遗传学实验ppt
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《遗传学实验》课件
基因敲除与敲入技术概述
基因敲除与敲入技术是一种通过特定手段将目的基因从细 胞或个体中剔除或插入特定位置的技术。
基因敲除与敲入的方法
基因敲除的方法包括同源重组法和CRISPR-Cas9技术等, 而基因敲入则通常采用逆转录病毒载体和锌指核酸酶等技 术。
基因敲除与敲入技术的应用
基因敲除与敲入技术在疾病模型建立、药物筛选、基因治 疗等领域有着广泛的应用。
基因编辑技术
基因编辑技术概述
基因编辑技术是一种能够对生物体基因组进行精确修改和调控的技 术。
基因编辑的方法
目前最常用的基因编辑技术是CRISPR-Cas9系统,它能够通过引导 RNA精确地定位到目标基因并对其进行切割和修复。
基因编辑技术的应用
基因编辑技术在遗传病治疗、农作物改良、动物模型建立等领域有着 广泛的应用前景,为人类带来了革命性的突破。
遗传学实验的历史与发展
历史
遗传学实验的历史可以追溯到19世纪中叶,随着孟德尔遗传定律的发现,遗传 学实验逐渐发展起来。随着科技的进步,遗传学实验的方法和技术不断更新和 完善。
发展
现代遗传学实验更加注重分子遗传学和基因组学的研究,利用基因编辑、基因 合成等技术手段,深入探究基因与表型之间的关系,为人类认识生命本质和解 决实际问题提供了有力支持。
果蝇遗传实验
果蝇遗传实验简介
果蝇是遗传学研究的常用材料, 其染色体数目少,繁殖快,易于
观察。
实验过程
通过果蝇的杂交实验,研究者可以 观察到明显的遗传现象,例如伴性 遗传、突变等。
实验结果
果蝇遗传实验为现代遗传学的发展 提供了重要的实验证据,帮助科学 家更好地理解基因与表型之间的关 系。
04
现代遗传学实验
大学课程遗传学实验实验四 孚尔根(Feulgen)核染色课件
1N HCl 60℃
酸解使DNA醛基暴露
醛基与Schiff试剂发生显色反应
孚尔根核染色法是Feulgen和Rossonbek于1924 年提出的鉴定细胞中DNA的组织化学方法。其 优点是制片清洁、染色体清晰、组织软化好, 易于压片。但对小型染色体(如玉米、水稻) 效果较差。在切片、涂片上研究核和染色体时, 能减少细胞质着色对观察的影响。在细胞学研 究中普遍采用
材料:大蒜根尖、洋葱根尖
1mol/L 盐酸(常温和60℃) Schiff试剂 45%醋酸或亮绿
实验步骤
预处理的目的及方法
目的:改变细胞质粘度,破坏和抑制纺锤体 的形成,使染色体适度缩短和分散。
方法: 0.04-0.2%秋水仙素溶液2-4小时。 对二氯苯饱和溶液3-5小时。 0.002M (或0.03%)8-羟基喹啉1.5-2小时以
黑暗条件下染色。 要保证细胞呈单层,使染色体在一个平面上,
根尖的切片尽量要薄,压片必须用力适度,压 片的实验台面要平坦。
实验作业
绘制你所观察到的图象,并说明是有丝 分裂的哪一个时期,并注明放大倍数。
前期、中期、后期、末期
思考题
为什么要严格掌握DNA的水解条件? 为什么实验材料从60℃盐酸中倒出后,
实验原理
有丝分裂是体细胞分裂的主要方式,在植物根尖或茎尖的 分生组织中可清晰观察。在有丝分裂时,细胞核与细胞质有很 大的变化,但以细胞核内染色体的变化最为明显,而且是有规 律地进行。各种生物染色体在数目上和形态上是相对恒定的, 并随科属种的不同而具有一定的特征。大蒜体细胞中有8对共 16条染色体,在有丝分裂过程中,每个染色体能复制一份, 然后分配到两个子细胞中,所以两个子细胞与母细胞所含的染 色体在数目、形态和性质上都是相同的。在细胞遗传学研究中, 人们常常需要了解某一物种的染色体数目,而最有效的方法就 是观察细胞有丝分裂的中期,这样能得到较为准确的结果。
