血液中乙醇的测定顶空气相色谱法
气相色谱仪对血液中酒精(乙醇)分析
血液中乙醇含量分析测定专用气相色谱仪随着新《交通法》的实施,驾车者血醇含量的检测日趋普遍,气象色谱法定性及定量检测血醇含量是唯一司法认定的检测手段。
我公司血液中乙醇含量检测解决方案是参考国外同类检测方法,并基于《中华人民共和国公共安全行业标准》(GA/ 105-1995)而开发的用带自动顶空进样器并配有双柱双检测器的气相色谱法进行的血液中的乙醇含量的定性及定量检测分析。
本方案检测方法先进,仪器配置合理,操作简单,适合各级公安部门及司法鉴定中心配备。
饮酒驾车国家质量监督检验检疫局发布的《车辆驾驶人血液、呼气酒精含量阈值与检验》国家标准,该标准规定:车辆驾驶人员血液中的酒精含量大于或等于20毫克/100毫升、小于80毫克/100毫升为饮酒驾车。
醉酒驾车血液中的酒精含量大于或者等于80毫克/100毫升为醉酒驾车。
自己估量据专家估算:排除个人体重、体温、性别、年龄、人体脂肪含量、是否经常饮酒等因素,一般喝2/5瓶普通瓶装啤酒,或半两50度左右的白酒,或2两左右的12度红酒,就能达到“酒后”标准。
仪器配置:适合用户:公安部门,司法鉴定中心,医院,研究单位。
分析图谱可用标准里面的图截取……酒驾新规内容一、有下列违法行为之一,一次记12分:(一)驾驶与准驾车型不符的机动车的;(二)饮酒后或者醉酒后驾驶机动车的;(三)驾驶公路客运车辆载人超过核定人数20%以上的;(四)造成交通事故后逃逸,尚不构成犯罪的;(五)使用伪造、变造机动车号牌、行驶证、驾驶证或者使用其他机动车号牌、行驶证的;(六)在高速公路上倒车、逆行、穿越中央分隔带掉头的。
第十五条有下列情形之一的,不得申请增加大型客车、牵引车、中型客车准驾车型:(一)发生交通事故造成人员死亡,承担全部责任或者主要责任的;(二)醉酒后驾驶机动车的;(三)在本记分周期和申请前最近连续三个记分周期内有饮酒后驾驶机动车行为的;(四)在本记分周期和申请前最近连续三个记分周期内有驾驶机动车行驶超过规定时速百分之五十以上行为,机动车驾驶证未被吊销的。
顶空-气相色谱法测定血液中的酒精含量
顶空-气相色谱法测定血液中酒精含量摘 要:以叔丁醇为内标,采用顶空-气相色谱法对血液中的酒精含量进行分析。
该方法在5~160 mg/100mL 浓度范围内线性良好,回收率在90%~110%之间,方法的检出限为0.38 mg/100mL 。
关键词:顶空-气相色谱法 血液 乙醇2008年世界卫生组织的事故调查显示,大约50%~60%的交通事故与酒后驾驶有关,酒后驾驶已经被列为车祸致死的主要原因。
在中国,每年由于酒后驾车引发的交通事故达数万起;而造成死亡的事故中50%以上都与酒后驾车有关,酒后驾车的危害触目惊心,已经成为交通事故的第一大“杀手”。
根据国家质量监督检验检疫局发布的《车辆驾驶人员血液、呼气酒精含量阈值与检验》(GB19522—2004)中规定,驾驶人员每血液酒精含量大于等于20 mg/100mL 小于80 mg/100mL 为酒后驾车;血液酒精含量大于或等于80 mg/100mL 为醉酒驾车。
本文参照公安部GA/T842-2009标准,以叔丁醇为内标,顶空-气相色谱法分析血液中的酒精含量。
该方法准确可靠,重复性好。
1.实验部分1.1仪器与试剂岛津GC-2010 Plus 气相色谱仪,配FID 检测器,顶空进样器(DANI HSS-86.50) 1.2分析条件 1.2.1色谱条件色谱柱:Stabilwax ,30 m×0.25 mm×0.25 μm 进样口温度:200℃柱温程序:70℃(4 min) 20℃/ min 150℃(1 min) 柱流量:1.2 mL/min 进样方式:分流 分流比:5:1 检测器温度:230℃ 氢气流量:40 mL/min 空气流量:400 mL/min 尾吹气流量:30 mL/min 1.2.2顶空条件 平衡温度:70℃ 平衡时间:15 min 定量环温度:105℃ 传输线温度:110℃ 1.3样品制备用移液枪移取0.50 mL 待测血液样品于顶空瓶中,加入0.1 mL 叔丁醇水溶液(200 mg/100mL )作为内标,密封后待测试。
血中乙醇的顶空气相色谱分析
基金项目 校级科研项目,项目编号:07LG002。
作者简介 刘兆(1974— ),男,汉族,讲师,法医学博士。
2008年第4期No 142008 Journal of Chinese Peop le πs Public Security University (Science and Technol ogy ) 总第58期Su m58血中乙醇的顶空气相色谱分析刘 兆,温永启,张惠芹(中国人民公安大学刑事科学技术系,北京 100038)摘 要 目的:探讨改良测定血中乙醇的顶空气相色谱分析方法。
方法:以正常人空白血液添加乙醇为样本,采用1,4-二氧六环作为内标物并在稀释液中加入硫脲和高氯酸以提高挥发性并促进蛋白质的降解,通过顶空气相色谱法进行定性定量分析,在对实际案例检样的检验中与采用“标准方法”检测的结果进行对比。
结果:采用新方法定量分析时,血中乙醇在010625mg/mL ~1mg/mL 范围内线性关系良好(r 2=019996),各浓度组的变异系数(CV )<2%,血中乙醇的最低检出限为012μg/mL (S/N ≥3)。
结论:以1,4-二氧六环为内标物的新方法简便、准确,比以往的方法更加灵敏且避免干扰,适用于血醇的定性、定量检验。
关键词 乙醇;顶空气相色谱;法医检验中图分类号 D9181930 引言血醇检验是法医毒化分析中的一项基本工作,在酒后驾车、中毒死亡等案件的鉴定中至关重要[1]。
目前国内公共安全行业标准中使用的方法(以下简称方法A )采用叔丁醇作内标物,通过顶空气相色谱法进行血中乙醇的检验[2],同时还可检测出甲醇、丙醇、戊醇等易挥发性物质。
所述方法中用作内标物的叔丁醇由于保留时间较短,易与其他挥发性物质产生干扰,且其定性、定量检验需使用约3mL 血液,在一些特殊情况中实属较大的消耗。
为改善上述问题,本实验方法(以下简称方法B )采用保留时间较长的1,4-二氧六环作为内标物以避免与其他挥发性物质的干扰,在检样制备中所用的稀释液里加入硫脲和高氯酸可提高挥发性和分解蛋白质[3],以便提高灵敏度,减少检样的消耗。
顶空气相色谱法检测血液中的乙醇含量
