沉淀反应课件

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沉淀反应的应用课件

沉淀反应的应用课件

Ca5(PO4)3(OH) 1.5×10-10g
Ca5(PO4)3F 9.5×10-11g
Ca5(PO4)3F
氟磷灰石
▪ 牙齿表面由一层硬的、组成为Ca5(PO4)3OH的 物质保护着,它在唾液中存在下列平衡: Ca5(PO4)3OH(s) 5Ca2++3PO43-+OH- 进 食后,细菌和酶作用于食物,产生有机酸,这 时牙齿就会受到腐蚀,其原因是
锅炉中水垢中含有CaSO4 ,可先用Na2CO3溶液 处理,使 之转化为疏松、易溶于酸的CaCO3。
CaSO4
SO42- + Ca2+
+ CO32-
CaCO3
龋齿
交流与讨论
阅读P66 氟化物防治龋齿的化学原理
Ca5(PO4)3(OH)
羟基磷灰石
难溶物
溶解度 (25℃)
5Ca 2+ 3PO34 OH+ F-
2. 根据沉淀溶解平衡,分析回答下列问题: (1)BaCO3 和 BaSO4 都难溶于水,在医学上常用 BaSO4 作钡餐透视,而不能用 BaCO3 的原因是什么? 答案 原因是 BaCO3 能溶于胃酸(主要成分为盐酸),反应 原理为 BaCO3(s) Ba2+(aq)+CO23-(aq) CO23-+2H+===CO2↑+H2O 可见,胃酸消耗 CO23-,使溶液中 c(CO23-)降低,从而使 BaCO3 的沉淀溶解平衡向右移动,c(Ba2+)增大引起人体重 金属中毒。
Mg(OH)2(s) ⇌Mg2+(aq)+2OH-(aq),
FeCl3
静置
Mg(OH)2↓
Fe(OH)3↓
沉淀的转化
沉淀转化的实质 ▪ 沉淀转化的实质是沉淀溶解平衡移动。

高中化学反应原理3.3沉淀溶解平衡课件鲁科.ppt

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(1)ZnS沉淀转化为CuS沉淀的定性解释
当向ZnS沉淀上滴加CuSOks54u溶精品液课时件 , ZnS溶解产生的S2-与 CuSO4溶液中的Cu2+足以满足Qc>Ksp(CuS)的条件, S2-与 Cu2+结合产生CuS沉淀并建立沉淀溶解平衡。 CuS沉淀的生 成,使得S2-的浓度降低,导致S2-与Zn2+的Qc<Ksp(ZnS),使得 ZnS不断的溶解,结果是ZnS沉淀逐渐转化成为CuS沉淀。
当这两个过程速率相等时, Pb2+和I-的沉淀与PbI2固体的溶
解达到平衡状态即达到沉淀溶解平衡状态.PbI2固体在水中的
沉淀溶解平衡可表示为:PbI2 (s)
Pb2+ + 2I-
2、溶度积常数或溶度积(Ksp ):
难溶固体在溶液中达到沉淀溶解平衡状态时,离子浓度保 持不变(或一定)。其离子浓度的方次的乘积为一个常数 这个常数称之为溶度积常数ks5简u精称品课为件 溶度积,用Ksp表示。
ZnS在水中存在沉淀溶解平衡:
ZnS(s)
Zn2+(aq)+S2-(aq)
Ksp=1.6×10-24mol2•L-2
CuS在水中存在沉淀溶解平衡:
CuS(s)
Cu2+(aq)+S2-(aq)
Ksp=1.3×10-36mol2•L-2
ZnS与CuS是同类难溶物,Ksp(ZnS) >Ksp(CuS),CuS的溶解 度远小于ZnS的溶解度。
2.沉淀的转化
观察•思考
ZnS沉淀转化为CuS沉淀
(1).在1试管中加入ZnSO4溶液,再滴入Na2S溶液,观察现象。 (2).静置后倾去上层清液,蒸馏水洗涤沉淀2-3次。 (3).向沉淀中滴加适量的CuSO4溶液,观察现象。

