动物细胞融合 PPT课件

公开课动物细胞融合与单克隆抗体ppt课件

目的获：得产生
相应抗体的B 细胞
（二选）：选能产生所需专
一抗体的杂交瘤细胞
体外培养小鼠腹腔内培养
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√ BB 、B瘤、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选择性培养基：
只有杂交瘤细胞才
能存活
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2.2单克隆抗体的应用特异性强
单克隆抗体最主要的优点：灵敏度高
并能大量制备
诊断试剂——最广泛应用
细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接
细胞融合，形成杂交细胞
（细胞膜具有一定的流动性）
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8
1.2动物细胞融合过程
为什么灭活的病毒能作诱导剂？
灭活丧失感染性保留融合活性
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1.3动物细胞融合技术的意义和应用
意义：
Hale Waihona Puke 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
应用：制备单克隆抗体（最主要的应用）
但是体外
怎样大量
？获得单一抗体
培养的细胞不能无限增
殖
癌细胞
既能产生特异性抗体，
又pp能t课件大. 量增殖的细胞 12
你的设想
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆动物细胞培养技术杂交瘤细胞
抗体
动物细胞融合技术
既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞
ppt课件.
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细胞继承了_双__亲__细__胞__的__遗__传__物__质____ ，因此不仅能分泌特异__性__抗__体_____ ，还有大量增殖本领。
（3）该方案的目的是__制__备__单__克__隆__抗__体___________。

动物细胞融合与单克隆抗体PPT

跟踪训练
(2011年滦县高二检测)能使动物细胞融 )
合的特有的诱导因素是( A．离心
B．灭活的病毒
C．电激
答案：B
D．振动
单克隆抗体的制备 1．关键思路及操作依据 (1)关键思路
①克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。
②将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细胞。 (2)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因
)
动物细胞工程动物细胞培养和融合，单克隆抗体的制备胰蛋白酶处理，制作细胞悬液物理方法、化学方法、生物方法单克隆抗体的制备动物血清不可缺少
A.1 C．3
B．2 D． 4
【尝试解答】
【解析】
B
选B。植物细胞工程常采用的技术手段
有植物组织培养和植物体细胞杂交。动物细胞工程
常采用的技术手段有动物细胞培养、细胞融合、单克隆抗体的制备，还有胚胎移植、核移植等。动、
细胞。
远缘杂交的不亲合性，成为研 4．意义：克服了______ 遗传、_________ 细胞免疫、肿瘤和生物_______ 新品种培究细胞_____
育的重要手段。
二、单克隆抗体
1．传统抗体的获得
抗原，使动 (1)方法：①向动物体内反复注射某种_____ 抗体；②从动物_____ 血清中分离所需抗体。物产生_____ 产量低、纯度低、_______ 特异性差。 (2)特点：_______
动物细胞融合 1．原理：膜的流动性。 2．诱导方法：物理法——离心、振动、电激；化学法——聚乙二醇；生物方法——灭活的病毒。
3．动物细胞融合的过程
4．优点：动物细胞融合技术突破了有性杂交方法
的局限性，使远缘杂交成为可能。特别提醒灭活是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。

新教材高中生物第2章第2节动物细胞工程：动物细胞融合技术与单克鹿体pptx课件新人教版选择性必修3

正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
1965年，研究证实了灭活的病毒在适当条件下确实可以诱导动物细胞融合。
一、动物细胞工程
2.动物细胞融合
病毒的灭活：灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。
仙台病毒
紫外线灭活
丧失感染活性（不感染细胞）保留融合活性（诱导细胞融合）
讨论： 1.但如何才能让两个不同的细胞融合? 2.细胞融合技术在生产实践中有哪些应用?
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
动物细胞融合技术的发展历史
时间
19世纪30年代 1858年 1875年 1876年 1962年 1965年 1974年
1975年
20世纪80年代
成果
观察到肺结核、天花、水痘、麻疹等疾病患者的病理组织中有多核细胞观察到正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞现象。第一个观察到脊椎动物（蛙类）的血液细胞发生融合的过程。在无脊椎动物中发现了细胞合并现象。日本学者冈田发现仙台病毒具有触发动物细胞融合的效应。英国科学家证实了灭活的病毒可诱发动物细胞融合华裔加拿大学者高国楠创立了聚乙二醇（PEG）化学融合法。 Kohler和Milstein成功地融合了小鼠B-淋巴细胞和骨髓瘤细胞而产生能分泌稳定单克隆抗体的杂交瘤细胞。发展出了电融合技术(1985年酵母原生质体电融合)
思考：诱导融合后的细胞一定具有双方的遗传信息吗？为什么？
不一定，诱导A、B两种细胞融合，融合后可能有A、B未融合细胞及AA、AB、BB等多种细胞，因此细胞融合后需要进行筛选。
一、动物细胞工程 2.动物细胞融合
(5)意义： ①突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 ②成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 ③利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。

