牦牛血中血红素的提取
牦牛血液氯化血红素的分离提纯及工艺优化研究
牦牛血液氯化血红素的分离提纯及工艺优化研究杨生忠;韩学燕;李宗文;陈虎;任茜;曹效海【摘要】试验以新鲜牦牛血液为原料,采用血粉法、冰醋酸法及醋酸钠法,探索制备氯化血红素的最优工艺参数,并对不同方法制备的氯化血红素纯度及得量进行对比.结果显示,血粉法的最优工艺是超声处理时间40 min,酸性丙酮添加量为120 mL,抽提时间30 min,乙酸钠添加量为9 mL,氯化血红素纯度达到96%,得量为7.38 g/L.采用冰醋酸法制备氯化血红素,当冰醋酸添加量为红细胞量的3倍时,氯化血红素纯度达到80%,得量为6.10 g/L.采用醋酸钠法制备氯化血红素,当氯仿添加量为红细胞量的2倍时,氯化血红素纯度达到90%,得量为3.44 g/L.通过对比3种制备方法,氯化血红素纯度依次为血粉法>醋酸钠法>冰醋酸法;氯化血红素得量依次为血粉法>冰醋酸法>醋酸钠法,由此可知,3种方法中,选用血粉法制备氯化血红素的量更高且更加有利于工业化生产.%The study was conducted to separate and purify the hemin from yak blood and the optimal process of preparing the hemin was confirmed using blood meal,glacial acetic acid and sodium acetate methods.The purity and the yield of the extracted hemin in different methods were compared.The results showed that the purity of hemin in yak blood was 96% and the yield was 7.38 g/L using blood meal method under the optimal process of 40 min for ultrasonic treatment,30 min for extraction,120 mL acid acetone and 9 mL sodium acetate.The purity of hemin was 80% and the yield was 6.10 g/L when the amount of glacial acetic acid was 3 times as much as blood cells amount using the glacial acetic acid method.The purity of hemin was 90% and the yield was 3.44 g/L when the amount of chloroform was 2 times as much as bloodcells amount using sodium acetate method.The purity of the hemin from high to low was blood meal method,sodium acetate method and glacial acetic acid method,and that of the hemin yield was blood meal method,glacial acetic acid method and sodium acetate method by comparing the three preparation methods.So the blood meal method was more conducive to industrial production.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2017(044)011【总页数】7页(P3163-3169)【关键词】牦牛血液;氯化血红素;牦牛血粉;醋酸钠法;冰醋酸法【作者】杨生忠;韩学燕;李宗文;陈虎;任茜;曹效海【作者单位】乌兰县畜牧兽医工作站,乌兰 817100;大通县畜牧兽医站,大通810100;乌兰县畜牧兽医工作站,乌兰 817100;青海大学农牧学院,西宁 810016;青海大学农牧学院,西宁 810016;青海大学农牧学院,西宁 810016【正文语种】中文【中图分类】S823.8+5牦牛是青藏高原特有的优势畜种,主要分布在中国青海、西藏、四川、甘肃等地区[1-2]。
蒸馏法提取血红素铁技术的研究
肉类研究年第期总第期肉类研究w w w .c m r c.c om .c n MEAT RESEARCH2008.1蒸馏法提取血红素铁技术的研究胡鑫,罗永康(中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083)我国畜禽血资源十分丰富,然而我国畜禽血利用率很低,利用率不到10%,除部分以血豆腐和血粉等初级加工形式利用外,相当一部分以污水的形式排放或丢弃,致使大量宝贵营养资源流失,且造成严重的环境污染。
畜禽血球中的卟啉铁是一种良好的补铁剂,可治疗缺铁性贫血。
发展中国家,尤其是贫困地区,食物结构大都以植物性食物为主,动物性食物为辅,而来自植物中的铁有90%不能被人体吸收,因此,铁缺乏高达30%-40%。
缺铁性贫血主要威胁少年儿童、育龄妇女,尤其是孕妇和乳母,它使人体红细胞减少,血红蛋白含量下降,工作效率降低,认知和行为能力变差,抗病力下降,因而对人类健康构成威胁[1]。
目前常用的补铁剂为非卟啉铁,如硫酸亚铁、乙二胺四乙酸铁钠(ED TA 铁钠)等,其吸收率低,并有一定的副作用[2]。
而从血球中提取的卟啉铁,无毒无害,吸收率高,一般不受膳食因素的影响。
本文以冷冻牦牛血细胞为原料,以血红素铁的得率及铁的含量为指标,筛选出了能有效地提取血红素铁的工艺技术。
1.材料与方法1.1材料牦牛血,采于青海省西宁市乐家湾畜产交易加工园区,于实验室冷冻保存。
1.2血红素铁的制备摘 要:本文以冷冻牦牛血细胞为原料,以血红素铁的得率及铁的含量为指标,研究不同pH 值及不同丙酮与血球液的体积比对血红素铁得率及铁的百分含量的影响,筛选出蒸馏法提取血红素铁的最优条件。