沉淀反应的应用课件

沉淀反应的应用课件
沉淀的生成和转化是化学反应中 重要的过程,通过控制条件可以 促进沉淀的生成和转化。
沉淀反应的速率
反应速率的概念
描述了化学反应的快慢,受反应物的浓度、温度、催化剂等 因素影响。
沉淀反应速率的影响因素
沉淀反应的速率受多种因素影响,如反应物的浓度、温度、 催化剂等。
沉淀反应的条件
01
02
03
04
反应物的浓度
沉淀反应的类型
根据沉淀的组成和结构,沉淀反应可分为两类:均相沉淀和多相沉淀。 均相沉淀是指沉淀的组成和结构与反应物相同,例如复分解反应生成的盐和水。
多相沉淀是指沉淀的组成和结构与反应物不同,例如通过离子交换形成的沉淀。
沉淀反应的特点
01
02
03
04
沉淀反应具有选择性,即反应 物在特定条件下才能形成沉淀
等;
2. 配制溶液
根据需要配制一定浓度的溶液;
3. 加入沉淀剂
将沉淀剂加入到溶液中,搅拌均 匀;
6. 分析鉴定
对沉淀进行分析和鉴定,如用 XRD、SEM等方法。
5. 分离沉淀
采用离心机等方法将沉淀分离出 来;
4. 视察和记录现象
视察溶液中的变化,记录沉淀的 颜色、形状、大小等;
实验结果与讨论
通过实验,视察到沉淀的颜色、形状 、大小等变化;

沉淀反应具有可逆性,即沉淀 可以重新溶解在溶液中。
沉淀反应具有速率快的特点, 通常可以在短时间内完成。
沉淀反应具有应用广泛的特点 ,可以用于分离、纯化、分析
、制备等许多方面。
02
沉淀反应的基本原理
沉淀反应的化学平衡
沉淀溶解平衡
描述了沉淀溶解和生成的平衡状 态,受温度、浓度、酸度等因素 影响。

人教版高中化学选修四课件沉淀反应的应用.pptx

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小结
沉淀的生成、溶解、转化实质上都是沉淀溶解平 衡的移动的过程,其基本依据主要有: ①浓度:加水,平衡向方溶向解移动。 ②温度:升温,多数平衡向方溶向解移动。 ③加入相同离子,平衡向方沉向淀移动。 ④加入可与体系中某些离子反应生成更难溶或更 难电离或气体的离子,使平衡向的溶方解向移动。
练习
1.硫酸钡在硫酸中的溶解度比在纯水中小? BaSO4(s)Ba2+(aq)+SO42-(aq)
空白演示
在此输入您的封面副标题
课前复习
1、沉淀的溶解平衡: 一定条件下,当沉淀溶解的速率与沉淀生成的速 率相等时,形成电解质的饱和溶液,达到平衡状 态,我们把这种平衡称为沉淀的溶解平衡。
2、特征: 逆、等、动、定、变
①内因: 3、影响因素
②外因:
难溶电解质的溶解平衡(4)
沉淀反应的应用
[情景1]“硬水”是指水中所溶的矿物质成分多,尤其 是Ca2+和Mg2+。硬水并不对健康造成直接危害,但 是会给生活带来好多麻烦,比如用水器具上会结水 垢、肥皂的洗涤效率减低等。硬水软化通常是将硬 水中的Ca2+、Mg2+除去。
沉淀反应的应用
②牙已膏知里Ca的5(P氟O离4)3子F的会溶与解Ca度5(P比OC4)a35O(PHO反4)应3O。H更请小用,离 子方程式表示使用含氟牙膏防止龋齿的原因
Ca5(PO4)3OH(s)5Ca2+(aq)+3PO43-(aq)+OH-(aq) Ca5(PO4)3OH+F-Ca5(PO4)3F+OH-
6.3×10-36 1.59×10-19
2×10-53 2.93×10-25
1.沉淀的生成
1)应用:生成难溶电解质的沉淀,是工业生产、 环保工程和科学研究中除杂或提纯物质的重要 方法之一。 2)方法: ①调pH

