苯酚与苯酚钠紫外吸收曲线的制作及其含量的测定
紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤
紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，可用于测定无机和有机物质的浓度。
在本实验中，我们将利用紫外可见分光光度法测定苯酚的含量。
下面是实验步骤。
实验原理苯酚在紫外和可见光区都有吸收峰，根据它的吸收峰特征可以测定其含量。
在本实验中，我们将利用苯酚在240 nm处的吸收峰进行测定。
实验仪器、试剂以及玻璃仪器仪器：紫外可见分光光度计试剂：苯酚、甲醇玻璃仪器：比色皿、移液管、醇灯、玻璃棒、烧杯等。
实验步骤步骤1：制备苯酚样品溶液将1 g的苯酚粉末称到50 mL的烧杯中，加入约30 mL甲醇并混合均匀，然后用甲醇稀释到50 mL。
最后用玻璃棒搅拌至完全溶解。
步骤2：制备苯酚标准曲线将制备好的苯酚样品溶液定容到50 mL，在紫外可见分光光度计中，设置检测波长为240 nm，然后将苯酚标准溶液分别放入比色皿中，取0、0.2、0.4、0.6、0.8 mL苯酚标准溶液，然后用甲醇稀释成10 mL。
最后，利用紫外可见分光光度计测量各个标准溶液的吸光度。
步骤3：测定未知样品将待测样品取5 mL，加甲醇稀释成50 mL，然后放到紫外可见分光光度计中测量样品的吸光度。
根据标准曲线可以计算出样品中苯酚的含量。
注意事项1.制备苯酚样品溶液的时候，要充分混合均匀，防止苯酚沉淀。
2.操作过程中，不可碰触紫外光管等易损部件。
3.实验前，应进行紫外可见分光光度计的预热操作，以保证测试准确性。
实验结果及分析根据实验测定的吸光度可以绘制出苯酚标准曲线，通过计算未知样品的吸光度，即可求出其苯酚含量。
对测量的结果进行分析，可以了解到此方法的准确性和可行性。
总结本实验介绍了紫外可见分光光度法测定苯酚含量的实验步骤。
通过本实验的学习，不仅能够掌握该分析方法的原理、仪器和操作要点，还能够提高实验技巧，从而为今后的实验研究奠定基础。
紫外测苯酚实验报告
一、实验目的1. 熟悉紫外分光光度法的基本原理和操作方法。
2. 掌握苯酚在紫外光区域的吸收特性。
3. 通过紫外分光光度法测定水样中苯酚的含量。
二、实验原理紫外分光光度法是一种利用物质在紫外光区域吸收特定波长的光而进行定量分析的方法。
苯酚分子中含有共轭双键，在紫外光区域具有特定的吸收峰，通过测定苯酚溶液在特定波长下的吸光度，可以计算出苯酚的浓度。
实验原理如下：1. 根据比尔定律，吸光度A与溶液的浓度c和光程L成正比，即A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数。
2. 通过绘制苯酚标准溶液的吸光度-浓度曲线，得到苯酚的摩尔吸光系数。
3. 测定水样中苯酚的吸光度，根据吸光度-浓度曲线计算苯酚的浓度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外可见分光光度计、石英比色皿、移液管、容量瓶、烧杯、玻璃棒等。
2. 试剂：苯酚标准溶液（浓度为 1.00mg/mL）、蒸馏水、无水碳酸钠、氢氧化钠、硫酸、盐酸等。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）取6个50mL容量瓶，分别加入0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mL苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度线。
（2）将标准溶液置于石英比色皿中，在270-295nm波长范围内，每隔10nm测定一次吸光度。
（3）以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线。
2. 样品测定（1）取适量水样于50mL容量瓶中，加入适量无水碳酸钠和氢氧化钠，使水样pH 值调节至碱性。
（2）加入适量硫酸，使水样pH值调节至酸性。
（3）加入适量盐酸，使水样pH值调节至中性。
（4）按照标准曲线绘制步骤，测定水样中苯酚的吸光度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光度-浓度曲线，得到苯酚的摩尔吸光系数为ε = 1.85×10^4 L·mol^-1·cm^-1。
2. 样品测定测定水样中苯酚的吸光度为0.576，根据吸光度-浓度曲线计算得到苯酚浓度为0.012mg/L。
实验一紫外－可见分光光度法测定水中苯酚的含量（3学时）
实验一紫外－可见分光光度法测定水中苯酚的含量（3学时）一、实验目的1. 学习使用UV757CRT紫外可见分光光度计。
2.掌握紫外－可见分光光度法测定水中微量苯酚含量的方法。
二、实验原理紫外－可见吸收光谱属分子吸收光谱法，当分子吸收到外来的辐射能量（光区范围在200-800 nm）时，分子外层价电子发生能级跃迁，进而产生吸收光谱。
紫外光谱具有灵敏度高、准确度好、仪器价格低廉、操作简便等许多优点，主要应用于化合物的定量分析。
其定量分析的主要依据为朗伯－比尔定律A = εbc式中，A---吸光度，ε--化合物的摩尔消光系数（L/(mol cm)），b—比色皿厚度（cm），c—溶液浓度（mol/L）。
根据上述公式，吸光度与溶液浓度呈线性关系，如已知某物质的摩尔吸光系数，就可以根据吸光度值得出待测溶液的摩尔浓度。
三、实验仪器、试剂四、实验步骤1. 打开电源，开机进行自检。
2. 配制苯酚标准溶液a. 精确称取苯酚0.3000 g，放入1 L容量瓶中，加蒸馏水摇匀，定容至刻度；b. 分别精确量取上述标准液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml，分别定容至50 ml，按序编号。
3. 绘制苯酚的标准吸收曲线取上述3(4)号标准液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，在190-400 nm波长范围内进行扫描，绘制苯酚的标准吸收曲线，并选取272 nm 附近最大吸收波长为本实验的入射波长。