关键词:牦牛血球;血红素;提取;蒸馏法St udy on t he E xt r act i on T echnol ogy of H em e Ir on by D i st i l l at i onH UX i n,LU OY ong-kang(C ollegeof F oodS cienceandN utri tionalEngineeringofC hi naA griculturalU niversity,B eijing 100083)A bstract :Inthis paper ,frozenyakbloodcell fluidw as takenas the raw m at erial,takinghem ei rontothe yi eldandt he cont ent of i ronas indicat ors,w e studiedthe affectionof t he hem e i roninthe rate andthe per centage of ir oncont ent causedbydiffer ent pH values anddifferent acetoneandbloodfluidvolum e ratio andgot theoptim um conditionsfor distillationextractiontechniquesofiron-porphyrin.K eyw ords:Y akblood;H em e;E xtract ;D istillation中图分类号:TS251.93 文献标志码:B 文章编号:1001-8123(2007)12-0024-03基金项目:国家“十一五”科技支撑项目(6363) 浙江省重大科技攻关项目(6)作者简介:胡鑫(),女,硕士研究生,研究方向:畜产品加工2420081107200070004200C120821984-肉类研究肉类研究5年第期总第期(1)分离血球:新鲜牦牛血,加入0.35%柠檬酸纳,搅拌均匀,离心分离,收集血球备用.(2)溶血:血球经20M pa 下高压均质,使血球破碎。
牛血液中SOD的提取分离纯化及鉴定
生物化学实验综合性设计实验报告牛血中SOD分离纯化及含量、活性、相对分子质量的测定The separation, collection, purification andidentification of SOD from the cow blood姓名:唐胜华学号:0941063 年级:09生科专业:生物科学小组成员:韩旭思关晴月指导教师:刘立亚2011年12月17日牛血中SOD分离纯化及含量、活性、相对分子质量的测定唐胜华韩旭思关晴月(中央民族大学北京市100081)摘要:目的熟练掌握从动物血液中提取SOD及分离鉴定和活力测定。
方法破碎细胞释放其中的内涵物,有机溶剂去除血红蛋白,再用透析法纯化所得SOD,然后根据SOD的物理化学性质进行各项指标测定。
结果实验中SOD在限制邻苯三酚自氧化的用量时随着提取纯化次数的增加而增加,PAGE电泳胶块染色和脱色后可以明显的发现胶块正中央有透明区域。
结论动物血液中含有SOD,它具有抑制氧化作用的功能。
关键词:SOD,邻苯三酚自氧化,PAGE电泳,抑制氧化。
The separation,collection, purification and identification of SOD from the cow bloodTANG Sheng-hua,HAN Xu-si, GUAN Qing-yue(MinZu University of China, City of Beijing,100081)Abstract: Objective From the experiment, we can know exactly how to get SOD from cow blood, then separate, collect, purify and identify it. Methods we start on determining the feature of SOD after extracting, separating, and collecting it, then we will get what we want from the experiment. Results through the experiment, obviously that the amount of Pyrogallol used to suppress the Oxidation rate is increased with the steps to separate, collect, purify the SOD increasing. Also we can find that there is a Transparency in the middle of the Rubber block after the Electrophoresis finished. Conclusions Through the experiment, we deeply know that there is always some SOD in the animal blood which itself can suppress the Oxidation rate in the body.Keywords:SOD, self-Oxidation of Pyrogallol, PAGE Electrophoresis, Oxidation-supression前言近年来,随着生物科学领域中分子生物学的迅速发展,使得之前只能从细胞层面研究血液组成及功能的瓶颈得以突破,进入研究血红细胞中分子组成的层次。
提取血红素的原理是
提取血红素的原理是
血红素的提取原理通常涉及以下步骤:
1. 血红素来源:血红素是在人和动物体内产生的一个重要生物分子,它是红血球中的一种血红素蛋白的组成部分。
红血球中的血红素与氧气结合,使其在体内运输。
2. 血红素的分离:要从生物体内提取血红素,首先需要将其与其他细胞和组织分离。
这可以通过离心、溶液直接抽取或其他物理和化学方法来实现。
3. 血红素的萃取:分离的血红素可以通过溶剂萃取的方式进一步提取。
常用的溶剂包括乙醚、醋酸乙酯等。
萃取过程中,血红素会与溶剂发生相互作用,从而被溶剂分离出来。
4. 脱色和纯化:血红素的提取通常还需要进行脱色和纯化步骤。
脱色过程中,常用活性炭或其他吸附剂来去除杂质。
纯化过程可以利用色谱或透析等技术,将血红素与其他物质分离开来。
5. 结晶和干燥:纯化的血红素可以通过结晶技术进一步提纯和纯化。
结晶过程中,通过逐渐降低温度,使血红素分子逐渐聚集成晶体。
最后,晶体通过干燥等工艺得到血红素的固态形式。
需要注意的是,血红素的提取原理可以根据具体的应用和实验目的而有所不同,上述步骤仅为一般性描述。
在实际操作中,根据需要可能会使用更复杂的方法和技术。
牦牛血液氯化血红素的分离提纯及工艺优化研究
and Veterinary Station in WuLan County , WuLan Animal Husbandry Animal Husbandry and Veterinary Station in Datong County ,Datong 810100,China ; College o f Agriculture and Animal Husbandry, Qinghai University ,Xining 810016,China)
