糖醛酸测定方法
人参多糖中糖醛酸含量测定方法的建立
人参多糖中糖醛酸含量测定方法的建立一、本文概述人参多糖作为一种具有广泛药理活性的天然产物，近年来在医药、保健品等领域的应用日益受到关注。
其中，糖醛酸作为人参多糖的重要组成成分，对于其生物活性的发挥起着至关重要的作用。
因此，建立一种准确、可靠的人参多糖中糖醛酸含量测定方法，对于人参多糖的质量控制、药效研究以及开发利用具有重要意义。
本文旨在建立一种适用于人参多糖中糖醛酸含量测定的方法，并对其进行系统的验证和应用研究。
通过对多种测定方法的比较和优化，最终确定了一种基于高效液相色谱法的糖醛酸含量测定方法。
该方法具有操作简便、准确性高、重现性好等优点，可广泛应用于人参多糖的质量控制、生产工艺优化以及药效研究等领域。
本文首先对人参多糖的提取方法进行了优化，以提高糖醛酸的提取效率。
然后，通过比较不同色谱柱、流动相、检测波长等条件，优化了高效液相色谱法的测定条件。
在此基础上，建立了糖醛酸含量测定的标准曲线，并对方法的准确性、精密度、稳定性等进行了系统的验证。
将该方法应用于实际样品的分析，为人参多糖的质量控制提供了可靠的技术支持。
通过本文的研究，不仅建立了一种准确、可靠的人参多糖中糖醛酸含量测定方法，而且为人参多糖的开发利用提供了有力的技术支持。
本文的研究结果也为其他天然产物中糖醛酸含量的测定提供了一定的参考和借鉴价值。
二、材料与方法本实验所需的试剂包括标准糖醛酸、人参多糖样品、硫酸、咔唑等。
所有试剂均为分析纯，购自国内知名试剂供应商。
实验所用仪器包括紫外可见分光光度计、电子天平、恒温水浴锅、离心机等。
所有仪器均经过校准，确保实验结果的准确性。
准确称取适量标准糖醛酸，用去离子水配制成不同浓度的标准溶液。
分别取各浓度标准溶液适量，加入咔唑试剂和浓硫酸，摇匀后在沸水浴中加热一定时间，冷却后测定其在特定波长下的吸光度。
以糖醛酸浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
将人参多糖样品研细，精确称取适量样品，加入去离子水，在恒温水浴锅中加热溶解。
天然多糖一些参数的测定
天然多糖提取物一些参数的的测定李老师（浙大国家大学科技园，杭州哲博化工科技有限公司哲博检测中心，Email：zhebocs@, 杭州310013）天然多糖提取物由于工艺复杂，杂质众多，需要对其质量有效控制。
常见的参数包括糖醛酸的测定、粘度的测定、蛋白质杂质测定等。
本文简要介绍如下：一.特性粘度精密称取本品0.1~0.11g，根据所测得干燥失重，用公式：样品质量*（1-干燥失重%）计算出绝对干品质量以此计算后面的样品浓度。
将样品于100ml量瓶中用0.2mol/l氯化钠定容至刻度，配成浓度为0.02、0.03、0.04、0.05g/100ml的系列样品液。
将空白溶剂（0.2mol/l氯化钠）和上述4个样品溶液分别用3号垂熔玻璃漏斗过滤，弃去初滤液，然后各取续滤液5ml，用内径0.5~0.6mm的乌式粘度计，在25°C下分别测定它们的流出时间T。
（空白溶剂）和T i（样品液），每个样品液的流出时间测两次，取平均值（两次读数相差不得超过0.2s）。
计算：相对粘度ηr=T i/T o；增比粘度ηsp=ηr-1然后以增比粘度ηsp /Ci为纵坐标，Ci为横坐标（Ci单位为g/100ml）作图，该回归直线与纵轴的截距为特性粘度η二.蛋白质含量的测定——Bradford染料结合法该法又称考马斯亮蓝法。
其原理是：染料考马斯亮蓝与蛋白质结合后最大吸收波长由456nm移至595nm，测得的595nm处的吸收度与蛋白质浓度呈线性关系。
特点：灵敏度高，最低检出限可达1μg。
BSA作为对照品。
本法有专用试剂盒（Braford reagent，Sigma）1.考马斯亮蓝试液的配制：考马斯亮蓝100mg溶于95%乙醇50ml中，再加85%磷酸100ml，最后加水稀释至800ml，用2号滤纸过滤备用。
2.标准曲线制作：取BSA 10mg，精密称定，置于100ml量瓶中，加水溶解稀释至刻度，制得100μg/ml的BSA对照液。
糖醛酸测定方法
糖醛酸测定方法一•间羟基联苯比色法1•原理：多聚己糖醛酸与含四硼酸钠的硫酸溶液在高温作用下水解，水解产物进一步与间羟基联苯反应，生成粉红色衍生物，产生紫外吸收，且在一定浓度范围内，该衍生物吸收值与糖醛酸含量呈线性关系，可通过比色法对糖醛酸含量进行计算。
2. 试剂配制：间羟基联苯溶液：称取0.15g间羟基联苯溶于5 mg/mL氢氧化钠溶液中，定容至100mL，其质量浓度为1.5mg/mL.四硼酸钠/硫酸溶液：0.478g四硼酸钠溶于100mL浓硫酸中，备用葡萄糖溶液：称取葡萄糖25.00mg，加水溶解并定容至25mL混匀，成1mg/mL的标准溶液。
（排除中性糖对测定结果的影响）半乳糖醛酸标准溶液：称取干燥至恒重的半乳糖醛酸25.00 mg，加水溶解并定容至25mL，混匀，成1mg/mL的标准溶液。
3. 波长扫描：取半乳糖醛酸标准溶液0.50mL，置10 mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀（质量浓度为0.05 mg/mL）。
量取溶液1.00 mL置于20 mL具塞试管，置冰水浴中，加入四硼酸钠/硫酸溶液6 mL，待全部加完后，用旋涡混合器混匀，于沸水浴中加热5 min，冰水浴中冷却后用微量加样枪加入1.5 mg/mL间羟基联苯溶液100此，混匀后振摇5 min，超声除去气泡。
以1 mL蒸馏水同上操作制得空白液调零，用UV-2450型紫外可见分光光度计在200 nm~ 800 nm波长范围内扫描，确定最大吸收波长。
4. 标准曲线的制备：取1mg/mL半乳糖醛酸标准溶液0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL和0.6 mL置于10 mL容量瓶中，加水定容，再分别取上述各配制溶液1.0mL至于20mL具塞试管，置冰水浴中，加入四硼酸钠/硫酸溶液6 mL，待全部加完后，用旋涡混合器混匀，于沸水浴中加热5 min，冰水浴中冷却后用微量加样枪加入1.5 mg/mL间羟基联苯溶液100 L混匀后振摇5 min，超声除去气泡。
测定葡萄糖醛酸内酯及其所含葡萄糖醛酸的方法
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一、引言葡萄糖醛酸内酯是一种重要的生物活性成分，在医药和食品工业中有着广泛的应用。
