标准曲线标准磷溶液200ugml,取0、0.05、0.1、0
土壤有效磷检测中改变标准溶液磷浓度和显色剂含量的试验
土壤有效磷检测中改变标准溶液磷浓度和显色剂含量的试验杨冬月;虞继权【摘要】土壤有效磷检测中,当标准曲线的溶液浓度是:0.00ug.ml-1、0.20ug.ml-1、0.40ug.ml-1、0.60ug.ml-1、0.80ug.ml-1、1.00ug.ml-1,那么显色剂的添加量为每50ml标准溶液添加钒钼酸铵显色剂8～12ml,用此标准曲线检测样品,结果准确可靠,可在实际检验操作中应用.【期刊名称】《云南农业》【年(卷),期】2011(000)001【总页数】2页(P28-29)【关键词】土壤有效磷;标准曲线;显色剂【作者】杨冬月;虞继权【作者单位】楚雄州动物疫病预防控制中心,675000;楚雄州农产品质量检测中心,675000【正文语种】中文按照《云南省测土配方施肥暨地力评价技术》一书检测土壤有效磷，配制的一系列标准溶液中，最高浓度是0.50ug.ml-1，此浓度相对应的吸光度值是0.2，而依据相关资料证明，当标准曲线吸光度范围是0.2～0.8（透射比为15%～65%）时，在此范围中测定的样品浓度相对误差较小。
为此，可采用的方法之一是调节标准溶液的浓度。
根据《云南省测土配方施肥暨地力评价技术培训教材》、《化验员读本仪器分析》，证实显色剂的用量影响标准溶液浓度，而且显色剂的用量与标准溶液浓度之间的关系可通过实验确定。
鉴于此，所做的实验分两步，第一步：配制一组磷含量是1.0ug.ml-1，而显色剂含量不同的溶液，显色剂的含量从低到高，依次增加，测定这组溶液的吸光度。
根据吸光度—浓度之间的关系，在一定的浓度值之间（此处浓度值指显色剂的浓度）吸光度出现稳定值，与这个稳定的吸光度值相对应的显色剂的量就是实验需确定的数据，它是配制标准溶液浓度达1.0ug.ml-1时所需添加的显色剂的量。
第二步：为了比较在标准曲线中加入第一步试验得出的显色剂的量后所检测的样品结果，与按照《云南省测土配方施肥暨地力评价技术培训教材》一书配制的标准曲线检测的样品结果是否一致，从第一步试验中选定一个在范围内的显色剂的用量，配制成一组磷浓度是0.0ug.ml-1到1.0ug.ml-1的标准曲线，检测样品，记录吸光度值，再按照教材配制一组磷浓度是0.0ug.ml-1到0.5ug.ml-1的标准曲线，检测同一个样品，记录吸光度值，判定两个吸光度值是否一致，从而进一步验证磷浓度是0.0ug.ml-1到1.0ug.ml-1的标准曲线中所添加的显色剂的量是否正确。
593-2010单质磷标准曲线
《深入探讨593-2010单质磷标准曲线》在分析化学领域中，单质磷是一种常见的化合物，其分析检测对于环境监测、食品安全等领域具有重要意义。
而593-2010单质磷标准曲线则是评定单质磷含量的一项重要方法。
本文将深入探讨593-2010单质磷标准曲线的相关内容，帮助读者更好地理解和运用这一分析方法。
1. 了解593-2010单质磷标准曲线的背景593-2010单质磷标准曲线是由国际标准化组织（ISO）制定，并被广泛应用于单质磷的含量测定。
该标准曲线的制定旨在通过一系列标准试样的测定，建立单质磷与所测特性（如吸光度、浓度等）之间的数学关系，从而实现对单质磷含量的准确测定。
2. 593-2010单质磷标准曲线的实验方法根据ISO xxx标准，593-2010单质磷标准曲线的实验方法包括准备标准试样、测定吸光度、绘制标准曲线等步骤。
实验操作需严格遵循ISO标准，以确保测定结果的准确性和可比性。
3. 593-2010单质磷标准曲线的应用范围593-2010单质磷标准曲线适用于水、土壤、食品等样品中单质磷的含量测定。
通过该标准，可以快速、准确地确定样品中单质磷的含量，为环境监测、农业生产、食品安全等领域提供重要的数据支持。