人教版教学课件动物细胞融合与单克隆抗体(共20张PPT)

培养液中或小鼠腹腔中培养从培养液或小鼠腹水中提
如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？
融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体。那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。
产生相应的B淋巴细效应B淋巴细胞胞
融合
培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞
多种杂交细胞
（只考虑两两融合）骨髓瘤细胞---骨髓瘤细培养液中细胞有几胞种类型？融合细胞在具有筛选作用的培养基上培养几种类型？ B淋巴细胞--- B淋巴细胞
专一抗体检验阳性 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞克隆上述杂交细胞
注射到小鼠体内
设计方案：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖
动物细胞融合技术单克隆动物细胞培养技术杂交瘤细胞抗体既能产生特异性抗体，又能大量繁殖的细胞
(1)、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能
迅速大量增殖，又能足够数量的单一抗体。
(2)、过程
1、单克隆抗体的制备过程
注射特定抗原蛋白
5、动物细胞融合过程
不同DNA的两个细胞
灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞进行有丝分裂
6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段

2022-2023学年苏教版选择性必修三动物细胞融合技术和干细胞技术(77张)课件

或椭圆球
圆球形
小
大
胚胎干细胞和成体干细胞
全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞
毒理特性
定向分化排斥药效
(1)细胞融合体现了细胞质膜的流动性。( √ ) (2)通过诱导只能使同物种细胞发生融合，而不能使不同物种的细胞之间发生融合。( × ) (3)二倍体动物细胞融合后的杂种细胞仍然是二倍体细胞。( × ) (4)浆细胞与骨髓瘤细胞融合后需要进行筛选。( √ ) (5)不同类型的干细胞，它们的分化潜能完全相同。( × ) (6)干细胞技术可应用于疾病治疗、新药研制和开发。( √ )
第2课时动物细胞融合技术和干细胞技术
课程内容标准
核心素养对接
(1)阐明动物细胞融合是指通过物理、 (1)科学思维——列表比较动物细胞融
化学或生物学等手段，使两个或多个合与植物体细胞杂交。
动物细胞结合形成一个细胞的过程。 (2)科学思维——构建单克隆抗体制备
(2)概述单克隆抗体的制备过程。的流程图。
(2)诱导融合的具体方法有__病__毒___诱__导__融__合__法__、__聚__乙__二__醇__诱__导__融__合__法__、__电__场__诱_ _导__融__合__法___ 。在各种方法的促融合作用下，细胞质膜出现 __粘__连__、__破__裂__和__融__合__，进而发生__细__胞__质__融__合__和__细__胞__核__融__合__，最终形成杂种细胞。
1.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
细胞质膜的流动性、细胞的全
原理
细胞质膜的流动性
能性
酶解法去掉细胞壁后，诱导原

动物细胞工程教学PPT

传代培养
将原代细胞进行传代培养，使其在体外持续增殖的过程。
细胞冻存与复苏
通过冷冻保存细胞，以便在需要时进行复苏和培养。
动物细胞培养的常见问题与解决方案
01 02
污染问题
动物细胞培养过程中常见的污染源包括细菌、霉菌和支原体等。解决方案包括定期检查培养环境、严格控制培养基和器具的灭菌过程以及及时处理污染细胞。
动物细胞工程实验技术
动物细胞融合技术
动物细胞融合技术是指将两个或多个动物细胞融合成一个细胞的过程，是动物细胞工程中的重要技术之一。
动物细胞融合技术需要使用特定的融合剂或电刺激等方法，使细胞膜融合，形成异核或多核细胞。
该技术可用于制备单克隆抗体、诱导多功能干细胞、研究细胞分化机制等方面。
动物染色体工程需要严格遵守伦理和法律规定，确保实验动物的福利和安全。
动物基因编辑技术
动物基因编辑技术是指通过特定的基因编辑工具对动物基因进行精确的修饰和改造的技术。
动物基因编辑技术可以采用CRISPRCas9等基因编辑系统，对目标基因进行敲除、敲入或定点突变等操作。
该技术可用于研究基因功能、治疗遗传性疾病、制备转基因动物等方面。
经济和社会发展
动物细胞工程的发展将带动相关产业的发展，创造就业机会，促进经济发展和社会进步。
THANKS
感谢观看
动物细胞工程教学
• 动物细胞工程概述 • 动物细胞培养技术 • 动物细胞工程实验技术 • 动物细胞工程的应用案例 • 动物细胞工程的未来展望
01
动物细胞工程概述
定义与特点
定义
动物细胞工程是以动物细胞为研究对象，通过细胞培养、细胞融合、基因转移等技术手段，实现动物细胞在数量和质量上的改变，以应用于医学、农业、生物工程等领域的技术。

