植物激素脱落酸(ABA)快速检测试剂盒试剂盒使用说明书
常见植物激素储存液使用说明书
第1页共5页常见植物激素储存液使用说明书储存条件：不同激素，根据产品标签及说明储存。
产品组成：产品内容产品货号规格NAA 储存液（1mg/mL ，除菌）PH101-100mL IAA 储存液（1mg/mL ，除菌）PH102-100mL IBA 储存液（1mg/mL ，除菌）PH103-100mL 6-BA 储存液（1mg/mL ，除菌）PH104-100mL 2,4-D 储存液（1mg/mL ，除菌）PH105-100mL GA3储存液（1mg/mL ，除菌）PH106-100mL TDZ 储存液（除菌）PH107-100mL 6-KT 储存液（1mg/mL ，除菌）PH108-100mL 脱落酸储存液（50mg/mL ，除菌）PH109-2×1mL 100mM 乙酰丁香酮溶液（除菌）SL9513-10mL 200mM 乙酰丁香酮溶液（除菌）SL95131-10mL 2.5M 氯化钙溶液（除菌，基因枪转化）PPT9510-500mL 麦草畏溶液（1mg/mL ，除菌）PH113-100mL 赤霉素GA4+7储存液（1mg/mL ，除菌）PH151-100mL 草甘膦溶液（100mg/mL ）CB24711-100mL ≤1mM 水杨酸储存液（除菌）PH131X-100mL 油菜素内酯储存液（1mg/mL ，除菌）PH161-10mL 反玉米素储存液（2mg/mL ，除菌）PH112-50mL说明书1份第2页共5页产品说明：1.Coolaber 所有植物激素均经过滤除菌处理，可以根据工作浓度，稀释后使用。
2.常规工作浓度，所有激素母液可以直接用水稀释后使用。
3.如稀释倍数小，建议用附录说明溶剂稀释，防止激素析出。
4.激素浓度可根据需要定做。
附录：常见激素种类，储存，溶解及对于植物生长的调节作用说明种类名称母液浓度溶剂储存作用生长素IAA 1mg/mL NaOH -20℃促进细胞伸长生长，调节细胞膜上的氢质子通道，使细胞壁酸化，细胞结构松弛，细胞可以膨胀生长，防止落花落果，作用具有两重性，低浓度促进，高浓度抑制。
植物激素的配制方法灭菌方法
母液浓度
生长素
IBA（3-吲哚丁酸）用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再缓慢加入水定容到一定浓度。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
IAA（3-吲哚乙酸）用适量无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再缓慢加入水定容到一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。
0.2g/L
α-NAA（a-萘乙酸）可用1M NaOH彻底溶解后，再加水定溶到一定浓度。
0.2g/L
ZT（反式玉米素）先溶于适量1M NaOH中，再加水至一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。（反式用少量1M NaOH溶解后，再加水定容至一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。
0.2g/L
赤霉素
GA3先溶于适量无水乙醇中，再加水定容到一定浓度。
除菌方式：抽滤除菌。
0.2g/L
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
2，4-D（2,4-二氯苯氧乙酸）用无水乙醇或1M NaOH彻底溶解后，再加水定容至一定浓度。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
0.2g/L
细胞分裂素
KT（激动素6-糖氨基嘌呤）和6-BA（6-苄氨基嘌呤）先溶于少量1M NaOH中，再加水定容。
除菌方式：与培养基高压共灭菌。
配制生长素类，例如IAA、NAA、2.4-D、IBA，应先用少量95%乙醇或无水乙醇充分溶解，或者用1mol/L的NaOH溶解，然后用蒸馏水定容到一定的浓度。
细胞分裂素，例如KT，应先用少量95%乙醇或无水乙醇加3~4滴1mol/L的盐酸溶解，再用蒸馏水定容。
配制生物素，用稀氨水溶解，然后定容。
配制方法
植物激素配制方法总结
原则
植物激素：每种激素必须单独配制成母液，浓度为0.1mg/ml，0.5mg/ml，1.0mg/ml，激素浓度的表示方法多种，ppm（mg/L）、mol/L、mg/ml，用时根据需要取用。
植物激素的hplc测定标准曲线的制作
植物激素的hplc测定标准曲线的制作
制作植物激素的HPLC测定标准曲线主要包括以下步骤：
1. 准备工作
- 购买合适纯品植物激素标准品，例如植物生长素（IAA）、生长素酸（IAA）、脱落酸（ABA）等。
- 找到合适的溶剂用于制备标准品的浓度梯度溶液。
一般情
况下，可以选择高纯度的有机溶剂，如甲醇、乙酸乙酯等。
2. 制备标准品溶液
- 使用分析天平称量适量的纯品植物激素到不同容量的瓶中。
- 使用溶剂逐一溶解不同容量瓶中的植物激素，制备出一系
列浓度梯度的标准品溶液。
3. 准备HPLC流动相
- 根据HPLC仪器说明书的要求，配置合适的流动相。
一般
情况下，可以选择有机溶剂和缓冲溶液的混合物作为流动相。
4. 进行HPLC分析
- 调整HPLC仪器的参数，如流速、柱温、检测波长等。
- 依次注入不同浓度的标准品溶液到HPLC仪器中，记录各
自的保留时间和峰面积。
5. 绘制标准曲线
- 将标准品溶液的浓度与相应的峰面积进行线性回归分析。
- 通过线性回归方程计算植物激素在样品中的浓度。
需要特别注意的是，在制作植物激素的HPLC测定标准曲线时，应保证各个工序的操作的高度准确和可重复性。
同时，应注意选择适用的HPLC仪器和柱以及合适的检测波长。
不同的植物激素可能需要不同的分析条件，所以在制作标准曲线之前最好先进行一些预实验以确定最佳的分析条件。
喷科富S-诱抗素（脱落酸ABA）在各种作物上的用法用量
喷科富S-诱抗素（脱落酸ABA）在各种作物上的⽤法⽤量功能介绍：喷科富Ｓ－诱抗素，是⼀种植物内源重要的调节物质，能够协调植株体内其他激素（⽣长素、⾚霉素、细胞分裂素等）的平衡，诱导作物启动120多种抗逆基因，增强作物抗旱、抗病、抗⾍、抗寒、耐涝、耐盐碱的能⼒；加速营养物质积累，提⾼⽔肥利⽤率，在减少投⼊成本的同时，增加农作物产量，⼤⼤提⾼种植效益。
Ø 优势介绍：抗冻抗寒诱导植物体内150多种抗性基因和蛋⽩的表达;增强植物抗寒抗冻的能⼒，帮助作物抵抗早春期间的低温冷害。
抗病抗逆提⾼植物的抗旱⼒。
耐盐⼒等不良环境的抵抗能⼒。
改善品质调节⽣长，增加⼲物质积累，膨⼤果实，增加产量。
提升果实甜度，着⾊好，耐存储，提升产品品质。
转⾊增甜加速作物转⾊，果⾯鲜亮，克服传统转⾊产品引起的落果、黄化等副作⽤。
健壮植株⽣根壮苗，使作物根系发达，植株健壮。
抑制蒸腾关闭⽓孔，抑制蒸腾作⽤。
作为蒸腾抑制剂使⽤。
调节⽣长能抑制杆伸长，并增加穗重,可抗作物倒伏。
Ø 应⽤推荐：作物类别使⽤时间和⽅法使⽤效果⼩麦苗期、返青期、孕穗期、灌浆期：稀释800-1000倍，喷雾处理；⽤药间隔10-15天，可多次使⽤；⼩麦⼲尖少，黄叶率下降，能显著提⾼⼩麦的分蘖数和次⽣根数，有利于穗粒数的形成和粒重的增加；有效增强⼩麦抗旱、抗寒性。
⽔稻苗期、分蘖期、孕穗期、灌浆期：稀释800倍，喷雾处理；⽤药间隔10-15天，可多次使⽤；缩短缓苗期，提⾼存活率，增加分蘖数，防倒伏；均衡植株营养⽣长和⽣殖⽣长，提⾼⽔肥吸收和抗病能⼒，提⾼结实灌浆，增产。
⽟⽶苗期：稀释800倍，喷雾处理；⽤药间隔10-15天，可多次使⽤；促进⽣根（汽⽣根增多），杆壮、叶⾯较宽⼤，穗位下移，单穗成熟度较好，防秃尖，抗粗缩病，颗粒饱满。
花⽣苗期、下针期、膨果期：稀释800-1000倍，喷雾处理；⽤药间隔10-15天，可多次使⽤；促根壮苗、团棵好、下针多，防早衰。
植物脱落酸测定方法
植物脱落酸测定方法《植物脱落酸测定方法》引言：植物脱落酸（abscisic acid，ABA）是一种重要的植物生长调节物质，对抗逆境环境具有重要的作用。
因此，准确测定植物体内ABA的含量对于研究植物逆境响应机制及植物生理生态学具有重要意义。
本篇介绍了几种常见的植物脱落酸测定方法，以供研究者参考。
方法一：高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是测定植物脱落酸含量的常用方法之一。
首先，将待测植物材料研磨成粉末，并用乙酸乙酯提取脱落酸。
然后，将提取物经过洗脱、浓缩、过滤等处理步骤后注入高效液相色谱系统中进行分析。
通过在特定的流动相条件下，在色谱柱上分离和检测脱落酸的峰值，并根据标准曲线计算出样品中的脱落酸含量。
方法二：气相色谱质谱法（GC-MS）气相色谱质谱法是另一种常用的植物脱落酸测定方法。
该方法首先将待测植物材料进行研磨，并用甲酸提取脱落酸。
然后，用氮气吹扫将脱落酸转化为甲酯化产物，并将产物通过气相色谱柱分离。
最后，通过质谱检测和数据分析来定量脱落酸的含量。
方法三：酶联免疫吸附测定法（ELISA）酶联免疫吸附测定法是一种快速、灵敏且经济的测定植物脱落酸的方法。
首先，将待测植物材料研磨，并用适当的缓冲液提取脱落酸。
接下来，将提取物加入预先涂有特异性的抗体的微孔板中，并进行孵育。
经过洗涤后，加入与抗体结合的酶标记抗体，并进行二级孵育。
最后，通过加入底物并测定酶标记物的反应产物的吸光度来定量脱落酸的含量。
结论：以上介绍的三种方法都是测定植物脱落酸含量的常用方法，每种方法各有其优势和适用范围。
