平面色谱法全解

4.定性和定量分析
• 定性分析
比较Rf值
• 定量分析
洗脱法 直接定量法 目视比较法 薄层扫描法
第三节
一、分离原理
纸色谱法
• 纸纤维为载体，吸着在上面水为固定相 • 属于正相分配色谱 • 极性或亲水性强的组分，K大，Rf值小， 反之……。
二、纸色谱法的实验条件
1.色谱纸的选择
• 对Rf值相差很小的化合物，宜采用慢速滤纸 • 对Rf值相差较大的化合物，则可用快速滤纸
吸附剂
硅胶 （1）含硅醇基，呈弱酸性 （2）原理：硅醇基(吸附中心)与极性基团形 成氢键 （3）应用：分离酸性和中性物质
（4） 活度：含水量高，活性级高，活度低 （5）活化：加热至100℃左右，除去吸附水 提高活度 （6）常用硅胶：
– 硅胶H，不含黏合剂 – 硅胶G，含煅石膏 – 硅胶GF254 含煅石膏和一种无机荧光剂，
展开剂
选择原则：根据被分离物质的极性
极性物质—活度低（活性级大）的吸附 剂-极性展开剂
看教材图19-3
混合溶剂作展开剂
先用单一溶剂展开，
若Rf值太小，则加入一定量极性强的溶剂， 如乙醇、丙酮等， 如果Rf值太大，则加入适量极性弱的溶剂(如 环己烷、石油醚等)，以降低极性。 可加入一定比例的酸或碱,使斑点集中。
3. 分配薄层色谱法
– 原理：多次分配的过程，分配系数 （溶解度）不等是实现分离前提 – 分类：正相色谱、反相色谱
• 正相色谱：水为固定相（硅胶载体），有机溶剂 为流动相（硅胶含17%水时，为分配色谱） 极性强的组分K大， Rf值小。
• 反相色谱：烷基化学键合相为固定相，水－有机 溶剂为流动相。极性强的组分K小， Rf值大。
2.固定相
• 水或甲酰胺、二甲基甲酰胺、丙二醇或缓冲 溶液。（酸、碱）
3.展开剂的选择 • 常用的展开剂
增加展开剂中极性，增大 Rf值；增加展开剂非极性，减小Rf值。 水饱和的有机溶剂，如水 饱和的正丁醇、正戊醇、酚等 析
4.操作步骤 点样、展开、显色、定性定量分
v L/t L ‘ R Rf u L0 / t L0
1 1 Rf 1 k 1 KV / V
s
m
K或K大组分，比移值小
1 Rf k Rf
第二节 薄层色谱法（TLC)
1.操作过程 制板-活化-点样-展开-显色-定性定量 2.吸附薄层色谱法 原理：固定相对组分有吸附作用 极性强的组分K大，Rf值小；极性 弱的组分……
第十九章 平面色谱法
在平面上进行分离的一种色谱方法。 • 纸色谱法 • 薄层色谱法
第一节平面色谱法的分类和原理
1. 分类
薄层Байду номын сангаас谱法：
吸附薄层色谱法
分配薄层色谱法


纸色谱法
薄层电泳法
2.有关参数 ①定性参数
比移值
Rf =L/L0 （0~1）
Rf =1（固定相不吸附组分）
Rf =0，在原点不动
一般：0.2~0.8
0.3~0.5最佳
相对比移值（Rr)
Rr = Rf (i)/Rf (s)=L(i)/L(s) • Rr值可以大于1，也可以小于1。
• 重现性比Rf值好（有参考物质）
②相平衡参数
• 分配系数K= Cs/Cm • 容量因子 k=C sVs/CmVm • K、k与Rf值的关系：
1 保留比 ‘ R 1 k
氧化铝
（1）活度也与含水量有关 （2）有碱性、中性、酸性氧化铝 （3）同硅胶，分为Ⅰ -Ⅴ 级 活性高-低
吸附色谱展开剂(流动相) 极性强的溶剂洗脱能力强 常用溶剂的极性强弱顺序： 水＞酸＞吡啶＞甲醇＞乙醇＞正丙醇＞ 丙酮＞乙酸乙酯＞乙醚＞氯仿＞二氯甲烷 ＞甲苯＞苯＞三氯乙烷＞四氯化碳>环己烷 >石油醚