细菌培养标本的采集运送与处理

疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采 血为宜。
多次采血时, 应在不同部位进行。 不要从血管插管内采血。 切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取
血标本。
采血方法
采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血 液注入血培养瓶前，应更换针头或过火消毒针 头。
血培养瓶口也要消毒，并待酒精挥发后（建议 用酒精灯烧灼瓶口）再注入血样, 。
时间)。
尿液标本采集方法
中段尿：
– 女性采样前应先用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口。 – 男性须翻转包皮冲洗，用0.1%新洁尔灭消毒尿道口，灭菌纱布擦干。 – 弃前段尿，无菌杯收集中段尿。
导尿管导尿
– 无菌操作进行导尿可减少尿道污染。 – 对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用联空针筒的
粪便培养
感染标本：感染性腹泻，多由志贺菌、沙门菌、弧菌、耶尔森
菌等肠道致病菌感染所引起。将标本接种在相应的选择性分离培 养基上即可，弧菌、耶尔森菌应先增菌后培养以提高检出率。
住院患者腹泻标本：
– 多为大量使用广谱抗生素后导致菌群失调引起。 – 住院超过3天或入院诊断不是肠胃炎的不做常规粪便培养。应考虑梭
状芽胞杆菌培养或毒素测定。 – 常见病原菌有艰难梭菌、弯曲菌、葡萄球菌、肠球菌、念珠菌等。
选择培养基应根据涂片结果而定。
粪便标本采集
应在发病早期并且尽量在用抗生素治疗前采集。 排便后，挑取有脓血、黏液部分的粪便（液状粪便则
取絮状物），稀便不少于1ml，固体便不少于1克，无 便患者可用直肠拭子。 对不易获取粪便者或婴幼儿，可用肛拭采集。将拭子 前端用无菌甘油水湿润。然后插入肛门约4～5cm （幼儿约2～3cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面黏液 后退出，置运送培养基内送检。 除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做 常规病源检查。
– 未成年患者: 不应使用扩阴器, 应以无菌拭子在阴道 口处采取分泌物送检。
– 尿道：2h不排尿，拭去尿道口渗出物，再插入尿 道口1-2cm旋转采取分泌物立即送检。
生殖道、尿道标本处理
立即送检 普通培养和淋球菌培养：室温 支原体、衣原体：4℃保存
生殖道标本处理
普通培养：
– 血琼脂 – 三区划线 – 35℃培养
增殖,不含其他杂菌
内容简介
细菌培养基本原则 常见临床标本的采集、运送与处理
标本采集的普遍原则
避免自身菌群的污染，只要可能的话，应该确定一个代表感染过 程的标本。
选择正确的解剖部位，采用适当的技术和设备采集标本。 选择合适的部位采集用于厌氧菌培养的标本。 收集标本量要足够，量少可能导致假阴性结果。 每份标本上注明姓名，标本来源，采集部位，时间和日期。 将标本放在设计用于提高可能病原体的生存、无漏、无菌、无潜
支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避 免咽喉部正常菌群感染。 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子伸入咽部，小儿因压舌 刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上，从而获得标本。 双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者，可用吸痰管经 人工气道估插至叶支气管水平吸引痰液。
采血量
每次采血量成人5～10ml，婴幼儿1～2ml， 培养基与血液之比以10：1为宜，以稀释血液 中的抗生素。
每增加1ml血量平均提高阳性率3.2%。
培养条件
视患者的感染、用药情况选用不同的培养瓶。真菌培 养可和普通培养共用一需氧瓶。