4. 绘制吸光度-浓度工作曲线分别取上述配制的5组溶液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，以上述选定的入射波长为测定波长，测定其吸光度值，并绘制成吸光度-浓度曲线，计算得到回归方程。
5. 待测溶液浓度的测定取待测苯酚溶液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，以上述选定的入射波长为测定波长，测定其吸光度值，代入回归方程中，计算待测溶液的克浓度和摩尔浓度(mol/L)；并通过朗伯-比尔公式计算苯酚的摩尔吸光系数。
(整理)紫外光度计测苯酚含量方案2
用紫外可见分光光度计测废水中的苯酚含量项目实施方案学校：绵阳职业技术学院指导老师：石建屏组长：高晓宇组员：刘世樑、汤效飞刘彦汝、齐丽君胡楚卿、邓素容目录一、仪器工作原理二、仪器结构1、光源2、分光系统3、吸收池4、检测显示系统三、仪器使用方法四、工作曲线法测苯酚含量（一）溶液的制备1、容器的洗涤2、溶液的配制（二）样品的测定1、绘制吸收光谱曲线，确定最大吸收波长2、绘制苯酚溶液工作曲线，计算未知样品浓度3、实验完毕五、结果记录及实验数据处理一、仪器工作原理含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特征吸收。
物质结构不同对紫外及可见光的吸收具有选择性。
其中，最大吸收波长λ、摩尔吸收系数ε及吸收曲线的形状不同是进行物质定性分析的依据。
由于在λmax处吸光度A有最大值，在此波长下A随浓度的变化最为明显，方法的灵敏度最大，故在紫外分光光度计上作苯酚水溶液（试液）的吸收光谱曲线，再由曲线上找出λmax，据此对物质进行定量分析。
用紫外分光光度计进行定量分析时，若被分析物质浓度太低或太高，可使透光率的读数扩展10倍或缩小10倍，有利于低浓度或高浓度的分析，其方法原理是依据朗伯-比耳定律：A=εbc。
二、仪器组成紫外分光光度计由光源、分光系统、吸收池、检测显示系统等四大部分组成，其组成框图见下图。
1、光源光源的作用是提供符合要求的入射光。
分光光度计对光源的要求是：在使用波长范围内提供连续的光谱，光强应足够大，有良好的稳定性，使用寿命长。
紫外光光源多为气体放电光源，如氢，氘，氙放电灯等。
其中应用最多的是氢气灯及同位素氘灯，其使用波长范围为185～357nm。
为了保证发光强度稳定，也要用稳压电源供电。
氘灯的光谱分布与氢灯相同，但光强比同功率氢灯大3～5倍，寿命比氢灯长。
2、分光系统分光系统是紫外可见分光光度计的核心部分。
它主要由入射狭缝、准直镜、光栅、物镜和出射狭缝组成。
入射狭缝起着限制杂散光进入的作用, 它一般处在准直镜的焦点上；准直镜将从入射狭缝射进来的复合光变成平行光；光栅用来分光。
紫外分光光度法测定苯酚的含量
紫外分光光度法测定苯酚的含量紫外分光光度法是一种常用的分析测定方法，可用于元素或分子组分浓度、光谱特性等多种分析测定。
这种方法是通过电子翻译和科学研究，发现物质吸收合能分子作用时，它和傅立叶调制光耦合，形成以如下算式为基础的内电子吸收系数反应理论：A=ελlog.C，且ε为内电子吸收系数，λ为辐射波长，C为测定物质的浓度。
因此，紫外分光光度法在电子吸收系数和被测物质浓度变动范围内，都可以准确、快速地测定物质含量。
紫外分光光度法测定苯酚的含量，是指在实验室使用紫外分光光度仪测定苯酚物质的量值。
具体实验步骤是：首先将一定体积的样品放入实验皿中，加稀释溶液，将稀释后的样本放入紫外分光分析仪的测量池中，在紫外分光分析仪中设定所需的参数，然后将玻璃管放入测量池内，按试验运行程序测量，再将取得的实验数据进行分析，从而得出苯酚的含量。
由于紫外分光光度法结果受到紫外分光光度仪本身的影响，因此苯酚含量测定之前需要进行仪器检定，以确保实验准确性。
在检定当中，有一定的质控指标，我们需要严格按照标准进行，以保证实验的结果的可靠性。
此外，紫外分光光度测定苯酚的含量的实验能够受到测定介质的影响。
因此，在实验中，在选择测定介质时，要根据不同测定物质的特性，并考虑苯酚与测定介质的溶解度来选择适当的测定介质。
另外，紫外分光光度测定苯酚含量时，还需要考虑苯酚本身的稳定性以及周围环境温湿度。
稳定性考虑如：放入测量池中的样品要限定容量，且时间也不宜太久，以保证试验结果的一致性；环境温湿度要求室温在25℃左右，湿度控制在60%以下，否则，有一定的影响实验结果的准确性。
紫外分光光度法测定苯酚的含量既快速、精确，而且容易操作，也无需添加化学药品，因此被广泛应用于微量苯酚测定和相应含量控制，具有一定的重要价值。
紫外吸收光谱法测定苯酚含量
紫外吸收光谱法测定苯酚含量一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计的结构、性能及使用方法2、熟悉定性、定量测定的方法二、实验原理紫外分光光度法，又称紫外吸收光谱法，它是研究分子吸收200.0~800.0nm波长范围内的吸收光谱。
紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。
通过测定分子对紫外光的吸收，可以对大量的无机物和有机物进行定性和定量测定。
苯酚已经被列入有机污染物的黑名单。
但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。
如果其含量超标，就会产生很大的毒害作用。
苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。
对苯酚溶液进行扫描时，在270nm处有较强的吸收峰。
定性分析时，可在相同的条件下，对标准样品和未知样品进行波长扫描，通过比较未知样品和标准样品的光谱图对未知样进行鉴定。
在没有标准样品的情况下，可根据标准谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。
定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值，并绘制标准曲线。
再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。