在选择测定方法时，需要考虑到实验条件、仪器设备和检测费用等因素。
因此，研究者可以根据自己的需要选择合适的方法来测定植物体内脱落酸的含量，以推动植物生理生态学领域的研究进展。
参考文献：1. Liu F, Xiang Y. (2015). Determination of abscisic acid in wheat using liquid chromatography-tandem mass spectrometry and the effect of baking. Food Chemistry, 15: 331-336.2. Parkyatnyuk E, et al. (2013). Enzyme-linked immunosorbent assay for abscisic acid: Modifications to eliminate maltose-dependent stimulation of antibody activity. Analytical Biochemistry, 435: 129-135.3. Steward FC, et al. (1967). Abscisic acid determinations in plant extracts by immunoassay. Plant Physiology, 42: 771-777.。
植物脱落酸葡萄糖酯（ABA-GE）试剂盒（ELISA）使用说明书
植物脱落酸葡萄糖酯（ABA-GE）试剂盒（ELISA）使用说明书⚫本试剂盒用于体外定量检测组织、细胞及相关液体样本中植物脱落酸葡萄糖酯（ABA-GE）的含量。
⚫有效期：6个月⚫保存条件：2-8℃⚫本试剂盒仅供科研使用，不得用于临床诊断实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被植物脱落酸葡萄糖酯（ABA-GE）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的植物脱落酸葡萄糖酯（ABA-GE）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样本处理及要求1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。
为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。
最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
植物激素脱落酸(ABA)ELISA试剂盒使用说明书
植物激素脱落酸(ABA)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞及其它相关样本中植物激素脱落酸(ABA)含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物激素脱落酸(ABA)水平。
用纯化的植物激素脱落酸(ABA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入植物激素脱落酸(ABA)，再与HRP标记的ABA抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的植物激素脱落酸(ABA)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物激素脱落酸(ABA)浓度。
标本要求：1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为150μg/L，100μg/L ，50μg/L，25μg/L，12.5μg/L）。
激素脱落酸ELISA试剂盒
激素脱落酸ELISA试剂盒激素脱落酸ELISA试剂盒供应商：上海乔羽生物有限公司ELISA试剂盒规格：(1) 规格：96T 可以测90个样，5个标准孔，1个空白孔(2) 规格：48T 可以测42个样，5个标准孔，1个空白孔激素脱落酸ELISA试剂盒上海乔羽生物有限公司专业的提供elisa试剂盒，进口/国产elisa 试剂盒，elisa试剂盒价格，elisa试剂盒说明书，专业elisa试剂盒说明书生产商,老品牌ELISA试剂盒,ELISA试剂盒报价,elisa试剂盒品牌,生化试剂，血清，标准品|对照品、培养基等科研生化试剂，品质保证，技术严格，无效果退款退货，欢迎来电咨询及订购。
激素脱落酸ELISA试剂盒试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存elisa试剂盒价格，elisa试剂盒说明书，elisa检测试剂盒激素脱落酸ELISA试剂盒Elisa kit operation procedure:3 temperature Education: with the sealing plate membrane sealing plate 37 degrees Celsius for 30 minutes.4 with liquid: 30 (48T of 20 times) times the concentration of washing liquid with distilled water 30 (20 times of 48T) diluted after the backup.5. Washing: be careful torn off the seal plate membrane, discard liquid, drying, washing liquid to fill each hole, standing for 30 seconds after the discard, repeat 5 times, pat dry.6 enzymes: each hole is added to the enzyme labeled reagent 50 mu L, except the blank hole.Sampling and storage of ELISA KitSerum - using a serum separating tube to make the sample at room temperature or clot for two hours overnightCentrifugation of freshly prepared serum was measured at approximately 1000 x G. 4oC for 20 minImmediately or store the samples at -20 degrees C or diluted with 80oC. Avoid repeated freezing and thawing cycles.Plasma plasma collection with EDTA or heparin as an anticoagulant. 15 minutes, centrifugal samples1000 * G in 2 to 8 degrees Celsius for 30 minutes. Removal of plasma and immediate detection or storage of samples激素脱落酸ELISA试剂盒Operation precautions:The reagent should label storage instructions, return to room temperature before use. The standard should be discarded after thinning, can not be saved.No - in the experiment of the plate should be immediately put back the bag, sealed to prevent spoilage.- no other reagents should be packaged or covered. Do not mix different batches of reagents. Shelf life before use.] using disposable suction head to avoid cross contamination and draw the termination of the liquid and the substrate of a and B liquid, avoid using a portion of the metal sample adding device.Plastic container configuration - use clean washing liquid. All samples of ingredients and mix well before use in the kit.The A substrate should be volatile, avoid long time to open the lid. Substrate B is sensitive to light and avoid prolonged exposure to light. Avoid hand contact, toxic. After completion of the experiment should be immediately read od.The addition of reagents should