而测定葡萄糖醛酸内酯及其所含葡萄糖醛酸的方法则成为了研究和生产中的重要课题，针对这一课题需要综合考虑不同的因素和方法。
二、测定葡萄糖醛酸内酯的方法1.色谱法：色谱法是一种常用的测定葡萄糖醛酸内酯的方法，通过色谱柱分离和检测样品中的成分。
该方法准确度高，但需要专业设备和操作技能。
2.光谱法：光谱法包括紫外-可见光谱和红外光谱，通过分析样品在不同波长下的吸收特性来测定葡萄糖醛酸内酯的含量。
这种方法适用性广，但需要考虑样品制备和仪器校准的影响。
3.生物传感器法：生物传感器是一种新兴的测定方法，通过生物元件与目标物质的特异性反应来实现检测。
这种方法具有快速、灵敏和实时性好的特点，但需要考虑生物元件的稳定性和再生性。
三、测定葡萄糖醛酸的方法1.酶法：酶法是测定葡萄糖醛酸含量的常用方法，通过酶促反应将葡萄糖醛酸转化为可测定的产物。
该方法操作简单，但需要注意酶的活性和稳定性。
2.高效液相色谱法：高效液相色谱法是一种准确测定葡萄糖醛酸的方法，通过利用不同的固定相和流动相来分离和检测样品中的葡萄糖醛酸。
这种方法具有分离效果好、灵敏度高的特点，但需要考虑流动相的制备和设备的维护。
四、个人观点和理解测定葡萄糖醛酸内酯及其所含葡萄糖醛酸的方法涉及到多种科学原理和技术手段，需要根据具体的实验条件和样品特性来选择合适的方法。
在实际研究和生产中，应该综合考虑方法的准确性、快速性和成本效益，选择最适合的测定方法。
总结测定葡萄糖醛酸内酯及其所含葡萄糖醛酸的方法涉及的技术和方法多种多样，每种方法都有其特点和适用范围。
在实际操作中，需要根据具体情况选择合适的方法，并注意方法的操作规范和质量控制。
希望通过本文的介绍，对测定葡萄糖醛酸内酯及其所含葡萄糖醛酸的方法有更深入的了解。
琐琐葡萄多糖中糖醛酸含量的测定
琐琐葡萄多糖中糖醛酸含量的测定俞丹;马龙;赵军;刘涛;张琳【摘要】目的:测定琐琐葡萄多糖中半乳糖醛酸的含量.方法:采用间羟基联苯法对琐琐葡萄多糖中的半乳糖醛酸进行含量测定,并研究了四硼酸钠/硫酸溶液用量,加酸后沸水浴时间、间羟基联苯溶液用量及中性糖对测定结果的影响.结果:该测定方法不受中性糖的影响,并测得琐琐葡萄多糖中半乳糖醛酸的平均百分含量为38.17%,RSD为1.65%.结论:间羟基联苯法简便、快速、准确,适用于对琐琐葡萄多糖中的半乳糖醛酸含量进行测定.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2009(032)005【总页数】3页(P533-535)【关键词】琐琐葡萄多糖;糖醛酸;含量测定;间羟基联苯法【作者】俞丹;马龙;赵军;刘涛;张琳【作者单位】新疆医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,新疆乌鲁木齐,830011;新疆医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,新疆乌鲁木齐,830011;新疆药物研究所维吾尔药研究开发重点实验室,新疆乌鲁木齐,830002;新疆医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,新疆乌鲁木齐,830011;新疆医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,新疆乌鲁木齐,830011【正文语种】中文【中图分类】O629.12琐琐葡萄(Vitis viniferal L.)属葡萄科小无核红葡萄品系植物，药食兼用，主产于新疆吐鲁番、和田、鄯善等地[1]。
作为药用果实，琐琐葡萄具有健脾胃、理肺、生津、养血等作用；维吾尔医学应用琐琐葡萄治疗脾胃不和、头晕腰酸、神志不安等，民间用于治疗小儿麻疹、肝炎等症[2]，其药用功效在《神农本草经》、《本草纲目》中均有记述。
多糖(polysaccharides)是自然界中含量最丰富的生物聚合物，也是构成生命活动的四大基本物质之一，近年来，多糖及其衍生物作为组织支持物质和能量来源的传统观念已被突破，作为一种非细胞毒物质，它还具有调节免疫、抗氧化、抗肿瘤、降血压、降血脂、降血糖、抗衰老、抗辐射等多种生物活性，成为近年来天药研究的热点课题之一[3]。
一种测定酸性多糖中糖醛酸和中性糖含量的改良方法_许会生
０．６
０．５
０．４
０．３
０ ０．０２ ０．０４ ０．０６ ０．０８ ０．１０ ０．１２ 时间（ ｍＬ）
图 ３ 间羟基联苯用量对吸光度的影响
２．２．６ ＧｌｃＡ 标 准 曲 线 的 制 备 精 密 吸 取 ＧｌｃＡ 储 备 液 １．０、２．０、３．０、４．０、５．０、６．０ｍＬ， 于 ５０ｍＬ 量 瓶 中 ， 加 水 稀 释 至 刻 度 ， 得 ＧｌｃＡ 浓 度 分 别 为 １０、２０、３０、４０、５０、 ６０μｇ·ｍＬ－ １ 的 ＧｌｃＡ 标准溶液。分别取 ＧｌｃＡ 标准溶液 ０．５ｍＬ 加 入 试 管 中 ， 置 冰 水 浴 中 ， 分 别 加 入 ４．５ｍＬ 四 硼酸钠－ 硫酸溶液， 继续冷却， 充分振荡； 将试管置于 １００℃水浴上加热 １０ｍｉｎ， 然后立即放入冰水浴至冷； 加 入 ０．０５ｍＬ ０．１５％间 羟 基 联 苯 溶 液 ， 充 分 振 荡 ， 显 色 ， 超 声 除 去 气 泡 ， 静 置 ２０ｍｉｎ， 以 ０．５ｍＬ 蒸 馏 水 同 上 制 得 空 白 液 调 零 ， 在 ５２５ｎｍ 处 测 定 吸 光 度 。 以 ＧｌｃＡ 浓 度 对 吸 光 度 做 图 制 备 标 准 曲 线 ， 得 回 归 方 程 为 Ａ２＝０．０１２４６Ｃｕｒｏｎｉｃ － ａｃｉｄ ０．００２２， ｒ＝０．９９９９（ｎ＝６）， 葡 萄 糖 醛酸浓度在 １０～６０μｇ·ｍＬ－ １ 范 围 内 ， 与 吸 光 度 呈 良 好 的线性关系。
２００７ 年第 ０７ 期 １９７
Ａ５２５ Ａ５２５
Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔ ｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｆｏｏｄ Ｉ ｎｄｕｓｔｒｙ