2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课件-高二下学期生物人教版选择性必修3

多孔细胞培养板阳性孔
一段时间后，检测各孔上清液中细胞分泌的抗体
上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔
抗体检测板
分泌抗体能跟特定抗原结合的细胞即为所需杂交瘤细胞
在单克隆抗体制备过程中，两次筛选的目的和方法是不相同的
（三）单克隆抗体的制备过程（非常重要）
02
将抗体检测为阳
新课程p64杂交瘤细胞在小鼠腹腔性的杂交瘤细胞
3、灭活病毒诱导细胞融合过程：
动物细胞融合实质及完成的标志：细胞核的融合融合后形成单核细胞
书本P49右上角问题： 19世纪30年代，科学家曾在患肺结核、天花和麻疹等疾病的病人的病理组织中观察到多核细胞。如何解释这一现象？
病人体内的病毒等诱导多个体细胞融合形成了多核细胞。
一、一动.动物物细细胞胞融融合合技技术术
多种已免疫 B淋巴细胞
小鼠的脾脏中获取
方法：电融合法、PEG融合法、灭活病毒诱导法
等诱导融合
骨髓瘤细胞
（三）单克隆抗体的制备过程（非常重要）
02
诱导融合后的细胞
B
BB
B1-瘤 B2-瘤 B3-瘤
瘤瘤瘤
第一次筛选置于选择培养基上培养
1
2
3
杂交瘤细胞(多种)
第一次筛选：用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
有没有技术能让不同种动物的体细胞杂交？
实例：1970年，人—鼠细胞荧光标记融合实验
红色荧光染料标记的膜蛋白
人细胞
绿色荧光染料标记的膜蛋白
鼠细胞
人鼠杂交细胞
细胞融合
37° 培养40min

实验十一鸡血细胞融合PPT课件

细胞形态比较
比较不同处理组之间的细胞形态差异，分析诱导因素对细胞形态的影响。
诱导因素对细胞融合的影响
诱导因素分析
分析不同诱导因素对细胞融合的作用，如化学物质、物理因素等。
诱导因素比较
比较不同诱导因素对细胞融合的影响程度，确定最佳诱导条件。
05 实验总结与展望
实验总结
实验原理
鸡血细胞融合实验涉及细胞生物学、遗传学和分子生物学等多个领域，通过实验，我们深入了解了细胞融合的过程和机制。
疾病治疗
通过细胞融合技术可以制备具有特定功能的细胞系，用于治疗某些遗传性疾病、肿瘤和免疫系统
疾病等。
药物研发
利用细胞融合技术可以制备具有特定功能的细胞系，用于药物筛选和药效研究，有助于发现新的药物和治疗方案。
生物材料
通过细胞融合技术可以制备具有特定功能的生物材料，如人工皮肤、骨骼和器官等，用于医学和生物工程领域。
细胞融合的诱导和检测
诱导细胞融合
将分离出的细胞用细胞融合诱导剂处理，诱导细胞融合。
检测细胞融合
使用荧光染料或免疫学方法检测细胞融合的情况，观察融合细胞的形态和数量。
细胞融合的鉴定和观察
鉴定细胞融合
通过检测细胞膜的连续性和荧光染料的分布情况，鉴定细胞是否融合成功。
VS
观察融合细胞
在显微镜下观察融合细胞的形态、生长情况及功能表现，记录相关数据。
实验十一鸡血细胞融合ppt课件
目录
CONTENTS
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果分析 •胞融合的过程
鸡血细胞融合是指将两个或多个鸡血细胞通过特定手段融合成一个细胞的过程。这个过程涉及到细胞膜的改变和细胞内物质的交换，是研究细胞结构和功能的重要手段。