实验三沉淀反应18页PPT

实验三沉淀反应18页PPT

注意事项
加样前判断孔内的琼脂是否已取出 加样时注意不要刮破琼脂以免影响
沉淀线形状 加样时抗体、阳性血清及待测标本
应各用一支加样器,以免混淆,影 响实验结果
实验报告
双扩的实验原理、结果、结果分析
附:沉淀线形状与抗原、抗体浓度的关系
Ab
表 示 Ag 与 Ab 的 分 子 量 大 小适中、浓度适宜
二、 琼脂扩散
(1)单向琼脂扩散(单扩)
不同 稀释 度的 Ag
已知Ab
意义:用于定量测定人或动物血清中各种Ig( IgD、IgE除 外)的含量。
(2)双向琼脂扩散
未知Ag
已知Ab
三、 扩散的基础上进行电泳
优点:提高反应敏感度,缩短反应时间。 抗原抗体在电场中能定向移动,既限制
了抗原抗体向四周扩散,增加局部反应 浓度,又加快泳动速度,从而缩短反应 时 间 ( 1-2h 即 可 ) , 提 高 反 应 敏 感 度 (10倍)。
操作步骤
用蜡笔在一洁净的载玻片中央1/3上划区,并作好标记 制备琼脂板:将玻片平放于水泥平台上,用吸管吸足量
琼脂,沿划区边缘快速一次性加入,形成厚约3mm的 琼脂板,放置1-2分钟使之凝固。(***避免产生气泡、 分层及厚薄不均) 琼脂板凝固后依模板打孔 加样: 原则:每孔10ul、加满孔、不含气泡、不溢出,每孔加 样量要准确均一 微量移液器的使用:各个微量移液器与相应血清一一对 应,不混用;吸液时下压有阻力即可,放液时须压到底。 加样完置湿盒过夜后观察结果。
表示Ag的浓度大于Ab
表示Ab浓度的大于Ag

26、要使整个人生都过得舒适、愉快,这是不可能的,因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭

27、只有把抱怨环境的心情,化为上进的力量,才是成功的保证。——罗曼·罗兰

沉淀反应(免疫学检验课件)

沉淀反应(免疫学检验课件)
第十三章
沉淀反应
沉淀反应
(precipitation)
可溶性抗原(细菌培养滤液、细胞或组织的 浸出液、血清蛋白等)与相应抗体在液相中特异 结合后,形成的免疫复合物受电解质影响出现的 沉淀现象。
反应中的抗原称为沉淀原(precipitinogen) 可以是类脂、多糖或蛋白质等;抗体称为沉淀素 (precipitin)。
❖ (3)溶液中的抗原-抗体复合物的数量要足够多。如果 数量太小,溶液浊度变化太小,对光通量影响不大。
❖ (4)透射比浊是依据透射光减弱的原理来定量的,因此 只能测定抗原-抗体反应的第二阶段,检测需抗原- 抗体温育反应时间,检测时间较长。
❖ (5)检测用的抗体一般应选择亲和力较高的抗体,且在 检测中应保证抗体过量。
退。实际上在电泳的过程中受
负电荷多

电泳力 >
电渗力
抗体 负电荷少
电泳力 ﹤ 电渗力
+
步骤:
制板
3-4ml琼脂
打孔
孔间距3mm
加样
约7ul
抗体
抗原
电泳
总电流=4mA x 1cm/板宽 x N(板数) 20—30分钟
三、免疫电泳技术
免疫电泳技术的用途
是散射比浊法的改良。一般在30~120min内比 浊
用于免疫沉淀反应的缺陷
(1)因为是一次性测定光吸收值,没有考虑每一个待测 样本的吸收和散射效果,可测定结果不准确
(2)测定的仍是抗原-抗体反应的第二阶段,不适合快 速检测。
(3) 终点法存在反应本底(空白管),测定样本的含量 越低,本底比例越大,故在微量测定时,本底的干 扰是影响准确测定的重要因素。
(4)若反应时间过长,IC聚合形成沉淀则导致散射值 偏低。故需掌握最适时间比浊。