ＧｌｃＡ ５０ｍｇ， 于 １００ｍＬ 量瓶中， 加水稀释至刻度， 摇 匀， 作贮备液。 ２．２．２ 最大吸收波长的选择 取 ＧｌｃＡ 浓度为 ５０μｇ·ｍＬ－１ 的 ＧｌｃＡ标准溶液 ０．５０ｍＬ， 置 １０ｍＬ 具塞试管中， 置冰 水 浴 中 ， 加 入 四 硼 酸 钠－ 硫 酸 溶 液 ４．５ｍＬ， 继 续 冷 却 ， 充分振荡； 将试管置于 １００℃水浴上加热 １０ｍｉｎ， 然后 立即放入冰水浴至冷； 加入 ０．０５ｍＬ ０．１５％间羟基联 苯溶液， 充分振荡， 显色， 超声除去气泡， 静置 ２０ｍｉｎ， 于 ２００～８００ｎｍ 波长范围内扫描， 确定最大吸收波长 为 ５２５ｎｍ。 ２．２．３ 四硼酸钠－ 硫酸溶液用量考察 取 ＧｌｃＡ 浓度为 ５０μｇ·ｍＬ－１ 的 ＧｌｃＡ 标准溶液 ０．５０ｍＬ， 置 １０ｍＬ 具塞 试管中， 置冰水浴中， 加入四硼酸钠－ 硫酸溶液 ２～６ ｍＬ， 继续冷却， 充分振荡； 将试管置于 １００℃水浴上加热 １０ｍｉｎ， 然 后 立 即 放 入 冰 水 浴 至 冷 ； 加 入 ０．０５ｍＬ ０．１５％间 羟 基联苯溶液， 充分振荡， 显色， 超声除去气 泡， 静置 ２０ｍｉｎ， 于 ５２５ｎｍ 处测定吸收度， 结果见图 １。 四硼酸钠－ 硫酸溶液用量为 ４．５ｍＬ 时吸光度达峰值。
糖醛酸测定方法
糖醛酸测定方法一．间羟基联苯比色法1.原理：多聚己糖醛酸与含四硼酸钠的硫酸溶液在高温作用下水解, 水解产物进一步与间羟基联苯反应, 生成粉红色衍生物, 产生紫外吸收, 且在一定浓度范围内, 该衍生物吸收值与糖醛酸含量呈线性关系, 可通过比色法对糖醛酸含量进行计算。
2.试剂配制：间羟基联苯溶液：称取0.15g间羟基联苯溶于5 mg/mL氢氧化钠溶液中, 定容至100mL, 其质量浓度为1.5mg/mL.四硼酸钠/硫酸溶液：0.478g四硼酸钠溶于100mL浓硫酸中, 备用。
葡萄糖溶液：称取葡萄糖25.00mg,加水溶解并定容至25mL混匀, 成1mg/mL的标准溶液。
(排除中性糖对测定结果的影响)半乳糖醛酸标准溶液：称取干燥至恒重的半乳糖醛酸25.00 mg, 加水溶解并定容至25mL, 混匀, 成1mg/mL的标准溶液。
3. 波长扫描：取半乳糖醛酸标准溶液0.50mL, 置10 mL容量瓶中, 用水定容至刻度, 摇匀( 质量浓度为0.05 mg/mL）。
量取溶液1.00 mL 置于20 mL具塞试管, 置冰水浴中, 加入四硼酸钠/硫酸溶液6 mL, 待全部加完后, 用旋涡混合器混匀, 于沸水浴中加热5 min, 冰水浴中冷却后用微量加样枪加入1.5 mg/mL间羟基联苯溶液100 μL, 混匀后振摇5 min, 超声除去气泡。
以1 mL蒸馏水同上操作制得空白液调零, 用UV-2450 型紫外可见分光光度计在200 nm~ 800 nm波长范围内扫描, 确定最大吸收波长。
4.标准曲线的制备：取1mg/mL 半乳糖醛酸标准溶液0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL和0.6 mL置于10 mL容量瓶中, 加水定容, 再分别取上述各配制溶液1.0mL至于20mL具塞试管，置冰水浴中, 加入四硼酸钠/硫酸溶液6 mL, 待全部加完后, 用旋涡混合器混匀, 于沸水浴中加热5 min, 冰水浴中冷却后用微量加样枪加入1.5 mg/mL间羟基联苯溶液100 μL, 混匀后振摇5 min, 超声除去气泡。
多糖中糖醛酸含量测定方法的研究进展
食品研究与开发F ood Research And Development圆园19年9月第40卷第17期多糖中糖醛酸含量测定方法的研究进展李亚平1，周鸿立1，2，*(1.吉林化工学院化学与制药工程学院,吉林吉林132022;2.吉林省农业资源综合开发与利用工程研究中心,吉林吉林132022)摘要：综述多糖中糖醛酸含量测定的方法,以期为更准确的测定糖醛酸含量提供一定的参考。
查阅近年国内外相关文献,对其含量测定的不同方法进行比较,并分析其各自的优缺点。
常见方法有光谱法和色谱法。
光谱法有吡唑-硫酸法、间羟基联苯法及3,5-二甲基苯酚法、色谱法有气相色谱法、分子体积排阻液相色谱法及阴离子液相色谱法。
不同方法的测试条件及准确度各有差别。
光谱法操作简单,但干扰因素多,测定结果偏离理论值较大,且测得的是总糖醛酸的含量;色谱法能够确地测定出不同种类的糖醛酸含量,其中高效阴离子液相色谱法不需要衍生化,是未来测定糖醛酸含量的主要方法。
关键词：多糖;糖醛酸;中性糖;含量测定;光谱法;色谱法Progress on Determination Content of Uronic Acid in PolysaccharidesLI Ya-ping 1,ZHOU Hong-li 1,2,*(1.College of Chemical and Pharmaceutical Engineering ,Jilin Institute of Chemical Technology ,Jilin 132022,Jilin ,China ;2.Engineering Research Center for Agricultural Resources and Comprehensive Utilization of JilinProvince ,Jilin 132022,Jilin ,China )Abstract ：Methods for determination the content of uronic acid in polysaccharides were reviewed ，In order to provide some reference for the accurate determination of the content of uronic acid.By reviewing relevant literatures at home and abroad in recent years ，the characteristics of different methods were compared ，and analyzed their respective advantages and disadvantages.The common methods were spectroscopy and chromatography.The spectroscopy included pyrazole-sulfuric acid method ，hydroxybiphenyl method and 3，5-dimethylphenol method ，and the chromatography had gas chromatography ，molecular size exclusion liquid chromatography and anionic liquid