不需要每个血培养都作厌氧培养。若同一次抽血既做 需氧也做厌氧，应先厌氧再需氧。
手术创口、烧伤创面与脓液处理
无菌生理盐水擦洗病灶表面后，用棉拭子采取病灶深 部的脓液和分泌物，置运送培养基内送检。采2个拭 子，一个培养，一个涂片。
开放性脓肿：尽可能抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤 口前沿取样。从脓肿底部或脓肿壁取样最好。
封闭性脓肿：宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，无菌注射 器抽取脓液送检，最好做厌氧培养。
一环尿液，划线方法为从上到下划一条直线，再画一 条垂直线，反复划线呈棋盘状。 35℃培养18-24h，观察结果。
呼吸道标本
标本留取质量的好坏直接影响到对下呼吸道病原学的 诊断。
标本留取不当会导致抗菌治疗失败,以及造成耐药菌的 出现。
标本采集时间
痰液：以晨痰为好。多数患者晨痰较多，即使 对痰量少的患者，也以清晨采集最为容易。对 支气管扩张症或与支气管相通的肺空洞患者， 清晨起床后进行体位引流，可采集大量痰液。 最好在应用抗菌药物之前或停药1天后采集标 本。
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生殖道、尿道标本采集
男性患者:
– 尿道标本:
2h不排尿 清洗龟头后,用碘伏等消毒后,挤出分泌物或以专用细拭子
插入尿道口1-2cm旋转采取分泌物立即送检。
前列腺液标本: 应由医师按摩前列腺,以无菌操做自尿道
口采取前列腺液放在无菌杯内送检。
生殖道、尿道标本采集
女性患者:
– 成年患者: 应在扩阴器的支持下,以无菌棉拭子擦去 分泌物，再用新的无菌拭子紧贴宫颈内道采样送检。
及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，才 能正确实施有效地抗菌治疗，从而有助于提高 治愈率和降低医疗费用。
采血时机
在出现临床症状后应尽快抽血作培养，最好在 发热初期和高峰或寒战时。
原则上应选择在抗菌药物应用之前，对已应用 药物而病情不允许停药的患者也应在下一次用 药前采血。
采血部位
通常采血部位为肘静脉。
拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次以取 得标本。 对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病，直取病灶部位， 拭子要避免接触口腔及舌粘膜。减少污染。 立即送检。室温保存。 接种同痰
保护性毛刷标本的处理
取完后加入1ml无菌生理盐水立即送检。 震荡、离心、涂片染色。 接种培养基同痰 接种划线方法同尿培养
痰标本运送和保存
从病人留痰后应在1h内送至实验室 不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。室温下担搁数小时定植于口
咽部的非致病菌呈过度生长而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血 杆菌检出率明显降低 未用运送培养基的标本送到实验室后应在30分钟内接种到相应培 养基
痰标本的处理
培养基：血琼脂、麦康凯琼脂、嗜血杆菌巧克 力琼脂和沙保弱琼脂。
细针斜穿管壁抽吸尿液；或拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前 段尿液，留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。 – 不可从集尿袋的下端管口留取标本。 – 长期留置导尿管者，应在更换新导尿管后留取尿标本 。
尿液标本采集方法
膀胱穿刺法: 是收集尿液的最好方法, 尤其对厌氧菌检查,但由于是 侵入损伤性操作,临床常少用,收集的标本可直接注 入血培养瓶中。
划线方法：分四区划线，每次划下一区前都要 烧灼接种环，待冷却后再划。下一区与上一区 要相交4-6次。
35℃5%-10%二氧化碳中培养24-48h。
咽拭子及口腔拭子
