酪蛋白课程报告
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生物技术学院
课程论文
课程名称:高级生物化学成绩:
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酪蛋白研究进展综述
提纲:酪蛋白简介-酪蛋白亚基结构-酪蛋白酶特性-酪蛋白活性肽研究进展
摘要:酪蛋白是一种含磷钙的结合蛋白,常见于哺乳动物及其乳汁中,如母牛、羊
以及人奶。酪蛋白对酸敏感,pH较低时会沉淀,因此本科生实验室常用其进行蛋
白质的沉淀反应。哺乳动物的主要蛋白是α-酪蛋白,然而人类乳汁中没有α-酪蛋白,
人乳中的酪蛋白主要是β-酪蛋白形式。对于人类幼儿而言,酪蛋白是氨基酸的来源,
但同时,它也是钙和磷的主要来源,同时,因为胃的酸性环境,酪蛋白还能在胃中
形成凝乳以便消化。本文综合中外文献,对酪蛋白进行了研究进展综述。
关键词:酪蛋白;蛋白亚基;活性肽
酪蛋白简介
在20℃,pH值为4.6时,牛乳中能沉淀下来一种呈酸性的蛋白质,我们将其称为酪蛋白。酪蛋白又名干酪素、乳酪素、酪朊,在牛奶中含量非常丰富。它是一种含磷的蛋白质,具有极高的营养价值,其中含有多种生物活性肽,因此它具有抗菌、降血压、抗氧化和促进双歧杆菌增殖等功能。
酪蛋白在母体蛋白质序列内是无活性的,通过体内或体外酶水解的方式释放出来后,它们即可作为具有类似激素活性的调节物质。这些产物可用作肽类药物、肽类试剂,主要用于科学试验和生化检测;也可用于活性肽功能性食品中,具有增强机体防御功能、调节生理节律、预防疾病和促进康复等功能。
酪蛋白的亚基结构
酪蛋白的分子质量约为20-25ku,由4类遗传变种组成,分别为αs1-酪蛋白、αs2-酪蛋白、β-酪蛋白和K-酪蛋白。其中,αs2-酪蛋白是牛乳中的主要酪蛋白,占总含量的38%;β-酪蛋白含量仅次于αs-酪蛋白,占总含量的35%,
分子质量为24ku,含209个氨基酸;K-酪蛋白是酪蛋白中惟一含有糖成分,且对钙不敏感的酪蛋白,在牛乳中的质量分数为13%,分子质量为19ku,含169个氨基酸回。这4种单体通过αs-螺旋、β-折叠和β-转角等结构构成了酪蛋白的空间结构。
酪蛋白的酶特性
蛋白质的酶解特性很大程度上取决于蛋白质本身的结构特点。Maryaln Salami等人比较研究骆驼奶与牛奶的胰酶(胰蛋白酶与胰凝乳酶)酶解发现,相比乳清蛋白而言,酪蛋白结构柔韧开放,从而水解快速,且其酶解程度取决于蛋白结构酶结合位点的数量及结合的难易程度,这些取决于蛋白质的三级结构。
针对胰蛋白酶水解酪蛋白可能的反应过程,齐威等人唯据高效凝胶排阻色谱(HPSEC)技术与水解度(DH值)相结合的方法,跟踪分析胰蛋白酶水解酪蛋白反应过程。依据HPSEC图谱,酶解反应初期酪蛋白胶粒的解聚速率大于酶解速率,随着水解度的升高,开始出现大分子肽段,当水解度升高至10%时,酪蛋白单体无吸收峰,随着水解度的继续升高,大分子肽逐渐较少而小分子肽逐渐增多。因此,推断可能的反应过程为:首先胶粒外层K-酪蛋白发生断裂,Wangh胶粒被破坏,αs-酪蛋白、日一酪蛋白等单体释放,经专一性酶解切割,可得到不同相对分子质量范围且相对集中的肽段。
酪蛋白功能活性肽研究进展
实验研究发现,在原始酪蛋白中含有很多无活性或活性很低的、且具有功能性的肽段,经过在机体内消化或体外酶解的方式可以被释放出来。
抗高血压肽
血管紧张素I型转化酶(ACE)是一种含锌的金属肽酶,这种金属肽酶参与合成高血压多肽、血管紧张肽以及降解低血压、血管舒缓激肽。因此,ACE抑制剂具有抗高血压的效果。
Miguel等人经过小鼠试验发现,酪蛋白经胃蛋白酶水解后,酶解产物具有ACE抑制活性,且分子量低于3000Da的短肽活性更强。
酪蛋白磷酸肽(CPP)
据报道,酪蛋白在体外或体内经消化可得到CPP。CPP能够有效结合二价金属离子,增强矿物质元素的溶解性,如钙、铁等。科学家TH研究喂养CPP对幼鼠体内钙、磷吸收的影响发现,相对于对照组,连续27d喂养CPP的幼鼠血清骨钙蛋白增多,大腿骨及肪骨质量明显增加,证明CPP能够刺激骨的形成,且对CPP中磷的利用率较高。
此外,Kitts曾报道,CPP表现出一定的抗氧化能力,具有在水系或脂系溶液中清除自由基的能力。
免疫活性肽
新生婴儿可以通过母乳喂养来获得抵抗细菌和病毒感染的能力,其中酪蛋白就是获得的免疫物质之一。事实上,在消化酶的作用下,这些具有免疫调节能力的肽被释放了出来。
阿片样活性肽
阿片样活性肽包括阿片激动活性肽和阿片拮抗活性肽,具有类似鸦片(吗啡)的药理特性,有调节睡眠模式、镇痛减压、调节呼吸和调节胃肠蠕动等作用。此外,阿片拮抗活性肽能够抑制脑啡肽的激动活性,多见于牛乳和人乳的K一酪蛋白序列中。
酪蛋白展望
天然蛋白质空间结构极其复杂,电镜技术虽已普遍用于观察酪蛋白胶团结构,
但只可到达其表面层次,对于酪蛋白胶团内部结构模型,至今仍处于争议之中。
安全性、高效性是酶解改性作为常用的蛋白质改性技术的优点,酪蛋白经酶解生成的短肤具有一定的生理功能活性,如抗高血压、免疫调节以及免疫活性等。作为膳食补充剂,酪蛋白在功能性食品和药物制剂中添加是否有益还应仔细审查。
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