实验蛋白质的等电点测定和沉淀反应ppt课件

实验蛋白质的等电点测定和沉淀反应ppt课件

(2)向以上试管中各加酪蛋白的醋酸钠溶液1mL, 加一管,摇匀一管。此时1、2、3、4管的pH依次为 5.9、5.5、4.7、3.5。观察其混浊度。静置10分钟 后,再观察其混浊度。 最混浊(有颗粒沉淀)的一 管pH即为酪蛋白的等电点。
(二)蛋白质沉淀实验
1. 蛋白质的盐析
n 加5%卵清蛋白溶液5 mL于试管中,再加等量 饱和硫酸铵溶液,混匀后静置数分钟则析出球 蛋白的沉淀。
n 离心倾去上清液,向沉淀中加入少量的水,沉 淀是否溶解?为什么?
3.有机酸沉淀蛋白质
n 取1支试管,加入蛋白质溶液2 mL,再加1 mL5%三氯乙酸溶液,振荡试管,观察沉淀的 生成。
n 离心倾去上清液,向沉淀中加入少量水,观察
沉淀是否溶解。
4.有机溶剂沉淀蛋白质
n 取1支试管,加入2 mL蛋白质溶液,再加 入2 mL 95%乙醇。混匀,观察沉淀的生 成。
现象
解释
4.有机溶剂沉淀蛋白质
现象
解释
5.乙醇引起的变性与沉淀
管 号 操作
1
振荡混匀
加数滴盐酸
2
振荡混匀
醋酸中和
加数滴盐酸
3
振荡混匀
碳酸钠中和
加数滴盐酸
现象
解释
n 水浴锅 n 温度计 n 锥形瓶 n 100mL容量瓶 n 吸管 n 试管及试管架
3、试剂
n 0.4% 酪蛋白乙酸钠溶液: 取20mL牛奶,加入 10mL 1mol/L NaAC,用去离子水定容至100mL
n 1.00 mol/L 醋酸溶液 n 0.10 mol/L 醋酸溶液 n 0.01 mol/L 醋酸溶液
实验结果
(一)酪蛋白等电点的测定
管号 pH值 混浊度 1 2 3 4

最新实验一沉淀反应PPT课件

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免疫固定电泳(IgAκ型)
实验二 凝集反应
细菌和红细胞等颗粒性抗原,与相应抗体 在电解质存在的条件下,特异性结合,出 现肉眼可见的凝集现象,称为凝集反应 。
直接凝集反应
直接凝集反应是颗粒性抗原在电解质参与 下直接与相应抗体结合,出现凝集。反应 中的抗原可以称为凝集原(agglutinogen), 参与反应的抗体称为凝集素(agglutinin)。
对流免疫电泳结果
对流免疫电泳是将双向免疫扩散与电泳相结合 的定向加速的免疫扩散技术。
火箭电泳示意图Biblioteka 火箭免疫电泳是将单向免疫扩散与电泳相结合的 一项定量检测技术
免疫电泳基本过程
免疫电泳结果
免疫固定电泳
免疫固定电泳是区带电泳与沉淀反应相结 合的技术。首先将样本进行区带电泳,然 后将浸有抗体的滤纸贴于其上,让抗原抗 体发生沉淀反应,洗脱游离的抗体,形成 的沉淀保留在凝胶中
双扩散实验结果
免疫电泳技术
免疫电泳技术(immunoelectrophoresis technique) 是可溶性抗原和抗体在直流电场的作用下,在凝 胶内加速定向运动,彼此相遇结合,在比例合适 处形成可见的沉淀物。
免疫电泳技术包括以下几种具体方法
对流免疫电泳 火箭免疫电泳 免疫电泳 免疫固定电泳
直接Coombs试验
间接Coombs试验
间接凝集试验
间接凝集反应是将可溶性抗原(或抗体) 吸附在一种与免疫无关的惰性颗粒表面, 使其成为致敏载体,在与相应的抗体或抗 原反应,在电解质存在的条件下,载体颗 粒被动地发生凝集。
(正向)间接凝集试验
反向间接凝集试验
间接凝集抑制试验
自身红细胞凝集试验
抗球蛋白试验
抗球蛋白试验是1945年由Coombs建立的一 种抗球蛋白抗体参与的血凝试验,用于检 测抗红细胞不完全抗体,因此又称为 Coombs试验