4. 个人观点和理解作为一项重要的分析方法，593-2010单质磷标准曲线在实际应用中具有广泛的意义。
通过建立标准曲线，可以实现对单质磷含量的准确测定，为相关领域的研究和生产提供可靠的数据支持。
我认为在使用593-2010单质磷标准曲线时，需充分了解ISO标准要求，并结合实际情况进行合理的操作和数据处理，以确保测试结果的准确性和可靠性。
总结回顾通过本文的介绍，读者可以更全面地了解593-2010单质磷标准曲线的相关内容，并对其实验方法、应用范围有了更深入的认识。
建议读者在实际操作中，遵循ISO标准要求，结合实际情况合理进行操作，以取得准确可靠的测试结果。
以上便是关于593-2010单质磷标准曲线的深入探讨，希望对读者有所帮助。
补充实验：水样中磷的测定--标准曲线不消解
补充实验：水样中磷的测定--标准曲线不消解补充实验：水样中磷的测定在天然水和废水中，磷几乎都以各种磷酸盐的形式存在，它们分为正磷酸盐、缩合磷酸盐（焦磷酸盐、偏磷酸盐和多磷酸盐）和有机结合的磷酸盐，它们存在于溶液、腐殖质粒子或水生生物中。
天然水中磷酸盐含量较少。
化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业的工业废水及生活污水中常含有较大量的磷。
磷是生物生长必需的元素之一，但水体中磷含量过高（如超过0.2mg/L)，可造成藻类的过度繁殖，直至数量上达到有害的程度（称为富营养化），造成湖泊、河流透明度降低，水质变坏。
水中总磷是指存在于水溶液中的可溶性正磷酸盐、含磷有机物，以及颗粒物中以各种形态存在的磷，称总磷。
水中磷的测定，通常按其存在的形式，分别测定总磷、溶解性正磷酸盐和总溶解性磷。
正磷酸盐的测定，可采用钼锑抗分光光度法分光光度法、氯化亚锡还原钼蓝法和离子色谱法。
总磷的测定方法则有钼锑抗分光光度法、钼酸铵分光光度法等。
测定水中的总磷，水样（包括悬浮物）要加强氧化剂处理，氧化分解水样中有机物及还原性物质，把各种形态的磷转化为正磷酸盐，利于测定。
水样预处理方法有过硫酸钾消解法、硝酸－硫酸消解法、硝酸－高氯消解法等。
根据水样被污染情况，选择不同的预处理方法，若水样严重污染，必须用硝酸－高氯酸分解。
测定总磷的水样采集后，加硫酸酸化至pH< 1保存。
溶解性正磷酸盐的测定，不加任何试剂，于2～5℃保存，在24 h内进行分析。
一、水样的预处理采集的水样立即经0.45 μm 微孔滤膜过滤，其滤液供可溶性正磷酸盐的测定。
滤液经下述强氧化剂的氧化分解，测得可溶性总磷。
取混合水样（包括悬浮物），也经下述强氧化剂分解，测得水中总磷含量。
1、仪器2医用手提式高压蒸汽消毒器或一般民用压力锅（1～1.5 kg/cm）；电炉（2kW）；具塞比色管（50 mL)；移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）。
（所有玻璃器皿用稀盐酸或稀硝酸浸泡） 2、试剂（1）5％ (m/V）过硫酸钾溶液：溶解5 g 过硫酸钾于水中，并稀释至100 mL(冷冻保存)。
HHJW10-2005正丁醇氯仿萃取磷钼蓝光度法测定磷量
宝钢集团上海五钢有限公司宝钢特钢检测中心上海市黑色金属质量监督检验站作业指导书主题: 正丁醇氯仿萃取磷钼蓝光度法测定磷量第3版文件编号: HHJW10-2005 正丁醇氯仿萃取磷钼蓝光度法测定磷量1 方法提要试样用硝酸或王水溶解，高氯酸氧化。
在0.63-1.63N的硝酸介质下，磷酸与钼酸铵生成磷钼杂多酸可被正丁醇氯仿混合剂萃取，然后用氯化亚锡将磷钼杂多酸还原为磷钼蓝，并反萃取至水相，测量其吸光度。
2 适用范围本方法适用于铁粉、碳钢、合金钢、高合金钢中磷量的测定。
测定范围：0.001％～0.020％。