顶空气相色谱法检测血液中的乙醇含量张伟;荆丽红;郭卫【摘要】目的建立顶空气相色谱法检测血液中乙醇含量的检测方法.方法取0.5 ml待测血样2份加入叔丁醇内标液0.1 ml于20 ml顶空瓶中,顶空进样.在特定的色谱条件下,血中的乙醇能与样品中可能存的主要干扰成分实现分离,阳性对照血中的乙醇、叔丁醇保留时间分别作为对照,以保留时间定性,用内标法以乙醇对内标物的峰面积比进行定量分析.结果乙醇的保留时间为3.482分,叔丁醇的保留时间为4.394分,相对标准偏差(n=10)均小于5%,该方法检测结果准确.结论顶空气相色谱法检测血液中的乙醇含量,血样直接顶空进样,不受进样误差干扰,结果稳定,操作方便,分析时间短、线性关系良好、灵敏度高,适用于涉嫌酒驾案件的全血中乙醇含量的测定.【期刊名称】《医学信息》【年(卷),期】2018(031)019【总页数】3页(P155-157)【关键词】气相色谱;乙醇;顶空进样;酒精检验【作者】张伟;荆丽红;郭卫【作者单位】天津公安警官职业学院,天津 300382;天津市公安局南开分局技术队,天津 300110;天津津实司法鉴定中心,天津 300202【正文语种】中文【中图分类】O657.7顶空气相色谱法(HS-GC)又称液上气相色谱分析,是一种联合操作技术,可对血液中乙醇的定性定量分析。
《刑法修正案》和修改后的《道路交通安全法》正式实施后,“醉酒驾驶”正式入刑,血液酒精含量检验结果作为认定犯罪嫌疑人是否醉酒的重要依据。
本文依据公安部发布的行业标准GA/T 842-2009血液酒精含量的检验方法、GA/T 1073-2013生物样品血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇和正丁醇的顶空-气相色谱检验方法和中华人民共和国司法部SF/Z JD0107001-2010顶空气相色谱法对血中乙醇的定性定量分析方法,结合本实验室仪器特点,建立一种快速、准确、精密度高的检测方法,以适应对涉嫌酒驾案件的血中酒精含量检验工作[1]。
顶空气相色谱内标法测定血液中乙醇含量
Dee mi a i n o h t a o o tn n b o d wi e d p c a h o t g a h (n e n l t n a d meh d Z t r n to ft e eh n l n e t lo t h a s a eg sc r ma o r p y i tr a a d r t o ) c i h s OU Li
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[ src] Obet e To p o o earpda ay i meh d frt ed tr n t n o ta o o tn lo y Ab ta t jci v r p s a i n lss t o o h ee miai feh n lc n lo o n e n ls a d r n . 0 mL o wo b a k b o d s mp e x d wi t a o , - r p n l a o 。e tb t l c h l t r a t n a d a d 0 5 ft ln l o a ls mi e t e h n l 1 p o a o , a i h
进 行 分 析 , 内标 法 以 醇 类对 内标 物 的峰 面积 比进 行 定 量 。在 0 1 0 . / 0 用 . ~4 O 0mg 10mL 范 围 内线 性 良好 , 出限 为 检 0 1mg 1 0mL . / 0 。结 论 顶 空 气 相 色谱 内标 法 直接 顶 空进 样 , 受进 样 误 差 干 扰 , 不 结果 稳 定 , 作 方便 , 析 时 间短 、 操 分
n l f bo d wi h i t r e e c o o e t g tb r s n e n t e s m p e n c iv d b s l e s p r — o l o t t e ma n i e fr n e c mp n n s mi h e p e e t d i h a l sa d a h e e a ei e a a o h n n t n Et a o , - r p n l t r- u y lo o fb a k b o d s mp e r o ta t d r s e t e y Re u t Th GC i . h n l 1 p o a o ,e tb t lac h lo ln l o a lswe e c n r s e e p c i l . s ls o v e HS (n e n l t n a d me h d o k t e h g o a i t fa c h l a d t r— u y lo o s i tr a t n a d , n s d i t r a a d r t o )t o h i h v l t i o lo o s n e tb t lac h l n e n ls a d r a d u e s ly a HS GC。 e e t ro l me in z t n t o t e t s . mp r d wi h lo o s sa d r a ls o e a i g p r l l d t c o ff a o ia i o d h e t Co a e t t e ac h l t n a d s mp e p r t a a l l o h n e y, t e r t n i n tme wa s d a a in a d t e q a t a i e o e k a e s u e o a a y e a c h l. e i t r a h e e to i s u e s r t n h u n i t fp a r a wa s d t n l z lo o s Th n e n l o t v s a d r t o s u e o e k a e fi t r a sa d r t o . o i e rt fa c h l s d t c e t i t n a d me h d wa s d f r p a r a o n e n lt n a d me h d Go d l a iy o lo o s wa e e t d wi n n h
顶空气相色谱法检验血液中乙醇含量
