罗替戈汀微球制备及质量评定

2014~2015学年第二学期《工业药剂》实验设计罗替戈汀微球的制备及质量评定

学校：安徽中医药大学

学院：药学院

班级：12药剂2班

姓名：汪新宇

学号：12314092

2015年6月

一、研究背景

随着我国人口老龄化的发展趋势，一些老龄化类的疾病困扰着老龄人口的健康，帕金森病是其中典型的一种。帕金森病（Parkinson’s disease，PD）是一种常见的神经系统变性疾病，老年人多见，平均发病年龄为60岁左右，40岁以下起病的青年帕金森病较少见。我国65岁以上人群PD的患病率大约是1.7%。大部分帕金森病患者为散发病例，仅有不到10%的患者有家族史。帕金森病最主要的病理改变是中脑黑质多巴胺（dopamine, DA）能神经元的变性死亡，由此而引起纹状体DA含量显著性减少而致病。导致这一病理改变的确切病因目前仍不清楚，遗传因素、环境因素、年龄老化、氧化应激等均可能参与PD多巴胺能神经元的变性死亡过程，罗替戈汀对帕金森病有一定的治疗效果。

二、立题依据

1、理化性质：

Rotigotine结构式

罗替戈汀的中文化学名称：（-）-（S）-2-[N-丙基-N-[2-(2-噻吩)乙基]氨基]-5-羟基-1,2,3,4-四氢萘盐盐酸。分子式C19H26ClNOS，分子量为351.91。具有还原性，弱碱性，不稳定性，较高的脂溶性。

2、药理性质：

罗替戈汀是一种非麦角类多巴胺受体激动剂，通过激动D3/D2/D1而产生抗帕金森作用。由于具有明显的肝首过效应，口服生物利用度很低，国外上市的罗替戈汀贴片存在患者敷贴不便、个体透皮吸收差异大等问题，因而需要开发一种罗替戈汀缓控释制剂，以平衡血药浓度及提高患者依从性。本研究旨在将罗替戈汀包埋于聚乳酸-羟基乙酸共聚物中构建罗替戈汀微球长效释药系统，经肌肉注

射给药，持续缓慢释药实现持续多巴胺能刺激治疗PD。

3、罗替戈汀的微球剂

目前根据能刺激治疗理念（CDS）治疗理论已研发的产品有左旋多巴泵和罗替戈汀贴片，尽管这些方式可以有效降低由左旋多巴胺诱导的运动并发症，但是这些方式或操作困难，易产生并发症，因此需要研究开发一种临床效果好、患者依从性高的CDS治疗方式，本实验为罗替戈汀的微球剂的剂型设计。

三、罗替戈汀微球剂的处方设计

0.5%聚乙烯醇溶液7.5mL 水相

罗替戈汀0.5g

乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA) 0.1g 油相

二氯甲烷 4.0mL

说明：

①0.5%聚乙烯醇为水相中的乳化剂；

②罗替戈汀为主药，PLGA为成微球材料，二氯甲烷为油相溶剂。

四、罗替戈汀的微球制备

1、仪器和材料

仪器：高剪切均质乳化机，冷冻干燥机，质谱仪，高效液相色谱仪，激光粒度仪，扫描电子显微镜。

材料：罗替戈汀原料药，乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA），聚乙烯醇（PEG），乙腈

2、制备方法：

采用乳化—溶剂挥发法制备罗替戈汀微球：

（1）乳化配制0.5%PEG溶液7.5mL为水相，将原料药0.5g与PLGA0.1g，溶解于4.0mL二氯甲烷中配制油相，在高速剪切条件下，将油相加入到水相中，得到O/W型乳液。

（2）溶剂挥发在低速搅拌条件下挥发有机溶剂，搅拌5h。

（3）洗涤将所得混悬液过滤收集微球，并以纯化水清洗微球3~5次。

（4）干燥真空冷冻干燥机中冻干即可。

3、实验流程图:

五、罗替戈汀微球的质量评价

1、粒度及粒度分度

采用激光粒度仪测定微球粒径。取120mL0.1%聚山梨酯-20溶液置于粒度仪的样品分散装置中，调节转速为2200r/min进行搅拌。首先测定分散剂背景，然后取微球样品约100mg，倒入其中，待样品分散均匀后，测其粒径。每个样品平行测定3次，结果取平均值。

2、形态学研究

将微球样品用双面胶固定于平板上，在真空条件下进行喷金，然后扫描电子显微镜观察微球表面特征，并记录。

3、载药量及包封率测定

精密称取微球样品20mg，置于250mL容量瓶中，用10mL乙腈溶解后，以0.01mol/L盐酸溶解稀释至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，续滤液按如下HPLC色谱条件测定含量：色谱柱为Discovery C18，流动相为乙腈-0.3%磷酸水（34：66）；流速为1.0mL/min；检测波长为223nm；柱温为35℃；进样量为20μL。根据HPLC色谱图的数据处理，可由如下方法计算：

载药量=（微球中药物重量/微球总重量）×100%

包封率=（微球实际载药量/理论投料量）×100%

4、药物的释放速率

精密称取微球样品置20mL带塞离心管中，加入pH7.4磷酸盐缓冲液释放介质9mL，涡旋1min后，放入37.5℃的恒温水浴振荡器中，以50r/min的转速振荡。分别于3，6h和1，2，4，6，8，10，12，14，16，18d取出离心管，在5~8℃条件下，3600r/min离心15min。待离心结束后，吸取上清液6mL作为供试品溶液，同时补充等温的释放介质6mL，涡旋1min后放回水浴振荡器中振荡。按照HPLC条件测定供试品溶液溶度，计算累积释放量。

5、有机溶剂残留量

取二氯甲烷标准溶液和供试品溶液，分别连续进样3次，每次2μl，测得相应的峰面积,以内标法测定时，计算待测物峰面积与内标物峰面积之比，供试品溶液所得的峰面积比的平均值不得大于由标准溶液所得的峰面积比的平均值。以外标法测定时，供试品溶液所得的待测物峰的平均面积不得大于由标准溶液所得的待测物峰的平均面积。