药物中特殊杂质的检查.

*杂质检查完毕的实验内容-G板和H板的制备
（每人做一个G和一个H 板）
• 玻璃板洗净，吹干，待用。 • 1.G板：玻璃背面先贴上标签（G板），取硅胶 G粉5g，加18毫升水，向同一个方向研磨混合， 去除表面气泡，从中心倒入洁净玻璃板，研钵 棒助涂布均匀(快速)，拍板，转向，再拍板， 平推，勿动！！ • 2.H板：玻璃背面先贴上标签（H板），取硅胶 H粉5g，加18毫升CMC-Na，同上法制板，平 推，勿动！！--制板完让老师看板，认可后方 能离开。
（三）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查
检查 吸取上述两种溶液各10μl（毛细管高度约2.0cm）， 分别点于同一含有羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶H 薄层板上。以苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1：1：4）为 展开剂，展开后，晾干，用对二甲氨基苯甲醛溶液 （2%对二甲氨基苯甲醛乙醇溶液100ml，加入冰醋酸 5ml制成）喷雾显色，供试品溶液如显与对照品相应的 杂质斑点，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更 深。
4. 点样时，宜分次点加，每次点加后，待其自然干燥或温热气流 吹干；点样基线距底边2.0cm，样点一般为圆点，直径为 2mm~4mm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜， 一般约为1.5cm~2.0cm。 5. 展开前，薄层板需饱和3-5min。 6. 展开时，薄层板浸入展开剂的深度为距底边0.5cm~1.0cm（切 勿将样点浸入展开剂中），密封室盖，待展开至10cm~15cm， 取出，晾干，按规定方法检测。层析缸必须密闭，否则影响分 离效果。实验完毕，展开剂应回收。 7. 碱性四氮唑蓝试液应临用新配，新鲜试剂应呈黄色，颜色变深 后不宜使用。 8. 自身对照法仅限于杂质斑点与主成分斑点颜色相同或相近时使 用。
TLC检查结果观察：
① 控制杂质斑点个数以控制杂质
种类；
② 供试品溶液所显杂质斑点不得
深于对照溶液的主斑点。
供 试 品
对 照 品
五、注意事项
1. 在阿司匹林中游离水杨酸的检查中，制备供试品溶液 所用的比色管须经干燥后使用，且供试品须用乙醇溶 解后才可加水稀释至刻度，否则供试品难以溶解。 2. 游离水杨酸检查时，供试品溶液要临用现配，避免阿 司匹林水解造成的误差。 3. 进行水杨酸检查时，应在中性或弱酸性溶液（pH4~6） 中进行。若在强酸性溶液中，生成的紫兰色配合物会 分解褪色。
Leabharlann Baidu
--杂质来源： 水解产生对氨基苯甲酸，进一步脱羧、
氧化成有色杂质，使注射剂颜色变黄、疗效下降、 毒性增加。
NH2 [H2O] NH2 - CO2 NH2 [O] O
COOCH2CH2N(C2H5)2
COOH
O
检查方法 ： TLC法
三、仪器与试药
• • • • • • • • • • • • 阿司匹林原料药； 盐酸溶液（9→100）； 硫酸铁铵指示液； 水杨酸对照品； 冰醋酸；乙醇；甲醇； 硅胶G；硅胶H； 四氮唑蓝的甲醇溶液； 氢氧化钠溶液； 羧甲基纤维素钠水溶液； 二氯甲烷；乙醚； 盐酸普鲁卡因注射液； 对氨基苯甲酸对照品；苯；丙酮；对二甲氨基苯甲醛 溶液等。 • 电子天平；纳氏比色管；薄层板；展开槽；干燥箱等。
原理：
pH 4 ~ 6 水杨酸 FeCl3 紫堇色
2.甾体激素中的有关物质：
--来源
• • • • 原料、中间体、异构体、降解产物 --特点 （1）可能存在多个甾体杂质 （2）结构类似
•
本实验中，氢化可的松中“其他甾体”（现 版药典称“有关物质”）的检查采用TLC法。
3.盐酸普鲁卡因注射液中的对氨基苯甲酸：
（二）氢化可的松中有关物质的检查
1. 供试品溶液和对照品溶液的制备 取本品，加氯仿-甲 醇（9:1）制成每1ml中含3.0mg的溶液，作为供试品溶 液。精密量取适量，加氯仿-甲醇（9:1）制成每1ml中 含60mg的溶液，作为对照品溶液。
2. 检查 吸取上述两种溶液各5μl （毛细管高度约2.0cm）， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-乙醚-甲醇 -水（385：60：30：2）为展开剂，展开后，晾干，在 105℃干燥10min，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立 即检视。供试品溶液如显杂质斑点，不得多于3个，其 颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深。
四、实验内容
（一）阿司匹林肠溶衣中游离水杨酸的检查
检查: 取本品30片（0.025g/片），研细，用乙醇15ml分 次研磨，并移入50ml量瓶中，充分振摇，用水稀释至刻 度，摇匀，立即滤过，精密量取续滤液2ml，置50ml纳 氏比色管中，用水稀释至50ml，立即加新制的稀硫酸铁 铵溶液3ml，摇匀，20秒钟内如显色，与对照液（精密 量取0.01%水杨酸标准溶液4.5ml，加乙醇3ml，0.05%酒 石酸溶液1ml，用水稀释至50ml，再加上述新制的稀硫 酸铁铵溶液3ml，摇匀）比较，不得更深（1.5%）。
实验二
药物中特殊杂质的检查
一、目的要求 1.掌握本实验中药物特殊杂质的来源；
2.掌握特殊杂质检查的操作方法。
二、实验原理
• 特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程 中引入的杂质，如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的 游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载 在中国药典正文各药品的质量标准中。 • 1.阿司匹林中的游离水杨酸: • --杂质来源：原料残存（生产过程中乙酰化不完全）、水 解产生（贮存过程中水解） • --检查原理：阿司匹林无游离酚羟基，不与高铁盐溶液作 用，而水杨酸则可与之反应生成紫堇色，可检出1μg的游 离水杨酸。