顶空气相色谱法检验血液中乙醇含量作者:张滢刘阳来源:《中国科技纵横》2014年第16期【摘要】本文采用顶空进样方法,通过改进色谱条件,改进数据处理方式,从而建立一个改进的血液中乙醇的检验方法,以获得更好的分离效果和线性关系,解决实际应用中存在的同一个样品无法重复进样,标样存储和取用的问题。
【关键词】内标曲线法顶空气相色谱血液中乙醇相对标准偏差乙醇广泛存在于日常饮用的各种饮品中,可以说是涉及人数最多、应用范围最广、滥用程度最高的一种毒(药)物。
长期过量饮酒或慢性酒精中毒可诱发或导致心脑血管疾病、消化系统疾病、精神障碍等多种疾病,甚至导致死亡。
饮酒后人的中枢神经活动会变得迟钝,致使手足活动迟缓、生理机能减退、视力听力等感知能力降低,还会导致行为异常,从而发生意外甚至犯罪,比如车祸、吸入呕吐物窒息而死、酒后肇事等[1]。
酒后驾驶更是一直以来困扰我们的世界性的社会问题,是造成交通肇事的主要原因[2]。
血液中乙醇含量(blood alcohol concentration,BAC)的检验在判定饮酒后驾车、饮酒后违法犯罪、饮酒中毒死亡等案事件中起到十分重要的作用。
现阶段对于血中乙醇含量的检测方法主要有化学法、光谱法、电池法、酶学法和气相色谱法[3,4]。
其中顶空气相色谱法(HS/GC)具有分离效率高、检测灵敏度高、分析速度快、准确度较高、精密度高、杂质干扰少等诸多优点[5、6],因而在BAC的测定中得到广泛应用。
但是在实际应用中我们发现,实验过程往往受到同一个样品无法重复进样的问题,标样的储存和取用问题的困扰。
因此,本文着重从上述三个问题入手,力争可以解决实际操作过程中遇到的这些问题。
1 实验部分1.1 仪器与试剂药品试剂:无水乙醇(Sigma-aldrich,色谱纯),叔丁醇(Fluka,色谱纯)。
仪器设备:顶空进样器(Agilent 7894E Headspace Sampler);气相色谱仪(Agilent 6890N GC),GILSON活塞排代式移液器(M1000型),GILSON空气排代式移液器(P100型)。
顶空气相色谱法测定血中乙醇含量不确定度分析
顶空气相色谱法测定血中乙醇含量不确定度分析何文芬;金广庆【摘要】Objective To establish a method for evaluation of uncertainty in determination of ethanol in blood by headspace gas chromatography coupled with flame ionization detector (HS-GC-FID). Methods The concentration of ethanol in blood sample was analyzed by HS-GC-FID. According to the relevant documents for uncertainty evaluation, sources of uncertainty were analyzed, followed by calculation of component factors, combined standard uncertainty (Uc) and expanded uncertainty (Ur). Results The standard uncertainties caused by random effects, balance, purity of the standard, flask, pipet and used standard curves were respective as 7.892×10-3(U1), 1.053×10-4(U2), 1.290×10-3(U3), 1.290×10-4(U4), 2.887×10-3(U5) and 7.069×10-3(U6). On the basis of the data ofU1~U6, the combined standard uncertainty (Uc=0.0111) and expanded uncertainty (Ur=0.0222) were obtained. Conclusions The uncertainty in the measurement of ethanol in blood derives mainly from parallel measuring error and importation of standard curves.%目的:对使用顶空气相色谱法测定血液中乙醇含量的方法进行不确定度分析。
顶空气相色谱内标法测定血液中乙醇含量
血液中乙醇含量的检测是法医鉴定和临床诊断的常规检 测项目。目前国内常 用 的 方 法 主 要 有 气 相 色 谱 法 、干 化 学 法、 速率法等,其 中 干 化 学 法、速 率 法 影 响 因 素 较 多,结 果 不 稳 定[1]。气相 色 谱 法 是 《中 华 人 民 共 和 国 公 共 安 全 行 业 标 准 》 (GA/T 105-1995)中 规 定 的 检 测 方 法 。 本 文 采 用 GA/T 105- 1995中要求的气相色谱法,采用 样 品 直 接 顶 空 进 样,中 等 极 性 的毛细管气相色谱柱分离,叔丁醇作为内标物。顶空气相色 谱 (内 标 法 )优 化 了 顶 空 进 样 器 和 气 相 色 谱 仪 的 各 项 工 作 参 数 ,以 期建立一种快速简便、高 效 准 确 的 分 析 方 法,适 用 于 批 量 样 品 的测定。 1 材 料 与 方 法 1.1 仪器与试剂 (1)仪器。7890N 型气 相 色 谱 仪(美 国 Ag- ilent公 司 );氢 火 焰 离 子 化 检 测 器 (FID);色 谱 柱 :柱 长 30 m,内 径0.53 mm,液 膜 厚 1μm;具 有 中 文 软 件 操 作 的 化 学 工 作 站 ; 7694E 型顶空进样器(美国 Agilent公 司);20 mL 顶 空 瓶 及 配 套瓶盖。(2)试剂。标 准 物 质:乙 醇、正 丙 醇、叔 丁 醇 均 为 分 析 纯;其中叔丁醇用作为内标,使用前均配成1mg/mL 的工作液