三、仪器与试剂1．紫外可见分光光度计2．容量瓶（1000ml、250ml、50ml）3．吸量管（5ml、10ml）4．苯酚（AR）于5支50ml的容量瓶中，用吸量管分别加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。
四、最大吸收波长的选择在标准系列溶液中任取一种，以水为参比，分别在波长200~300nm之间以10为间隔测定其吸光度，在吸光度最大值附近以间隔2nm为单位测定，直至找到最大吸收波长。
五、数据记录及结果分析(1)、标准表(2)、苯酚的吸收曲线图（根据上表任意组标准溶液数据作图）(3)、标准曲线图C phenol （mg/L）标准曲线方程：Y =0 .055+ 0.1515 * X相关系数r=0.9979六、苯酚浓度的测定在相同情况下，直接测定未知样品的吸光度。
紫外吸收光谱法测定水中的苯酚
大学学生实验报告开课学院及实验室：化学化工学院室2013年月日学院化学化工学院年级、专业、班姓名学号实验课程名称分析化学实验成绩实验项目名称紫外吸收光谱法测定水中的苯酚指导老师一、实验目的1．学会使用UV1100型紫外分光光度计。
2．学会并掌握紫外吸收光谱曲线的绘制和测量波长的选择以及标准曲线的绘制。
二、实验原理通过紫外分光光度计测定苯酚的紫外吸收光谱图，以确定苯酚的λmax。
在仪器设置的λmax下，用1cm石英比色皿，以蒸馏水作空白对照，测定苯酚标准浓度系列溶液的吸光度值，根据A=εbc，绘制苯酚水溶液的标准工作曲线。
在相同条件下，测得待测苯酚溶液的吸光度值，以确定试样中苯酚的含量。
三、仪器与试剂1．仪器UV1100型紫外分光光度计（附1cm石英皿1套），25mL容量瓶7个，10mL吸量管1支，10mL 移液管1支，洗耳球，烧杯，洗瓶，镜头纸。
2．试剂⑴1g·L-1苯酚标准溶液⑵100mg·L-1苯酚标准溶液⑶苯酚水样。
四、实验步骤1．绘制吸收光谱曲线和选择测量波长⑴用吸量管取5.00mL苯酚标准溶液（100mg·L-1）1份，于25mL容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
⑵以蒸馏水为参比溶液，在UV1100型紫外分光光度计上，选择波长扫描，波长范围设置225～300nm，获得苯酚的吸收曲线，求得苯酚最大吸收波长λmax。
2．绘制标准曲线用吸量管分别吸取1.50、3.00、4.50、6.00、7.50mL苯酚标准溶液（100mg·L-1），分别放入25mL 容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度线定容后，混匀。
此苯酚标准溶液系列对应的浓度分别为6.0、12.0、18.0、24.0和30.0 mg·L-1。
同样以蒸馏水为参比溶液，在苯酚最大吸收波长λmax处，按浓度从低到高依次测定对应的苯酚标准溶液系列的吸光度值，并记录。
以苯酚标准溶液的含量（mg·L-1）为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。
紫外吸收光谱法测定苯酚含量
紫外吸收光谱法测定苯酚含量一、实验目的1、了解紫外可见分光光度计的结构、性能与使用方法2、熟悉定性、定量测定的方法二、实验原理紫外分光光度法，又称紫外吸收光谱法，它是研究分子吸收200.0~800.0nm 波长范围内的吸收光谱。
紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。
通过测定分子对紫外光的吸收，可以对大量的无机物和有机物进行定性和定量测定。
苯酚已经被列入有机污染物的黑名单。
但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。
如果其含量超标，就会产生很大的毒害作用。
苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。
对苯酚溶液进行扫描时，在270nm 处有较强的吸收峰。
定性分析时，可在相同的条件下，对标准样品和未知样品进行波长扫描，通过比较未知样品和标准样品的光谱图对未知样进行鉴定。
在没有标准样品的情况下，可根据标准谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。
定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值，并绘制标准曲线。
再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。
三、仪器与试剂1．紫外可见分光光度计2．容量瓶（1000ml、250ml、50ml）3．吸量管（5ml、10ml）4．苯酚（AR）于5支50ml的容量瓶中，用吸量管分别加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。
四、最大吸收波长的选择在标准系列溶液中任取一种，以水为参比，分别在波长200~300nm之间以10为间隔测定其吸光度，在吸光度最大值附近以间隔2nm为单位测定，直至找到最大吸收波长。
五、数据记录与结果分析(1)、标准表(2)、苯酚的吸收曲线图（根据上表任意组标准溶液数据作图）(3)、标准曲线图C phenol （mg/L）标准曲线方程：Y =0 .055+ 0.1515 * X相关系数r=0.9979六、苯酚浓度的测定在相同情况下，直接测定未知样品的吸光度。
苯酚的紫外光谱的绘制及定量测定
苯酚的紫外光谱的绘制及定量测定
苯酚的紫外光谱的绘制及定量测定可以通过以下步骤进行：
绘制苯酚的紫外光谱：
（1）准备苯酚样品：将苯酚溶解在适当的溶剂中，例如甲醇或乙腈，制备成适当浓度的溶液。
（2）准备紫外光谱仪：将紫外光谱仪预热并校准，确保仪器处于良好状态。
（3）设置参数：设置扫描范围、扫描速度、扫描间隔等参数，这些参数将影响光谱的精度和分辨率。
（4）开始扫描：将制备好的苯酚溶液倒入样品池中，开始扫描紫外光谱。
（5）记录数据：在扫描过程中，记录每个波长下的吸光度值。
定量测定苯酚：
（1）选择合适的工作曲线：根据苯酚的浓度范围，选择合适的工作曲线，例如线性工作曲线或非线性工作曲线。
