第二章 药物性状检查与鉴别实验 - 2

特点：专属性强，应用较广（固体、液体、气体）；
主要用于组分单一、结构明确的原料药，以及结构
相近的同类药物。 方法： 标准图谱法：按指定条件绘制供试品的红外图谱，与《药品 红外光谱集》中的相应标准图谱对比，如果峰位、峰形、相 对强度都一致时，即为同一种药物。 对照品法：将供试品与对照品在相同的条件下绘制红外图
（六）质谱法
将被测物质离子化后，在高真空状态下按离子的质荷比 （m/z）大小分离，而实现物质成分和结构分析的方法。用
于药物的定性鉴别和定量测定。
（七）X射线粉末衍射法
利用晶体对X射线的衍射效应来进行定性、定
量分析的方法。
用于结晶物质的鉴别，将供试品与参照品的X
射线粉末衍射图进行比较。
第二节 药物的鉴别试验 三、鉴别的方法 （三）色谱法 1. 概念：利用不同物质在不同色谱条件下，产生各自的 特征色谱行为（比移值或保留时间）进行的鉴别试验
第二章 药物的性状检查与鉴别试验
第二节
药物的鉴别试验
第二节 药物的鉴别试验 一、鉴别的目的、意义
根据药物的组成、结构、理化性质，利用物理化学及生 物学等方法来判断药物真伪的分析方法。 主要目的：判断药物的真伪，是药品检验中的首项工作
第二节 药物的鉴别试验 二、分类 （一）一般鉴别试验
依据某一类药物的化学结构或物化性质的特征，通过化学反应来 鉴别药物的真伪。 无机物：阴离子和阳离子的特殊反应 有机物：典型的有机官能团反应。
第二节 药物的鉴别试验 二、分类
钠盐 焰色反应：显鲜黄色 焦锑酸钠反应： 钠离子+焦锑酸钾→致密的沉淀焦锑酸钠↓
无机金属盐（Na, K, Ca)
焰色反应：Na显鲜黄色；K显紫色；Ca显砖红色
第二节 药物的鉴别试验 二、分类
焰色反应是某些金属或它们的挥发性化合物在无色火焰中灼烧时使 火焰呈现特征的颜色的反应.有些金属或它们的化合物在灼烧时能使火 焰呈特殊颜色。这是因为这些金属元素的原子在接受火焰提供的能量时， 其外层电子将会被激发到能量较高的激发态。处于激发态的外层电子不 稳定，又要跃迁到能量较低的基态。不同元素原子的外层电子具有着不 同能量的基态和激发态。在这个过程中就会产生不同的波长的电磁波， 如果这种电磁波的波长是在可见光波长范围内，就会在火焰中观察到这 种元素的特征颜色。利用元素的这一性质就可以检验一些金属或金属化 合物的存在。这就是物质检验中的焰色反应。
质谱鉴别法 (Mass Spectrometry)
9-HO-LPT #1664 RT: 9.39 AV: 1 NL: 5.18E6 T: + c sid=-10.00 Q3MS [ 50.00-500.00] 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 50 100 150 200 250 m/z 300 350 400 450 500 102.02 59.94 68.96 129.93 274.21 144.95 218.16 246.16 318.23 362.28 415.17 433.21 473.23 428.18 432.18 302.22 427.17
沉淀生成反应鉴别法
荧光反应鉴别法
鉴别方法
气体生成反应鉴别法
使试剂褪色的鉴别法
测定生成物的熔点
（一）呈色反应鉴别法
在供试品溶液中加入适当的试剂，在一定条件下反
应，生成易于观测的有色产物。
（1）酚羟基的三氯化铁呈色反应
（2）托烷生物碱类的Vitali反应
（3）芳香第一胺的重氮化-偶合反应
（4）氨基醇结构的双缩脲反应
显 微 鉴 别 法
生 物 鉴 别 法
利用药效学和分子生物学等有关技术来鉴定药物 品质的一种方法，主要用于抗生素、生化药物以 及中药的鉴别，分为生物效应鉴别法和基因鉴别 法两类。
鉴别试验的灵敏度
鉴别试验是以灵敏度的专属反应为依据，在合适的条件下进行 试验判定工作的，如果选择的鉴别反应的灵敏度高，则产生可被 观测的结果所需要的药物愈少。
（一）反应的灵敏度和空白试验 1、反应的灵敏度（sensitivity）： 在一定的条件下，能在尽可能稀的溶液中观测出尽可 能少量的供试品，反应对这一要求所能满足的程度，即 称为反应的灵敏度。 （1）最低检出量（minimum detectable quantity）：又 称为检出限量，以m表示，就是利用某一反应，在一定条 件下，能够观测出的供试品的最小量，单位：μg。 （2）最低检出浓度（ minimum detectable concentration ）：又称界限浓度，以1:G（或1:V）表 示，其中G（V）表示含有1g重某供试品的溶液的克（mL） 数。即应用某一反应，在一定条件下能够观测出供试品 的最低浓度。
+2AgNO3 白色沉淀
+2HNO3
第二节 药物的鉴别试验 二、分类 （二）专属鉴别试验
证实某一种药物的依据