chromatography.The test conditions and accuracy of different methods were different.The spectroscopy was simple to operate ，but there were many interference factors and large deviation and the measured result was the total uronic acid content.The chromatography could accurately determinedifferent kinds of uronic acid content ，among which the high-efficiency anion liquid phase chromatography did not require derivatization.It was the primary method for determination the uronic acid content in the future.Key words ：polysaccharide ；uronic acid ；neutral sugars determination content ；spectroscopic method ；chro -matography引文格式:李亚平,周鸿立.多糖中糖醛酸含量测定方法的研究进展[J].食品研究与开发,2019,40(17):207-211LI Yaping ,ZHOU Hongli.Progress on Determination Content of Uronic Acid in Polysaccharides[J].Food Research and Devel -opment ,2019,40(17):207-211基金项目:吉林省省级产业创新专项资金项目(2017C044)作者简介:李亚平(1991—),女(汉),硕士研究生,研究方向:天然产物的研究与开发。
糖醛酸的含量测定
糖醛酸的含量测定1. 仪器、试剂与药材Hitachi U-3010 紫外可见分光光度计（日本） 超声清洗机（Sb5200D ）宁波生物科技有限公司 恒温数控水浴锅（HH —4）国华电器有限公司半乳糖醛酸为urchem 公司，咔唑为国药集团化学试剂有限公司进口分装。
其他试剂均为分析纯。
0.1%的咔唑标准溶液的制备：取0.1g 咔唑，精密称定，置于100ml 容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。
半乳糖醛酸标准溶液的制备：称取20mg 干燥至恒重的半乳糖醛酸对照品，精密称定，置于100ml 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，得0.1948mg/ml 半乳糖标准溶液。
2.实验部分2.1实验条件的选择：2.1.1最大吸收波长的选择精密吸取半乳糖醛酸标准溶液0.5ml 和五加果实粗多糖溶液0.3ml ，分别置于10ml 的具塞刻度试管中，加水至1.00ml ，加6ml 浓硫酸，摇匀，沸水浴加热20分钟，冷至室温后假如0.1%的咔唑标准溶液0.25ml ，摇匀。
另取1.00ml 水同上操作制得空白溶液。
用日本hitach 紫外-可见分光光度计于400-600nm 波长范围内依次扫描，确定半乳醛酸最大吸收波长为520nm ，样品也为520nm 。
400500600nm糖醛酸纯品0.000.050.100.150.200.250.300.350.400.450.50 Abs糖醛酸纯品Peak # Start (nm) Apex (nm) End (nm) Height (Abs) Valley (nm) Valley (Abs) 600.00 520.00 419.00 0.476 50.349 419.00半乳糖醛酸标准品nmB0.30.40.50.60.70.80.91.0 Abs五加果实粗多糖样品中糖醛酸BPeak # Start (nm) Apex (nm) End (nm) Height (Abs) Valley (nm) Valley (Abs)1 600.00 518.00 415.50 0.953 131.559 415.502.1.2浓硫酸用量考察精密吸取半乳糖醛酸标准溶液0.5ml ，浓硫酸用量为3-10ml ，其它操作同前，分别测定吸收度值。
植物多糖中糖醛酸和中性糖分析检测方法的研究进展
植物多糖中糖醛酸和中性糖分析检测方法的研究进展陈辉;和娴娴;李浩然【摘要】综述植物多糖组分中糖醛酸和中性糖定性及定量的各种分析检测方法,并进行分类比较.【期刊名称】《食品工程》【年(卷),期】2011(000)002【总页数】4页(P50-53)【关键词】糖醛酸;中性糖;检测方法;研究进展【作者】陈辉;和娴娴;李浩然【作者单位】河北科技大学,石家庄050018;河北科技大学,石家庄050018;河北科技大学,石家庄050018【正文语种】中文【中图分类】TS236.2随着生物技术的发展，多糖组分检测方法的研究日益受到重视。
多糖是由10个以上的单糖，并通过糖苷键聚合而成的一种生物大分子，其相对分子质量为数万甚至数百万。
多糖一般分为均多糖和杂多糖，在天然多糖类中以杂多糖为主。
在多糖组分结构中除单糖外，还含有糖醛酸、去氧糖、氨基糖、糖醇等基团。
按照化学性质，植物多糖可以分为中性多糖和酸性多糖。
其中后者引入了糖醛酸等基团而有酸性和一些相应的药效，通常有葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸。
定量测定时，其中的糖醛酸与中性糖两种组分会相互干扰而影响到实验准确性。
由于植物多糖中组分性质的不同，使组分的分析条件不同，增加了其分析测定的难度。
分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
按照显色剂的不同，检测糖醛酸的方法可以分为间羟基联苯法和硫酸-咔唑法两种。
两种具体方法的检测步骤类似，均是加入四硼酸钠硫酸溶液后，置于冰水浴中预冷。
然后分别取空白溶液（蒸馏水）和不同浓度的标准品各l mL加入到试管里，之后轻轻的震荡，直至充分混匀，期间不断用冰水浴冷却，并将试管置沸水中加热数分钟，冷却至室温。
最终加入显色试剂，摇匀，并沸水中再加热若干分钟后，冷却至室温，在指定处测定吸光度，以吸光度对浓度作图即可得出标准曲线。