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Abstract: The study was conducted to separate and purify the hemin from yak blood and the opti mal process of preparing the hemin was confirmed using blood meal,glacial acetic acid and sodium acetate methods. The purity and the yield of the extracted hemin in different methods were com pared. The results showed that the purity of hemin in yak blood was 9 6 ' and the yield was 7. 38 g/L using blood meal method under the optimal process of 40 min for ultrasonic treatment, 30 min for extraction,120 mL acid acetone and 9 mL sodium acetate. The purity of hemin was 8 0 ' and the yield was 6. 10 g/L when the amount of glacial acetic acid was 3 times as much as blood cells amount using the glacial acetic acid method. The purity of hemin was 9 0 ' and the sing sodium acet at e me thod. The purity of the hemin from high to low was blood mealmethod , sodium acet at e met hod and glacial ace tic c aid met hod,and that of the hemin yield was blood meal method,glacial aceticacidmethodandsodiumacetatemethodbycomparing the threepreparation methods. So t he blood meal met hod was more conducive t o indus trial product ion. Keywords : yakblood ;hemin;yakbloodm eal ;sodiumacetatemethod;glacial aceticacidmethod yield was 3. 44 g/L when the amount of chloroform was 2 times asmuch as blood cells amount uChinBiblioteka Animal Husbandry
青海牦牛血液资源的研究现状及开发利用
青海牦牛血液资源的研究现状及开发利用王华清;来进君;段培琪;王涛;马永贵【摘要】文章阐述了青海牦牛养殖和牦牛血资源开发利用的现状,介绍了对牦牛血资源的开发价值,总结了牦牛血开发所面对的问题.【期刊名称】《青海畜牧兽医杂志》【年(卷),期】2016(046)002【总页数】2页(P43-44)【关键词】牦牛血;现状;开发;综述【作者】王华清;来进君;段培琪;王涛;马永贵【作者单位】青海师范大学,西宁,810008;青海师范大学,西宁,810008;青海师范大学,西宁,810008;青海师范大学,西宁,810008;青海师范大学,西宁,810008【正文语种】中文【中图分类】S823.8+5近年来,人们对自然资源的利用倍受关注。
在此背景下,动物血资源的开发和利用越来越受到人们的重视。
牦牛血相比于其他动物血,蛋白含量高,营养丰富,是一种优质的动物血资源。
青海省作为牦牛养殖量最大的省份,拥有大量的牦牛血资源,但是牦牛血的开发利用率低,研究较少,造成了大量牦牛血液资源的浪费。
为此本文就青海牦牛血的开发现状进行阐述。
全世界现有牦牛l500多万头〔1〕,其中中国现有牦牛l400多万头,约占世界牦牛总数的95%以上〔2〕,是世界上牦牛数量和品种最多的国家。
我国的牦牛主要分布在青海、西藏、四川、甘肃和新疆等省份。
青海是我国牦牛饲养量最多的省份,现有牦牛近500万头,约占全国总数的40%。
主要分布于海拔3000m以上的高寒牧区,其中玉树州数量最多,占全省牦牛总数的34.37%,果洛州占25.65%,海南州占11.46%,黄南州占10.39%,海北州占9.09%,海西州占4.2%,海东地区和西宁市郊占4.3%,其他地区约占0.45%〔3〕。
目前对于牦牛血的研究主要集中在食用、医药等方面。
食用方面主要是对牦牛血的初加工后进行食用,如加工成血肠、血块。
医药方面主要是从血液中分离医药成分,开发成药物或保健品,如杨敦豪等发明的高原牦牛血胶囊及其制备方法等。
牦牛血粉酶法制备氯化血红素工艺研究
牦牛血粉酶法制备氯化血红素工艺研究
李得信;师希雄;文鹏程;张炎;汪月;张忠明;张卫兵
【期刊名称】《中国食品工业》
【年(卷),期】2015(000)007
【摘要】为研究牦牛血资源的合理开发利用,试验以牦牛血粉为原料,采用酶法制备氯化血红素.研究了酶解温度、pH、时间、酶添加量等因素对氯化血红素制备的影响.试验表明,酶法制备氯化血红素的最佳工艺参数为:酶解温度55℃、酶解pH8.0、酶解时间5h、酶添加量为0.6%.此条件下氯化血红素的得率达到15.203mg/g.【总页数】3页(P66-68)
【作者】李得信;师希雄;文鹏程;张炎;汪月;张忠明;张卫兵
【作者单位】甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学
食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食
品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070;甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070
【正文语种】中文
【相关文献】
1.响应面法优化高产糖化酶的黑曲霉突变菌株制备糯米酒酒曲工艺研究 [J], 崔敬爱;邵智韬;徐岩;戴碧玮;庄若岩;曹勇;陈海燕;陈晓平
2.利用猪血粉制备多肽的工艺研究 [J], 汪学荣;郑炯;阚建全
3.氯化血红素作为过氧化氢模拟酶制备高纯度低聚果糖 [J], 梁锦添;韦超;郑忠毅;
姚评佳;魏远安
4.猪血粉制备复合氨基酸工艺研究 [J], 郑远旗;李建吾
5.喷雾干燥法制备鸭血粉的工艺研究 [J], 汪学荣; 王飞; 张晓春; 彭祥伟
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CMC-Na法提取牦牛血红素的工艺研究
14 4
甘 肃 农 业 大 学 学 报
S - HB Ⅲ型循环 水 多 用 真 空 泵 、 HS3 型 电 子 p P -C H
计 、Y9一 N 型超 声 波 细胞 粉碎 机 、 - 5 B型 J 2 ⅡD KQ 2 0 超 声波 清洗 器 、T 一0型 架盘 天平等 . J P1
( . ) 3 8 抗凝 [ 搅 拌一 加入 0 9 生理 盐水 离心 2 L .
