实验三、寄生虫学粪便检查法(三)

用吸管将粪液加满并使之凸出瓶口
（2）、麦克马斯特计数法； ） 麦克马斯特计数法； 麦克马斯特计数板的规格：它由两块玻片 所组成，其间隔距离为1.5mm，上面的盖 玻片上一般有1－2个1 平方厘米的方格， 每个计数室的体积为o.15立方厘米，容量 为o.15ml。
1.5mm
1.5mm
麦克马斯特计数板
B、平皿幼虫分离法： 取培养好的粪样1－2g＿放入平皿中 ＿加40℃的温水（以浸没粪便为宜）＿ 静置（5－10′）＿去粪便＿镜检平皿中 5 10′ 的液体。 C、直接检查法： 取少量培养好的粪样＿置于载玻片上 ＿滴清水＿静置（30′）＿镜检
作业： 将计算方法和检查结果写出。
观察: 观察:
线虫的种类很多而它们排出的虫卵， 在形态、结构和大小上极为相似，因此， 以虫卵来鉴别线虫的种类是较困难的， 只有通过培养出第三期幼虫（即具有感 染力的幼虫），才能根据幼虫的形态结 构来进行鉴定。
（2）、温水引诱法：
A、贝尔曼法： 该方法检出率高，适用于检查各种线虫的 幼虫，包括土壤、饲料和器官内的幼虫检查。 贝尔曼分离器装制：用一个直径为10－ 15cm的漏斗，下接一条10－15cm长的胶管， 再接一个沉淀管，并准备一个止水夹和铜
ห้องสมุดไป่ตู้滤筛。
滤筛
漏斗
胶管
试管
操作方法：
取培养好的粪样（10－20g）＿用两层纱 布包扎好＿置于漏斗中的铜筛中＿沿漏斗边 缘加入37－40℃的温水（以淹盖粪样为佳） ＿静置（1－2小时）＿夹好止水夹＿取下沉 淀管＿吸去上清液＿取沉渣镜检。 如果没有沉淀管时，在加温水之前应夹好 止水夹，静置（1－2小时）后，收集下面一 部分水，进行离心后取沉渣镜检。
实验三、寄生虫学粪便检查法（三） 实验三、寄生虫学粪便检查法（
一、目的 通过本次实验学习掌握线虫幼虫的检查方 法、学习掌握虫卵的计数方法；了解线虫幼 虫的形态。 二、内容 1、学习虫卵计数法 a）简易计数法 b）麦克马斯特计数法 2、学习线虫幼虫检查法 a）幼虫培养法 b）温水引诱法
本次实验的意义： 本次实验的意义：
原理: 原理:
由于计数室内充满了用漂浮液制成的 粪液，因此，在计数室内体积小、比重 轻的虫卵漂浮在上面，而粪渣则沉于下 面，当视野感觉模糊时往往所看到的是 该室的底部沉渣，当清晰见到上面的线 条时，才能找到虫卵，由于有线条的规 范，有效地防止了漏检或重检。
麦克马斯特操作方法： 麦克马斯特操作方法： 操作方法 取样（2g）＿加饱和盐水（58ml）＿ 充分混匀＿过滤＿混匀后立即用吸管注 入计数室内＿静置（1－2分钟）＿镜检。 计算公式： 计算公式： 每克粪便中的虫卵数＝全部计数室的 虫卵总数/计数室的个数×200
2、线虫幼虫的检查法： 线虫幼虫的检查法：
方法：在平皿中垫上一层吸水纸--将含有虫 卵的粪便（混匀）--放入平皿中（如粪便太 干燥时洒适量的水，如太湿时应洒适量的炭 末）--塑成半球状（压平并略高出平皿口）-放入恒温箱内（25－30℃，夏天可放在室 内，根据情况可适当洒点水，以保持吸水纸 的潮湿度）--经过7－10天的时间--就会发育 成第三期幼虫。
学习虫卵计数法的操作技术，对于我 们判定宿主感染寄生虫病的强度，或者 检验驱虫药使用后的效果如何，都有着 重要的参考价值。
1、寄生虫排卵有一定的规律性，因此，宿主 所排出的粪便中虫卵的含量就会有所很大差异， 而且虫卵在同一个粪样中，分布也是不均匀的； 2、粪便的浓稠程度的不同，虫卵的含量也会 不同。 如果要想获得较为准确的数据，不仅要克服主 观上的不足外，还要将被检宿主在24小时内所排 出的粪便全部收集起来，经充分混合均匀后，称 量好总量，按一定的比例来称取粪样，通过换算 后，得出的结果才是较为准确的数据。
实验内容： 实验内容：
1、虫卵计数法：（只适用于线虫卵和球虫卵囊） （1）简易计数法： （2）斯陶尔法； （3）麦克马斯特计数法。 3 2、线虫幼虫检查法： （1）线虫幼虫的培养方法； （2）温水引诱法； （3）毛蚴孵化法：
四、操作方法
1、虫卵计数法： 、虫卵计数法： ）、简易计数法 （1）、简易计数法： ）、简易计数法： 取粪样（1g）＿加清水（10－15倍）＿ 搅拌均匀＿过滤＿静置（30－40分钟） ＿倒去上清液＿再加饱和盐水＿混匀＿ 倒入青霉素瓶＿用吸管加满并使之凸出 瓶口＿加上盖玻片＿静置（20－30分钟） ＿垂直取下盖玻片＿镜检＿并盖上另一 块盖玻片（一般要检三片以上）。