安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

安捷伦1260高效液相色谱仪操作规程

一、开机

（1）打开计算机，登陆windows操作系统。

（2）打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标，进入化学工作站，从视图菜单中选择“方法和运行控制”

画面。

（3）进行仪器配置，点仪器-仪器配置-选择所需模块-自动配置-输入IP地址：192.168.254.11。把各流动相放入相应的溶剂瓶中。

（4）编辑方法。方法-新建方法-方法-编辑完整方法-编辑各项（四元泵、TCC、VWD、仪器曲线参数设定，仪器参数默认），完成后，文件→方法另存为→编辑名称，保存方法。

（5）排气。旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”设置泵流速，排气可设置1.2ml/min，l流量梯度100，也可5ml/min，流量梯度10。一般冲洗3-5min，注意倾斜储液瓶使过滤头处的气体进入

管道才可使气体排出，观察管路中气体位置，以其排净为目的。关泵，关

闭排气阀（顺时针）。（注意：先开排气阀，再开泵，先关泵，后关排气阀）。（6）在让液体进入柱子之前应将甁填充设置为实际值，谨防空进。将泵流速设置1ml/min,用过渡液即缓冲液冲洗色谱柱20—30分钟。

（7）换流动相，待柱前压力基本稳定后，打开检测器，视图，在线信号，选择信号，观察基线情况。

二、数据采集信息编辑及进样

（1）编辑样品信息：点“单次样品”小瓶，或点击运行信息-单次进样，设定操作者姓名，样品数据文件名，进样量等。

（2）编辑好样品信息后方可进样。

三、数据处理

（1）打开桌面“仪器1脱机”，单击“数据分析”进入数据分析画面。

（2）从“文件”菜单中选择调用信号，选择您的数据文件名，单击确定。（3）谱图优化。从“图形”菜单中选择“信号选项”从范围中选择“自动量程”

及合适的显示时间，或选择“自定义量程”调整，反复进行，直到图比例

合适为止。

（4）积分。从“积分”中选择“自动积分”，若积分结果不理想，从菜单中选“积分事件”，更改数据为合适的“斜率灵敏度、峰宽、最小峰面积、最小峰高”，从“积分”中选择积分选项，则数据被积分，如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。单击左边图标将积分参数存入方法。

（5）校正表设计。点击“校正”菜单中的“校正设置”给出各个参数，点击确定，调出建立校正表所需的谱图并对谱图进行图形优化和积分优化。点击校正→新建校正表，选择自动设定→确定，在校正表中给出正确的“化合物名”和“含量”如需增加校正点数，校正→添加级别，给出第二校正点的含量，以此类推。校正表建立完成后点击“确定”点击“保存图标”将校正表存入方法中，或点击文件-方法另存为-找到对应文件夹，编辑日期及前缀存入。

（6）数据结果及报告打印。在校正表的基础上打开样品图谱，编辑报告格式：外标法等，读出含量。点击计算结果和报告打印图标，或预览报告后点击右下角“打印”打印出报告。可点击积分，去掉含量为零的点。

四、关机。

（1）关机前用过渡液冲洗半小时以上，再用甲醇冲柱子和系统半小时。然后关泵。

（2）退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机。

（3）关闭主机电源开关。

五、注意事项。

（1）流动相使用前必须经过过滤，不要使用多日存放的纯水。

（2）流动相必须经过脱气处理，可用超声波震荡15-30min。

（3）氘灯是易耗品，应最后开灯，不分析样品即关机。

（4）做完样应清洗进样阀，若使用含盐流动相，应先用水冲洗手动进样阀，再用甲醇洗，清洗时搬动进样阀数次，每次数毫升。