be consistent in order to ensure that all reaction plate hole incubation time.The temperature in accordance with the amount of liquid and the sequence of instructions indicated time, sterile operation激素脱落酸ELISA试剂盒Kit performance1 sensitivity: the minimum detection concentration is less than 1 standard. Linearity of dilution. Sample linear regression and the expected concentration correlation coefficient R value is 0.990.2 specificity: no reaction with other cytokines.3 repeatability: the variation coefficient of the plate and the plate are all less than 10%.Result judgment and analysis1, the instrument value: Yu Bo 450nm ELISA od read the hole on the instrument2, to the OD value for the longitudinal axis (y), corresponding HLA-B27 standard concentration as the abscissa (x), do the corresponding curve, HLA-B27 content in the sample can be according to its OD value by standard curve conversion out corresponding concentration.3, the detection value range: 0-8.0IU/ml4, sensitivity: 0.01 IU/ml友情提醒：公司经营的产品均为科研实验用，不可用于临床应用。
植物生长激素使用指南
植物生长激素使用指南1. 引言植物生长激素是一类广泛应用于农业和园艺领域的重要工具，能够调节植物生长和发育。
它们可以促进根系生长、花芽分化、果实发育等，从而提高农作物产量和品质。
本文将为您介绍植物生长激素的分类、作用机制以及正确的使用方法。
2. 植物生长激素分类在自然界中，植物生长激素主要分为五类：赤霉素（GA）、生长素（IAA）、脱落酸（ABA）、细胞分裂素（CYT）和顶端去除活性因子（CTA）。
每一类都有其独特的功能和作用机制。
2.1 赤霉素（GA）赤霉素是一种促进幼苗茎伸长的激素，它能够促进细胞的伸长分裂并加速植物的垂直生长。
赤霉素还具有促进花芽分化和果实发育的作用。
2.2 生长素（IAA）生长素是一种调节植物各个方向生长的激素。
它能够促进细胞的伸长和分裂，并参与根系发育、侧芽伸长以及果实膨大等过程。
2.3 脱落酸（ABA）脱落酸是一种抑制植物生长的激素。
它在干旱、低温等环境胁迫下起到保护作用，通过抑制种子发芽、幼苗伸长和花芽分化等，减少水分蒸腾和能量消耗。
2.4 细胞分裂素（CYT）细胞分裂素是植物生长过程中必不可少的一类激素，能够促进细胞的分裂和增殖，从而增加组织和器官的量。
2.5 顶端去除活性因子（CTA）顶端去除活性因子在信号传导中起着重要作用，它能够促进茎尖合上和弯曲，从而调整植物在光照条件下的生长方向。
3. 植物生长激素的作用机制不同类型的植物生长激素通过不同的机制来调控植物生长和发育。
3.1 赤霉素（GA）作用机制赤霉素通过影响细胞壁松弛酶活性，引起细胞伸展和延伸。
此外，赤霉素还可以促进DNA合成、RNA合成和蛋白质合成等基本代谢过程。
3.2 生长素（IAA）作用机制生长素主要通过与细胞壁相关的信号传导途径发挥作用。
它可以结合与细胞壁松弛相关的酶，并调节细胞壁松弛，从而引起细胞伸展和延伸。
3.3 脱落酸（ABA）作用机制脱落酸主要通过调节蛋白质磷酸化、离子通道活性以及基因转录等途径来发挥功能。
脱落酸(ABA)受体研究(原创)
脱落酸（ABA）受体研究（原创）脱落酸(ABA)受体研究(原创)植物激素是植物体内合成的一批微量信号分子,通过整合不断变化的外界环境与内部发育信号,从分子、细胞、组织和器官水平上调控植物的生理生化反应和形态建成,确保植物正常的生长发育。
受体是激素初始作用发生的位点，植物激素受体是指能与植物激素专一结合，并在结合后能引起特定的激素生理生化效应的物质。
脱落酸(abscisic acid,ABA)调节种子发育、幼苗生长、叶片气孔行为和营养生长向生殖生长转变等诸多植物生长发育过程,并在调节植物逆境适应性方面起着关键的作用。
植物细胞的ABA受体可能是多重的,在不同的条件下介导不同的生物学效应时,可能有不同的受体参与其中。
目前已经发现多个不同的受体。
ABA一、FCA受体Razem等采用抗-抗ABA抗体(AB2)筛选ABA处理过的大麦糊粉层cDNA表达文库,获得一全长cDNA(aba33),进而进行体外富集表达和蛋白特性鉴定,得到体外表达的具有潜在ABA受体特征的大麦糊粉蛋白ABAP1蛋白,该蛋白可在体外结合ABA。
ABAP1与拟南芥调控植物开花时间的蛋白FCA的氨基酸序列类似。
FLC(识别、结合并启动、调控MADS基因的表达)是一种MADS(能够编码具有调控功能的DNA结合蛋白)转录因子,是成花过渡过程中的主要抑制因子。
FCA是细胞核内一种RNA结合蛋白,通过与FLC的mRNA结合控制开花时间。
在RNA3′-末端的加工因子FY(跟染色质修饰或RNA修饰有关)参与下FCA通过mRNA前体成熟前剪切和多聚腺苷化自我调控自身的表达。
FCA是作为一种ABA受体调控植物开花的时间,但并不参与种子萌发和气孔关闭,推测在植物体内肯定还存在其他类型的ABA受体。
二、ABAR受体我国科学家在蚕豆中纯化了一个ABA结合蛋白ABAR,该蛋白质为镁离子螯合酶的H亚基((magnesium-chelatase H subunit,ABAR/CHLH))(Zhang et al.,2002)。
植物脱落酸测定方法
植物脱落酸测定方法植物脱落酸测定方法是一种用于测定植物体内脱落酸含量的技术手段。
脱落酸又称为植物生长素（auxin），是一类具有促进植物生长和发育的植物激素。
测定植物脱落酸含量可以帮助我们了解植物的生理状态、响应外界环境变化的能力以及促进和抑制植物生长的机制。
本文将介绍几种常用的植物脱落酸测定方法。
首先是高效液相色谱法（HPLC），该方法利用高效液相色谱仪对植物组织中的脱落酸进行分离和定量。
测定前需要将植物样品研磨成粉末，然后使用有机溶剂提取植物中的脱落酸。
提取液经过预处理后，使用高效液相色谱仪进行分离和定量。
该方法具有测定速度快、灵敏度高和分离效果好的优点，但需要使用昂贵的仪器设备和特殊的试剂。
其次是酶联免疫吸附测定法（ELISA），该方法利用特异性抗体与脱落酸结合形成免疫复合物，通过检测免疫复合物的光学信号来确定脱落酸的含量。
该方法不需要分离和纯化样品中的脱落酸，操作简便、灵敏度高，可以同时测定多个样品，但需要配套的抗体和试剂。
第三种方法是生物测定法，该方法利用感生植物对脱落酸的特异生物学效应，测定植物样品中的脱落酸含量。
常用的感生植物包括纤维苋（Avena sativa）和豌豆（Pisum sativum）等。
测定方法包括种子萌发试验、生长促进试验和胚轴伸长试验等。
该方法操作简单、成本低，但具有一定的主观性和时效性。
最后是气相色谱法（GC），该方法通过将植物样品中的脱落酸转化为易于挥发的二氯苯酚酯衍生化物，然后使用气相色谱仪进行分离和定量。
该方法的优点是灵敏度高、精确度好，但需要较长的操作时间和复杂的操作步骤。
综上所述，植物脱落酸测定方法包括高效液相色谱法、酶联免疫吸附测定法、生物测定法和气相色谱法等。
每种方法都有其适用的场景和优缺点，研究人员可以根据自己的需求和实验条件选择合适的方法来测定植物脱落酸含量。
植物激素及理化指标检测书
► 积的变化不会影响影响定量结果。 内ꢉ法抵消了前处理的操作误差，乃至流动相、 检测器的影响。
匮＿ E-ꢂꢃꢄꢅ: ꢆꢇdꢈꢇ@bꢈꢉꢊꢆfbꢈꢉꢊꢋꢊꢆp
类别 游离态生长素 结合态生长素
生长素前体
脱落酸 游离态茉莉酸 结合态茉莉酸 茉莉酸前体 游离态水杨酸 结合态水杨酸
天然细胞分裂素
人工合成细胞分裂素 赤霉素系列 油菜素内酯
ꢸꢹꢺꢻꢺꢼꢽꢾ
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꣥꣦ꢌ꣑꣧꣨꣩ ꢐꢑ꣪曲线ꢒ
꣫ ꣬ ꣭꣮ꣂ꣯ꣂ ꣰ ꣱ ꣅꣲ꣯꣭ꣅꣳꣴ『＝ꣅ꣭꣯ꣅꣅꣵ ꣴꣶꢈꣷ꣸꣹tꣷꢠ꣺ ꣂ xꣻ꣄ꢭ
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比色法
乙醇提取-比色法测定
脱落酸(ABA)检测
脱落酸（ABA）检测
脱落酸（Abscisic acid，ABA），又称为脱落素、休眠素，广泛分布于高等植物体内，具有抑制细胞生长、促进叶子脱落和休眠等作用，广泛应用于农业生产中。
脱落酸分子结构式
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液相色谱质谱联用(HPLC-MS或LC-MS/MS)的方法，可检测各类样品中脱落酸含量变化。