次一加 入去 离子水 一加 入 o 1mL乙醇一 搅 拌 均匀 . 一 超声 波 破碎 一 抽 滤一 取 滤 液一 调 溶 液 p 值 ( H 使 之 达到 分离 珠蛋 白和血 红素 的最佳 值 , 连续 搅拌 ) 并
一
加入 C - ( ) 浮液 吸附一 搅 拌 均 匀一 调 MC Na 3 悬 A 0
1 0
2 0
3 0
4 0
5 O
节 溶液 p 值 到 5 5 连 续搅 拌 一 高 速离 心一 分离 H .一
出血红 素一 洗涤一 干燥 一血 红素 .
1 3 2 试 验 设 计 _.
去离子 水 添加 量 I mL
Th il f e go i o l ra h3 0 8mg mL wi h xrcintc nq e. eyedo mo lbnc ud ec . 2 / t t ee ta t h iu s h h o e
Ke r s CM C- ; e o l b n; a y wo d : Na h m g o i y k
( 肃农 业大学食品科学与工程学 院 , 甘 甘肃 兰州 7 0 7 ) 3 00 摘要: 以新鲜牦牛血为原料 , 采用超声波破碎 进行溶血 , 利用羧 甲基纤维 素( MC) C 的吸附作用 提取血 红素. 结 果表 明 : 提取牦牛血红 素的最佳 的条件为 :OmI红血球 中, 1 去离子水 添加量 为 4 超 声波破碎 时间为 2 n OmI, 0mi, 分离 p H值为 2 0 C - ( ) . , MCNa 3 的添加量为 3mI, 该工艺从牦牛血全 血中提取的血红素产率为3 0 8mg mL . 2 / . 关键 词 : MC Na ; C - 法 血红素 ; 牦牛
禽兽血提取血红素方法及研究
禽兽血提取血红素方法及研究以禽兽血提取血红素方法及研究为题,本文将介绍禽兽血提取血红素的方法,以及相关的研究进展。
血红素是一种具有重要生物学功能的金红色分子,主要存在于血液中的红细胞中。
它在人体内有着多种功能,如运输氧气、参与细胞代谢等。
因此,研究血红素具有重要的科学意义和应用价值。
禽兽血是血红素的重要来源之一,其血红素含量较高,因此提取禽兽血中的血红素具有一定的研究意义和应用前景。
目前,有几种常用的提取血红素的方法,下面将逐一介绍。
一、酸碱浸提法这是一种常用的提取血红素的方法,其原理是利用酸和碱的化学反应将血红素从禽兽血中分离出来。
具体操作为将禽兽血与酸性溶液或碱性溶液混合,待反应结束后,通过过滤或离心分离出血红素。
这种方法提取的血红素纯度较高,但操作相对复杂。
二、溶剂萃取法溶剂萃取法是一种利用溶剂将血红素从禽兽血中分离的方法。
常用的溶剂有乙醇、乙醚等。
具体操作为将禽兽血与溶剂混合搅拌,待血红素溶于溶剂后,通过过滤或离心分离出血红素。
这种方法操作简单,但提取的血红素纯度较低。
除了以上两种常用的方法,还有其他一些新的提取血红素的方法正逐渐被研究和应用。
例如,超声波辅助提取法、微波辅助提取法等。
这些方法利用了物理效应来提高血红素的提取效率和纯度。
在禽兽血提取血红素的研究中,除了提取方法的改进外,还有一些其他的研究内容。
例如,研究血红素的生物学功能、血红素与疾病的关系等等。
这些研究有助于深入了解血红素的作用机制,为相关疾病的诊断和治疗提供理论依据。
禽兽血提取血红素是一项具有重要科学意义和应用价值的研究工作。
通过不断改进提取方法和深入研究血红素的功能,我们可以进一步探索血红素在人体内的作用机制,为相关领域的研究和应用提供支持和指导。
希望在未来的研究中,能够有更多的科学家投入到这一领域,为我们的生活和健康做出更多的贡献。
藏羊血液中血红素的制备
21 0 1年第 4 l卷第 5期 ( 总第 24期 ) 1
由图 3和 图 4可知 , 红 素样 品红 外 光 谱 图与 标 血 准 品波形 相似 , 二者 的 吸收峰位 置 和强度来 看 构 从 结 相同, 两种 物质 为 同一 种 , 即血红 素 。 2 2 血 红素 的定量测 定 . 2 2 1 血 红 素标 准溶 液 的制 备 血 红 素标 准 品 ( .. 海 宁市和 田龙牌 , 纯度 为 9 . % ) 15 干燥 至 恒 重 , 48 经 0℃ 用 分析 天 平 称 取 2 . m , 于烧 杯 中 , 0 1mo L 0O g置 加 . l / 的氢氧 化钠溶 液 溶 解 , 将 溶 液 转 移 到 5 m 并 0 L容 量 瓶 中 , 0 1 o L的氢 氧化钠 溶液定 容 、 匀 。 加 .m l / 摇
r主签塑 l 1
l
x l 罐 a,
图4 血红素样品红外光谱 图
222 标 准 曲线绘 制 ..