遗传学设计性实验ppt课件
注意事项
麻醉剂的使用:乙醚有毒, 挥发性强,使用时, 要注意随时盖好瓶盖,防止乙醚挥发。
麻醉深度:麻醉果蝇时,要防止麻醉过度,影 响继代培养。
做好标记:新转移的培养瓶上需贴好标签,注 明继代培养日期及实验者姓名。
实验原理
遗传基本规律:分离规律;自由组合规 律;伴性遗传规律;连锁与互换规律。
1、一对相对性状:长翅(雌)×残翅(雄);残 翅(雌)×长翅(雄)
2、两对相对性状:灰残(雌)×檀黑长(雄); 檀黑长(雌)×灰残(雄)
3、伴性遗传:红(雌)×白(雄);白(雌)×红( 雄)
实验操作流程
1、根据设计分取突变体 2、果蝇饲养
3、收集处女蝇。雌蝇羽化后8~12h不交配。亲本和F1雌蝇都必需是 处女蝇。 4、按组合收集雌雄蝇杂交,贴上标签(组合名称、杂交日期、小组 名称) 5、 6~7d后,幼虫出现后,放去成蝇(记日期),种蝇要放干净。
诱变方法
一般采用r圃,以60CO源为中心放置处理材 料,以材料与60CO源中心距离和照射时间来控制 辐射量。这种r圃对于诱变育种的应用不是十分合 适的,一般设置小的60CO室进行处理。可处理植 株、植株的局部、处理种子或花粉。处理花粉的 优点是产生突变不至于形成嵌合体,但花粉的存 活时间短暂不易进行处理。但花粉离体培养结果 表明,玉米新鲜花粉可在常温下储存在液体石蜡 油中2.5h,对花粉活力没有影响。
实验前要写好设计方案,涉及原理、实验流程、预期结果、 参考文献等。
实验过程中:
1、处女蝇的选择要准确。
2、麻醉深度适当;
3、若F1性状混杂,暂停;
4、培养基不够用,自行配制,注意配方和数量;
5、安排人员值班,每人2d,早、晚各1h。钥匙不得转 手。同时督促各组做好开放实验登记和清洁卫生。
遗传学实验
洋葱、大蒜的鳞茎,玉米、蚕豆的种子等。本 实验1 植物细胞有丝分裂及染色体行为的观察
实验1 植物细胞有丝分裂及染色体行为的观察
实验选用大蒜。 实验3 染色体组型分析
压片时应注意的问题有哪些?
实验4 果蝇唾腺染色体的观察
实验用品: 实验5 果蝇的形态观察
☺ 果蝇的自由组合杂交试验 2 画出在显微镜下看到的有丝分裂各时期的图像;
遗传学实验
☺ 植物染色体制片及有丝分裂观察 ☺ 大葱小孢子母细胞的减数分裂观察 ☺ 果蝇的形态观察及杂交试验 ☺ 果蝇的单因子杂交试验 ☺ 果蝇的自由组合杂交试验 ☺ 果蝇的伴性遗传杂交试验 ☺ 果蝇的三点测交试验 ☺ 两对非等位基因的相互作用研究 ☺ 染色体组型分析 ☺ 果蝇的唾腺染色体制片及观察 ☺ 植物原生质体的分离 ☺ 植物多倍体的诱发及鉴定
丝分裂及染色体行为的观察 ☺ 植物原生质体的分离
第三部分 研究性实验
7 压片:盖上盖玻片,在酒精灯上烤片。 ☺ 植物原生质体的分离 2 预处理:将剪取的新鲜材料于0. 实验4 果蝇唾腺染色体的观察 ☺ 植物原生质体的分离 3 固定:将经过预处理和未经预处理的材料冲洗后转移至卡诺氏固定液中,室温下处理3~24小时。 药品:蒸馏水、卡诺氏固定液、45%醋酸、秋水仙素、改良苯酚品红染液等。 实验3 染色体组型分析 第三部分 研究性实验
2 预处理:将剪取的新鲜材料于0.1%秋水仙素 溶液中室温下处理3~4小时。
3 固定:将经过预处理和未经预处理的材料冲 洗后转移至卡诺氏固定液中,室温下处理3~24小时。
4 解离:将冲洗后的根尖放入1mol/L的盐酸中, 室温下处理10~15min。
5 软化:将解离好的根尖冲洗后,放入45%醋 酸中软化10min左右。
请注意比较经过预处理和未经预处理的材料有何不同?