此外，我们还提供其他植物激素检测服务，以及植物激素系列检测试剂盒产品，以满足您的不同需求。
样品制备
脱落酸提取方法（此部分涉及到公司的核心工艺，以下提供常规的提取工艺）
1）称量约0.5 g的新鲜植物样品；
2）液氮研磨至粉碎；
3）加入5 mL异丙醇/盐酸缓冲液，4℃震荡30 min；
4）加入10 mL二氯甲烷，4℃震荡30 min；
5）4℃，13000 rpm离心5 min，取下层有机相；
6）避光，氮气吹干有机相，用250 μL-500 μL甲醇(0.1%甲酸)溶解；
7）0.45 μm的微孔滤膜过滤，用HPLC-MS/MS检测。
HPLC和LC-MS测定脱落酸样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目报告
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 脱落酸含量信息
相关服务
植物激素HPLC检测植物激素LC-MS检测。
植物(plant)激素脱落酸(aba)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断植物（Plant）激素脱落酸（ABA）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被激素脱落酸（ABA）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的激素脱落酸（ABA）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本：请1000x g离心20分钟，取上清即可检测。
4.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
上海笃玛生物科技有限公司试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、5、10、20、40、80ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
植物激素调节植物体内发育和逆境适应
植物激素调节植物体内发育和逆境适应植物作为自然界的一种重要生物，其身体内部没有神经和免疫系统等特殊器官，但却能够感知周围环境并作出相应的反应。
而植物激素便是一种能够在植物体内传递信号，引起相应变化的分子。
植物激素的种类有多种，不同类型的激素在植物体内有着各自不同的作用，都对植物的发育和逆境适应起到不可或缺的作用。
一. 植物激素调节发育1. 原生质体激素（IAA）IAA是一种重要的植物生长素，对植物生长极其重要。
IAA在植物中的合成受到光照、温度、盐度等多种环境因素影响，它通过调节植物细胞壁的松紧度、细胞的长度和分裂等多种途径影响植物的生长发育。
例如，在根部和茎的顶端，IAA可以激活细胞伸长，促进植物向上或向下生长。
在花蕾中，IAA会抑制花蕾开放。
IAA还能促进叶片的生长，并提高光合作用的效率，让植物合成更多的糖类，为植物提供更多的能量和营养物质。
2. 脱落酸（ABA）ABA是一种植物生长素，它主要参与植物的逆境应答反应。
当植物体受到干旱、高温、盐碱等逆境时，ABA的合成量会增加，在植物体内传递信号，引起植物体内多种逆境应答反应，如开启保护性通道，调节植物体内水分平衡等。
除此之外，ABA还能调节种子休眠，促进干果成熟，保护植物体内的细胞和组织免受逆境的伤害。
3. 生长素（GA）生长素是植物体内最早被发现的生长素之一，它通过调节植物的细胞分裂、细胞壁的松紧度、构建植物的发育方向等多种途径影响植物的生长。
生长素能够促进植物生长，比如促进茎的伸长、根的生长等，还能够影响植物的开花与结果。
二. 植物激素调节逆境应答1. 脱落酸（ABA）ABA是调节植物逆境应答反应的重要激素之一。
除了在生理上促进植物在干旱、寒冷等环境下产生逆境应答反应之外，ABA还能够抑制植物在有水分的情况下的生长，保护植物免遭低温等逆境的伤害。
此外，ABA还能够改善植物在低温等逆境下的抗性，减缓植物受到低温等逆境的损伤程度，实现植物的生存和繁衍。
Abscisic acid (ABA) ELISA Kit说明书
Plant hormone abscisic acid (ABA) ELISA KitCatalog Number. CSB-E09159PlFor the quantitative determination of endogenic plant hormone abscisic acid (ABA) concentrations in plant tissues.This package insert must be read in its entirety before using this product.If You Have ProblemsTechnical Service Contact informationPhone: 86-27-87582341Fax: 86-27-87196150Email:****************Web: In order to obtain higher efficiency service, please ready to supply the lot number of the kit to us (found on the outside of the box).PRINCIPLE OF THE ASSAYThis assay employs the competitive inhibition enzyme immunoassay technique. The microtiter plate provided in this kit has been pre-coated with antigen. Standards or samples are added to the appropriate microtiter plate wells with an antibody specific for ABA. The competitive inhibition reaction is launched between with pre-coated ABA and ABA in samples with the antibody. Then add a Horseradish Peroxidase (HRP) conjugated goat-anti-rabbit IgG antibody. A substrate solution is added to the wells and the color develops in opposite to the amount of ABA in the sample. The color development is stopped and the intensity of the color is measured.DETECTION RANGE0.156 μg/ml-10 μg/ml.SENSITIVITYThe minimum detectable dose of plant ABA is typically less than 0.04 μg/ml.The sensitivity of this assay, or Lower Limit of Detection (LLD) was defined as the lowest protein concentration that could be differentiated from zero.CROSS-REACTION RATEAbscisic acid100%Gibberellin＜0.01%Indoleacetic acid ＜0.01%PRECISIONIntra-assay Precision (Precision within an assay): CV%<10%Three samples of known concentration were tested twenty times on one plate to assess.Inter-assay Precision (Precision between assays):CV%<20%Three samples of known concentration were tested in twenty assays to assess.LIMITATIONS OF THE PROCEDURE●FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN DIAGNOSTICPROCEDURES.●The kit should not be used beyond the expiration date on the kit label.●Do not mix or substitute reagents with those from other lots or sources.●If samples generate values higher than the highest standard, dilute thesamples and repeat the assay.●Any variation in operator, pipetting technique, washing technique,incubation time or temperature, and kit age can cause variation in binding.