根据一类药物中每一种药物化学结构的差异理化特 性，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物 的真伪。 如：巴比妥类药物的鉴别试验（共有母核，5,5位和 2-位取代基不同）
第二节 药物的鉴别试验
只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物！ 方法具有专属性，不能依据方法鉴别未知物！
第二节 药物的鉴别试验 丙二酰脲类（巴比妥酸） 托烷生物碱类（阿托品）
芳香第一胺类
CHP2015 通则下收 载的项目 有机氟化物类 无机金属盐类 无机酸盐类 有机酸盐类
Na+、K+、 Li+、Fe3+、 Al3+、NH4+
+F +Ce-Leabharlann 3+pH4.3
O
OH O F CH2COO CH2N CH2COO Ce OH
蓝紫色络合物
O
第二节 药物的鉴别试验 二、分类
丙二酰脲类（巴比妥类）药物
R1 R2 CO C CO NH NH C O
丙二酰脲-CONHCONHCO可与某些金属离子（Ag+、Cu2+、
Hg2+等）反应呈色或产生沉淀
• 规定最大吸收波长和吸光度比值法
第二节 药物的鉴别试验 三、鉴别的方法 （二）光谱法 2.红外分光光度鉴别法
（1）概念：红外光区（2.5～25μm）的吸收光谱
第二节 药物的鉴别试验 三、鉴别的方法
（二）光谱法
2.红外分光光度鉴别法 （2）主要依据：标准图谱，主要参数是吸收峰的位置和 吸收峰的强度，另外还需分析特征区与指纹区的峰形特 点。 （3）供试品的制备及测定 （4）注意事项
2、空白试验（blank test）
在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供
试品外，其他试剂同样加入进行试验。 在选用灵敏度很高的反应时必须采用高纯度的试剂 和非常洁净的器皿，才能保证试验结果的可靠性。为了 消除试剂和器皿可能带来的影响，应同时进行空白试验 进行对照。
（5）含羰基结构的苯肼反应
（二）沉淀生成反应鉴别法
在供试品溶液中加入适当的试剂，在一定条件下 反应，生成不同颜色的沉淀。 （1）氯化物的银盐沉淀反应 （2）与重金属离子的沉淀反应 （3）含氮杂环类的生物碱沉淀剂（碘化铋钾、 硅钨酸等）反应 （4）磺胺类药物的铜盐反应
（三）荧光鉴别法
（1）在适当的溶液中药物本身在可见光下发射荧光 如：硫酸奎宁的稀硫酸溶液显蓝色荧光 （2）药物与适当试剂反应后发射荧光 如：维生素B1的硫色素反应 VB1
光谱法
原子吸收法 （AAS）
核磁共振法（NMR）
质谱法（MS）
X射线粉末衍射法（XRD）
第二节 药物的鉴别试验 三、鉴别的方法 （二）光谱法 1.紫外-可见分光光度鉴别法
（1）概念（200~760nm）
（2）鉴别的主要依据：吸收 光谱的形状、 最大吸收波长、吸收峰数目、 各吸收峰的 位置、强度和相应的吸收系数。
ChP2015版示例
• 示例一 盐酸布比卡因的鉴别试验 • 约0.40mg/ml λmax: 263nm、271nm • A: 0.53~0.58；0.43~0.48 • 规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度 • • • • 示例二 地蒽酚的鉴别试验 λmax: 257nm、289nm、 356nm A257/ A289=1.06~1.10 A356/ A289=0.90~0.94
紫外-可见分光光度法吸收光谱示意图
特点：操作简便、快速，可用于多数有机药物的鉴别。 不足：用作鉴别的专属性远不如红外光谱法。 常用方法：
①对比吸收光谱一致性 ②对比吸收光谱特征参数 ③比较吸收度比值一致性
④经化学处理后，测定反应产物的吸收光谱特性。
以上方法可单用，也可几个结合使用，以提高专属性。
•
（四）原子吸收法
利用原子蒸气可以吸收由该元素作为阴极的空心阴极 灯发出的特征谱线的特性，根据供试溶液在特征谱线处 的最大吸收和特征谱线的强度减弱程度进行定性、定量 分析。
（五）核磁共振法
用于化学结构研究。药物中常用的是1H-NMR，其光
谱的化学位移、峰面积、偶合常数、弛豫时间是鉴定化 合物结构的重要参数。
碱性
K3Fe(CN)6 硫色素（蓝色荧光）
（四）气体生成反应鉴别法
（1）大多数胺（铵）类药物、酰脲类药物以及某些酰 胺类药物，经强碱处理后加热，产生氨（胺）气； （2）化学结构中含硫的药物，经强酸处理后加热，产 生硫化氢气体； （3）含碘有机药物，经直火加热，生成紫色碘蒸气；
（4）含乙酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后加乙醇，
药物鉴 别 一般鉴别
以某些类别药物 的共同化学结构 为依据,根据其相 同的物理化学性 质进行药物真伪 的鉴别,可以区别 不同药物类别
专属鉴别
在一般鉴别的基础 上,利用各种药物化 学结构的差异来鉴 别药物,可以区别同 类药物或具有相同 化学结构部分的各 个药物单体