遗传学实验——设计果蝇杂交实验PPT
表型
长翅灰体 长翅黑檀 短翅灰体 短翅黑檀
总计
观察数 理论数 偏差值 X2值
五、实验结果记录表格
(3)伴性遗传: P: ♀26 红 × ♂6 白
实验日期:
世代
♀红数目 ♂红数目 ♂白数目
总计
比例
F1
F2
X2检验:(F2代)
表型
பைடு நூலகம்
♀红
♂红
♂白
总计
观察数
理论数
偏差值
X2值
六、预期实验结果
六、预期实验结果
四、实验步骤(技术路线)
各实验具体步骤 三.伴性遗传: 1.选择处女蝇 2.杂交:6号雄果蝇和26号雌果蝇杂交,25℃恒温培养。 3. 弃除亲本:待F1幼虫出现即可弃除亲本。 4.观察F1:观察F1眼色、性别。 5.F1互交:在新的培养瓶中,放入3-5对F1果蝇并培养。 6.弃除F1:待F2幼虫出现即可放掉并处死F1果蝇。 7.观察F2:观察F2眼色、性别后处死,连续观察并统计数 据。 8.数据处理及统计分析:分析实验结果与预期理论的符合 程度。
世代
黑檀数目
F1
F2
实验日期:
灰体数目 总计
X2检验:(F2代) 表型 观察数 理论数 偏差值 X2值
黑檀
灰体
比例
总计
五、实验结果记录表格
(2)自由组合定律:
P: ♀26 黑檀长翅 × ♂6 灰体短翅
实验日期:
世代 F1
长翅灰体 长翅黑檀数 短翅灰体数 短翅黑檀数 总计 比例
数目
目
目
目
F2
X2检验:(F2代)
二、实验原理
二、实验原理
(一)果蝇(Drosophila melanogaster)属于昆虫纲,双翅目。果蝇形体小, 生长迅速,繁殖率高,饲养简便,染色体数目少,突变性状多,是遗传学 研究的好材料。
遗传学课件遗传学实验-人类染色体核型分析
[3] Smith J, Johnson M, Levine A. Karyotyping in clinical practice.
American Journal of Human Genetics, 2017, 91(6): 987-998.
附录:相关图表和数据
图1
人类染色体核型图谱
表1
染色体异常类型及临床表现
障碍等问题。
倒位
染色体倒位是指染色体局部发 生倒转的现象,可能导致胎儿 智力障碍、生长发育迟缓等问 题。
缺失
染色体缺失是指染色体部分缺 失的现象,可能导致胎儿智力 障碍、生长发育迟缓等问题。
重复
染色体重复是指染色体部分重 复的现象,可能导致胎儿智力 障碍、生长发育迟缓等问题。
染色体异常的遗传机制
染色体异常的遗传机制主要包括基因突变和染色体畸变。基因突变是指在基因序 列中发生碱基对的增添、缺失或替换等现象,可能导致胎儿发育畸形、智力障碍 等问题。
实验材料准备
准备好染色体标本、显微镜、染色剂、载玻片、 盖玻片、显微操作器等实验器材和试剂。
实验环境设置
确保实验室环境整洁、无尘,并保持适宜的温度 和湿度。
实验人员要求
实验人员应具备基本的遗传学知识和实验技能, 熟悉实验操作流程和注意事项。
实验操作流程
01
02
03
04
标本制备
采用适当的细胞培养和固定方 法,制备染色体标本。
遗传学课件-人类染色体核型 分析
目录
• 人类染色体介绍 • 染色体核型分析技术 • 人类染色体核型异常 • 染色体核型异常与疾病 • 实验操作和注意事项 • 参考文献和附录
01
人类染色体介绍
染色体的组成和功能
最新医学遗传学实验:人类染色体常规核型分析教学讲义ppt
清点实验物品:
每组剪刀、镊子、离心管、吸管各4, 止血钳2
秋水仙素处理培养的血细胞
用止血钳去掉培养瓶(瓶中为已培养了约70小时 的血细胞)瓶盖表面的铁皮
打开瓶盖,每瓶加入秋水仙素2~3滴 盖上瓶盖,轻轻摇匀,作好标记 37℃继续培养约2小时
教学内容
人类外周血淋巴细胞染色体标本的制备 人类染色体常规核型分析
了解人外周血淋巴细胞常规染色体标本 制备的原理与方法
实验用品
实验器械:冰箱、恒温培养箱、恒温水 浴箱、离心机、天平、吹风机、15ml离 心管、吹打管、试管架、染色架、废液 缸。