计算式中 W1、W2 为2份检材平行定量测 定 的 结 果 ,W 为 2份检材平均值。 1.4.2 将 检 测 的 蜂 面 积 代 入 公 式 计 算 2 结 果 2.1 乙 醇、正 丙 醇、叔 丁 醇 的 保 留 时 间 分 别 为 1.27、1.69、 2.23 min。 2.2 取3种不同浓度的标准溶液(20、80、400mg/mL)进 行 分 析,在0.0~400.0 mg/100 mL 乙 醇 浓 度 范 围 内 线 性 良 好 。 根 据3倍基线噪声所对应的标准物质的浓度,计算出该方法的 检 出 限 为 0.1 mg/100 mL。 2.3 取混 合 的 血 样 进 行 加 标 回 收 试 验 。 加 入 的 乙 醇 浓 度 为 80mg/mL。每份血样分装 成 4 份 平 行 样 品,其 中 1 份 用 以 测 定样品 的 本 底 值,其 余 3 份 加 入 乙 醇 标 准 溶 液 后 进 行 测 定 ,计 算 其 加 标 回 收 率 为 98.5% ,回 收 率 良 好 。 [3-4] 2.4 取1mg/mL 的乙醇、叔丁醇混合标准溶液,加入10 个 检 测瓶,连续测定10次,以 乙 醇、叔 丁 醇 的 峰 面 积 分 别 计 算 标 准 差和变异系数,乙醇、叔丁醇 的 变 异 系 数 分 别 2.56%、2.74%。 在本精密度试验中得到的值 均 小 于 10%,查 相 关 文 献 得 知,精 密 度 良 好[5]。 3 讨 论 3.1 柱温的选 择 柱 温 是 影 响 气 相 色 谱 分 离 的 重 要 因 素 之 一。本实验在40~80 ℃范 围 内 考 察 了 柱 温 对 分 离 的 影 响,并 在 不 同 柱 温 下 ,对 和 乙 醇 结 构 近 似 的 常 见 低 级 醇 类 ,如 甲 醇 、异 丙醇、正丙醇、叔丁醇配制了混合溶液进行了试验。结果表 明, 与 乙 醇 最 接 近 的 峰 为 甲 醇 和 异 丙 醇 ,因 此 以 它 们 的 分 离 情 况 作 为考察指标,温度越 高,乙 醇 与 甲 醇、异 丙 醇 保 留 时 间 越 接 近, 分离不好。进行多次 研 究 发 现,在 作 者 设 定 的 色 谱 条 件 下,40 ℃时乙醇与甲醇和异 丙 醇 的 分 离 情 况 和 峰 形 最 好 ,其 余 物 质, 如正丙醇、叔丁醇亦不 会 产 生 干 扰,因 此 试 验 最 后 选 定 柱 温 为 40 ℃。甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇、叔 丁 醇 的 保 留 时 间 分 别 为 1.00、1.27、1.49、1.69、2.23 min[6-7]。 3.2 内标物质的选择 内标法可在一定程度上消除操作条 件
自动顶空-气相色谱-质谱法测定血液中乙醇含量
自动顶空-气相色谱-质谱法测定血液中乙醇含量周枝凤;陈凌云;沈梅;马安德;邹飞【摘要】提出了自动顶空-气相色瞥质谱联用检测血液中乙醇含量的方法.取一定量的血样或乙醇标准样品置于项空瓶中(其中各加固定量的叔丁醇作为内标),在60℃及中速振摇的条件下平衡20 min,通过进样环定量地将一定量样品引入于气相色沓质谱联用仪器中进行测定.乙醇和叔丁醇的保留时间分别为1.47 min和1.56 min.方法的线性范围为0.01~10.00 g·L~(-1)检出限(3S/N)为0.6 mg·L~(-1),测定下限(10S/N)为1.0 mg·L~(-1).乙醇的回收率在92%~105%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)小于7%.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2010(046)001【总页数】3页(P22-24)【关键词】乙醇;自动顶空进样;气相色谱-质谱法;血液【作者】周枝凤;陈凌云;沈梅;马安德;邹飞【作者单位】南方医科大学公共卫生与热带医学学院,广州,510515;南方医科大学公共卫生与热带医学学院,广州,510515;南方医科大学公共卫生与热带医学学院,广州,510515;南方医科大学公共卫生与热带医学学院,广州,510515;南方医科大学公共卫生与热带医学学院,广州,510515【正文语种】中文【中图分类】O657.7血液中乙醇含量的检测是法医鉴定和临床诊断的常规检测项目。
常用的检测方法主要有直接进样气相色谱(GC)火焰离子化检测器(FID)法[13]和手动顶空 GCFID法[4]。
这两种方法所需的分析时间长且定性能力不强,不适合临床和司法鉴定的快速定性和定量分析要求。
气相色谱质谱(GCM S)联用法结合了色谱定量和质谱定性的强大功能,已广泛用于分析挥发性有机物[5]。
自动顶空进样器自动化程度高,进样准确。
因此,自动顶空气相色谱质谱仪联用已成为分析低沸点有机物的重要方法[5]。
血液中乙醇的测定顶空气相色谱法
司法鉴定技术规范SF/Z JD0107001——2016血液中乙醇的测定顶空气相色谱法中华人民共和国司法部司法鉴定管理局发布目次前言 (I)1 范围 (1)2 规范性引用文件 (1)3 原理 (1)4 试剂和材料 (1)5 仪器 (1)6 测定步骤 (2)7 结果计算 (3)附录A (资料性附录)乙醇对照品和内标气相色谱图 (4)附录B (资料性附录)校准曲线 (5)前言本技术规范按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本技术规范的附录A和附录B为资料性附录。
本技术规范由司法部司法鉴定科学技术研究所提出。
本技术规范由司法部司法鉴定管理局归口。
本技术规范起草单位:司法部司法鉴定科学技术研究所。
本技术规范主要起草人:卓先义、刘伟、向平、沈保华、卜俊、马栋、严慧。
本技术规范所代替规范的历次版本发布情况为:SF/Z JD0107001——2010。
血液中乙醇的测定顶空气相色谱法1 范围本技术规范规定了血液中乙醇的顶空气相色谱测定方法。
本技术规范适用于血液中乙醇的定性及定量分析。
本技术规范的方法检出限为0.01mg/mL;定量下限为0.05mg/mL。