以上两种方法的主要区别在于显色试剂的种类和用量，分别加入的间羟基联苯的氢氧化钠溶液和咔唑的乙醇溶液，具体的显色剂用量和衍生处理时间则是依照实验过程而定。
一种快速测定毛竹半纤维素中糖醛酸含量的方法
一种快速测定毛竹半纤维素中糖醛酸含量的方法林妲;彭红;阮榕生;余紫苹;刘玉环【摘要】Arabinoglucuronoxylan is the main component in the hemicellulose of moso bamboo. The content of glucuronic acid which is as the main side chain can reflect the structure of the hemicellulose. In this paper, a method for the determination of glucuronic acid in hemicellulose of moso bamboo with m-hydroxydiphenyl was used. The amounts of tetraborate/H2SO4 , m-hydroxydiphenyl and the boiling time were studied. This method was proved simple, accurate and reproducible.%采用间羟基联苯比色法测定毛竹半纤维素中葡萄糖醛酸含最,并研究了四硼酸钠/硫酸、间羟基联苯溶液添加量及沸水浴时间对测定结果的影响,建立了适合于毛竹半纤维素中糖醛酸含量的测定条件,同时证明了该方法测定毛竹半纤维素中葡萄糖醛酸的稳定性、可重复性和精密度.【期刊名称】《中国造纸》【年(卷),期】2012(031)003【总页数】4页(P16-19)【关键词】毛竹半纤维素;葡萄糖醛酸;间羟基联苯比色法【作者】林妲;彭红;阮榕生;余紫苹;刘玉环【作者单位】南昌大学生物质转化教育部工程技术研究中心,江西南昌,330047;南昌大学生物质转化教育部工程技术研究中心,江西南昌,330047;南昌大学生物质转化教育部工程技术研究中心,江西南昌,330047;南昌大学生物质转化教育部工程技术研究中心,江西南昌,330047;南昌大学生物质转化教育部工程技术研究中心,江西南昌,330047【正文语种】中文【中图分类】TS749+.3毛竹又名“楠竹”、“孟宗竹”，禾本科竹亚科刚竹属，单轴散生型，常绿乔木状竹类植物。
多糖中糖醛酸含量测定方法的研究进展
多糖中糖醛酸含量测定方法的研究进展李亚平; 周鸿立【期刊名称】《《食品研究与开发》》【年(卷),期】2019(040)017【总页数】5页(P207-211)【关键词】多糖; 糖醛酸; 中性糖; 含量测定; 光谱法; 色谱法【作者】李亚平; 周鸿立【作者单位】吉林化工学院化学与制药工程学院吉林吉林132022; 吉林省农业资源综合开发与利用工程研究中心吉林吉林132022【正文语种】中文糖醛酸[1]又名透明质酸，它作为多糖分子中6位的羟甲基氧化成羧基的产物，是一种酸性的黏多糖。
其中，某些多糖本身或具有糖醛酸结构的多糖常表现出十分重要的生物活性，例如，免疫调节活性、抗病毒活性[2-3]，而这类具有特殊生理活性的多糖中糖醛酸含量一般较高。
由于含有糖醛酸结构的多糖一般存在于植物中，因此，对于从天然植物中提取的多糖，确定其分子结构中是否含有糖醛酸残基具有极其重要的意义，所以有必要对糖醛酸含量测定方法进行研究。
因为糖类物质大都没有紫外吸收，须将其衍生化后方可进行测定。
但在实际工作中，特别是在测定天然多糖产物中糖醛酸含量时，发现测得的结果往往与实际情况有偏差，这是由于糖醛酸和中性单糖并不是独立存在，它们可能存在于同一个糖链中，无法将它们分离。
例如，很多多糖以酸性杂多糖的形式存在，这在测定糖醛酸含量时可能存在相互干扰的情况[4]。
因此探索准确测定天然多糖化合物中糖醛酸含量的方法是十分有必要的。
目前多糖中糖醛酸含量测定的方法有光谱法和色谱法。
本文对目前的国内外糖醛酸的含量测定方法进行了综述，以期为糖醛酸的质量控制提供参考。
1 糖醛酸含量的检测方法1.1 光谱法1.1.1 咔唑-硫酸法咔唑-硫酸法[5]是测定糖醛酸含量的方法之一，糖醛酸在浓硫酸的作用下水解成带有-COOH的糠醛或糠醛衍生物，与咔唑试剂发生缩合反应，生成紫红色化合物，其呈色强度与糖醛酸含量成正比，可比色定量。
采用咔唑-硫酸法测定糖醛酸含量见如表1所示。
葡萄糖糖醛酸测定标准操作规程
葡萄糖醛酸检测标准操作规程1．目的规范产品葡萄糖醛酸检测程序，特制定本规程。
2．范围本公司葡萄糖醛酸的检查3．责任人检验人员4．内容4.1仪器与用具紫外可见分光光度计、万用电炉、1000ml搪瓷杯、25ml具塞试管、0.5ml刻度吸管、1ml刻度吸管、5ml刻度吸管、10ml刻度吸管、100ml容量瓶、万分之一分析天平。
4.2试药与试液4.2.1 60μg/ml的葡萄糖醛酸标准溶液：精密称取经60℃干燥至恒重的葡萄糖醛酸对照品60mg,精密称定，置100ml量瓶中，用水溶解，并稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
4.2.2 0.025mol/l的硫酸硼砂溶液：称取四硼酸钠4.77g，溶于浓硫酸（AR）500ml中即得。
4.2.3 0.125%的咔唑试剂：称取咔唑0.125g，溶于100ml无水乙醇（AR）中，置于棕色瓶中于冰箱内保存，保存期三年。
4.3操作方法4.3.1标准曲线的制作：精密量取对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml，分别置25ml具塞试管中，各加水至1.0ml，混匀，冰浴中冷却，并在不断振摇下缓缓滴加0.025mol/L硼砂硫酸溶液5.0ml，密塞，沸水浴加热10分钟（中间振摇一次），迅速冷却，加0.125%咔唑的无水乙醇溶液0.2ml，摇匀，沸水浴中加热15分钟（中间振摇一次），冷却至室温。
照紫外-可见光光度法（中国药典2010年版二部附录IV A），以0管为空白，在530nm的波长处测定吸光度，以葡萄糖醛酸的μg数对相应的吸光度计算回归方程：C=kA+b，b-截距，k-斜率。
4.3.2 供试品的测定4.3.2.1 供试品溶液的配制：取样品约300mg，精密称定，置100ml量瓶中，用水溶解，并稀释至刻度，摇匀；用内容量移液管量取1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