量取 标 准 溶 液 0 5 L,m , .m l L
0 9 O 0 0 O 0 B 7 6 5 4
^ 譬鍪 S
2 L 3 ,mL5 L于 lO L容量 瓶 , 0 1 o L的 m ,mL4 ,m Om 用 .m l / 氢氧 化钠 溶 液定 容 至刻 度 , 匀 , 0 1 o L的氢 氧 摇 以 .m l / 化钠溶 液为空 白, 45 m 波长处 测定其 吸光 度 ( , 在 0n A)
Ab t a t o e t b i e xr c t o fT b t n s e p h me T e c u e e ta t f i ea h e lo s sr c :T s l h a n w e ta t a s meh d o i ea h e e . h r d x cs o b tn s e p b o d a r T h a tr l a eo e a d a i c tn s s le t w s p r i d nr e p c o c p s a p e o u l i t e r w ma e a , c t n n cd a e o e a o v n - a u i e .I f r d s e t s o y wa p  ̄ d f r q ai t e i f a r a t v n lss f me- n l a i lts e t p oo t a t i d frq a t t e d t r n t n o e e B i g e—fco a ay i o e h a d u t voe p c r h t mer w s u l e u n i i ee mia o fh i . y s l r o y i z o a t v i n n a tr t s t ee i e t a e d s g f a eo e i b o d v l me o i s a d c nrf g t n t s 1 r i ih i t e e t o d tr n h tt o a e o c tn s lo o u f1 t m h me n e t u a i i i 5 n1 c s h i o me a wh
牦牛血液中高纯度血红素的提取试验研究
( 柠檬 酸三 钠 ) 丙酮 、 、 冰醋 酸 、 浓盐 酸 ( 均为 分析纯 ) 12 仪器 : . 离心 沉淀 机 (S 2上海 医分 仪器 制 造有 LJ一 限公 司 )数 显恒 温水 浴锅 ( H一8常 州 市华普 达 教学 、 H 仪 器 有 限公 司 ) 旋 转蒸 发 仪 ( E一5 , 海 亚 荣生 化 、 R 2上 仪 器 厂 ) 电子 天 平 ( Al N, 海 精 密 科 学 仪 器 有 、 F l一4 上 限公 司 )循 环水 式真空 泵 ( 州科 工 贸 ) 紫外 分 光光 、 郑 、 度计。
a i i c tn wa , n i s a a fy k b o d v l me r s e t ey, n e p rt o a lo e a h cd c a e o e- s 1 4 a d 4 t me s t t a lo ou e p c i l a d t u y fy k bo d h me r c h o v h i e 9 .2 9 4 % p r e t y ed c e i in s8 1 g L e c n . il o f c e ti . 8kbod H me E t c n e o d : iga - a l - e I x at g o r i
血红 素是 由一个 二价 铁离 子镶 嵌在 一个 原 叶琳环 而构 成 的 , 一类 重要 的 天 然 卟 啉 铁 化 合 物 ( 本 结 是 基 构见 图 1 , ) 主要 存 在 于 动物 血 液 中 , 动物 血 液 中 的 是 天然 色素 , 具有 重要 的生 理功 能和 很高 的实 用价 值 , 在 医药 、 品 、 工 、 健 品及 化妆 品行 业 中 都 有广 泛 应 食 化 保 用 一 引。 牦 牛血 液 的营养 价值 很 高 , 化特性研 究 表 明 , 理 牦 牛血全 血 、 浆 、 细 胞 的 蛋 白含 量 分 别 为 1 . % , 血 血 55 6 9 和 3 . % , 由于诸 多原 因 , .% 27 但 当前 我 国牦 牛 藏 羊血液 的利 用率 几乎是 空 白, 多 以污水形 式 排放 , 大 致 使 大量 宝 贵 营养 资 源 流失 , 造 成 严 重 的 环 境 污 染 。 且 目前 为 止 , 用 猪 血 、 血 等 制 备 血 红 素 已有 相 关 报 利 牛 道 l J但 对青 藏高 原特 有畜 种—— 牦 牛血 液 的研 究 1 , 非 常少 , 实验 就从 牦 牛 血 液 中 的提 取 高 纯 度血 红 素 本 的工 艺进 行 了初步研究 与探索 。