2 规范性引用文件下列文件对于本技术规范的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本技术规范。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本技术规范。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682-2008,ISO 3696:1987,MOD)GA/T 122 毒物分析名词术语3 原理本法利用乙醇的易挥发性,以叔丁醇为内标,用顶空气相色谱火焰离子化检测器进行检测,经与平行操作的乙醇对照品比较,以保留时间进行定性分析;以峰面积为依据,用内标法定量。
4 试剂和材料除另有说明外,水为GB/T 6682规定的二级水。
4.1 乙醇色谱纯。
4.2 乙醇标准溶液精密称取适量乙醇,用水配成10.0mg/mL乙醇标准储备溶液。
生物样品血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇和正丁醇的顶空-气相色谱检验方法
生物样品血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇和正丁醇的顶空-气相色谱检验方法
生物样品(如血液和尿液)中乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇和正丁醇的顶空-气相色谱检验方法可按照以下步
骤进行:
1. 样品预处理:将生物样品进行适当的前处理。
常见的前处理方法包括稀释、固相萃取或液液萃取等。
前处理的目的是去除干扰物、浓缩目标物或改变样品的特性以符合检测方法的要求。
2. 顶空采样:将预处理过的样品装入顶空采样瓶中,并用适当的方法(如注射针头或顶空装置)将顶空气相抽取到顶空瓶中。
顶空瓶中的气相是样品中挥发性化合物的浓缩形式。
3. 色谱条件设置:使用气相色谱仪,设置适当的色谱柱和色谱条件。
选择合适的色谱柱型号和尺寸,并设置适当的流速、温度梯度和检测器等参数。
常见的色谱柱选择包括毛细管柱、PTV柱或毛细管柱等。
4. 校准曲线制备:制备合适浓度范围的标准品,含有乙醇、甲醇、正丙醇、乙醛、丙酮、异丙醇和正丁醇等目标化合物。
使用适当的浓度梯度进行稀释,并进行质量浓度的准确测定。
5. 检测分析:将顶空采样瓶插入气相色谱仪中,进行样品的分析。
通过峰的保留时间和相对峰面积与校准曲线进行比较,定量分析样品中各目标化合物的浓度。
6. 数据处理:根据样品中各目标化合物的峰面积和校准曲线,计算出其对应的浓度。
可以使用计算机软件对数据进行进一步处理和分析。
需要注意的是,该方法是一种常见的分析方法,在实际操作中可能根据不同的样品性质和实验室条件进行适当改进和调整。
在实验过程中,应遵循相关的实验安全规范,注意仪器的操作规程。
血液中乙醇含量的色谱法测定
血液中乙醇含量的色谱法测定目的:建立一种简便、快速、准确、可靠的顶空气相色谱法对血中乙醇进行定性、定量分析。
方法:采用顶空进样器,利用气体对挥发性物质的萃取原理进行样品前处理,叔丁醇为内标物,气相色谱仪进行分离分析,用保留时间定性,内标标准曲线法定量。
结果:该方法线性范围为0.2~2.0 mg/ml,方法回收率为100.21%,最低检测限(the lowest limit of detection,LLOD)为0.01 mg/ml。
结论:该方法可用于法医毒物分析血中乙醇的检测及实验室能力认可中能力验证计划样品的测定,结果令人满意。
标签:法医毒物分;顶空气相色谱法;血液;乙醇我国交通法规定,驾驶员血液中乙醇浓度大于或者等于0.2 mg/ml,小于0.8 mg/ml的驾驶行为为酒后驾车,乙醇浓度大于或者等于0.8 mg/ml的驾驶行为为醉酒驾车[1-2]。
“酒驾”、“醉驾”是当前道路交通事故的主要肇事原因之一。
本文在参考大量文献的基础上[3],对双柱双检测器顶空气相色谱法进行了探索,并取得了满意的结果,现报道如下。
1 材料与方法1.1 仪器和试剂俊齐GC2002气相色谱仪;顶空自动进样器(HS-16A);乙醇标准溶液(2.0 mg/ml,购自司法部司法鉴定科学技术研究所);叔丁醇(色谱纯)。
待测样品:CNAS Z0039样品1;CNAS Z0039样品2。
1.2 实验方法1.2.1 溶液配制乙醇标准储备液:用2.0 mg/ml逐级稀释为浓度1.6、1.2、1.0、0.8、0.4、0.2 mg/ml的乙醇标准储备液系列。
内标叔丁醇溶液:在十万分之一电子天平上准确称取一定量的叔丁醇(色谱纯)放入100 ml容量瓶中,用蒸馏水定容到刻度,使其浓度为4 mg/ml,作为叔丁醇储备液;准确移取一定量上述叔丁醇储备液放入250 ml容量瓶中,用蒸馏水定容到刻度,使其浓度为40 μg/ml,得内标叔丁醇标准溶液。
血液中乙醇含量的检测
顶空气相色谱法分析血液中乙醇含量的测定顶空GC 定量分析的最早应用就是1964年报道的测定血液中的乙醇浓度,经过多次改进后,这一方法已成为世界各国所普遍采用,主要用来测试酒后驾车司机血液中的乙醇浓度。
我公司血液中乙醇含量检测解决方案是参考国外同类检测方法,并基于《中华人民共和国公共安全行业标准》(GA/T 105-1995)而开发的自动顶空气相色谱法进行的定性及定量分析,本方案检测方法先进,仪器配置合理,操作简单,适合各级公安部门及司法鉴定中心配备。
分析方法简介(参照《中华人民共和国公共安全行业标准》制定)仪器配置方案 仪器名称规格及说明 参考价格 GC9890A 气相色谱仪主机,氢火焰检测器,填充柱及毛细管进样系统,程序升温,智能后开门系统DK100自动顶空进样器专用封口钳(1把),顶空瓶、盖、垫(100套)专用色谱柱根据样品的要求选配 色谱工作站双通道 外置总 价 分析图谱示例及说明分析条件色谱柱:[1]5%CARBOWAX 20M/Carbopack(80–120目) 2m ×2mm 玻璃填充柱。
[2]Porapak S (80-100目) 2m ×2mm 玻璃填充柱。
柱 温:柱[1]程序升温:始温70℃;速率5℃/min;终点170℃(5min)柱[2]程序升温:始温100℃;速率15℃/min;终点200℃(10min)检测器:火焰离子化检测器(FID )检测器温度:230℃ 汽化室温度:210℃ 载气(N2): 流速 20-35mL/min 燃气(H2)和空气:流速根据仪器条件选定 顶空条件 平衡温度:50℃; 平衡时间:10min (快速搅拌,若不搅拌则需平衡20min ) 阀输送管及定量管温度:80℃; 加压:13.8kPa(2psi) 加压时间:0.15min 充样时间:0.15min ; 压力平衡时间:0.15min 定量管:1.0ml。