实验试剂:RPMIl640完全培养基( 含胎 牛血清、PHA、抗生素等) 肝素、秋水仙素、0.045M KCl、甲醇、 冰醋酸、 Giemsa染液
每组剪刀镊子离心管吸管各4止血钳2秋水仙素处理培养的血细胞用止血钳去掉培养瓶瓶中为已培养了约70小时的血细胞瓶盖表面的铁皮打开瓶盖每瓶加入秋水仙素23滴盖上瓶盖轻轻摇匀作好标记37继续培养约2小时人类外周血淋巴细胞染色体标本的制备人类染色体常规核型分析人类染色体常规核型分析核型
医学遗传学实验:人类染色体常 规核型分析
注意:
1.用镊子取冰片,千万不要用手摸冰片的表面, 以免染色体不能附着。
2.滴片时要有一定高度,且玻片要稍倾斜。
3.冰片一定要清洁湿冷,易于染色体的分散。
染色
1∶10 Giemsa染液(pH 6.8)染色10min。 流水冲洗,吹风机吹干,镜检。
1 采血、接种、细胞培养 8 终止培养前2小时,加入秋水仙素
褥垫层的设计
褥垫层的设计目的 (1)保护桩土共同承担荷载; (2)调整桩土荷载应力分担比; (3)减少基础底面的应力集中;
(4)调整桩土水平荷载的分担。
专题07 遗传的基本规律(课件)-2023年高考生物二轮复习(全国通用)
镶嵌显 性
超显性
总结
等位基因的不同成员分别影 响生物体的一部分,在杂合 体中它们所决定的性状同时
在生物的不同部位表现
不同异色瓢虫的鞘翅底色上呈现不同的黑色斑纹。黑缘型鞘翅
(SASA)的前缘呈黑色,均色型鞘翅(SESE)的后缘呈黑色。
基因型为SASA与SESE的个体杂交,F1表现为鞘翅的前缘和后缘 均呈黑色的镶嵌型。在F1随机交配产生的F2中,黑缘型、镶嵌
检验是细胞核遗传还是细胞质遗传
【例题1】 (2021•河南模拟)某二倍体植物的花色有四种,由4个复等位基因控制, 它们的显隐生关系是A1>A2>A3>A44个基因的频率相等,下列叙述错误的是( A ) A.这4个复等位基因分别位于两对同源染色体上 B.群体中与该性状相关的基因型有10种,表现型有4种 C.在自然种群中,与该性状相关的杂合子所占的比例可能为3/4 D.孟德尔遗传规律能够解释4个复等位基因控制的遗传现象
特别提醒 ①孟德尔发现遗传定律的时代“基因”这一名词还未提出来, 用“遗传因子”表示。 ②两大定律发现的时间比达尔文自然选择学说晚,所以达尔文对 遗传变异的本质不清楚。 ③F1配子的种类是指雌、雄配子分别有两种:D和d,D和d的比例为1∶1, 而不是雌、雄配子的比例为 1∶1。生物一般雄配子的数量远远多于雌配子的数量,如豌豆。
不同显性类型
不完全 显性
概念
具有相对性状的两个纯合亲 本杂交,F1表现为双亲性状
的中间类型
遗传现象
紫茉莉开红花的纯系(RR)与开白花的纯系(rr)杂交,F1植 株(Rr)开粉红花,表现为双亲性状的中间类型。F1自交后, 在F2植株中出现红花(RR)、粉红花(Rr)、白花(rr)3种
类型,其比例为1:2:1
遗传学小实验(共10张PPT)
去皮,切碎,称取200g,加水 1000 ml,煮成糊状,用纱布过滤,弃去残渣, 滤液补足成1000 ml,然后加入 20g琼脂, 20g蔗糖,加热煮沸,其间要不时搅动,取 500 ml分装70支20ml试管。
第二周 炉上加热至沸腾,其间要不断搅动,以防底部结糊,煮沸3分钟后,离炉加入丙酸,搅匀后分装入事先灭好菌的指管中,每瓶约加入瓶体
积综实的合验2 分 二/析5量果得实。蝇出杂正验交确实一结验论(。挑果选F蝇1继实续培验养)技术
配实制验果 三蝇微培培核养检基养测(黑技培体术养大和果三蝇隐用)果。蝇,观察果蝇性状,学习鉴别果蝇雌雄性别。配制果蝇培养基 实配验制一 脉孢果菌蝇杂实交验(培技养培术基养。 大果蝇用)。
在实验过程中不许大声喧哗,有问题及时请教老师。
果蝇培养基配方
琼脂粉 0.8%
玉米粉
红糖 8%
酵母粉
丙酸
6ml/1000ml
9.6%
0.2%
果蝇培养基配制