牦牛血液氯化血红素的分离提纯及工艺优化研究
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%'0'*'0冰醋酸 法 将 新 鲜 的 牦 牛 血 液 加 入 柠 檬酸抗凝剂!用 离 心 机 分 离 血 浆 与 血 细 胞' 在 配 有 回 流 冷 凝 管 的 三 口 烧 瓶 中 加 入 %&0&*&)&1 倍 的 冰 醋 酸 与 氯 化 钠 !加 热 使 氯 化 钠 溶 解 !细 流 加 入 已 经 抗 凝
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中国畜牧兽医
)) 卷
牦牛是青藏高 原 特 有 的 优 势 畜 种!主 要 分 布 在 中国青海&西藏&四川&甘肃等地区 ' )%!0* 青海 牦 牛 数 量 较 多 !牦 牛 肉 和 牦 牛 乳 是 重 要 的 畜 产 品 资 源 !但 由 于牦牛血液腥味 重!不 宜 食 用!利 用 率 极 低!还 可 能 会造成严重环境污染'动物血液中富含多种蛋白质 "包括血浆蛋白&血 红 蛋 白 等#&微 量 矿 物 元 素&维 生 素"烟酸#&激素 和 其 他 生 理 活 性 物 质' 牦 牛 血 液 中 血红蛋白"W2#的含量较高!是制取血红素 类产品 的 优 质 资 源 ' )*!1*
动物血液资源的开发利用研究进展
9% 。用离 子交换 层析 可将血 浆蛋 白分离 为纤 维蛋 白、
球 蛋 白和 白蛋 白三种 主 要蛋 白质 ;血 细胞 约 占血 液 的
35% ,主要 成分 是血 红 蛋 白。血 液 中含有 丰 富 的蛋 白
质和微 量元素 ,以及适 量 的矿 物质 、维 生 素 、激 素 和其
它一些 生物活 性物质 ,。
资源作为解 决 营养 不 良的有效手 段之一 。
体对这 种铁 的吸收 率是 无 机铁 的 3倍 ,因此 血 液 中 的
1 动物血 液 的理 化和营 养特性
卟啉 铁 ,对 于改善 缺铁性贫 血效 果明显 。
1.1 血液 的理化 特性
血液 对动 物体十 分重 要 ,它 是 动 物体 内循 环 系统
血液约占其体重 的 8%,屠宰后可收集血液占屠宰重 氨酸和胱氨酸(含硫氨基酸),而其余 的必需氨基酸的
的 4% 一5% 。我 国的动物血 液 资源 十分 丰 富 ,估 计 在 化学成分都接近或超过 100分 J。虽然较低的异亮氨
2.3×10 kg以上 … ,据 估 算 青 海 省 动 物 血 液 至 少 约 酸含量,影响了蛋 白质中必需氨基酸的比例 ,降低 了血
一 五”期间,由青海省安利牧生物技术公 司、青海省畜 量 ,改善其结构和质量 ,而在焙烤工业中,利用血浆蛋
牧兽 医科学 院联 合 申报 ,青 海 省 科 技 厅 下 达 了 “特 色 白质极好的发泡能力,可以减少鸡蛋蛋 白的用量。血
牦牛 藏羊血 功 能性 食 品的 研 发 ”项 目,针 对牦 牛 藏 羊 液蛋 白质 中最 主要 的组 分是 血 红 蛋 白 。约 占蛋 白质 总
血液 资源进 行 了有 效 的开 发 利用 研 究 ,首次 从 牦 牛藏 量的 2/3,其相对分子质量为 68 000,由四条多肽链构
牲畜血液的加工利用
牲畜血液的加工利用牲畜(牛、猪、羊)血液是一种资源,利用牲畜血液作原料,可加工成多种产品。
在我国的少数边远地区,由于对牲畜血液加工利用的意识淡薄,再加上地域条件所限和缺乏技术,误把牲畜血液视为“负担”,个别地区甚至将牲畜血液任意丢弃,造成了当地不该出现的环境污染。
统计资料表明,牲畜血液约占牲畜活重的8%-9%,血液的采出率占牲畜活重的3%-5%,其中牛血为活重的5%,猪血为活重的3.5%,羊血为活重的 3.2%。
就全国而言,可用来加工利用的牲畜血液是一个庞大的数字。
不言而喻,做好牲畜血液的加工利用,正视牲畜血液的价值,挖掘牲畜血液的潜在效能和用途,无疑是一项创造财富、有利环境、利国利民的事业。
1牲畜血液的性质刚从牲畜体内流出的血为红色、不透明、微碱性的液体,稍带黏性,有咸味或特殊嗅味。
牲畜血液从血管或放血口流出来时是液态,如果静置不动,约5-10min 后即变黏稠,并结成红色胶冻物。
血在液体状态中就形成丝状的纤维,结成网状,布满液体中。
此时血液已失去液体的特性,凝成块状,这种现象俗称凝固。
血液凝固是血浆由溶胶状变为凝胶状的过程。