（2）绘制工作曲线：使用不同浓度的苯酚溶液，按照相同的方法绘制紫外光谱，并记录每个波长下的吸光度值。
将这些数据点绘制在图上，拟合一条直线或曲线作为工作曲线。
（3）测定未知样品：将未知样品的苯酚溶液按照相同的方法绘制紫外光谱，并记录每个波长下的吸光度值。
（4）定量分析：根据工作曲线的斜率和截距，计算未知样品中苯酚的浓度。
需要注意的是，在进行定量分析时，需要保证实验条件的一致性，包括溶剂、温度、pH值等。
此外，还需要注意紫外光谱仪的校准和仪器的维护保养，以保证实验结果的准确性和可靠性。
3.紫外分光光度法测定苯酚
实验四紫外分光光度法测定苯酚1.目的要求⒈学会使用UV-2102PC型紫外可见分光光度计。
⒉掌握紫外光谱法定量分析方法与原理。
2．基本原理苯酚在220-380nm处具有特征吸收，因此其含量可用紫外分光光度计作测定，不需进行显色反应，方法简便，快速，且准确度高。
3. 仪器与试剂⒈仪器：UV-2102PC型紫外可见分光光度计； 10mL吸量管1只； 50mL容量瓶7个； 100mL容量瓶5个。
2.试剂：0.250g/L苯酚标准溶液准确称取25.0mg分析苯酚，溶于适量水中，全部转移至100mL 容量瓶中，用纯水稀释至刻度，摇匀。
4. 实验步骤⒈绘制吸收光谱图和选择测量波长用吸量管取4mL0.250g/L苯酚标准溶液于50ml容量瓶中，用纯水稀释至刻度，摇匀。
此溶液在UV-2102PC型紫外可见分光光度计上，用1cm石英液槽，以纯水为参比溶液，于波长220-380nm 范围内，分辨精度1nm，绘制吸收光谱图，并选择测量波长λmax.⒉绘制标准曲线取5只50mL容量瓶，由吸量管分别加入2.00、4.00、6.00、8.00、10.0mL0.250g/L苯酚标准溶液，以纯水稀释至刻度。
摇匀。
得一系列苯酚标准溶液。
用1cm石英液槽，以纯水为参比溶液，在选定波长处测上列各标准溶液的吸光度。
绘制标准曲线。
⒊试样溶液的测定用移液管取适量试样溶液于50mL容量瓶中,按上述步骤2配制溶液并测定吸光度。
平行测定二份。
（黑体字部分实验报告中请按自己实际操作撰写）5．数据处理⒈根据实验所苯酚吸收光谱曲线，运用理论知识根据吸收谱带的位置形状及吸收强度（摩尔吸光系数），对所做谱图进行解析，判断苯酚紫外光谱的吸收带与跃迁类型。
2绘制标准曲线，并由曲线求算试样溶液中苯酚量（mg/L）.6．问题讨论本实验测定时能否用玻璃液槽代替石英液槽盛放溶液，为什么？紫外光谱实验参考文献紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。
紫外吸收光谱法测定水中的苯酚
大学学生实验报告开课学院及实验室：化学化工学院室2013年月日学院化学化工学院年级、专业、班姓名学号实验课程名称分析化学实验成绩实验项目名称紫外吸收光谱法测定水中的苯酚指导老师一、实验目的1．学会使用UV1100型紫外分光光度计。
2．学会并掌握紫外吸收光谱曲线的绘制和测量波长的选择以及标准曲线的绘制。
二、实验原理通过紫外分光光度计测定苯酚的紫外吸收光谱图，以确定苯酚的λmax。
在仪器设置的λmax下，用1cm石英比色皿，以蒸馏水作空白对照，测定苯酚标准浓度系列溶液的吸光度值，根据A=εbc，绘制苯酚水溶液的标准工作曲线。
在相同条件下，测得待测苯酚溶液的吸光度值，以确定试样中苯酚的含量。
三、仪器与试剂1．仪器UV1100型紫外分光光度计（附1cm石英皿1套），25mL容量瓶7个，10mL吸量管1支，10mL 移液管1支，洗耳球，烧杯，洗瓶，镜头纸。
2．试剂⑴1g·L-1苯酚标准溶液⑵100mg·L-1苯酚标准溶液⑶苯酚水样。
四、实验步骤1．绘制吸收光谱曲线和选择测量波长⑴用吸量管取5.00mL苯酚标准溶液（100mg·L-1）1份，于25mL容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
⑵以蒸馏水为参比溶液，在UV1100型紫外分光光度计上，选择波长扫描，波长范围设置225～300nm，获得苯酚的吸收曲线，求得苯酚最大吸收波长λmax。
2．绘制标准曲线用吸量管分别吸取1.50、3.00、4.50、6.00、7.50mL苯酚标准溶液（100mg·L-1），分别放入25mL 容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度线定容后，混匀。
此苯酚标准溶液系列对应的浓度分别为6.0、12.0、18.0、24.0和30.0 mg·L-1。
同样以蒸馏水为参比溶液，在苯酚最大吸收波长λmax处，按浓度从低到高依次测定对应的苯酚标准溶液系列的吸光度值，并记录。
以苯酚标准溶液的含量（mg·L-1）为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。
紫外可见苯酚实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握紫外可见分光光度法的基本原理和应用。
2. 学习紫外可见分光光度计的使用方法。
3. 了解苯酚在紫外可见光区的吸收特性，并测定苯酚溶液的浓度。
二、实验原理苯酚是一种有机化合物，分子式为C6H5OH。
苯酚在紫外可见光区具有特征吸收，其最大吸收波长为270-295nm。
紫外可见分光光度法是利用苯酚在紫外可见光区吸收特定波长的光而进行定量分析的方法。
根据朗伯-比尔定律，苯酚溶液的吸光度与其浓度成正比，即A = εcl，其中A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，c为苯酚溶液的浓度，l为光程。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：- 紫外可见分光光度计- 10mL移液管- 50mL容量瓶- 100mL容量瓶- 烧杯- 玻璃棒- 酸式滴定管- pH计- 电子天平2. 试剂：- 苯酚标准溶液（0.1mg/mL）- 硫酸- 氢氧化钠- 水为二次蒸馏水四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：1.1 准备标准溶液：准确移取0.1mg/mL苯酚标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL于50mL容量瓶中，用二次蒸馏水定容至刻度，摇匀。