在容量为1000ml的搪瓷缸中,加入800ml左右的 蒸馏水,依次按量加入琼脂粉、玉米粉、红糖和酵 母粉,搅拌均匀后定容至1000ml,然后在电炉上 加热至沸腾,其间要不断搅动,以防底部结糊, 煮沸3分钟后,离炉加入丙酸,搅匀后分装入 事先灭好菌的指管中,每瓶约加入瓶体积的2 /5量。
第三周 因实故验不 结能束上后实,验相者关应器有材请要假彻手底续清,洗是干否净进,行放补到课指由定代位课置教。师研究决定。
清实洗验果 二蝇果杂蝇交杂实交验实所验有(用倒具亲本)
配丙制酸脉孢菌实完全验培三养基,微培养6核m脉l/检1孢0菌0测0(m技l扩增术)。 配红 课器制糖堂材脉 表 、孢现药菌及品配完课等全堂按制8%培作规脉养业定孢基使4,用菌0%培,完养严全脉禁孢乱培菌用养(乱扩放基增。酵,)母培。粉 养脉0孢. 菌(扩增);培养大果蝇。配制果蝇培养基。 仔实细验观 六察粗,第糙认脉真四孢思周菌考顺,序及四时分做子好分记析录(;脉孢菌培养) 遵实红守验糖实 结 二验束果制后实蝇度,杂,相8验%交注关二实意器验安材(全要挑(彻果选如底蝇F水清1、洗继杂电干续交、净培煤,养实气放酵)、到母验强指粉(酸定、位挑强置选碱。0. 、处有女毒物蝇质杂等)交。) 实配验制六 果蝇粗培实糙养链基验孢(四霉培顺养序大人四果分类蝇子用遗分)传析。(性统状计杂的交分结析果)
第二周 炉上加热至沸腾,其间要不断搅动,以防底部结糊,煮沸3分钟后,离炉加入丙酸,搅匀后分装入事先灭好菌的指管中,每瓶约加入瓶体
积综实的合验2 分 二/析5量果得实。蝇出杂正验交确实一结验论(。挑果选F蝇1继实续培验养)技术
配实制验果 三蝇微培培核养检基养测(黑技培体术养大和果三蝇隐用)果。蝇,观察果蝇性状,学习鉴别果蝇雌雄性别。配制果蝇培养基 实配验制一 脉孢果菌蝇杂实交验(培技养培术基养。 大果蝇用)。
在实验过程中不许大声喧哗,有问题及时请教老师。
果蝇培养基配方
琼脂粉 0.8%
玉米粉
红糖 8%
酵母粉
丙酸
6ml/1000ml
9.6%
0.2%
果蝇培养基配制
在容量为1000ml的搪瓷缸中,加入800ml左右的 蒸馏水,依次按量加入琼脂粉、玉米粉、红糖和酵 母粉,搅拌均匀后定容至1000ml,然后在电炉上 加热至沸腾,其间要不断搅动,以防底部结糊, 煮沸3分钟后,离炉加入丙酸,搅匀后分装入 事先灭好菌的指管中,每瓶约加入瓶体积的2 /5量。
第三周 因实故验不 结能束上后实,验相者关应器有材请要假彻手底续清,洗是干否净进,行放补到课指由定代位课置教。师研究决定。
清实洗验果 二蝇果杂蝇交杂实交验实所验有(用倒具亲本)
配丙制酸脉孢菌实完全验培三养基,微培养6核m脉l/检1孢0菌0测0(m技l扩增术)。 配红 课器制糖堂材脉 表 、孢现药菌及品配完课等全堂按制8%培作规脉养业定孢基使4,用菌0%培,完养严全脉禁孢乱培菌用养(乱扩放基增。酵,)母培。粉 养脉0孢. 菌(扩增);培养大果蝇。配制果蝇培养基。 仔实细验观 六察粗,第糙认脉真四孢思周菌考顺,序及四时分做子好分记析录(;脉孢菌培养) 遵实红守验糖实 结 二验束果制后实蝇度,杂,相8验%交注关二实意器验安材(全要挑(彻果选如底蝇F水清1、洗继杂电干续交、净培煤,养实气放酵)、到母验强指粉(酸定、位挑强置选碱。0. 、处有女毒物蝇质杂等)交。) 实配验制六 果蝇粗培实糙养链基验孢(四霉培顺养序大人四果分类蝇子用遗分)传析。(性统状计杂的交分结析果)
遗传学实验人类染色体的识别及核型分析.ppt
组型分析能进行染色体分组外,还能对染色体的各种 特征做出定量和定性的描述,是研究染色体的基本手 段之一。利用这一方法可以鉴别染色体结构变异、染 色体数目变异,同时也是研究物种的起源、遗传与进 化,细胞遗传学,现代分类学的重要手段。
2
遗传学实验 2008-3
二、实验原理——人类染色体
2.人类的单倍体染色体组〔n=23〕上约有3000040000个结构基因。平均每条染色体上有上千个基因。 各染色体上的基因都有严格的排列顺序,各基因间的
4
遗传学实验 2008-3
表1 人类染色体的主要特征
组别 染色体序号 形态大小 着丝粒位置
次缢痕
随体