●This assay is designed to eliminate interference by soluble receptors,binding proteins, and other factors present in biological samples. Until all factors have been tested in the Immunoassay, the possibility of interference cannot be excluded.MATERIALS PROVIDEDReagents QuantityAssay plate 1(96 wells) Standard (10 x concentrate) 1 x 200 μl Antibody (100 x concentrate) 1 x 60 μlHRP-conjugate(100 x concentrate) 1 x 120 μl Antibody Diluent 1 x 10 mlHRP-conjugate Diluent 1 x 20 mlSample Extraction Buffer (25 x concentrate) 1 x 20 mlSample Diluent 2 x 20 mlWash Buffer (25 x concentrate) 1 x 20 mlTMB Substrate 1 x 10 mlStop Solution 1 x 10 ml Adhesive Strip (For 96 wells) 4Instruction manual 1STORAGEUnopened kit Store at 2 - 8°C. Do not use the kit beyond the expiration date. Opened kit May be stored for up to one month at 2 - 8° C.*Provided this is within the expiration date of the kit.OTHER SUPPLIES REQUIREDMicroplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm, with the correction wavelength set at 540 nm or 570 nm.An incubator which can provide stable incubation conditions up to 37°C±0.5°C.Squirt bottle, manifold dispenser, or automated microplate washer.Absorbent paper for blotting the microtiter plate.100 mL and 500 mL graduated cylinders.Deionized or distilled water.Pipettes and pipette tips.Test tubes for dilution.LyophilizerStirrerPRECAUTIONSThe Stop Solution provided with this kit is an acid solution. Wear eye, hand, face, and clothing protection when using this material.SAMPLE COLLECTION AND STORAGE●Xylem saps from plants Xylem sap from wild plants can be obtainedby cutting the plant about 10-15 cm above the ground (preferably early in the morning, to fully utilize the root pressure). Xylem sap collects in the silicon tube through root pressure. If there is risk of too much exposure to light, the tube should be wrapped in aluminum foil. Depending on the plant and the treatment, about 0.5mL should be obtained within 1-2 hours. The sap is collected from the silicon tube into an Eppendorf-vial, using a pipette, immediately frozen and stored for analysis at -80℃. This method has been used successfully on wheat, oil seed rape, maize and rice.●Crude extracts Crude extracts of gingko, phoenix tree, rape ecthave been tested to date with the extraction method describe below.Weigh out 0.5 g of freeze dried, finely ground material into a centrifuge tube containing 4.5 ml of sample extraction buffer. Shake the samples overnight in the cold (4-5℃) and dark. Spin down the solids and use the supernatant directly or diluted with buffer or H2O in the ELISA. For materials other than the ones mentioned above, the validity of this extraction method should be tested by both, cross-reaction test and confirming measurements with a HPLC - GC set-up.(Dilution factor: 10)REAGENT PREPARATIONNote:●Kindly use graduated containers to prepare the reagent.●Bring all reagents to room temperature (18-25°C) before use for 30min.●Prepare fresh standard for each assay. Use within 4 hours and discardafter use.●Making serial dilution in the wells directly is not permitted.●To minimize imprecision caused by pipetting, use small volumes andensure that pipettors are calibrated. It is recommended to suck more than 10μl for once pipetting.●Distilled water is recommended to be used to make the preparation forreagents. Contaminated water or container for reagent preparation will influence the detection result.●Antibody (1x) - Centrifuge the vial before opening.Antibody requires a 100-fold dilution. A suggested 100-fold dilution is 10μl of Antibody + 990 μl of Antibody Diluent.●HRP-conjugate (1x) - Centrifuge the vial before opening.HRP- conjugate requires a 100-fold dilution. A suggested 100-fold dilution is 10 μl of HRP- conjugate + 990 μl of HRP- conjugate Diluent.●Sample Extraction Buffer(1x)- If crystals have formed in the concentrate,warm up to room temperature and mix gently until the crystals have completely dissolved. Dilute 20 ml of Sample Extraction Buffer Concentrate (25 x) into deionized or distilled water to prepare 500 ml of Sample Extraction Buffer(1x).