3 试剂材料本方法未经特别注明，所用的水为三级以上纯净水，试剂为分析纯。
3.1 高氯酸（ρ1.67g/mL）。
3.2 盐酸（ρ1.19g/mL）。
3.3 硝酸（ρ1.42g/mL）。
3.4 硝酸－盐酸混合酸：一份和两份盐酸（ρ1.19g/mL）混合。
3.5硝酸（1+3）。
3.6 高锰酸钾（4%）。
3.7亚硝酸钠（10%）。
3.8 正丁醇氯仿混合剂（1+3）。
3.9 钼酸铵（4%）。
3.10 氯化亚锡（1%）称取1.0000g氯化亚锡溶解于8ml盐酸（3.2），用水稀释至100ml。
（现用现配）3.11磷标准溶液（200μg/mL）称取0.8780g基准磷酸二氢钾溶于水，定容于1000ml容量瓶。
3.12磷标准溶液（2μg/mL）分取10ml磷标准溶液（3.11）定容于1000ml容量瓶。
4 仪器设备4.1 分光光度计：200～850nm。
4.2 光电分析天平:准确至0.1mg。
4.3 容量瓶:25mL、100mL、1000mL，A级。
4.4 移液管:2mL、5mL、10mL、20mL，A级。
4.5 一般的实验室仪器。
5 分析步骤5.1 试样量称取0.1000g-0.2000g试样。
5.2 空白试验随同试样做空白试验。
5.3 测定5.3.1 将试样（5.1）置于50mL钢铁两用瓶中，加10-15mL硝酸－盐酸混合酸（3.4），加热溶解，加3mL高氯酸（3.1）（需挥铬的试样多加2～3mL高氯酸）蒸发冒高氯酸烟至近干（成浆状不流动）勿焦，稍冷，加16ml硝酸（3.5）溶解盐类，趁热滴加高锰酸钾（3.6）至黑色二氧化锰沉淀出现，煮沸1-2分钟，滴加亚硝酸钠（3.7）至紫红色消失，煮沸1分钟，冷却。
最新[牛血清蛋白标准曲线]考马斯亮蓝法标准曲线
![最新[牛血清蛋白标准曲线]考马斯亮蓝法标准曲线](https://img.taocdn.com/s3/m/828b9ad777eeaeaad1f34693daef5ef7ba0d122b.png)
最新[牛血清蛋白标准曲线]考马斯亮蓝法标准曲线牛血清蛋白表1.Folin酚法定制牛血清蛋白及测定人体血清蛋白加样操作表01234567样1样2试管编号200ug/mL牛血清蛋白标准液（mL）0.000.300.400.500.600.700.800.90 1.001.00 1mol/1000mL人血清蛋白（mL）PH7.4磷酸缓冲液（mL)1.000.700.600.500.400.300.200.100.000.00 Folin酚甲（mL）以上各管均加入1.00mL，振荡均匀后，反应15min Folin酚乙（mL）以上各管均加入4.00mL，振荡均匀后，55℃水浴反应25minA650nm实测OD值0.0000.2380.3020.3650.4210.4850.5210.5730.4730.378 表2.Folin酚法定制牛血清蛋白标准曲线，微机数据处理表0123456试管编号标准牛血清蛋白呈色浓度（ug/mL）0.00A650nm实测OD值回归方程对应OD值线性回归方程斜率a 线性回归方程截距b线性回归方程实验相关性（r）710.0013.3316.6720.0023.3326.6730.000.0000.2380.3020.3 650.4210.4850.5210.5730.0330.2220.2840.3470.4100.4730. 5360.5990.018870.03298y=0.01887x+0.032980.9934 凝血酶原时间标准曲线半定量测定纤维蛋白原含量的方法的临床应用凝血酶原时间标准曲线半定量测定纤维蛋白原含量的方法的临床应用孙彦平1 杨光2(11黑龙江省鸡西市矿业集团总医院,黑龙江鸡西158100;21黑龙江省林业总医院,黑龙江150040)〔文章编号〕1002-2376(2004)02-0017-02 〔中图分类号〕TH773 〔文献标识码〕B 〔摘要〕目的:利用Controlplasma建立一种简便、易于临床实验室开展的半定量纤维蛋白原(FiB)检测方法,并对其初步评价。