4.3.2.2测定法：精密量取供试品溶液1.0ml，置25ml具塞试管中，自“冰浴中冷却”起照标准曲线制备项下的方法测定4.4注意事项本实验所使用的硫酸硼砂溶液为危化品，操作时必须佩带口罩，橡胶手套，加热须置于通风处。
总多糖含量测定方法
总多糖含量测定方法
总多糖的含量测定方法有多种，其中包括苯酚-硫酸法、3,5-二硝基水杨酸比色法、蒽酮-硫酸法等。
1. 苯酚-硫酸法：苯酚-硫酸试剂可与游离的或多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应，己糖在490nm波长处、戊糖及糖醛酸在480nm 波长处有最大吸收，吸收度与糖含量呈线性关系。
2. 3,5-二硝基水杨酸比色法（DNS法）：3，5-二硝基水杨酸与多糖水解后的还原糖生成有色物质进行测定。
这种方法是在碱性条件下显色，较准确测定还原糖与总糖的含量从而求出多糖的含量，可消除还原性杂质的干扰。
3. 蒽酮-硫酸法：多糖与硫酸发生脱水反应，生成糠醛或其衍生物，与蒽酮试剂缩合生成有色物质进行测定。
此外，间羟基联苯法也是一种常用的多糖中糖醛酸含量测定方法，该法较硫酸咔唑法受中性糖残基的干扰更小。
另外还有超氧阴离子清除率和羟自由基清除率的检测方法、水分的检测方法等。
糖醛酸测定方法
糖醛酸测定方法一•间羟基联苯比色法1•原理：多聚己糖醛酸与含四硼酸钠的硫酸溶液在高温作用下水解，水解产物进一步与间羟基联苯反应，生成粉红色衍生物，产生紫外吸收，且在一定浓度范围内，该衍生物吸收值与糖醛酸含量呈线性关系，可通过比色法对糖醛酸含量进行计算。
2. 试剂配制：间羟基联苯溶液：称取0.15g间羟基联苯溶于5 mg/mL氢氧化钠溶液中，定容至100mL，其质量浓度为1.5mg/mL.四硼酸钠/硫酸溶液：0.478g四硼酸钠溶于100mL浓硫酸中，备用葡萄糖溶液：称取葡萄糖25.00mg，加水溶解并定容至25mL混匀，成1mg/mL的标准溶液。
（排除中性糖对测定结果的影响）半乳糖醛酸标准溶液：称取干燥至恒重的半乳糖醛酸25.00 mg，加水溶解并定容至25mL，混匀，成1mg/mL的标准溶液。
3. 波长扫描：取半乳糖醛酸标准溶液0.50mL，置10 mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀（质量浓度为0.05 mg/mL）。
量取溶液1.00 mL置于20 mL具塞试管，置冰水浴中，加入四硼酸钠/硫酸溶液6 mL，待全部加完后，用旋涡混合器混匀，于沸水浴中加热5 min，冰水浴中冷却后用微量加样枪加入1.5 mg/mL间羟基联苯溶液100此，混匀后振摇5 min，超声除去气泡。
以1 mL蒸馏水同上操作制得空白液调零，用UV-2450型紫外可见分光光度计在200 nm~ 800 nm波长范围内扫描，确定最大吸收波长。
4. 标准曲线的制备：取1mg/mL半乳糖醛酸标准溶液0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL和0.6 mL置于10 mL容量瓶中，加水定容，再分别取上述各配制溶液1.0mL至于20mL具塞试管，置冰水浴中，加入四硼酸钠/硫酸溶液6 mL，待全部加完后，用旋涡混合器混匀，于沸水浴中加热5 min，冰水浴中冷却后用微量加样枪加入1.5 mg/mL间羟基联苯溶液100 L混匀后振摇5 min，超声除去气泡。
化妆品中葡糖醛酸等14种原料的检验方法
附件6化妆品中葡糖醛酸等14种原料的检验方法Determination of Glucuronic Acid and Other 13 Kinds of Components in Cosmetics1 范围本方法规定了高效液相色谱法测定化妆品中葡糖醛酸等14种原料的含量。
本方法适用于液体类、凝胶类、膏霜乳类化妆品中葡糖醛酸等14种原料含量的测定。
本方法所指的14种原料包括葡糖醛酸、酒石酸、羟基乙酸、苹果酸、乳酸、柠檬酸、2-羟基丁酸、乳酸甲酯、扁桃酸、乳酸乙酯、乳酸丁酯、二苯乙醇酸、柠檬酸三乙酯、羟基辛酸。
2 方法提要以水提取化妆品中葡糖醛酸等14种原料，用高效液相色谱仪进行分离，二极管阵列检测器检测，以保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量。
本方法中14种原料的检出限、定量下限及取样量为1.0 g，定容体积为10 mL时检出浓度和最低定量浓度见表1。
表1 14种原料的检出限、定量下限和检出浓度、最低定量浓度序号原料名称检出限定量下限检出浓度最低定量浓度（μg）（μg）（μg/g）（μg/g）1 葡糖醛酸0.08 0.24 160 4802 酒石酸0.03 0.09 60 1803 羟基乙酸0.02 0.06 40 1204 苹果酸0.02 0.06 40 1205 乳酸0.05 0.15 100 3006 柠檬酸0.02 0.06 40 1207 2-羟基丁酸0.04 0.12 80 2408 乳酸甲酯0.04 0.12 80 2409 扁桃酸0.001 0.003 2 610 乳酸乙酯0.04 0.12 80 24011 乳酸丁酯0.04 0.12 80 24012 二苯乙醇酸0.001 0.003 2 613 柠檬酸三乙酯0.04 0.12 80 24014 羟基辛酸0.02 0.06 40 1203 试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T 6682规定的一级水。
银耳多糖中糖醛酸含量的测定
银耳多糖中糖醛酸含量的测定咱们先来说说银耳。
这银耳啊，可是个好东西！白白嫩嫩的，吃起来滑溜溜的，不管是炖汤还是凉拌，都特别美味。
而且啊，它还富含各种营养成分，对咱们的身体那是相当好。
其中，银耳多糖就是银耳的一大“宝贝”。
这银耳多糖就像是银耳的“能量库”，有着很多神奇的功效，比如能增强免疫力、美容养颜、延缓衰老等等。
而在这银耳多糖里面，糖醛酸又是一个重要的“角色”。
那为什么要测定银耳多糖中糖醛酸的含量呢？这就好比你想知道一个宝箱里到底藏了多少宝贝一样。
了解了糖醛酸的含量，我们就能更清楚地知道银耳的营养价值到底有多高，也能更好地利用银耳来保健养生。
比如说，如果糖醛酸含量高，那说明这个银耳的品质可能就比较好，营养成分更丰富；要是含量低呢，那可能就需要再找找其他更优质的银耳啦。
接下来，咱们就来说说怎么测定这个糖醛酸的含量。