●Wash Buffer(1x)- If crystals have formed in the concentrate, warm up toroom temperature and mix gently until the crystals have completely dissolved. Dilute 20 ml of Wash Buffer Concentrate (25 x) into deionized or distilled water to prepare 500 ml of Wash Buffer (1 x).StandardCentrifuge the standard vial at 6000-10000rpm for 30s before opening.Dilute the Standard(10x) with Sample Diluent. A suggested 10-fold dilution is 50 μl of Standard(10x) + 450 μl of Sample Diluent. This diluted Standard (S7) serves as the high standard (10 μg/ml).Do not substitute other diluents. Mix the standard to ensure complete dilution and allow the standard to sit for a minimum of 15 minutes with gentle agitation prior to making dilutions.Pipette 250 μl of Sample Diluent into each tube (S0-S6). Use the diluted Standard (S7) solution to produce a 2-fold dilution series (below). Mix each tube thoroughly before the next transfer. Sample Diluent serves as the zero standard (0 μg/ml).Tube S7 S6 S5 S4 S3 S2 S1 S0μg/ml10 5 2.5 1.25 0.625 0.312 0.156 0Note:1. CUSABIO is only responsible for the kit itself, but not for the samplesconsumed during the assay. The user should calculate the possible amount of the samples used in the whole test. Please reserve sufficient samples in advance.2. Samples to be used within 5 days may be stored at 2-8°C, otherwisesamples must be stored at -20°C (≤1month) or -80°C (≤2month) to avoid loss of bioactivity and contamination.3. If the samples are not indicated in the manual, a preliminary experiment todetermine the validity of the kit is necessary.4. Please predict the concentration before assaying. If values for these arenot within the range of the standard curve, users must determine the optimal sample dilutions for their particular experiments.5. Tissue or cell extraction samples prepared by chemical lysis buffer maycause unexpected ELISA results due to the impacts of certain chemicals.ASSAY PROCEDUREBring all reagents and samples to room temperature before use. Centrifuge the sample again after thawing before the assay.It is recommended that all samples and standards be assayed in duplicate.1. Prepare all reagents, working standards, and samples as directed in theprevious sections.2. Determine the number of wells to be used and put any remaining wellsand the desiccant back into the pouch and seal the ziploc, store unused wells at 4°C.3. Set a Blank well without any solution. Add 50μl of Standard or Sampleper well.4. Add 50μl of Antibody(1x)to each well(not to Blank well). Mix well andthen incubate for 30 minutes at 37°C.5. Aspirate each well and wash, repeating the process two times for a total ofthree washes. Wash by filling each well with Wash Buffer(200μl) using a squirt bottle, multi-channel pipette, manifold dispenser, or autowasher, and let it stand for 10 seconds, complete removal of liquid at each step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Buffer by aspirating or decanting. Invert the plate and blot it against clean paper towels.6. Add 100μl of HRP-conjugate(1x) to each well(not to Blank well). Mix welland then incubate for 30 minutes at 37°C.7. Repeat the aspiration/wash process for five times as in step 5.8. Add 90μl of TMB Substrate to each well, mix well. Incubate for 20 minutesat 37°C. Keeping the plate away from drafts and other temperature fluctuations in the dark.9. Add 50μl of Stop Solution to each well, gently tap the plate to ensurethorough mixing.10. Determine the optical density of each well within 10 minutes, using amicroplate reader set to 450 nm.Note:1. The final experimental results will be closely related to validity of theproducts, operation skills of the end users and the experimental environments.2. Samples or reagents addition: Please use the freshly prepared Standard.Please carefully add samples to wells and mix gently to avoid foaming. Do not touch the well wall as possible. For each step in the procedure, total dispensing time for addition of reagents or samples to the assay plate should not exceed 10 minutes. This will ensure equal elapsed time for each pipetting step, without interruption. Duplication of all standards and specimens, although not required, is