磷含量标准曲线
磷标液体积V(ml)1248
磷含量(微克)50100200400
吸光度0.0560.1370.2160.417
磷标准曲线绘制磷含量计算公式
y=0.0012x+0.0160随着所配试剂吸光度的变
x=y-0.016/0.0012=(1/0.0012)*y-0.016/0.0012
x=833.33y-13.33/100
x=833.33y-0.133
y为试样的吸光度值代入上面的公式计算，得出标准曲线磷含量值。
最后再按书上的公式计算即可
最后除以样品质量
2017.6.27上午
磷标液体积V(ml)0124
磷含量(微克)050100200
吸光度00.0690.1470.28
x=714.28y-0.714
y为试样的吸光度值代入上面的公式计算，得出标准曲线磷含量值。
最后再按书上的公式计算即可
2017.6.27下午
磷标液体积V(ml)0124磷含量(微克)050100200吸光度00.0990.1750.361
x=558.87y-1.22
y为试样的吸光度值代入上面的公式计算，得出标准曲线磷含量值。
最后再按书上的公式计算即可
16
800
0.776
量计算公式
随着所配试剂吸光度的变化，此公式只做参考用。
饲料中总磷含量的测定
饲料中总磷含量 的测定
原理
将试样中的有机物破坏，使磷溶 解出来，在酸性溶液中，磷与钒钼酸铵 生成黄色络合物，在400nm波长下比色 测定。此法测得为总磷，包括植酸磷。
操作步骤
1. 试样分解 2.标准曲线绘制 ３.试样
测定
操作步骤
1. 试样分解
有干法，湿法。 与测钙基本相同（其中盐酸浓度1+1）
▪须有足够的显色时间，天气冷须 延长
▪ 避免使用浑浊的样品分解液
为何用于比色的溶液的容量（50ml）不在 计算公式中出现？
因为测标准曲线时与测定试样时均 定容50ml，含磷量X为这50ml供比色的 溶液中磷的总量，而非浓度，所以这 50ml前后抵消，不在计算公式中出现。
实验中应注意的问题：
1.显色时间不充分 2.对含磷量的误解：
亦可根据最小二乘法，计算出斜率 b值，以方便算出含磷量
曲线方程中，Y = a + b X
吸光度 截距 斜率 含磷量
当曲线为经原点的斜线，则a=0,所以吸光度
Y=bX
根据测标准曲线时各点的吸光度Y和含磷 量X，可统计得
斜率b = n*∑XY―∑X*∑Y n*∑X2―(∑X)2
测样品时，测得吸光度，可算出溶液含磷量 X=Y/b
操作步骤
３.试样测定：
吸取试样分解液适量，以同样 方法显色和比色，根据所测得的吸 光度，查标准曲线的溶液含磷量， 再计算样品含磷量。
计算：P(ຫໍສະໝຸດ )=X ×10—6 ×100%
M *(V’ / V)
重复性要求：
含磷>0.5% 允许相对偏差３% <0.5%
10%
注意：
实验方法汇总
可溶性蛋白、SOD 、POD 、CAT 、MDA 的测定一、磷酸缓冲液的配制：二、酶液的制备：称取0.5—1g （FW ）放入研钵中，加5×毫升PH=7.8的磷酸缓冲液，冰浴研磨，匀浆倒入离心管中，12000转冷冻离心20分钟，上清液（酶液）倒入试管中，置于0—4ºC 下保存待用。
三、可溶性蛋白的测定 1、试剂的配制:牛血清白蛋白标准液（100g/mL ）：精确称取0.0100g 牛血清白蛋白，用蒸馏水溶解后定容至100mL （4℃保存）。
考马斯亮蓝G-250染色液：取0.10g 考马斯亮蓝G-250，溶于50mL 95%的乙醇中，加入100mL 85%的正磷酸，再用蒸馏水定容到1000mL 。
过滤待用。
该试剂于常温下可保存1个月。