采集前患者应用冷开水反复漱口， 拭子的选择：要求无菌、不含抑制剂； 预先沾湿拭子（非常重要）； 由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，将棉
粪便标本运送
卡波氏管：普通培养 碱性蛋白胨水：霍乱弧菌培养 难辨梭菌培养：
– 及时送检，用厌氧输送培养基。
粪便标本处理
普通培养∶
– MAC、SS、10%绵羊血的弯曲杆菌培养基（暂无) – 四区划线（同痰标本） – MAC、SS 35℃培养 – 10%绵羊血的弯曲杆菌培养基42℃ 5%-10%二氧
肾盂尿采集法:
应请泌尿科医生采取, 左右侧的标本要标明,收集的标 本可直接注入血培养瓶中。
尿液标本运送和保存
无菌杯立即送检
室温下尿标本担搁稍久可导致尿内细菌数量明 显增加而影响病原菌与污染菌的区分和细菌定 量。
不能立即送检者，可暂存4℃冰箱。
尿液标本处理
2小时内处理完毕 培养基：血琼脂和麦康凯琼脂。 接种方法：10ul接种环垂直插入充分混匀的样品中取
实验室接到标本应立即放入血培养仪。中夜班收到标 本放置室温,不用放置35℃温箱 。
对急诊室送来或室温久置的标本，应先检查瓶底有无 变化，如变黄，应先涂片并盲传，以防漏检。
尿液标本
标本采集时间:
– 应在用药前或停药5天后留取标本 – 以晨起第一次尿为宜 – 使尿液在膀胱内停留6-8h以上(给细菌足够的繁殖
细菌培养及鉴定
概念
细菌培养：细菌培养是一种用人工方法使细菌生长繁 殖的技术。用人工方法将采集的标本接种于培养基上， 使其生长繁殖。对培养出来的细菌进一步鉴定分型及 药物敏感试验，为临床的治疗及抗生素选择提供帮助。
分离培养：将目标菌培养并从杂菌中分离出来的过程. 纯培养：将单一的细菌（也可以是细胞原虫等）进行
在安全性问题的容器内。
标本转运的原则
所有标本必须立即送交实验室，最好不要超过 2小时，如标本处理不得不延迟，应在合适的 条件下储存，但不超过24小时。
对环境敏感的微生物包括志贺氏菌（应立即处 理）、淋球菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌 （对低温敏感）。脑脊液、生殖器、眼或内耳 标本不要冷冻。
运送培养基原则
黄色——小儿瓶 蓝色——未用抗生素需氧 绿色——已用抗生素需氧（√） 紫色——未用抗生素厌氧 橙色——已用抗生素厌氧（√）
胸腹水及脑脊液标本
采集: 以无菌操作穿刺抽取，直接注入培养瓶内。量少注入小 儿瓶，量多的注入成人瓶。
运送: 若床边没有接种，用带盖的无菌容器送检。
血液和无菌体液的处理
血液或无菌体液抽取后应立即放入血培养瓶,立即送检 或室温保存,不能放冰箱!
鼻咽拭子 ： 应于抗菌药物治疗前采集为好。 咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后 采集为宜。
痰标本采集方法
自然咳痰：清水反复漱口后用力咳痰，从呼吸道深部咳出新鲜痰液于 无菌容器送检。痰量极少者可用45℃10%氯化钠溶液雾化吸入导痰。
气管穿刺法: 适用于昏迷和咳嗽乏力患者。 纤维支气管镜抽取法: 适用于纤维支气管镜检查或治疗的患者。用纤维
运送所有细菌
需氧菌、厌氧菌、苛氧菌
细菌不生长 非营养培养基
保持细菌存活: 标本采集后超过24 h不应增加或减少活菌数量
标本的拒绝接收原则
未贴或错贴标签 送检延迟 不正确的转运温度和转运工具 不合适或泄漏的容器 有明显污染的标本 干涸的拭子标本 标本量不足 同一天内同一个检测条件的重复标本（血培养除外）
问题标本的处理
与送检医生或护士联系。对非损伤方法取得的 标本，再送新标本。对经损伤程序取得的标本， 和临床联系后可以处理，但要在申请单上注明 问题。
特殊情况下，即使标本质量有损害，也必须处 理。
– 疑难病症 – 罕见病例 – 传染性疾病的会诊
血液细菌培养
临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血流感染 的患者，需做血液细菌培养以明确病原。
采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂。
标本运送处理
2h内送检，不能及时送检可放室温。 血平板 三区划线 35℃培养