1.2 吸取各标准溶液2.0mL于10mL容量瓶中，用二次蒸馏水定容至刻度，摇匀。
1.3 在紫外可见分光光度计上，选择波长为270nm，以二次蒸馏水为参比溶液，测定各标准溶液的吸光度。
1.4 以苯酚浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：2.1 准确移取待测苯酚溶液2.0mL于10mL容量瓶中，用二次蒸馏水定容至刻度，摇匀。
2.2 在紫外可见分光光度计上，选择波长为270nm，以二次蒸馏水为参比溶液，测定样品溶液的吸光度。
2.3 根据标准曲线，计算样品溶液中苯酚的浓度。
3. 结果分析：3.1 计算样品溶液中苯酚的浓度，并与理论值进行比较。
3.2 分析实验误差，讨论实验过程中可能存在的问题。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制：通过绘制标准曲线，可以得出苯酚溶液的浓度与吸光度之间的关系。
紫外分光光度法测定水中苯酚的含量
大 学 通 用 化 学 实 验 技 术
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紫 外 分 光 光 度 法 测 定 水 中 苯 酚 的 含 量
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92.6 参考答案
简述紫外分光光度法的特点及适用范围。 （1） 简述紫外分光光度法的特点及适用范围。 紫外分光光度法，又称紫外吸收光谱法， 答：紫外分光光度法，又称紫外吸收光谱法，它主 要研究分子在190 ～ nm波长范围内的吸收光谱 波长范围内的吸收光谱。 要研究分子在 190～ 400 nm 波长范围内的吸收光谱 。 其 190 吸收光谱主要产生于分子中价电子或外层电子在电子能 级间的跃迁。通过测定分子对紫外光的吸收， 级间的跃迁。通过测定分子对紫外光的吸收，可以对大 量的无机物和有机物进行定性和定量分析。 量的无机物和有机物进行定性和定量分析。 其主要应用范围是: 其主要应用范围是 : 对具有芳香环或共轭双键结构 的有机化合物，进行定性和定量分析。 的有机化合物，进行定性和定量分析。
实验92 实验92 紫外分光光度法测定水中 苯酚的含量
92. 92.1 实验目的
(1) 学习紫外分光光度法的基本原理及定量分析方 法。 掌握紫外(2) 掌握紫外-可见分光光谱仪的基本结构和一般操 作。
大 学 通 用 化 学 实 验 技 术
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紫 外 分 光 光 度 法 测 定 水 中 苯 酚 的 含 量
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92.2 实验原理
在紫外分光光度分析中， 常用波长为200 200～ nm的近 在紫外分光光度分析中 ， 常用波长为 200 ～ 400 nm 的近 紫外光。当有机物分子受到紫外光辐射时， 紫外光。当有机物分子受到紫外光辐射时，分子中的价电子 或外层电子能吸收紫外光而发生能级间的跃迁， 或外层电子能吸收紫外光而发生能级间的跃迁，其吸收峰的 位置与有机物分子的结构有关， 其吸收强度遵循朗伯位置与有机物分子的结构有关 ， 其吸收强度遵循朗伯 - 比尔 定律，与有机物的浓度有关。 定律，与有机物的浓度有关。 苯酚是一种重要的化工原料，也是一种可致癌的有机污 苯酚是一种重要的化工原料， 染物。苯酚主要用于合成酚醛树脂，在某些药品、 染物。苯酚主要用于合成酚醛树脂，在某些药品、添加剂和 增塑剂中也有应用。其水溶液在紫外光区197 nm、 nm和 增塑剂中也有应用。其水溶液在紫外光区197 nm、210 nm和 nm附近有吸收峰 其中在270 nm处的吸收峰较强 附近有吸收峰， 处的吸收峰较强。 270 nm附近有吸收峰，其中在270 nm处的吸收峰较强。 因玻璃比色皿在紫外区有吸收， 因玻璃比色皿在紫外区有吸收，故要用不吸收紫外光的 石英比色皿。 石英比色皿。
苯酚与苯酚钠紫外吸收曲线的制作及其含量的测定
荧光光谱
2. 分子光谱与原子光谱有许多不同之处。
原子光谱是由一条条谱线组成的，谱线的数目较少，间隔较大。而分子 光谱，谱线的数目很多，且较密集，呈带状光谱。这是由于分子的能级分布 比较复杂。对原子而言，只有电子相对于原子核的运动。
二. 分子吸收光谱
物质分子内部三种运动形式： （1）电子相对于原子核的运动； （2）原子核在其平衡位置附近的相对振动； （3）分子本身绕其重心的转动。
2.吸光质点形式不变
亚甲蓝阳离子水溶液的吸收光谱
a. 6.36×10-6 mol/L b. 1.27×10-4 mol/L c. 5.97×10-4 mol/L
单体 max= 660 nm 二聚体 max= 610 nm
离解、络合、缔合会破坏线性关系
应控制条件(酸度、浓度、介质等)
3.稀溶液
浓度增大，分子之间作用增强，折射率发生偏移。所测吸光度为0.15-1.0或
E
h
hc
近紫外：200 ~ 400 nm；近红外：750 ~ 2500 nm 可见光： 400 ~ 750 nm，人眼所能感觉到的波长范围
光谱学基础知识
2. 物质的基本性质
原子或分子中的电子，总是处在某一种运动状态之中。 每一种状态具有一定的能量，对应一定的能级。 电子如果吸收了外来辐射的能量，就可以一个较低能量的能级跃迁到另一 个能量较高的能级。
环境仪器分析实验之紫外光谱法
苯酚与苯酚钠紫外吸收曲线的制作及其含量的测定
王春燕 二〇一九年四月
一、实验目的
1. 了解紫外-可见分光光度计的基本原理，并学会使用紫外-可 见分光光度计；
2. 分别使用UV6100型和TU-1810型紫外-可见分光光度计制作紫 外吸收曲线，并进行比较；
紫外吸收光谱法鉴定苯酚及其含量的测定
紫外吸收光谱法鉴定苯酚及其含量的测定紫外吸收光谱法鉴定苯酚及其含量的测定实验目的:掌握紫外光谱法进行物质定性分析的基本原理掌握紫外光谱法进行定量分析的基本原理学习UV1700型紫外可见分光光度计的使用方法。