2、标准曲线制作0—1000μg/ml 标准曲线的制作取6支10ml 具塞试管，按下表取样。
盖塞后，将各试管中溶液纵向倒转混合，放置2min 后，在595nm 波长下比色，记录各管测定的光密度OD 值，并做出标准曲线。
表 0~1000μg/ml 标准曲线管号1 2 3 4 5 6 1000μg/ml 母液(ml) 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 DH 2O(ml)1.00 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 G-250试剂(ml) 5 5 5 5 5 5 蛋白质含量(μg) 0 200 400 600 800 1000 2、样品测定取2支试管（10ml 具塞，作为3个重复），按下表加样：管号 空白 样品 样品 样品 待测样品(ml)0 0.08 0.08 0.08 DH 2O(ml) 1.00 0.92 0.92 0.92 G-250 5 5 5 5 OD5950 蛋白质含量3、计算结果样品中蛋白质含量（μg/gFW ）=1V W V X ⨯⨯ 其中X 为在标准曲线上查得的蛋白质含量，μg ；V 0为提取的总体积，ml ；V 1为测定蛋白质时所用的体积，ml ；W 为样品鲜重，g 。
(整理)氨基酸含量的测定
氨基酸含量的测定标准曲线绘制准确吸取200ug/ml的氨基酸标准溶液0.0，0.6，0.8，1.0,1.2，1.5，2.0 ml，分别置于25ml容量瓶或比色管中，各加水补充至溶剂为4.0ml，然后加入茚三酮和磷酸缓冲溶液各1ml，混合均匀，于水浴上加热15min，取出迅速冷至室温，再摇匀，加水至标线25ml，摇匀。
静置15min后，在570nm波长下，以试剂空白为参比液夨订其余各溶液的吸光度A。
以氨基酸的微克数为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。
样品的测定：将虾研磨冷却过滤后稀释10倍，吸取澄清的样品溶液1.5ml，平行三次，按标准曲线制作步骤，在相同条件下测定吸光度A 值，用测得的A值在标准曲线上即可查得氨基酸的微克数。
公式：氨基酸总量（ug/100g）=(c/m*1000)*100*10式中c是指从标准曲线上查得的氨基酸的ug数；M是指测定的样品溶液相当于样品的质量g；PH计酸度计测量ph的方法：(1)拿下笔帽(2)按on/off键，机器显示运作(3)将ph计放入待测液中(4)轻轻晃动ph计，保证内气泡逸出，使之于溶液充分接触，勿碰撞杯壁(5)ph计会立即显示数值，将笔置入待测液待数值稳定，30秒内将显示正确数值，(特：ph计数值上下浮动或不稳定是正常现象)(6)按hold键锁定数值，可在待测溶液外记录读取，继续按hold键解除锁定(7)按on/off键关闭ph计(8)轻甩PH计测试笔上多于的水，用蒸馏水或脱离子水冲洗，盖上笔帽测量温度方法在测试模式下，温度数值与ph数值同步显示在液晶面板上，但在校准模式下不显示，数值默认为摄氏温度。
（一）挥发性盐基氮（TVB-N）的测定半微量定氮法（1）原理：蛋白质在酶和细菌的作用下分解后产生碱性含氮物质，有氨、伯胺、仲胺等，此类物质具有挥发性，可在碱性溶液中被蒸馏出来，用标准酸滴定，计算含量。
（2）试剂①氧化镁混悬液(10g/L) 称取1.0g氧化镁，加100ml水，振摇成混悬液。
2421-2013 磷 标准曲线
2421-2013 磷标准曲线磷是生物体中不可或缺的元素，它在植物和动物的生长发育中发挥着重要的作用。
然而，磷的过量排放会导致水体富营养化，严重影响水生态环境的稳定性。
监测和控制水体中磷的浓度是环境保护和水质管理的重要任务之一。