牲畜血液呈弱碱性,pH7.3-7.5。
一般血液的酸碱度是指血浆的pH值,血细胞的pH约为7.1。
血液本身有缓冲作用,即使不断增加碳酸,仍可保持pH在7.4左右。
牲畜血的比重在1.041-1.057的范围内,通常在1.05-1.06之间。
血液的比重和血中蛋白质的含量大致成比例。
血的黏度主要来源于血细胞,血浆及已溶血的黏度很低。
水、血浆、全血黏度之比为1∶1.7-2.0∶3.6-5.4。
2牲畜血液的组成[NextPage]牲畜血液由液体部分血浆和悬浮在液体内的有形成分血细胞组成。
在牲畜血液中,干物质占18%-23%,其余是水。
在干物质中,有机化合物占17%-22%,无机化合物占0.6%-1%。
血液中血浆约占60%,血细胞约占40%。
血浆中含水分90%-92%,干物质8%-10%。
以牦牛血粉为原料酶法制备氯化血红素的方法[发明专利]
专利名称:以牦牛血粉为原料酶法制备氯化血红素的方法专利类型:发明专利
发明人:张卫兵,李得信,高维东,李晓鹏,刘兴龙,杨敏
申请号:CN201310321052.4
申请日:20130723
公开号:CN103396418A
公开日:
20131120
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明公开了一种以牦牛血粉为原料酶法制备氯化血红素的方法。
本发明生产氯化血红素的步骤包括牦牛血粉的溶解、酶解、灭酶、除杂和干燥。
本发明采用生物酶法制备氯化血红素的方法简单、易于操作,成本较低,污染小,便于工业化生产。
同时,本发明以牦牛血粉为原料制备氯化血红素,为牦牛血粉的综合利用提供了一种新途径。
申请人:甘肃农业大学
地址:730070 甘肃省兰州市安宁区营门村1号
国籍:CN
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目录
摘要 (1)
关键字 (1)
前言 (1)
1.血红素的结构及性质 (1)
2.血红素的提取 (2)
2.1:试验材料及药品 (2)
2.2.试验方法 (2)
2.2.1 提取原理 (2)
2.2.2 试验流程 (3)
2.2.3 试验步骤……………………(3-4)
3.结果与分析 (5)
4..参考文献……………………(5-6)
牦牛中血红素的提取与分离
摘要:以新鲜牦牛血液为原料, 研究牛血红素的提取方法和工艺。
采用醋酸钠
法, 蒸馏法, 两种方法提取血红素, 通过试验来确定药品的最佳用量,醋酸钠添加量约为 0.7 倍, 氯仿添加量约为 0.1 倍, 丙酮添加量约为 4倍, 加水量
为约 1 倍,醋酸钠法是提取血红素的最佳工艺。
关键词:血红素提取离心分离蒸馏法醋酸钠法
前言:铁是人体内含量最丰富的一种必需微量元素。
机体缺铁能引起缺铁性贫
血, 并影响机体的免疫力, 对儿童还能影响其智力发育, 引起行为改变, 如注意力分散、易烦燥、表情淡漠等。
虽然铁在食品中广泛存在, 但由于它在食品中存在的形态不利于机体对它的吸收利用, 所以, 人们易患缺铁症, 特别是轻度缺铁较常见, 多见于儿童、妊娠妇女、哺乳妇女等。
我国少年儿童缺铁性贫血症发病率很高, 目前常用的补铁剂是含铁的化学制剂, 主要有硫酸亚铁、富马酸铁、葡萄糖酸亚铁等, 这些补铁剂在人体内吸收利用率较低, 它们对胃肠道有不同的刺激作用, 常使患者食欲不振, 且铁离子在血液中浓度过高, 可导致体内铁负荷过重, 产生铁蓄积中毒。
而血红素是血红蛋白的辅基, 简称卟啉铁化合物, 是很好的铁强化剂。
血红素治疗缺铁性贫血疗效显著, 已逐渐受到人们的重视。
青海省地处青藏高原地区,牦牛资源十分丰富,牦牛血中的血红素的含量随着海拔的升高而增多,由于有此特性在医学等领域有着广泛的运用,主要研究的有CMC-Na法提取牦牛血中的血红素、低温乙醇发法提取牦牛血中的血清蛋白、牦牛血粉制备氯化血红素、牦牛血红蛋白活性肤酶法的制备工艺牦牛血中超氧化物歧化酶的提取、醇法水解牦牛血红蛋白等研究工艺。
从而更加清楚的了解牦牛血中红星无知的理化性质以及特有的作用。
1. 血红素的结构及性质
血红素是由一个二价铁离子镶嵌在一个原卟啉环而构成的称为铁卟啉的化合物,。
卟啉环上的4个氮原子位于同一平面上,其中2个氮原子与铁原子以共价键结合,另外2个氮原子则以配位键结合。
铁原子以配位键与球蛋白分子的组氨酸残基上的咪唑环的氮原子相结合,以复合蛋白质的形式存在。
铁原子的配位数是6,因此还有一个配位键能与其他原子连接。
血红素的分子式为C34H33FeN4O4,分子量为633. 49。