适用用户:公安部门,司法鉴定中的医院,研究单位等。
顶空-气相色谱法测定血液中乙醇含量方法的研究
顶空-气相色谱法测定血液中乙醇含量方法的研究摘要:利用乙醇的挥发性,以叔丁醇为内标,用顶空-气相色谱火焰离子化检测器(FID),对血液中的乙醇含量进行分析,经与平行操作的乙醇对照品比较,以保留时间定性,用内标法、峰面积比进行定量。
该方法在0.5-400mg/100ml浓度范围内线性良好,回收率在95%-105%之间,方法检出限为0.01mg/100ml。
关键词:顶空气相色谱法血液乙醇内标乙醇是一种高效麻醉剂,研究表明,饮酒后由于乙醇的麻醉作用,人的中枢神经活动会变得迟钝,并延及运动神经和末梢神经,使手足活动迟缓,生理机能减退,视力、听力等感知能力降低[1]。
近年来,酒后驾车和酒精中毒事件日益增多,人体中乙醇含量的测定是诊断和治疗酒精中毒性疾病及对酒后引发的交通事故和刑事案件分析裁定的重要依据。
乙醇主要在胃吸收,约1 h-1.5 h可全部吸收[2]。
因此,血液乙醇含量分析对临床治疗效果监测和交通部门执法都有重要意义。
交通事故处理和临床治疗中常需快速、准确地检测血液中乙醇含量[3]。
目前,血液中乙醇含量测定有化学法、色质联用法、生物传感器法和气相色谱法等,这些已有的方法在实际应用中操作复杂,耗时长,或者成本较高,导致检测应用的局限性。
本研究建立一种无需样品前处理方法,对实验影响因素进行探讨和优化,确立了血液中乙醇含量快速测定的顶空气相色谱法。
1实验部分1.1仪器与试剂Agilent7890A气相色谱仪(配FID检测器),北京中兴DK-3001A型顶空进样器,精密移液器,色谱纯乙醇和叔丁醇。
1.2分析条件1.2.1色谱条件色谱柱:INNOWAX毛细柱 30m×0.32mm进样口温度:250℃柱温:60℃柱流量:3ml/min检测器温度:250℃分流比:10:1进样方式:顶空进样器进样氢气流量:30ml/min空气流量:400ml/min尾吹气流量:30ml/min载气:氮气1.2.2顶空进样器条件样品瓶温度:70℃阀箱温度:90℃管路温度:110℃1.3试剂制备1.3.1乙醇标准溶液的配置吸取5.02ml色谱纯乙醇至于200ml容量瓶中,添加重蒸馏水至刻度,混匀,得2000mg/100ml乙醇储备液。
血液酒精含量的检验方法
血液酒精含量的检验方法GA2009-07-27发布2009-12-01实施中华人民共和国公共安全行业标准GA/T842—2009血液酒精含量的检验方法Analysis method for ethanol concentration in blood中华人民共和国公安部发布前言本标准的附录A、附录B为资料性附录。
本标准由公安部道路交通管理标准化技术委员会提出并归口。
本标准负责起草单位:天津市公安交通管理局。
本标准参加起草单位:天津市天通司法鉴定中心。
本标准主要起草人:谢金荣、沈宇明、张灏、刘洪月、蔡红艳、刘俊芳。
血液酒精含量的检验方法1 范围本标准规定了血液酒精含量的顶空气相色谱检验方法。
本标准适用于道路交通执法活动中对人员血液中酒精(以下均称乙醇)、正丙醇的定性和定量分析。
2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB19522 车辆驾驶人员血液、呼气酒精含量阈值与检验GA/T122-1995 毒物分析名词术语3 术语和定义GB19522和GA/T122-1995中确立的术语和定义适用于本标准。
4 原理本方法利用乙醇的易挥发性,以叔丁醇为内标,用顶空气相色谱火焰离子化检测器进行检测;经与平行操作的乙醇标准品比较,以保留时间或相对保留时间定性,用内标法以乙醇对内标物的峰面积比进行定量分析。
5 试剂5.1 乙醇标准溶液吸取10.04mL或称取8.008g无水乙醇标准品(含量不小于99.9%)置于100mL容量瓶中,添加重蒸馏水至刻度,混匀,得8000mg/100mL乙醇储备液,将储备液稀释分别得到浓度为4000 mg/100mL、2000mg/100mL、1000mg/100mL、100mg/100mL的乙醇标准使用液。
空顶气相色谱外标法测定全血中乙醇含量
空顶气相色谱外标法测定全血中乙醇含量改进全血中乙醇含量测定的方法。
方法采用顶空气相色谱外标法测定,峰面积定量,保留时间定性。
结果本法质量浓度在0.0~160.0mg/100ml,加标回收率在97.0~103.0%。
结论本法操作步骤简单、快速,线性关系良好,灵敏度高,适用于全血中乙醇含量的测定。
[关键词]气相色谱;外标法;全血;乙醇乙醇俗名酒精,我国酒文化源远流长,在婚庆、节日、宴会等都有饮酒的习惯。
但过量饮酒会严重抑制中枢神经系统,引起运动失常,呼吸中枢麻痹,严重会导致死亡。
血液中乙醇浓度在200~400mg/100ml为严重中毒,400mg/100ml以上可致死[1]。
近年来因饮酒驾车而引起重、特大交通事故不计其数,《中华人民共和国道路交通安全法》第九十一条规定:严禁机动车驾驶员酒后驾车,这就要求建立一个快速、准确检测全血中乙醇含量的方法。
血中乙醇检测方法有重铬酸钾比色法[1],顶空气相色谱法[2],直接进样气相色谱法[3],叔丁醇作内标物的气相色谱检测方法[4~5],呼出气体酒精含量测定仪现场检测法。
本文研究了顶空气相色谱--外标法测定全血中乙醇含量,该法简便、快速、准确。
结果满意。
1 材料与方法1.1原理在一定温度下,乙醇在密闭条件下,经过一定时间,气液达到平衡,吸取一定体积液上气体,通过GDX-102柱子分离,FID检测器分析,以保留时间定性,峰面积定量,利用外标法计算样品中乙醇的含量。
1.2仪器GC-SC6000气相色谱仪(重庆川仪九厂),带FID检测器,GDX-102不锈钢填充柱2m×3mm(重庆川仪九厂),DK-3001A型顶空进样器(北京中兴分析仪器新技术研究所),顶空瓶(20ml),抗凝管5ml。
1.3 试剂乙醇标准物质(国家标准物质研究中心),8000mg/100ml。
1.4 分析步骤1.4.1 色谱条件汽化室180℃,检测室180℃,柱箱150℃,氮气20ml/min,氢气30ml/min ,空气100ml/min。
气相色谱检测血液中乙醇含量方法探讨
气相色谱检测血液中乙醇含量方法探讨摘要:目的:通过实验探究分析气相色谱法在检测血液中乙醇含量时具体的操作流程。