recommended. To avoid cross-contamination, change pipette tips between additions of each standard level, between sample additions, and between reagent additions.Also, use separate reservoirs for each reagent.3. Incubation: To ensure accurate results, proper adhesion of plate sealersduring incubation steps is necessary. Do not allow wells to sit uncovered for extended periods between incubation steps. Once reagents have been added to the well strips, DO NOT let the strips DRY at any time during the assay. Incubation time and temperature must be observed.4. Washing: The wash procedure is critical. Complete removal of liquid ateach step is essential to good performance. After the last wash, remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting and remove any drop of water and fingerprint on the bottom of the plate. Insufficient washing will result in poor precision and falsely elevated absorbance reading. When using an automated plate washer, adding a 10 second soak period following the addition of wash buffer, and/or rotating the plate 180 degrees between wash steps may improve assay precision.5. Controlling of reaction time: Observe the change of color after adding TMBSubstrate (e.g. observation once every 10 minutes), TMB Substrate should change from colorless or light blue to gradations of blue. If the color is too deep, add Stop Solution in advance to avoid excessively strong reaction which will result in inaccurate absorbance reading.6. TMB Substrate is easily contaminated. TMB Substrate should remaincolorless or light blue until added to the plate. Please protect it from light.7. Stop Solution should be added to the plate in the same order as the TMBSubstrate. The color developed in the wells will turn from blue to yellow upon addition of the Stop Solution. Wells that are green in color indicate that the Stop Solution has not mixed thoroughly with the TMB Substrate.CALCULATION OF RESULTSUsing the professional soft "Curve Expert" to make a standard curve is recommended, which can be downloaded from our web.Average the duplicate readings for each standard and sample and subtract the average optical density of Blank.Create a standard curve by reducing the data using computer software capable of generating a four parameter logistic (4-PL) curve-fit. As an alternative, construct a standard curve by plotting the mean absorbance for each standard on the x-axis against the concentration on the y-axis and draw a best fit curve through the points on the graph. The data may be linearized by plotting the log of the ABA concentrations versus the log of the O.D. and the best fit line can be determined by regression analysis. This procedure will produce an adequate but less precise fit of the data.If samples have been diluted, the concentration read from the standard curve must be multiplied by the dilution factor.STANDARD CUEVESAMPLE VALUE Different plantsRapeDifferent tissuesDifferent extraction。
脱落酸ABA
植物生长激素检测试剂盒ABACompetitive ELISA（请仔细阅读英文说明书，中文说明书仅供参考）所有试剂及微孔板使用前均需回温到25℃左右1. 试剂盒内组分项目96反应孔包被ABA抗体的微孔板 1ABA追踪物3瓶-1ml冻干粉追踪稀释液（包含0.02%叠氮化钠）1瓶-15mlPNP底物片1瓶-6片X5mg底物稀释液（包含0.02%叠氮化钠）1瓶-30ml洗涤溶液（包含0.02%叠氮化钠）2瓶-30ml反应停止液1瓶-5ml说明书 1封口膜 2注意：以上物品需要在4℃环境下保存。
2.原理利用酶联免疫的方法定量检测植物激素，ABA检测利用的是ABA单克隆抗体，这个反应在1ml中含有0.0064-0.16皮摩尔ABA比较敏感。
这种测试方法用竞争性抗体结合方法来测定植物提取液中的ABA。
ABA追踪物用碱性磷酸酶标记，当和植物提取液一同加入包被抗体的微孔板中，通过重氮甲烷预处理使酸转化为甲酯形式。
一个竞争性的结合反应是建立在定量的追踪物和未知样品中IAA竞争有限数量的抗体结合位点的基础上的。
样品中的甲基化的ABA和追踪物竞争抗体结合位点，未结合的追踪物在加底物前被洗去，黄色的深浅和样品中的ABA含量成反比。
3. 操作者应该注意之事项----反应停止液为1M NaOH，一种腐蚀性物质，如不慎接触到眼睛或皮肤，请用大量清水冲洗或寻求医生帮助。
----ABA试剂盒仅为研究用，一些试剂中包含0.02％的叠氮化钠做为防腐剂。
----生长激素试剂盒--对温度敏感，应保存在4℃。
----追踪物—稀释的追踪物可以在4℃稳定保存7天。
----底物—底物溶液可在4℃稳定保存8小时。
不要用过期的试剂。
----只有在B0的OD值大于0.750结果才是可靠的，如果低于这个值，增加底物孵育的时间直到获得需要的OD值（不要超过30分钟）。
4. 需要的材料但盒中不提供----酶标仪（405nm）----37℃孵育箱----(+) cis/trans ABA标准（Sigma Cat. No. A4906）----绝对的甲醇（稀释ABA标准）----TBS缓冲液（准备样品和标准）----容器（4个，用来装底物溶液，洗涤溶液，追踪溶液和反应停止液）----吸水纸----蒸馏水----微量移液器：1ml，5ml，100ul单道，50-200ul多道----在密封塑料盒底部铺一张吸水纸，倒入适量蒸馏水使之刚好润湿，即为恒湿箱，孵育用5. 实验过程样品准备对于不同类型的植物材料，样品的准备是多样的。