血红素为片状或针状的紫色结晶,不溶于水、稀酸、醚、氯仿及丙酮,溶于氢氧化钠水溶液、热醇或氨水中,主要存在于动物的血液和肌肉中,是动物血液中的天然色素,具有重要的生理功能和很高的实用价值,是一种优良的铁强化剂及抗贫血药,在医药、食品、化工、保健品、建筑及化妆品行业中有广泛应用,其化学结构如图1所示:
2.血红素的提取
2.1:试验材料及药品
新鲜牦牛血(取自青海西宁城东屠宰场)、LXJ-64-01型离心机、LR-200电磁搅拌器、PH5-酸度计
药品:焦亚硫酸钾(K2S2O5)分析纯、氯化钠(NaCl)分析纯、15%的HCl、
无水乙醇、冰乙酸(分析纯)、三氯甲烷(分析纯)、固体氢氧化钠、丙酮(分析纯)
2.2.试验方法
2.2.1 提取原理
血红蛋白是血液中红血球的主要成分, 是由 4 分子血红素和 1 分子珠蛋白结合而成的, 因此在正常条件下, 亚铁血红素与珠蛋白紧紧结合在一起, 很难把它们拆分开来, 但是由于蛋白质不稳定, 在极端环境中容易变性如加热, pH 变化和脲、胍等变性剂的存在, 导致血红蛋白的空间结构发生变化而变性, 如 pH 引起的变性是与埋藏在蛋白质分子内部的基团的不稳定性有关。
当pH=2~5 时, 血红蛋白分子中原先不带电荷的埋藏在分子内部的组氨酸残基(pI=7.00), 由于带有负电荷而暴露出来, 而此时血红素与珠蛋自的结合最为疏松, 血红素容易被释放出来, 并随即氧化成高铁血红素。
在此条件下, 就有可能使用分离剂, 使高铁血红素和分离剂发生共沉淀而达到分离目的。
2.2.2 试验流程
新鲜抗凝买牛血→离心分离→红血球→洗涤→溶血→沉淀血红蛋白→溶解血红蛋白→分离血红素→结晶→干燥→精制血红素→称量
2.2.3 试验步骤
(1)新鲜牦牛血的抗凝处理
取新鲜牦牛血, 加入 5%的柠檬酸三钠, 搅拌均匀、便得新鲜的抗凝牦牛血。
(2)分离红血球
把抗凝处理的血液放入高速离心机, 以 3000r/min 离心约 15 分钟, 用吸管把上清液(黄色血清)小心吸去抛掉, 下层的红血球用 2倍生理盐水洗 2 次, 在每一次洗涤中, 用离心机以 3000r/min 离心7 分钟, 反复操作后, 得到洗涤血红细胞
(3)溶血
取洗涤血红细胞 50ml, 加入相等于红血球体积的 1 倍蒸馏水, 0.25 倍无水乙醇, 搅拌 30 分钟, 红血球吸水胀裂, 血红蛋白便从红细胞中分离出来。
(4)分离血红蛋白
溶血后加入 0.15 倍的氯仿, 搅拌 15 分钟离心, 可得含血红蛋白的沉淀物
(5)血红素的分离
上述沉淀物中加入相等于红细胞体积的 0.15%的Na2S2O5 溶液, 使其溶解,
然后加入相等于红细胞体积的 4 倍丙酮, 搅拌均匀, 调节 pH约等于3.0 使珠蛋白与血红素充分分离, 搅拌抽提 10 分钟以上, 然后离心过滤, 可得血红素的丙酮溶液。
(6)血红素提取、结晶
血红素提取、结晶的方法主要有醋酸钠法、鞣酸法、蒸馏法、羧甲基纤维素法,本实验采用蒸馏法和醋酸钠法
蒸馏法
对上述滤液进行水浴回收丙酮, 滤液浓缩后即产生沉淀, 抽滤, 用蒸馏水、无水乙醇洗涤 2 次, 干燥得血红素成品。
蒸馏法所得血红素产品外观如下图所示
醋酸钠法
在上述滤液中加 1mol/LNaOH 调 pH=4~6, 再加滤液量 1%的醋酸钠搅拌均匀, 静止后血红素呈无定形沉淀, 分别对其用蒸馏水、无水乙醇洗涤 2 次, 干燥得血红素成品。
用此方法得到的血红素产品外观如下图所示:
( 7) 洗涤
分别对上述方法中得到的血红素成品用去离子水、无水乙醇依次洗涤 2 次、滤干、放入变色硅胶干燥器中干燥, 便得血红素精制品。
3.结果与分析
3.1 氯仿加入量对提取血红素的影响
红细胞溶血后,加入氯仿分离血球蛋白滤液,氯仿加入量对提取血红素的影响尤为明显,通过多次实验可知氯仿加入量在2倍~5倍范围内,随加入量增加时,血红素含量快速增加。
超过5倍继续增加时血红素含量缓慢增加。
3.2 酸性丙酮加入量对提取血红素的影响
血红蛋白溶液用酸性丙酮溶液浸提,酸性丙酮加入量对提取血红素的影响结果见下图由图可知,酸性丙酮加入量由2倍增至3倍,血红素含量缓慢增加。
加入量在3倍~5倍时,血红素含量快速增加,超过5倍继续增加时,血红素含
量缓慢增加。
3.3 pH对提取血红素的影响
提取血红素滤液用NaOH处理后,用1mol/LHCl调节不同pH。
pH对提取血红素的影响结果见吸下图,
由图可知,pH从6~4,血红素含量迅速增加,pH从4~3,血红素含量迅速下降,说明pH对提取血红素影响较大。
3.参考文献
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