沉淀反应(免疫学检验课件)

沉淀反应(免疫学检验课件)

一、单向琼脂扩散试验 (平板法)
抗体与待测的抗原,在两者比例合适的部位结合形 成沉淀环。环的大小与抗原的浓度成正相关。
本法稳定、简便、无需仪器设备。重复性和线性 均可信,但灵敏度稍差、耗时长、影响因素多。
单向免疫扩散试验
二、双向琼脂扩散试验 (平板法)
将抗原抗体分别加在琼脂糖凝胶不同的对应孔 中,两者在凝胶中自由扩散,在比例合适处形成白 色沉淀线。沉淀线的位置、形状以及对比关系,可 进行定性分析,如抗原或抗体的存在与否、相对含 量估计、相对分子量分析和性质分析。
方法评价:简便快速,只能定性。
二、絮状沉淀试验
原理:抗原溶液与相应抗体溶液混合,在电解质 存在的条件下,抗原与抗体结合出现可见的絮状 沉淀。由此可作为最适比测定的基本方法。
技术要点:
抗原稀释法
抗体稀释法
方阵滴定法
方法评价:简单、不需特殊设备,敏感度较低, 受抗原抗体比例影响非常明显。常用于滴定抗原 抗体反应的最适比例。
沉淀反应
前言
• 沉淀反应(precipitation )

可溶性抗原与相应抗体发生特异性结合,在适
当条件下而出现的沉淀现象。

沉淀反应分类
1.液相内沉淀试验 环状沉淀反应、絮状沉淀反应、 免疫比浊度分析。
2.凝胶内沉淀试验 单向琼脂扩散试验、双向琼脂 扩散试验。
3.凝胶免疫电泳技术 对流电泳技术、免疫电泳技 术、火箭电泳技术、免疫固定电泳技术。
三、免疫比浊度分析
根据抗原抗体在体内快速结合的原理
透射免疫比浊法
(turbidimetric immunoassay)
散射免疫比浊法
(nephelometry immunoassay)

均匀沉淀法ppt课件

均匀沉淀法ppt课件
3
由Klevin公式及过饱和度条件可知,只有当 下式成立时,晶粒才有可能出现。
E
16 3(RT
3M 2 ln S )2

r ZM RT ln S面的能量 σ——液固界面张力 M——溶质的分子质量 ρ——溶质颗粒的密度 S——溶液的过饱和度 r——晶粒半径
根据化学反应动力学理论,晶粒的生成速率为:
N
K
exp
16 3M 2 3R3T 3(ln S)2
式中K——反应速率常数
由上式可以看出,晶粒的生成速率对过饱和度S 十分敏感,S愈大,界面张力σ愈小,所需活化能愈 低,生成速率愈大。
5
另一过程是核的生长过程,即在过饱和 溶液中形成晶粒以后,溶质在晶粒上不断地 沉积,使晶粒不断长大。晶粒线性生长速率 的普遍式为:
24
均匀沉淀法
1
1.概念
均匀沉淀法是利用某一化学反应使溶液中的 构晶离子由溶液中缓慢均匀地释放出来,通过控制 溶液中沉淀剂浓度,保证溶液中的沉淀处于一种平 衡状态,从而均匀的析出。
2
2.均匀沉淀法理论基础
纳米颗粒从液相中析出并形成是由两个过程 构成的。一是核的形成过程,即溶液处于过饱和 的介稳态时,由于分子或离子的运动,某些局部 区域的分子凝聚而形成集团,这种分子集团称为 胚芽,它是不稳定的,它可能聚集更多的分子而 生长,也可能分解消失,只有当体积达到相当程 度后才能稳定而不消失,此时称为晶粒。
(NH2)2CO + 3H2O (母体)
70℃
2NH4+ + 2OH- + CO2 (沉淀剂)
11
这样在溶液内部生成沉淀剂OH-。若溶液中存在 金属离子将OH-消耗掉,当OH-被消耗后, (NH2)2CO 继续水解,产生OH- ,不致产生局部过浓现象。

