实验十四干化学试带法尿液检查(精)

2．检测项目 尿液的酸碱度（pH）、比密（SG）、 蛋白质（PRO）、葡萄糖（GLU）、酮体（KET）、 胆红素（BIL）、尿胆原（URO）、 亚硝酸盐 （NIT）、白细胞（LEU/WBC）、红细胞 （RBC/ERY）或隐血（Hb）、维生素C（Vit C）， 一个或多个检测内容可组成不同的组合。 3．试带反应原理 ⑴酸碱度（pH）：采用pH指示剂法。用甲基红 （pH4.6～6.2）和溴麝香草酚蓝（pH6.0～7.8）两种 指示剂适量组合成为复合pH试剂模块，其呈色范围 为pH4.5～9.0，颜色发生橙红、黄绿及蓝色变化。
⑻尿胆原（URO）：采用①醛化反应法：在强酸 条件下尿胆原和对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反应， 生成樱红色缩合物。②偶氮法：在强酸条件下尿 胆原和对-四氧基苯重氮四氟化硼发生重氮盐偶联 反应，生成胭脂红色化合物。 ⑼尿白细胞（LEU）：采用中性粒细胞酯酶法。 中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚酯生成吲哚酚和 有机酸，吲哚酚可进一步氧化形成靛蓝，或吲哚 酚和重氮盐反应生成紫色重氮色素。
【操作】 1．混匀尿液 2．浸湿试带 3．沥去多余尿液 4．比色与分析 5．报告方式
【注意事项】 1．熟悉试带特性 必须了解所用试带各膜块反应原 理、药物干扰以及参考范围等，掌握试带检测每一 成分的敏感度和特异性。很多中间环节和干扰因素 都可影响颜色变化而导致假阳性或假阴性。同一检 测项目，不同厂家所用的色素原可能不同，因此存 在显色差别 2．注意试带保存条件 尿试带应根据厂家推荐的条 件（如温度、暗处等）保存，在有效期内使用。不 应将试带放在直射光下照射或暴露在潮湿环境中， 应保存在厂商提供的容器中，不可更换保存容器。
3．规范操作 （1）试带从冷藏冰箱中拿出后，待平衡至室温再 打开盛装的筒盖。一次只取所需要量的试带，并 应立即将瓶盖盖好。多余试带不得放回原容器中， 更不应该合并各瓶的试带。 （2）试带与尿液的反应时间需严格遵循产品说明 书的规定，操作中注意切勿触摸试带上的反应检 测模块。 （3）试带浸入尿液标本的时间应在1～2s，所有试 剂模块，包括空白和参比模块，要全部渗入尿液 中，试带上过多的尿液标本应去除干净。
⑵比密（SG）：采用离子交换pH指示剂法。尿液中电解 质释放出的阳离子与试带中的离子交换体中的H＋交换， 释放出的H＋与酸碱指示剂反应，根据指示剂显示的颜色 （蓝、绿及黄）可换算尿液中的电解质浓度，以电解质浓 度来代表密度，从而得出比密值。 ⑶尿蛋白（PRO）：采用 pH指示剂蛋白误差法。试剂模 块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝、枸橼酸缓冲系统和表面 活性剂。在pH3.2时，溴酚蓝电离、带负电荷并释放H＋， 带负电荷的溴酚蓝与此时带正电荷的蛋白质（白蛋白）生 成复合物，导致溴酚蓝进一步电离产生更多的H＋，当超 过缓冲范围时，指示剂发生颜色改变（黄、绿及蓝），变 色程度与蛋白质含量成正比。