方法:在本次实验探究过程中使用一次性注射器代替顶空进样装置,完成相应的实验探究过程,并且选择适量样品放置在顶空瓶中,将温度设置为80℃进行恒温水浴,水浴时间控制在15分钟,然后取液体上部气体两毫升进行气相色谱检测分析和测定。
结果:在选择的血液样本中分别加入不同标准的乙醇样品,然后完成加标回收测定操作,并且要保证其回收率以及回收率的标准偏差等均在指定范围内。
结论:通过以上实验探究流程得出的实验探究结果准确性相对较高,并且相关检测结果存在的误差在规定范围之内,此种检测流程的方法简单可靠,对于基层疾控中心实验室来说,适用性较强。
关键词:气相色谱检测血液乙醇含量方法引言:通过实验探究证明,人类在服用大量酒精以后,可能会出现幻觉或者昏昏欲睡以及思维迟钝等问题。
如果在酒后存在驾驶行为,将会造成严重的安全隐患,因此需要对人体血液中乙醇含量进行全面测定,并且要提高测定的准确性和测定效率。
利用气相色谱检测的方法可以辅助交警系统完成人体内血液乙醇含量的快速测定工作,进而为防止酒后驾驶,保证交通安全做好保障。
同时因为酒驾和醉驾在处罚的过程中标准不同,因此还需要疾控中心实验室提供更加准确的数据,为得出合理的惩罚结果提供更多理论依据。
1.资料与方法1.1仪器与试剂在本次实验操作过程中,所选择的实验仪器和试剂主要包含了气相色谱仪、FID检测器以及 N2000色谱工作站和顶空瓶等。
同时还需要准备容量为5毫升的一次性注射器以及乙醇标准品。
要选择玻璃毛细血管,并且将其设定的温度控制在70℃左右,然后要将FID检测器的温度控制在250℃,进样的温度控制为200℃,氮气的流速控制为每分钟30毫升,空气的流速控制为每分钟300毫升,氢气的流速控制为每分钟30毫升,同时利用叔丁醇物质作为内标。
1.2实验方法分析在进行检测的过程中,首先要完成相关乙醇标准品的制定过程,要吸取10毫升左右的无水乙醇标准品放置在容量为100毫升的容量瓶中,然后向其中加入蒸馏水,并且进行混匀操作,得到每100毫升溶液中8000毫克的乙醇储备液,再进行稀释操作,最终稀释为每100毫升溶液中分别为1000毫克、2000毫克和4000毫克的低中高各标准乙醇溶液。
顶空气相色谱法测定小鼠血液中乙醇的浓度
顶空气相色谱法测定小鼠血液中乙醇的浓度雷红伟,高铁祥,田先翔,杨 敏,陈 靓(湖北中医学院药学院,湖北武汉430065) 摘要:目的 建立测定小鼠血液乙醇的浓度的灵敏方法。
方法 取仲丁醇标液1m l和血样0125m l放入顶空瓶中,用内衬聚四氟乙烯膜的硅垫密封,置电热恒温器中60℃加热平衡30m in,气相色谱仪测定小鼠血液的乙醇浓度。
结果 校正因子Fi/Fs的平均值为31686,平均偏差为2115%。
结论 本方法是测定血液乙醇浓度简便、灵敏、有效的方法。
关键词:顶空气相色谱法;血药浓度;乙醇;仲丁醇中图分类号:R96911 文献标识码:A 文章编号:1008-987X(2007)02-0037-02D e tec ti o n o f the A l co ho l Co ncen tra ti o n i n R a ts’B l o o d byHead sp ace Ga s C h r om a t o g rap hHong wei Lei,Tiexiang Gao,Xianxiang Tian,et,al(11Depart m ent of Phar macol ogy,Phar maceutic of Hubei Chinese medicfal college W uhan430065) Ab s trac t:O b j ec ti ve:To detect the alcohol concentrati on in Rats’bl ood.M ethods:Sec-butyl alcohol is used as the inter2 nal standard and,heated at the te mperature of60℃and balanced f or30m inutes.Heads pace gas chr omat ograph is adop ted t o detect the alcohol concentrati on in Rats’bl ood.Results:The average value of correcti on fact or Fi/Fs is3.686,and the average deviati on is2.15%.Conclusi ons:Heads pace gas chr omat ograph is the si m p le,flexible and effective method t o detect the alco2 hol concentrati on in Rats bl ood.Ke y wo rd s:Heads pace gas chr omat ograph;B l ood concentrati on;A lcohol;Sec-butyl alcohol 血液乙醇含量测定,一般采用三氯醋酸稀释[1],离心后取上清液经微孔滤膜过滤,再以气相色谱法测定。
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司法鉴定技术规范
SF/Z JD0107001——2016
血液中乙醇的测定
顶空气相色谱法
中华人民共和国司法部司法鉴定管理局发布
目次
前言 (I)
1 范围 (1)
2 规范性引用文件 (1)
3 原理 (1)
4 试剂和材料 (1)
5 仪器 (1)
6 测定步骤 (2)
7 结果计算 (3)
附录A (资料性附录)乙醇对照品和内标气相色谱图 (4)
附录B (资料性附录)校准曲线 (5)
前言
本技术规范按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本技术规范的附录A和附录B为资料性附录。
本技术规范由司法部司法鉴定科学技术研究所提出。
本技术规范由司法部司法鉴定管理局归口。
本技术规范起草单位:司法部司法鉴定科学技术研究所。
本技术规范主要起草人:卓先义、刘伟、向平、沈保华、卜俊、马栋、严慧。
本技术规范所代替规范的历次版本发布情况为:SF/Z JD0107001——2010。
血液中乙醇的测定
顶空气相色谱法
1 范围
本技术规范规定了血液中乙醇的顶空气相色谱测定方法。