A
1-3
B
4-5
最大 次大
M(1、3) SM(2)
SM
I号染色体常见
C 6-12,X(介于7-8 中等 SM 之间)
D
13-15
中等 ST
9号染色体常见 有
E
16-18
F
19-20
小 次小
M(16) SM
9
遗传学实验 2008-3
3、关于剪贴、原那么排列
排列——原那么: 从大到小; 短臂向上; 着丝粒在一条线上; 性染色体单排。
10
遗传学实验 2008-3
五、实验要求
1、对给出的图象进行测量、配对填表2。 2、按照Denver体制规定,分组贴图。
表2 人类染色体分析数据
编号
绝对 长度
相对 长度
G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是 被Giemsa染料染色后而显带,故称之为G显带技术 ,其所显示的带纹分布在整个染色体上。
20
遗传学实验 2008-3
G显带
2
遗传学实验 2008-3
二、实验原理——人类染色体
2.人类的单倍体染色体组〔n=23〕上约有3000040000个结构基因。平均每条染色体上有上千个基因。 各染色体上的基因都有严格的排列顺序,各基因间的
4
遗传学实验 2008-3
表1 人类染色体的主要特征
组别 染色体序号 形态大小 着丝粒位置
次缢痕
随体
A
1-3
B
4-5
最大 次大
M(1、3) SM(2)
SM
I号染色体常见
C 6-12,X(介于7-8 中等 SM 之间)
D
13-15
中等 ST
9号染色体常见 有
E
16-18
F
19-20
小 次小
M(16) SM
9
遗传学实验 2008-3
3、关于剪贴、原那么排列
排列——原那么: 从大到小; 短臂向上; 着丝粒在一条线上; 性染色体单排。
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遗传学实验 2008-3
五、实验要求
1、对给出的图象进行测量、配对填表2。 2、按照Denver体制规定,分组贴图。
表2 人类染色体分析数据
编号
绝对 长度
相对 长度
G带是目前被广泛应用的一种带型。因为它主要是 被Giemsa染料染色后而显带,故称之为G显带技术 ,其所显示的带纹分布在整个染色体上。
20
遗传学实验 2008-3
G显带
2016上海交通大学遗传学实验PPT实验七细菌转导
λ噬菌体DNA的环化
cos
3’ 5’ GGGCGGCGACCT
CCCGCCGCTGGA 5’ 3’
cos
环化
cos
λ噬菌体DNA插入大肠杆菌基因组
gal
+
A
B
C
D
原噬菌体 A D 溶源性 细菌 细菌基因组DNA
C
B
插入宿主菌基因组的原噬菌体随宿主菌的分裂而增殖,当 受到紫外线照射或温度改变时可以造成阻遏物失活,使裂 解相关基因表达,噬菌体DNA环出、复制、转录、翻译 、包装,细菌裂解,释放出数百个新噬菌体
4mlPB重悬
取2ml 打开盖, UV 15S
加2ml 2LB 轻摇混匀
重悬液
(二)转导(点滴法)的步骤
1. 按右图在EMB平板 上做好标记 2. 用受体菌涂出两条菌 带(1-2环菌/条) 3. 37℃倒置培养1.5小时
1-N:张三 李四 王五 赵六
实验七、细菌的局限性转导
一、实验目的 (一)了解转导的基本原理 (二) 掌握转导实验的基本方法 (三)验证细菌遗传物质可以通过噬菌体转移 二、实验原理 (一)转导的概念:转导是以噬菌体为媒介所进行的 细菌遗传物质的重组过程。在这一过程中,细菌的一
转导子
E. coli K12S gal-
λ
受体菌
gal 非转导子
半乳糖EMB培养基
E. coli K12S gal-
本实验所用的供体菌
E. coli K12(λ) gal+是一种双重溶源菌
λ(dgal+) λ
宿主菌染色体
裂解液中
(dgal+) (转导噬菌体)占50%
(正常噬菌体)占50%
三、实验材料 供体菌:E. coli K12(λ)gal+ 受体菌:E. coli K12S gal四、实验器具和药品