⑷尿葡萄糖（GLU）：采用葡萄糖氧化酶法。尿 液中葡萄糖在试带中葡萄糖氧化酶的催化下，生 成葡萄糖酸内酯和过氧化氢。在有过氧化物酶的 情况下，以过氧化氢为电子受体使色素原（邻甲 联苯胺、碘化钾等）氧化而呈色。色素原不同， 呈色可为蓝色、红褐色或红色。 ⑸尿酮体（KET）：采用亚硝基铁氰化钠法。检 测尿酮体的模块中主要含有亚硝基铁氰化钠，可 与尿液中的乙酰乙酸、丙酮产生紫色反应。其对 乙酰乙酸的敏感性为50～100mg/L，对丙酮为 400～700mg/L，不与β-羟丁酸起反应。
（5）肾移植病人发生免疫排斥时尿液中出现大量 淋巴细胞，但由于其胞质无中性粒细胞酯酶，干 化学试带法检测白细胞阴性。 （6）白细胞检测时出现干化学试带法“阳性”而 镜检“阴性”的结果，可能ຫໍສະໝຸດ Baidu尿液在膀胱贮存时 间过长、中性粒细胞中被破坏后其酯酶释放到尿 液中有关。红细胞出现此类结果可能是因为红细 胞在尿液中被破坏，无完整红细胞（血红蛋白释 放），或尿液中含高活性不耐热的触酶。对于后 者，可将尿液煮沸冷却后再测试，验证和排除 “假阳性”结果。
实验十四 干化学试带法尿液检查
【目的】 掌握尿液检查干化学试带的反应原理和使 用注意事项。 【原理】 1．试带构成 在长条形塑料片上每隔一定距离（约 2mm）有一正方形试剂模块（5mm×5mm），其中 有两块集中在试纸条一端，分别是空白模块尿液颜 色参比模块，可作为对照使用；其余模块分别含有 相应干式化学试剂（图5-25）。试剂中的碘酸盐可破 坏VitC等还原性物质，消除VitC中的碘酸盐可破坏 Vit C等还原性物质，消除VitC对其他反应的干扰； 若不含碘酸盐，试纸条将增加Vit C检测模块，以便 对Vit C干扰项目的质控和校正。
⑹尿亚硝酸盐（NIT）：采用偶氮法。尿液中含 有来自食物或蛋白质代谢产生的硝酸盐，如尿液 中含有大肠埃希菌等具硝酸盐还原酶的细菌时， 可将硝酸盐还原为亚硝酸盐，亚硝酸盐与芳香胺 的重氮化反应形成重氮盐，随后发生偶联反应， 形成红色重氮色素。 ⑺尿胆红素（BIL）：采用偶氮法。在强酸性介质 中，胆红素与试带上的二氯苯胺重氮盐起偶联作 用，生成红色偶氮化合物。
⑽尿红细胞（RBC）或血红蛋白（Hb）：采用过 氧化物酶法。血红蛋白中亚铁血红素具有弱的过 氧化物酶样作用，以催化H2O2作为电子受体使色 原（常用的有邻联甲苯胺、氨基比林、联苯胺等） 氧化呈蓝绿色，其颜色的深浅与血红蛋白成正比。 ⑾尿维生素C（VitC）：采用还原法。试剂模块中 含有2，6-二氯酚靛酚钠、中性红、亚甲基绿磷酸 二氢钠和磷酸氢二钠，维生素C能还原氧化型染 料，而使指示剂发生由绿或深蓝至粉红色的颜色 变化，颜色的深浅与VitC含量成正比。也有采用 VitC和作为色素原的磷钼酸反应，形成钼蓝的原 理。
4．结果分析 （1）尿液干化学测定结果与传统湿化学法存在差 异。 （2）必要时，试带法干化学检测尿液结果应做确 证试验。 （3）尿液干化学试带检查仅是一个过筛手段，适 用于健康普查和疾病筛选，不能完全替代尿液有 形成分显微镜检查，特别是蛋白质、白细胞、红 细胞、亚硝酸盐中任一项阳性，必须进行人工镜 检。 （4）尿液干化学测试结果应与理学、显微镜检查 结果相结合，互相印证才能为临床提供有价值的 信息。