实验原理:定性分析的原理:含有苯环和共轭双键的有机化合物在紫外区有特征吸收。
物质结构不同对紫外及可见光的吸收曲线不同。
最大吸收波长λmax，最大摩尔吸收系数εmax及可见光的吸收曲线的形状不同是进行物质定性分析的依据。
定量分析的原理:根据物质对紫外—可见光吸收的吸光度与物质含量符合朗伯—比尔定律：A=εbC仪器与实验试剂:1.仪器UV1700型紫外可见分光光度计1cm石英吸收池2个25mL容量瓶10个10m移液管一支100mL烧杯一个洗耳球1个2.试剂苯酚标准溶液100mg/L 苯酚待测液实验步骤:一）定性分析1. 分析溶液的制备取苯酚标准溶液1.0mL，放入25mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，则得到100mg/L苯酚标准溶液。
2. 鉴定在UV1700型紫外可见分光光度计上，用1cm石英吸收池，蒸馏水作参比溶液，在200－330nm 波长范围扫描，绘制苯酚的吸收曲线。
由曲线上找出λmax，并求出εmax与其所对应的吸收度的比值，与苯酚紫外吸收光谱数据表对比，鉴定苯酚。
二)定量分析1. 标准曲线的制作取5个25mL的容量瓶，分别加入2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL 的苯酚（100 mg/L），用去离子水到刻度，摇匀。
用1cm石英比色管，去离子水作参比，在选定的最大波长下，分别测定各溶液的吸光度，以吸光度对浓度作图，作出工作曲线。
2. 定量测定废水中的苯酚含量准确移取未知液10mL于25mL比色管中，用去离子水稀释到刻度，摇匀。
在同样条件下测定其吸光度，根据吸光度在工作曲线上查出苯酚的待测液的浓度，并计算出未知液中苯酚的含量。
数据及结果分析:定性结果分析:从吸收曲线上可以看出,该物质210nm-270nm有强吸收，表示含有共轭双键。
紫外含量测定实验报告
一、实验目的1. 掌握紫外分光光度法的基本原理和应用。
2. 学习紫外-可见分光光度计的使用方法。
3. 通过实验，测定苯酚在水样中的含量。
二、实验原理紫外分光光度法是一种基于物质分子对紫外或可见光的选择性吸收进行定性和定量分析的方法。
苯酚作为一种具有共轭双键的有机化合物，在紫外光区（200-400nm）有较强的吸收特性。
通过测定苯酚在特定波长下的吸光度，可以计算出其浓度。
实验原理依据朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law），即 A = εlc，其中A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，l为光程，c为溶液浓度。
通过制备一系列已知浓度的苯酚标准溶液，绘制标准曲线，可以计算出待测水样中苯酚的浓度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：- 紫外-可见分光光度计- 10mL容量瓶- 移液管- 洗瓶- 恒温水浴锅- 电子天平- 磁力搅拌器2. 试剂：- 苯酚标准溶液（100mg/L）- 水样- 硫酸- 乙腈- 无水乙醇四、实验步骤1. 准备标准溶液：- 称取一定量的苯酚标准品，用无水乙醇溶解，配制成100mg/L的标准溶液。
- 取10mL容量瓶，分别加入0.0、0.5、1.0、1.5、2.0mL的标准溶液，用无水乙醇定容至10mL，配制成0.0、5.0、10.0、15.0、20.0mg/L的标准系列。
2. 标准曲线绘制：- 使用紫外-可见分光光度计，以无水乙醇为参比溶液，在265nm波长下，测定标准系列溶液的吸光度。
- 以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
3. 水样测定：- 取一定量的水样，用硫酸酸化，用无水乙醇提取苯酚。
- 将提取液转移至10mL容量瓶中，用无水乙醇定容至10mL。
- 以无水乙醇为参比溶液，在265nm波长下，测定提取液的吸光度。
4. 计算水样中苯酚含量：- 根据标准曲线，查得待测水样中苯酚的浓度。
- 计算水样中苯酚的浓度，并记录实验结果。
五、实验结果与讨论1. 实验结果：- 通过实验，测定水样中苯酚的浓度为15.2mg/L。
03 苯酚紫外光谱测绘及定量测定.doc
实验苯酚紫外吸收光谱的绘制及定量测定一、实验目的1.了解紫外可见分光光度法的基本原理。
2.掌握紫外可见分光光度计的基本操作。
3.紫外可见吸收光谱的绘制和定量测定方法二、实验原理分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。
它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。
可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。
根据Lambert-Beer定律：A=εbc，（A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度）可以对溶液进行定量分析。
在紫外可见吸收分光光度分析中,必须注意溶液的pH值的影响。
因为溶液的pH值不但有可能影响被测物吸光强度,甚至还可能影响被测物的峰位形状和位置。
酚类化合物就有这一现象，例如苯酚在溶液中存在着如下电离平衡：苯酚在紫外区有三个吸收峰,在酸性或中性溶液中, λmax为196.3nm,210.4nm和269.8nm;在碱性溶液中λmax位移至207.1nm,234.8nm和286.9nm. 图3-3为0.021g/L的苯酚分别在0.010mol/L 盐酸溶液与氢氧化钠溶液中的紫外吸收光谱.。
由图知在盐酸溶液与氢氧化钠溶液中，苯酚的紫外吸收光谱有很大差别，所以在用紫外可见吸收分光光度分析苯酚时应加缓冲溶液，本实验是通过加氢氧化钠强碱溶液来控制控制溶液的pH。