根据《水和废水监测分析方法》中的规定，2421-2013《水质监测第4部分：总磷的测定高分子物质亮光消解-分光光度法》是用于测定水体中总磷含量的标准方法之一。
该标准方法主要适用于地表水、地下水、饮用水、污水和工业废水等水体样品的监测和分析。
其中，磷的测定是通过高分子物质亮光消解-分光光度法进行的，该方法具有操作简便、准确度高、灵敏度强等特点。
2421-2013标准还规定了磷标准曲线的构建和应用。
磷标准曲线是通过一系列已知浓度的磷标准溶液测定其吸光值，进而构建磷浓度与吸光值之间的线性关系曲线。
通过这条标准曲线，可以将未知水样的吸光值对应到磷浓度，从而准确地测定水样中磷的含量。
建立2421-2013标准曲线的步骤如下：1. 准备磷标准溶液。
根据实际需要，配制一系列不同浓度的磷标准溶液，覆盖待测样品中磷浓度的范围。
要求标准溶液的制备精确、浓度准确。
2. 测定磷标准溶液的吸光值。
使用高分子物质亮光消解-分光光度法，分别对各个磷标准溶液进行吸光值的测定。
3. 绘制标准曲线。
将磷标准溶液的浓度作为横坐标，吸光值作为纵坐标，在坐标纸上绘制出浓度与吸光值之间的线性关系曲线。
通常情况下，经过线性拟合，可以得到一条斜率和截距均为已知数值的直线。
4. 验证标准曲线。
用一定浓度的磷标准溶液对标准曲线进行验证，检查曲线的线性程度和预测精度等指标。
2421-2013标准曲线的应用主要包括以下几个方面：1. 测定未知水样中的磷含量。
将未知水样的吸光值代入标准曲线方程，即可计算出该水样中磷的浓度。
2. 质量控制和质量保证。
标准曲线可以用于对测定结果的准确性进行验证，确保实验数据的可靠性。
3. 比较不同水样中磷的含量。
水中总磷标准工作曲线制备的简化
下 , 正磷酸盐与钼酸铵 、酒石酸锑氧钾
将优级纯磷酸 二氢钾 ( KH2 PO4 ) 过硫酸钾消解液 4. 0mL , 按 GB11893
反应 , 生成磷钼杂多酸 , 被还原剂抗坏 于 110 ℃干燥 2h , 在干燥器中放冷 。称 - 89 水质总磷的测定要求进行消解处
血酸还原 , 则变成蓝色络合物 , 通常即 取 0. 2197g 溶于水 , 移入 1000mL 容 理后 , 再同 4. 1 加 1O %抗坏血酸 1.
测定 mg/ L
均值
相对 相对标 测定 误差 准偏差 mg/ L
GB11893 - 89
均值
相对 误差
相对标 准偏差
标样 203920
(0. 084 ±0. 009)
0. 088
0. 081
0. 090 0. 090 7. 1 % 2. 2 % 0. 082 0. 081 - 3. 6 % 2. 0 %
石酸锑氧钾溶液并且混合均匀 。贮存在 于 700nm 波 长 处 比 色 测 定 吸 光 度 A
1 方法原理
棕色玻璃瓶中于约 4 ℃保存 。至少稳定 值 。
水中磷化合物在过硫酸钾氧化下可 两个月 。
4. 2 标准工作曲线组
转变为可溶性正磷酸盐 。在酸性条件
3. 4 磷酸盐贮备溶液
同 4. 1 要求配制标准系列后各加
4. 1 标准曲线组
该法绘制总磷的标准工作曲线时需对总 黄 , 则弃去重配 。
取 50 mL 具塞比色管 6 支 , 依次
磷标准系列进行消解前处理 , 操作步骤
3. 3 钼酸盐溶液
加人磷酸盐标准使用液 0. 00 、1. 00 、
繁琐 , 分析时间长 。在实际操作中 , 总
分光光度法测定水中总磷时标准曲线的处理
分光光度法测定水中总磷时标准曲线的处理磷是营养元素，也是具有生态毒性的有机污染物，是水体污染物中最重要的污染物之一。
而分光光度法是一种测定水中总磷得最常用的方法，因此本文首先来介绍分光光度法在测定水中总磷的应用，其次阐述标准曲线的处理原理和方法。
1.光光度法测定水中总磷
分光光度法是一种主要取决于溶液中磷化合物比例和每种化合
物的吸收率的光学技术，它可以测定溶液中任何可吸收光的物质。