这可就有点像一场小小的“科学探险”啦！我们得把银耳中的多糖提取出来。
这就好比是从一堆宝藏里把我们想要的那部分宝贝找出来。
提取的方法有很多种，就像是有好多条通往宝藏的路，每种方法都有它的特点。
有的方法可能比较简单，但提取出来的多糖可能不太纯；有的方法虽然复杂一点，但能得到更纯净的多糖。
提取完多糖之后，就要开始测定糖醛酸的含量啦。
这时候，我们会用到一些专业的仪器和试剂，就像是探险时需要的工具一样。
比如说，我们可以用比色法来测定。
这个方法啊，简单来说，就是让糖醛酸和一种特定的试剂发生反应，然后根据反应后溶液颜色的变化来判断糖醛酸的含量。
这就好比是给糖醛酸穿上了一件有颜色的“衣服”，通过看“衣服”的颜色深浅，就能知道糖醛酸有多少啦。
测定的过程可没那么简单哦。
就像探险路上会遇到各种困难一样，我们在测定的时候也会遇到一些干扰因素。
比如说，其他物质可能也会和试剂发生反应，影响我们对糖醛酸含量的判断。
这时候，我们就需要采取一些措施来排除这些干扰，就像是在探险路上要克服各种障碍一样。
通过准确地测定银耳多糖中糖醛酸的含量，我们不仅能更好地了解银耳的营养价值，还能为银耳的开发和利用提供科学依据。
糖醛酸含量测定
糖醛酸含量测定——硫酸-咔唑（523 nm）1实验材料1.1药品：半乳糖醛酸、四硼酸钠、浓硫酸、无水乙醇、咔唑、漩涡混合器、具塞试管1.2对照品溶液的配制精密称取干燥至恒质量的半乳糖醛酸10mg, 用适量的蒸馏水溶解, 并定容于100mL 容量瓶中, 配成100μg/mL 的对照品溶液。
1.3供试品溶液的配制精密称取多糖10mg, 加入蒸馏水溶解, 并定容于10mL 容量瓶中, 配制成浓度为1mg/mL 溶液。
1.4四硼酸钠- 硫酸溶液的配制精密称取0.478g 四硼酸钠溶解于100mL 浓硫酸中备用[3]。
1.5咔唑溶液的配制精密称取咔唑75mg, 溶解于50mL 无水乙醇中,配制成0.15%的咔唑溶液备用。
2实验方法2.1测定波长的选择分别吸取对照品溶液、供试品溶液1mL, 置于10mL 具塞试管中, 在冰水浴中分别加入四硼酸钠- 硫酸溶液5mL, 用漩涡混合器混匀, 于沸水浴中加热20min, 取出后立即冷却至室温, 加0.15%咔唑溶液0.2mL, 摇匀, 在室温下保持2h, 另取1mL 蒸馏水同法操作作参比, 在波长400～800nm 扫描,2.2标准曲线的制作分别精密吸取对照品溶液0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0mL 于10mL 具塞试管中, 各管加水至1mL, 分别在冰水浴中加入四硼酸钠- 硫酸溶液5mL,取出后立即冷却至室温, 加0.15%咔唑溶液0.2mL, 摇匀, 在室温下保持2h, 在最佳测定波长下测定其吸光度。
2.3样品糖醛酸含量的测定取供试品溶液各1 mL，同时做三个重复, 以空白试剂为参比, 按上述标准曲线的测定法, 分别测定其吸光度值, 计算样品中蛋白质的含量。
蕨麻多糖（1 mg/ml）3.1 稳定性实验取同一供试品溶液1 mL, 按下列时间梯度测定3 次,观测其稳定性, 结果见表。
静置时间过长？3.2 精密度实验精密吸取100 μg/mL标准溶液0.5 mL 进行精密度试验, 连续进行6 次测定其吸光度,3.3重现性实验精密吸取来自同一批原料的试样, 按样品测定方法, 分别测定其吸光度, 检验该测定方法的重现性, 表明重复性较好,3.4回收率实验精密吸取1mg/mL 供试品溶液0.1mL, 分别加入0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL 的对照品溶液, 按样品测。
糖醛酸的含量测定
糖醛酸的含量测定1. 仪器、试剂与药材Hitachi U-3010 紫外可见分光光度计（日本）超声清洗机（Sb5200D）宁波生物科技有限公司恒温数控水浴锅（HH- 4）国华电器有限公司半乳糖醛酸为urchem公司，咔唑为国药集团化学试剂有限公司进口分装。
其他试剂均为分析纯。
0.1%的咔唑标准溶液的制备：取0.1g咔唑，精密称定，置于100ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。
半乳糖醛酸标准溶液的制备：称取20mg干燥至恒重的半乳糖醛酸对照品，精密称定，置于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，得0.1948mg/ml半乳糖标准溶液。
2. 实验部分2.1实验条件的选择：2.1.1最大吸收波长的选择精密吸取半乳糖醛酸标准溶液0.5ml和五加果实粗多糖溶液0.3ml，分别置于10ml 的具塞刻度试管中，加水至 1.00ml，加6ml浓硫酸，摇匀，沸水浴加热20分钟，冷至室温后假如0.1%的咔唑标准溶液0.25ml，摇匀。
另取1.00ml水同上操作制得空白溶液。
用日本hitach紫外-可见分光光度计于400-600nm波长范围内依次扫描，确定半乳醛酸最大吸收波长为520nm,样品也为520nm=糖醛酸纯品Apex (nm) End (nm) Height (Abs) Valley (nm) Valley 520.00 419.00 0.476 50.349 419.00半乳糖醛酸标准品nmAbs糖醛酸纯品Peak # Start (nm) (Abs) 600.00Abs1.0 二0.940.84圧0.640.5 !0.440芜_400五加果实粗多糖样品中糖醛酸BPeak # Start (nm) Apex (nm) End (nm) Height (Abs) Valley (nm) Valley (Abs)1600.00 518.00415.500.953131.559415.502.1.2浓硫酸用量考祭精密吸取半乳糖醛酸标准溶液0.5ml , 浓硫酸用量为3-10ml ,其它操作同前，分别测定吸收度值。
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糖醛酸测定方法
一．间羟基联苯比色法
1.原理：多聚己糖醛酸与含四硼酸钠的硫酸溶液在高温作用下水解, 水解产物进一步与间羟基联苯反应, 生成粉红色衍生物, 产生紫外吸收, 且在一定浓度范围内, 该衍生物吸收值与糖醛酸含量呈线性关系, 可通过比色法对糖醛酸含量进行计算。
2.试剂配制：
间羟基联苯溶液：称取0.15g间羟基联苯溶于5 mg/mL氢氧化钠溶液中, 定容至100mL, 其质量浓度为1.5mg/mL.
