13c. 氟谱在盐酸氟西汀的定性与定量分析探讨-2014.11

积分 44
公式法: y = 30.83 x - 2.11 44 = 30.83 x - 2.11 x = 46.11 / 30.83 = 1.50 mM
内插法: 浓度 1.5 mM
标准曲线比较讨论
(1). 三氟乙酸毛细管内标法
数据较精确!? 而且操作方便! 值得推荐! 前提: 小心筛选内径差不多的核磁管 筛选法: 加入 2 mM 盐酸氟西汀于 20 根核磁样品管 检测时, 都使用同一毛细管 (内装三氟乙酸) 检测氟谱 (约 64 次可以得到清晰谱图), 将三氟乙酸积分定为 100 得到各核磁管氟氟西汀的积分约 60 左右. 淘汰积分值太高 (>63, 管径大) 或积分值太小者 (<57).
15.0
140.93
14.113
[FXT] = 1.2 mM CF3CH2OH as internal reference
FXT
10.0
5.0
标准曲线的应用
某药片含盐酸氟西汀的量?
1. 称重该药片 (例如 100 mg), 加最少量的水溶解之 (使浓度大) (假设 100 mL). 2. 取约 0.5 mL 溶液置入核磁样品管 (经筛选, 和制标准曲线的管同源). 3. 将三氟乙酸毛细管内标置入, 检测氟谱, 调整好相位与积分. 4. 定三氟乙酸的积分为 100, 得到样品的 FXT 氟峰积分值 (例如 44). 5. 由标准曲线, 内插法 (或公式法) 可以得到相对应的浓度 (范例答案 1.5 mM) 6. 由浓度, 体积, 分子量, 可得该药品含盐酸氟西汀的量 (51.87 mg) (即 1.5 * 0.1 * 345.79) 7. 计算得知该药片含有盐酸氟西汀的相对量为: 51.87%
固定 pw= 14.5 微秒 (pw90)
定量分析: 标准曲线
两方案: 毛细管内标法/ 直接内标法 (1). 以三氟乙酸毛细管为内标 三氟乙酸加水稀释, 使其氟谱积分在合适范围, 装入毛细管中 (2). 以三氟乙醇直接加入为内标 三氟乙醇先制备成 12 mM (0.012 g 加水成 10 mL)
(2). 三氟乙醇直接内标法
应该是比较精确不受核磁管粗细的影响 但是结果反而较差. 评估原因: 测量 0.1 mL 的 TFE 溶液, 可能产生误差 或许应该避免制备小于 1 mL 的测量.
谢谢!
希望和大家多交流
sslin@pku.edu.cn; (010) 62753021, 62754051 www.chem.pku.edu.cn/sslin/SSL_Personal_Page.htm ftp://ftp.chem.pku.edu.cn/sslin 核磁论坛 : www.instrument.com.cn www.nmrbbs.cn
在高场区的信号峰: 胶囊中含的其他淀粉物质 每个胶囊: 含 20 mg 盐酸氟西汀, 但是胶囊总重 205 mg.
NMR 氟谱
课题探讨
定性分析: 某物质是否含有 "盐酸氟西汀"? (在药典定的药物 20 ppm 检测限内) 定量分析: 若含有, 其浓度 (mM) 或含量 (mg) 多少?