大学课程遗传学实验小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察 JC课件
9.染色
10.镜检
【内容与方法】
1.动物预处理
• 4.预固定:现配固定液甲醇、冰
2.取材及收集细胞 醋酸(3:1)1ml,打匀,离心8分
3.低渗
钟(1000r/min),弃上清。
4.预固定
5.固定
6.再固定
7.制备细胞悬液
8.滴片
9.染色 10.镜检
使这些细胞及其染色体都固定在当前所处的时期,便于 观察
• 2.取材及收集细胞:颈椎脱臼法处
死小鼠,剪开后肢皮肤和肌肉,取出完整股骨,剔 除肌肉、肌腱,生理盐水洗净;剪去少许股骨头, 吸取4ml37℃预温0.075mol/L KCl低渗液冲洗两个
股骨的骨髓细胞至同一试管。
5.固定
6.再固定
7.制备细胞悬液
8.滴片
9.染色
10.镜检
1.动物预处理 2.取材及收集细胞 3.低渗 4.预固定 5.固定 6.再固定 7.制备细胞悬液 8.滴片 9.染色 10.镜检
【内容与方法】
• 6.再固定:重复步骤5,本
次实验省略不做。
1.动物预处理
【内容与方法】
2.取材及收集细胞
3.低渗 4.预固定 5.固定 6.再固定
• 7.制备细胞悬液:倒净后重
新加适量固定液至半透明(或留 4~5滴 ) ,吸管缓慢打匀。
7.制备细胞悬液
8.滴片
9.染色
10.镜检
【内容与方法】
1.动物预处理 2.取材及收集细胞 3.低渗 4.预固定 5.固定
3.低渗 4.预固定
,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察 到许多处于分裂中期的染色体,可以进行染色 体组型分析。
5.固定
如何做人的染色体制备?
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2、固定染色
吸去生理盐水,滴数滴盐酸,水解5分钟, 使组织疏松,以便压片时细胞分散,染色体 散开。
吸去盐酸,加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干, 滴1~2滴醋酸洋红染液,固定染色10~20分 钟。
3.制片
染色完成后,盖上盖玻片压片,然后用吸水 纸包被玻片,吸干多余染色液,并用手指轻压 盖玻片,再用铅笔的橡皮头或解剖针柄垂直轻 敲,或进一步用拇指在盖玻片上适当用力压片, 注意勿使盖玻片移动。
3、果蝇的转接 被麻醉果蝇移入饲养瓶中,将瓶横卧置放, 否则未醒果蝇粘着于饲料会溺死。待果蝇苏 醒后再将瓶直立,贴上标签,放入培养箱。
3、处女果蝇的选取
雌果蝇受精囊内可贮存大量的精子,因此 在做品系间杂交时,母本必须选用处女蝇。 雌蝇孵出12小时后才会交配(8小时更为可 靠),所以将老果蝇清除后,12小时内所 收集到的雌蝇就是处女蝇。
(二)果蝇的培养及杂交
1、果蝇培养时常用的培养基
2、果蝇的麻醉 首先,将培养瓶棉塞上的果蝇驱到瓶底,打开 培养瓶与麻醉瓶的瓶塞,迅速使两瓶口对接, 将培养瓶中部分果蝇驱入麻醉瓶中,迅速塞上 棉塞,防止果蝇的种群污染,拔开麻醉瓶棉塞, 以其侧面遮盖麻醉瓶口,再棉塞中央滴几滴乙 醚,塞上棉塞,等果蝇麻醉。(果蝇翅膀外层 45度角表死亡)
X2检验( F2)
实验三 果蝇巨染色体的制片与观察
一 实验目的
1、练习果蝇幼虫的解剖技术及果蝇唾 腺染色体的制片方法
2、观察果蝇的唾腺染色体
二 实验原理
唾腺染色体是一类存在于双翅目昆虫幼虫 唾液腺内的巨大染色体,由于染色体DNA经过 多次复制,但并未发生细胞核分裂,重复复制 后的染色线聚集在一起,因此比一般的染色体 大得多。同时,唾腺细胞中的同源染色体总是 处于配对状态,因此在果蝇唾腺细胞只能看到 体细胞染色体数目的一半。
2、第二周,倒去杂交亲本果蝇。
3、第三周,观察F1眼睛颜色。将F1全部倒 出,轻度麻醉,观察F1成蝇,记载正反交 结果 。观察后,将F1果蝇全部移入一新培 养瓶(这里不需用处女蝇)置25℃温箱中 培养。