分光光度法通常用于测定水体中溶解性有机物，特别是水中总磷。
通过将磷的标准溶液和样本溶液放入光度计中，观察其吸收率的变化，就可以测定样本溶液中磷的含量。
2.准曲线的处理原理和方法
标准曲线的处理是指根据比较样本溶液的吸收率和标准溶液的
吸收率，从而测定样本溶液中磷的含量。
标准曲线的处理方法如下： a) 使用标准溶液测定并绘制标准曲线：首先将标准溶液中磷的含量分别作为标准曲线的X轴和Y轴，使用光度计测量标准溶液的吸收率，并将测得的数据作为点的坐标，再用连线法绘制出标准曲线。
b) 使用样本溶液测试并绘制实际曲线：将磷的含量分别作为实际曲线的X轴和Y轴，使用光度计测量样本溶液的吸收率，并将测得的数据作为点的坐标，再用连线法绘制出实际曲线。
c)实际曲线投射到标准曲线上：将实际曲线投影到标准曲线上，从而可以获得样本溶液中磷的含量。
3.论
分光光度法是一种常用的测定水中总磷的方法，而标准曲线的处理方法可以精确测定样本溶液中磷的含量。
磷含量的测定
钼蓝比色法（1）仪器：瓷坩锅或石英坩锅、紫外分光光度计、移液管（5 ml、10ml）、电炉高温炉、漏斗、容量瓶：100,500,1000ml、表面皿、烧杯、量筒、恒温水浴锅、坩锅、试剂瓶等。
（2）试剂：a、 50%氢氧化钾溶液/盐酸、硫酸、氧化锌、滤纸、0.015%硫酸联氨溶液；b、 2.5%钼酸钠稀硫酸溶液：量取140ml硫酸注入300ml水中,摇匀,冷却至室温，加入12.5g钼酸钠,溶解后加水至500ml,摇匀,静置24小时备用。
c、磷标准溶液：称取无水的磷酸二氢钾0.4391g溶于1000ml水中作为1号液，含磷0.1mg/ml，吸取1号液10ml，加水稀释至100ml含磷0.01mg/ml作为2号液，比色用。
（3）操作方法：a、绘制标准曲线以吸光值为纵坐标，以磷（0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mg）为横坐标绘制标准曲线。
b、制备被测液用坩锅称取试样约10g(准确至0.001g)，加氧化锌0.5g，先在电炉上加热炭化，然后送入550～600℃的高温炉中灼烧至灰化(白色)，灼烧时间约2小时,取出坩锅在干燥器中冷却至室温，用热盐酸(1:1)10ml溶解灰分，并加热微沸5分钟，将溶解液过滤，注入 100ml容量瓶中，用热水冲洗坩锅和滤纸，待滤液冷却至室温后，用50%氢氧化钾溶液中和至出现浑浊，缓慢滴加盐酸使氢氧化锌沉淀全部溶解后，再滴2滴，最后用水稀释至刻度，摇匀。
c、比色：用移液管吸取被测液10ml注入50ml比色管中,加入0.015%硫酸联氨8.0ml，加2.0ml 钼酸钠稀硫酸溶液，加塞, 摇匀, 将比色管置于正在沸腾的水浴中加热10分钟,取出冷却至室温，用水稀释至50ml充分摇匀，经10分钟后，用分光光度计在650nm下，用1cm液槽，用水调整零点,测定消光值。
d、结果计算：根据被测液的消光值，从标准曲线查得磷量(p)，按公式计算磷脂含量微波消解-分光光度法测定食品中磷试剂:1、硝酸, 优级纯。
补充实验：水样中磷的测定--标准曲线不消解
补充实验：水样中磷的测定在天然水和废水中，磷几乎都以各种磷酸盐的形式存在，它们分为正磷酸盐、缩合磷酸盐（焦磷酸盐、偏磷酸盐和多磷酸盐）和有机结合的磷酸盐，它们存在于溶液、腐殖质粒子或水生生物中。
天然水中磷酸盐含量较少。
化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业的工业废水及生活污水中常含有较大量的磷。
磷是生物生长必需的元素之一，但水体中磷含量过高（如超过0.2 mg/L)，可造成藻类的过度繁殖，直至数量上达到有害的程度（称为富营养化），造成湖泊、河流透明度降低，水质变坏。