图3-2苯酚的紫外吸收光谱曲线A: 苯酚在0.010mol/L氢氧化钠溶液中的紫外吸收光谱曲线B: 苯酚在0.010mol/L盐酸溶液中的紫外吸收光谱三、仪器和试剂1.仪器：（1）紫外可见分光光度计（2）1.0cm石英比色池2.试剂：（1）苯酚标准溶液:0.5g/L（2）0.25mol/L NaOH四、实验操作1.准确移取0.5g/L的苯酚标准溶液5.00ml于50 ml容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀.分别准确移取上述苯酚溶液0.00, 5.00,10.00,15.00ml于25ml 比色管中,另准确移取合适体积的未知溶液(视未知溶液中苯酚溶液的浓度而定)2份于25ml比色管中，上述各比色管中分别各加1ml 0.25mol/L的NaOH溶液,用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
紫外可见分光光度法测定水中苯酚含量
紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量紫外-可见分光光度法是一种常用的分析方法，可用于测定水中苯酚含量。
以下是该方法的实验步骤和实验结果的解释。
一、实验原理紫外-可见分光光度法是一种基于分子吸收光谱的定量分析方法。
当光通过样品溶液时，样品溶液中的物质会吸收特定波长的光，导致透射光强度降低。
吸收光谱的强度和波长之间的关系可用于确定物质的浓度。
苯酚是一种常见的污染物，在水中含量较高时会对环境和人类健康产生负面影响。
因此，测定水中苯酚含量对于环境保护和水质监测具有重要意义。
在紫外-可见光谱范围内，苯酚具有明显的吸收峰，可用于其定量分析。
二、实验步骤1.试剂与仪器实验所需试剂包括苯酚标准品、纯水、显色剂（如溴酸钾、溴化钾等）。
实验所需仪器包括紫外-可见分光光度计、比色皿（1cm）、容量瓶（25mL）、吸管（1mL、5mL）等。
2.样品准备将待测水样进行过滤，以去除悬浮物和杂质。
取5mL滤后的水样于25mL容量瓶中，加入适量显色剂。
3.标准曲线制作分别取0.0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL苯酚标准品于25mL容量瓶中，加入适量显色剂。
用纯水定容至刻度，摇匀。
在紫外-可见分光光度计上分别测量各容量瓶中溶液的吸光度，绘制标准曲线。
4.样品测定在紫外-可见分光光度计上测量待测样品溶液的吸光度。
根据标准曲线可得到待测样品中苯酚的浓度。
三、实验结果解释通过对比标准曲线和样品溶液的吸光度，可以确定样品中苯酚的浓度。
根据测定的苯酚浓度，可以进一步计算水中苯酚的含量。
具体计算方法如下：水中苯酚含量（mg/L）= 样品溶液中苯酚浓度（mg/L）× 水样体积（L）通过实验结果解释可知，紫外-可见分光光度法是一种可靠的测定水中苯酚含量的方法。
该方法具有操作简便、灵敏度高、准确度高等优点，适用于水中苯酚含量的监测和分析。
在实际应用中，需要注意控制实验条件，如显色剂种类和浓度、反应温度和时间等，以提高测定结果的准确性和可靠性。
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当发生电子能级跃迁时，不可避免地发生振动能级和转动能级之间的跃迁， 所得到的一系列谱线彼此间波长间隔很小，连在一起呈带状，称带状光谱。
二. 分子吸收光谱
1. 转动能级的能量差：小于0.05 eV，跃迁产生吸收光谱位于远红 外区，远红外光谱或分子转动光谱 2. 振动能级的能量差约为：0.05～1 eV，跃迁产生的吸收光谱位 于红外区，红外光谱或分子振动光谱 3. 电子能级的能量差较大1 ～ 10 eV，电子跃迁产生的吸收光谱 在紫外－可见光区，紫外－可见光谱或分子的电子光谱
4. 比较在不同溶剂下吸收曲线的变化。
二、紫外光谱法基本原理
UV——分子外层价电子能级的跃迁（电子能谱），可用于结构鉴定和 定量分析；电子跃迁的同时，伴随着振动转动能级的跃迁；带状光谱。
二、紫外光谱法基本原理
1.物质对光的选择性吸收
物质对可见光中某些特定波长的光选择性吸收，使得他们呈现出特征的颜色。
二、紫外光谱法基本原理
1.物质的吸收曲线及定性分析
物质分子的能级是千差万别的，内部各种能级的间隔也不相同，所以物质对光 的选择性吸收可反映分子内部结构的差异，可以根据吸收曲线的形状和最大吸 收波长的位置，对物质定性分析。
A
B
max (A) max (B)
二、紫外光谱法基本原理
2.物质的吸收曲线及定量分析
2. 制作苯酚标准曲线
分别吸取苯酚标准溶液0mL，1.0mL，2.0mL，3.0mL，4.0mL，5.0mL于6只25mL容 量瓶中，用蒸馏水定容，最终浓度为0ug/mL， 0.5ug/mL， 1.0ug/mL， 1.5ug/mL， 2.0ug/mL， 2.5ug/mL，以蒸馏水为参比，测定最大吸收波长λmax处的吸光度。
透光率为10%-70%，物质浓度的测量误差最小。
二、紫外光谱法基本原理
4.吸收曲线的特点：
①同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为 最大吸收波长λmax。 ②不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而对于不同物 质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。
③吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。
原子的激发态不稳定，它只能以极短的时间处于这种状态，约10-8-10-5s后， 便要恢复原状，即跃迁回基态，而把多余的能量用发光的方式放射出来。同时， 发生其他能级间的跃迁，放出其他波长的光。将这些不同波长的光记录下来， 便得到一条条谱线，这就是原子发射光谱。
一. 原子吸收光谱
原子吸收光谱跃迁前后两个能级的能量差遵守严格的量子规则
3. 吸收光谱的种类
原子吸收光谱和分子吸收光谱 紫外吸收光谱和红外吸收光谱
一. 原子吸收光谱
在无外来作用时，原子中各电子都尽可能的处于最低能级，能量最低(基态)。 当有外来因素激发时，它的一个电子或几个电子就可能跃迁到较高能级上 去(激发态)。
原子处于基态 光、电等
激发态
当一连续频率的辐射照射单原子时，它将吸收不同波长的光而从基态跃迁 到较高的能级，将这些不同波长的光用谱板记录下来便得到一条条谱线，这就是 原子吸收光谱。
