菌落，菌落表面有皱折、呈颗粒状、黄色或深 橙色；在血琼脂平板上菌落较小、凸起、呈白色
肠杆菌科 Enterobacteriaceae
基本特征：在血琼脂平板上生长，在麦康凯、伊红 亚甲蓝、中国蓝琼脂平板上形成发酵和不发酵乳糖 的菌落；在三糖铁或克氏双糖底层、上层产酸、产 气、氧化酶试验阴性 基本鉴定试验要求：
培养特性：初次分离需在5-10%二氧化碳环境中 生长，血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、 透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克 力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色 的似露滴状菌落
淋病奈瑟菌 N.gonorrhoeae
形态与染色：阴双球菌、成双、肾形排列。生殖道 分泌物直接涂片，急性期常位于白细胞内、慢性期 位于白细胞外
产气荚膜杆菌 C.perfingens
形态与染色：革兰阳性粗大杆菌、两端钝圆、单个 或成双，芽孢卵圆形、位于菌体中央或次极端、有 荚膜、无鞭毛
细菌分离培养及鉴定
细菌分离培养：使细菌在平板上分散生长，便
于观察菌落特征，也易于挑取单个菌落进行生 化鉴定或血清学试验 细菌鉴定：形态与培养特性：形态、染色、培 养特性和菌落特征是鉴定细菌的初步依据
细菌形态与染色特点
染色性：革兰阳性、阴性，抗酸染色阳性、阴性等
形状、大小和排列：球菌、杆菌、螺形菌，菌体大小、 单个、成双、短链、葡萄状等
杆菌肽敏感实验＞10cm
肺炎链球菌S.pneumoniae
形态与染色：呈矛头状， 成双或链状，有荚膜
荚膜染色
纯培养
痰液
培养特性：在5-10%二氧化碳环境中生长良好， 血平板上形成细小、圆形、中央呈脐窝状，表面光 滑、灰色、扁平，周围有草绿色溶血环，部分菌株 与典型菌落不同，不是中央凹陷，而是湿润、透明 的粘液样菌落
形态与染色：阴性杆菌、单个或呈双排列、有时呈 现丝状或链状
培养特性：在血平板上形成圆形、光滑、边缘整齐 的菌落，部分菌落呈粘液状；在麦康凯上形成粉红 色菌落，48h后菌落呈深红色，部分菌落呈粘液型
紫色杆菌 C.violaceum
形态与染色：阴性杆菌、具有极端鞭毛和周鞭毛 培养特性：在血平板上形成圆形、光滑、β溶血、 紫黑色菌落，在麦康凯上呈紫色菌落
形态与染色：革兰阴性杆菌，菌体细长，有周鞭毛
培养特性：在麦康凯上形成无色、透明菌落，SS平 板上呈无色、透明菌落、但大部分菌落中央呈黑色
肺炎克雷伯氏菌K.pneumoniae
形态与染色：革兰阴性杆菌，单个、成双或短链排
列，荚膜染色可见外周有透明、环状荚膜
培养特性：在血平板上形成较大、圆形、凸起、灰白色、不 溶血菌落；血平板上极少数菌株可出现较大、粗糙型、野菊 花状菌落。麦康凯上形成隆起、大而粘液样、易融合的粉红 色菌落，接种环挑取呈丝状粘连
培养特性：初次分离需在5-10%二氧化碳环境中 生长，血平板上形成灰白、光滑、湿润、有光泽、 透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落。在巧克 力平板上形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰兰色 菌落
白喉棒状菌 C.diphteriae
形态与染色：革兰阳性，细长微弯、菌体一端或两 端粗大，呈棒状，排列不规则，菌体一端或两端可 见异染颗粒
培养特性：在血平板上形成较小、圆形、凸起、光 滑、灰白色菌落，似干酪状，易碎成两半，无或狭 窄溶血环，在亚啼酸钾血琼脂平板上形成黑色或灰 黑色菌落
产单核细胞李斯特氏菌L.monocytogenes
形态与染色：革兰阳性小杆菌，直或微弯、无 芽孢、无荚膜
培养特性：在血平板上形成较小、圆形、光滑、而 有β溶血环的菌落，在液体培养基中呈均匀浑浊生 长，在半固体培养基中，动力字穿刺线向四周蔓延 生长，呈倒伞状
形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、端鞭毛 培养特性：在麦康凯上呈无色半透明菌落，在营养 琼脂上形成荧光色的菌落
恶臭假单胞菌 P.putida
形态与染色：阴性杆菌、无芽孢、无荚膜、极端鞭毛 培养特性：在麦康凯上呈较大无色、湿润菌落，在营 养琼脂上形成黄绿色菌落，紫外线下可见荧光
鲍曼不动杆菌 A.baumannii
放射根瘤菌R.radiobacter
形态与染色：阴性杆菌、单个或成双、有周鞭毛 培养特性：在血平板上形成灰白色、光滑、湿润、 凸起、无溶血环的菌落，在麦康凯上呈无色、湿润、 粘液样菌落、时间延长时呈淡粉红色
流感嗜血菌Haemophilus
形态与染色：阴性短小杆菌、两端钝圆，粘液型菌株有荚膜 培养特性：在5-10%二氧化碳中可促进生长，生长需Ⅴ、Ⅹ两 种因子，适宜培养基是巧克力平板。在巧克力平板上形成微 小、无色透明似露滴状菌落，在血平板上形成极小、圆形、 透明菌落，并有“卫星现象”
铜绿假单胞菌 P.aeruginosa
形态与染色：阴性杆菌、细长，菌体一端有单鞭毛