糖类脂肪蛋白质的鉴定(课堂PPT)

将花生种子经过3-4小时的浸泡使其变软， 有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否 则切片时易碎裂，切不成薄片。
3.试剂配制
苏丹Ⅲ溶液：将0.1g苏丹Ⅲ干粉溶于 100mL体积分数为95%的酒精溶液中，待全部 溶解后即成。
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4.实验步骤
（1）切片制作
①去掉花生种皮
②用左手的三个手指夹住花生的一片
子叶，使花生子叶高于手指之上（为 什么？）。右手持刀片，将子叶削去
R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O
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2.实验材料 做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖
的含量、生物组织有无色素是影响实验结 果及其观察的最重要因素。
因此要选用可溶性还原糖含量高、 白色或近于白色的植物组织，其中以 苹果、梨最好，也可用白萝卜替代。
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3.试剂配制 甲液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液）
（3）镜检鉴定
在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的 最薄处（最好只有1-2层细胞），移至视野 的中心→换用高倍镜观察，调焦至最清晰。 可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒，这就是 脂肪滴（油滴）。若发现观察物外围也有许 多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。
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脂肪检测实验的实验结果
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若用物理方法如何鉴定脂肪的存在?
烘烤种子后,把子叶放在白纸上用手指 挤压,白纸上会出现透明的油迹,说明子 叶含有脂肪。
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（三）生物组织中蛋白质的鉴定
1 实验原理
在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲 （H2NOC-NH-CONH2）能与Cu 2+作用， 形成紫色的络合物，这个反应叫做双 缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩 脲结构相似的肽键，因此，蛋白质都可 与双缩脲试剂发生颜色反应。
实验：生物组织中可溶性还原糖、
脂肪、蛋白质的鉴定
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（一）生物组织中可溶性还原糖的鉴定
1.实验原理
当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液 与质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合 后，立即生成淡蓝色的Cu(OH)2悬浊液。 Cu(OH)2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性 还原糖共热，能够生成砖红色的Cu2O沉淀。 因此，利用该反应，可证明样液中含可溶 性还原糖。
加3-4滴 双缩脲ຫໍສະໝຸດ 剂B液16蛋白质检测实验的实验结果
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注意：在鉴定蛋白质时要分别滴加两种试 剂，并且硫酸铜只能加3—4滴，不能过量 如过量，CuSO4在碱性溶液中生成大量蓝色 Cu（OH）2沉淀，遮盖了紫色。
鉴定蛋清组织中存在蛋白质时，要充分稀释。
如稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后，会粘固在 试管内壁上，使反应不易彻底，并且试管中也不易 冲洗干净。
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5.
如稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后， 会粘固在试管内壁上，使反应不易彻底， 并且试管中也不易冲洗干净。
6.若用物理方法如何鉴定脂肪的存在? 烘烤种子后,把子叶放在白纸上用手 指挤压,白纸上会出现透明的油迹,说 明子叶含有脂肪
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一层，形成平面。
③刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作，
自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意 要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连
续动作，切下一些薄片。
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（2）染色
用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的 中央→滴苏丹Ⅲ溶液2-3滴于花生子叶薄片上→21min后，吸去染液→滴50%的酒精洗去浮色→吸去 多余酒精→再滴1-2滴蒸馏水→盖上盖玻片，制成 临时装片。
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2.实验材料 做蛋白质的鉴定实验，一般选用蛋白质
含量较高的大豆(可用豆浆替代）或鸡蛋清。 3.试剂配制
A液（0.1g/mL的氢氧化钠溶液） 双缩脲试剂
B液（0.01g/mL的硫酸铜溶液）
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4.实验步骤：
（1）制备生物组织样液（教师制备） （2）鉴定
先加 2mL组 织样液
再加 2mL双 缩脲试 剂A液
斐林试剂 乙液（0.05g/mL的硫酸铜溶液）
甲液乙液等量混合，现用现配， 切不可分开滴加，或者久置后 才用。
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4.实验步骤 （1）制备组织样液（教师制备） （2）鉴定样液
先在试管中加入 2mL组织样液
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注意观察整 个实验过程 中，溶液颜 色的变 化！！！
再加入 2mL刚 配制的 斐林试 剂
水浴煮沸 2分钟
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还原糖检测实验的实验结果
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（二）生物组织中脂肪的鉴定 1.实验原理
苏丹Ⅲ是可以对脂肪染色的试剂， 因此，当含有大量油滴的植物细胞用苏 丹Ⅲ染色后，在显微镜下可以看到细胞 内橘黄色的颗粒。
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2.实验材料
做脂肪的鉴定实验时，所用材料一要脂肪含 量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生 种子符合该实验的要求。