2. 测定标样最大吸收波长处的吸光度，以标液浓度为横坐标以吸 光度为纵坐标制作标准曲线，并得到标准曲线方程。
3. 从标准曲线上找出测得的未知样的吸光度所对应的横坐标浓度， 即为未知样的浓度。
12:40 13:40 14:40 15:40
小组长请留下电话
3. 测定未知样品中苯酚的吸光度
以蒸馏水为参比，测定未知样最大吸收波长λmax处的吸光度。
六、数据处理
1. 用紫外-可见分光光度计测量扫描得到苯酚在H2SO4和NaOH溶液中 的吸收光谱图，标出两条曲线R带的最大吸收峰位置，并指出从 苯酚（H2SO4溶液）到苯酚钠（NaOH溶液中）是蓝移还是红移？
环境仪器分析实验之紫外光谱法
苯酚与苯酚钠紫外吸收曲线的制作及其含量的测定
王春燕 二〇一九年四月
一、实验目的
1. 了解紫外-可见分光光度计的基本原理，并学会使用紫外-可 见分光光度计；
2. 分别使用UV6100型和TU-1810型紫外-可见分光光度计制作紫 外吸收曲线，并进行比较；
3. 熟练运用UV6100型和TU-1810型紫外-可见分光光度计制作苯 酚吸收的标准曲线，并确定苯酚的含量；
荧光光谱
2. 分子光谱与原子光谱有许多不同之处。
原子光谱是由一条条谱线组成的，谱线的数目较少，间隔较大。而分子 光谱，谱线的数目很多，且较密集，呈带状光谱。这是由于分子的能级分布 比较复杂。对原子而言，只有电子相对于原子核的运动。
二. 分子吸收光谱
物质分子内部三种运动形式： （1）电子相对于原子核的运动； （2）原子核在其平衡位置附近的相对振动； （3）分子本身绕其重心的转动。
（一）仪器型号
UV6100型和TU-1810型紫外-可见分光光度计
（二）实验内容
苯酚与苯酚钠紫外吸收曲线的制作及其含量的测定
（三） 实验试剂
H2SO4水溶液：0.05mol/L NaOH水溶液：0.1mol/L； 苯酚储备液：准确称取0.2500g苯酚，用二次蒸馏水溶解，移入 100mL容量瓶中定容；然后吸取10mL于另一只100mL容量瓶中，稀 释至100mL，此苯酚标液浓度0.250mg/mL;
E
E2
E1
h
h
c
一般为1～10eV，吸收或发射的能量都是h的整数倍，故各条 谱线的波长(或频率)差别较大，呈线状分开，所以原子光谱是不 连续性的线状光谱。
二. 分子吸收光谱
1. 分子光谱产生的机理与原子光谱很相似
M + h → M *
基态
激发态
E1 （△E） E2
M +热
M + 荧光或磷 光
实验安排：
实验一 苯酚和苯酚钠紫外吸收曲线的制作及其含量的测定
（紫外吸收光谱法）
实验二 聚苯乙烯的红外光谱测定与谱图分析
（红外吸收光谱法）
实验三 火焰原子吸收法铜含量的测定
（原子吸收光谱法）
实验四 高效液相色谱仪的结构认识及基本操作
（高效液相色谱法）
光谱学基础知识
吸收光谱学研究的课题是光与物质相互作用过程的有关问题。 1. 光的基本性质
有四种跃迁所需能量ΔΕ大小顺序为：n→π* < π→π* < n→σ* < σ→σ*
R带杂原子的孤对电子发生n→π* 跃迁，吸收相对较弱；
K带是二个或二个以上π键共轭时，π电子向π * 反键轨道跃迁；
E带包括E1和E2带，是苯环上三个双键共轭体系中的π电子向π*反键轨道跃迁；
B带苯环π→π* 跃迁和苯环振动的重叠引起，吸收相对较弱
单光束
单色器
单色器 单 色 器
吸收池 吸收池
吸收池
检测器
双光束
检测器
双波长
四、实验原理
有机化合物的紫外—可见吸收光谱
在有机化合物分子中有形成单键的σ电子、有形成双键的π电子、有未成键 的孤对n电子。
HC O
s
Hp
n
s*
p*
E K
R
E,B
n
p
分子轨道理论：成键轨道—反键轨道。
s
当外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态向激发态(反键轨道)跃迁。主要
2.吸光质点形式不变
亚甲蓝阳离子水溶液的吸收光谱
a. 6.36×10-6 mol/L b. 1.27×10-4 mol/L c. 5.97×10-4 mol/L
单体 max= 660 nm 二聚体 max= 610 nm
离解、络合、缔合会破坏线性关系
应控制条件(酸度、浓度、介质等)
3.稀溶液
浓度增大，分子之间作用增强，折射率发生偏移。所测吸光度为0.15-1.0或
依据：朗伯-比耳定律
吸光度： A = bc 透光度：-lgT = bc
当液层厚度为定值时，吸光度A与 样品浓度呈正比例关系。通常测定
最大吸收波长λmax处的吸光度，
建立标准曲线，标定未知样浓度。
二、紫外光谱法基本原理
3.物质的吸收曲线及定量分析
朗伯-比尔定律的适用条件：
1.单色光 应选用max处或肩峰处测定，灵敏度高
E
h
hc
近紫外：200 ~ 400 nm；近红外：750 ~ 2500 nm 可见光： 400 ~ 750 nm，人眼所能感觉到的波长范围
光谱学基础知识
2. 物质的基本性质
原子或分子中的电子，总是处在某一种运动状态之中。 每一种状态具有一定的能量，对应一定的能级。 电子如果吸收了外来辐射的能量，就可以一个较低能量的能级跃迁到另一 个能量较高的能级。
五、实验内容及步骤
（四）实验步骤
1. 吸收曲线制作
准 确 称 取 苯 酚 水 溶 液 5.00 mL 于 2 只 100 mL 容 量 瓶 中 ， 分 别 用 0.05 mol/L H2SO4,0.1mol/L NaOH稀释至刻度，并以0.05 mol/L H2SO4,0.1mol/L NaOH 作空白， 在210-400nm，以5nm为间隔，以UV6100和TU1810型紫外-可见分光光度计测定溶液的 吸光度，找出R吸收并找出R吸收带最大吸收波长λmax。
④不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度 A 有差异，在λmax处吸 光度A 的差异最大。此特性可作作为物质定量分析的依据。
⑤在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是 定量分析中选择入射光波长的重要依据。
三、仪器结构与原理
紫外-可见分光光度计的结构示意图
单色器
吸收池