沉淀反应的应用 课件

沉淀反应的应用 课件

HCO-3
H2CO3
CO2气体的生成和逸出,使CaCO3溶解平衡体系中的CO23-浓度不断减小, 平衡向沉淀溶解 的方向移动。
②分别写出用HCl溶解难溶电解质FeS、Al(OH)3、Cu(OH)2的离子方程式 FeS+2H+===Fe2++H2S↑、Al(OH)3+3H+===Al3++3H2O、 Cu(OH)2+2H+===Cu2++2H2O 。
沉淀反应的应用
一、难溶电解质的溶解平衡
1.沉淀的生成
(1)调节pH法
如加入氨水调节pH=4,可除去氯化铵中的杂质氯化铁。
反应离子方程式:
Fe3++3NH3·H2O===Fe(OH)3↓+3NH+ 4

(2)加沉淀剂法
以Na2S、H2S等作沉淀剂,使Cu2+、Hg2+等生成极难溶的硫化物CuS、
HgS等沉淀。反应离子方程式如下:
二、沉淀溶解平衡在工业除杂中的应用 例2 工业制氯化铜时,是将浓盐酸用蒸气加热至80 ℃左右,慢慢加入粗制 氧 化 铜 粉 ( 含 杂 质 氧 化 亚 铁 ) , 充 分 搅 拌 使 之 溶 解 , 反 应 如 下 : CuO + 2HCl===CuCl2+H2O,FeO+2HCl===FeCl2+H2O。已知:pH≥9.6时,Fe2+ 以Fe(OH)2的形式完全沉淀:pH≥6.4时,Cu2+以Cu(OH)2的形式完全沉淀; pH为3~4时,Fe3+以Fe(OH)3的形式完全沉淀。 (1)为除去溶液中的Fe2+,可采用的方法是( ) A.直接加碱,调整溶液pH≥9.6 B.加纯铜粉,将Fe2+还原出来 C.先将Fe2+氧化成Fe3+,再调整pH到3~4 D.通入硫化氢,使Fe2+直接沉淀
(2)工业上为除去溶液中的Fe2+,常使用NaClO,当溶液中加入NaClO后,

分步沉淀ppt课件

分步沉淀ppt课件
K为酸溶平衡常数。 对于同类硫化物,Ksp 大的,较易溶解。
8
为什么 CaCO3(s)溶于HAc, 而CaC2O4(s)不溶于 HAc?
CaCO3(s) = Ca2+ (aq) + CO32- (aq) Ksp = 4.96 × 10–9 CaCO3 + 2HAc = Ca2+ + H2CO3 + 2Ac–
c(Pb2 ) c
K
sp ,PbCrO4
c(CrO42 ) / c
2.8 1018 1.1106
2.51012
表明:PbCrO4已沉淀完全。
28
分步沉淀:向离子混合溶液中慢慢滴加入沉淀剂,
离子分先后被沉淀的现象。
分步沉淀的基本原则:
当溶液中同时存在几种离子时,离子积QC最先 达到溶度积KSPӨ的难溶电解质,首先析出沉淀。
5
大部分难溶弱酸盐易溶于酸,但并不是所有 的难溶弱酸盐都易溶于酸。 如:
MnS易溶于稀HCl, ZnS却溶于浓HCl, 而 CuS即使在最浓的HCl也不溶解。
6
K1Ө
MS(s)
包含了沉淀溶解平衡和酸碱 平衡---多重平衡。
M2+ + S2–
+ 2H3O+
K2Ө
酸溶反应
H2S