定性分析
脉冲 pw 对氟信号的影响
pw = 2 微秒 pw = 3.5 微秒 pw = 7.25 微秒 pw = 10 微秒 pw= 14.5 微秒 (pw90) 固定 gain = 38 (maximum)
增益 gain 对氟信号的影响
gain = 4 gain = 10 gain = 20 gain = 30 gain = 38 (maximum)
15.0 ppm (t1)
36.76
14.113
[FXT] = 1.2 mM CF3CO2H in capillary tube as reference
FXT
10.0
5.0
定量分析: 标准曲线
(2). 三氟乙醇直接内标法 实验步骤: 将不同浓度 (0.4 ~ 1.6 mM) 的盐酸氟西汀水溶液 各 1 mL 置于小试管. 然后在这些小试管加入 0.1 mL (以移液器配合移液管) 的三氟乙醇溶液 (12 mM). 检测氟谱, 得到清晰的氟谱后 (较稀的溶液检测超过 500 次), 定积分. 将内标 "三氟乙醇" 的氟积分定为 100, 得到各谱图氟西汀的氟峰积分值. 作图: 氟峰积分 vs 盐酸氟西汀浓度 结果:
逐渐加 H2O 稀释. 配样安排如下所示:
定量分析: 标准曲线
(1). 三氟乙酸毛细管内标法 实验步骤: 选用管径类似的核磁管 (之前做过定积分实验), 分别装入 0.4 ~ 2.0 mM 盐酸氟西汀水溶液. 检测氟谱, 得到清晰的氟谱后 (较稀的溶液检测超过 500 次), 定积分. 将内标 "三氟乙酸" 的氟积分定为 100, 得到其他谱图氟西汀的氟峰积分值. 作图: 氟峰积分 vs 盐酸氟西汀浓度 结果:
配样:
定性分析: 氟谱检测
检测 0.05 mM 盐酸氟西汀水溶液 (相当于含 17.3 ppm) 氟谱检测结果: 14.12 ppm 氟信号峰, spiking test 证实
1. 需要检测 500 次 (nt= 500) 才能看到清晰可辨的信号峰 2. 此时参数设定: gain =30, pw = pw90 = 14.5 微秒 如果 pw 太小 (例如 pw = 3.5), 检测 500 次观测不到氟信号峰 如果 gain 太小 (例如 gain = 4), 检测 500 次观测不到氟信号峰
盐酸氟西汀 药性
CF3 O CH CH2 CH2 NH CH3 HCl
治疗:
抑郁症 (百忧解由来), 强迫症, 神经性贪食症
副作用: 神经系统: 头晕, 失眠 消化系统: 恶心, 呕吐 呼吸系统: 咽炎, 呼吸困难 泌尿系统: 尿频 近期英国统计发现: 长期服用者自杀比率高
NMR 氢谱
说明: 氢谱基本合理
中仪标化
核磁共振培训
核磁共振氟谱在盐酸氟西汀 的定性与定量分析
林崇熙 2014.11
北京大学化学学院
基本理化数据
CF3 O CH CH2 CH2 NH CH3 HCl
盐酸氟西汀 百忧解 盐酸氟苯氧丙胺
N-甲基-3-(对三氟甲基苯氧基)-3-苯基丙胺盐酸
Fluoxetine Hydrochloride
Biblioteka Baidu
定量分析: 配样
某物质含有多少 "盐酸氟西汀"? 探讨策略: 制作标准曲线 浓度 (盐酸氟西汀) 对氟谱积分 (有参考内标) 作图 未知样品含量由内插/外插法得到 配样: 将盐酸氟西汀胶囊 (含 34.6 mg 盐酸氟西汀) (或胶囊重 403 mg) 溶于 50 mL H2O, 制备出 2 mM 作为最浓的母液 (stock solution)
某物质是否含有 "盐酸氟西汀"? (在药典定的药物 20 ppm 检测限内) 探讨策略: 氢谱/ 氟谱是否合理 在极稀溶液中 (含量 < 20 ppm), 是否能观测到氟信号峰. 将盐酸氟西汀胶囊 (含 34.6 mg 盐酸氟西汀) (或胶囊重 403 mg) 溶于 50 mL H2O (相当于 2 mM) 以此为 stock solution, 再逐渐稀释, 获得不同浓度的溶液 最后得到 0.05 mM 溶液 (相当于 17.3 ppm) (17 mg/L).
分子式: C17H18F3NO HCl 分子量: 345.79 溶解度 (H2O): 4 mg/ mL Solubility (capsule): quite soluble in the following solvents H2O, CHCl3, acetone, DMSO, CH3CN, CH3OH, Diethyl ether 其他: 自药店购买得到, 28 胶囊, 276 元 胶囊重 233 mg, 含盐酸氟西汀 20 mg Outlook: white solid CAS: [59333-67-4] mp: 158-159 C