本技术规范适用于血液中乙醇的定性及定量分析。
本技术规范的方法检出限为0.01mg/mL;定量下限为0.05mg/mL。
2 规范性引用文件
下列文件对于本技术规范的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本技术规范。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本技术规范。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682-2008,ISO 3696:1987,MOD)
GA/T 122 毒物分析名词术语
3 原理
本法利用乙醇的易挥发性,以叔丁醇为内标,用顶空气相色谱火焰离子化检测器进行检测,经与平行操作的乙醇对照品比较,以保留时间进行定性分析;以峰面积为依据,用内标法定量。
4 试剂和材料
除另有说明外,水为GB/T 6682规定的二级水。
4.1 乙醇
色谱纯。
4.2 乙醇标准溶液
精密称取适量乙醇,用水配成10.0mg/mL乙醇标准储备溶液。
储备液在冰箱中冷藏密闭保存,有效期为6个月。
试验中所用其它浓度的标准溶液均从上述储备液稀释而得,在冰箱中冷藏密闭保存,有效期为3个月。
4.3 叔丁醇
色谱纯。
4.4 叔丁醇溶液
精密称取适量叔丁醇,用水配成5.0mg/mL叔丁醇储备液。
储备液在冰箱中冷藏密闭保存,有效期为12个月。
将储备液用水稀释,得40.0μg/mL叔丁醇内标工作液,在冰箱中冷藏密闭保存,有效期为6个月。
5 仪器
5.1 气相色谱仪
配火焰离子化检测器(FID)。
5.2 顶空进样器
配1mL定量进样环。
5.3 样品瓶
10mL,顶空自动进样器用。
5.4 硅橡胶垫
5.5 铝帽
5.6 密封钳
5.7 精密移液器
5.8 自动稀释仪
6 测定步骤
6.1 样品处理
用精密移液器或自动稀释仪取待测血液0.10 mL及0.50 mL 40.0μg/mL 叔丁醇内标工作液,加入样品瓶内,盖上硅橡胶垫,用密封钳加封铝帽,混匀。
6.2 测定
6.2.1 顶空气相色谱测定参考条件
a)色谱柱(1):DB-ALC1(30m⨯0.32mm⨯1.8μm)石英毛细管柱或相当者;
柱温:恒温40︒C;
色谱柱(2):DB-ALC2(30m⨯0.32mm⨯1.2μm)石英毛细管柱或相当者;
柱温:恒温40︒C;
b)载气:氮气,纯度≥99.999%,流速8mL/min;
c)进样口温度:150︒C;
d)检测器温度:250︒C;
e)加热箱温度:65︒C;
f)定量环温度:105︒C;
g)传输线温度:110︒C;
h)气相循环时间:3.5min;
i)样品瓶加热平衡时间:10.0min;
j)样品瓶加压时间:0.10min;
k)定量环充满时间:0.10min;
l)定量环平衡时间:0.05min;
m)进样时间:1.00min。
6.2.2 定性测定
样品溶液按照顶空气相色谱测定条件测定,以叔丁醇为内标,记录色谱峰的保留时间。
将待测样品色谱峰的保留时间与乙醇标准对照品的保留时间比较,相对误差在±2%内,空白对照样品内标物色谱峰正常而无乙醇的色谱峰,一般可以认为待测样品中含有乙醇;必要时,选择不同的色谱条件或用气相色
谱-质谱法确证。
如果内标物色谱峰正常,而无乙醇的色谱峰时,可认为检验结果为阴性。
乙醇对照品和内标气相色谱图,参见附录A。
6.2.3 定量测定
本方法采用内标法-校准曲线法或内标法-单点校正法定量测定。
6.2.3.1 内标法-校准曲线法
采用内标-校准曲线法测定(见附录B)。
将乙醇对照品溶液进样,以乙醇和内标峰面积比为纵坐标,乙醇对照品工作溶液浓度为横坐标绘制标准曲线,用标准曲线对待测样品进行定量,所测样品中乙醇的浓度值应在线性范围内。
6.2.3.2 内标法-单点校正法
待测血液样品乙醇浓度在标准溶液浓度的±30%内可用单点法定量。
6.3 平行试验
按以上步骤对同一待测样品进行平行试验。
单柱单检测器两份样品测定结果按两份样品的平均值计算,双样相对相差不得超过10%(有凝血块的血样不超过15%)。
双样相对相差按式(1)计算:
| C1 - C2|
双样相对相差(%)= −−−−−⨯ 100 (1)
⎺C
式中:
C1、C2−−两份样品平行定量测定的结果;
⎺C −−两份样品平行定量测定结果的平均值(C1+C2)/2。
双柱双检测器两份样品测定结果的相对标准偏差RSD(%)若不超过5%时(有凝血块的血样不超过10%),结果按两份样品结果的平均值计算。
7 结果计算
血液中乙醇浓度测定采用内标法-校准曲线法定量或按式(2)计算:
A⨯ A i′⨯c
C = −−−−−− (2)
A′⨯A i
式中:
C−−血液样品中乙醇浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL);
A−−血液样品中乙醇的峰面积;
A′−−标准溶液中乙醇的峰面积;
A i′−−标准溶液中内标物的峰面积;
A i−−血液样品中内标物的峰面积;
c−−标准溶液中乙醇浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL)。
附录A
(资料性附录)
乙醇对照品和内标气相色谱图
A.1 按色谱柱(1)条件得乙醇对照品和内标气相色谱图,见图A.1。
图A.1 按色谱柱(1)条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图A.2 按色谱柱(2)条件得乙醇对照品和内标气相色谱图,见图A.2。
图A.2 按色谱柱(2)条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图
附录B
(资料性附录)
校准曲线
配制乙醇浓度为0.10、0.20、0.50、0.80、1.00、2.00、3.00mg/mL的水溶液,按6.1和6.2项下分析,每一浓度点取2份,以乙醇与内标叔丁醇的峰面积比对乙醇浓度做标准曲线。
按色谱柱(1)条件测得的标准曲线方程为X = 1.0761 C - 0.0162(r = 0.9997),按色谱柱(2)条件测得的标准曲线方程为X = 1.0655 C - 0.0177(r = 0.9997)。
式中X为乙醇与叔丁醇的峰面积比值,C 为乙醇工作溶液浓度(mg/mL)。