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植物激素脱落酸(ABA)快速检测试剂盒试剂盒使用说明书产品编号：CSB-E09159Pl检测范围：3.12 pmol/ml-200 pmol/ml最低检测限：0.78 pmol/ml特异性：本试剂盒可用于快速检测植物样本中ABA含量。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定植物组织样本中的ABA含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理本试剂盒采用酶联免疫间接竞争法检测ABA。
微孔板上包被有ABA偶联物。
加入ABA抗体和ABA标准品或样品，游离ABA与微量反应板上的ABA结合物竞争结合抗ABA抗体，没有结合的抗体被洗去，再向微孔中加辣根过氧化物酶标记二抗，与结合在反应板上的抗体作用一定时间，洗去多余的辣根过氧化物酶标记二抗。
再向反应孔中加入相应反应底物TMB，作用一定时间后，结合的酶结合物将TMB转化为蓝色，转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的ABA 呈负相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.已包被ABA偶联物的酶联板(Assay plate )：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2×250ul/瓶。
3.样品稀释液(Sample Diluent)：2×20ml/瓶。
4.ABA单克隆抗体：1×60μl/瓶（1：100）5.辣根过氧化物酶标记二抗（HRP-anti-antibody ）：1×120μl/瓶（1：100）6.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
7.浓洗涤液（W ash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
8.终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
需要而未提供的试剂和器材1.标准规格酶标仪2.高速离心机3.电热恒温培养箱4.超声清洗器5.离子交换小柱（PCX）6.氮气吹干仪7.干净的试管和Eppendof管8.系列可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，最好用多通道移液器9.蒸馏水，容量瓶等标本的稀释原则：首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。
只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。
稀释的过程中，应做好详细的记录。
最后计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则：2瓶，每瓶浓度为200 pmol/ml，以样品稀释液做系列倍比稀释，分别稀释200 pmol/ml，100 pmol/ml，50 pmol/ml，25 pmol/ml，12.5 pmol/ml，6.25 pmol/ml，3.12 pmol/ml。
样品稀释液直接作为标准浓度0 pmol/ml。
ABA抗体和辣根过氧化物酶标记二抗的稀释原则：临用前以样品稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（ABA抗体每孔50ul，辣根过氧化物酶标记二抗每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10ulABA 抗体和辣根过氧化物酶标记二抗加990ul样品稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
操作步骤实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。
每次检测都应该做标准曲线。
如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.酶联板使用前用洗液洗板2-3次，每次浸泡1-2分钟，250ul/每孔，甩干。
2.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液100ul，余孔分别加标准品或待测样品50ul，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，然后在所有孔中加入50 ul ABA 抗体工作液。
尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
酶标板加上盖或覆膜，37℃反应30分钟（为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液）。
3.温育后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，250ul/每孔，甩干。
4.所有孔中加入100 ul辣根过氧化物酶标记二抗工作液。
尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
酶标板加上盖或覆膜，37℃反应30分钟5.温育后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，250ul/每孔，甩干。
6.依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光显色（30分钟内，一般10-15分钟内，此时肉眼可见标准品的后3-4孔有明显的梯度蓝色，前3-4孔颜色不明显，即可终止）。
7.依序每孔加终止溶液50ul，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。
在加终止液后15分钟以内进行检测。
注：1. 用户在初次使用试剂盒时，应将各种试剂管离心数分钟，以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2N H2SO4。
测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。
标准品、ABA抗体和辣根过氧化物酶标记二抗工作液请依据所需的量配置使用。
请勿重复使用已稀释过的标准品、ABA抗体和辣根过氧化物酶标记二抗工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
洗板方法手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟。
根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓，避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要，不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请最后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时，请以相应的稀释液配制，不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
9. 本产品适用于大量样本的快速筛查。
由于生物试验存在人为及不可预知的影响因素，本试剂盒得到的检测结果仅为参考，不能据此做出任何结论。
本公司不承担由此引起的任何责任。
植物脱落酸(ABA) ELISA 检测试剂盒试验原理：ABA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知ABA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将ABA和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中ABA的浓度呈比例关系。
自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
试剂的准备1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。
稀释前将标准品振荡混匀。
稀操作步骤1．使用前，将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。
立即加入50ul 的生物素标记的抗体。
盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5．每孔加入60ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。
重复此操作3次。
如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。
避免光照。
8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9．在450nm波长处测定各孔的OD值。
局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。
试剂盒性能1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y)，相应的ABA标准品浓度为横坐标(X)，做得相应的曲线，样品的ABA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围：0-80pmol/L4、敏感度：0.1 pmol/L。