总反应:MS(s) + 2H3O+
Pb2+ (aq) + S2– (aq) = PbS(s,黑色)
总反应:PbSO4(s) + S2– (aq) = PbS(s) + SO42– (aq)
K = —c(—SO—42—–) = —c(—SO—42—–) —·c—(Pb—2+—)
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阴性:受检孔与中央孔之间无沉淀线。
作业:
完成实验报告画出你所观察到的沉
淀线,并对其进行简要说明。
二、双向琼脂扩散试验
实验材料:
1、鸡传染性法氏囊病毒标准抗原;
2、鸡传染性法氏囊病毒标准阳性血清;
3、待检血清:来自受检鸡的新鲜血清;
4、平皿(Φ6cm)、打孔器、微量加样器等;
二、双向琼脂扩散试验
5、琼脂凝胶板: 将琼脂糖1.0克、NaCl8.0克、蒸馏水100ml装 入三角烧瓶,煮沸,然后用吸管吸取7ml加入平皿 内(勿有气泡)使成约3mm厚的凝胶,待冷却凝固 后按如下图方式打孔。(注意打孔完毕要封底)
一、环状沉淀试验
2.炭疽标准抗原 3、炭疽阴性抗原(健康组织浸出液) 4.阳性、阴性炭疽沉淀素血清
5.毛细吸管
沉淀反应管(Φ 0.3-0.4cm )
一、环状沉淀试验
实 验 步 骤
设 阳 性 、 阴 性 静 用另一支毛细吸管吸取被检 对 置 材料,插入离沉淀管底近1/3 照 - 处,沿管壁缓慢加入到沉淀 素的上面,边注边提使达到 2/3高度处即可。 5 10min 用毛细吸管吸取炭疽沉淀 素,插入沉淀反应管底部, 缓慢注入到距管底的1/3 处。
结 果 观 察
一、环状沉淀试验
试验组
阳性对照组
阴性对照组
一、环状沉淀试验
结果判定:
两液面交界处出现清晰、致密
如线的白轮,是炭疽阳性。
无此现象为炭疽阴性。
二、双向琼脂扩散试验
目的:掌握双向琼脂扩散试验的原理、
操作方法及结果判定方法。
二、双向琼脂扩散试验
原理:
可溶性Ag与Ab在含有电解质的半固体(1%)琼 脂内进行自由扩散,当两者由高浓度向低浓度扩散 相遇时,如果二者相对应而且比例适当,则可在相 遇处形成白色的沉淀线,为阳性反应。另外,沉淀 带对于组成它的Ag、Ab具有特异地不可透过性,而 对其它的Ag与Ab是可透过的,所以一条沉淀带仅代 表一种AgAb系统的沉淀物。
二、双向琼脂扩散试验
实验步骤:
中间孔加标准抗原, 外周孔加被检血清及阳性 血清(如要测被检血清的 效价,外周孔可倍比稀释 后依次加入)。加样后盖 上皿盖,37℃扩散24小时, 观察结果。
二、双向琼脂扩散试验
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 结果判断:
阳性:标准对照孔之间有明显的沉淀线时, 受检孔与中央孔之间形成沉淀线并与
阳性对照沉淀线融合。
实验二 沉淀试验
一、环状沉淀试验 二、双向琼脂扩散试验
一、环状沉淀试验
目的:以炭疽环状沉淀反应为例,掌握 沉淀反应原理、操作方法及结果 的判定方法。
原理:将可溶性抗原层积于抗体之上,如
果二者相应,则可在抗原、抗体两 液接触界面形成白色的沉淀环。
一、环状沉淀试验
实验材料:
1.被检抗原(沉淀原)的制备: (1)热浸法 取可疑材料约1克,研碎,加入510mL生理盐水混合,转至试管内,煮沸30min,取出 冷却,用滤纸过滤,滤液即为被检的沉淀原。 (2)冷浸法 取疑为炭疽的皮革和兽毛,高压灭 菌后,取1 或兽毛数克浸于5-10倍的0.5%石炭酸生理 盐水中,4℃浸渍18-24小时,同上法过滤。
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