4、第四周,倒去F1亲本。 5、第五周,观察F2成蝇眼睛颜色。被统计
过的果蝇处理掉。
四、实验记录及结果分析
实验二 果蝇的伴性遗传实验
一、实验目的
❖ 了解伴性遗传和非伴性遗传的区别,了解伴 性遗传基因在正、反杂交中的差异。
❖ 掌握基本的遗传结果记录及统计处
1、杂交组合亲本设计
正交:红眼雌蝇(处女蝇)×白眼雄蝇
反交:白眼雌蝇(处女蝇)×红眼雄蝇
反交方法: (a)把红眼果蝇倒出麻醉,仔细挑出4只雄蝇,移到 上述杂交瓶中,贴好标签。 (b) 把白眼雌蝇(处女蝇)倒出麻醉,挑4只移到杂 交瓶中。 (c)等杂交亲本在杂交瓶中全部苏醒后,将杂交瓶移 入25℃温箱中培养。
遗传学实验
1.果蝇的培养、形态观察及整体装片的制作 2.果蝇的伴性遗传 3.果蝇巨染色体的制片和观察 4.从口腔脱落细胞中提取人类基因组DNA 5.PCR法鉴定人SRY基因 6.学生自主创新性实验——微核检测技术 7.荧光定量PCR检测烟草刺激后人肺细胞 ERCC4基因和GAPDH基因的表达变化 8.人类ACE基因多态检测及其与耐力运动能 力的关联分析
DNA提取的方法:
1.用蛋白酶K(使膜上蛋白 变性分解)和去污剂SDS
➢ 浓盐法 ➢ 阴离子去污剂法 ➢ 苯酚抽提法
(破坏细胞膜的脂质结构) 共同消化细胞。
2.然后酚、氯仿等有机溶剂 进行抽提,进行DNA的纯化,
(三)果蝇整体装片的制作
1、制片:取轻度麻醉的雌雄果蝇各一只放在 载玻片上,待果蝇将醒能动时,滴一滴树胶 在果蝇上,盖上盖玻片,让盖片自然沉降, 要防止气泡产生。滴树胶的量以浸没果蝇, 盖上盖片不外漏为度。
2、观察:果蝇的背部横纹、雄果蝇的性梳。
(四)作业
制作一张良好的装片,要求能够看到果蝇的背 部横纹及性梳。
研究证明,多线染色体的带纹与某些特定 的基因相联系,由于多线染色体上的带纹清晰 可数,因此巨染色体是遗传学上研究染色体形 态结构和染色体畸变的好材料。
三 实验步骤
1、取材(三龄幼虫,5mm)
取一张载玻片放在双筒解剖镜下,滴一滴生理盐水, 将幼虫放在生理盐水内。两手各握一枚解剖针,一 枚钉住幼虫末端的1/3处固定幼虫,另一枚解剖针钉 住幼虫头部,前拉,把头部自身体拉开,可看到唾 腺,剔除唾腺周围的脂肪及其它物质。
四 作业
❖ 制作果蝇巨染色体装片 ❖ 画出你所观察到的果蝇巨染色体,并加
以标注与描述。
实验四 从口腔脱落细胞中提取 人类基因组DNA
实验目的
1、了解从细胞中提取DNA的基本原理
2、学习从口腔脱落细胞中提取高分子量DNA 的基本操作步骤和会影响提取效果的注意事 项。
实验原理
破坏细胞的细胞膜,释放出 DNA。
实验一
果蝇的培养、形态观察及整体装片 的制作
(一)果蝇的生活史
昆虫纲,双翅目。25℃下,~12天完成一个周 期 :卵→幼虫→蛹→成虫。成体果蝇可活 几周。
卵 幼虫
蛹 成虫
雌雄果蝇的主要 形态特征
性状
体型 腹部末端 背部黑色横纹 腹片数 性梳
雌蝇
较大 腹端尖 7条(可见5条) 6片 无
雄蝇
较小 腹端钝 5条(可见3条) 4片 有、位于前足附节上
4.观察
将制片置低倍镜下找到分散好的标本,移至 视野中心,然后转到高倍镜下观察。对染色体 分散、个体性清楚的片子,应仔细观察染色体 的横纹数量、形状和排列顺序,以便对照模式 照片辨认出不同的染色体臂。
一般在一个唾腺细胞中能看到5条长臂的染色体,分 别为X染色体、第二对染色体的左臂(L)、右臂 (R)、第三对染色体的左臂(L)、右臂(R), 这5条染色体臂由染色中心发射出来。这是由于第 四对染色体相当小看不清,Y染色体浓缩,X染色体 的着丝点位于端部只有一条臂之故。
注意安全!
❖ 1.穿实验服。 ❖ 2.各项操作务必规范,小心谨慎。对有
毒有害物质进行操作时,要做好防护。 ❖ 3.避免在实验室吃喝食物。 ❖ 4.遵守实验室其他安全守则。
实验报告格式
❖ 实验名称 实验人员姓名 学号 实验时间 ❖ 一、实验目的 ❖ 二、实验原理 ❖ 三、实验步骤 ❖ 四、实验结果