四硼酸钠/硫酸溶液：0.478g四硼酸钠溶于100mL浓硫酸中, 备用。
葡萄糖溶液：称取葡萄糖25.00mg,加水溶解并定容至25mL混匀, 成1mg/mL的标准溶液。
(排除中性糖对测定结果的影响)
半乳糖醛酸标准溶液：称取干燥至恒重的半乳糖醛酸25.00 mg, 加水溶解并定容至25mL, 混匀, 成1mg/mL的标准溶液。
3. 波长扫描：取半乳糖醛酸标准溶液0.50mL, 置10 mL容量瓶中, 用水定容至刻度, 摇匀( 质量浓度为0.05 mg/mL）。
量取溶液1.00 mL 置于20 mL具塞试管, 置冰水浴中, 加入四硼酸钠/硫酸溶液6 mL, 待全部加完后, 用旋涡混合器混匀, 于沸水浴中加热5 min, 冰水浴中冷却后用微量加样枪加入1.5 mg/mL间羟基联苯溶液100 μL, 混匀后振摇5 min, 超声除去气泡。
以1 mL蒸馏水同上操作制得空
白液调零, 用UV-2450 型紫外可见分光光度计在200 nm~ 800 nm波长范围内扫描, 确定最大吸收波长。
4.标准曲线的制备：取1mg/mL 半乳糖醛酸标准溶液0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、0.4 mL、0.5 mL和0.6 mL置于10 mL容量瓶中, 加水定容, 再分别取上述各配制溶液1.0mL至于20mL具塞试管，置冰水浴中, 加入四硼酸钠/硫酸溶液6 mL, 待全部加完后, 用旋涡混合器混匀, 于沸水浴中加热5 min, 冰水浴中冷却后用微量加样枪加入1.5 mg/mL间羟基联苯溶液100 μL, 混匀后振摇5 min, 超声除去气泡。
以1 mL蒸馏水同上操作制得空白液调零,在最大吸收波长处测定吸光度。
5.样品测定：取样品5 mg置100 mL容量瓶, 加水溶解定容至刻度。
取溶液1.00 mL按标准曲线项方法操作。
6.中性糖影响：在一定浓度半乳糖醛酸标准溶液中, 添加不同质量的中性糖（以葡萄糖为例）, 测得加入不同质量浓度的中性糖对半乳糖醛酸溶液吸光度的影响。
二．高效液相色谱法A
1.标准溶液的制备：
精密称取半乳糖醛酸对照品205. 4 mg,置50mL容量瓶中,加超纯水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每1 mL中含半乳糖醛酸4. 108 mg) 。
精密吸取上述对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0mL置于25 mL容量瓶中,加超纯水稀释至刻度,摇匀,制得0.116432、0.132864、0.149296、0.165728、0.18216、
0.198592、1.115024、1.131456、1.147888 mg/mL的系列标准溶液。
2.标准曲线的绘制：
取配制好的半乳糖醛酸系列标准溶液,分别进样20μL,按下面色谱条件测定半乳糖醛酸峰面积,以半乳糖醛酸峰面积为纵坐标, 对照品浓度(mg/mL)为横坐标,绘制标准曲线。
求得回归方程。
3.色谱条件
色谱柱: Sugar-PakⅠ (300 mm ×6. 5 mm) ,流动相: 0. 0001 mol/L EDTA水溶液,流速: 0. 6 mL /min,示差检测器,柱温: 90 ℃,示差检测池温度: 40 ℃,进样量: 20μL。
理论板数:以半乳糖醛酸峰计算,不得低于3000。
高效液相色谱法B
色谱条件色谱柱：ZORBAX SAX 4.6×250mm 5-Micron Agilent ；柱温：40℃；流动相：0.7mol/l乙酸；流速：1.0ml/min；测定波长：示差检测；示差检测器温度：40℃；进样量：20μL。
标准曲线的绘制：称取古洛糖醛酸标准品，用重蒸水溶解，配制成浓度为1.07、2.14、3.21、5.35、10.7mg/mL的标准溶液。
分别进样10μL进行HPLC测定，以峰面积为纵坐标，相应标准溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线进行线性回归。
样品处理与检测：准确称取300mg（精确至±0.0001）海藻酸钠或者海藻，加入72%硫酸溶液3.5mL，于研钵中研磨2h，用100mL 蒸馏水将其转移至250mL 三角瓶，100℃沸水浴加热2.5h，于自来水中冷却至室温，加入过量BaCO3粉末，充分反应至溶液pH 为7左右，3000r/min离心，沉淀用150mL 蒸馏水洗涤3次，将上清液和洗涤液合并在一起，45℃真空旋转浓缩后，定容至10mL，进样10μL 进行HPLC测定。
依据样品测定的峰面积和出峰时间，在相应的标准曲线查出所测组分的量，结合所取样品的质量和定容体积，计算出各组分的含量。
三．咔唑—硫酸比色法（修改后）
1. 原理：半乳糖醛酸在硫酸中与咔唑试剂发生缩合反应，生成紫红色化合物，其呈色强度与半乳糖醛酸含量成正比，可比色定量。
2. 对照品溶液的配制：精密称取干燥至恒重的半乳糖醛酸19. 8 mg，用适量的蒸馏水溶解，并定容于100 ml 容量瓶中，配成198 μg /ml 的对照品溶液。
使用时稀释至99μg/ml。
四硼酸钠-硫酸溶液的配制:精密称取0.956 g 四硼酸钠溶解于200 ml 浓硫酸中，超声溶解，备用。
咔唑溶液的配制：精密称取咔唑100 mg，溶解于100 ml无水乙醇中，配制成0.1%的咔唑溶液备用。
4.半乳糖醛酸标准曲线制备：分别精密吸取对照品0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml 溶液置于10 ml 具塞试管中，各管加水至0.5 ml，分别在冰水浴中加入四硼酸钠－硫酸溶液3ml，用漩涡混合器混匀，于沸水浴中加热5 min，取出后立即冷却至室温，加0.1%咔唑溶液0.1 ml，摇匀，煮沸5min，冷却至室温后在530nm处测定其吸光度。
以浓度为横坐标，以吸光度值为纵坐标进行线性回归。
方法学考察：
⑤精密度试验取同一对照品溶液,重复测定5 次。
⑥稳定性试验取同一供试品溶液,每隔30min 测定1 次，共测定2h 。
⑦重现性试验取同一批号样品多糖5 份,按测定法操作。
⑧加样回收率试验精密称取已知含量多糖5份,分别精密加入葡萄糖醛酸对照品适量,测定吸收度,计算回收率。
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