水中总磷是指存在于水溶液中的可溶性正磷酸盐、含磷有机物，以及颗粒物中以各种形态存在的磷，称总磷。
水中磷的测定，通常按其存在的形式，分别测定总磷、溶解性正磷酸盐和总溶解性磷。
正磷酸盐的测定，可采用钼锑抗分光光度法分光光度法、氯化亚锡还原钼蓝法和离子色谱法。
总磷的测定方法则有钼锑抗分光光度法、钼酸铵分光光度法等。
测定水中的总磷，水样（包括悬浮物）要加强氧化剂处理，氧化分解水样中有机物及还原性物质，把各种形态的磷转化为正磷酸盐，利于测定。
水样预处理方法有过硫酸钾消解法、硝酸－硫酸消解法、硝酸－高氯消解法等。
根据水样被污染情况，选择不同的预处理方法，若水样严重污染，必须用硝酸－高氯酸分解。
测定总磷的水样采集后，加硫酸酸化至pH< 1保存。
溶解性正磷酸盐的测定，不加任何试剂，于2～5℃保存，在24 h内进行分析。
一、水样的预处理采集的水样立即经0.45 µm 微孔滤膜过滤，其滤液供可溶性正磷酸盐的测定。
滤液经下述强氧化剂的氧化分解，测得可溶性总磷。
取混合水样（包括悬浮物），也经下述强氧化剂分解，测得水中总磷含量。
1、仪器医用手提式高压蒸汽消毒器或一般民用压力锅（1～1.5 kg/cm2）；电炉（2kW）；具塞比色管（50 mL)；移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）。
（所有玻璃器皿用稀盐酸或稀硝酸浸泡）2、试剂（1）5％ (m/V）过硫酸钾溶液：溶解5 g 过硫酸钾于水中，并稀释至100 mL(冷冻保存)。
总磷TP-（孔雀绿-磷钼杂多酸分光光度法
总磷(TP)测定方法（孔雀绿-磷钼杂多酸分光光度法）一、实验原理在中性条件下用过硫酸钾使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐，在酸性介质中正磷酸盐与钼酸铵反应，经一系列反应后的物质与显色剂发生显色反应，通过分光光度计测其吸光度，由标准曲线算出总磷含量。
二、适用范围取样消解水样中的总含磷量不超过2μg。
三、实验仪器50.0ml具塞比色管；压力锅（能升温至120℃）；分光光度计（3 cm玻璃比色皿）；各规格移液管。
四、试剂1.钼酸铵（分析纯）溶液：溶解176.5g鉬酸铵（（NH4）6Mo7O24•4H2O）于水中，并稀释至1000ml；2.孔雀绿（分析纯）溶液：加热溶解1.12g孔雀绿于水中，并稀释至100ml；3.显色剂：在40ml钼酸铵溶液中依次加入30ml浓硫酸及36ml孔雀绿溶液，混匀、静置30 min后，经过0.45μm滤膜过滤（现用现配）；4.聚乙烯醇（PVA）溶液：取PVA（聚合度1750±50）1g溶于100ml热水中，滤纸过滤后使用；5.磷酸盐储备液：将磷酸二氢钾于110℃干燥2 h，在干燥器中放冷.称取0.2197g溶解水中，定量转移入1000ml容量瓶中，加（1+1）硫酸5ml，用水稀释至标线，此溶液磷质量浓度为50.00μg/mL；6.磷酸盐标准使用液：称取1ml贮备液于250ml容量瓶中，用水稀释至标线，此溶液磷质量浓度为0.2μg/mL磷（现用现配）；7.5%过硫酸钾溶液：溶解过硫酸钾5g于水中，并稀释至100ml；8.浓硫酸（分析纯）；五、实验步骤水样预处理：取混匀水样25.0ml于具塞比色管中，加4ml 5%过硫酸钾溶液，加塞并用纱布包扎好，置于压力锅中，于120℃下消解30min，取出放冷，供水中总磷测定。
标准曲线的绘制：于25ml具塞比色管中分别加入磷酸盐标准使用液0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，5.00，10.00ml，加水至25ml，再加入3ml的显色剂及1ml1%PVA溶液，混匀，放置30 min后，于650 nm波长处以试剂空白为参比，进行吸光度测量，得到吸光度-磷含量标准曲线。